DE3614317A1 - O-sulfatierte ss-lactam-hydroxamsaeuren - Google Patents

Description

36U317

λ 5 Gegenstand der Erfindung sind O-sulfatierte ß-Lactam Hydroxamsäuren der allgemeinen Formel I

. I ^x ""2Ί (I)

und ihre pharmazeutisch verträglichen Salze, in der

R^ einen Acylrest bedeutet, η und m unabhängig voneinander den V/ert 1, 2 oder 3 haben und X eine gesättigte Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindung bedeutet ,
η und m unabhängig voneinander den Wert 1,2,3 oder 4- haben, die Summe von η + m -£ 5 ist und X -0-, -S- oder 0

11

-S- darstellt,

η und m unabhängig voneinander den Wert 1, 2 oder 3 haben, die Summe von η + m ■< 4 ist und X

-CH- oder -N- bedeutet, η und m unabhängig voneinander den Wert 1 oder 2 haben, die Summe von η + m ·< 3 ist und X 0 R₂,

Il 1^·

-C-N- darstellt, oder η und m jeweils den Wert 1 haben und X -S-CIL)-S,

0 0 0 0 R₄O R₄ -S-CHo-S-, -S-CHp-S- oder -N-C-N- bedeutet, OO

I?2 einen Alkyl-, Aryl-, Hydroxyl-, Alkoxy-, Alkanoyloxy-, Carbamoyloxy-, Alkanoylamino- oder Ureidorest darstellt, R, ein Wasserstoffatom, einen Alkyl-, Aryl-, Alkanoyl- oder Carbamoylrest bedeutet, und

R^ ein Wasserstoffatom, einen Alkyl- oder Arylrest darstellt.

Nachstehend werden die Definitionen der verschiedenen zur Beschreibung der ß-Lacteme der Erfindung verwendeten Begriffe erläutert. Diese Definitionen gelten für die Begriffe in der gesamten Beschreibung (soweit sie nicht in bestimmten Fällen anders eingeschränkt sind), und zwar sowohl für die Gruppen einzeln oder als Teil größerer Reste.

Die Begriffe "Alkylrest" und "Alkoxyrest" umfassen unverzweigte und verzweigte Reste. Bevorzugt sind die Reste mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen.

Der Begriff "Alkanoylrest" umfaßt unverzweigte und verzweigte Reste. Bevorzugt sind die Reste mit 2 bis 10 Kohlenstoffatomen.

Der Begriff "Arylrest" bezieht sich auf Phenylgruppen, die gegebenenfalls mit 1, 2 oder 3 Aminogruppen, Halogenatomen, Hydroxyl-, Trifluormethyl-, C-^-Alkyl-, C^_^-Alkoxy-, Alkanoyloxy-, Aminocarbonyl- oder Carboxylgruppen substituiert sein können.

36U317

Die Bezeichnung "Acylrest" bezieht sich auf alle durch Entfernung der Hydroxylgruppe von einer organischen Säure, d.h. einer Carbonsäure, abgeleiteten organischen Reste. Bestimmte

Acylreste sind natürlich bevorzugt, jedoch ist die Erfin-5

dung nicht darauf begrenzt. Beispiele für geeignete Acylreste sind diejenigen, die bereits in der Vergangenheit zur Acylierung von ß-Lactam-Antibiotika einschließlich 6-Aminopenicillansäure und ihre Derivate und 7-Aminocephalosporansäure und ihre Derivate benutzt worden sind, vgl. beispiels-

10" >*

weise Cephalosporins and Penicillins, herausgegeben von Flynn, Academic Press (1972), DE-OS 2 716 677, BE-PS 867,994, US-PSen 4,152,432, 3,971,778 und 4,172,199, GB-PS 1,348,894 und EP-A 75 805.

Nachstehende Auflistung von Acylresten dient zur weiteren Verdeutlichung des Begriffes "Acylrest"; die Erfindung ist aber auch darauf nicht beschränkt. Spezielle Beispiele sind: (a) Aliphatische Reste der Formel

on "

^^u R -C-

in der R ein Alkyl-, Cycloalkyl-, Alkoxy-, Alkenyl-,

el

Cycloalkenyl-, Cyclohexadienyl- oder ein durch mindestens ein Halogenatom, eine Cyano-, Nitro-, Amino-, Mercapto-, Alkylthio- oder Cyanomethylthiogruppe substituierter Alkyl- oder Alkenylrest ist;

(b) Carbocyclische aromatische Reste der IOrmeln

CH₂-O-C-,

d ° 0-CH₂-C- ,

O If S-CH₂-C-

oder

in denen η den Wert 0,1,2 oder 3 hat, R^, R und R, unabhängig voneinander Wasserstoff- oder Halogenatome oder Hydroxyl-, Nitro-, Amino-, Cyano- oder Trifluormethylgruppen oder Alkylreste mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkoxyreste mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder Aminomethylgruppen bedeuten und R eine Amino- oder Hydroxylgruppe, ein Carboxylsalz, eine geschützte Carboxylgruppe, eine Formyloxygruppe, ein SuIfo- oder Sulfoaminosalz, eine Azidogruppe,ein Halogenatom, eine Hydrazino-, Alkylhydrazino-, Phenylhydrazino- oder [(Alkylthio)-thioxomethyl]-thiogruppe bedeutet.

"⁹" 36U317

Bevorzugte carbocyclische aromatische Acylreste haben die Formeln

10

CH₂NH₂

15

20 25

(R ist vorzugsweise ein Carboxyl- oder Sulfosalz) und

(R ist vorzugsweise ein Carboxyl- oder Sulfosalz).

ti

(c) Heteroaromatische Reste der Formeln

O Il

--CH-C-

30 35

0 Il Rf-O-CH₂-C- ,

0 Il Rf-S-CH₂-C- ,

0 0 Il H

Rf-C-C-

36Η317 in denen η den Wert 0, 1, 2 oder 3 hat, R wie vorstehend definiert ist und R_f einen substituierten oder unsubstituierten 5-, 6- oder 7-gliedrigen heterocyclischen Ring (Heteroarylring) mit 1, 2, 3 oder 4 (vorzugsweise 1 oder 2) Stickstoff-, Sauerstoff- oder Schwefelatomen darstellt. Beispiele für heterocyclische Ringe sind die Thienyl-, Furyl-, Pyrrolyl-, Pyridinyl-, Pyrazolyl-, Pyrazinyl-, Thiazolyl-, Pyrimidinyl-, Thiadiazolyl- und Tetrazolylgruppen. Beispiele für Substituenten sind Halogenatome, Hydroxyl-. Nitro- und Aminogruppen, geschützte Aminogruppen, Cyano- und Trifluormethylgruppen, Alkylreste mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkoxyreste mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder die Gruppe der Formel

HOOC-CH-CH₀-O-C-NH

Bevorzugte heteroaromatische Acylreste sind diejenigen Reste der vorstehenden Formeln, in denen R- eine 2-Amino-4-thiazolyl-, 2-Amino-5-halogen-4-thiazolyl-, 4-Aminopyrimidin-2-yl-, 5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl-, 2-Thienyl-, 2-Furanyl- oder 6-Aminopyridin-2-yl-Gruppe bedeutet.

