DK155937B

DK155937B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 16-metoxy-16-metyl-prostaglandin e1-derivater

Info

Publication number: DK155937B
Application number: DK151480AA
Authority: DK
Inventors: Umberto Guzzi; Romeo Ciabatti
Original assignee: Lepetit Spa
Priority date: 1979-04-10
Filing date: 1980-04-09
Publication date: 1989-06-05
Also published as: NZ193370A; AT370725B; HK66283A; DK155937C; FR2510567B1; IE49675B1; GB2046750A; IT1162731B; GB2046750B; AU534150B2; SE465126B; AU5656080A; DK151480A; NL8002073A; CA1186305A; US4547521A; JPH0141625B2; NO800998L; SE8002689L; FR2510567A1

Description

DK 155937[

Den foreliggende opfindelse angår en analogi-fremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 16-metoxy-16-metyl-prostaglandin -derivater med den nedenfor viste almene formel I, hvor R har den ligeledes nedenfor angivne 5 betydning, i form af en blanding af isomerer eller i form af de rene optiske antipoder med (15R, 16S), (15S,16R), (15R,16R) eller (15S,16S) konfigurationen. Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i krav 1's kendetegnende del angivne.

10 Forbindelserne egner sig som gastroprotektive midler og kan derfor oparbejdes til farmaceutiske præparater og bruges som gastroprotektive midler.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser har den almene formel 15

Ϊ „CH- 6 .CH * .CH 2 COOR

/ if CH2 OCH^CH2 CH2 0 0 j — 18 2 0

\ 13 ^CH 15 17^-CH 19 CH- J

I Ulln *·

20 HO OH J

hvor R betegner en C,_. alkylgruppe eller en ugiftig, farma- 4* 4* ceutisk acceptabel kation, fx Na , K , ammonium-kationen el-2g ler dens organiske derivater.

1 den foran viste formel I er brudte linjer anvendt til at angive at en given substituent ligger under papirets plan således som molekylet er tegnet (α-konfiguration), mens en kraftig, fuld linje anvendes om en substituent som ligger 30 over papirets plan i den viste tegningsmåde (3“konfiguration).

De prostaglandinagtige forbindelser med den ovenfor viste formel I har to chiral-centre på den nedre sidekæde, nemlig ved C-15 og C-16. Der kan derfor fremstilles fire forskellige isomerer af en forbindelse med formlen I som 35 nævnt ovenfor.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser udmærker sig ved en bemærkelsesværdig antisekre-

DK 155937B

2 torisk aktivitet, navnlig når de indgives oralt, og de udviser selv ved indgift af meget lave orale doser fremragende cytoprotektive virkninger.

Prostaglandiner udgør en gruppe naturlige stoffer som 5 for tiden er underkastet dybtgående undersøgelser fordi de har forskellige farmakologiske virkninger (abortfremkaldende, antisekretoriske,hypotensive, bronkodilatoriske) og også fordi de er involveret i mange biologiske processer (W. Losert et al., Arzneim. Forsch. Drug Res., 25, nr. 2, side 135, 1975).

10 Der findes derfor en uhyre litteratur på dette område, og der eksisterer også et stort antal patenter og patentansøgninger rettet på særlige grupper "syntetiske" prostaglandiner som afviger fra de naturligt forekommende med hensyn til strukturen af cyklopentanringen og/eller den ene af eller begge sidekæder-15 ne (se fx de britiske patentskrifter nr. 1.409.841, 1.506.816 og 1.345.934, belgisk patentskrift nr. 827.529 og USA patentskrift nr. 4.029.698).

De samme prostaglandiner med den ovenfor viste almene formel I, der fremstilles i henhold til den foreliggende op-20 findelse, omfattes, skønt de er hidtil ukendte, af de almene formler i belgisk patentskrift nr. 837.865 og britisk patentskrift nr. 1.495.152. Imidlertid er i ovennævnte belgiske patentskrift 16-metyl-16-metoxy-prostaglandin E^-derivater med en mættet binding ved C-5 ikke beskrevet, mens 25 der i britisk patentskrift nr. 1.495.152 kun er fremstillet to 16,16-dimetylprostaglandiner E-, hvor desuden metylengruppen i stilling 17 er erstattet med et oxygenatom som på sin side bærer en propyl- eller pentylgruppe, og der er altid en cis-5-dobbeltbinding til stede.

30 De her omhandlede· forbindelser med den almene formel I

fremstilles ved en i og for sig kendt metode som alment anvendes på dette område af kemien, og denne fremgangsmåde er udførligt beskrevet i belgisk patentskrift nr. 837.865. Udgangsforbindelsen er et cyklopentan-aldehyd med den almene formel 35 DK 155937 3 9R1 A-'CH2^ /CH2\ /CH2\ ^C0°R CH2 ™2 CH2 “

UK OHO

1 2 hvor R har den ovenfor angivne betydning og R og R uafhængigt af hinanden hver betegner et hydrogenatom eller en be-10 skyttelsesgruppe på hydroxyfunktionen. Ved den foreliggende

fremgangsmåde er R fortrinsvis en ^2-4 alifatisk acylgruppe og R er fortrinsvis et hydrogenatom eller en tetrahydro-lH-pyran-2-yl-gruppe. Det som udgangsmateriale anvendte cyklopentanaldehyd kan fremstilles ved fremgangsmåder der allerede er beskrevet i littera-15 turen, se fx de belgiske patentskrifter nr. 807.161 og 837.855, Som det første trin i fremgangsmåden ifølge opfindelsen foretages der kondensation mellem aldehydet med den foran viste almene formel II og et fosfonatreagens med den almene formel III

20 3 0 ?CH3 *vj i *

^P-CH2-CO-C-CH2-CH2-CH2-CH3 III

r3o^ ch3 3 hvor R er en alkylgruppe med 1-4 kulstofatomer, hvorved der 25 fremkommer et mellemprodukt med den almene formel 1 OR-1·

0„CHo CH0. CH„ ^COOR

" 0CH>»r ^2^ ?' II CH 2 2 OR 0 CH3 1 2 hvor R har den ovenfor angivne betydning og R og R uafhængigt af hinanden er hydrogenatomer eller beskyttelsesgrupper

•3 c I

på hydroxyfunktionerne, idet R fortrinsvis er en C2_^ alifa-tisk acylgruppe og R2 fortrinsvis er et hydrogenatom eller en tetrahydro-lH-pyran-2-yl-gruppe.

