DE69618688T2

DE69618688T2 - Nahrungsmittelzusammensetzung mit Fischmilch

Info

Publication number: DE69618688T2
Application number: DE69618688T
Authority: DE
Inventors: Tadashi Idota; Hiroshi Kawakami; Taku Nakano
Original assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Current assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Priority date: 1995-03-03
Filing date: 1996-03-02
Publication date: 2002-11-21
Anticipated expiration: 2016-03-03
Also published as: JP3366769B2; AU710332B2; AU4333796A; DE69618688D1; EP0729710A1; JPH08238072A; EP0729710B1

Description

ERFINDUNGSGEBIET

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf eine Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder, die gemahlene Fischmilch(zellen) und/oder eine Fischmilchfraktion enthält. Der Ausdruck "Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder", wie er in der vorliegenden Erfindung verwendet wird, bedeutet Säuglingsmilch, proteinhydrolysierte Milch, Folgemilch und besonders modifizierte Nahrungsmilch, die für Kleinkinder hergestellt werden; und Entwöhnungsnahrung für Säuglinge. Weiterhin umfasst die erfindungsgemäße Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder Milchpulver und Entwöhnungsnahrung, die getrocknet und pulverisiert sind.

HINTERGRUND DER ERFINDUNG

Fischmilch wird aus Lachs, Forelle, Kabeljau, Hering und dergleichen gewonnen. Nur ein Teil der Fischmilch wird für Nahrungszwecke verwendet, und das meiste davon verworfen. Sie stellt daher eine nicht ausgenützte (Nahrungs-)Quelle dar. Es ist bekannt, dass die Fischmilch viele wirksame Bestandteile, wie Nukleinsäuren, die zum größten Teil aus DNS, und basische Proteine, die zum größten Teil aus Protamin bestehen, enthält. Es wurden verschiedene Verfahren zur Extraktion dieser wirksamen Bestandteile aus der Fischmilch untersucht. Beispielsweise sind viele Verfahren, wie ein Verfahren zur Herstellung von Desoxyribonukleinsäure (DNS) (Japanische nichtgeprüfte Patentveröffentlichung Nr. Hei 1-128795), ein Verfahren zur Herstellung von Protamin (Japanische nichtgeprüfte Patentveröffentlichungen Nrn. Sho 62-187491, Sho 63-301900, Hei 2-264800 und Hei 2- 279699) offenbart.
Die physiologischen Wirkungen der Fischmilch nach oraler Verabreichung sind jedoch kaum bekannt. In letzter Zeit wurde begonnen, die in der Fischmilch enthaltenen Nukleinsäuren in die Gesundheit fördernde Nahrungsmittel zur Vermeidung von Alterungserscheinungen und Krankheiten bei Erwachsenen und zur Konservierung des Nahrungsmittels durch die antibakteriellen Eigenschaften der basischen Proteine zu verwenden. Solche Nahrungsmittel sind in den Japanischen nicht geprüften Patentveröffentlichungen Nrn. sho 61-195651, 61-40766 und 61-152963 offenbart. Diese Nahrungsmittel sind jedoch zur Verbesserung der regenerativen Fähigkeiten und Ausdauer Erwachsener bestimmt. Obwohl daher viele Verfahren, die die Fischmilch betreffen, veröffentlicht sind, wird die Fischmilch nur in Nahrungsmitteln für Erwachsene verwendet.
Bei Nahrungsmittelzusammensetzungen für Kleinkinder sind andererseits durch die jüngsten technologischen Fortschritte Produkte auf dem Markt erschienen, die der Muttermilch, die in Bezug auf die Bestandteile das Standardziel darstellt, sehr ähnlich sind. In Bezug auf ihre Funktionen verbleiben aber noch viele Probleme im Vergleich zur Muttermilch. Besonders bei Funktionen wie der Verbesserung des Stuhls bei Diarrhoe, grünem Stuhl und dergleichen, der Verbesserung des Verhältnisses der Stickstoffverwertung, der Verbesserung von Verdauungs- und Absorptionseigenschaften, der Vorbeugung allergischer Krankheiten, der Immunopotentiation, der Verbesserung der Darmbakterienflora, einschließlich Hemmung schädlicher Bakterien, der Verbesserung der Eisenaufnahme, der Verbesserung des Fettstoffwechsels, der Verbesserung von Lernfähigkeiten und der Knochenstärkung gelten die Nahrungsmittelzusammensetzungen für Kleinkinder nicht als ausreichend gleichwertig im Vergleich zur Muttermilch.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Es wurde daher nach einer Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder geforscht, um eine Zusammensetzung zu finden, deren Funktionen denen der Muttermilch ähnlicher sind. Es wurde gefunden, dass Wirkungen, die mit den herkömmichen Nahrungsmittelzusammensetzungen für Kleinkinder nicht erzielt werden konnten, erzielt werden können, indem gemahlene Fischmilch(zellen) oder eine Fischmilchfraktion in eine Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder aufgenommen werden.
Es ist ein erfindungsgemäßes Ziel, eine Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder bereitzustellen, die dieselben Funktionen wie Muttermilch aufweist.
Erfindungsgemäß wird eine Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder bereitgestellt, die gemahlene Fischmilch(zellen) und/oder eine Fischmilchfraktion enthält.
Erfindungsgemäß wird weiterhin eine Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder bereitgestellt, die gemahlene Fischmilch(zellen) und/oder eine Fischmilchfraktion in einer Menge von 0,01 bis 10 Gew.-%, bezogen auf den Feststoffgehalt der Zusammensetzung, enthält.
Erfindungsgemäß wird weiterhin eine Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder bereitgestellt, wobei die gemahlenen Fischmilch(zellen) hergestellt werden, indem die äußere Haut der Fischmilch(zellen) entfernt und diese gemahlen werden und die mit einer oder mehreren Lösungen, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Wasser, Salzwasser und Alkohol, deodorisiert werden.
Erfindungsgemäß wird ferner eine Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder bereitgestellt, wobei die Fischmilchfraktion hergestellt wird, indem die Fischmilch deodorisiert und nach einem oder mehreren Verfahren, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Säureextraktion und Enzymhydrolyse, behandelt wird.
Erfindungsgemäß wird weiterhin eine Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder bereitgestellt, wobei die Fischmilchfraktion hergestellt wird, indem die Fischmilch deodorisiert und nach einem oder mehreren Verfahren, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Säureextraktion und Enzymhydrolyse, behandelt wird, und anschließend nach einem oder mehreren Verfahren, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Fällungsfraktionierung, Behandlung mit Ionenaustauscherharz, Gelfiltration, Membranfraktionierung oder Elektrodialyse, weiter gereinigt wird.