(d) [[(4-substituierte-2,3-Dioxo-1-piperazinyl)-carbonyl]-amino]-arylacetylreste der Formel

0 O .—.

M H ^/ ^

-C-CH-NH-C-N

^g

in der R einen aromatischen Rest bedeutet (einschließlich carbocyclischer Aromaten, wie derjenigen der Formel

L .. J

36H317 und heteroaromatische Reste mit der Definition von R_) und R, einen Alkylrest, substituierten Alkylrest (in dem der Alkylrest mit mindestens einem Halogenatom,einer Cyano-, Nitro-, Amino- oder Mercaptogruppe substituiert ist), Arylmethylenaniinorest (d.h. -N=CH-R , wobei R wie vorstehend definiert ist), Arylcarbonylaminorest (d.h.

0
-NH-C-R ,

wobei R wie vorstehend definiert ist) oder Alkylcarbonylaminorest darstellt.

Bevorzugte [[(4-substituierte-2,3-Dioxo-1-piperazinyl)-carbonyl] -amino]-arylacetylreste sind diejenigen, in denen R, eine Äthyl-, Phenylmethylenamino- oder 2-Furylmethylenaminogruppe bedeutet.

(e) (Substituierte Oxyimino)-arylacetylreste der Formel

O
it

-C-C=N-O-R.

I ι

in der R wie vorstehend definiert ist und R. ein Wasser-

g ι

stoffatom, einen Alkyl-, Cycloalkyl- oder Alkylaminocarbonylrest, einen Arylaminocarbonylrest (d.h.

Il

-C-NH-R ,

wobei R wie vorstehend definiert ist) oder substituierten Alkylrest darstellt (wobei der Alkylrest mit mindestens einem Halogenatom ,einer Cyano-?, Nitro-, Amino-, Mercapto- oder Alkylthiogruppe, einem aromatischen Rest·(wie definiert durch R ), einer Carboxylgruppe (einschließlich der Salze davon), einer Amido-, Alkoxycarbonyl-, Phenylmethoxycarbonyl-, Diphenylmethoxycarbonyl-, Hydroxyalkoxyphosphinyl-,

L J

36U317 Dihydroxyphosphinyl-, Hydroxy(phenylmethoxy)-phosphinyl-, Diallcoxyphosphinyl- oder Tetrazolylgruppe substituiert ist).

Bevorzugte (substituierte Oxyimino)-arylacetylreste sind diejenigen, in denen der Rest R die 2-Amino-4-thiazolylgruppe ist. Weiter bevorzugt sind auch solche Gruppen, in denen R. eine Methyl-, Äthyl-, Carboxymethyl-, 1-Carboxy-1-methyläthyl-, 2,2,2-Trifluoräthyl- oder 1-CarboxyeyeIopropylgruppe ist.

(f) (Acylamino)-arylacetylreste der Formel

Il H

-C-CH-NH-C-R.

I J

in der R wie vorstehend definiert ist und R. einen Rest der Formel

W ^(CH2⁾n-°-'

eine Amino-, Alkylamino-, (Cyanoalkyl)-amino-, Amido-, Alkylamido- oder (Cyanoalkyl)-amidogruppe oder einen der

Reste der Formeln 25

^NH2 S
-CH-CH₂-C-NH-CH₃,

^H0

^*^ t'll 1 III. I ^ "— -» jy

L J

36U317

HO

darstellt.

Bevorzugte (Acylamino)-arylacetylreste der vorstehenden Formeln sind diejenigen, in denen R. eine Amino- oder Amidogruppe bedeutet. Bevorzugt sind weiter diejenigen Verbindungen, in denen R eine Phenyl- oder 2-Thienylgruppe ist.

(g) [t[3-substituierte-2-Oxo-1-imidazolidinyl]-carbonyl]-amino]-arylacetylreste der Formel ?\

O OC
Il Il / \
-C-CH-NH-C-N N-R₁

i I I ^{k %} A CH₂- CH

in der R wie vorstehend definiert und R, ein Wasserstoffen κ

atom, eine Alkylsulfonyl- oder Arylmethylenaminogruppe 0

(d.h. -NaCH-R , wobei R wie vorstehend definiert ist), -C-R (wobei R ein Wasserstoffatom, einen Alkyl- oder einen halogensubstituierten Alkylrest bedeutet), einen aromatischen Rest (wie vorstehend durch R definiert), einen Alkyl- oder substituierten Alkylrest bedeutet (wobei der Alkylrest mit mindestens einem Halogenatom, einer Cyano-, Nitro-, Amino- oder Mercaptogruppe substituiert sein kann).

Bevorzugte [[[3-substituierte-2-Oxo-1-imidazolidinyl]-carbonyl] -amincj-arylacetylreste der vorstehenden Formeln sind solche, in denen R eine Phenyl- oder 2-Thienylgruppe ist. Ferner sind solche Verbindungen bevorzugt, in denen R, ein Wasserstoffatom, eine Methylsulfonyl-, Phenylmethylenamino- oder 2-Furylmethylenaminogruppe darstellt.

L J

Die Verbindungen der Erfindung bilden basische Salze mit anorganischen und organischen Basen, die ebenfalls Gegenstand der Erfindung sind. Zu diesen Salzen gehören die Ammonium-, Alkalimetall- und Erdalkalimetallsalze sowie Salze mit organischen Basen, wie Dicyclohexylamin, Benzathin, N-Methy1-D-glucamin und Hydrabamin.

Die Verbindungen der Erfindung sind als Säuren dargestellt. Sie können jedoch auch als Zwitterionen (innere Salze) vorliegen. Auch diese Formen gehören zu den "pharmazeutisch verträglichen Salzen" und damit zum Gegenstand der Erfindung.

