DE69604009T2

DE69604009T2 - Stabile flüssige Zusammensetzung enthaltend Urateoxidase und lyophilizierte Zusammensetzung für seine Herstellung

Info

Publication number: DE69604009T2
Application number: DE69604009T
Authority: DE
Inventors: Claude Aleman; Alain Bayol; Thierry Breul; Patrice Dupin
Original assignee: Sanofi SA
Current assignee: Sanofi Aventis France
Priority date: 1995-05-11
Filing date: 1996-05-09
Publication date: 2000-04-06
Anticipated expiration: 2016-05-10
Also published as: IL118171A0; AU710288B2; FR2733914B1; NO315261B1; EP0742013A1; ES2137635T3; HUP9601241A3; NO961915L; TW420614B; AU5213996A; PL314147A1; SG42355A1; IL118171A; CN1090972C; ZA963683B; HU9601241D0; BR1100337A; DE69604009D1; EA199600024A2; HU225147B1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft eine flüssige pharmazeutisch annehmbare Zubereitung enthaltend Uratoxidase, die in Form einer bei 25ºC stabilen und nach der Bewegung durchsichtigen Lösung vorliegt.
Diese Lösung kann auch durch Auflösen eines gefriergetrockneten Produkts, welches Uratoxidase in einem Lösungsmittel enthält, erhalten werden.
Uratoxidase (Urat-Sauerstoff-Oxidoreductase EC 1.7.3.3 Uox), ein ausgehend von Aspergillus flavus erhaltenes proteinartiges Enzym, welches Harnsäure zu Allantoin oxidiert, wird zur Vorbeugung oder zur Behandlung der Hyperurikämie in der Chemotherapie verwendet, da Allantoin zehnmal besser löslich ist als Harnsäure und leicht über die Nieren ausgeschieden wird (P. Laboureur et al., Bull. Soc. Chim. Biol., 50 (1968). 811-825; P. Kissel et al. The Lancet, J25 (1975). 229).
Uratoxidase ist ein tetrameres Enzym, welches aus vier identischen Einheiten aufgebaut ist mit einem Molekulargewicht von 34152. Jede Monomeren-Einheit, die aus einer einzigen Polypeptidkette mit 301 Aminosäuren aufgebaut ist, ist an ihrem N-terminalen Ende acetyliert und weist keine Disulfidbrücken auf. Der optimale pH-Wert der Stabilität der enzymatischen Aktivität der Uratoxidase in Lösung ist pH = 8 (A. Bayol et al., zur Veröffentlichung angenommen, Biophys. Chem. (54) (1995), 229-235).
Die cDNA, die für dieses Protein codiert, wurde geklont und in E. coli (R. Legoux et al., J. Biol. Chem., 267(12), (1992), 8565-8570); in A. flavus (L. Chevalet et al., Curr. Genet., 21 (1992), 447-453); und in S. cerevisiae (P. Leplatois et al., Gene., 122 (1992), 139-145) exprimiert. Die besten, ausgehend von S. cerevisiae erzielten Ausbeuten haben die Auswahl dieser Hefe für die Herstellung von rekombinanter Uratoxidase (re-Uox) begünstigt. Das in dem intrazellulären Raum angesammelte rekombinante Enzym in löslicher und aktiver Form wird extrahiert und bis zum Erhalt einer pharmazeutisch geeigneten Qualität gereinigt.
Zur Bildung einer an den Menschen verabreichbaren Formulierung muß die Uratoxidase in Form einer pharmazeutischen Zubereitung hergestellt werden. Solche Zubereitungen müssen die enzymatische Aktivität der Uratoxidase im Laufe der Zeit beibehalten. Man verwendet im allgemeinen eine gefriergetrocknete Form zur Konservierung der biochemischen Integrität und der biologischen Aktivität der Enzyme bei den unterschiedlichsten Aufbewahrungsbedingungen. Es ist gut bekannt, daß gefriergetrocknete Präparate diese Eigenschaften besser konservieren als die entsprechenden flüssigen Präparate.
Die gefriergetrockneten Präparate müssen vor der Verabreichung an den Menschen auf parenteralem Wege mit einem pharmazeutisch annehmbaren Lösungsmittel verdünnt werden. Eine flüssige Enzymzubereitung wäre dennoch vorzuziehen, da sie schneller verabreichbar ist, vorausgesetzt, daß sie physikalisch und chemisch stabil ist.
Eine bekannte pharmazeutische Formulierung von Uratoxidase (Uricozyme®) ist ein gefriergetrocknetes injizierbares Präparat, welches ein Lösungsmittel zur Wiederherstellung benötigt. Die Zusammensetzung der gefriergetrockneten Form von Uricozyme® ist die folgende:
Uratoxidase 1000 Einheiten
Aza-8-dioxo-2,6-purin-Monohydrat
Neutrales, wasserfreies Natriumcarbonat
Dinatriumtetracemat, Dihydrat 0,37 mg
Lactose
Die Zusammensetzung des Lösungsmittels zur Rekonstitution ist die folgende:
Einfachsaures Kaliumphosphat
Zweifachsaures Kaliumphosphat
Glucose
Wasser für Injektionszwecke ad 1 ml
(Dictionnaire VIDAL Paris, 61. Auflage (1985). S. 1552)
