DK151339B

DK151339B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-acetamido)-cephalosporinderivater

Info

Publication number: DK151339B
Application number: DK669174AA
Authority: DK
Inventors: Mitsuo Numata; Isao Minamida; Masayoshi Yamaoka; Mitsuru Shiraishi; Toshio Miyawaki
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Priority date: 1973-12-25
Filing date: 1974-12-20
Publication date: 1987-11-23
Also published as: AR218214A1; DE2461478A1; DE2462736C2; GB1491018A; FR2255077A1; CA1070294A; DE2462893C2; PH15904A; DK669174A; CA1104125B; HK15781A; AR230063A1; FI63585C; FI63585B; FI365274A; US4080498A; US4517361A; PH12246A; NL164561B; DK151339C

Description

151339

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 7-[2-(2-imino-4-thiazolin-4--yl)-acetamido]-cephalosporinderivater med den almene formel

myS

N_U-eH^CONH-,_

2 i I

l-N ^-J-CH-Y

O"" V

COOH

i hvilken Y betyder en -OCOCH,-gruppe eller en gruppe med form-3 3 J

len SR , hvor R betyder en usubstitueret eller substitueret thia-diazolyl-, diazolyl-, tetrazolyl-, triazolyl-, oxadiazolyl-, N-oxido- 151339 2 -pyridazinyl-,'thiazolyl-, pyrimidyl-, pyridyl-, pyridazinyl- eller oxazolylgruppe, idet substituenterne er C^_2-alkyl, amino, hydroxyl, trifluormethyl, di-C^_2~alkylaminoacetylamino, "(CH2)n“q, -S—(CH2) -q eller -NH-(CH2)n~q, hvor n er 1 eller 2, og q er hydroxyl, carboxyl, sulfo, carbamoyl, C-^-alkoxycarbonyl, di-C^_2-alkylamino, di-ci-2"alkylcarbamoyl' C1_2-alkylthio, C^_2-alkylsulfonyl, acetyl, benzoyloxy eller morpholinocarbonyl, eller farmaceutisk acceptable salte eller estere heraf.

Undersøgelser over syntesen af cephalosporinderivater har hidtil været rettet på omdannelsen af 7-aminocephalosporansyre til forskellige acylderivater i 7-stillingen eller til derivater ved 3-acetoxy-gruppenfor at fremstille forbindelser med enten et bredt antibakterielt spektrum eller et specifikt antibakterielt spektrum. Disse velkendte cephalosporinderivater er imidlertid ikke altid helt tilfredsstillende med hensyn til deres antimikrobielle aktivitet mod et stort antal forskellige mikroorganismer. Man har derfor søgt efter en forbindelse, der har et bredere antimikrobielt spektrum og er effektiv selv i lave koncentrationer.

I dansk patentansøgning nr. 3930/71 er beskrevet forbindelser, hvor acylgrupperi i 7-stillingen er 0 Z-C-NH-CH0C-NH- II 6

NH

eller

O

Z-.-N-CH--C-NH- rjL 2 Χ0/'Λ%^0 der adskiller sig væsentligt fra gruppen

HN

V" Ί] » HN-l-CH2-C-NH- i 7-stillingen i forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse.

De foreliggende forbindelser er desuden mere aktive end de ovennævnte kendte forbindelser, hvilket fremgår af følgende:

Der refereres deri f.eks. til følgende forbindelse

^ N—H

W nh . /—i J-ch2-s-^s>ch3 3 151339 der betragtes som den mest fordelagtige forbindelse og også omtales som "BL-S339" i journalen "Antimicrobial Agents and Chemotherapy", vol 3, 40, 1973. Ifølge denne artikel, side 42, venstre kolonne og fig. 4 er BL-S339 mindre aktiv end "Cephalothin" over for P. mira-bilis. På den anden side er de foreliggende forbindelser ikke mindre aktive end "Cephalothin" (jfr. tabel II). Heraf fremgår indirekte, at de foreliggende forbindelser er mere aktive end de kendte forbindelser .

I dansk patentansøgning nr. 1196/72 beskrives forbindelser, som ifølge side 6 og 7 i beskrivelsen til denne ansøgning alle er på esterform, der ændres til den frie form i legemet. Produkterne "Cephazolin" og "Cephaloridin", der forhandles verden over, er begge baseret på de frie ovennævnte forbindelser.

De foreliggende forbindelser er mere aktive end de to ovennævnte produkter, hvilket fremgår af tabellerne VIII-XII.

"Cephazolin", der anvendes som kontrol ved afprøvning af de her omhandlede forbindelser, er beskrevet i tysk fremlæggelsesskrift nr. 1.770.168.

Cephalosporinderivater er desuden beskrevet i dansk patentansøgning nr. 3451/72. Forbindelsen f.eks. ifølge eksempel 1 i denne ansøgning er mindre aktiv end de her omhandlede forbindelser, jfr. tabel VIII.

Det har nu vist sig, at hidtil ukendte cephalosporinderivater repræsenteret ved den ovennævnte formel I har et bredere antimikro-bielt spektrum i sammenligning med spektret af kendte cephalospori-ner, såsom Cephazolin, Cephaloridin og natrium-7-(1'-pyrazolylacet-amido)-3-(2"-pyridylthiomethyl)-3-cephem-4-carboxylat-l"-oxid (forbindelse ifølge DK-patentansøgning nr. 3451/72). Cephalosporinderi-vaterne med formlen I er f.eks. ønskelige cephalosporinantibiotika med et stærkt og bredt antimikrobielt spektrum især mod sådanne gramnegative bakterier som Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae,

Proteus vulgaris og Proteus morganii, og som viser en større inhibe-rende aktivitet i sammenligning med kendte cephalosporiner, såsom de ovenfor nævnte.

7-[2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-cephalosporin-derivaterne [I] fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan anvendes med sin 4-carboxylgruppe fri eller efter omdannelse til et farmaceutisk acceptabelt salt med en ikke-toksisk kation, f.eks. natrium eller kalium, en basisk aminosyre, f.eks. arginin, ornithin, ly-'

Sin eller hi Sti Λ in . eller on vViTirlmvira 1 Vvl ami n _ c S c em W—τηο-Ητι,Ι rrl nr·— 4 151339 anrin, diethanolamin, triethanolamin eller tris-hydroxymethylaminomethan. Disse' forbindelser med formlen I kan også anvendes, efter de er blevet omdannet til et biologisk aktivt esterderivat ved esteri-ficering af 4-carboxylgruppen, idet disse esterderivater bidrager til f.eks. et forøget blodniveau eller/og en længere varende aktivitet. Som estergrupper til dette formål kan f.eks. nævnes alkoxymethyl og a-alkoxyethyl og andre α-alkoxy-a-substituerede methylgrupper, f.eks. methoxymethyl, ethoxymethyl, isopropoxymethyl, a-methoxy-ethyl eller a-ethoxyethyl, alkylthiomethylgrupper, f.eks. methyl-thiomethyl, ethylthiomethyl eller isopropylthiomethyl, og acyloxy-methyl og α-acyloxy-a-substituerede methylgrupper, f.eks. pivaloyloxy-methyl og α-acetoxybutyl.

Fremgangsmåden til fremstilling af cephalosporinderivaterne méd formlen X, er ejendommelig ved at, (a) en dehydratiseringskatalysator får lov til at indvirke j i på en forbindelse med den almene formel

NH

NHo-C-SCHoC0CHoC0NH-_ 2 2 Γ I (II)

X-N -ii-CH-Y

COOH

hvori Y har den ovenfor angivne betydning, eller et salt eller en ester heraf, (b) en forbindelse med formlen Η—N Ll-CH2C0NH-|-SS\ (Ιχ) ch2ococh3

COOH

eller et salt eller en ester deraf omsættes med en forbindelse med formlen R3SH (X) 3 hvor R har den ovenfor angivne betydning, eller et salt heraf, eller 5 151339 (c) en forbindelse med formlen v-i—ΓSni 3 0^·—n^^I-c^sr (XII)

GOOH

hvor har den ovenfor angivne betydning, eller et salt eller en ester heraf, omsættes med en forbindelse med formlen X1 s (XIII) r^-nZ j| -ch2cooh hvor X^· betyder en beskyttet iminogruppe, eller et reaktivt derivat heraf, hvorefter om nødvendigt beskyttelsesgruppen fjernes fra iminogruppen.

Det følgende er en mere detaljeret forklaring af fremgangsmådevarianterne (a)-(c).

Variant (a)

Ringslutningsreaktionen af forbindelsen II til forbindelserne I sker let i et opløsningsmiddel. Som opløsningsmidler kan der sædvanligvis anvendes vand, alkoholer (f.eks. methanol eller ethanol), acetone, acetonitril, chloroform, dioxan, ethylenchlorid, tetra-hydrofuran, ethylacetat, dimethylformamid og dimethylsulfoxid eller passende blandinger af sådanne opløsningsmidler. Reaktionen fremmes ved tilstedeværelsen af en Lewis-syre eller en base, der virker som en dehydratiseringskatalysator. Som en sådan syre kan der anvendes enhver phosphatpuffer med sur pH-værdi, saltsyre, phosphorsyre og svovlsyre og deres alkalimetalsalte, og andre uorganiske og organiske syrer, f.eks. eddikesyre eller mælkesyre. Som base kan der sædvanligvis anvendes sådanne på uorganisk eller· organisk basis f.eks. basiske • phosphatpuffere, alkalimetalhydroxider (f.eks. natriumhydroxid eller kaliumhydroxid), alkalimetalhydrogencarbonater (f.eks. natriumhydro-gencarbonat eller kaliumhydrogencarbonat) ammoniak, N,N-dicyclo-hexylamin, triethylamin, pyridin, ammoniak N,N-dimethylanilin.

Udgangsforbindelsen II anvendes ved reaktionen som den frie syre eller som et alkalimetalsalt, f.eks. natriumsaltet eller kaliumsaltet, eller som en let spaltelig ester, f.eks. trimethylsilylesteren, 151339 6 methoxymethylesteren, 2-methylsulfonylethylesteren, p-nitrobenzyl-esteren, 2,2,2-trichlorethylesteren eller tritylesteren. Reaktionen-forløber sædvanligvis tilstrækkelig tilfredsstillende ved temperaturer fra ca. -70°C til ca. stuetemperatur, skønt den kan ledsages af opvarmning eller afkøling om nødvendigt. Reaktionen udføres under tilfredsstillende betingelser fra få til mange timer, hvorved ringslutningsproduktet I dannes. Når der som opløsningsmiddel vælges en pufferopløsning, kan omdannelsen til forbindelsen med formlen I foregå i tilfredsstillende grad ved bare at opløse XI i pufferen og henstille opløsningen, fordi pufferen indeholder den ovennævnte j syre eller base som en af sine komponenter.

Man kan let undersøge om en syre (eller sure betingelser) eller en base (eller basiske betingelser) er nødvendige for reaktionen, f.eks. ved blanding af II med nævnte syre eller base i et opløsningsmiddel i lille skala og undersøgelse af resultatet ved tyndtlagschromatografi, idet udgangsforbindelsen II og den ønskede forbindelse I let kan adskilles ved tyndtlagschromatografi. På denne måde kan valget af en nødvendig syre eller base eller andre nødvendige reaktionsbetingelser let udvælges nøjagtigt.