DETAILBESCHREIBUNG DER ERFINDUNG

Die vorliegende Erfindung wird nachfolgend im Detail beschrieben.
Die erfindungsgemäße Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder enthält als Hauptbestandteile Proteine, Lipide, Kohlenhydrate, Vitamine und Mineralien, jedoch können andere wirksame Bestandteile aufgenommen werden, die in Nahrungsmittelzusammensetzungen für Kleinkinder enthalten sein können.
Als Proteine können Milchprotein wie Kasein, Proteinkonzentrate aus Molke (whey protein concentrates, WPC), Proteinisolate aus Molke (whey protein isolates, WPI), αs-Kasein, β-Kasein, α-Lactalbumin und β-Laktoglobulin; Milchproteinfraktionen, Eiproteine; Pflanzenproteine wie Proteine aus Sojabohnen und Proteine aus Weizen in der Nahrungsmittelzusammensetzung enthalten sein. Diese Proteine können weiterhin mit Säuren und Enzymen behandelt werden, und können in der Zusammensetzung in der Form von Peptiden oder freien Aminosäuren enthalten sein. Die freien Aminosäuren können verwendet werden, um daneben eine bestimmte physiologische Aktivität als Stickstoffquelle bereitzustellen. Als Beispiele können Taurin, Cystin, Cystein, Arginin, Glutamin und dergleichen angegeben werden. Diese Proteine, Peptide und freien Aminosäuren sind in der Nahrungsmittelzusammensetzung vorzugsweise in einer Menge von 5 bis 30 Gew.-%, bezogen aus den Feststoffgehalt der Zusammensetzung, enthalten.
Als Beispiele für Kohlenhydrate können Stärke, lösliche Polysaccharide, Dextrin, Saccharose, Laktose, Maltose, Glukose, Oligosaccharide wie 6'-Galaktosyllaktose, Fruktooligosaccharide, Laktulose, oder jeder beliebige künstliche Süßstoff angegeben werden, und eines dieser Kohlenhydrate kann verwendet werden. Die Menge der in der Nahrungsmittelzusammensetzung enthaltenen Kohlenhydrate beträgt vorzugsweise 40 bis 80 Gew.-%, bezogen auf den Feststoffgehalt der Zusammensetzung.
Als Beispiele für Lipide können tierische Fette wie Milchfett, Schmalz, Rindertalg und Fischöle; pflanzliche Öle wie Sojabohnenöl, Rapssamenöl, Maisöl, Kokosnussöl, Palmöl, Palm-Pit-Öl (palm pit oil), Safranöl, Perillaöl, Leinsamenöl, Primelöl, Fettsäuretriglyzeride mittlerer Kettenlänge (middle-chain fatty triglyceride (MCT)) und Baumwollsamenöl; fraktioniertes Öl, hydriertes (gehärtetes) Öl und damit umgeestertes Öl angegeben werden, und eines oder mehrere dieser Öle können verwendet werden. Die Lipide sind in der Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder vorzugsweise in einer Menge von 40 Gew.-% oder weniger, bezogen auf den Feststoffgehalt der Zusammensetzung, enthalten.
Als Vitamine und Mineralien können eines oder mehrere Vitamine und Mineralien verwendet werden, die in Nahrungsmittelzusammensetzungen für Kleinkinder verwendet werden können und die in Codex alimentarius, Vol. IV, Nahrungsmittel für speziellen diätetischen Gebrauch (einschließlich Nahrungsmittel für Kleinkinder und Kinder), zweite Auflage, Food and Agriculture Organization of the United Nations and World Health Organization (1994), CAC/VOL. IX-1. Auflage und Ergänzungen 1, 2, 3, 4 (1993), veröffentlicht von Nihon Kokusai Rakuno Renmei, "1993 Handbook For Specified Item Food additives (revidierte 31. Auflage)(1993), veröffentlicht von Shokukin to Kagakusha", und "Handbook for Application systems for Food Additives and Natural Food Materials (12. Auflage)(1992), veröffentlicht von Shokukin to Kagakusha", beschrieben sind.
Als Beispiele für Vitamine können Vitamin A, Bs, C, D, E, Ks, Folsäure, Pantothensäure, β-Carotin, Nicotinsäureamid und dergleichen angegeben werden. Die Menge an in der Nahrungsmittelzusammensetzung enthaltenem Vitamin liegt vorzugsweise im Bereich von 10 mg bis 5 g Gew.-%, bezogen auf den Feststoffgehalt der Zusammensetzung.
Als Beispiele für Mineralien können Calcium, Magnesium, Kalium, Natrium, Eisen, Kupfer, Zink, Iod, Mangan, Selen und dergleichen angegeben werden. Die Mineralien sind in der Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder vorzugsweise in einer Menge von 1 mg bis 5 g Gew.-%, bezogen auf den Feststoffgehalt der Zusammensetzung, enthalten.
