DE9104344U1 - Kühleinrichtung zur Probenvorbereitung für ein Elektronenmikroskop - Google Patents
Kühleinrichtung zur Probenvorbereitung für ein ElektronenmikroskopInfo
- Publication number
- DE9104344U1 DE9104344U1 DE9104344U DE9104344U DE9104344U1 DE 9104344 U1 DE9104344 U1 DE 9104344U1 DE 9104344 U DE9104344 U DE 9104344U DE 9104344 U DE9104344 U DE 9104344U DE 9104344 U1 DE9104344 U1 DE 9104344U1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- reaction vessel
- cooling device
- attachment
- cryogen
- reaction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 238000001816 cooling Methods 0.000 title claims description 37
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 52
- 239000002826 coolant Substances 0.000 claims description 18
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 15
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 12
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims description 10
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 8
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims description 6
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 4
- 239000004020 conductor Substances 0.000 claims description 3
- 238000009413 insulation Methods 0.000 claims description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 3
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 claims description 3
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 claims description 3
- 239000007769 metal material Substances 0.000 claims description 2
- 230000000379 polymerizing effect Effects 0.000 claims 3
- 244000038559 crop plants Species 0.000 claims 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 claims 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 claims 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000011810 insulating material Substances 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 229920006328 Styrofoam Polymers 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000000112 cooling gas Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000012520 frozen sample Substances 0.000 description 1
- 239000007792 gaseous phase Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008261 styrofoam Substances 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
- F25—REFRIGERATION OR COOLING; COMBINED HEATING AND REFRIGERATION SYSTEMS; HEAT PUMP SYSTEMS; MANUFACTURE OR STORAGE OF ICE; LIQUEFACTION SOLIDIFICATION OF GASES
- F25D—REFRIGERATORS; COLD ROOMS; ICE-BOXES; COOLING OR FREEZING APPARATUS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- F25D3/00—Devices using other cold materials; Devices using cold-storage bodies
- F25D3/10—Devices using other cold materials; Devices using cold-storage bodies using liquefied gases, e.g. liquid air
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/42—Low-temperature sample treatment, e.g. cryofixation
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Combustion & Propulsion (AREA)
- Mechanical Engineering (AREA)
- Thermal Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Description
Institut für Genetik und
Kulturpflanzenforschung
Kulturpflanzenforschung
91/01-GM 01.03.1991
Kühleinrichtung zur Probenvorbereitung für ein Elektronenmikroskop
Die Erfindung betrifft eine Kühleinrichtung zur Probenvorbereitung
für ein Elektronenmikroskop durch Gefriersubstitution
und Polymerisation kleiner, vor allem biologischer Proben nach dem Oberbegriff des Anspruches 1.
Aus der DE-Patentschrift 34 25 744 ist ein solches Gerät bereits
bekannt. Es ist speziell auf kleine biologische Proben zugeschnitten und soll deren Vorbereitung vereinfachen. Das
dabei verwendete Kühlgefäß ist mehrteilig so zusammengesetzt, daß die Proben nach der Entfernung eines Abschlußdeckels ausgewechselt
werden können. Ein ringförmiger, flacher, metallischer Dichtflansch am Mittelteil wird zwischen den Abschlußdeckel
und das Unterteil gebracht und dichtet alle drei Teile gegeneinander ab. Das Wechseln der im Mittelteil angesiedelten
Proben ist dabei recht umständlich, auch dann, wenn das darin angeordnete Reaktionsgefäß im Mittelteil verbleibt und dieses
komplett getauscht wird.
Insbesondere für die gleichmäßige Temperierung dieser Proben und die Vorkühlung der bei dem Verfahren erforderlichen Substitutions-
und Einbettungsmedien sind in der bekannten Anordnung
eine Reihe von aufwendigen apparativen Maßnahmen getroffen, um eine optimale Strömungsführung des Kryogens und dessen
sparsame Verwendung abzusichern. Die in dem verwendeten Kühlgefäß über dem Kühlmittel behälter befindlichen Reaktionsgefäße
tauchen nicht in das Kryogen - zumeist flüssiger Stickstoff ein, sondern werden von dessen gasförmiger Phase umspült; es
ist wie auch in einer ähnlichen Anordnung gemäß der DE-Patentschrift 29 44 464 Vorsorge getroffen, daß der Wärmeübergang
zur Wand des Reaktionsgefäßes intensiv ist, vor allem durch eine große Übergangsfläche. Auch aus diesem Grund ist eine
komplizierte und aufwendige Einrichtung entstanden, welche die Kosten der Probenvorbereitung erheblich belastet.