Nogle af forbindelserne II cycliseres så let, at de kan cy-clisere under de i det følgende beskrevne reaktionsbetingelser, der anvendes til fremstilling af dem selv. I et sådant tilfælde er det unødvendigt at isolere II, men I dannes under fremstillingen af udgangsmaterialet. Dvs. at forbindelserne II cycliserer så let til forbindelsen lt at de selv under deres egen fremstilling lidt efter lidt omdannes, til forbindelsen I. Det er derfor praktisk at udføre den foreliggende reaktion i kombination med fremstillingen af forbindelsen II.

7-[2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]—cepha-lo spor inder ivater med formlen I fremstillet på denne måde kan isoleres og renses på i og for sig kendt måde, f.eks. ved opløsningsmiddelekstraktion, indstilling af pH-værdien, faseoverførsel, destillation, krystallisation, omkrystallisation, chromatografi eller de-esteri-ficering.

Fremgangsmådevarianten (a) kan udføres på den måde, at en forbindelse med formlen NCS-CH2COCH2CONH-.-

Jr—N^-CH2Y (III1 0 ΡΛΛΙΙ 7 151339 i hvilken Y har den ovennævnte betydning, eller et salt eller en ester deraf omsættes med vand, hydrogensulfid eller ammoniak. Den anvendte form forbindelsen III, det anvendte opløsningsmiddel, syre og base, fremgansmåde til udvælgelse af reaktionsbetingelserne, reaktionsbetingelserne og isoleringen af produktet kan være de samme som beskrevet i forbindelse med omdannelsen af II til I.

I praksis omdannes de fremstillede forbindelser V

NH

H N-C-SCEUCOCH~CONH- _r^S\.

PJ-CH2V <V>

Cr '

COOH

uden isolering in situ spontant til I eller om ønsket ved behandlingen beskrevet ovenfor.

Fremgangsmådevarianten (a) kan også gennemføres således, at en forbindelse med formlen wch2coch2conh-.—i^Snt (VI)

COOH

i hvilken W betyder halogen, især chlor eller brom, eller et salt eller en ester deraf, omsættes med thiourinstof til dannelse af en forbindelse med formlen (II), der derpå underkastes den ovenfor beskrevne ringslutning, idet der refereres til omsætningen af VI med thiourinstof kan forbindelsen VI underkastes reaktionen på fri form, og thiourinstof anvendes sædvanligvis på fri form eller i form af et salt eller thiolfunktionen heraf med et alkalimetal, f.eks. lithium, kalium eller natrium, eller ammonium. Reaktionen udføres sædvanligvis ved blanding af ækvimolære mængder af de to materialer med 1-2 mol ækvivalenter af en base i nærværelse af et opløsningsmiddel. Som egnede opløsningsmidler for denne reaktion kan der f.eks. nævnes vand, methanol, ethanol, acetone, dioxan, acetonitril, chloroform, ethylenchlorid, tetrahydrofuran, ethyl-alkalimetal, f.eks. lithium, kalium eller natrium, eller ammonium. Reaktionen udføres sædvanligvis ved blanding af ækvimolære mængder · af de to materialer med 1-2 mol ækvivalenter af en base i nærværelse af et opløsningsmiddel. Som egnede opløsningsmidler for denne reaktion kan der f.eks. nævnes vand, methanol, ethanol, acetone, dioxan, 8 151339 acetonitril, chloroform, ethylenchlorid, tetrahydrofuran, ethyl-acetat, dimethyIformamid, dimethylacetamid eller andre sædvanlige organiske opløsningsmidler der ikke forstyrrer reaktionen- Af disse opløsningsmidler kan hydrofile opløsningsmidler anvendes i blanding med vand. Som base kan der blandt andet nævnes alkalimetalhydroxider, f.eks. natriumhydroxid eller kaliumhydroxid, alkalimetalcarbonater, f.eks. natriumcarbonat eller kaliumcarbonat, alkalimetalhydrogen-carbonater, f.eks. natriumhydrogencarbonat, eller organiske tertiære aminer, f.eks. trimethylamin, triethylamin eller pyridin.

Da basen skal anvendes til neutralisering af carboxylgruppen i cephalosporinen og det hydrogenhalogenid, der frigøres i løbet af reaktionen, anvendes den fordelagtigt i en mængde på ca. 2 ækvivalenter, når thiourinstof anvendes på fri form, eller en mængde på ca. et ækvivalent, når thiourinstof anvendes i form af f.eks. et alkalimetalsalt. Der er ingen særlig begrænsning af reaktionstemperaturen, skønt reaktionen sædvanligvis foretages ved afkøling, . f.eks. ved -30°C til stuetemperatur. Reaktionen forløber sædvanligvis hurtigt, idet den afsluttes i løbet af 10 minutter, skønt det undertiden kan tage mere end 1/2 time at udføre reaktionen.

Hydrogenhalogeniderne eller deres salte, der frigøres under omsætningen af forbindelsen VI med thiourinstof kan virke som en effektiv dehydratiseringskatalysator ved ringslutningen af de dannede forbindelser II, hvorfor det andet trin ved denne udførelsesform sædvanligvis forløber uden yderligere behandling. Som et alternativ kan forbindelserne II isoleres og renses på i og for sig kendt måde og underkastes ringslutningsreaktionen som først beskrevet.

Fremgangsmådevariant (b) 7-[2-(2-Ethoxy-substitueret-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]--3-acetoxymethyl-cephalosporinderivatet med formlen IX; der er blandt forbindelserne opnået ved de ovenfor beskrevne processer, kan yderligere omsættes med en nitrogenholdig heterocyclisk thiol 3 med formlen R SH (X) til dannelse af 7-[2-(2-imino-4-thiazolin--4-yl)-acetamido]-cephalosporinderivater I. Forbindelserne med formlen IX kan være en isoleret forbindelse eller en reaktionsblanding fra de ovennævnte processer* Forbindelserne IX kan anvendes på fri form eller som saltet af den ved den ovenfor beskrevne fremgangsmåde anvendte base, idet eksempler på sådanne salte er alkalimetalsalte, f.eks. natrium eller kalium, eller organiske 151339 9 aminer, f.eks. triethylamin eller triethylamin. Den nitrogenholdige heterocycliske thiol X, der skal anvendes, underkastes reaktionen på fri form eller som et salt ved sin thiolfunktion med et alkalimetal, f.eks. lithium, natrium eller kalium.

Denne reaktion udføres sædvanligvis ved opvarmning til 40-80°C ved omtrent neutral værdi. Reaktionen udføres i et opløsningsmiddel, af hvilke foretrukne eksempler er vand eller vandige opløsningsmidler, f.eks. blandinger af vand med højt polære opløsningsmidler, der ikke vil forstyrrer reaktionen, f.eks. acetone, tetrahydrofuran, dimethylformamid, methanol, ethanol og dimethyl-sulfoxid.

Når forbindelsen IX anvendes på fri form, er det undertiden ønskeligt til reaktionssystemet at sætte en base, såsom natrium-hydrogencarbonat, kaliumhydrogencarbonat, natriumcarbonat eller kali-umcarbonat eller lignende til indstilling af pH-værdien til neutral.

Om nødvendigt kan der også anvendes en pufferopløsning. Reaktionstiden og andre betingelser for reaktionen skal bestemmes med reference til sådanne faktorer som typen af udgangsmaterialer og opløsningsmiddel, temperaturen osv. Cephalosporinderivaterne i, der fås på denne måde, kan isoleres og renses på konventionel måde som ovenfor beskrevet.

Fremgangsmådevariant (c).

Ved udførelsen af denne reaktion kan 4-carboxylgruppen i 7-aminoforbindelsen XII være på enhver form, der let kan omdannes til en fri carboxylgruppe ved behandling med alkali, syre eller enzym eller ved reduktion, eller i form af en ester, der er aktiv in vivo.

De tilsvarende salte med alkalimetaller, jordalkalimetaller organiske aminer osv., f.eks. natrium, kalium, magnesium, calcium, aluminium eller triethylamin, og de tilsvarende estere med β-methyl-sulfonylethyl, trimethylsilyl, dimethylsilenyl, benzhydryl, β,β,β-trichlorethylén, phenacyl, p-methoxybenzyl, p-nitrobenzyl eller methoxymethyl, kan f.eks. således nævnes. Carboxylsyreforbin-delsen XIII kan anvendes ved acyleringsreaktionen som fri syre eller det tilsvarende salt med natrium, kalium, calcium, trimethylamin, pyridin eller lignende, eller yderligere som reaktive derivater, såsom syrehalogenider, syreanhydrider, blandede syreanhydrider, cycliske carboxyanhydrider, aktive amider eller estere, af hvilke svrechlorid. alkvlcarbonat anhvdrid, aliohatisk carboxvlsvrean- 10 151339 hydrid eller syreazolid er de mest almindeligt anvendte. Som den aktive ester kan der f.eks. anvendes p-nitrophenylester, 2,4-dinitro-phenylester, pentachlorphenylester, N-hydroxysuccinoimidoylester, N-hydroxyphthalimidoylester osv. Som blandede syreanhydrider kan der f.eks. anvendes anhydrider med carbonatmonoestere (f.eks. monomethyl-carbonat eller mono-isobutylcarbonat). ellet halogensubstituerede eller ikke-substituerede lavere alkansyrer (f.eks. pivalinsyre eller trichlor-eddikesyre). Det er ønskeligt, at iminogruppen beskyttes før acyleringen med en let fjernelig beskyttende gruppe, f.eks. som proton, t-butoxycar-bonyl eller trichlorethoxycarbonylgruppe. Acyleringsreaktion kan fordelagtigt udføres i et opløsningsmiddel. Som opløsningsmiddel kan der anvendes sædvanlige opløsningsmidler og deres blandinger, hvis de ikke forstyrrer den foreliggende reaktion. Der kan derfor nævnes sådanne opløsningsmidler som vand, acetone, tetrahydrofuran, dioxan, acetonitril, chloroform, dichlormethan, dichlorethylen, pyridin, dimethylanilin eller dimethylsulfoxid. Skønt reaktionstemperaturen øjensynlig er uden betydning, udføres reaktionen sædvanligvis under afkøling eller ved stuetemperatur. Når carboxylsyrefor-bindelsen XIII anvendes i form af den frie syre eller et salt, anvendes der samtitig et passende kondenseringsmiddel. Kondenseringsmidlet omfatter blandt andet disubstituerede carbodiimider (f.eks.