Die ß-Lactame der Formel I und ihre pharmazeutisch verträgliehen Salze wirken gegen gram-positive und gram-negative Keime. Die Verbindungen der Erfindung können deshalb zur Behandlung von bakteriellen Infektionen einschließlich Harnwegs- und Atemwegsinfektionen bei Säugern, wie Haustieren, z.B. Hunde, Katzen, Kühe oder Pferde, sowie beim Mensehen eingesetzt werden.

Zur Behandlung von bakteriellen Infektionen wird eine Verbindung der Erfindung in einer Menge von etwa 1,4- bis 350, vorzugsweise etwa 14· bis 100 mg/kg/Tag verabreicht. Die Verabreichung kann auf irgendeiner der in der Vergangenheit zur Aufnahme von Penicillinen und Cephalosporinen an den Ort der Infektion angewandten Verabreichungsarten erfolgen. Hierzu gehören orale, intravenöse oder intramuskuläre Verabreichung oder die Gabe als Suppositorium.

Zur Herstellung der Verbindungen der Erfindung können als Ausgangsmaterial ein geschützter Aminosäureester der Formel II Q

A₁-NH-CH₂-C-O-A₂ (II)

und ein Keton der Formel III eingesetzt werden.

36H317

20

(III)

In der Formel II bedeutet, wie allgemein in der Beschreibung, das Symbol A^ eine Amino-Schutzgruppe, beispielsweise eine tert.-Butoxycarbonyl- oder eine Benzyloxycarbonylgruppe. Das Symbol A2 bezeichnet eine Carboxyl-Schutzgruppe, wie eine Alkyl-, Benzyl- oder Benzhydrylgruppe. Eine Aldol-Kondensation einer Verbindung der Formel II mit einem Keton der Formel III ergibt die entsprechende Verbindung der Formel IV.

\b-

OH

(CH,)

2'm

(IV)

O-A.

25 30

Die Entfernung der Carboxyl-Schutzgruppe "A2" unter Verwendung üblicher Verfahren zur Schutzgruppen-Abspaltung ergibt die entsprechende Verbindung der allgemeinen Formel V.

35

36U317 Die Kupplung einer Säure der Formel V mit einem Hydroxylamin mit geschütztem O-Atom der Formel VI

A₅-ONH₂ (VI)

in der A, eine Schutzgruppe, wie feine Benzyl-, Trityl- oder Pivaloylgruppe darstellt, ergibt die entsprechende Verbindung der Formel VII

<^CH2>n

(VII)

NH-O-A-

Die Umsetzung verläuft in Gegenwart eines Kupplungsmittels, wie 1-Äthyl-3-(dimethylaminopropyl)-carbodiimid oder Dicyclohexylcarbodiimid.

Die Cyclisierung einer Verbindung der Formel VII kann durfch Behandlung der Verbindung mit Triphenylphosphin und einem Dialkylazodicarboxylat erfolgen. Dabei wird eine entsprechende Verbindung der Formel VIII erhalten.

A₁-NH

CH C (C

J: N-o-A,

(VIII)

In einer anderen Ausführungsform kann die Verbindung der Formel VIII dadurch hergestellt werden, daß zunächst die Hydroxylgruppe der Verbindung der Formel VII in eine austretende Gruppe umgewandelt wird. Dazu wird beispielsweise ein Reagens, wie Pyridin-Schwefeltrioxid-Komplex verwendet. Anschließend wird die Verbindung mit einer Base, wie eirem

-17- . 36U317 Alkalimetallcarbonat, behandelt.

Die Reduktion einer Verbindung der Formel VIII zur entsprechenden Verbindung der allgemeinen Formel IX 5

A, -NH

-C—— ι

(IX)

^^ N-OH

(UH₂)

kann durch katalytische Hydrierung, wenn A, eine Benzylgruppe darstellt, Behandlung mit einer Base, wie Natriumsulfid oder Natriumhydroxid, wenn A₇, eine Pivaloylgruppe bedeutet, oder durch Behandlung mit 80$ wäßriger Essigsäure erfolgen, wenn A^ die Tritylgruppe darstellt.

Eine Verbindung der Formel IX kann mit einem Komplex aus Pyridin und Schwefeltrioxid behandelt werden, wobei das Pyridiniumsalz der Verbindung der Formel X entsteht.

'n A,-NH

Ι·· "~Hfi I

Nja c—(CH₂)_m

I ι (χ)

N-O-SCUH .

Die Umsetzung kann in einem anorganischen Lösungsmittel, vorzugsweise Pyridin, erfolgen. Anstelle der Verwendung eines vorgeformten Komplexes aus Pyridin und Schwefeltrioxid kann der Komplex auch in situ erzeugt werden, beispielsweise durch Verwendung von Chlorsulfonyltrimethylsilylester und Pyridin als Reagenzien. In einer anderen Ausführungsform kann ein Komplex aus Dirnethylformamid-Schwefeltrioxid oder 2,6-Lutidin-Schwefeltrioxid verwendet

werden. Unter Anwendung üblicher Verfahren, beispielsweise von Ionenaustauscherharzen, Kristallisation oder Ionenpaar-Extraktion, können die durch die vorstehenden Umsetzungen erzeugten Pyridiniumsalze in andere Salze umgewandelt werden.

Die Abspaltung der Schutzgruppe des 3-Amino-Substituenten einer Verbindung der Formel X kann durch Anwendung üblicher Verfahren zur Abspaltung von Schutzgruppen erfolgen. Es wird die entsprechende Verbindung der allgemeinen Formel XI erhalten.

NH,

^H- . ^ ^

—2'η (CH

-N-O-SO₃H

Wenn beispielsweise die Schutzgruppe eine tert.-Butoxycarbonylgruppe ist, kann Trifluoressigsäure zur Abspaltung der Schutzgruppe von der Aminogruppe verwendet werden. Wenn die Schutzgruppe eine Benzyloxycarbonylgruppe darstellt, kann katalytische Hydrierung angewendet werden. Wenn die Schutzgruppe eine o-Nitrosulfenylgruppe bedeutet, kann p-Toluolsulfonsäure in Verbindung mit p-Thiokresol eingesetzt werden.