Die Erfindung hat sich demgegenüber die Aufgabe gestellt, eine Einrichtung der eingangs näher bezeichneten Art so auszurichten,
daß beide erforderlichen technologischen Prozesse der Gefriersubstitution
und der Polymerisation der Proben mit ganz einfachen apparativen Mitteln durchgeführt werden können, die
- beispielweise in einem Forschungslaboratorium - mit einiger Erfahrung sogar aus handelsüblichen Bauteilen selbst zusammengestellt
werden können; dabei soll der Energie- und Kryogeneinsatz erheblich vermindert und gleichwohl eine sichere
Einbettung der Proben gewährleistet sein.
Erfindungsgemäß wird die Aufgabe dadurch gelöst, daß das Kühlgefäß
dreigeteilt aus einem oben offenen, sonst aber gut wärmeisolierten Kühlmittelbehälter für ein flüssiges und verdampfendes
Kryogen, einem den Kühlmittelbehälter gut wärmeisolierend
und abnehmbar abdeckenden Aufsatz mit einem im Aufsatz angeordneten, oben offenen, sonst aber gut wärmeisolierten Reaktionsgefäß
aus einem metallischen Werkstoff und einem den
Aufsatz bedeckenden und dessen Cberscite gut wärmeisolierenden
Abschlußdeckel besteht, und daß der Kühlmittelbehälter mit dem
Aufsatz und der Aufsatz mit dem Abschlußdeckel durch in den jeweiligen, aneinanderstoßenden Flächen vorgesehene Ringleisten
trapezförmigen Querschnitts, die in zugehörigen entsprechenden
Ringnuten ebenfalls trapezförmigen Querschnitts oder
kegelstumfförmigen Ausnehmungen des jeweils anschließenden Gegenstücks
liegen, miteinander labyrinthdichtungsartig verbunden sind.
Weitere Merkmale der Erfindung enthalten die Unteransprüche.
Es ist aus der DE-Offenlegungsschrift 35 17 518 zwar bereits
an sich bekannt, Proben für die Verwendung in einem Elektronenmikroskop in einer Kühlkammer einer Spülung eines Kühlgases
auszusetzen. Eine solche Anordnung ist für die Gefriersubstitution
bzw. Polymerisation aber ungeeignet, sondern stattdessen nur für eine direkte Beobachtung tiefgefrorener Proben,
die mit Hilfe einer Schleuse in das Elektronenmikroskop eingeführt
werden müssen. Im Grunde genommen ist bei dieser vorbekannten Kühlkammer das Reaktionsgefäß nur ein Kompartiment des
gesamten Kühlgefäßes; eine exakte Temperierung der Proben durch eine Gegenheizung ist deshalb nicht vorgesehen. Ferner
ist der gesamte apparative Aufbau davon abhängig auch anders gestaltet insofern, als Reaktionsgefäß und Kühlmittelbehälter
eine Baueinheit bilden, die in ein Isoliergefäß eingesetzt und darin auch wechselbar sind. Eine solche Konstruktion ist deshalb
nur für kleine Kryogenmengen geeignet.
Durch die Erfindung werden die Nachteile des bekannten Standes
der Technik in einfacher Weise beseitigt. Die Zusammensetzung des mehrteiligen Kühlgefäßes wird durch die Ringleisten und
-nuten sehr vereinfacht, so daß der verfahrensbedingte Wechsel
der Reeaktionsgefäße sehr schnell erfolgen kann. Die technische Ausführung der aneinandergrenzenden Flächen ist einfach,
leichte Beschädigungen vermindern den Dichteffekt nicht.
Wegen der Verwendung des originär als Kühlmittel vorgesehenen Kryogens auch als (ständiges) Spülmittel für das Reaktionsgefäß
werden die darin befindlichen Proben gut getrocknet. Ferner wird der Innenraum des Reaktionsgefäßes durch das abrauchende,
selbst noch nicht erwärmte gasförmige Kryogen trotz niedriger Wärmeübergangszahlen vorgekühlt, weil sich eine
fortwährende Strömung einstellt; diese Vorkühlung erfaßt auch die für den Gesamtprozeß erforderlichen Reagenzien, die ebenfalls
im Reaktionsgefäß untergebracht sind. Schließlich ist die Anordnung auch bei der Polymerisation der Proben von Vorteil;
der dabei störende Luftsauerstoff wird durch das Kryogen abgespült, so daß eine Polymerisation auch in offener Form erfolgen
kann, wie sie etwa für die Flach-Einbettung erforderlich ist.