N,N'-dicyclohexylcarbodiimid), azolidforbindelser (f.eks. Ν,Ν'-carbo-nylimidazol og Ν,Ν'-thionyldiimidazol) og sådanne dehydratiserings-midler som N-ethoxycarbonyl-2-ethoxy-l,2-dihydroquinolin, phosphor-oxychlorid eller alkoxyacetylen. Når der anvendes et sådant kondenseringsmiddel, forløber reaktionen over et reaktivt intermediat ved carboxylgruppen. Når reaktionen forløber under frigørelse af syren, sættes der fortrinsvis en base til reaktionssystemet for at neutralisere denne syre. Som baser, der er egnet til dette formål, kan der nævnes sædvanlig anvendte aliphatiske, aromatiske eller heterocycliske nitrogenholdige baser eller alkalimetalcarbonater og bicarbonater, f.eks. triethylamin, Ν,Ν-dimethylanilin, N-ethyl-morpholin, pyridin, collidin, 2,6-lutidin, natriumcarbonat, kaliumcarbonat, natriumhydrogencarbonat eller kaliumhydrogencar-bonat. Når der anvendes et dehydratiseringsmiddel, er det naturligvis fordelagtigt at udelukke vand fra opløsningsmidlet. Det er undertiden ønskeligt at udføre denne metode i en indifferent gas, f.eks. nitrogengas for at udelukke fugtighed.

Den dannede forbindelse I underkastes om nødvendigt en procedure til fjernelse af beskyttelsesgruppen, og derpå en sæd- 151339' vanlig oparbejdning til isolering og rensning på lignende måde som beskrevet ovenfor. Når iminogruppen i udgangsforbindelsen XII beskyttes med en proton, der leveres fra en syre, fås der den frie iminoforbindelse I ved kun at ændre pH-værdien til den alkaliske side under rensningsprocessen. Når iminogruppen beskyttes med en acylgruppe, anvendes der en sædvanlig deacyleringsprocedure for gruppen, f.eks. syrebehandling i tilfælde af formyl, amyloxy-carbonyl eller tert.butoxycarbonylgruppe, eller reduktion i forbindelse med en 2,2,2-trichlorethoxycarbonylgruppe, en benzyloxycarbonyl-gruppe eller en p-nitrobenzyloxycarbonylgruppe, eller en alkalibehandling i tilfælde af en 2-methylsulfonyl-ethoxycarbonylgruppe.

Fremstilling af udgangsmaterialerne anvendt ved varianterne (a)-(c).

De 3-nitrogenholdige heterocycliske thiomethylforbindelser III, VI og XII fremstilles ved følgende reaktioner: nh2-i—rSsi (XII)

COOH

WCH2COCH2COW (XIV)

V

wch 9coch 9conh-_ Δ Δ I (vi) o>—n^J-ch2y

COOH

MSCN (XV)

V

NCSCH2COCH2CONH- -^SN. (III) i—U-ch2y O' '

COOH

hvor M betyder et alkalimetal, og de andre symboler har den ovenfor angivne betydninger.

De nitrogenholdige heterocycliske thiolforbindelser X omfatter hidtil ukendte forbindelser, der ikke selv er beskrevet i 151339 12 litteraturen, og sådanne hidtil ukendte forbindelser fremstilles ved en i og for sig kendt heterocyclisk syntese beskrevet f.eks. i kapitel 5 fra Heterocyclic Chemistry (A.R. Katritzky og J.M. Logwski, publiseret af John Wiley & Søn, 1960) eller ved i og for sig kendte modificeringsreaktioner på let eller kommerciel tilgængelige nitrogen-holdige heterocycliske thioler.

Aminforbindelserne XII kan fremstilles ved en deacylering af reaktionsproduktet af cephalosporin C og en nitrogenholdig heterocyclisk thiol X eller ved omsætning af en 7-beskyttet aminocephalo-sporansyre med en nitrogenholdig heterocyclisk thiol X og fjernelse af beskyttelsesgruppen fra reaktionsproduktet.

Struktur og nomenclatur

Forbindelserne I findes på følgende to tautomere former:

"VS

HN_!| -CH2CONH-. ^Ss% (A)

L_N^J-CH2Y

c> '

COOH

A

Y

NH2V% N ll-CH2CONH-j-iB)

j-^“CH2Y

<f COOH

hvor Y har de ovenfor angivne betydninger.

De aktuelle fysiske data af sådanne forbindelser viser, at der eksisterer en ligevægtstilstand mellem de to former, selv hvis ligevægten ligger forskudt mod oven af fordelingen af den intra-molekylære association vist i det følgende.

-CH,-C-NH -,-

_H··......I ^— N^j-CH2Y

NH COOH

i3 151339 ;

De tautomere isomere er alle omfattet af opfindelsen.

7- [2- (2-imino-4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-cephalosporin-derivater I fremstillet på denne måde har et bredt og potent anti-mikrobielt spektrum, idet de viser aktivitet mod gramnegative og grampositive bakterier og især mod sådanne gramnegative bakterier som Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris og Proteus morganii, idet disse forbindelser I er mere virksomme end hidtil kendte cephalosporiner. Disse forbindelser giver således en glimrende terapeutisk effekt ved behandling af infektioner med disse bakterier hos mennesker og dyr.

Ligesom kendte cephalosporiner kan de her omhandlede forbindelser indgives oralt eller parenteralt i form af pulvere eller opløsninger eller suspensioner i blanding med et fysiologisk acceptabelt grundlag eller hjælpestof i overensstemmelse med accepterede farmaceutiske procedurer.

Især ved behandlingen af forskellige humane sygdomme forårsaget af de ovennævnte bakterier, suppurative sygdomme, infektioner af åndedrætsorganer, galdegangsinfektioner, infektioner af tarme, urinvejsinfektioner og obstetriske og gynækologiske infektioner, indgives de her omhandlede forbindelser, f.eks. natrium-7-[2-(2-amino-thiazol-4-yl)-acetamido]-3-(1,3,4-thiadiazol-2-yl)-thiomethyl-3--cephem-4-carboxylat, natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-acetamido]-3--(l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat, natrium--7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-acetamido]-3-(5-methyl-l,3,4-thiadiazol--2-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat, natrium-7-[2-(2-aminothia-zol-4-yl)-acetamido]-3-[2-(2-hydroxyethylthio)-1,3,4-thiadiazol-5-yl]--thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat, natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4--yl)-acetamido]-3-[2-(N,N-dimethylcarbamoylmethyl)-1,3,4-thiadia-zol-5-yl]-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat, natrium-7-[2-(2-amino-thiazol-4-yl)-acetamido]-3-[2-(2-acetoxyethylthio)-1,3,4-thiadiazol--5-yl]-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat, dinatrium-7-[2-(2-amino-thiazol-4-yl)-acetamido]-3-(2-carboxymethyl-l,3,4-thiadiåzol-5-yl)--thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat, natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4--yl)-acetamido]-3-(2-carbamoylmethyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thio-methyl-3-cephem-4-carboxylat og natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)--acetamido]-3-(2-carbamoylmethylthio-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thio-methyl-3-cephem-4-carboxylat, hver ønskeligt parenteralt (ikke--oralt) i en daglig dosis på ca. 5-20 mg/kg legemsvægt i 3-4-delte doser pr. dag.

14 b * 339

Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse illustreres yderligere ved hjælp af efterfølgende eksempler. I disse eksempler er harpikser benævnt "Amberlite" produkter fremstillet af Rohm & Haas Co. i USA. Alle temperaturer er ukorrigerede, og procenter er alle vægtprocenter, hvis intet andet er angivet. NMR-spektra måles under anvendelse af en Varian Model HA 100 (100 MHz) eller T60 (60 MHz)-spektrofotometer med tetramethylsilan som indre eller ydre reference, og alle <f-værdierne er i ppm. Symbolet s betyder en singlet, d betyder en dublet, t betyder en triplet, q betyder en kvartet, m betyder en multiplet, og J betyder en koblingskonstant.

Eksempel 1

Fremstilling af natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-acetamidoj-3--acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylat.

I en blanding af 53 ml vand og 26,4 ml tetrahydrofuran opløses 0,442 g thiourinstof og 0,889 g natriumhydrogencarbonat. Derpå tilsættes der lidt efter lidt 2,3 g 7-(4-brom-3-oxobutyrylamido)-3--acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre og opløses. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 30 minutter, hvorpå den koncentreres under formindsket tryk til fjernelse af tetrahydrofuran og derpå til endeligt rumfang på 20 ml. Remanensen chromatograferes på en kolonne af polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) og fremkaldes med vand. De fraktioner, der indeholder det ønskede produkt, (med god absorption af ultraviolet lys ved 254 ταμ) forenes og frysetørres. Proceduren giver den ovennævnte forbindelse et udbytte på 1,305 g (52,6%).

IR(cm-1, KBr): 1767 U^piax(£ i vand): 256 nm(l,35 x 10^) NMR(<S i D20) : 2,15 (s, CH-jCO), 3,39 & 3,69(ABq, Jl8Hz, 2-CH2), 3,62 (s, CH2CO), 4,75 & 4,94(ABq, 1 J13Hz, 3-CH2), 5,15(d, J5Hz, 6-H), 5,71(d, J5Hz, 7-H), 6,52(s, thiazol 5-H)

Elementær analyse: Beregnet for C15H15N4°6S2Na’2H20: I

C 38,29; H 4,07; N 11,91

Fundet: C 38,41; H 3,90; N 11,72 j i .. 15l?3f

Id

Antibakterielt spektrum tyug/ml, agarfortyndingsmetode)

Mikroorganisme- Produkt fra _ , , .,. _ , , .

stamme eksempel Cephaloridm Cephazolin S. aureus 209P <0,78 0,05 0,1 S. aureus 1840 1,56 0,39 1,56 E. coli NIHJ JC-2 1,56 6,25 1,56 K pneumoniae DT <0,78 3,125 1,56 P. vulgaris Eb-57 <0,78 >100 50

Eksempel 2

Fremstilling af 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)acetamido]-3--acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

I en blanding af 80 ml vand og 40 ml tetrahydrofuran opløses 0,602 g thiourinstof og 0,664 g natriumhydrogencarbonat. Derpå tilsættes der lidt efter lidt og opløses 3,085 g 7-(4-chlor-3-oxobutyrylamido)--3-acetoxymethyl-3~cephem-4-carboxylsyre. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 1 time, hvorpå tetrahydrofuranen afdestilleres under formindsket tryk. Remanensen indstilles ved stuetemperatur, og de dannede krystaller samles ved filtrering. Filtratet koncentreres yderligere og henstilles natten over, hvorpå der opnås yderligere krystaller. Disse krystaller samles og kombineres med de ovennævnte krystaller. Den beskrevne procedure giver 2,703 g (83¾) af den ovennævnte forbindelse.

IR(cm-1, KBr): 1776 UVA max(£i vand): 256 nm(l,35 x 10^) NMR(6 i dg-DMSO): 2,01(s, CH3CO), 3,38 (s, CH2C0), 3,40 & 3,63 (ABq, J18Hz, 2-CH2), 4,68 & 4,98 (ABq, J13HZ, 3-CH2), 5,06(d, J5Hz, 6-H), 5,68 (dd, J5 & 8Hz, 7-H), 6,23 (s, thiazol 5-H), 6,90 (bred s, NH2), 8,82(d, J8Hz, CONH), 9,20 (bred s, COOH) 151339 16

Eksempel 3

Fremstilling af natrium-«?-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-acet-amido]-3-(ly 3,4-thiadiazol-2-yl)-thiomethyl-3~cephem-4-carboxylat.