Die erfindungsgemäße Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder besteht aus den vorstehend angegebenen Proteinen, Lipiden, Kohlenhydraten, Vitaminen und Mineralien als Hauptbestandteilen und enthält gemahlene Fischmilch(zellen) und/oder eine Fischmilchfraktion. Die Fischmilch kann aus jedem beliebigen Seetier wie Lachs, Forelle, Kabeljau, Hering, Tintenfisch und Kammmuschel gewonnen werden. In Anbetracht der effektiven Ausnützung der Ressourcen ist es jedoch bevorzugt, die Fischmilch von Seetieren mit großen Fangmengen, wie Lachs, Forelle und Kabeljau, zu verwenden. Daher sind die Bestandteile der Fischmilch von Lachs und Hering in der nachstehenden Tabelle 1 angegeben. Tabelle 1
Vorzugsweise wird die äußere Haut entfernt und die Fischmilch homogenisiert und gemahlen, um eine Paste oder eine Flüssigkeit herzustellen, da die Fischmilch nicht in ihrer ursprünglichen Form in die Zusammensetzung aufgenommen werden kann. So behandelte Fischmilch hat einen starken, der Fischmilch eigenen Geruch. Die Fischmilch wird daher vorzugsweise verwendet, nachdem die Deodorisierungs- und Reinigungsbehandlung und dergleichen durchgeführt wurden. Um die Fischmilch zu deodorisieren, werden Wasser, Salzwasser oder eine Alkohollösung oder Mischungen davon zu der pastösen oder flüssigen Fischmilch zugegeben, und die Fischmilch wird unter Rühren gewaschen. Anschließend werden die äußere Haut und Verunreinigungen, wie Blutbestandteile, durch Zentrifugieren oder Filtration und dergleichen entfernt, und die gemahlene Fischmilch wird gesammelt. Da die gemahlene Fischmilch bei der Herstellung deodorisiert wurde und Verunreinigungen entfernt wurden, kann sie einer Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder zugesetzt und damit gemischt werden, auch wenn diese als Flüssigkeit, Aufschlämmung, Paste oder durch Gefriertrocknen oder Sprühtrocknen als Pulver hergestellt wird, so dass sie bei der Verarbeitung einfach einzusetzen ist.
Die gemahlenen, deodorierten und von Verunreinigungen befreiten Fischmilch(zellen) können danach nach einem oder mehreren Verfahren, ausgewählt aus der Gruppe der Säureextraktion und Enzymhydrolyse, behandelt werden, und können in der Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder aufgenommen werden. Das Extraktionsverfahren mit Säure umfasst beispielsweise die Zugabe einer 0,01 N bis 6 N Mineralsäure, wie Schwefelsäure oder Salzsäure, zu der die gemahlenen, deodorierten und von Verunreinigungen befreiten Fischmilch(zellen) enthaltenden Lösung, worauf 0,5 bis 6 Stunden bei 30 bis 80ºC gerührt wird; anschließend wird die Lösung zentrifugiert, um den Überstand von dem Präzipitat (Niederschlag) abzutrennen, und das Präzipitat wird als Fischmilchfraktion gesammelt.
Das Verfahren der Enzymhydrolyse umfasst beispielsweise die Zugabe von Protease und/oder Nuklease in einer Menge von 10 bis 10.000.000 Einheiten (in Abhängigkeit von der Menge der zu behandelnden Fischmilch) zu der die gemahlenen, deodorierten und von Verunreinigungen befreiten Fischmilch(zellen) enthaltenden Lösung, worauf die Enzyme 0,5 bis 8 Stunden bei 20 bis 70ºC unter Rühren aktiviert werden; anschließend wird die Lösung zentrifugiert, um den Überstand von dem Präzipitat (Niederschlag) abzutrennen, und das Präzipitat wird als Fischmilchfraktion gesammelt. Die Fischmilch wird durch die Enzymhydrolysebehandlung in eine besser verdaubare und absorbierbare Form umgewandelt, wodurch sich die Fischmilch für Säuglinge mit unzureichender Verdauung und Absorption eignet.
Die Fischmilchfraktion kann sowohl durch Säureextraktion als auch durch Enzymhydrolyse behandelt werden. Geeignete Proteasen sind beispielsweise von Tieren oder Pflanzen stammende Enzyme wie Trypsin, Papain, und von Mikroorganismen, wie dem Stamm Aspergillus, Rhizopus uns Bacillus produzierte Enzyme. Als Nuklease kann beispielsweise von Tieren oder Mikroorganismen erhaltene Desoxyribonuklease verwendet werden.
Wie vorstehend beschrieben, enthält die im Überstand vorhandene Fraktion der durch Säureextraktion behandelten Fischmilch als Hauptbestandteil Protein, ferner Nukleinsäure und Spuren von Polyamin. Die Bestandteile schwanken in Abhängigkeit von der Art des zur Herstellung der Fischmilch verwendeten Seetieres, aber das Verhältnis von Nukleinsäure zu Protamin beträgt etwa 1 : 9.
Andererseits beträgt das Verhältnis von Nukleinsäure zu Protamin in den Präzipitatfraktionen der Fischmilch etwa 8 : 2.