Die Einzelheiten der Erfindung werden nachstehend an Hand der Zeichnung an einem Ausführungsbeispiel näher erläutert. Es
zei gen
Fi g.1 die gesamte Anordnung im schematischen Überblick,
Fig.2 einen Schnitt durch ein Kühlgefäß nach der Erfindung, Fig.3 einen Schnitt durch ein Reaktionsgefäß in einer vergrößert
gezeichneten Einzelheit A der Fig.2, einge-
richtet für die Gefriersubstitution, und
Fig.4 die gleiche Darstellung wie in Fig.3, nun aber für
die Polymerisation von biologischen Proben vorbereitet,
Fig. 5 eine Draufsicht auf eine Halteplatte aus Fig.3 und
Fig. 6 eine Draufsicht auf einen Halteeinsatz aus Fig.4, jeweils in vereinfachter, auf das Wesentliche zielenden Darstellungsweise.
Zur besseren Unterscheidung werden diejenigen Bezugszeichen, die sich - bei einem sonst gleichen Funktionselement - nur auf
das Reaktionsgefäß zur Gefriersubstitution beziehen, mit dem
Anhängebuchstaben a, hingegen Bezugszeichen, die sich nur auf das Reaktionsgefäß zur Polymerisation beziehen, mit dem Anhängebuchstaben
b versehen.
Die Gesamtapparatur besteht zunächst entsprechend Fig.1 aus
einem mehrteiligen Kühlgefäß 1, einem Vorratsbehälter 2 für ein Kryogen, mit dem das Kühlgefäß 1 betrieben wird, einem
Nachfüllgerät 3, das die bedarfsgerechte Förderung des Kryogens
aus dem Vorratsbehälter 2 in das Kühlgefäß 1 steuert, einer Zeitschalteinrichtung 4, die ihrerseits das Nachfüllgerät
steuert, einer Temperaturregelung 5 für eine thermostatisehe
Regelung der Reaktionstemperatur und aus einem Thermographen 6 zur Überwachung der Reaktionen. Die Einzelheiten der Anordnung
werden bei der Beschreibung der übrigen Figuren der Zeichnung mit erörtert.
In der Fig.2 ist das Kühlgefäß 1 vergrößert und im Längsschnitt
dargstellt. Ein das Unterteil bildender Kühlmittelbe-
hälter 7 besteht in einfacher Weise aus einem hehlzylindrischen
Mantel 8 und einem damit einstückigen Behälterboden 9
aus einem Schaumstoff wie Styropor oder dgl., in dem sich das Kryogen 10 befindet; über dessen Flüssigkeitsstand 11 füllt
seine dampfförmige Phase einen Verdampfungsraum 12 aus. Eine Einfüllöffnung 13 für das Kryogen 10 verbindet den Kühlmittelbehälter
7 mit dem Vorratsbehälter 2, aus dem das Kryogen 10 gemäß Fig.1 mittels einer Fördereinrichtung 14 in den Kühlmittelbehälter
7 abgepumpt wird. In einfacher Weise eignet sich dazu eine Heizung 15, die an einer passenden Stelle eines die
Einfüllöffnung 13 mit dem Vorratsbehälter 2 verbindenden
Schlauches 16 angeordnet ist, so daß durch eine von der Heizung ausgelöste örtliche Verdampfung des im Schlauch 16 befindlichen
Kryogens 10 dieses gefördert wird. Für die Regelung der Förderung ist ein Flüssigkeitsstandssensor 17 angebracht,
der den Flüssigkeitsstand 11 in dem Kühlmittelbehälter 7 ertastet. Der Flüssigkeitsstandssensor 17 und die Heizung
15 sind elektrisch in dem Nachfüllgerät 3 gekoppelt, das
außerdem von der Zeitschalteinrichtung 4 angesteuert wird,
durch welche das Nachfüllgerät 3 nur nach Ablauf einer vorgegebenen
Zeitdauer von bis zu 6 Stunden durch den Flüssigkeitsstandssensor
17 aktiviert werden kann, so daß ein unnötig häufiges Schalten der Heizung 15 unterbleibt.
Die Zeitschalteinrichtung 4 besitzt außerdem einen zeit- oder
handbetätigten Schalter für eine UV-Lampe, deren Zweck weiter
unten erläutert ist.
Das Mittelteil des Kühlgefäßes 1 wird von einem Aufsatz 19 gebildet,
in dem auf dessen Oberseite 20 ein Reaktionsgefäß 21
eingelassen ist. Eine Temperaturregelung 5 (Fig.1) schaltet
über eine Leitung 48 eine Heizeinrichtung 22, die sich (Fig.3,
4) unterhalb des Bodens 23 des Reaktionsgefäßes 21 im Aufsatz 19 befindet, in Abhängigkeit vom Meßwert eines Temperaturfühlers
24 für die Temperatur in einem vom Innern des Reaktionsgefäßes 21 gebildeten Reaktionsraum 25, der damit thermostatisch
gegengeheizt wird auf eine Temperatur knapp über der Verdampfungstemperatur des Kryogens 10. In einfacher Weise
wird für die Heizeinrichtung 22 ein Leistungstransistor verwendet.