I 20 ml af en phosphatpuffer med en pH-værdi på 6,4 opløses 0,47 g natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-acetamido]-3-acetoxymethyl--3-cephem-4-carboxylat og 0,14 g l,3,4-thiadiazol-2-thiol, og opløsningen omrøres under opvarmning ved 55-60°c i 15 timer. Efter afkøling tilsættes 0,084 g natriumhydrogencarbonat til reaktionsblandingen. Blandingen chromatograferes derpå på en kolonne af polystyrenharpiks (amberlit XAD-2) og fremkaldes med vand. De fraktioner, der indeholder det ønskede produkt, forenes og frysetørres. Den beskrevne procedure giver den ovennævnte forbindelse i et udbytte på 0,096 g.

IR(cm-1, KBr): 1763 UVAmax(£ i vand): 262 nm(l,57 x 10^) NMR (S i D20): 3,41 & 3,77(ABq, jl8Hz,2-CH2), 3,60 (s, CH2CO), 4,09 & 4,54(ABq, Jl3Hz, 3-CH2), 5,08 (d, J5Hz, 6-H), 5,65 (d, J5Hz, 7-H) , 6,48 (s, thiazol 5-H), 9,42(s, thiadiazol 5-H) .

Elementær analyse: Beregnet for C15H13Ng04S4Na*3,5H20 C 32,43; H 3,63; N 15,13;

Fundet: C 32,32; H 3,05; N 14,36

Antibakterielt spektrum _Qig/ml, agar fortyndingsmetode)_

Produkt fra mikroorganisme- dette stamme eksempel Cephaloridin Cephazolin S. aureus 209 P <0,78 0,05 0,1 S. aureus 1840 <0,78 0,39 1,56 E. coli 0-111 <0,78 3,125 1,56 K. pneumoniae DT <0,78 3,125 1,56 P. vulgaris Eb-58 <0,78 12,5 6,25 „ 151339

Eksempel 4

Fremstilling af natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-acet-amido]-3-(1,3,4-thiadiazol-2-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat.

I en blanding af 10 ml vand og 10 ml tetrahydrofuran opløses 0,076 g thiourinstof og 0,84 g natriumhydrogencarbonat. Derpå tilsættes der og opløses 0,449 g 7-(4-chlor-3-oxobutyrylamido)-3--(1,3,4-thiadiazol-2-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre. Reaktionsblandingen henstilles natten over ved stuetemperatur, hvorpå den koncentreres under formindsket tryk til fjernelse af tetrahydrofuran.

Til remanensen sættes 0,16 g natriumhydrogencarbonat, og blandingen chromatograferes på en kolonne af polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) under anvendelse af vand som fremkalderopløsningsmiddel. De fraktioner, der indeholder det ønskede produkt, forenes og frysetørres. Proceduren giver den ovennævnte forbindelse, der stemmer godt overens med produktet fra eksempel 13 i IR- og NMR-spektra. Udbyttet er 0,122 g.

Eksempel 5

Fremstilling af natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-acetamido]--3-(l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat.

151339 18

Antibakterielt spektrum (pg/ml, agar fortyndingsmetode).

Produkt fra mikroorganisme- dette stamme......eksempel..... Cephaloridin Cephazolin S. aureus 209 P 0,39 0,05 0,1 S. aureus 1840 0,78 0,39 1,56 E. coli NIHJ JC-2 0,39 6,25 1,56 E. coli 0-111 0,2 3,125 1,56 K. pneumoniae DT ^.0,1 3,125 1,56 P. vulgaris Eb 58 0,39 12,5 6,25 P. morganii Eb 53 3,125 >100 100

Eksempel 6

I en blanding af 10 ml vand og 10 ml tetrahydrofuran opløses 0,076 g thiourinstof og 0,084 g natriumhydrogencarbonat. Derpå tilsættes der og opløses 0,447 g pulverformigt 7-(4-chlor-3-oxobutyrylamido)-3--(l-methyltetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre. Reaktionsblandingen henstilles ved stuetemperatur natten over, hvorpå den koncentreres under formindsket tryk til fjernelse af tetrahydrofuran. Til remanensen sættes 0,16 g natriumhydrogencarbonat, og den dannede blanding chromatograferes på en kolonne af polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) og fremkaldes med vand. De fraktioner, der indeholder det ønskede produkt forenes og frysetørres. Frysetørring giver den ovennævnte forbindelse, der stemmer godt overens med produktet fra eksempel 16 i IR og NMR-spektre. Udbyttet er 0,182 g.

Eksempel 7

Fremstilling af natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-acet-amido]-3-(5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-yl)-thiomethyl-3-cephem-4--carboxylat. 1 20 ml af en phosphatpuffer med en pH-værdi på 6,4 opløses 151339 19 -3-cephem-4-carboxylat, 0,157 g 5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-thiol og 0,084 g natriumhydrogencarbonat, og den blandede opløsning omrøres under opvarmning til ca. 55°C i 15 timer. Efter afkøling chromatografe-res blandingen på en kolonne af polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) og fremkaldes med vand. De fraktioner, der indeholder det ønskede produkt, forenes og frysetørres. Den beskrevne procedure giver den ovennævnte forbindelse et udbytte på 0,118 g.

IR(cm”1, KBr)i 1763 NMR (δ i D20)ϊ 2,76(s, thiadiazol 5-CH3), 3,42 & 3,79 (ABq, J18HZ, 2-CH2), 3,62(s, CH2CO), 4,02 & 4,51 (ABq, J14HZ, 3-CH2), 5,11 (d, J5Hz, 6-H), 5,68(d, J5Hz, 7-H), 6,50(s, thiazol 5-H)

Elementær analyse: Beregnet for C^gH^3Ng0ijS^Na*2.5H20 C 34,84; H 3,65; N 15,23 Fundet: C 34,87; H 3,47; N 14,82

Eksempel 8

Fremstilling af natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-acetamido]--3-(5-methyl-l,3,4-thiadiazol-2-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat.

I en blanding af 10 ml vand og 10 ml tetrahydrofuran opløses 0,076 g thiourinstof og 0,084 g natriumhydrogencarbonat. Derpå tilsættes der og opløses 0,463 g 7-(4-chlor-3-oxobutyrylamido)-3-(5--methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre. Blandingen henstilles ved stuetemperatur natten over, hvorpå den koncentreres under formindsket tryk til fjernelse af tetrahydrofuran. Til remanensen sættes 0,16 g natriumhydrogencarbonat, og blandingen chroma-tograferes på en kolonne af polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) og fremkaldes med vand. De fraktioner der indeholder det ønskede produkt, forenes og frysetørres. Proceduren giver den ovennævnte forbindelse, der stemmer godt overens med produktet fra eksempel 7 i IR- og NMR-spektre.

Eksempel 9

Forbindelserne opstillet i tabellerne I til xil fremstilles ved én eller flere af de følgende metoder 1-5.

151339 20

Metode 1.

Til en blandet opløsning af 0,304 g (4 mmol) thiourinstof, 2 ml tetrahydrofuran og 1 ml vand sættes dråbevis en opløsning af 2 mmol 7-(4-chlor eller brom)-3-oxobutyrylamido)-3-(nitrogenholdig heterocyclisk) thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre (VI) (2 mmol) i 3 ml tetrahydrofuran o'g samtidig en opløsning af 0,18 g (2,2 mmol) natriumhydrogenearbonat i 2 ml vand efterfulgt af omrøring i 3 timer. Reaktionsblandingen underkastes en destillation af det organiske opløsningsmiddel, og remanensen opløses i 4 ml 0,5 N vandig opløsning af natriumhydroxid. Opløsningen chromatograferes på en kolonne af polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) og fremkaldes ved gradient-eluering, idet der startes med vand og sluttes med 40% methanol.

De fraktioner, der indeholder det ønskede produkt, samles og frysetørres til dannelse af natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)acetamido]--3-(nitrogenholdig heterocyclisk)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat (I).

Metode 2.

En opløsning af 0,824 g (2 mmol) 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-acetamido]-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre, 2,2 mmol af en nitrogenholdig heterocyclisk thiol (X) og 0,336 g (4 mmol) natrium-hydrogencarbonat opløses i 8 ml vand (når der ikke opnås en homogen opløsning, tilsættes der 4 ml tetrahydrofuran) og omrøres i 6-8 timer under opvarmning til 60-65°C. Efter afkøling underkastes reaktionsblandingen en destillering af tetrahydrofuranen under sugning, og remanensen chromatograferes på en kolonne af polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2), efterfulgt af en fremkaldelse ved gradientelue-ring, idet der gås fra vand til 40% methanol. De fraktioner, der indeholder det ønskede produkt, forenes og frysetørres til dannelse af natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)acetamido]-3-(nitrogenholdig heterocyclisk)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat (I).

Metode 3.

I 40 ml af en phosphatpuffer med en pH-værdi på 6,4 opløses 0,824 g (2 mmol) 7-[2- (2-aminothiazol-4-yl)-acetamido]-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carboxylsyre, 2,2 mmol af en nitrogenholdig hetero-cyclisk thiol (X) og 0,336 g (4 mmol) natriumhydrogencarbonat, og opløsningen omrøres i 7-8 timer under opvarmning ved 60-65°C. Reaktionsblandingen koncentreres til ca. 20 ml under formindsket tryk, og koncentratet chromatograferes på en kolonne af polystyrenharpiks 151339 21 (Amberlite XAD-2) efterfulgt af fremkaldning med vand, 5% ethanol og 10% ethanol i denne rækkefølge. De fraktioner, der indeholder det ønskede produkt, forenes og frysetørres til dannelse af na-trium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)acetamido]-3-(nitrogenholdig hetero-cyclisk)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat (I).

Metode 4.

En blandet opløsning af 0,824 g (2 mmol) 7-[2-(2-aminothiazol-4--yl)acetamido]-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre, 0,596 g (2 mmol) 2-(2-benzoyloxyethylthio)-1,3,4-thiadiazol-5-thiol, 0,336 g (4 mmol) natriumhydrogencarbonat, 5 ml tetrahydrofuran og 10 ml vand opvarmes til 65°C i 5 timer. Reaktionsopløsningen koncentreres til tørhed, og remanensen opløses i 4 ml acetonitril. Opløsningen chroma-tograferes på en kolonne af silicagel og fremkaldes med 5% vandig opløsning af acetonitril og derpå 15% vandig opløsning af acetonitril. De fraktioner, der indeholder det ønskede produkt, forenes og koncentreres til dannelse af krystaller, der samles ved filtrering, til dannelse af 0,43 g 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)acetamido]-3-[2--(2-benzoyloxyethylthio)-1,3,4-thiadiazol-5-ylJ thiomethyl-3-cephem--4-carboxylsyre.

Metode 5.

(1) I 10 ml dimethylformamid opløses 0,4 g (2 mmol) 2-(2-amino-thiazol-4-yl)-eddikesyre-hydrochlorid, 0,25 g (2,2 mmol) N-hydroxy-succinimid og 0,412 g (2 mmol) dicyclohexylcarbodiimid og opløsningen henstilles ved stuetemperatur i 3 timer. Reaktionsblandingen underkastes en filtrering ved sugning til fjernelse af bundfaldet af Ν,Ν'-dicyclohexylurinstof.