Die so erhaltene Fischmilchfraktion kann in die Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder aufgenommen werden. Versuche haben ergeben, dass die im Überstand enthaltende Fraktion einen großen Einfluß auf die Verbesserung der Diarrhöe und des grünen Stuhls hat, während die im Präzipitat enthaltene Fraktion günstig auf die Verbesserung des Verhältnisses der Stickstoffverwertung und der Verbesserung der Verdauungs- und Absorptionseigenschaften wirkt. Es ist daher zweckmäßig, wenn jede Fraktion in Abhängigkeit von den Zielen in die Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder aufgenommen wird. Zusätzlich ist es natürlich möglich, die im Überstand und die im Präzipitat enthaltende Fraktion zusammen aufzunehmen, wodurch die Wirkungen beider Fraktionen kombiniert werden können.
Ferner können die im Überstand und die im Präzipitat enthaltende Fraktion, die durch die Säure- und/oder Enzymbehandlung hergestellt werden, weiter nach einem oder mehreren Verfahren, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Fällungsfraktionierung, Behandlung mit Ionenaustauscherharz, Gelfiltration, Membranfraktionierung und Elektrodialyse gereinigt werden. Für die im Überstand enthaltende Fraktion können beispielsweise als Reinigungsverfahren eingesetzt werden: eine Fraktionierung durch Abkühlen auf 15ºC oder weniger und stehenlassen; eine Fraktionierung durch Zugabe anorganischer Salze, wie Sulfat und Hydrochlorid und stehenlassen; eine Fraktionierung durch Zugabe von Alkohol und stehenlassen. Als Ionenaustauscherharze können solche mit Sulfosäuregruppen, Sulfopropylgruppen, Phosphorsäuregruppen, Carboxymethylgruppen, Aminoethylgruppen, Diethylaminogruppen, tertiären Aminoethylgruppen und tertiären Ammoniumgruppen verwendet werden. Die Reinigung wird durchgeführt, indem die Lösungen durch die mit diesen Harzen gefüllte Säule laufen gelassen und so damit in Kontakt gebracht werden. Zusätzlich können Membrantrennungsverfahren und Gelfiltrationsverfahren eingesetzt werden, da die Molekulargewichte von Polyamin und Protamin unterschiedlich sind. Das Molekulargewicht von Polyamin beträgt etwa 90 bis 200, und das von Protamin etwa 1.000 bis 12.000. Um sje zu fraktionieren, können eine geeignete Ultrafiltrationsmembran, Mikrofiltrationsmembran, Umkehrosmosemembran oder Gelfiltrationsmembran gewählt werden. Bei den vorstehend erwähnten Verfahren kann jedes Verfahren in Kombination mit jedem anderen verwendet werden, um den Reinheitsgrad zu erhöhen.
Zusätzlich können die vorstehend genannten Reinigungsverfahren auch auf die im Präzipitat enthaltende Fraktion angewendet werden, und diese in Polyamin, Protamin und Nukleinsäuren fraktioniert werden.
Die mit den vorstehend beschriebenen Verfahren hergestellte(n) gemahlenen Fischmilch(zellen) oder Fischmilchfraktion können (kann) einzelnen oder als Mischung in der Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder enthalten sein. Ihre Menge in der Zusammensetzung beträgt 0,01 bis 10 Gew.-% basierend auf dem Feststoffgehalt der Zusammensetzung. Bei Mengen unterhalb 0,01 Gew.- % können die Wirkungen wie Verbesserung des Stuhls, Verbesserung des Stickstoffverwertungsverhältnisses, Verhinderung von Verdauungs- und Absorptionsproblemen und Hemmung allergischer Krankheiten nicht erzielt werden. Wenn andererseits die Menge 10 Gew.-% überschreitet, kommt es zu Problemen wie erhöhtem Fischmilchgeruch, und die Qualität des Erzeugnisses ist vermindert.
Die die erfindungsgemäße(n) Fischmilch(zellen) oder Fischmilchfraktion enthaltende Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder zeigt Wirkungen auf das Immunsystem, verbessert die enterobakterielle Flora, einschließlich Hemmung schädlicher Bakterien, verbessert die Eisenabsorption, verbessert den Lipidmetabolismus, verbessert die Lernfähigkeit und die Knochenstärke, und hat daneben Wirkungen wie die Verbesserung des Stuhls, Verbesserung des Stickstoffverwertungsverhältnisses, Verbesserung von Verdauungs- und Absorptionseigenschaften und Verhinderung allergischer Krankheiten.
Die Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder kann in geeigneter Form nicht nur als Flüssigkeit, sondern auch als Pulver oder Tabletten verwendet werden.
Die vorliegende Erfindung wird nun im Detail anhand der nachstehenden Beispiele näher beschrieben. Die Beispiele sollen jedoch den Umfang der vorliegenden Erfindung nicht beschränken.