Die nach dem Auflösen des gefriergetrockneten Materials in dem Lösungsmittel zur Rekonstitution erhaltene Lösung der Uratoxidase zeigt eine sich mit der Zeit beim Aufbewahren bei 25ºC verstärkende Trübung bis zum Auftreten eines filamentösen Proteinniederschlags. Die Bildung dieses Proteinniederschlags in der Lösung wird durch die Zeit und die Heftigkeit der Bewegung der Lösung beschleunigt. Die erhaltene Lösung ist physikalisch instabil.
Die löslichmachenden Eigenschaften von nichtionischen oberflächenaktiven Mitteln sind dem Fachmann gut bekannt, jedoch sind die Wechselwirkungen zwischen Proteinen und nichtionischen oberflächenaktiven Mitteln spezifisch und in der Literatur beschrieben.
Das Patent EP 211 601 beschreibt die Verwendung bestimmter Copolymere mit regelmäßiger Verteilung der Monomeren auf der Kette, welche nichtionische oberflächenaktive Moleküle darstellen für die Stabilisierung von injizierbaren Formulierungen von Wachstumshormon. Das Wachstumshormon wird in einer Gelmatrix stabilisiert, die durch ein regelmäßiges Copolymer gebildet wird, welches Poly oxyethylen- und Polyoxypropylen-Einheiten mit einem mittleren Molekulargewicht zwischen 1100 und 40000 aufweist.
Das US-Patent 4,783,441 beschreibt ein Verfahren zur Vorbeugung der Denaturierung von Proteinen, wie Insulin, in wäßriger Lösung durch Zugabe einer Menge von bis Zu 500 ppm von oberflächenaktiven Molekülen, welche alternierend aus schwach hydrophilen und schwach hydrophoben Gruppen aufgebaut sind, in Lösungen mit einem pH-Wert zwischen 6,8 und 8.
Das US-Patent 5,096,885 beschreibt die Zusammensetzung einer gefrierzutrocknenden Lösung, welche menschliches Wachstumshormon, Glycin, Mannit, ein nichtionisches oberflächenaktives Mittel und einen Puffer enthält.
Das US-Patent 3,928,137 beschreibt eine Uratoxidase-Zubereitung, welche gepuffert und mit einem oberflächenaktiven Mittel stabilisiert ist, bei dem es sich um ein stickstoffhaltiges Copolymer von Polyoxypropylen und Polyoxyethylen handelt. Diese Zubereitung ist eine feste physikalisch stabile Zubereitung. Jedoch vermittelt dieses Dokument keinerlei Hinweis auf das Verhalten und insbesondere die physikalische Stabilität der wäßrigen Zubereitungen, die sich beim Auflösen einer solchen festen Zubereitung in einer wäßrigen Lösung ergeben.
Die Druckschrift JP 60 224 499 betrifft ein flüssiges stabiles Uratoxidase-Präparat, welches eines oder mehrere nichtionische oberflächenaktive Mittel, Serumalbumin und gegebenenfalls eine oder mehrere basische Aminosäuren enthält. Nach dieser Druckschrift ist das Einarbeiten des Serumalbumins in Kombination mit einem oder mehreren oberflächenaktiven Mitteln essentiell zur Sicherstellung der physikalischen Stabilität der flüssigen Zubereitungen, und dies sogar nach der Gefriertrocknung und der Wiederauflösung in einer wäßrigen Lösung.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist eine flüssige, pharmazeutisch annehmbare Zubereitung einer Lösung von Uratoxidase, die zwischen 0,1 mg/ml und 10 mg/ml eines regelmäßigen Copolymeren (Copolymer mit regelmäßiger Anordnung der Monomeren-Einheiten, Sequenz-Copolymer) von Ethylenoxid und Propylenoxid, nämlich Poloxamer 188, in dem wäßrigen gepufferten Medium enthält. Diese Zubereitung ist nach heftiger Bewegung oder Rührung nach dem Aufbewahren während mindestens 48 Stunden bis zu einem Jahr bei 25ºC klar und physikalisch und chemisch stabil.
Die durch diese Form erhaltenen Vorteile sind eine größere Einfachheit der klinischen Anwendung, verbunden mit der Möglichkeit der direkten Verabreichung und der Lagerung in einer direkt verabreichbaren Form während längerer Zeit.
Ein weiterer Vorteil ist in der Nichtnotwendigkeit von besonderen Vorschriften von Vorsichtsmaßnahmen zur Aufbewahrung, die normalerweise notwendig sind zur Vermeidung der Ausfällung von Proteinfilamenten bei zu injizierenden Lö sungen, da die erfindungsgemäße Zubereitung die Fähigkeit besitzt, die Ausfällung von Proteinfilamenten aus der Lösung zu vermeiden.
Die erfindungsgemäße flüssige wäßrige Zubereitung ist durchsichtig, stabil, steril und pharmazeutisch annehmbar und kann durch Injektion auf subkutanem, intravenösem oder intramuskulärem Wege an Menschen oder Tiere verabreicht werden.