DK 155937B

4

Kondensationen udføres fortrinsvis under samme betingelser som er beskrevet i den kemiske litteratur vedrørende syntese af prostaglandiner ud fra cyklopentanaldehyd-prækursorer og fosforholdige reagenser. Særligt foretrukket udføres 5 den i nærværelse af et inaktivt organisk opløsningsmiddel som fx tetrahydrofuran, dimetoxyætan, benzen eller dioxan og ved en temperatur mellem 0 og 80°C.

For at udføre kondensationen må fosfonat-reaktionsdel-tageren omdannes til den tilsvarende anion, og til dette for-10 mål bruges der fortrinsvis ca. en ækvimolær mængde (beregnet på fosfona-tet med formel III) af et alkalimetalhydrid. Fosfonatet med for mel III har et chiralcenter (som er markeret i formel III med en stjerne), og det kan bruges i en optisk aktiv form eller som en blanding af de to mulige isomerer. Kondensationen mel-15 lem aldehydet med formlen II og en blanding af de to isomerer af fosfonatet med formlen III giver derfor en blanding af de to mulige isomerer med formlen IV, der har den modsatte abso- 20 25 30 35 5 DK 1559371 lutte konfiguration (den ene R og den anden S) i C-16, mens anvendelse af den optisk aktive form af fosfonatet III giver en forbindelse med formlen IV med den givne konfiguration i C-16 (R eller S). Hvis der vindes en blanding af de 5 to mulige isomerer i C-16, kan den adskilles i de to isomere former ved i og for sig kendt teknik, fx ved kromatografiske metoder. I alle tilfælde er det tilrådeligt, selv om det ikke er absolut nødvendigt, at udføre adskillelse i de enkelte isomerer før viderebehandling af mellemproduktet IV. Det an-10 det trin af reaktionsfølgen er således reduktion af 15-ketoforbindelsen til det tilsvarende 15-hydroxyderivat ved hjælp af et af de almindeligt anvendte, blandede metal-hydrider som reduktionsmiddel, såsom natriumborhydrid, zink-borhydrid, difenyltinhydrid eller litiumtrialkylborhydrider.

15 I betragtning af at reduktionen af oxogruppen i C-15 bevirker indførelse af et yderligere chiral-center og at reduktionen som angivet ovenfor mest fordelagtigt udføres særskilt på de to mulige isomerer med formlen IV, vindes der fra hver af C-16-isomererne en blanding af to produk-20 ter med formlen V, der har ens konfiguration i C-16 (R eller S) og modsatte konfigurationer (R og S) i C-15; OR1 i

λ ,CH ^ CH„ COOR

/Nr' 2^CH2^ 2^:h^ 2^ch/ \-Z /CH. ?CH3 ^CH0 .CH- „

- ^*CH^ ^CH-C-CH0^^ 2^CH/ 3 V

OR2 I I 2 2 OH CH3

Den på denne måde vundne blanding af de to isomerer med formel V kan anvendes som sådan i de følgende reaktionstrin, el-25 ler den kan adskilles i de to enkelte isomerer som derefter hver for sig vil undergå de samme reaktioner. Således vil der i det førstnævnte tilfælde vindes en isomerblanding af slutproduktet med formlen I, der om ønsket kan adskilles i sine komponenter, mens man i sidstnævnte tilfælde ved anvendelse af en enkelt 30 isomer med givne absolutte konfigurationer i C-15 og C-16 vin- 6

DK 155937 B

der kun den ene af de mulige isomerer med formlen I.

Det er bemærket at når reduktionen udføres på en forbin- 2 delse med formlen IV, hvor R er et hydrogenatom og kulstof-atomet i stilling 16 fortrinsvis har den ene af de to mulige 5 absolutte konfigurationer, så vindes de to C-15-isomerer i ganske forskellige mængder.

Undertiden vindes den ene af C-15-isomererne, og i almindelighed den mest polære, i meget små udbytter. Det har overraskende vist sig at hvis reduktionen udføres på en for-10 bindelse med formlen IV, hvor R er en beskyttelsesgruppe på hydroxyfunktionen og fortrinsvis en tetrahydro-lH-pyran-2-yl-gruppe, så vindesde to isomerer i tilnærmelsesvis samme mængde. I dette tilfælde giver den påfølgende adskillelse ved i og for sig kendte metoder, fx søjlekromatografi på silikagel 15 eller præparativ tyndlagskromatografi med silikagel-plader, to enkelte produkter med formlen V, hvor hydroxygruppen i stilling 11 er beskyttet, fortrinsvis som tetrahydro-lH-pyran-2-ylysteren. Det kan imidlertid i afhængighed af konfigurationen i C-16 være nødvendigt at retablere den fri hydroxyfunk-20 tion i stilling 11 før blandingen underkastes den kromatografiske adskillelse.

Det foretrækkes at omsætte en molær mængde af forbindelsen med formlen IV, hvor R^ er en beskyttelsesgruppe på hydroxy- 2 funktionen og fortrinsvis en C2_^ alifatisk acylgruppe og R er 25 et hydrogenatom og med en given absolut konfiguration i C-16, med ca. 2-3 molære proportioner 2,3-dihydropyran i nærværelse af et vandfrit inaktivt organisk opløsningsmiddel, fx benzen, og en katalytisk mængde p-toluensulfonsyre. Reaktionen forløber ved stuetemperatur og tager fra ca. 5 til ca. 20 minutter.

30 Der vindes herved en forbindelse med formlen IV hvor R har den ovenfor angivne betydning, R^ er en beskyttelsesgruppe på hydroxyfunktionen eller fortrinsvis en C2-4 alifatisk acylgruppe, og R^ er en tetrahydro-lH-pyran-2-yl-gruppe. Den efterfølgende reduktion af oxogruppen i C-15 giver en tilsvarende 35 forbindelse med formlen V (som en blanding af de to mulige 2 isomerer i C-15) hvor R er en tetrahydro-lH-pyran-2-yl-gruppe.

DK 155937 E

7

Eventuelt kan den således vundne blanding adskilles i de enkelte C-15-isomerer i henhold til de ovenfor beskrevne metoder. Blandingen eller de enkelte isomerer behandles derefter yderligere til frembringelse af slutprodukterne med formlen I.