Der Aufsatz 19, der bis auf das Reaktionsgefäß 21 aus reinem Isolierstoff wie Styropor oder dgl. besteht, ist mit einem
Abschlußdeckel 26 aus einem ebensolchen Isolierstoff gegen die Umgebung 27 abgedichtet.
An der offenen Oberseite des Kühlmittelbehälters 7 ist eine
mit dem Mantel 8 einstückige Ringleiste 28 trapezförmigen
Querschnitts angearbeitet, die mit einer kegelstumpfförmigen
Ausnehmung 29 auf der Unterseite des Aufsatzes 19 labyrinthdichtungsartig
zusammenwirkt.
In ähnlicher Weise befindet sich auf der Oberseite 20 des Aufsatzes
19 eine Ringnut 30, die mit einer Ringleiste 31 an der Unterseite des Abschlußdeckels ebenfalls labyrinthdichtungsartig
zusammenwirkt, da beide wiederum trapezförmigen Querschnitt
aufweisen.
Das Reaktionsgefäß 21a der Fig.3, ist zur Gefiersubstitution
eingerichtet. Es nimmt einen leicht wechselbaren Halteeinsatz
32a auf. Der Halteeinsatz 32a besteht aus einer Halteplatte 33, die mindestens zwei Segmenten 34 und 35 (Fig.5) unterschiedlichen
Abstandes von dem Boden 23a besitzt. Beide Segmente 34 und 35 sind mit Durchbrüchen 36 bzw.37 versehen, von
denen die Durchbrüche 36 für die Lagerung der gefrierzutrocknenden
Proben 38 dienen, die sich in Probengefäßen 39 befinden,
während in den Durchbrüchen 37 Vorratsgefäße 40 eingelegt
sind, in denen sich die bei dem Gesamtverfahren erforderlichen Reagenzien befinden, die demzufolge im Reaktionsraum
25a auf die Arbeitstemperatur heruntergekühlt werden. In dem
Segment 35 ist schließlich noch ein Durchbruch 41 für ein Strömungsröhrchen 42 vorhanden, das in einem Durchlaß 43a befestigt
ist, der in dem Boden 23a vorgesehen ist und den Reaktionsraum 25a mit dem Verdampfungsraum 12 strömungstechnisch
verbindet. Das Strömungsröhrchen 42 fördert gasförmiges Kryogen 10 in den Raum über der Halteplatte 33.
Schließlich ist noch in bewährter Weise ein stabförmiger Wärmeleiter
49, vorgesehen, der das flüssige Kryogen 10 mit dem Reaktionsgfäß 21 wärmeleitend verbindet und dadurch dessen
Temperierung beschleunigt. Für einen besseren Wärmeübergang
von dem Reaktionsgefäß 21a auf die Probengefäße 39 sorgt eine beide kontaktierende, geeignete Flüssigkeit 44 wie etwa Methanol,
die den Boden 23a soweit bedeckt, daß ein entsprechender Wärmekontakt hergestellt ist. Sie füllt im wesentlichen den
Raum unterhalb des Segmentes 34 aus, das weniger dick als das Segment 35 ist und etwa auf dessen halber Höhe an diesem angebunden
ist.
Etwas anders ist enstprechend Fig.4 ein Reaktionsgefäß 21b
eingerichtet, das für die Polymerisation des Werkstoffes
dient, in den die Proben 38 eingebettet sind. Auf seinen Boden 23b ist ein Halteeinsatz 32b aufgelegt, der aus gewickeltem
Kupferdraht besteht und an seiner Oberseite spiral ig gewendelte Auflagedrähte 45 bildet (Fig.6). Alle Drahtteile sind gegebenenfalls
durch versteifende Zwischenstücke verbunden. Die durch Gefriersubstitution des Wassers und die Einbettung in
ein polymerisierbares Kunstharz vorbereiteten Proben 38, die
danach in verdrillte Haltedrähte 46 aus Kupfer oder einem anderen guten Wärmeleiter eingelegt oder eingespannt wurden,
sind auf den Auflagedrähten 45 lose angeordnet; zum besseren Wärmeübergang und zur sicheren Arretierung befinden sich auf
der Oberseite der Auflagedrähte 45 jeweils paarweise gegenüberliegende
Kerben 47, in welchen die Haltedrähte 46 eingelegt wurden. In Fig.4 und 6 ist ferner der Durchlaß 43b zu
erkennen, der auch bei dem Reaktionsgefäß 21b den Verdampfungsraum
12 mit dem Reaktionsraum 25b verbindet.