Zur Umwandlung einer Verbindung der Formel XI in ein Produkt der Formel I können übliche Acylierungsverfahren benutzt werden. Beispiele für geeignete Verfahren sind die Umsetzung mit einer Carbonsäure (R^-OH) oder dem entsprechenden Carbonsäurehalogenid oder Carbonsäureanhydrid. Die Umsetzungen mit einer Carbonsäure verlaufen am besten in Gegenwart eines Carbodiimids, wie Dicyclohexylcarbodiimid, und eines Stoffes, der zur Bildung eines reaktiven Zwischenproduktes in situ in der Lage ist, wie N-Hydroxy-

~¹⁹~ 36U317

benzotriazol oder 4-Dimethylaminopyridin. In den Fallen, in denen der Acylrest (R^) eine reaktive Gruppe, wie Amino- oder Carboxylgruppen, enthält, kann es notwendig sein, diese Gruppen zunächst zu schützen, dann die Acylierung durchzuführen und schließlich die Schutzgruppen vom erhaltenen Produkt abzuspalten.

Weitere Ausführungsformen des Verfahrens zur Herstellung der Verbindungen der Erfindung sind für den Fachmann ersichtlich. Beispielsweise kann die Amino-Schutzgruppe von einer Verbindung der Formel VIII abgespalten und die erhaltene Verbindung acyliert werden, bevor die Sauerstoff-Schutzgruppe (A^) in 1-Stellung des ß-Lactams abgespaltet und sulfoniert wird.

Die bevorzugten Acylreste (R^) in den Verbindungen der Erfindung sind diejenigen der Formel XII

in der Y^ und Y^ unabhängig voneinander Wasserstoffatome oder Methylgruppen bedeuten oder Y^ und Y2 zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind, eine Cyclopropyl-, Cyclobutyl- oder Cyclopentylgruppe bilden, und Y-, eine Hydroxy-, Amino- oder Hydroxyaminogruppe darstellt.

Die Verbindungen der Formel I enthalten mindestens ein AsymmetrieZentrum - das Kohlenstoffatom (in 3-Stellung des ß-Lactam-Kerns), an das der Amino- oder Acylamino-Substituent gebunden ist. Die Erfindung betrifft diejenigen ß-Lactame gemäß vorstehender Beschreibung, in der die Stereo-Chemie am AsymmetrieZentrum in 3-Stellung des ß-Lactam-Kernsdie gleiche ist, wie die Konfiguration am Kohlenstoffatom in 6-Stellung der natürlich vorkommenden

Penicilline, z.B. Penicillin G, und wie die Konfiguration am Kohlenstoffatom in 7-Stellung der natürlich vorkommenden Cephamycine, z.B. Cephamycin C.

Die Beispiele erläutern die Erfindung.

Beispiel 1 Dikaliumsalz von (Z)~^7Z^-(²-"^Amin°-^i|~'^tniazolyl)-2-oxo-2-

äthyliden7-amino7-ox27-essigsäure

A) N-(tert.-Butoxycarbonyl)-glycin-benzylester

2)75 S (0,05 Mol) N-(tert.-Butoxycarbonyl)-glycin und 9*4 S (0,055 Mol)Benzylbromid werden in 20 ml Dimethylformamid auf geschlämmt und unter Argon mit 6,0 g (0,06 Mol) Kaliumbicarbonat behandelt. Nach 38 Stunden Rühren wird Wasser zugegeben, wobei eine Masse aus klumpigem weißen Peststoff entsteht, die filtriert und mit Wasser gewaschen wird. Der Feststoff wird dann in Essigsäureäthylester aufgenommen und die Lösung über Natriumsulfat getrocknet, eingedampft und der erhaltene Feststoff aus 600 ml heißem Hexan umkristallisiert. 2 Stunden Abkühlen auf -5°C und Filtrieren ergibt 11,6 g kristalline Blättchen vom F. 72 bis 73°C in zwei Chargen.

B) N-(tert.-Butoxycarbonyl)-oi -(1-hydroxycyclopentyl)-glycin-benzylester

Eine Lösung von 3»77 ml (23 mMol) Diisopropylamin in 40 ml trockenem Tetrahydrofuran wird unter Argon auf -4-0⁰C abgekühlt und mit 13 ml (21,5 mMol) 1,71 N n-Butyllithium-Iösung behandelt. Nach 20 Minuten Rühren wird das Gemisch auf -78⁰C abgekühlt und mit einer Lösung von 2,65 S (10 mMol) N-(tert.-Butoxycarbonyl)-glycin-benzylester in 10 ml Tetrahydrofuran behandelt. Das Gemisch bekommt eine dunklere gelbe Färbung, bleibt jedoch klar. Nach 0,5 Stunden bei -78⁰C werden 0,88 ml (11,5 mMol) getrocknetes (4 S. Sieb)

~^2Λ~ 36U317 Cyclopentanon zugegeben. Nach weiteren 15 Minuten bei -78 C wird das Gemisch innerhalb von 0,5 stunden auf -2O⁰C erwärmt, wobei sich die Farbe der Lösung nach tief purpur verändert. Die Temperatur wird für 20 Minuten auf O⁰C erhöht. Dann werden 1,32 g (22 mMol) Essigsäure in 5 ml Tetrahydrofuran zugegeben, worauf die Farbe verschwindet und ein gelartiger Niederschlag zurückbleibt. Das Gemisch wird in Wasser gegossen und mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die organische Schicht wird mit Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und zu einem öl eingedampft, das an 900 ml LPS-1 in Hexan:Essigsäureäthylester =3:1 chromatographiert wird. Eindampfen der Produktfraktionen und Kristallisation aus Hexan ergibt in zwei Chargen 1,68 g Produkt vom F. 68 bis 70⁰C (R_f = 0,77; Kieselgel, Hexan:

Essigsäureäthylester = 3:1).

C) N-(tert.-Butoxycarbonyl)-CX-(I-hydroxycyclopentyl)-glycin

Eine Lösung von 1,81 g (4,98 mMol) Produkt von Teil B) in 30 ml wasserfreiem Äthanol wird bei 25⁰C 2,5 Stunden mit 0,4 g 10$ Palladium auf Aktivkohle und Wasserstoff unter einem Druck von 1 Atmosphäre behandelt. Dann wird der Katalysator abfiltriert und das Lösungsmittel abdestilliert. Der Rückstand wird mit Benzol versetzt und eingedampft. Anschließend wird der Rückstand aus Isopropyläther (erste Charge) und Hexan (zweite Charge) kristallisiert, wobei insgesamt 1,07 g Produkt vom F. 132 bis 134⁰C erhalten werden.