BEISPIEL 1

(Herstellung der Fischmilchfraktion)

Nach dem Waschen von 1 kg Lachsfischmilch, deren äußere Haut entfernt wurde, wurde die Fischmilch entwässert. Weitere 3 Liter Wasser wurden zu der Fischmilch zugegeben, und mittels eines Homogenisators homogenisiert. Es wurden 3 Liter 1 N Salzsäure zugegeben und 3 Stunden unter Rühren eine Säureextraktion bei 40ºC durchgeführt. Nach Beendigung der Extraktion wurde zentrifugiert, um den Überstand und die Präzipitate zu fraktionieren. Nach 4 Stunden Kühlen des Überstandes bei 4ºC wurde die präzipitierte Protaminfraktion durch Zentrifugieren entfernt, um den Überstand zu erhalten. Die Fraktion im Überstand wurde mit 30% Natriumhydroxidlösung neutralisiert und anschließend gefriergetrocknet. 1 g der erhaltenen pulverförmigen Fischmilchfraktion enthielten 300 mg Polyamin und 10 mg Protamin.

(Herstellung von Kleinkindernahung)

7,5 kg Molkeproteinkonzentrat und 44 kg Laktose wurden gemischt und in 240 kg entfetteter Milch gelöst. Die Lösung wurde mit jeweils 1 kg der wasserlöslichen Vitaminbestandteile (Vitamin B&sub1;, B&sub2;, B&sub6;, B&sub1;&sub2;, C, Niacin, Folsäure, Pantothensäure, Biotin, Cholin, Inosit) und der mineralischen Bestandteile (Calciumcarbonat, Kaliumchlorid, Magnesiumsulfat, Natrium-Eisen-II-citrat, Kupfersulfat, Zinksulfat), einer Lösung, in der 100 g wie vorstehend beschrieben hergestellte pulverförmige Fischmilchfraktion suspendiert und in 300 g heißem Wasser gelöst war, und 23,9 kg modifiziertem Fett, in dem die fettlöslichen Vitamine (Vitamin A, D, E, K, β-Karoten) gelöst waren, gemischt und homogenisiert. Die so erhaltene Lösung wurde sterilisiert, nach einem herkömmlichen Verfahren konzentriert und getrocknet, um 100 kg Milchpulver zu erhalten. Die Kleinkindernahrung enthielt nach dem Auflösen des Milchpulvers in heißem Wasser, um einen Feststoffgehalt von 13% zu erhalten, 13 mg der Fischmilchkomponente in 100 ml.

BEISPIEL 2

(Herstellung der Fischmilchfraktion)

3 Liter Wasser wurden zu 2 kg Lachsfischmilch, deren äußere Haut entfernt wurde, zugegeben, und mittels eines Homogenisators homogenisiert. Es wurden 4 Liter 3 N Schwefelsäure zugegeben und 4 Stunden unter Rühren eine Säureextraktion bei 45ºC durchgeführt. Nach Beendigung der Extraktion wurde zentrifugiert, um den Überstand und die Niederschläge zu fraktionieren. Nach dem Neutralisieren des Überstandes mit 30%-iger Natriumhydroxidlösung wurde dieses durch eine Säule, die mit einem Träger zur Gelfiltration gefüllt war, laufen gelassen, und eine Fraktion mit niedrigem Molekulargewicht und eine Fraktion mit höherem Molekulargewicht gesammelt. Die Fraktion mit niedrigem Molekulargewicht wurde anschließend gefriergetrocknet. 1 g der so erhaltenen pulverförmigen Fischmilchfraktion enthielt 650 mg Polyamin und 10 mg Protamin.