Zu dem Reaktionsgefäß 21b gehört ein Abschlußdeckel 26, in
dem die UV-Lampe so plaziert ist, daß die Proben 38 mit ultraviolettem Licht bestrahlt werden können und so polymerisieren.
Eine zur Vermeidung von flüssigem Niederschlag doppelte Scheibe aus einem Werkstoff, der gut durchlässig für UV-Licht
ist, deckt die UV-Lampe gegen den Reaktionsraum 21b ab. Die UV-Lampe gehört zum bekannten Stand der Technik und ist
deshalb in der Zeichung weggelassen.
Claims (17)
1. Kühleinrichtung zur Probenvorbereitung für ein Elektronenmikroskop
durch Gefriersubstitution und Polymerisation
kleiner vor allem biologischer Proben, im wesentlichen bestehend aus einem Vorratsbehälter für ein Kryogen, einem
Kühlgefäß, das aus dem Vorratsbehälter gespeist wird und
in dem beide Verfahren an den eingebrachten Proben ablaufen, und den für den Prozeßablauf erforderlichen Steuer-
und Regeleinrichtungen,
dadurch gekennzeichnet, daß das Kühlgefäß (1) dreigeteilt
aus einem oben offenen, sonst aber gut wärmeisolierten
Kühlmittelbehälter (7) für ein flüssiges und verdampfendes
Kryogen (10), einem den Kühlmittelbehälter (7) gut wärmeisolierend und abnehmbar abdeckenden Aufsatz (19) mit
einem im Aufsatz (19) angeordneten, oben offenen, sonst aber gut wärmeisolierten Reaktionsgefäß (21) aus einem metallischen
Werkstoff und einem den Aufsatz (19) bedeckenden und dessen Oberseite (20) gut wärmeisolierenden Abschlußdeckel
(26) besteht, und daß der Kühlmittelbehälter
(7) mit dem Aufsatz (19) und der Aufsatz (19) mit dem Abschlußdeckel (26) durch in den jeweiligen, aneinanderstoßenden
Flächen vorgesehene Ringleisten (28,31) trapezförmigen Querschnitts, die in zugehörigen entsprechenden
Ringnuten (30) ebenfalls trapezförmigen Querschnitts oder
kegelstumfförmigen Ausnehmungen (29) des jeweils anschließenden
Gegenstücks (29,30) liegen, miteinander labyrinthdichtungsartig
verbunden sind.
2. Kühleinrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Aufsatz (19) mit einem zur Durchführung der Gefriersubstitution
eingerichteten Reaktionsgefäß (21a) ausgerüstet ist.
3. Kühleinrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,
daß der Aufsatz (19) mit einem zur Durchführung der Polymerisation eingerichteten Reaktionsgefäß (21b) ausgerüstet
ist.
4. Kühleinrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Reaktionsgefäß (21) in dem Aufsatz (19) auswechselbar
ist.
5. Kühleinrichtung nach Anspruch 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß das Reaktionsgefäß (21) mit dem flüssigen
Kryogen (10) in an sich bekannter Weise durch einen stabförmigen Wärmeleiter (49) wärmeleitend verbunden ist.
6. Kühleinrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch
gekennzeichnet, daß der Verdampfungsraum (12) des Kühlmittelbehälters
(7) mit einem vom Innern des Reaktionsgefäßes (21) gebildeten Reaktionsraum (25) durch einen einfachen,
den Boden (23) des Reaktionsgefäßes (21) einschließlich dessen Isolierung durchsetzenden Durchlaß (43) strömungstechnisch
verbunden ist.
7. Kühleinrichtung nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet,
daß der Durchlaß (43) mit einem in das Reaktionsgefäß (21)
ragenden Strömungsröhrchen (42) versehen ist.
8. Kühleinrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch
tj. daß der Abschlußdeckel (26) auf das Reaktionsgefäß
(21) nur soweit gegen die Umgebung (27) abdichtend aufgebracht ist, daß noch ein geringer Gasaustausch zwischen
dem Reaktionsraum (25) des Reaktionsgefäßes (21) und der Umgebung (27) stattfinden kann.
9. Reaktionsgefäß zur Gefriersubstitution in einer Kühleinrichtung
nach einem der Ansprüche 1 oder 2 oder 4 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß in dem Reaktionsraum (21a) ein
Halteeinsatz (32a) für Probengefäße (39) so angeordnet ist, daß die Probengefäße (39) teilweise in eine den Boden (23a)
des Reaktionsraumes (25a) bedeckenden, als thermischer Puffer dienenden Flüssigkeit (44) wie beispielsweise Methanol
eintauchen, im übrigen aber mit dem Boden (23a) nicht wärmeleitend verbunden sind.