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung versteht es sich, daß der Begriff Uratoxidase für das Protein steht, welches durch Fermentieren eines natürlichen oder durch genetische Methoden mutierten Stammes erhalten worden ist. Das Enzym wird somit durch Extraktion aus der natürlichen Quelle oder ausgehend von Zellkulturen gewonnen. Die in den erfindungsgemäßen Zubereitungen verwendete Uratoxidase kann beispielsweise gemäß den Druckschriften US 3,810,820, DD 284 689, DD 296 804, DD 300 781, DE 21 64 018, DE 15 17 742, FR 2 664 286, GB 2 221 910, JP 76-007749, JP-75-030137, JP-84-023987, JP 73 018473, JP- 47 029 575, SU 565 935, US 4,062,731, EP 545 688 oder EP 435 776 erhalten werden.
Der Begriff pharmazeutisch wirksame Menge steht für jede Menge von Uratoxidase, die einen therapeutischen Effekt ergibt.
Die erfindungsgemäßen Lösungen enthalten eine pharmazeutisch wirksame Menge von Uratoxidase. Vorzugsweise enthalten diese Lösungen in Abhängigkeit von der angestrebten Dosis zwischen 0,1 mg/ml und 50 mg/ml Uratoxidase. Der Konzentrationsbereich der Uratoxidase ist erfindungsgemäß nicht kritisch und kann in Abhängigkeit von den Präparaten variieren.
Die erfindungsgemäßen Lösungen enthalten ein nichtionisches oberflächenaktives Mittel vom Typ eines regelmäßigen Copolymeren aus Polyoxyethylen und Polyoxypropylen, welches als Poloxamer 188 bezeichnet wird und welches der Formel HO(CH&sub2;CH&sub2;O)&sub7;&sub5;(CH(CH&sub3;)CH&sub2;O)&sub3;&sub0;(CH&sub2;CH&sub2;O)&sub7;&sub5;H entspricht. Dieses Produkt wird von der Firma LC. I. unter der Bezeichnung Synperonic F 68® und von der Firma B. A. S. F. unter der Bezeichnung Pluronic F 68® vertrieben. Die zur Bildung von physikalisch stabilen Lösungen von Uratoxidase erforderlichen Mengen an Poloxamer 188 liegen zwischen 0,1 mg/ml und 10 mg/ml, vorzugsweise zwischen 0,5 mg/- ml und 5 mg/ml.
Der pH-Wert der Lösung liegt vorzugsweise zwischen 7,5 und 8,5. Wenn der pH-Wert 8 beträgt, ist die Uratoxidase in Lösung chemisch besonders stabil.
Ganz allgemein ist es bevorzugt, einen Natriumphosphatpuffer zum Puffern des Mediums zu verwenden. Die Konzentration des Puffers beträgt mit Vorteil 5 mM bis 100 mM.
Der bevorzugt eingesetzte Puffer ist ein Natriumphosphatpuffer mit einem pH-Wert von 8 und einer Konzentration zwischen 5 mM und 100 mM.
Die erfindungsgemäße flüssige Zubereitung ist vorzugsweise isotonisch und enthält mit Vorteil die Bestandteile, die zum Erhalt einer isotonischen Lösung erforderlich sind, wie Mannit oder Alanin.
Die Lösung kann insbesondere Mannit enthalten, vorzugsweise in einer Konzentration zwischen 1 mg/ml und 50 mg/ml.
Die Lösung kann insbesondere Alanin enthalten, vorzugsweise in einer Konzentration zwischen 1 mg/ml und 50 mg/ml.
Die Lösung enthält mit Vorteil Mannit und Alanin in jeglichem Verhältnis, welches die Isotonizität der Lösung aufrechterhält, vorzugsweise 1 bis 50 mg/ml Mannit und 1 bis 50 mg/ml Alanin.
Mit Vorteil enthält die Lösung 10,6 mg/ml Mannit und 15,9 mg/ml Alanin.
Die erfindungsgemäße flüssige Zubereitung enthält mit Vorteil die notwendigen Konservierungsmittel, die zur bakteriologischen Konservierung der Lösung notwendig sind, wie insbesondere Benzylalkohol, Phenol, m-Kresol, Methylparaben, Propylparaben, ein Benzalkoniumchlorid oder Benzethoniumchlorid.
Die Lösung kann direkt durch Auflösen der Bestandteile in Wasser erhalten werden; oder nach der Wiederherstellung eines gefriergetrockneten Materials, welches Uratoxidase enthält, mit einem wäßrigen Lösungsmittel, das Poloxamer 188 enthält; oder nach Wiederherstellung eines gefriergetrockneten Materials, welches Uratoxidase und Poloxamer 188 enthält, mit einem wäßrigen Lösungsmittel.
In dieser Hinsicht betrifft die Erfindung ebenfalls eine in einem wäßrigen Lösungsmittel aufzulösende gefriergetrocknete Zubereitung, die Uratoxidase und Poloxamer 188 enthält, wobei das Gewichtsverhältnis von Poloxamer 188 zu Uratoxidase 0,01 bis 50 beträgt.
Die gefriergetrocknete Zubereitung kann mit Vorteil zusätzlich einen Puffer, wie er oben für die Lösung angegeben worden ist, enthalten.
Sie kann weiterhin mit Vorteil die Bestandteile enthalten, welche die Isotonie der durch Auflösen des gefriergetrockneten Materials in einem wäßrigen Lösungsmittel erhaltene wäßrige Lösung sicherstellt, wie beispielsweise Alanin oder Mannit, in variablen Mengenverhältnissen in Abhängigkeit von dem Volumen des zu verwendenden Lösungsmittels für die Wiederherstellung.
Die folgenden Beispiele dienen der Erläuterung der Erfindung.