5 De reaktionstrin som ud fra en forbindelse med formlen V fører til en slutforbindelse I består i at beskytte hydroxygruppen i stilling 15 i forbindelsen med den ovenfor viste almene formel V ved omsætning med et passende beskyttelsesmiddel, fortrinsvis 3,4-dihydro-2H-pyran, om nødvendigt hydrolyse af den 10 dannede 15-beskyttede forbindelse med formlen V, fortrinsvis under milde betingelser, fx med natrium- eller kaliumkarbonat hvis er en C2_4 alifatisk acylgruppe til retablering af den frie hydroxylgruppe i stilling 9 og derefter oxydere nævnte hydroxy-gruppe til en oxogruppe ved en eller anden sædvanlig oxyda-15 tionsproces (fx med Collins's reagens, dvs. komplexet pyridin/ kromoxyd) og til sidst fjerne beskyttelsesgrupperne i stillingerne 11 (om nødvendigt) og 15 ved mild hydrolyse.

Når beskyttelsesgrupperne på hydroxyfunktionerne i stillingerne 11 og 15 er tetrahydro-lH-pyran-2-yl-grupper udføres 20 fjernelse af dem fortrinsvis ved sur hydrolyse med en blanding af eddikesyre/vand/tetrahydrofuran 19:11:3 (rumfang) ved en temperatur på 40-45°C. Hvis disse reaktioner udføres på en blanding af forbindelser med formel V med ens absolut konfiguration i C-16 og modsatte konfigurationer i C-15, vindes der 25 en blanding af to af forbindelserne med formlen I, der er isomerer i C-15. Eventuelt kan denne blanding adskilles i enkelte isomerer ved hjælp af sædvanlig kromatografiteknik som belyst foran.

Det som udgangsmateriale anvendte fosforreagens med for-30 mel III kan fremstilles ved at man kondenserer en metylfosfon-syrealkylester med den almene formel VI

(r3o) u

^P-CH VI

3 J

(RJor 3 hvor R er en alkylgruppe, med en a-metyl-a-metoxyhexan-

syrealkylester (eller det tilsvarende acylklorid) med formel VI

8

DK 155937 B

OCH_ I 3

XOC-C-CH0-CH„-CH0-CH0 VII

| 2 2 2 3 ch3 3 hvor X betegner OR eller Cl.

Denne fremgangsmåde indebærer at man først omdanner metylfosfonatet med formel VI til den tilsvarende anion ved 5 tilsætning af butyllitium ved -78°C i tetrahydrofuran og derefter bringer det i kontakt med forbindelsen VII i ca. 1 time, stadig ved samme temperatur. Når der ønskes en optisk aktiv form af fosfonatet med formlen III opsplittes racematet af α-metyl-a-metoxyhexansyren først i de to antipoder på konven-10 tionel måde, fx ved hjælp af en optisk aktiv base såsom efe- drin, atropin eller amfetamin, til dannelse af de tilsvarende salte som derefter adskilles ved fraktioneret krystallisation.

De adskilte antipoder omdannes derefter til de tilsvarende optisk aktive estere eller syreklorider med formlen 15 VII, der derefter kondenseres med metylfosfonat med formlen VI.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser er stærkt virkende inhibitorer af mavesekretionen, også når de indgives til laboratoriedyr ad oral vej. Omfanget af denne biologiske aktivitet kunne overhovedet ikke forudses 20 af de sagkyndige i betragtning af den omstændighed at de tilsvarende forbindelser med 5-dobbeltbinding, der er beskrevet i belgisk patentskrift nr. 837.865, ved oral indgift er langt mindre aktive. Det har med andre ord vist sig at en svag modificering af strukturen af disse forbindelser har fremkaldt 25 bemærkelsesværdige og gunstige ændringer i den biologiske aktivitet. De gastrisk antisekretoriske egenskaber af disse forbindelser efter oral indgift blev bedømt på basis af deres evne til at hæmme hyperaciditet induceret i hunde ved hjælp af histamin. Histamin, der er en kraftigt virkende 30 stimulator af mavesyresekretionen (se Bertaccini et al, Eur. Journ. Pharmacol., 28, 360, 1974) blev indgivet intravenøst ved kontinuerlig infusion under forsøgene.

I forsøget brugtes der en gruppe på 5 bastardhunde. Hundene blev kirurgisk opereret i maven ved den metode der er be-

DK 155937 E

9 skrevet af Bertaccini et al (loc.cit.) for at forsyne hvert af dyrene med en innerveret hovedmave eller mavefistel (GF) og en denerveret mave eller Haidenhain-lomme (HP). Hovedma-ven og Haidenhain-lommen blev hver udstyret med en kanyle 5 for at gøre det muligt for mavesaften at løbe bort til omverdenen under tyngdekraftens indvirkning.

De opsamlede mavesaftprøver blev derefter titreret hver for sig med 0,1N NaOH ved hjælp af en automatisk titra-tor ("Radiometer", København). Efter en periode på 4-5 ugers 10 restitution blev de fem hunde først behandlet med det sekretfremkaldende middel alene (doser af histamin blev forøget progressivt hver 30.minut fra et minimum på 40 til et maximum på 320 yg/kg/h) for at stimulere den sure mavesaftsekretion både i GF og HP. Hvert 30. minut blev det sure udløb både fra 15 GF og fra HP opsamlet og titreret på den ovenfor beskrevne måde. De på denne måde opnåede værdier (hver enkelt som et gennemsnit for fem hunde) blev betragtet som kontrolværdier eller kontroller. For at evaluere den gastriske antisekretori-ske aktivitet efter oral indgift af de ved fremgangsmåden iføl 20 ge opfindelsen fremstillede forbindelser blev disse indgivet med en sonde i hovedmaven i en ønsket dosis, udtrykt som yg/kg/h og opløst i 1 ml fysiologisk saltopløsning, 60 minutter før den sekretfremkaldende behandling. D.et middel som stimulerede den gastriske hypersekretion blev indgivet in-25 travenøst ved kontinuerlig infusion i de foran angivne doser, og hvert 30. minut blev mavesaften både fra GF og fra HP opsamlet og titreret. På denne måde var det ved simple beregninger muligt at fastslå den procentuelle inhibering af sur mavesaftsekretion, der bevirkes ved givne doser af histamin 30 og af den virksomme forbindelse.

De resultater der opnåedes med den forbindelse ifølge omstående eksempel 1, der havde en værdi på [a]^ = -44,7°, viser at meget lave doser, fra 25-100 yg/kg/h, inhiberer den hyperaciditet i maven som fremkaldes af doser fra 40-160 35 yg/kg/h histamin, i en grad på ca. 95 til ca. 35% (beregnet i forhold til kontrollerne) i GF og fra ca. 60 til ca. 30% i HP.