10. Reaktionsgefäß zur Gefriersubstitution in einer Kühleinrichtung
nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Halteeinsatz (32a) eine Halteplatte (33) mit Durchbrüchen
(36,37) zur Aufnahme von Vorratsgefäßen (40) für die für
die Gefriersubstitution und/oder eine Kunstharzimprägnierung
erforderlichen Solvenzien aufweist, die in die als thermischer Überträger dienende Flüssigkeit (44) eintauchen.
11. Reaktionsgefäß zur Polymerisation der biologischen Proben
in einer Kühleinrichtung nach einem der Ansprüche 1 oder
3 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß ein mit dem Boden
(23b) des Reaktionsgefäßes (21b) wärmeleitend verbundener Halteeinsatz (32b) aus einem gut wärmeleitenden Werkstoff vorgesehen ist, der waagerechte, beispielsweise spiral ig
gewendelte Auflegedrähte (45) aufweist, die sämtlich miteinander verbunden sind und wobei auf davon jeweils mindestens zwei die in Kunstharz eingebetteten Proben (38) mittels Haltedrähten (46) frei aufgelegt sind.
(23b) des Reaktionsgefäßes (21b) wärmeleitend verbundener Halteeinsatz (32b) aus einem gut wärmeleitenden Werkstoff vorgesehen ist, der waagerechte, beispielsweise spiral ig
gewendelte Auflegedrähte (45) aufweist, die sämtlich miteinander verbunden sind und wobei auf davon jeweils mindestens zwei die in Kunstharz eingebetteten Proben (38) mittels Haltedrähten (46) frei aufgelegt sind.
12. Reaktionsgefäß zur Polymerisation der biologischen Proben in einer Kühleinrichtung nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß die Auflegedrähte (45) mit oben angeordneten
Kerben (47) zur Aufnahme der Haltedrähte (46) versehen
sind.
sind.
13. Kühleinrichtung nach einem der Ansprüche 1 oder 3 bis 8
sowie 11 oder 12 mit einem Reaktionsgefäß zur Polymerisation der biologischen Proben, dadurch gekennzeichnet. daß in dem Abschlußdeckel (26b) eine UV-Lampe (18) vorgesehen ist.
sowie 11 oder 12 mit einem Reaktionsgefäß zur Polymerisation der biologischen Proben, dadurch gekennzeichnet. daß in dem Abschlußdeckel (26b) eine UV-Lampe (18) vorgesehen ist.
14. Kühleinrichtung nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet,
daß die UV-Lampe (18) durch eine doppelte Scheibe (48) aus für UV-Licht durchlässigem Werkstoff gegen den Reaktionsraum (25b) abgedeckt ist.
15. Kühleinrichtung nach einem der Anspruch 1 bis 14, dadurch
gekennzeichnet, daß unterhalb des Bodens (23) des Reaktionsgefäßes (21) eine thermostatisch gesteuerte Heizeinrichtung
(22), vorzugsweise ein Leistungstransistor, vorgesehen ist.
16. Kühleinrichtung nach einem der Anspruch 1 bis 15, dadurch
gekennzeichnet, daß zwischen dem Vorratsbehälter (2) für das Kryogen (10) und dem Kühlmittelbehälter (7) eine Fördereinrichtung
(14) für das Kryogen (10) vorgesehen ist, die in Abhängigkeit von dem Flüssigkeitsstand (11) in dem
Kühlmittelbehälter (7) geschaltet wird,
17. Kühleinrichtung nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet,
daJ3 eine Zeitschalteinrichtung (4) vorgesehen ist, welche
die Fördereinrichtung (14) außerdem zeitabhängig schaltet,
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE9104344U DE9104344U1 (de) | 1991-04-10 | 1991-04-10 | Kühleinrichtung zur Probenvorbereitung für ein Elektronenmikroskop |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE9104344U DE9104344U1 (de) | 1991-04-10 | 1991-04-10 | Kühleinrichtung zur Probenvorbereitung für ein Elektronenmikroskop |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE9104344U1 true DE9104344U1 (de) | 1991-08-08 |
Family
ID=6866152
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE9104344U Expired - Lifetime DE9104344U1 (de) | 1991-04-10 | 1991-04-10 | Kühleinrichtung zur Probenvorbereitung für ein Elektronenmikroskop |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE9104344U1 (de) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE102004041965A1 (de) * | 2004-08-31 | 2006-03-09 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zur Gefriersubstitution und Einbettung von biologischen Proben |