BEISPIEL 1

Lösung von Uratoxidase, hergestellt durch Auflösen der Bestandteile in Wasser
Uratoxidase 1,5 mg
Mannit 10,6 mg
L-Alanin 15,9 mg
Dibasisches Natriumphosphat, Dodecahydrat 14,32 mg
Poloxamer 188 1 mg
Wasser für Injektionspräparate ad 1 ml

BEISPIEL 2

Lösung von Uratoxidase, hergestellt ausgehend von einem gefriergetrockneten Uratoxidase enthaltenden Material, welches durch ein wäßriges Wiederaufnahmemedium, das Poloxamer 188 enthält, wiederhergestellt worden ist Zusammensetzung des gefriergetrockneten Materials:
Uratoxidase 1,5 mg
Mannit 10,6 mg
L-Alanin 15,9 mg
Dibasisches Natriumphosphat, Dodecahydrat 14,32 mg
Zusammensetzung des Wiederaufnahmelösungsmittels:
Poloxamer 188 1 mg
Wasser für Injektionspräparate ad 1 ml

BEISPIEL 3

Lösung von Uratoxidase, hergestellt ausgehend von einem gefriergetrockneten Material von Uratoxidase, welches Poloxamer 188 enthält, wiederhergestellt mit Wasser
Zusammensetzung des gefriergetrockneten Materials:
Uratoxidase 1,5 mg
Mannit 10,6 mg
L-Alanin 15,9 mg
Dibasisches Natriumphosphat, Dodecahydrat 14,32 mg
Poloxamer 188 1 mg
Zusammensetzung des Wiederaufnahmelösungsmittels:
Wasser für Injektionspräparate ad 1 ml
Die Vorteile der erfindungsgemäßen Zubereitungen werden im folgenden durch Vergleich mit den Eigenschaften verschiedener Zubereitungen auf der Grundlage von Uratoxidase verdeutlicht, die in der Tabelle I und den beigefügten Figuren wiedergegeben sind.