D) N-(Benzyloxy)-N -(tert.-butoxycarbonyl)-ot-(1-hydroxycyc1openty1)-glycinamid

Eine Lösung von 0,83 g (3,2 mMol) Produkt von Teil C) in 20 ml Tetrahydrofuran wird unter Argon bei O⁰C mit 0,43 g (3,2 mMol) Hydroxybenzotriazol-monohydrat und dann mit 0,65 g (3,2 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 2 Stunden bei O⁰C gerührt. Eine

-²²- 36U317

Lösung von 1 g (6,3 mMol) o-Benzylhydroxylamin-hydrochlorid in 10 ml Wasser wird mit 10$ Natronlauge auf den pH-Wert 13 eingestellt. Kochsalz wird zur Sättigung zugegeben und die freie Base in Diäthyläther extrahiert. Nach dem Trocknen über wasserfreiem Natriumsulfat wird der Äther eingedampft, wobei 0,8 g freies Amin als öl verbleiben. Eine Lösung des o-Benzylhydroxylamins in Tetrahydrofuran wird zu dem Hydroxybenzotriazolester gegeben. Das Reaktionsgemisch wird auf 20°C erwärmt und 5 Stunden gerührt. 10

Dann wird das Reaktionsgemisch abgekühlt und filtriert. Das Piltrat wird zu einem Schaum eingedampft, der in Essigsäureäthylester gelöst und nacheinander mit Wasser, 5# Natriumbicarbonatlösung und Kochsalzlösung gewaschen wird.

!5 Nach dem Trocknen über wasserfreiem Natriumsulfat wird die Lösung zu einem öl eingedampft. Das öl wird dann an LPS-1 chromatographiert und mit HexanrDiäthyläther:Methylenchlorid = 1:1:1 eluiert. Die reines Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und zu 0,82 g festes Produkt eingedampft.

E) 1-(Benzyloxy)-3-^rtert.-butoxycarbonyl)-amino7-2-oxo-

Eine Lösung von 0,82 g (2,16 mMol) Produkt von Teil D) in 15 ml Pyridin wird unter Argon mit 0,47 g (29,5 mMol) Pyri din-Schwefeltrioxid-Komplex versetzt. Das Reaktionsgemisch wird auf 50 bis 55°C erhitzt. Nach 1,5 Stunden wird eine weitere Menge von 0,150 g (0,9 mMol) Pyridin-Schwefeltrioxid-Komplex zugegeben und das Reaktionsgemisch 1 weitere Stunde erhitzt. Dann wird das Reaktionsgemisch unter vermindertem Druck eingedampft und dreimal mit Acetonitril azeotrop destilliert. Der Rückstand wird hierauf mit einem kalten Gemisch aus einer Lösung von 3,32 g Kaliumcarbonat in 9 nil Wasser und 25 ml Essigsäureäthylester versetzt. Das Reaktionsgemisch wird kräftig gerührt und 2 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Danach zeigt das Dünnschichtchroma

-²³~ 36U317 togramm an, daß die Umsetzung nahezu abgeschlossen ist. Nach dem Abkühlen wird das Reaktionsgemisch mit Wasser und Essigsäureäthylester verdünnt und die Phasen getrennt. Die organische Phase wird mit 5% Kaliumbisulfatlösung und Kochsalzlösung gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Nach dem Eindampfen wird der Rückstand an LPS-1 mit Hexan:Essigsäureäthylester = Ί>\Λ chromatographiert. Ausbeute: 550 mg reine Titelverbindung.

F) Monokaliumsalz von 3-/Ttert.-Butoxycarbonyl)-amino7-2-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro₍/5.i!:7octan Eine Lösung von 0,4-5 g (1,29 mMol) Produkt von Teil E) in 25 ml absolutem Äthanol wird mit 100 mg 10$ Palladium auf Aktivkohle behandelt und bei Raumtemperatur 1 Stunde unter Wasserstoff gerührt. Danach zeigt das Dünnschichtchromatogramm, daß kein Ausgangsmaterial mehr vorhanden ist. Das Gemisch wird durch ein Celite-Bett filtriert, das Filtrat zu einem Rückstand eingedampft, dieser mit 10 ml Pyridin versetzt und die Lösung auf O⁰C abgekühlt und unter Argon gerührt. Dann wird das Gemisch mit 64-3 mg (3 Äquiv.) Pyridin-Schwefeltrioxid-Komplex versetzt und bei Raumtemperatur gerührt. Nach 2 Stunden zeigt das Dünnschichtchromatogramm, daß die Umsetzung vollständig ist. Nach dem Eindampfen unter vermindertem Druck wird der Rückstand in einer 10prozentigen Lösung von zweibasigem Kaliumphosphat mit einer kleinen Menge Aceton zum Löslichmachen aufgenommen und auf eine Säule mit Dowex AG-50 (K⁺) gebracht und mit Wasser und anschließend mit 20# Aceton/Wasser eluiert. Die produkthaltigen Fraktionen werden lyophilisiert und der Rückstand dann an einer Säule mit HP-20 gereinigt und mit V/asser und anschließend mit einem Gradienten von 0-10% Aceton/ Wasser gereinigt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden lyophilisiert, wobei insgesamt 259 mg Produkt erhalten werden.

- 36U317

G) Monokaliumsalz von (Z)-/7Z^-(²-Amino-4~thiazolyl)-2-oxo-2-/72"-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro/3.4;7oct-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-oxy_7-essigsäure-diphenylmethylester 280 mg (0,75 mMol) Titelverbindung von Teil F) werden mit 2 ml trockenem Dichlormethan bedeckt, mit 0,8 ml Anisol versetzt und das Gemisch auf -10⁰C abgekühlt. Sodann werden 3 ml Trifluoressigsäure zugegeben und die Lösung 1,5 Stunden bei -10 bis -5°C gerührt. Nach 0,75 Stunden entsteht ein Feststoff, dessen Menge nach 1,5 Stunden erheblich ist. Die flüchtigen Bestandteile werden unter vermindertem Druck abdestilliert und der feste Rückstand mit Äther digeriert, wobei 3-Amino-2-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro/3-^z*-7octan erhalten wird.

310 mg (0,75 mMol) (Z)-2-Amino- a:-/7777tdiphenylmethyl)-ox27-carbony l7-methy 17-0x^7-imino7-^zi—thiazolessigsäurediphenylmethylester in 4- ml trockenem Dimethylformamid werden mit 115 /ul (0,82 mMol) Triäthylamin behandelt und das Gemisch unter Argon auf -30⁰C abgekühlt. Dann werden 155 μΙ (0,75 mMol) Diphenylchlorphosphat zugegeben und das Gemisch 1 Stunde bei -30 bis -20⁰C gerührt, wobei eine Lösung eines gemischten Anhydrids der Ausgangssäure erhalten wird.