DE102004046762A1 (de) * | 2004-09-24 | 2006-04-06 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Vorrichtung zur Polymerisation von biologischen Proben bei der Gefriersubstitution und Verwendung von Dioden mit UV-Anteilen |
DE102005003286A1 (de) * | 2005-01-25 | 2006-07-27 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Behälter für eine Vorrichtung zur automatisierten Gefrier- oder Tieftemperatursubstitution |
DE102005003284A1 (de) * | 2005-01-25 | 2006-07-27 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Dewar-Gefäß zur automatisierten Gefrier- oder Tieftemperatursubstitution und Vorrichtung zur automatisierten Gefrier- oder Tieftemperatursubstitution |
Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE1751051B2 (de) * | 1968-03-26 | 1973-06-14 | Siemens AG, 1000 Berlin u 8000 München | Kryostat mit einer vakuumkammer |
DE2349585A1 (de) * | 1973-10-03 | 1975-04-10 | Leybold Heraeus Gmbh & Co Kg | Kuehlbad |
GB2117660A (en) * | 1982-02-22 | 1983-10-19 | David John Ayres | Fluidisation apparatus |
DD208209A1 (de) * | 1981-12-05 | 1984-03-28 | Adl Der Ddr Fz F Tierproduktio | Kryostat |
US4485641A (en) * | 1982-07-07 | 1984-12-04 | L'air Liquide, Societe Anonyme Pour L'etude Et L'exploitation Des Procedes Georges Claude | Device for freezing biological products |
DE3404937A1 (de) * | 1984-02-11 | 1985-08-14 | Bernhard Dr. 7801 Buchenbach Wolf | Vorrichtung zum einfrieren von biopsiematerial |
DE3425744A1 (de) * | 1984-07-12 | 1986-01-16 | C. Reichert Optische Werke Ag, Wien | Vorrichtung zur entwaesserung und/oder polymerisationseinbettung biologischer proben bei tiefen temperaturen |
DE3532606C1 (de) * | 1985-09-12 | 1986-11-13 | C. Reichert Optische Werke Ag, Wien | Vorrichtung zur Metallspiegel-Kryofixation von insbesondere biologischen Objekten |
DE3517518A1 (de) * | 1985-05-15 | 1986-11-20 | Fa. Carl Zeiss, 7920 Heidenheim | Kuehlkammer zum bearbeiten von objekten fuer mikroskopische oder elektronenmikroskopische untersuchungen |
DE2944464C2 (de) * | 1979-11-03 | 1987-12-03 | C. Reichert Optische Werke Ag, Wien, At | |
DE3024029C2 (de) * | 1979-06-28 | 1987-12-23 | Jacques Montpellier Fr Rivoire |
-
1991
- 1991-04-10 DE DE9104344U patent/DE9104344U1/de not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE1751051B2 (de) * | 1968-03-26 | 1973-06-14 | Siemens AG, 1000 Berlin u 8000 München | Kryostat mit einer vakuumkammer |
DE2349585A1 (de) * | 1973-10-03 | 1975-04-10 | Leybold Heraeus Gmbh & Co Kg | Kuehlbad |
DE3024029C2 (de) * | 1979-06-28 | 1987-12-23 | Jacques Montpellier Fr Rivoire | |
DE2944464C2 (de) * | 1979-11-03 | 1987-12-03 | C. Reichert Optische Werke Ag, Wien, At | |
DD208209A1 (de) * | 1981-12-05 | 1984-03-28 | Adl Der Ddr Fz F Tierproduktio | Kryostat |
GB2117660A (en) * | 1982-02-22 | 1983-10-19 | David John Ayres | Fluidisation apparatus |
US4485641A (en) * | 1982-07-07 | 1984-12-04 | L'air Liquide, Societe Anonyme Pour L'etude Et L'exploitation Des Procedes Georges Claude | Device for freezing biological products |
DE3404937A1 (de) * | 1984-02-11 | 1985-08-14 | Bernhard Dr. 7801 Buchenbach Wolf | Vorrichtung zum einfrieren von biopsiematerial |
DE3425744A1 (de) * | 1984-07-12 | 1986-01-16 | C. Reichert Optische Werke Ag, Wien | Vorrichtung zur entwaesserung und/oder polymerisationseinbettung biologischer proben bei tiefen temperaturen |
DE3517518A1 (de) * | 1985-05-15 | 1986-11-20 | Fa. Carl Zeiss, 7920 Heidenheim | Kuehlkammer zum bearbeiten von objekten fuer mikroskopische oder elektronenmikroskopische untersuchungen |
DE3532606C1 (de) * | 1985-09-12 | 1986-11-13 | C. Reichert Optische Werke Ag, Wien | Vorrichtung zur Metallspiegel-Kryofixation von insbesondere biologischen Objekten |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JP 61-189435 A. In: Patents Abstracts of Japan, P-536, Jan.16, 1987, Vol.11/No.15 * |
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE102004041965A1 (de) * | 2004-08-31 | 2006-03-09 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zur Gefriersubstitution und Einbettung von biologischen Proben |