(Herstellung von Kleinkindernahrung)

9,4 kg Molkeproteinkonzentrat und 55 kg Laktose wurden in 300 kg heißem Wasser gelöst. Die Lösung wurde mit einer Lösung, in der 7,1 kg Kasein in einer bestimmten Menge an Alkali, jeweils 1 kg der Vitamin- und der mineralischen Bestandteile (wie in Beispiel 1 beschrieben), einer Lösung, in der 1,5 kg der wie vorstehend beschrieben hergestellten Fischmilchfraktion suspendiert und in bellen 2 und 3 angegeben. Wäßriger Stuhl wurde als Diarrhöe definiert. Tabelle 2 ANZAHL DER ENTLEERUNGEN VOR UND NACH DEM VERSUCH
(Einheit: Anzahl der Tiere) Tabelle 3 HÄRTE DES STUHLS VOR UND NACH DEM VERSUCH
(Einheit: Anzahl der Tiere)
Tabellen 2 und 3 zeigen, dass in der Zusatzmilch-Gruppe die Anzahl der Entleerungen deutlich im Vergleich zu vor der Verabreichung abnehmen, und dass in Bezug auf die Härte des Stuhls der normale Stuhl im Vergleich zur Kontrollgruppe stieg, und die Stuhlparameter sich denen der Muttermilch-Gruppe und der Normalgruppe anglichen. Es wurde daher gezeigt, dass die Fischmilchfraktion die Diarrhöe verbessert und die Stuhlparameter etwa denen der mit Muttermilch gefütterten Säuglinge ähnelten.

ANWENDUNGSBEISPIEL 2

(Bestätigungstest der Verbesserung von grünem Stuhl)

1 bis 7 Monate alte Säuglinge, die Symptome von grünem Stuhl aufwiesen, wurden in die nachstehenden drei Gruppen eingeteilt:
(1) Eine Gruppe von Säuglingen erhielt modifizierte Milch, die durch Auflösen der in Beispiel 2 erhaltenen Kleinkindernahrung in heißer Milch zubereitet war, mit der Abweichung, dass die Milch keine Fischmilchfraktion enthielt (nachstehend als "Kontrollgruppe" bezeichnet).
(2) Eine Gruppe von Säuglingen erhielt modifizierte Milch, die durch Auflösen der in Beispiel 2 erhaltene Kleinkindernahrung in heißem Wasser zubereitet war (nachstehend als "Zusatzmilch-Gruppe" bezeichnet).
(3) Eine Gruppe von Säuglingen erhielt Muttermilch (nachstehend als "Muttermilch-Gruppe" bezeichnet).
Die aufgenommene Menge an modifizierter Milch betrug 600 bis 1.200 ml/Tag, und Entwöhnungsnahrung und feste Nahrung konnte daneben frei aufgenommen werden. Es wird vorausgesetzt, dass die Bestandteile der Nahrungsmittel denjenigen vor dem Versuch etwa gleichen und die Säuglinge, die Entwöhnungsnahrung erhielten, keine besonderen Nahrungsmittel aufnahmen. Die Farbe des Stuhles vor und nach dem Versuch wurde beobachtet. Die Farbe des Stuhls wurde in 5 Stufen eingeteilt, d. h. tiefgelb, blaßgelb, gelbgrün, grün und braun. Die Ergebnisse sind in Tabelle 4 dargestellt. Tabelle 4 FARBE DES STUHLS VOR UND NACH DEM VERSUCH
(Einheit: Anzahl der Säuglinge)
In der Zusatzmilch-Gruppe verringerte sich nach der Verabreichung das Auftreten von grünem Stuhl deutlich im Vergleich zu der Kontrollgruppe, und die Stuhlparameter veränderten sich zu den gleichen wie in der Muttermilch-Gruppe. Es wurde gezeigt, dass die Fischmilchfraktion das Auftreten von grünem Stuhl verbessert und der Stuhl sich dem der Muttermilch-Gruppe angleicht.

Anwendungsbeispiel 3

(Bestätigungstest der Auswirkungen auf die Verbesserung des Stickstoffverwertungsverhältnisses)