10

DK 155937 B

Under samme forsøgsbetingelser er de tilsvarende forbindelser med en C-5-dobbeltbinding næsten inaktive.

Et andet forsøg blev udført under samme betingelser som ovenfor, men med indgift af histamin i en fast dosis på 5 160 ug/kg/h i stedet for stigende doser, og ved dette forsøg 20 viste det sig at forbindelsen ifølge eksempel 1 med [ctl^ = -44,7° blokerer mavesyresekretionen ca. 60%, mens de tilsvarende forbindelser med en dobbeltbinding i C-5 er inaktive.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede 10 forbindelser er kraftigt virkende inhibitorer af mave-hyperse-kretion, også ved intravenøs indgift. Dette er bekræftet ved evaluering af de virkninger på histamininduceret mave-hyper-sekretion, der fremkaldes af en enkelt intravenøs indgift i anæsteserede rotter af de omhandlede forbindelser. Forsøgene 15 blev udført i det væsentlige ved den metode der er beskrevet af Ghosh og Schild i Brit. J. Pharm. (1958) 13, 54-61. Ved denne teknik anæsteseres rotten med uretan og dens mave perfunderes med en tynd natriumhydroxydopløsning (N/4000 NaOH med en hastighed på ca. 1 ml/min.) via spiserøret og pH af 20 den væske der udgår fra en kanyle i pylorus registreres kontinuerligt ved hjælp af en glaselektrode forbundet med et direkte aflæsende pH-meter og overføres derfra til et skriveapparat. Ved passagen gennem maven opsamler perfusatet tilstrækkelig meget puffer til at virke som et tilnærmelsesvis 25 lineært puffersystem over det relevante område, hvorved ændringen i pH-værdien bliver et mål for syresekretionen.

Når N/4000 NaOH-opløsningen opsamles efter at have passeret gennem den ustimulerede mave giver den en oprindelig værdi på 6-6,5 (pHustimuleret mavef PHUS). En sekretionsstimulant, 30 i dette tilfælde histamin, indgives derefter intravenøst ved kontinuerlig infusion i en dosis på 1,5 mg/kg/h. Efter nogle få minutter begynder pH at falde, og efter ca. 10-20 minutter når den sekretoriske virkning sit maximum og pH sin laveste værdi <PHhistamlnstlmuleret mave; PHjjgg)- der på grund af den 35 kontinuerlige infusion af histamin holder sig konstant. De til afprøvning værende forbindelser indgives derefter intravenøst og pH opnoteres kontinuerligt. Ved at se på den højeste opnoterede pH-værdi, der viser den maximale antisekretoriske

DK 155937 E

11 virkning opnået med testforbindelsen og. ved anvendelse af følgende ligning

' ΡΗΜΆΕ ~ pHHSS 100 pHUS ” pHHSS

kan man let beregne den procentuelle inhibering af mavesyre-5 sekretionen. En effekt på 100% betyder at den afprøvede forbindelse ved den afprøvede dosis bragte pH-værdien i den histaminstimulerede mave tilbage til den ustimulerede maves oprindelige pH-værdi, mens en effekt på 0% betyder at indgiften ikke påvirkede den af histamin inducerede mavesaftsekretion.

10 Ved repræsentative forsøg med den ifølge omstående ek- 2 0 o sempel 1 fremstillede forbindelse med [α]^ = -44,7 opnåedes følgende resultater:

Dosis (ug/kg) % inbibering af sur _mavesaftsekretion 15 2,5 15 10 63 20 90 50_100_

Der udførtes andre forsøg som viste at de ved frem-20 gangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser også har bemærkelsesværdig cytoprotektiv virkning, der viser sig ved meget lave orale doser. Forbindelsernes cytoprotektive aktivitet blev evalueret på basis af deres effektivitet med hensyn til at inhibere dannelse af og nedsættelse af alvoren 25 af mavesår hos rotter fremkaldt af indgift af en høj dosis 1-(p-klorbenzoyl)-5-metoxy-2-metyl-3-indolyleddikesyre (indo-methacin),idet de her omhandlede forbindelser virker i orale doser som er langt lavere end dem der bevirker inhibering af mavesyresekretionen. Ved disse forsøg blev rotter afskåret fra 30 føde dagen før forsøgets begyndelse, mens de havde adgang til vand ad libitum. De til afprøvning, værende forbindelser blev indgivet ad oral vej som suspension i en 0,5%s vandig methocel- 12

DK 155937 B

opløsning (5 dyr/dosis), mens indomethacin blev indgivet in-traperitonealt i en mængde på 10000 mg/kg i samme bærestof.

En anden gruppe rotter (kontroller) fik kun det ulcerogene middel. De cellebeskyttende egenskaber af de. ved fremgangs-5 måden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser blev derefter udtrykt som % inhibering af mavesårene i forhold til kontrollerne, hvilket let kan beregnes ud fra følgende ligning: (kontrol) (behandlede dyr) χ (kontrol) 10 hvor AUD(]conj-roij er åen gennemsnitlige grad af ulceration i maverne hos kontroldyrene og AUD(behandlede dyr) er gennemsnitlige ulcerationsgrad af maverne hos de dyr som modtog både indomethacin og testforbindelsen.

AUD-værdierne er beregnet ved den metode der er beskre-15 vet af Thuillier et al, Chim. Ther., 3, 53, 1968, ved undersøgelse af laboratoriedyrenes maver for mulige ulcerationer og tildeling af en pointværdi fra 0 til 4 i afhængighed af antallet og styrken af de iagttagne ulcerationer. 0 betyder fravær af enhver mavesårsdannelse på mavevæggen, 4 betyder 20 perforerende mavesårsdannelser. En enkelt ulcerationsgrad (SUD) beregnes derefter for hver enkelt mave. Summen af værdierne for SOD divideret med antallet af dyr giver værdien af AOD for maverne for hver gruppe dyr.

Ved disse forsøg viste forbindelsen ifølge eksempel 1 25 med [a]^ = -44,7° sig at være meget aktiv, selv ved meget lave doser. Ved en dosis på 3 yg/kg, den laveste dosis der blev · afprøvet ved disse forsøg, var den procentuelle inhibering af mavesårene i forhold til dem hos kontroldyrene ca. 43, mens ED,-q (den dosis som bevirker inhibering på 50% af mavesårene 30 i forhold til kontrollerne), beregnet ved extrapolation, var 6 yg/kg.