(2) Filtratet sættes på en gang til en opløsning af 2 mmol 7--aminocephalosporansyre eller en 7-amino-3-(nitrogenholdig hetero-cyclisk)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre (XII) og 0,404 g (4 mmol) triethylamin opløst i 20 ml dichlormethan, og den blandede opløsning omrøres i 24 timer ved stuetemperatur. Opløsningsmidlet sidestilleres under formindsket tryk, og remanensen indstilles til en pH-værdi på 7 ved tilsætning af 10% vandig opløsning af natriumhydrogencar-bonat. Den dannede opløsning chromatograferes på en kolonne af polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) og fremkaldes med vand og derpå med 5% ethanol. De fraktioner, der indeholder det ønskede produkt, forenes og frysetørres til dannelse af det tilsvarende natrium-7-[2-(2- -ami H a — 4—·ν1 1 afotami rtn 1 — "3— (arO-t-nwme-Hivl al 1 ar rH hT*r>rranhnl rH et 151339

Tabel I

mY 11

HN--, S

CH CONH-1—f N N N

>1^.ch2sAs;Lh=

COOM

For- bin- UV X max IR Meto- delse (£ i (KBr) de nr.__R_M vand) cm-·*-_NMR S ppm_nr.

(60MHz, i D20): 3,4--3,7(m,2xCH2), 3,9-4,31-(ABq,J14Hz,3-CH2), 5,08- 1 -SH Na - 1760 (d,J5Hz,6-H), 5,64(d,- 2 J,J5Hz,7-H), 6,50 (s,-thiazol 5-H).

(60MHz, i D20) : 2,70-(s,CH ), 3,45-3,70(m,-2xCH27, 3,95-4,34(ABq, 2 -SCH Na ~ 1760 J14Hz,3-CH2), 5,10(d, 2 J5Hz,6-H), 5,70(d,J5Hz,-7-H), 6,55(s,thiazol 5-H) .

(100MHz, i D20): 2,74-(m,4H), 3,53 & 3,87(ABq, J18Hz,2-CH2), 3,70(s, @ f—y 262 nm CH2CO) , 3,88(m,4H), 1 3 -CH N O Q (1,53 1769 4,15(s,=NCH2), 4,20 & —/ xlO4) 4,59 (ABq,J13Hz,3-CH2) , 3 H 5,20(d,J5Hz,6-H), 5,76- (d,J5Hz,7-H), 6,58(s, thiazol 5-H).

(100MHz, i D20): 3,44 & 3,88(ABq,J18Hz,~ 260nm 2-CH2), 3,70(s,CH2CO), 1 4 -NH Na (1,61 1760 3,89 & 4,51(ABq,Jl3Hz,- * xlO4) 3-CH2), 5,19(d,J5Hz,6-H), 3 5,75(d,J5Hz,7-H), 6,60-(s,thiazol 5-H).

151339 '

Tabel I (fortsat,)

For- bin- UvA.max IR Meto- delse 5 (£ i (KBr) de nr. R M vand) cm “1 NMR 0 ppm nr.

(100MHz, i D20): 3,47 & 3,88(ABq, J18Hz, 2-CH2), 3,71(s,CH2CO), 261 nm 3,89(s,OCH3), 3,90 & 1 5 -NHCOOCH Na (1,61 1760 4,51(ABq,J13Hz,3-CH2), xlO4) 5,19(d,J5Hz,6-H), 5,75- 3 (d,J5Hz,7-H), 6,59(s,-thiazol 5-H).

(60MHz, i D20): 3,4-3,8(m,3xCH2), 3,95-260nm (6,J6Hz,CH20), 4,00 & 1 6 -SCH CH OH Na (1,65 1765 4,40(ABq,Jl4Hz,3-CH2), Å 1 xlO4) 5,05(d,J5Hz,6-H), 5,62- 2 (d,J5Hz,7-H), 6,52(s,-thiazol 5-H).

(60MHz, i D20): 2,95(s,2xCH3), 3,40- 261nm -4,10(m,4xCH2), 5,02(d, 1 7 -NHCOCH„N(CH ) Na (1,62 1760 J5Hz,6-H), 5,59(d,J5Hz, xlO4) 7-H), 6,42(s,thiazol 2 5-H).

(100MHz, i D20): 3,12 & 3,28(hver s,-N(CH3)2), 3,54 & 3,89- 260nm (ABq,J18Hz,2-CH2) , 3,72- 1 8 -CH CON(CH ) Na (1,48 1757 (s,CH2CO), 4,20 & 4,61- 1 6 xlO4) (ABq,J14Hz,3-CH2), 5,22- 3 (d,J5Hz,6-H), 5,78(d,-J5Hz,7-H), 6,61(s,thiazol 5-H) .

(60MHz, i D20): 2,74(s,2xCH3), 3,2-3,8-260nm (m,4xCH2), 4,14 & 4,54- 1 9 -SCH CH N(CH ) Na (1,54 1768 (ABq,J14HZ,3-CH2), 5,00- Z 1 ά xlO4) (d,J5Hz,6-H), 5,56(d,- 2 J5Hz,7-H), 6,23(s,thiazol 5-H).

i 1% (60MHz, i D20-dg-DMSO):

NaHCO,: 1772 3,3-3,8(m,3xCH2), 4,12 233nm & 4,52(ABq,Jl4Hz,3-CH2), 10 -SCH CH OCOC Ης H (2,14 4,58(t,J6Hz,CH20), 5,02- 4 1 xlO4) (d,J5Hz,6-H), 5,60(d,- 260nm J5Hz,7-H), 6,28(s,thia- ^l64) zol 5-H), 7,4-7,9(m,5H).

24 *51339

Tabel I (fortsat)

Forbin- UvXmax IR Meto- delse <- (£ i (KBr) de nr. R3 M vand) cm-1 NMR S ppm nr.

(60MHz, i D20): 2,00(s,CH3CO), 3,2-3,7-260nm (m,6H), 4,0-4,4(m,4H), 11 -SCH CH OCOCH Na (1,68 1763 5,00(d,J5Hz,6-H), 5,57- 2 xlO4) (d,J5Hz,7-H), 6,46(s,- thiazol 5-H).

(60MHz, i D20): 3,0-3,8(m,8H), 4,00 & 261nm 4,27 (ABq, J13Hz, 3-0¾) , 12 -SCH CH-SO Na Na (1,70 1763 5,03 (d, J5Hz ,6-H) , 5,58- 2 xlO4) (d,J5Hz,7-H), 6,48(s,- thiazol 5-H).

(60MHz, i D20): l,23(t,J7Hz,CH3CH2), 261nm 3,4-4,5(m,10H), 5,04(d- 1 13 -SCH COOC H Na (1,75 1763 J5Hz,6-H), 5,64(d,J5Hz, 2 . 1 b xlO4) 7-H), 6,45(s,thiazol 5- H) .

(60MHz, i D20): /—\ 260nm 3,3-4,5(m,16H), 5,07- 1 14 -SCH CON O Na (1,73 1763 (d,J5Hz,6-H), 5,63(d,- 2 ^—' xlO4) J5Hz,7-H), 6,48(s,thia- zol 5-H).

(60MHz, i D20): 3,36 & 3,76(ABq,J16HZ,-261nm 2-CH2), 3,60(s,CH2CON), 1 15 -SCH COONa Na (1,67 1763 3,96 & 4,40(ABq,J14Hz, J xlO4) 3-CH2), 5,08(d,J5Hz,- 2 6- H), 5,63(d,J5Hz,7-H), 6,48(s,thiazol 5-H).

(60MHz, i D20): 3,49 & 3,69(ABq,J18Hz,-261nm 2-CH2), 3,59(s,CH2CO), 1 16 -SCH CONH Na (1,69 1768 4,04(s,SCH2CO), 4,00 & xlO4) 4,42(ABq,Jl4Hz,3-CH2), 3 5,03(d,J5Hz,6-H), 5,60-(d,J5Hz,7-H), 6,47(s,-thiazol 5-H).

(60MHz, i D20): 3,3-3,95(m,8H), 4,32- 260nm (ABq,3-CH2), 4,97(d,- 1 17 -NHCH-CH OH Na (1,63 1765 J5Hz,6-H), 5,53(d,J5Hz,- 2 xlO4) 7-H), 6,40(s,thiazol 5-H) .

25 151339

Tabel I fortsat

Forbin- UVΛ max IR Meto- delse (£ i (KBr) de nr. R M vand) cm-! NMR S ppm nr.

(60MHz, i D20): 2,95(s,6H), 3,55(m,6H), 255nm 3,95(ABq,2-CH2), 4,35- 1 18 -NHCH CH N(CH,)_ Na (2,12 1760 (ABq,3-CH2), 5,02(d,- 11 KlO4) J5Hz,6-H), 5,55(d,- 2 J5Hz,7-H), 6,38(s,thia-zol 5-H).

(100MHz, i D20): 3,56 & 3,92 (ABq, J18Hz,-262nm 2-CH2), 3,76(s,CH2CO), 1 .19 -CH2COONa Na (1,76 1761 4,16(s,CH2C0), 4,20 &

KlO4) 4,62(ABq,J13Hz,3-CH2), 3 5,24(d,J5Hz,6-H) , 5,79-(d,J5Hz,7-H) , 6,65 (s,-thiazol 5-H) .

(100MHz, i D20): 3,52 & 3,87(ABq,J18Hz,-261nm 2-CH2), 3,70(s,CH2CO), 1 20 -CH_COOCH_ Na (1,64 1757 3,91(s,OCH3), 4,18 & 2 xlO4) 4,58(ABq,Jl3Hz,3-CH2), 3 5,20(d,J5Hz,6-H) , 5,75- ! (d,J5Hz,7-H), 6,60(s-thiazol 5-H). > -1-----i- (100MHz, i D20): 3,51 & 3,86(ABq,Jl8Hz,- | 260nm 2-CH2), 3,70(s,CH2CO), j 1 21 j-CH CONH Na (1,64 1762 4,18 & 4,57 (ABq,3-CH2),- ( I 2 2 xlO4) 5,19 (d,J5Hz,6-H) , 5,75- ' 3 (d,J5Hz,7-H), 6,58(s- .

thiazol 5-H). j ------i- (60MHz, i D20): 3,23(t,J6Hz,CH2S03), 260nm 3,5-3,7(m,3xCH2) , 4,05 ! 22 -NHCH CH SO^Na Na (1,67 1760 & 4,45(ABq,Jl3Hz,3- I 2 xl04) -CH2), 5,04{d,J5Hz,6- j -H), 5,58(d,J5Hz,7-H), j 6,48(s,thiazol 5-H). j t ___ ^_____ > i i (60MHz, i D20): ; 2,40(s,CH3), 3,4-3,8- : 260nm (m,2xCH2), 4,05 & 4,35- ! 23 -SCH COCH. Na (1,58 1765 (ABq,Jl4Hz,3-CH2) , \ 2 2 xlO4) 4,30(s,CH2CO), 5,08- j (d,J5Hz,6-H), 5,62(d,- ; J5Hz,7-H), 6,42(s,- ; 26 151339

Tabel I fortsat

Forbin- UvAmax IR Meto- delse (gi (KBr) , de nr. R"3 M vand) cm~l NMR^ppm nr.