Gerade entwöhnte Wistar-Ratten (20 Tage alt, 10 Tiere) wurden in eine Gruppe, deren Nahrung eine Fischmilchfraktion zugesetzt wurde (nachstehend als "Futterzusatz-Gruppe" bezeichnet), und eine Gruppe, deren Nahrung keine Fischmilchfraktion zugesetzt wurde (nachstehend als "Kontrollgruppe" bezeichnet) aufgeteilt. Die Nahrung enthielt Casein als Proteinquelle. In der Kontrollgruppe wurde die Fischmilchfraktion in einer Menge von 1,0 g/100 g zugesetzt, und der Stickstoffgehalt wurde so eingestellt, dass eine Menge von 1,6 g/100 g in der gesamten Nahrung enthalten war.
Die verwendete Fischmilchfraktion wurde durch Entfernen der äußeren Haut von Lachsfischmilch, Homogenisieren, Zusatz von 6 N Salzsäure in äquivalenter Menge, Säureextraktion bei 40ºC über 3 Stunden, Neutralisieren mit 50% Natriumchloridlösung, Zentrifugieren zur Trennung des Überstandes und des Präzipitats, Sammeln der Fraktion im Präzipitat und Gefriertrocknen zur Gewinnung eines Pulvers hergestellt. Dieses Pulver wurde der Tiernahrung 28 Tage lang zugesetzt, worauf die Proteineffizienzrate (protein efficiency rate, PER), der biologische Wert und die Nettoproteinverwertung (net protein utilization, NPU) bestimmt wurden. Die Ergebnisse sind in Tabelle 5 dargestellt. Tabelle 5 ERGEBNISSE DER BESTIMMUNG VON PER, BIOLOGISCHEM WERT UND NPU
Die Futterzusatz-Gruppe zeigte im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant hohe Werte sowohl bei PER, biologischem Wert und NPU. Die Ergebnisse beweisen, dass die Fischmilchfraktion eine steigernde Wirkung auf das Stickstoffverwertungsverhältnis hat.

ANWENDUNGSBEISPIEL 4

(Bestätigungstest der Beschleunigung der Darmreifung)

Junge Wistar-Ratten (10 Tage alt, 10 Tiere) wurden in eine Gruppe mit künstlicher Milchnahrung, zu der gemahlene Fischmilchzellen in einer Menge von 5 mg/100 ml zugesetzt wurden (nachstehend als "Zusatzmilch-Gruppe" bezeichnet) und in eine Gruppe mit künstlicher Milchnahrung, zu der keine gemahlene Fischmilchzellen zugesetzt wurden (nachstehend als "Kontrollgruppe" bezeichnet), eingeteilt. Die gemahlenen Fischmilchzellen wurden hergestellt, indem die äußere Haut von Lachsfischmilchzellen entfernt, homogenisiert, mit heißem Wasser und Alkohol gewaschen, gefriergetrocknet und pulverisiert wurde. In beiden Gruppen wurde 10 Tage nach der Geburt operativ eine Magenkanüle eingesetzt und die Nahrung vollständig künstlich zugeführt. Die künstliche Milch wurde 10 Tage lang vom 10. bis zum 20. Tag nach der Geburt verabreicht. Nach dem Fasten über Nacht wurden die Ratten durch Ausbluten unter Ethernarkose am 21. Tag nach der Geburt getötet und der Dünndarm entfernt. Die Dünndarmschleimhaut wurde bei Eistemperatur vom Dünndarm abgekratzt, in kalter physiologischer Kochsalzlösung aufbewahrt und anschließend eine Dünndarmschleimhautfraktion mit einem Homogenisator hergestellt. Der Proteingehalt der Dünndarmschleimhautfraktion wurde nach dem Lowry-Verfahren bestimmt. Zur Bestimmung der Enzymaktivität des Disaccharid-Abbaus mit Lactase, Saccharase und Maltase wurden Lactose, Saccharose und Maltose als Substrate verwendet, und 50 ul der Substratlösung wurde mit 50 ul der Dünndarmschleimhaut gemischt und 30 Minuten bei 37ºC inkubiert. Anschließend wurden 20 ul des Reaktionsgemischs gesammelt und unter Verwendung eines Tests zur Bestimmung von Glucose (hergestellt von Wako Pure Chemical Industries Co., Ltd.) die Menge an Glucose bestimmt, die durch das Enzym in der Dünndarmschleimhaut hydrolysiert und freigesetzt wurde. Die Ergebnisse sind in Tabelle 6 dargestellt. In der Tabelle 6 sind die Aktivitäten durch die Menge an Glucose (in der Einheit umol), die in einer Minute von 1 g Proteinen aus der Dünndarmschleimhaut erzeugt wird, dargestellt. Zusätzlich wird die Darmreifung durch die Abnahme der Lactaseaktivität und die Zunahme der Saccharase- und Maltaseaktivität dargestellt. Tabelle 6 ERGEBNISSE DER BESTIMMUNG DER ENZYMAKTIVITÄTEN DES DISACCHARIDABBAUS IN DER DÜNNDARMSCHLEIMHAUT
*(U) = (pmol/min/g Protein)
Aus den in der Tabelle 6 gezeigten Ergebnissen ist ersichtlich, dass in der Zusatzmilch-Gruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe die Lactase-Aktivitäten signifikant abnahmen und die Saacharase- und Maltase-Aktivitäten zunahmen. Es wurde daher gezeigt, dass die Reifung der Dünndarmschleimhaut durch die Aufnahme der gemahlenen Fischmilchzellen beschleunigt wird.