DE102004041965B4 (de) * | 2004-08-31 | 2009-08-13 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zur Gefriersubstitution und Einbettung von biologischen Proben |
US7591981B2 (en) | 2004-08-31 | 2009-09-22 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Apparatus and method for cryosubstitution and embedding of biological specimens |
DE102004046762A1 (de) * | 2004-09-24 | 2006-04-06 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Vorrichtung zur Polymerisation von biologischen Proben bei der Gefriersubstitution und Verwendung von Dioden mit UV-Anteilen |
DE102004046762B4 (de) * | 2004-09-24 | 2009-01-15 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Vorrichtung zur Polymerisation von biologischen Proben bei der Gefriersubstitution und Verwendung von Dioden mit UV-Anteilen |
DE102005003286A1 (de) * | 2005-01-25 | 2006-07-27 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Behälter für eine Vorrichtung zur automatisierten Gefrier- oder Tieftemperatursubstitution |
DE102005003284A1 (de) * | 2005-01-25 | 2006-07-27 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Dewar-Gefäß zur automatisierten Gefrier- oder Tieftemperatursubstitution und Vorrichtung zur automatisierten Gefrier- oder Tieftemperatursubstitution |
US7547416B2 (en) | 2005-01-25 | 2009-06-16 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Dewar vessel for automated cryosubstitution or low-temperature substitution, and apparatus for automated cryosubstitution or low-temperature substitution |
DE102005003286B4 (de) * | 2005-01-25 | 2009-07-02 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Behälter für eine Vorrichtung zur automatisierten Gefrier- oder Tieftemperatursubstitution |
DE102005003284B4 (de) | 2005-01-25 | 2022-05-05 | Leica Mikrosysteme Gmbh | Dewar-Gefäß zur automatisierten Gefrier- oder Tieftemperatursubstitution |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0226936B1 (de) | Verfahren und Vorrichtung zum thermischen Polymerisieren von Kunststoffen für Dentalzwecke | |
DE3042578C2 (de) | ||
DE4012600A1 (de) | Kuehlkammer an einem mikrotom und verfahren zur einstellung der kuehlkammertemperatur | |
DE9104344U1 (de) | Kühleinrichtung zur Probenvorbereitung für ein Elektronenmikroskop | |
AT403097B (de) | Vorrichtung zur entwässerung und/oder einbettung von proben | |
DE3416789C2 (de) | Vorrichtung zur alternativen Kryofixation biologisch-medizinischer oder technischer Objekte mit hohem Wasser-bzw. Flüssigkeitsgehalt durch Immersion bzw. am Metallspiegel | |
DE102005003286A1 (de) | Behälter für eine Vorrichtung zur automatisierten Gefrier- oder Tieftemperatursubstitution | |
DE1433816B2 (de) | Atmosphärische Abdichtung | |
EP0343413A2 (de) | Vorrichtung zum Reinigen solcher Teile von Kunststoffverarbeitungsmaschinen, an denen Kunststoffreste anhaften | |
CH627659A5 (de) | Anlage zum trocknen und entgasen von oel, insbesondere von kabeloel. | |
DE4017565A1 (de) | Vorrichtung zum gefrieren von schuett- und fliessfaehigen stoffen | |
EP0202599B1 (de) | Kühlkammer zum Bearbeiten von Objekten für mikroskopische oder elektronenmikroskopische Untersuchungen | |
EP0222731A2 (de) | Druckwechseladsorber für die Aufnahme von körnigen Adsorptionsmitteln | |
DE3225672C2 (de) | ||
AT392423B (de) | Vorrichtung zum einbringen von gasen in festbettfilter | |
DE3024709A1 (de) | Transportbehaelter fuer metallschmelzen | |
DE3037593C2 (de) | Injektor zum Einspritzen von plastischem Wachs | |
DE1778456A1 (de) | Verfahren und Vorrichtung zum Gefriertrocknen | |
DE2936428C2 (de) | Heißwasserbereiter, insbesondere Kochendwassergerät | |
DE746588C (de) | Kippbarer Acetylenentwickler | |
DE2413085A1 (de) | Gefriergeraet | |
DE3520476C2 (de) | ||
DE10043323A1 (de) | Selektiv erwärmbarer Substanzträger | |
DE2858068C2 (de) | Wärmebehandlungs-Vorrichtung zur Verlängerung der Lebensdauer eines Druckbehälters, insbesondere eines Reaktordruckbehälters | |
DE2953696C2 (de) | Inkubationseinrichtung zur Behandlung von histologischen Präparaten |