' I - — — (100MHz, i D2O): 2,24(s,CH3S), 3,53 & 3,85(ABq,Jl8Hz,2-CH2), 262nm 3,72(s,CH2CO), 4,21- 1 24 -CH2SCH- Na (1,63 1762 (s,CH2S), 4,25 & 4,59- xlO4) (ABq,Jl4Hz,3-CH2), 5,20- 3 (d,J5Hz,6-H), 5,78(d,-J5Hz,7-H), 6,58(s,thi-azol 5-H).

(100MHz, i D20): 3,32(s,CH3S02), 3,53 & 261nm 3,84(ABq,Jl8Hz,2-CH2), 1 25 -CH_S02CH Na (1,64 1765 3,70(s,CH2CO), 4,23 & 2 J xlO4) 4,59 (ABq,J14Hz,3-CH2), 3 5,19 & 5,74 (hver d, J5Hz,6 & 7-H), 6,58(s,-thiazol H).

(100MHz, i D20): /—^ 262nm 3,4-4,4(m,12H), 5,21- 1 26 -CH2CON O Na (1,65 1770 (d,J5Hz,6-H), 5,77(d,- 2 N—/ xlO4) J5Hz,7-H), 6,60(s,thi- 3 azol 5-H).

(60MHz, i D20): 260nm 2,95 & 3,14(hver s,- 1 27 -SCH CON(CH ) ! Na (1,70 1765 j 2xCH3), 3,5-4,4(m,- 6 i xlO4) : 4xCH2), 5,04(d,J5Hz,- j 6-H) , 5,64(d,J5Hz,7-H) , 2 j j 6,45(s,thiazol 5-H).

__:---!—!-- 27 1 5 1 3 3 9

Tabel II

“VS

LX

CELCONH---N-N

J=V*v-U

(f ' '6

COOM R

Forbin- UVA IR Meto- delse (6 iaX (KBr) de nr. R M vand) cm-1 NMR <f ppm nr (60MHz, i DO); 2,79(s,2xOO , 1 261nm 3,5-4,8(m,5xCH2), 28 -CH -CH„N(CH ) Na (1,71 1765 5,09(d,J5Hz,6-H), 2 1 xlO4) 5,65(d,J5Hz,7-H), 6,48(s,thiazol 5-H).

(100MHz, i D20): 3,52 & 3,84(ABq,-J18Hz,2-CH2), 1 259nm 3,72(s,CH CO), 29 -CH CONH Na (1,48 1765 4,24 & 4,49(ABq,- 3 1 1 xlO4) Jl3Hz,3-CH2), 5,20- (d,J5Hz,6-H), 5,42-(s,NCH CO), 5,76-(d,J5Hz,7-H), 6,62-(s,thiazol 5H).

28 151339

Tabel III

Ό

ο COOM

Forbin- UV^ __ jr Meto- delse ^ (Θ i (KBr) de nr. R M vand) cm~l NMR tTppm nr.

(100MHz, i D20): 3.44 & 3,83 (ABq,-J18Hz,2-CH.), 3,69-(s,CH CO) /3,76 (s,-CH2COy, 3,99 & 4,57- 259nm (ABq,Jl4Hz, 3-CH2), 1 30 -CH.COONa Na (1,66 1763 5,15(d,J5Hz,6-H), 5,72- 2 xlO4) ! (d,J5Hz,7-H), 6,58 (s,- 3 7-stillet thiazol 5-H) 7,35(s,3-stillet thiazol 5-H).

Tabel IV

Ύ\

^CH CONH-._/ N N-N

0 C00M CH3

Forbin— UVA IR Meto- delse (6 T* (KBr) de nr. R° M vand) cm-l NMR cTppm nr.

(100MHz, i DO): 3.45 & 3,95 TABq, J18Hz,2-CH2), 3,57 257nm (s,N-CH3), 3,68 & 31 -NH Na (1,43 1758 4,36(ABq,J13Hz, 3 2 XlO4) 3-CH2), 3,70(s, CH2CO), 5,17(d, J5Hz,6-H), 5,72(d, J5Hz,7-H), 6,60(s, thiazol 5-H).

29 151339

Tabel V

^ CH^CONH--] N 'I

f-N\^_CH2 θ'

COOM

Forbin- IR Metode Ise g (KBr) de nr. R M cm~l NMR <fppm nr.

(ΙΟΟΜΗζ,ϊ DO): 2,04(s,CH3), 3,43 & 3,74(ABq,J18Hz,2-CH ), 3,66(s,CH CO), 3,91 & 4,572 32 4-NH ,5-CH Na 1758 (ABq,J14Hz,3-CH2), 5,12(d,J5Hz, 3 6 6-H), 5,73(d,J5Hz,7-H), 6,52 (s,- thiazol 5-H), 7,79(s, pyrimidin-H) (ΙΟΟΜΗζ,ϊ D20): 3,52 & 3,80 (ABq,J18Hz,2-CH ), 3,69 (s,- 33 4-NH ,6-OH Na 1758 CH2CO), 4,10 & 4,59(ABq,3-CH), 3 5,17(d,J5Hz,6-H), 5,75(d,J5Hz, 7-H), 6,55(s,thiazol-H) (ΙΟΟΜΗζ,ϊ D20): 2,31(s,CH3), 3,58 & 3,82(ABq,J18Hz,2-CH2), 3,67(s,CH2CO), 4,13 & 4,56(ABq, 34 4-OH,6-CH3 Na 1760 J14Hz,3-CH2), 5,22(d,J5Hz,6-H), 3 5,75(d,J5Hz,7-H), 6,08(s,pyri-midin-H), 6,52(s,thiazol-H).

Tabel VI

30 151339 NH. c.

^ch2conh- .-[/SN

/-γ® 2SrU

0 COOM

Forbin- UVAmax IR Meto- delse ^ (6 i (KBr) de nr. R M vand) cm-l NMR cPppm nr.

(100MHz, i D20): 2,57 (s,oxadiazol I CH ), 3,42 & 3,82 35 N_N Na 258nm (ABq,J18Hz,2-CH2), 3 ff || (1,56 1763 3,62 (s,CH2CO), 3,97 & A^c^-CH xio4) 4,51(ABq,J13Hz,3-CH2), 5 5,10(d,J5Hz,6-H), 5,67 (d,J5Hz,7-H), 6,51(s, thiazol 5-H).

(100MHz, i D20): 3,47 CH & 3,90(ABq,17Hz,2-CH2), « 3 3,67(s,CH2CO), 3,80 (s, 36 /N Tj Na 261nm triazol CH3), 3,83 & -4 '1 (1,49 1765 4,37 (ABq, J14Hz,3-CH2) , 3 XN N xlO4) 5,15(d,J5Hz,6-H), 5,70 (d,J5Hz,7-H), 6,56 (s,thiazol 5-H), 8,58 (s,triazol 5-H).

(100MHz, i D20): 2,47 (s,pyridazin CH3), 3,58(ABq,2-CH2), 3,59 37 Na - 1750 (s,CH2CO), 4,20(ABq, 2 -i //"CH 3-CH2), 5,10 (d,6-H), N__N 5,65 (d,7-H), 6,46 (s, 5 φ thiazol 5-H), 7,35 & O 7,74(hver d, pyridazin 4 & 5-H).

Tabel VI (fortsat) 151339' --------

Forbin- UVAmax IR Meto delse ^ (β i (KBr) de nr. R M vand) cm--*- NMR (Γppm nr.

(100MHz, i D20): 3,45 & 3,77(ABq,J18Hz,2-CH2), 3,62(S,CH2C0), 4,03 & 38 J?-li Na 259nrn 4,27 (ABq, J14Hz,3-CH2) , 3 J (1,46 1768 5,12 (d,5Hz,6-H) , 5,67 xlO4) (d,5Hz,7-H),6,50(s, triazol 4-H), 8,36 (s,triazol 5-H).

(100MHz, i D20): 2,52 (s,triazol S-CH^), 3,43 & 3,95(ABq,J18Hz, 39 _Na 250nm 2-CH2), 3,68(s,CH2CO & 2 |l Μ (1,60 1760 triazol 4-CH3) , 3,74 xlO4) & 4,41(ABq,J14Hz,3-CH2) , 3 £h 5,14(d,J4Hz,6-H), 5,70 3 (d,J4Hz,7-H), 6,57(s, 1 thiazol 5-H). j (100MHz, i dg-DMSO): 3,39(s,CH2CO), 3,55 & 3,77(ABq,J18Hz,2-CH2), 3,90(s,tetrazol I-CH3), N_N 4,21 & 4,36(ABq,J14Hz, 40 J il H - 1762 3-CH2), 5,03(d,J5Hz, 1 "\N^N 1662 6-H) , 5,66 (dd,J9 & 5Hz, I 7-H), 6,23 (s,thiazol CH3 5-H), 6,2-7,1(m,NH2), 8,85(d,J9Hz,CONH).

(100MHz, i D20): 3,32 & 3,85(ABq,J18Hz,2-CH2), 3,68(s,CH2CO), 3,65 & 4,35(ABq,J13Hz,3-CH2), N-Π 3,79(s,l,3-diazol 1- 41 j JJ Na 250nm -CH3), 5,13(d,J5Hz,6-H), 3 (1,57 1758 5,69 (d,J5Hz,7-H) , 6,57 xlO4) (s,thiazol 5-H), 7,14 3 & 7,30(hver d,JlHz,l,3- -diazol 4- & 5-H).

32 1 5 1 3 3 9

Tabel VI (fortsat)

Forbin- UVAmax IR Meto- delse (6 i (KBr) de nr. R M vand) cm--*- NMR <fppm nr.

(100MHz, i D20): 3,56 & 3,89(ABq, _N J18Hz,2-CH2), 3,71 42 _1 Na 261nm (s,CH2CO), 4,32 & 3 (1,59 1763 4,70(ABq,J13Hz,3- xlO4) CH2), 5,21(d,J5Hz, 5 6- H), 5,78(d,J5Hz, 7- H), 6,58(s, thiazol 5-H).

(100MHz, i D20): 2,35 & 2,77(hver s,thiazol 4- & 5-CH3), 3,40 & 43 N-pCH_ Na 258nm 3,82 (ABq, J18Hz, 3 J L· 3 (1,61 1757 2-CH2), 3,69(s, s/ 3 xlO4) CH2CO), 3,89 & 5 4,51(ABq,J13Hz, 3-CH2), 5,15(d, J5Hz,6-H), 5,75 (d,J5Hz,7-H), 6,56(s,thiazol,5-H).

(100MHz, i dg-DMSO): 2,32(s,thiazol 4-CH3), 3,99(s,CH2CO), 3,50 & 3,77(ABq,J18Hz, w-τι— CH 2-CH2), 4,10 & 44 J l| 3 H (i 2% 4,48 (ABq, J13Hz, 3 "''s' NaHC03) 3-CH2), 5,05 (d, 259nm J5Hz,6-H), 5,67 5 (1,61 (q,J5 & 8Hz,7-H), xlO4) 6,23(s,thiazol 5-H), 6,85(bred s,NH„), 7,15(s,thiazol^5-H), 8,82(d,J8Hz,CONH).