ANWENDUNGSBEISPIEL 5

(Bestätigungstest der Inhibition der Permeation von Allergenen)

Junge Wistar-Ratten (10 Tage alt, 10 Tiere) wurde in eine Gruppe mit künstlicher Milchnahrung (enthaltend 10 mg gemahlene Fischmilchzellen/100 ml; nachstehend als "Zusatzmilch-Gruppe" bezeichnet) und in eine Gruppe mit künstlicher Milchnahrung (enthaltend keine gemahlenen Fischmilchzellen; nachstehend als "Kontrollgruppe" bezeichnet), eingeteilt. Die gemahlenen Fischmilchzellen wurden hergestellt, indem die äußere Haut von Lachsfischmilchzellen entfernt, nach einer Dampfbehandlung gefiltert, mit heißem Wasser und Salzlösung gewaschen, gefriergetrocknet und pulverisiert wurde. In beiden Gruppen wurde 10 Tage nach der Geburt operativ eine Magenkanüle eingesetzt und die Nahrung vollständig künstlich zugeführt. Die künstliche Milch wurde 10 Tage lang vom 10. bis zum 20. Tag nach der Geburt verabreicht. Am 21. Tag nach der Geburt wurde eine Lösung von β- Lactoglobulin (β-Lg) durch die Magenkanüle verabreicht und 1 bzw. 2 Stunden danach Blut entnommen. Weiterhin wurden weiße Kaninchen (Japanische Art, männlich) mit β-Lg sensibilisiert und anti-β-Lg Serum erhalten. Unter Verwendung des Antiserums als primärem Antikörper wurde die Menge an β-Lg im Blut mittels eines Sandwich-ELISA-Verfahrens, wobei der zweite Antikörper mit Meerretich-Peroxidase (horseradish peroxidase, PO) markiert war, bestimmt, wobei Blut verwendet wurde, das nach 3 Stunden erhalten worden war. Zusätzlich wurde der anti-β-Lg Antiköper in nach 2 Stunden erhaltenem Blut mittels eines ELISA-Verfahrens unter Verwendung von β-Lg und mit PO markiertem anti-Ratten-IgE-Antikörper (hergestellt von Nordick) bestimmt. Die Ergebnisse sind in Tabelle 7 dargestellt. Tabelle 7 ERGEBNISSE DER BESTIMMUNG VON β-Lg UND β-LgIgE IM BLUT
Die Ergebnisse der Tabelle 7 zeigen, dass in der Zusatzmilch- Gruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe die Menge an aus dem Verdauungstrakt ins Blut gewandertem β-Lg und die Menge des anti-β- LgIgE im Blut signifikant niedriger war. Daher wurde gezeigt, dass die Permeation von Allergenen durch die Aufnahme von gemahlenen Fischmilchzellen und die Produktion von Allergien erzeugenden Antikörpern verhindert wird.
Wie vorstehend beschrieben, wirkt die gemahlene Fischmilchzellen und/oder eine Fischmilchfraktion enthaltende Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder auf die Verbesserung der Stuhlparameter wie Diarrhöe und grünem Stuhl, die Beschleunigung der Darmreifung, die Verbesserung des Stickstoffverwertungsverhältnisses und die Verhinderung allergologischer Krankheiten.
Die erfindungsgemäße Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder ist daher funktionsmäßig mit der Muttermilch gleichzusetzen, und trägt zu einem vergleichsweise ausgezeichneten Wachstum der Säuglinge im Vergleich zu Säuglingen, die Muttermilch erhalten, bei. Die erfindungsgemäße Nahrungsmittelzusammensetzung ist daher sehr nützlich.

Claims

1. Nahrungsmittelzusammensetzung für Kleinkinder, dadurch gekennzeichnet, daß sie enthält:

a) gemahlene Fischmilch(zellen), von denen die äußere Haut entfernt wurde und die mit Wasser, Salzwasser, Alkohol oder deren Gemischen deodorisiert wurden, und/oder

b) eine Fischmilchfraktion, die aus den genannten gemahlen Fischmilch(zellen) erhalten wurde und die noch Protamin enthält.

2. Nahrungsmittelzusammensetzung nach Anspruch 1, worin die gemahlenen Fischmilch(zellen) und/oder die Fischmilchfraktion in der Zusammensetzung in einer Menge von etwa 0,01 bis 10 Gew.-%, bezogen auf den Feststoffgehalt der Zusammensetzung, enthalten sind.

3. Nahrungsmittelzusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, worin die Fischmilchfraktion (b) durch Säureextraktion und/oder Enzymhydrolyse hergestellt worden ist.

4. Nahrungsmittelzusammensetzung nach Anspruch 2, worin die Fischmilchfraktion durch Fällungsfraktionierung, Behandlung mit Ionenaustauscherharz, Gelfiltration, Membranfraktionierung, Elektrodialyse oder eine Kombination dieser Verfahren weiter gereinigt worden ist.

5. Nahrungsmittelzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, welche weiterhin Proteine, Kohlenhydrate, Lipide, Vitamine und Mineralien enthält.

6. Modifizierte Milch oder Entwöhnungsnahrungsmittel auch in getrockneter und gepulverter Form, enthaltend eine Nahrungsmittelzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 5.