HERSTELLUNG DER ZUBEREITUNGEN

Die Lösungen von Uratoxidase, die der Erfindung entsprechen, können in unterschiedlicher Weise hergestellt werden, beispielsweise:
- Durch Vermischen einer wäßrigen konzentrierten Lösung von Uratoxidase, die einen Natriumphosphatpuffer mit einem pH-Wert von 8 enthält, mit einer wäßrigen Lösung, die Poloxamer 188 und gegebenenfalls weitere Bestandteile, welche die Isotonie der vermischten Lösung sicherstellen, und gegebenenfalls Konservierungsmittel enthält.
- Durch Auflösen eines gefriergetrockneten Materials, welches Uratoxidase, einen Natriumphosphatpuffer mit einem pH-Wert von 8, Ballastträgerstoffe, welche die Isotonie sicherstellen, wie Alanin und Mannit, enthält; in einem wäßrigen Lösungsmittel, welches Poloxamer 188 und gegebenenfalls Konservierungsmittel enthält.
- Durch Auflösen eines gefriergetrockneten Materials, welches Uratoxidase, einen Natriumphosphatpuffer mit einem pH-Wert von 8, Ballastträgerstoffe, wie Alanin und Mannit, und Poloxamer 188 enthält; in einem wäßrigen Lösungsmittel, das gegebenenfalls Konservierungsmittel enthält.
Die mit Hilfe dieser drei Verfahren erhaltenen Lösungen können steril filtriert werden.
Sie behalten ihre physikalische Stabilität sowie die chemische Stabilität und die enzymatische Aktivität der Uratoxidase während 1 Monat bei 25ºC bei.
Zur Messung der verschiedenen Parameter, wie der Trübung, oder zur Bestimmung der enzymatischen Aktivität wurden verschiedene analytische Methoden angewandt.

1. Messung der Trübung:

Man bestimmt die Trübung der Uratoxidase-Lösungen mit Hilfe eines Ratio Hach-Trübungsmeßgeräts. Die Ergebnisse der Trübung sind in nephelometrischen Einheiten der Trübung (NTU) angegeben, die definiert sind in: Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater der American Public Health Association. Die Messung der Trübung gibt einen Hinweis auf den Aggregationsgrad der Uratoxidase in der Lösung.

2. Bestimmung der enzymatischen Aktivität der Uratoxidase:

Man bestimmt die enzymaitsche Aktivität der Uratoxidase durch Spektrophotometrie in einer auf 30ºC thermostatisierten Küvette durch Verfolgen des Verschwindens der Harnsäure bei 292 nm (R. Legoux et al., J. Biol. Chem., 267 (12), (1992), 8565-8570).
Es werden Untersuchungen der Stabilität der wiederhergestellten Lösung nach Beispiel 2 bei 25ºC durchgeführt. Die nachfolgende Tabelle I zeigt die Stabilität von Lösungen, die durch Auflösen mit Wasser und mit Lösungsmitteln, die 1 mg Polysorbat 80 (Tween 80®) oder 1 mg Poloxamer 188 gemäß der Erfindung enthalten, mit einer ausreichenden Menge Wasser zur Bildung eines Lösungsvolumens von 1 ml wiederhergestellt worden sind. Tabelle I: Stabilität der wiederhergestellten Lösung bei 25ºC
UAE: Einheit der enzymatischen Aktivität
Das Aussehen (Opaleszenz) der Lösungen wird gemäß der Methode der Pharmacopée Européenne (II) V. 6 durch Vergleich der zu untersuchenden Probe mit einer Kontrollsuspension bestimmt.