Det er derfor tydeligt at den stærke beskyttende virkning på mavens slimhinde, som udøves af disse forbindelser, sker ved en eller flere mekanismer som er uafhængige af inhiberingen

DK 155937B

13 af syresekretionen eftersom, som det klart ses af resultater-ne af sidstnævnte forsøg, at denne forbindelse virker beskyttende i doser som er meget for små til at inhibere mavesyre-sekretionen i betragtelig grad.

5 Af de viste resultater ses det at de ved fremgangsmå den ifølge opfindelsen fremstillede prostaglandinderivater er nyttige til hos pattedyr at nedsætte og kontrollere excessiv mavesyresekretion og også, selv i meget små doser, at udøve fen beskyttende virkning på mavens slimhinder, hvorved man 10 kan nedsætte eller undgå gastrointestinal sårdannelse. Man kan følgelig med sådanne formål for øje indgive dyr eller mennesker farmaceutiske eller veterinærmedicinske præparater iridéholdéndé ét prostaglåndinagtigt derivat med formlen I som virksom bestanddel.

15 Ved udnyttelse af forbindelserne til dette formål er den foretrukne indgiftsvej for disse forbindelser per os i form af kapsler, overtrukne tabletter eller saft. Eventuelt kan der også fremstilles parenteralt indgivelige dosisformer såsom ampuller med en injicerbar væske. Disse farmaceutiske 20 præparater oparbejdes på kendt måde, se fx Remington's

Pharmaceutical Sciences, 13. udgave, Mack Publishing Co.,

Easton, Pennsylvania, og de fremstilles ved sædvanlige procedurer. De kan indeholde fra ca. 5 til ca. 100 yg og fortrinsvis fra ca. 10 til ca. 60 yg virksom bestanddel. Foruden dis-25 se terapeutiske forbindelser kan kapsler og overtrukne tabletter indeholde de sædvanlige farmaceutisk acceptable excipien-ter såsom inerte fortyndingsmidler, smøremidler og desintegrationsmidler. Saft kan indeholde sædvanlige suspenderings-, be-fugtnings-, pufrings- og aromagivende midler samt præserverings 30 midler. Dosisområdet for de omhandlede prostaglandinagtige forbindelser til anvendelse til mavebeskyttende behandling vil afhænge af en lang række forskelige faktorer, herunder art, alder og vægt af individet. Der kan opnås gode resultater ved indgift af de omhandlede prostagiandinforbindelser i et dag-35 ligt dosisområde mellem ca. 10 og ca. 300yg, fortrinsvis i deldoser. Det er dog klart at en dagsdosis uden for det angivne område også kan anvendes i afhængighed af det behandlede

DK 155937 B

14 individs individuelle tilstand.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen skal i det følgende belyses ved nedenstående eksempler 1 og 2.

Eksempel 1 5 11a,15-Dihydroxy-16-metoxy-16-metyl-9-oxoprosta-13(E)- en-syremetylester (15R, 16R) og (15S, 16R) eller (15R, 16S) og (15S, 16S)_ a) Til en blanding af 770 mg af en 81,8%s suspension af natriurahydrid i mineralolie (0,026 mol) og 30 ml vandfrit 10 dimetoxyætan sættes der dråbevis en opløsning af 8 g (0,030 mol) optisk aktiv 3-metoxy-3-metyl-2-oxoheptylfosfonsyre-dimetylester med [a]p0 = +41,2° (c = 1% i CHCl^) i 40 ml dimetoxyætan. Den resulterende blanding henstår ved stuetemperatur i 15 minutter og derefter tilsættes der gradvis en op-15 løsning af 4,08 g (0,013 mol) 7-(5a-acetoxy-2|3-formyl-3a- hydroxycyklopent-la-yl)-heptansyremetylester i 50 ml vandfrit dimetoxyætan.

Efter henstand ved stuetemperatur i 6 timer udhældes reaktionsblandingen i en vandig opløsning mættet med Nal^PO^, 2o og der ekstraheres derefter med ætylæter. Den organiske ekstrakt tørres over MgSO^ og koncentreres til tørhed. Den vundne remanens renses ved søjlekromatografi på silikagel under elue-ring med ætylæter/petroleumsæter 1:1 (rumfang som alle elue-ringsmiddelblandingsforholdene i alle eksemplerne). Udbytte 25 3,9 g 9a-acetoxy-lla-hydroxy-16-metoxy-16-metyl-15-oxoprosta- 13(E)-en-syremetylester hvor C-16 har den absolutte konfiguration R eller S. [a]^ = +53,8° (c = 0,81% i CHCl^) . NMR-absorptionstoppe i CDCl^ (<5): 0,89, 1,1-2,1, 1,29, 2,08, 2,30, 2,4-2,6, 3,21, 3,68, 4,11, 5,23, 6,87.

30 b) En blanding af 5 g (0,0113 mol) 9a-acetoxy-lla-hydroxy- 16-metoxy-16-metyl-15-oxoprosta-13(É)-en-syremetylester, fremstillet som beskrevet ovenfor under a) opløst i 150 ml vandfrit benzen, 2,6 ml (0,0285 mol) 2,3-dihydropyran og 70 mg p-toluensulfonsyre i 50 ml vandfrit benzen tilberedes ved en 35 temperatur mellem 5 og 10°C og holdes derefter på stuetempera-

DK 155937 B

15 tur i ca. 10 minutter. Reaktionsblandingen vaskes først med en vandig opløsning mættet med natriumbikarbonat og derefter med vand. Afdampning af opløsningsmidlet giver en remanens som renses ved søjlekromatografi på silikagel under eluering 5 med petroleumsæter/ætylæter 7:3. Udbytte 5 g 9a-acetoxy-16-metoxy-16-metyl-15-oxo-lla-[(tetrahydro-lH-pyran-2-yl)-oxy]-prosta-13(E)-en-syremetylester hvor kulstofatomet i stilling 16 har den absolutte konfiguration R eller S. NMR-ab-sorptionstoppe i CDCl^ (δ): 0,88, 1,1-3,0, 1,25, 2,06, 3,23, 10 3,3-4,8, 3,72, 5,20, 6,8-7,1.