Es wird eine Lösung von 3-Amino-2-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro/3.47octan in 2,5 ml Dimethylformamid hergestellt.

Die Lösung des gemischten Anhydrids wird dann bei -30⁰C mit 500 pl (3>6 mMol) Triäthylamin und anschließend mit der Lösung des ß-Lactams versetzt. Das Gemisch wird in 0,5 Stunden unter Argon auf -5°C erwärmt. Dann wird das Gemisch unter vermindertem Druck zu einem gummiartigen Rückstand eingedampft. Dieser wird in Aceton aufgenommen und mit einem gleichen Volumen Wasser verdünnt. Der pH-Wert (3,4-5) wird mit Kaliumbicarbonat auf 6,85 eingestellt und die Lösung wird durch eine Säule mit Dowex AG50 (K ) geführt und mit 50$ Aceton eluiert. Die produkthaltigen Fraktionen werden zu einer Aufschlämmung eingeengt, die auf eine Säule mit

-²⁵~ 36U317 80 ml HP-20 aufgebracht und mit Wasser und anschließend mit einem Aceton-Gradienten bis zu 50% Aceton eluiert wird. Die Produktfraktionen (37,5 bis 50# Aceton) werden vereinigt und lyophilisiert. Ausbeute: 0,31 g weißer Peststoff mit einer IR-Absorption bei 1780 cm"¹.

H) Dikaliumsalz von (Z)-^77^;T-(2-Amino-^~thiazolyl)-2-oxo-2-/72-OXO-1-(sulfooxy)-1-azaspiro^3·47oct-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-ox27-essigsäure

0,31 g (0,4-6 mMol) Titelverbindung von Teil G) werden in 6 ml trockenem Dichlormethan und 0,8 ml Anisol aufgeschlämmt, auf -10°C abgekühlt und mit 10 ml Trifluoressigsäure versetzt. Nach 1 Stunde bei -10 bis -5°C werden 10 ml trockenes Toluol zugegeben und das Gemisch unter vermindertem Druck nahezu zu Trockne eingedampft. Der Rückstand wird mit Hexan gewaschen, dann in Wasser aufgenommen (pH-Weit 1,8) und rasch mit verdünnter Kaliumbicarbonatlosung auf den pH-Wert 6,85 eingestellt.
Chromatographie an 60 ml HP-20 in Wasser ergibt das reine Produkt. Durch Lyophilisierung werden 217 mg Titelverbindung als weißes Pulver vom F. 230 bis 250⁰C (Zers.) erhalten.

Analyse für O, ^H₁^N₅O₉S₂K₂.3,5 H₂O
ber.: C 27,90 H 3,68 N 11,62 S 10,64 K 12,97 gef.: 27,85 3,61 11,94 10,37 13,56

Beispiel 2

Dikaliumsalz von (Z)-/7Z^-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-/72-OXO-1-(sulfooxy)-1-azaspiro£3.37hept-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-ox27-essigsäure

A) N-(tert.-Butoxycarbonyl)-a-(i-hydroxycyclobutyl)-glycin-benzylester

Eine Lösung von 9,7 ml (70 mMol) Diisopropylamin in I50 ml trockenem Tetrahydrofuran wird bei -40⁰C unter Argon mit 39 ml (64,5 mMol) 1,71 N n-Butyllithium in Hexan behandelt

und die blaßgelbe Lösung 20 Minuten bei -A-O⁰C gerührt. Dann wird die Lösung auf -78 C abgekühlt und tropfenweise innerhalb von 5 Minuten mit einer Lösung von 7,95 g (30 mMol) N-(tert.-Butoxycarbonyl)-glycin-benzylester in 30 ml trockenes Tetrahydrofuran versetzt. Es entsteht eine dunkler gelbe Lösung und nach 20 Minuten eine leichte Trübung. Nach 0,5 Stunden wird eine Lösung von 2,42 g (2,0 ml, 3^,5 mMol) Cyclobutanon in 30 ml Tetrahydrofuran zugegeben. Das erhaltene gelbe, trübe Gemisch wird 15 Minuten bei -78⁰C gerührt und dann 2 Stunden in ein Eisbad von O⁰C gestellt. Bei einer Innentemperatur von -25°C (1 Stunde) wird die Lösung klar und bei -15°C dunkel-purpurfarben. Die Lösung wird 0,5 Stunden bei O⁰C gerührt und dann mit 3,96 g (66 mMol) Eisessig in 15 ml Tetrahydrofuran behandelt, wobei ein trübes, hell-

¹^ gelbes G_emisch erhalten wird. Dieses wird in 5OO ml kaltes Wasser gegossen und zweimal mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die Extrakte werden mit 2% Kaliumbisulfatlösnng, 5$ Natriumbicarbonatlösung und Kochsalzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und zu einem dicken Öl eingedampft. Chromatographie an 800 ml LPS-1 in Hexan:Essigsäureäthylester =2:1 und Vereinigung der Produktfraktionen (E_f = 0,29) ergibt 7,8 g Produkt als öl.

B) W-(tert.-Butoxycarbonyl)-a-(1-hydroxycyclobutyl)-glycin

7,8 g (23,3 mMol) Produkt von Teil A) werden 4 Stunden bei 25°C über 1 g 10$ Palladium auf Aktivkohle in 500 ml absolutem Äthanol unter einem Druck von 1 Atmosphäre Wasserstoff hydriert. Dann wird der Katalysator abfiltriert und das Lösungsmittel unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird zweimal mit Benzol versetzt und eingedampft, wobei 5,0 g Produkt als harter Schaum erhalten werden.

*5 £ 1 / *? 1 7

C) N-(Benzyloxy)-N -(tert.-butoxycarbonyl)-<x-(T--nydroxycyelobutyl)-glycinamid

5,0 g (20,4 raMol) Produkt von Teil B) werden in 150 ml trockenen Tetrahydrofuran unter Argon gelöst. Die Lösung wird mit 3,12 g (20,4 mMol) Hydroxybenzotriazolhydrat versetzt und das Gemisch auf O⁰C abgekühlt und dann mit 4,20 g (20,4 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid behandelt. Nach 1,75 Stunden bei O⁰C wird eine Lösung von O-Benzylhydroxylamin in 15 ml Tetrahydrofuran zugegeben und das Gemisch 17 Stunden bei 0 bis 25°C gerührt. Das Tetrahydrofuran-Gemisch wird dann 20 Minuten auf -10°C abgekühlt und der entstandene Feststoff abfiltriert und mit trockenem Tetrahydrofuran gewaschen. Das Filtrat wird eingedampft und der Rückstand in Essigsäureäthylester aufgenommen und rasch mit 2% Kaliumbisulfatlösung, Kochsalzlösung, 5$ Natriumbicarbonatlösung und Kochsalzlösung gewaschen, dann über Natriumsulfat getrocknet und zu einem Schaum eingedampft. Digerieren mit Isopropyläther ergibt 4,69 g Produkt als weißer Feststoff vom F. 95 bis 97⁰C