BESCHREIBUNG DER FIGUREN

Fig. 1 verdeutlicht die Entwicklung der Trübung in NTU-Einheiten nach dem Rühren während 1 Minute mit einem Vortex-Rührer von fünf Uratoxidaselösungen, die der Erfindung entsprechen oder auch nicht, in Abhängigkeit von ihrem Gehalt an nichtionischen oberflächenaktiven Mitteln.
Zubereitung Nr. 1: 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.
Zubereitung Nr. 2: 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, 10 mg Polysorbat 80 und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.
Zubereitung Nr. 4 (erfindungsgemäß): 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, 10 mg Poloxamer 188 und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.
Zubereitung Nr. 3: 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, 100 mg Polysorbat 80 und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.
Zubereitung Nr. 5 (erfindungsgemäß): 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, 100 mg Poloxamer 188 und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.
Fig. 2 verdeutlicht die Entwicklung der Trübung in NTU-Einheiten im Verlaufe von 24 Stunden nach dem Rühren während 1 Minute in einem Vortex-Rührer von sechs Uratoxidaselösungen, die Poloxamer 188 enthalten und der Erfindung entsprechen, in Abhängigkeit von ihrem Gehalt an Poloxamer 188.
Zubereitung Nr. 5: 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, 100 mg Poloxamer 188 und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.
Zubereitung Nr. 4: 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, 10 mg Poloxamer 188 und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.
Zubereitung Nr. 6: 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, 7,5 mg Poloxamer 188 und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.
Zubereitung Nr. 7: 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, 5 mg Poloxamer 188 und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.
Zubereitung Nr. 8: 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, 2,5 mg Poloxamer 188 und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.
Zubereitung Nr. 9: 15 mg Uratoxidase, 106 mg Mannit, 159 mg L-Alanin, 143,2 mg Dinatriumphosphat, Dodecahydrat, 1 mg Poloxamer 188 und 10 ml Wasser für die Herstellung von Injektionspräparaten.

Claims

1. Flüssige, pharmazeutisch annehmbare, physikalisch stabile Zubereitung enthaltend Uratoxidase und 0,1 mg/ml bis 10 mg/ml Poloxamer 188 in wäßrigem gepuffertem Medium.

2. Zubereitung nach Anspruch 1, enthaltend zwischen 0,5 mg/ml und 5 mg/ml Poloxamer 188.

3. Zubereitung nach Anspruch 1, enthaltend zusätzlich Alanin.

4. Zubereitung nach Anspruch 3, worin die Menge des Alanins zwischen 1 mg/ml und 50 mg/ml liegt.

5. Zubereitung nach Anspruch 1, enthaltend zusätzlich Mannit.

6. Zubereitung nach Anspruch 5, worin die Menge des Mannits zwischen 1 mg/- ml und 50 mg/ml liegt.

7. Zubereitung nach Anspruch 1, enthaltend zusätzlich Alanin und Mannit.

8. Zubereitung nach Anspruch 7, enthaltend 1 bis 50 mg/ml Alanin und 1 bis 50 mg/ml Mannit.

9. Zubereitung nach Anspruch 8, enthaltend 15,9 mg/ml Alanin und 10,6 mg/- ml Mannit.

10. Isotonische Zubereitung nach Anspruch 1.

11. Zubereitung nach Anspruch 1, enthaltend einen Natriumphosphatpuffer.

12. Zubereitung nach Anspruch 1, worin die Konzentration des Puffers zwischen 5 mM und 100 mM liegt.

13. Zubereitung nach Anspruch 1 mit einem pH-Wert zwischen 7,5 und 8,5.

14. Zubereitung nach Anspruch 1, enthaltend ein oder mehrere Konservierungsmittel ausgewählt aus Phenol, Benzylalkohol, m-Kresol, Methylparaben, Propylpa raben, ein Benzalkoniumchlorid oder Benzethoniumchlorid.

15. Zubereitung nach Anspruch 1, erhalten durch Auflösen eines gefriergetrockneten Materials in einem wäßrigen Lösungsmittel.

16. Zubereitung nach Anspruch 1, die steril und auf subkutanem, intravenösem oder intramuskulärem Wege Menschen oder Tieren injiziert werden kann.

17. Injizierbare Zubereitung nach Anspruch 15 und Anspruch 16, worin die Zusammensetzung des gefriergetrockneten Materials die folgende ist:

Uratoxidase 1,5 mg

Mannit 10,6 mg

L-Alanin 15,9 mg

Dinatriumphosphat-Dodecahydrat 14,32 mg

und die Zusammensetzung des wäßrigen Lösungsmittels zur Herstellung die folgende ist:

Poloxamer 188 1 mg

Wasser für Injektionszwecke ad 1 ml.

18. Gefriergetrocknete Zubereitung zur Auflösung in einem wäßrigen Lösungsmittel, enthaltend Uratoxidase und Poloxamer 188, wobei das Gewichtsverhältnis von Poloxamer 188 zu Uratoxidase 0,01 bis 50 beträgt.

19. Gefriergetrocknete Zubereitung nach Anspruch 18, enthaltend zusätzlich einen Puffer.

20. Gefriergetrocknete Zubereitung nach Anspruch 18, enthaltend zusätzlich Hilfsstoffe, welche die Isotonie der durch Auflösen des gefriergetrockneten Materials in einem wäßrigen Lösungsmittel gebildeten wäßrigen Lösung sicherstellt.