Tabel VI (fortsat) 33 151339

Forbin- UVAmax ir Meto- delse · (6 i (KBr) de nr. R M vand) cm-l NMR (Γppm nr.

(100MHz, i D20): 2,55 (s,thiazol 5-CH3), 3,42 & 3,85(ABq,J18Hz, 45 N-ί Na 258nm 1758 2-CH2), 3,70(s, CH2CO), 3

Jl jj_CH (1,73 3,90 & 4,56(ABq,J14HZ, xlO4) 3-CH„) , 5,15 (d,J4,5Hz, 5 6-H)7 5,73 (d,J4,5Hz,7-H) 6,58(s-thiazol 5-H), 7,51(s,thiazol 4-H).

(60MHz, i D20): 3,28 & 3,64(ABq,J18Hz, 2-CH2), 3,50 (s, CH2CO)., 03,80 & 3,64(ABq,J14HZ, 3-CH2)/ 4,95(d,J4,5Hz,

Na - 1765 6-H), 5,54(d,J4,5Hz, 3 7-H), 6,41(s,thiazol 5-H), 7,0-7,9(m, pyri-din 3,4-5H), 8,28 (m, pyridin 6-H).

(60MHz, i D20): I 3,63(s,CH2CO), 3,42 I & 3,95(ABq,J18Hz, 2-CH2), 3,85 & 4,35 (ABq,J14Hz, O! 3-CH2), 5,01(d,J5Hz,6-H),

Na - 1763 j 5,60(d,J5Hz,7-H), 6,40 3 ; (s,thiazol 5-H), 7,15 j (t,J5,5Hz, pyrimidin j 5-H), 8,47(d,J5,5Hz, I pyrimidin 4- & 6-H).

34 151339

Tabel VII

NR s HN_!l-CH9C0NH-,-,/SN.

GJV

^__ COONa__

For- bin- , - UVX IR Meto- del- R (ε 1?ax (KBr) NMR S ppm de se cm-1 nr.

vand) nr.

(100MHz^ i D 0j. 2/i4 & 2,34 (hver s, oxazol 4- & 5-CH3), 3,42 & N-.-CH3 255nm 3,87 (ABq, J18Hz, 2-CH2), 48 -S-^0JJ-CH3 (1,87 1757 3,70 (s, CH2CO) , 3,91 & 5 xlO4) 4,57 (ABq, J14Hz, 3-CH2), 5,16(d, J5Hz, 6-H), 5,75(d, J5Hz, 7-H), 6,58(s, thiazol 5-H).

49 -OCOCH3 identisk med forbindelsen fra eksempel 2 5

N-N

li Μ 50 identisk med forbindelsen fra eksempel 5 5 ch3

N-N

51 -S-|^s^[l-CH3 identisk med forbindelsen fra eksempel 7 5 1 identisk med forbindelsen fra eksempel 4 5 35

Tabel VIII

151339

Antibakterielt spektrum tøig/ml, agar-fortyndingsmetode)

Grampositive Gram-negative bakterier

Forbindelse bakterier_______ nr‘ S. S. E. E. E. K. P. P.

au- au- coli coli coli pneu- vul- mor- reus reus NIHJ 0-111 T-7 mo- garis ganii 209P 1840 JC-2 niae IFO Eb53 DT 3988

Cephaloridin <0,2 0,39 3,13 1,56 >100 1,56 6,25 >100

Cephazolin <0,2 0,78 1,56 0,78 50 1,56 6,25 100 4 0,2 0,78 0,78 0,1 100 0,2 0,2 50 6 <0,2 0,78 0,78 <0,2 12,5 <0,2 0,39 6,25 7 0,78 3,13 0,78 <0,2 25 <0,2 0,39 12,5 8 0,39 0,78 0,78 <0,2 12,5 <0,2 0,39 <0,2 9 <0,2 0,78 1,56 0,39 50 <0,2 6,25 <0,2 12 0,39 1,56 0,78 <0,2 50 <0,2 <0,2 25 —---------- 15 0,78 1,56 0,78 <0,2 25 <0,2 <0,2 3,13 16 <0,2 0,78 0,39 <0,2 12,5 <0,2 <0,2 1,56 17 0,39 3,13 0,39 <0,2 12,5 <0,2 0,39 0,78 18 1,56 3,13 0,78 <0,2 6,25 <0,2 1,56 1,56 19 0,78 3,13 0,78 <0,2 25 <0,2 <0,2 0,78 21 <0,2 1,56 0,39 <0,2 25 <0,2 <0,2 0,78 22 0,78 3,13 0,78 <0,2 25 <0,2 <0,2 0,78 23 <0,2 0,78 1,56 0,39 25 <0,2 0,39 3,13 24 <0,2 0,78 1,56 0,39 25 <0,2 0,39 25 25 0,39 0,78 0,39 <0,2 100 <0,2 0,39 25 28 0,39 1,56 0,39 <0,2 3,13 <0,2 0,78 <0,2 29 0,78 1,56 0,39 <0,2 3,13 <0,2 <0,2 <0,2

Tabel VIII (fortsat) 36 151339

Grampositive Gram-negative bakterier

Forbindelse bakterier nr. —-------1-- S. S. E. E. E. K. P. P.

au- au- coli coli coli pneu- vul- mor- reus reus NIHJ 0-111 T-7 mo- garis ganii 209P 1840 JC-2 niae IFO Eb53 DT 3988 30 0,39 1,56 1,56 0,39 100 <0,05 0,2 50 31 0,78 1,56 0,2 £0,1 3,15 <0,1 0,2 1,56 32 0,2 1,56 1,56 0,78 50 0,39 0,78 100 35 0,39 0,78 1,56 0,39 - 0,39 - 25 36 0,78 1,56 0,2 <0,05 25 0,1 - 25 37 0,2 0,78 0,39 0,2 - 0,1 - 3,125 38 0,39 0,78 0,78 0,78 - 0,2 - 25 39 0,39 1,56 0,2 0,1 - 0,1 - 1,56 41 0,39 1,56 0,78 0,39 6,25 0,39 0,39 42 <0,2 0,78 3,13 0,78 25' 0,78 0,78 44 <0,2 0,78 1,56 0,78 12,5 0,39 0,39

Forb. iflg. eks. 1 i DK patent- <0,78 6,25 12,5 - - 6,25 25 50 ans. nr. 3451/72 _j_

Tabel IX

37 151339

Antibakterielt spektrum (pg/ml, agar-fortyndingsmetode)

Forbindelse Proteus mirabilis nr. GN 4359

Eks. 1, 2 £0,2

Eks.3,4 £0,2

Eks. 5, 6 £0,2

Eks. 7,8 £0,2

Eks. 9, forb. nr. 6 0,39 " nr. 7 0,39 " nr. 8 0,39 " nr. 9 1,56 " nr. 12 £0,2 " nr. 13 0,39 " nr. 15 £0,2 " nr. 16 0,78 " nr. 17 0,39 " nr. 18 0,78 " nr. 19 <0,2 " nr. 20 <0,2 " nr. 21 0,78 " nr. 22 £:0,2 " nr. 23 1,56 " nr. 24 0,78 " nr. 25 0,39 " nr. 26 3,13 " nr. 27 3,13 " nr. 28 £0,2 M nr. 29 <0,2 " nr. 31 <0,1 " nr. 35 0,78 " nr. 36 <0,2 " nr. 37 <0,2 " nr. 38 <0,2 " nr. 39 <0,2 " nr. 42 0,78 " nr. 43 1,56 " nr. 44 <0,2 " nr. 45 0,78 " nr. 46 0,39 " nr. 47 0,39 " nr. 48 1,56

Cephalothin 3,13

Cephazolin 6,25

Cephaloridin 6,25 38 151339

Tabel X

Protektiv effekt (ED^^x mg/kg) på inficerede mus

Forbindelse nr. ED50X m<?/kg 9 0,812 11 <0,625 19 <0,625 21 <0,625

Cephaloridin 2,81

Tabel XI

Forbindelse nr. ED^qX ^g/kg 12 <0,625 15 <0,625 16 <0,625 17 <0,625 18 0,625

Cephaloridin 1,94

Tabel XII

Forbindelse nr. EE50X m9/kg 37 0,28 39 0,38 40 0,73 50 0,89 52 2,38

Cephaloridin 3,57

Cephazolin 3,1 x Forsøgsdyr: hanmus (ICR/SLC) 5 mus pr. gruppe pr. enkelt dosis

Infektion: intraperitonealt med

Escherichia coli 0-111

Indgivelse: en enkelt subcutan dosis straks efter indgivelse

Observationsperiode: 7 dage.

39 151339

Eksempel A (Fremstilling af udgangsprodukt)

Fremstilling af 7-(4-chlor-3-oxobutyrylamido)-3-acetoxymethyl--3-cephem-4-carboxylsyre.

En opløsning af 4,4 g diketen i 10 ml methylenchlorid afkøles på forhånd til -35°C, og 3,92 g chlor ledes gennem opløsningen. Reaktionsblandingen omrøres i 15 minutter. I mellemtiden er 10,9 g 7-amino-cephalosporansyre og 8,1 g triethylamin blevet opløst i 100 ml methylenchlorid, og opløsningen er blevet afkølet til -30°C. Til denne opløsning sættes den ovenfor fremstillede reaktionsblanding under omrøring og afkøling, således at temperaturen ikke overstiger -30°C. Derpå hæves temperaturen af blandingen lidt efter lidt til stuetemperatur i løbet af 1 time, hvorpå opløsningsmidlet afdestilleres under formindsket tryk. Til remanensen sættes 100 ml ethylacetat, og blandingen rystes kraftigt med 100 ml af en 10% vandig opløsning af phosphorsyre. Det vandige lag fraskilles, mættes med natriumchlorid og ekstraheres tre gange med ethylacetat. Ethylacetatlagene forenes, vaskes med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid, dehydratiseres og koncentreres under formindsket tryk til et endelig rumfang på 20 ml. Koncentratet henstilles i kulden, og de dannede krystaller samles ved filtrering. Den beskrevne procedure giver den ovennævnte forbindelse i et udbytte på 6,3 g med et smeltepunkt på 135-140°C (sønderdeling).

IR(cm-1, KBr): 1790, 1750 og 1655 NMR( i dg-DMSO) : 2,00 (s, COCH-j), 3,41 & 3,64 (ABq, Jl8Hz, 2-CH2) , 3,56(s,COCH2CO), 4,50(s,C1CH2-), 4,67 & 5,00 (ABq, J13Hz, 3-CH2), 5,07(d, J4,5Hz, 6-H), 5,66(dd, J4,5 & 8Hz, 7-H), 9,04(d, J8Hz, CONH)

Elementær analyse: Beregnet for C14H15C1N2°7Si C 43,03; H 3,87; N 7,17 Fundet: C 43,01; H 3,89; N 7,18

Eksempel B (Fremstilling af udgangsprodukt)

Fremstilling af 7-(4-brom-3-oxobutyrylamido)-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

En opløsning af 3,4 g diketen i 10 ml methylenchlorid afkøles på forhånd til -30°C, og der tilsættes dråbevis en opløsning af 6,4 g brom i 10 ml methylenchlorid. I mellemtiden er 10,9 g 7-amino-cephalosporansyre og 8,1 g triethylamin blevet opløst i 100 ml methylenchlorid og opløsningen er blevet afkølet til -30°C. Til denne opløsning 40 1 5 1 3 3 9

Temperaturen hæves lidt efter lidt til stuetemperatur i løbet af 1 time, hvorpå opløsningemidlet afdestilleres under formindsket tryk. Til remanensen sættes 100 ml ethylacetat, og blandingen rystes kraftigt med 100 ml 10% vandig phosphorsyre. Det vandige lag fraskilles, mættes med natriumchlorid og ekstraheres 2 gange med ethylacetat. Ethylacetat-lagene forenes, vaskes med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid, dehydratiseres, behandles med aktivt kul og koncentreres til tørhed under formindsket tryk. Til remanensen sættes ether, og blandingen henstilles.