c) Til en opløsning af 13,5 g natriumborhydrid i 400 ml metanol, afkølet til -20°C, sættes der dråbevis en opløsning i metanol af 5 g (0,0093 mol) 9a-acetoxy-16-metoxy-16-metyl-15-oxo-lla-[(tetrahydro-ΙΗ-pyran-2-y1)-oxy]-prosta-13(E)-en-syre-15 metylester, fremstillet som beskrevet i afsnit b). Den resulterende opløsning holdes på -20°C i ca. 2 timer og udhældes derefter i en mættet vandig opløsning af Na^PO^ hvorefter der ekstraheres med ætylæter. Den organiske ekstrakt tørres over Na^SO^ og inddampes til tørhed, hvorved der vindes 20 en remanens som er en blanding af de to mulige isomerer i C-15 af 9a-acetoxy“15-hydroxy-16-metoxy-16-metyl-lla-[(tetrahydro-lH-pyran-2-yl)-oxy]-prosta-13(E)-en-syremetylester. Disse isomerer adskilles ved at man først eluerer med petroleumsæter/ ætylæter 8:2 for at rense råblandingen og derefter med pe-25 troleumsæter/ætylæter 6:4. Det først eluerede produkt (2,05 g rent produkt, den mindst polære isomer) har følgende NMR-spek-trum: hovedabsorptionstoppe i CDCl^ forekommer ved følgende frekvenser, udtrykt i δ-enheder: 0,90, 1,13, 1,1-2,9, 2,07, 3,28, 2,5-4,3, 3,73, 4,67, 5,20, 5,7-5,9.

30 Det andet eluerede produkt (2,1 g rent produkt, den mest polære isomer) har følgende NMR-spektrum i CDCl^ (δ-en-heder): 0,93, 1,07, 1,1-2,9, 2,07, 3,28, 3,2-4,2, 3,72, 4,67, 5,20, 5,7-5,9.

De to på denne måde vundne produkter har samme absolut-35 te konfiguration i C-16 (R eller S) og modsatte konfigurationer i C-15. De repræsenterer derfor det isomere par som har føl-

DK 155937B

16 gende absolutte konfiguration i C-15 og i C-16: (15R, 16R) og (15S, 16R) eller (15R, 16S) og (15S, 16S).

De efterfølgende kemiske modifikationer/ der fører til slutprodukterne med formel I, ændrer ikke stereokemien i 5 stilling C-15 og C-16.

d) 2/1 g af den mest polære isomer af 9a-acetoxy-15-hydro-xy-16-metoxy-16-metyl-lla-[(tetrahydro-lH-pyran-2-yl)-oxy]-prosta-13(E)-en-syremetylester, fremstillet som beskrevet ovenfor under c), opløses i 150 ml vandfrit benzen. Efter 10 afkøling tilsættes 1,3 ml (0,0142 mol) 2,3-dihydropyran og en opløsning af 75 mg p-toluensulfonsyre i 40 ml vandfrit benzen, og efter 15 minutter udhældes opløsningen i vandigt natriumbikarbonat. Det organiske lag fraskilles, tørres over Na2S0^ og inddampes til tørhed. Remanensen renses ved søjlekro-15 matografi på silikagel under eluering med petroleumsæter/ætyl-æter 7:3, hvorved der fremkommer 2,1 g 9a-acetoxy-16-metoxy-16-metyl-lla,15-bis-[(tetrahydro-lH-pyran-2-yl)-oxy]-prosta- 13 (E)-en-syremetylester, hvori kombinationen af de absolutte konfigurationer i C-15 og C-16 er en af de fire mu-20 lige. NMR-spektrum (CDCl^): 0,92, 1,12, 1,15, 1,1-3,0, 2,07, 3,25, 3,32, 3,2-4,2, 3,70, 4,5-5,2, 5,3-5,6 (δ-enheder).

Den på denne måde vundne forbindelse opløses i 200 ml vandfri metanol og til den resulterende opløsning sættes der 2,1 g vandfrit kaliumkarbonat. Efter omrøring ved stuetempera-25 tur i 24 timer udhældes blandingen i en vandig mættet opløsning af NaE^PO^, og derefter ekstraheres med ætylæter. Den organiske fase fraskilles, tørres over Na2S0^ og koncentreres til tørhed. Der vindes 1,95 g 9a-hydroxy-16-metoxy-16-metyl-11a,15-bis-[(tetrahydro-lH-pyran-2-yl)-oxy]-prosta-13-30 (E)-æ-syremetylester (rent produkt). NMR-spektrum i CDCl^CS): 0,92, 1,0-2,9, 1,10, 1,13, 3,25, 3,32, 3,2-4,4, 4,6-5,0, 5,4-5,9.

e) En blanding af 6,38 g "Celite", 7,25 g Collins reagens (Py2-Cr0g) og 1,95 g 9a-hydroxy-16-metoxy-16-metyl-lla,15- 35 bis-[(tetrahydro-lH-pyran-2-yl)-oxy]-prosta-13(E)-en-syre-

DK 155937 B

17 metylester i 180 ml metylenklorid omrøres ved stuetemperatur i ca. 1 time. Reaktionsblandingen udhældes i 1200 ml ætylæter og filtreres gennem "Cellte'1. Filtratet affarves med aktiveret kul og koncentreres til tørhed. Udbytte 1,77 g 16-metoxy-16-5 metyl-9-oxo-11a,15-bis-[(tetrahydro-lH-pyran-2-yl)-oxy]- prosta-13(E)-en-syremetylester. NMR-spektrum i CDCl^ (6): 0,93, 1,0-2,9, 1,12, 1,15, 3,1-4,9, 3,25, 3,32, 3,70, 5,4-5,8.

f) De 1,77 g af det således vundne produkt suspenderes i 10 100 ml af en opløsning af eddikesyre/vand/tetrahydrofuran 19:11:3. Efter omrøring ved 45°C i 2 timer fortyndes blandingen med vand og pH bringes til 7,2 ved tilsætning af natrium-bikarbonat.

Blandingen ekstraheres med ætylæter som derefter afdam-15 pes og giver 1,19 g råprodukt som renses ved søjlekromatografi på silikagel ved eluering med ætylæter. Der vindes 780 mg rent 11a, 15-dihydroxy-16-metoxy--16“metyl--9-oxoprosta-13 (E) -en-syremetylester hvor kulstofatomerne i stillingerne 15 og 16 har en af de fire mulige kombinationer af absolutte 20 konfigurationer, dvs. (15R, 16R) eller (15R, 16S) eller (15S, 16R) eller (15S, 16S). Forbindelsen har følgende egenskaber: [alp0 = -44,7° (c = 0,98% i CHC13). NMR i CDC13 (6): 0,92, 1,1-1,7, 1,11, 1,9-2,8, 2,29, 3,1-3,3, 3,24, 3,63, 4,07, 4,12, 5,69.