D) 1-(Benzyloxy)-3-/rfrert.-butoxycarbonyl)-amino7-2-oxo-1-azaspiro/5.37heptan

3,50 g (10 mMol) Produkt von Teil C) in 200 ml trockenem Tetrahydrofuran werden bei O⁰C unter Argon mit 2,4 ml (15 mMol) Diäthylazodicarboxylat und dann innerhalb von 10 Minuten mit einer Lösung von 5»2 g (20 mMol) Triphenylphosphin in 50 ml Tetrahydrofuran versetzt und das Gemisch wird 1 Stunde bei O⁰C gerührt. Nachdem die gelbe Farbe bestehen bleibt, werden weitere 0,52 g (2 mMol) Triphenylphosphin zugegeben. Nach 15 Minuten wird das Gemisch unter vermindertem Druck zu einem Öl eingedampft. Digerieren mit 100 ml Hexan:Essigsäureäthylester (2:1) ergibt einen weißen Feststoff, der abfiltriert wird. Chromatographie des FiI-trats an 800 ml LPS-1 ergibt Produktfraktionen (R_f =0,8 in Hexan:Essigsäureäthylester = 1:1), die mit einer benachbart laufenden Verunreinigung behaftet sind. Diese wird

durch Digerieren mit I.sopropyläther entfernt. Ausbeute: 1,07 g Produkt als weißer Feststoff vom F. 156 bis 157⁰C

E) Mononatriumsalz von 3-^C"fcert.-Butoxycarbonyl)-amino7-2-0X0-1 -(sulfooxy)-1-azaspiro^3 .*>7heptan 1,07 g (3,22 mMol) Produkt von Teil D) werden in 30 ml absolutem Äthanol über 0,4 g 10% Palladium auf Aktivkohle 3 Stunden bei 25°C unter einem Wasserstoffdruck von 1 Atmosphäre hydriert. Dann wird der Katalysator abfiltriert und das Lösungsmittel bei 10 C unter vermindertem Druck abdestilliert, wobei ein Feststoff erhalten wird, der in 19 ml trockenes Pyridin aufgenommen und bei 25°C unter Argon mit 1,44 g (9 mMol) Pyridin-Schwefeltrioxid behandelt wird. Nach 4 Stunden werden die flüchtigen Bestandteile unter vermindertem Druck abdestilliert, der Rückstand in Wasser aufgenommen und der pH-Wert von 5,4-0 mit verdünnter Natriumbicarbonatlösung auf 6,45 eingestellt. Das Gemisch wird in Wasser durch eine Säule mit 40 ml Dowex AG50 (K⁺) geführt, wobei Produkt in 3OO ml erhalten wird. Durch Lyophilisierung wird ein weißer Feststoff erhalten, der an HP-20 chromatographiert und zunächst mit Wasser und dann mit einem ansteigenden Gradienten bis 20$ Aceton eluiert wird. Die Produktfraktionen werden lyophilisiert. Ausbeute: 0,75 S weißes Pulver.

F) Monokaliumsalz von (Z)-^7_7/T-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-

oxo-2-/72-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro/^5.37hept-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-ox27-essigsäure-diphenylmethyl- ester

0,3 g (0,87 mMol) Produkt von Teil E) werden bei -10⁰C unter Argon in 2,5 ml trockenem Dichlormethan und 1,0 ml Anisol aufgeschlämmt und dann mit 4,0 ml Trifluoressigsäure behandelt. Nach 0,5 Stunden ist ein Feststoff entstanden. Nach 1,5 Stunden werden 4 ml trockenes Toluol zugegeben und das Gemisch unter vermindertem Druck eingedampft, wobei festes 3-Amino-2-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro^5-37heptan

erhalten wird, das zweimal mit Hexan digeriert und unter vermindertem Druck 1 Stunde bei 25°C getrocknet wird.

0,42 g (1,0 mMol) (Z)-2-Amino-cx-^ZZZ^^diP^heny^lmeth7¹)-ox2;7-car'bonyl7-methyl7-ox27-iniino7-^zl~thiazolessigsäure- diphenylmethylester werden 2 Stunden bei 25 C unter vermindertem Druck über Phosphorpentoxid getrocknet. Eine Lösung dieses Feststoffs in 5iO ml trockenes Dimethylformamid unter Argon wird mit 0,10 g (1,0 mMol) Triäthylamin behandelt und auf -35°C abgekühlt. Dann werden 207 All (269 mg, 1,0 mMol) Diphenylchlorphosphat zugegeben und das Gemisch 50 Minuten bei -30 bis -4-0⁰C gerührt, wobei eine gelbe trübe Lösung eines gemischten Anhydrids erhalten wird.

Das vorstehend erhaltene 3-Amino-2-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro^3»37heptan wird in 5 ml trockenem Dimethylformamid bei O⁰C aufgenommen. Diese Lösung wird gleichzeitig mit 0,4 g (4· mMol) Triäthylamin zu dem gemischten Anhydrid gegeben. Nach 1 Stunde bei -35 bis -5°C wird das Dimethylformamid unter vermindertem Druck bei 10⁰C eingedampft und der Rückstand in Aceton und Wasser aufgenommen (pH-Wert 4,35). Der pH-Wert wird mit verdünnter Kaliumbicarbonatlösung auf 6,75 eingestellt und die Lösung wird in 50$ Aceton-Wasser durch eine Säule mit 30 ml Dowex AG50 (K⁺) geführt.

Die Produktfraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft, wobei eine wäßrige Aufschlämmung erhalten wird, die auf eine Säule mit 40 ml HP-20 aufgebracht und mit Wasser eluiert wird. Durch Einführung eines 50$ Aceton-Gradienten wird das Produkt erhalten. Lyophilisierung ergibt 400 mg weißliches Pulver.