De dannede krystaller fjernes ved filtrering under sugning. Proceduren giver den ovennævnte forbindelse. Dette produkt omfatter et kvart mol ethylacetat som opløsningsmiddel for krystallisationen.

Udbyttet er 8 g.

IR(cm-1, KBr): 1780, 1735 og 1650 NMR( i dg-DMSO): 2,01(s,CH3CO), 3,54(m,2-CH2) 3,62(s,COCH2CO), 4,37(s,BrCH2CO), 4,67 & 5,01 (ABq, J14HZ, 3-CH2), 5,08(d, J4Hz, 6-H), 5,66(dd, J4 & 8Hz, 7-H), 9,04(d, J8Hz, CONH)

Elementær analyse: Beregnet for C^H^gBrN2O^S.l/4 C^HgC^: C 39,40 H 3,75; N 6,13;

Fundet: C 39,20 H 3,63; N 6,09

Eksempel C (Fremstilling af udgangsprodukt)

Fremstilling af 7-amino-3-(2-methylsulfonylmethyl-l,3,4--thiadiazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

(1) En opløsning af 4,9 g kaliumhydroxid i 30 ml methanol omrøres under isafkøling,og til opløsningen sættes 12,5 g methylsulfony1--acetylhydrazid og 5,3 ml carbondisulfid efterfugt af omrøring i 30 minutter under isafkøling og derpå i 30 minutter ved stuetemperatur. Methanol afdestilleres fra reaktionsblandingen, og remanensen tritureres under tilsætning af ethanol til dannelse af et bundfald. Bundfaldet samles ved filtrering og tørres til dannelse af 20,39 g kalium-3--(methylsulfonylacetyl)-dithiocarbazinat som et krystallinsk pulver.

(2) I 40 ml koncentreret svovlsyre afkølet med is opløses 8,0 g kalium-3-(methylsulfonylacetyl)dithiocarbazinat, og blandingen omrøres i 10 minutter under isafkøling. Reaktionsblandingen hældes ud på 150 g is, og blandingen omrøres til dannelse af et bundfald, der samles ved filtrering og vaskes med koldt vand efterfulgt af tørring. Proceduren giver 2,29 g 2-?-methylsulfonylmethyl-l,3,4-thiadiazol-5-thiol med et smeltepunkt på 204-206°C (sønderdeling).

41 151339 IR(cm nujol): 1315 og 1139 NMR(100 MHz, i dg-DMSO) : <f3,08(s, CH.^) , 4,56~(bred, s, SH) , 4,89 (s, CH2)

Elementær analyse: Beregnet for C 22,84; H 2,288; N .13,32; ......... -· — - - - **

Fundet: C 22,97; H 2,85) N 13,18 (3) 2-Methylsulfonylmethyl-l,3,4-thiadiazol-5-thiol behandles på lignende måde som ved metode 1 i eksempel 9 til dannelse af 7-amino-3-(2-methylsulfonylmethyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)--thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

IR(cm”1, KBr): 1800

Eksempel D (Fremstilling af udgangsprodukt) På lignende måde som i eksempel C fremstilles følgende forbindelser:

Tabel XIII N-N

r1!. s JJLr^

Smeltepunkt IR

R15 R16 (°C) R16 (cm"1, KBr) CH3SCH2- H 105 - 107 * 1800 (omkrystalliseret fra ethylacetat) NH2COCH2- H 179 - 182 * 1800 (sønderde1ing) CH3OCOCH2- H 79-80 * 1800 (omkrystalliseret fra benzen) HOOCCH2- H 166-168 * 1800 (sønderdeling, omkrystalliseret fra ethylacetat-benzen) — <^/N-CH2- H - * 1800 (CH3)2NCOCH2- H - * 1800 151339 * «ΗΓΊ—ί| /)-Νγ^εΗ2

COOH

Eksempel Ε (Fremstilling af udgangsprodukt)

Fremstilling af 7-amino-3-[2-(2-hydroxyethylamino)-1,3,4--thiadiazol-5-yl]-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

(1) En opløsning af 12,2 g methyldithiocarbazinat og 18,3 g 2-aminoethanol i 25 ml vand opvarmes til 95°C i 5 timer. Efter afkøling sættes 10 ml eddikesyre til reaktionsblandingen, og blandingen henstilles i en fryser natten over til udfældning af krystaller, der samles ved filtrering og tørres til dannelse af 2,85 g 4-(2-hydroxyethyl)--thiosemicarbaz id.

(2) En blandet opløsning af 1,35 g 4-(2-hydroxyethyl)-thiosemicarbazid, 1/14 g carbondisulfid og 20 ml pyridin opvarmes under tilbagesvaling i 5 timer under omrøring, og reaktionsblandingen koncentreres til tørhed under formindsket tryk. Til remanensen sættes vand til udfældning af krystaller, der samles ved filtrering til dannelse af 1,35 g 2-(2-hydroxyethylamino)-l,3,4-thiadiazol-5-thiol.

NMR(60 MHz, i DMSO) : 3,19 (t, CH2), 3,46(t, CH2) og 7,33 (bred s, OH) (3) 2-(2-Hydroxyethylamino)-l,3,4-thiadiazol-5-thiol behandles på lignende måde som metode 2 fra eksempel 9 til dannelse af den ovennævnte forbindelse.

IR (cm-1, KBr): 1800.

Eksempel F (Fremstilling af udgangsprodukter) På lignende måde som eksempel E, fremstilles følgende forbindelser: 43 151339

Tabel XIV N-N - R1 2-— S -JLs J— R15

NMR <f IR

R15 R16 (60 MHz) R16 (cm"1, KBr) (CH_)9NC H NH- H (i DMSO) 2,90(s, * 1800 0 4 2xCH,), 3,40(t, CH2); 4,28(t, CH2) HSO-C.H.NH- H (i D20) 3,17(t, * 1795 CH2), 3,78(t, CH2) * Den samme som i tabel XIII.

Eksempel G (Fremstilling af udgangsprodukt)

Fremstilling af 7-amino-3-[2-(2-hydroxyethylthio-l,3,4--thiadiazol-5-yl]-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

Til en opløsning af 3,0 g l,3,4-thiadiazol-2,5-dithiol opløst i 22 ml 0,1 N vandig opløsning af natriumhydroxid dryppes 2,5 g ethylenbromhydrin under isafkøling og omrøring. Blandingen henstilles natten over ved stuetemperatur til udfældning af belggule nåle, der samles ved filtrering under sugning og tørres til dannelse af 3,0 g 2-(2-hydroxyethylthio)-l,3,4-thiadiazol-5-thiol med smp. 112-113°C.

IR (cm""1, KBr): 1500, 1280 og 1055 NMR(60 MHz, i NaHC03“D20): 3,50(t, CH2), 4,60(t, CH2) 2

Det ovennævnte produkt (1) behandles på lignende måde som metode 2 fra eksempel 9 til dannelse af den ovennævnte forbindelse. IR (cm-1, KBr): 1800 NMR(60 MHz, i NaHC03-D20): 3,54(t, J6Hz, CH2), 3,54 & 3,73(ABq, J16Hz, 2-CH2), 3,91(t, J6Hz, CH2), 4,07 & 4,38 (ABq, J13Hz, 3-CH2), 5,05 (d, J5Hz, 6—H), 5,45(d, J5Hz, 7-H)

Eksempel H (Fremstilling af udgangsprodukter) På lignende måde som eksempel G fremstilles følgende forbindelser : 44 151339

Tabel XV N-N

R^-S-IJ-R15 R15 R16 IR (cm"1, KBr) R16 IR (cm"1, KBr) HS03C2H4S- H 1190,1040 + 1800 NH2COCH2S- H 1685 * 1800 CH3COCH2S- H * 1800 CH3OC2H4S- H 1720 * 1800 C2H5OCOCH2S- H 1705 * 1800 (CH3) 2NC2H4S~ H * 1800 ^^>-COOC2H4S- H * 1795 * Den samme som i tabel XIII.

/·'

Claims

151339 Analogifremgangsmåde til fremstilling af 7-[2-(2-imino--4-thiazolin-4-yl)-acetamido]-cephalosporinderivater med den almene formel "T’l H N—*— CH2-CONH—-\^\ (I) O ' u COOH i hvilken Y betyder en -OCOCH.,-gruppe eller en gruppe med formlen 3 3 J -SR , hvor R betyder en usubstitueret eller substitueret thia-diazolyl-, diazolyl-, tetrazolyl-, triazolyl-, oxadiazolyl-, N--oxido-pyridazinyl-, thiazolyl-, pyrimidyl-, pyridyl-, pyridazi-nyl- eller oxazolylgruppe, idet substituenterne er C^_2-alkyl, amino, hydroxyl, trifluormethyl, di-C^_2_alkylaminoacetylainino, -^CiI2^n-^' -S-(CH2)n-q e^er -NH- (CH2) -q,. hvor n er 1 eller 2, og q er hydroxyl, carboxyl, sulfo, carbamoyl, C^_2-alkoxycarbonyl, di-C1_2-alkylamino, di-C1_2-alkylcarbamoyl, C1_2-alkylthio, C^_2~ -alkylsulfonyl, acetyl, benzyloxy eller morpholinocarbonyl eller farmaceutisk acceptable salte eller estere heraf, kendetegnet ved, at (a) en dehydratiseringskatalysator får lov til at indvirke på en forbindelse med formlen NH nh2-c-s-ch2-co-ch2conh (II) i—N\1ACH2Y ,

0 COOH i hvilken Y har den samme betydning som ovenfor, eller et salt eller en ester heraf, (b) en forbindelse med formlen ΝΗγΝ ch2conh -rY (IX) y_CH20-C0-CH3

0 COOH eller et salt eller en ester heraf omsættes med en forbindelse med formlen R3SH (X) 3 151339 i hvilken R har den samme betydning som ovenfor, eller et salt heraf, eller (c) en forbindelse med formlen H2N-|—rSNl , (XII) )—N\>-ch2srj

0 COOH 3 i hvilken R har den samme betydning som ovenfor, eller et salt eller·en ester heraf omsættes med en forbindelse med formlen H-N-!Lch COOH (XIII) i hvilken betyder en beskyttet iminogruppe, eller et reaktivt derivat heraf, hvorefter om nødvendigt beskyttelsesgruppen fjer-. nes fra iminogruppen.