25 Forbindelsen er et enhedsprodukt hvilket bevises ved differentiel scanderingskalorimetri, der giver smp. ved 40-48°Cc 1

Ved at gå ud fra den mindst polære isomer af 9a-acetoxy- 15-hydroxy-16-metoxy-16-metyl-lla-[(tetrahydro-IH-pyran-2-yl)-oxy]-prosta-13(E)-en-syremetylester, fremstillet som be- 30 skrevet ovenfor i afsnit c), og ved at gå frem præcis som beskrevet i afsnit d), e) og f), vindes der 380 mg lla,15-di-hydroxy-16-metoxy-16-metyl-9-oxoprosta-13(E)-en-syremetylester der i C-16 har samme absolutte konfiguration som den under afsnit f) vundne forbindelse, men modsat absolut konfigu- 20 35 ration i C-15. Forbindelsen har følgende egenskaber: [a]D =

DK 155937 B

18 -79,6° (c = 1% i CHC13). NMR-spektrum i CDC13 (δ): 0,92, 1,1-1,7, 1,17, 1,9-2,8, 2,29, 3,26, 3,69, 4,10, 4,17, 5,75.

Eksempel 2 11a,15-Dihydroxy-16-metoxy-16-metyl-9-oxoprosta-13(E) -5 en-syremetylester (15R, 16S) og (15S, 16S) eller (15R, 16R) og (155, 16R)

Ved at gå frem i det væsentlige på samme måde som beskrevet i eksempel 1, men ud fra den anden optiske antipode af fos-fonatreagenset, som anvendtes i afsnit a) i eksempel 1 10 ([α]p = -41,3° (c = 1% i CHCl^)) , fremstilles de andre to mulige isomerer af lla,15-dihydroxy-16-metoxy-16-metyl-9-oxo-prosta-13(E)-en-syremetylester med formlen I. Disse to isomerer har samme absolutte konfiguration i C-16, og den er modsat C-16-konfigurationen hos de to isomerer i eksempel 1, 20 og derhos har de to isomerer indbyrdes modsat konfiguration i C-15.

a) Ved at kondensere 5 g (0,0188 mol) 3-metoxy-3-metyl-2-oxoheptylfosfonsyredimetylester med [a]^ = -41,3° (c = 1% i CHCl^) med 2,5 g (0,0080 mol) 7-(5a-acetoxy-23-formyl-3a- 25 hydroxycyklopent-la-yl)-heptansyremetylester som beskrevet i eksempel 1 a) og ved derefter at gå frem som beskrevet i afsnittene b) og c) i samme eksempel, vindes der en blanding (2,65 g råprodukt) af de to isomerer i C-15 af 9a-acetoxy-15-hydroxy-16-metoxy-16-metyl-lla[(tetrahydro-lH-pyran-2-yl)-30 oxy]-prosta-13(E)-en-syremetylester. NMR-spektrum i CDC13 (δ): 0,91, 1,0-2,6, 1,06, 1,07, 1,13, 1,14, 2,06, 2,29, 3,22, 3,24, 3,3-4,2, 3,68, 4,5-4,6, 5,13, 5,5-5,7.

b) Blandingen af de under eksempel 2 a) vundne isomerer i C-15 (2,65 g) hydrolyseres ved behandling med 78 ml af en 35 blanding af eddikesyre/vand/tetrahydrofuran 19:11:3 ved 45°C i 90 minutter. Reaktionsblandingen neutraliseres med natriumbikarbonat og ekstraheres med æter. Ved inddampning af den organiske ekstrakt til tørhed vindes der 2,55 g råprodukt som er en blanding af de to C-15 isomerer af 9a-acetoxy-lla,15-di-

DK 155937 B

19 hydroxy-16-metoxy“16-metylprosta-13 (E) -en- syremetylester.

De rene isomerer adskilles ved søjlekromatogråfi på silikagel ved eluering med ætylæter. Det først eluerede produkt er den mindst polære isomer i en mængde på 850 mg og med følgende 5 egenskaber: [a]^° = +17,3° (c = 0,95% i CHC13). NMR-spektrum i CDC13 (δ): 0,92, 1,05-1,1-2,6, 2,07, 2,29, 3,23, 3,68, 3,93, 4,15, 5,19, 5,63.

Det andet eluerede produkt er den mest polære isomer 20 i en mængde på 870 mg og med følgende egenskaber: [a]D = 10 +45,3° (c = 0,76% i CHCl^). NMR-spektrum i CDCl^ (δ): 0,91, 1,0-1,7, 1,13, 2,07, 2,2-3,0, 2,29, 3,25, 3,68, 3,89, 4,15, 5,17, 5,53,- 5,71.

c) En biånding af 870 mg (0,00191 mol) af den mest polære isomer fremstillet som beskrevet i afsnit b) i 130 ml vandfrit 15 benzen, 30 mg p-toluensulfonsyre i 30 ml vandfrit benzen og 2,5 ml (0,0273 mol) 2,3-dihydropyran holdes på 15°C i 15 minutter og udhældes derefter i en mættet vandig opløsning af NaHCO^, hvorpå den organiske fase fraskilles. Efter vask med vand tørres den organiske fase over Na2S04 og inddampes til 20 tørhed.

Den vundne remanens renses ved kromatografi på en sili-kagel-kolonne og eluering med petroleumsæter/ætylæter 7:3. Udbytte 1,09 g 9a-acetoxy-16-metoxy-16-metyl-llcc, 15-bis-[(tetrahydro-lH-pyran-2-yl)-oxy]-prosta-13(E)-en-syre-25 metylester med absolut konfiguration i C-16 der er modsat den hos det produkt der fremstilledes i eksempel 1 d), og en af de to mulige konfigurationer i C-15. NMR-spektrum i CDCl^ (δ): 0,92, 1,0-2,7, 1,11, 1,15, 2,05, 2,29, 3,22, 3,29, 3,3-4,2, 3,68, 4,6-4,9, 5,13, 5,4-5,8.

30 d) Ved at gå frem i det væsentlige som beskrevet i afsnittene d) (sidste del) , e), f) og g) i eksempel 1, men udgående fra den forbindelse der vandtes ifølge eksempel 2 c), vindes der 250 mg lla,15-dihydroxy-16-metoxy-16-metyl-9-oxoprosta-13 (E)-en-syremetylester. Dette produkt har følgende egenskaber: 35 = -51,4° (c = 0,52% i CHCl^ ) . NMR-spektrum i CDC13 (δ) :

DK 155937 B

20 0,91/ 1,1-3,2, 1,14, 2,30, 3,25, 3,68, 4,07, 4,10, 5,6-6,0.

e) Ved at gå frem som beskrevet i nærværende eksempels afsnit c) og d), men udgående fra 860 mg af den mindst polære isomer vundet i afsnit b), vindes der 320 mg 11a,15-dihydroxy-5 16-metoxy-16-metyl-9-oxoprosta-13(E)-en-syremetylester.

Denne forbindelse, der har samme absolutte konfiguration i C-16 som den tilsvarende isomer fremstillet ifølge afsnit d) og modsat konfiguration i C-15, udviser følgende egenskaber: . [ct]p° = -82,4° (c = 0,95% i CHC13 ) . NMR-spektrum i CDC13 {&) : 10 0,94, 1,1-1,8, 1,06, 2,0-2,9, 2,30, 3,24, 3,69, 4,11, 4,19, 5,6-5,9.

Eksempel 3

Der fremstilles en kapsel indeholdende følgende bestanddele: 15 11a,15-dihydroxy-16-metoxy-16-metyl- 9-oxoprosta-13(E)-en-syremetylester 40 yg talkum 3 mg lak tose 3 mg natriumkarboxymetylcellulose 3 mg 20 stivelse indtil 90 mg

Eksempel 4

Der fremstilles en overtrukket tablet med lla,15-dihydroxy-16-metoxy-16-metyl-9-oxoprosta-13(E)-en-syremetylester 60 yg 25 natriumkarboxymetylcellulose 4 mg magniumstearat 4 mg gelatine 7 mg . stivelse 7 mg sakkarose 20 mg 30 samt gummi arabikum, laktose, titandioxyd, aluminiumlak som ved konventionelle metoder.

Claims

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 16-metoxy- 16-metyl-prostaglandin -derivater med den almene formel

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved 1. at R er en C2_^ alifatisk acylgruppe og R er et hydrogenatam eller en tetrahydro-lH-pyran-2-yl-gruppe. DK 155937 B

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved at reduktionen af 15-oxogruppen til en 15-hy-droxygruppe udføres på en forbindelse med formlen IV, hvor R er en beskyttelsesgruppe på hydroxyfunktionen.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendeteg- 2 net ved at R er en tetrahydro-lH-pyran-2-yl-gruppe.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved at der fremstilles 11a,15-dihydroxy-16-meto-xy-16-metyl-9-oxo-prosta-13(E)-en-syremetylester.

5. CH_ 6 CH. * ^fH2s* /?°0Κ 2^chA* och*01^ 2vch2^1 / e 2 QCH3 2 je 2 20 \ **L is ^CH 15 vCi* U/CH2^19 τ L CH3 2 2 HO OH 10 hvor R betegner en _^alkylgruppe eller en ugiftig, farmaceutisk acceptabel kation, i form af en blanding af isomerer eller i form af de rene optiske antipoder med (15R,16S), (15S,16R), (15R,16R) eller (15S,16S) konfigu-15 ration, kendetegnet ved at man a) omsætter et cyklopentanaldehyd roed den almene formel 9R1 ^k-'CH2-CH/CH^CH / CH^C„/C00R OR2 CHO 1 2 hvor R har den ovenfor angivne betydning og R og R uafhængigt af hinanden hver betegner et hydrogenatom seller en be-2 5 skyttelsesgruppe på hydroxyfunktionen, med et racemisk fosfonat med den almene formel , Λ OCH, R30^ j? I* 3 30 ^i-CH2-CO-C-CH2-CH2-CH2-CH3 III r3cT ch3 hvor R3 er en alkylgruppe, eller med en af denne forbin delses optiske antipoder, til dannelse af en forbindelse med 35 formlen DK 155937 B OR1 i ,CH. , -CH, »^CH2 , ^COOR χ*Υ c< ch2 1V c- 11» 1 el 3 18 20 IV CH^ CH2 ^ CH2^ H3 OR2" S CH3 1 2 10 hvor R, R og R har de ovenfor angivne betydninger, b) reducerer 15-oxogruppen i denne forbindelse til en 15-hydroxygruppe ved behandling af forbindelsen med formlen IV med et blandet metalhydrid, fortrinsvis natriumborhydrid, zinkborhydrid, difenyltinhydrid eller et litiumtrialkylborhydrid, til dannel-15 se af en forbindelse med den almene formel V 9r1 CH2-ch/C00R 20 2,>-<Ch^CH-ch-S2--CH2-ch/CH3 v OR2 I I 2 2 OH CH3 1 2 hvor R, R og R har de ovenfor angivne betydninger, 25 c) beskytter hydroxygruppen i C-15 ved hjælp af et passende beskyttelsesmiddel for hydroxyfunktioner, d) om nødvendigt frigør hydroxyfunktionen i C-9 ved fjer- nelse af beskyttelsesgruppen R , e) oxyderer hydroxygruppen i C-9 til en oxogruppe og til 30 slut f) etablerer hydroxyfunktionerne i C-ll(om nødvendigt) og C-15 ved mild hydrolyse, hvorpå man om ønsket adskiller en vunden isomerblånding i de enkelte isomerer ved konventionel teknik.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved at der fremstilles den stereoisomer af 11a,15-di-hydroxy-16-metoxy-16-metyl-9-oxoprosta-13(E)-en-syremetylester, der har en chiralitet i som svarer til den der foreligger i hos den stereoisomer af 3-metoxy-3-15 metyl-2-oxo-heptyl-fosfonsyre-di-metylester, der har [a]p^ = 41,2° (c=1% i CHCl^), og en chiralitet i Cjj svarende til den der foreligger hos den mest polære stereoisomer af 9cc-acetoxy- 15-hydroxy-16-metoxy- 16-metyl-11a-[(tetrahydro-1H-pyran-2-yl)-oxy]-prosta-13(E)-en-syre-20 metylester, som er det andet eluerede produkt ved kromatografisk adskillelse af stereoisomerer på en silicagel-kolonne under eluering i rækkefølge med petroleumsæter/ ætylæter 8:2 og derpå petroleumsæter/ætylæter 6:4 (rumfangsforhold) . 25 30 35