G) Dikaliumsalz von (Z)-/77^;T-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-/72-OXO-1-(sulfooxy)-1-azaspiro/3.^7hept-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-oxv7-essigsäure

325 mg (0,51 mMol) Produkt von Teil F) werden in einem Gemisch von 6 ml trockenem Dichlormethan und 1 ml Anisol unter

"⁵⁰~ 36U317 Argon bei -10 C aufgeschlämmt und mit 10 ml Trifluoressigsäure behandelt. Nach 45 Minuten bei -10° bis O⁰C werden 10 ml trockenes Toluol zugegeben und die flüchtigen Bestandteile unter vermindertem Druck bei 10⁰C abdestilliert. Der Rückstand wird zweimal mit Hexan digeriert, unter vermindertem Druck trockengepumpt, dann in 10 ml Wasser aufgenommen (pH-Wert 1,8) und der pH-Wert mit verdünnter Kaliumbicarbonatlösung auf 6,75 eingestellt. Chromatographie an einer Säule mit 40 ml HP-20 in Wasser ergibt nach 140 ml Auslauf die Produktfraktionen. Durch Lyophilisierung werden 205 mg Titelverbindung als weißer Feststoff erhalten.

Analyse	für	98	I 1	3	OqS2I	N	2,	95 H2(	S 11	,08	K	13	,51
ber.:	C 26,	98	H	2	,29		12	,10	10	,81		14	,78
gef.:	26,		,68	12	,04

Beispiel 3 (Z)-/77^-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-/72-oxo-1-(sulfooxy)-

7-oxa-1 -azaspiro^3". ^Znon^-ylZ-aminoZ-athylidenZ-amino/-oxy-essigsäure
20

A) N-(tert.-Butoxycarbonyl)-Ot-(4-hydroxy-2,3,5,6-tetrahydro-4-pyranyl)-glycin-benzylester Eine Lösung von 17,5 ml (0,127 Mol) Diisopropylamin in 300 ml trockenem Tetrahydrofuran wird bei -45°C unter Argon mit 70 ml (0,117 Mol) 1,71 M n-Butyllithium in Hexan behandelt. Nach 20 Minuten bei -45°C wird das Gemisch auf -72⁰C abgekühlt und mit 13,3 g (0,05 Mol) getrockneter N-(tert.-Butoxycarbonyl)-glycin-benzylester in 60 ml trockenes Tetrahydrofuran behandelt. Nach 50 Minuten wird die dunkelgelbe homogene lösung mit 5 ml (5,43 g, 0,0543 Mol) Tetrahydro-4-pyranon in 50 ml Tetrahydrofuran behandelt und die Temperatur in 1,5 Stunden auf O⁰C ansteigen gelassen. Die purpurrote Lösung wird dann mit einer Lösung von 7,2 g (0,12 Mol) Eisessig in 20 ml Tetrahydrofuran versetzt. Das dabei erhaltene hellgelbe trübe Gemisch wird in 1 Liter Wasser gegossen und mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die

"³¹- 36H317

organische Schicht wird mit 2% Kaliumbisulfatlösung, 5$ Natriumbicarbonatlösung und Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und zu einem Öl eingedampft. Chromatographie an 800 ml LPS-1 in Hexan:Essigsäureäthylester (1:1) und Vereinigung der Produktfraktionen (IL. = 0,52 im gleichen Lösungsmittel) ergibt ein Öl, das beim Digerieren mit Hexan verfestigt wird. Gesamtausbeute: 10,34 g Produkt als weißer Feststoff vom P. 90 bis 93°C.

B) N-(tert.-Butoxycarbonyl)-oi_(4_hydroxy-2,3,5,6-tetrahydro-4-pyranyl)-glycin

10*34 g (28,3 mMol) Produkt von Teil A) und 2,0 g 10$ Palladium auf Aktivkohle in 200 ml absoluten Äthanol werden 2 Stunden mit Wasserstoff und einem Druck von 1 bar behandelt. Danach wird der Katalysator abfiltriert und das Lösungsmittel unter vermindertem Druck und zuletzt durch gemeinsame Verdampfung mit Benzol entfernt. Eine geringe Menge Essigsäureäthylester führt zur Kristallisation. Die Aufschlämmung wird mit Isopropyläther digeriert, filtriert und mit Isopropyläther und Hexan gewaschen und an der Luft getrocknet. Ausbeute: 6,84 g Produkt als weißer Peststoff vom P. 140 bis 141⁰C.

C) N-(Benzyloxy)-N -(tert.-butoxycarbonyl)- ot-(4-hydroxy-2,3,5,6-tetrahydro-4-pyranyl)-glycinamid 6,84 g (24,9 mMol) Produkt von Teil B) und 3,80 g (24,9 mMol) N-Hydroxybenzotriazolhydrat in 150 ml Tetrahydrofuran werden bei 0⁰C mit 5»12 g (24,9 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid behandelt und das Gemisch 1 Stunde gerührt. Dann wird das Gemisch mit einer Lösung von O-Benzylhydroxylamin in 50 ml Tetrahydrofuran versetzt. Die erhaltene Aufschlämmung wird 14 Stunden bei 0 bis 25⁰C gerührt, dann auf 0⁰C abgekühlt und filtriert. Das Piltrat wird zu einem Schaum eingedampft. Dieser wird zwischen Essigsäureäthylester und 5$ Natriumbicarbonatlösung verteilt. Die organische Schicht wird abgetrennt und mit J>% Kaliumbisulfatlösung gewaschen,

~⁵²~ 36H317

über Natriumsulfat getrocknet und zu einem Feststoff eingedampft. Digerierung mit Isopropyläther und Hexan ergibt 8,14 g Produkt vom F. 154 bis 157°C

D) 1-(Benzyloxy-3-/£tert.-butoxycarbonyl)-amino7-2-oxo-7-oxa-1-azaspiro/5.]?7nonan

1,9 g (5 mMol) Produkt von Teil C) in 20 ml trockenen Pyridin wird unter Argon mit 1,05 g (6,5 mMol) Pyridin-Schwefeltrioxid behandelt und 2 Stunden auf 57°C erhitzt. Dann werden die flüchtigen Bestandteile unter vermindertem Druck entfernt. Trockenes Acetonitril wird viermal zugegeben und abdestilliert. Der Rückstand wird mit einer Lösung von 5 g (36 mMol) Kaliumcarbonat in 12,5 ml Wasser und dann 4-0 ml Essigsäureäthylester behandelt. Das Gemisch wird 6 Stunden unter Rückfluß erhitzt und kräftig gerührt. Dann wird das Gemisch abgekühlt, mit Wasser verdünnt und die Schichten getrennt. Die organischen Schichten werden mit 3$ Kaliumbisulfatlösung und Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und zu einem Feststoff eingedampft. Chromatographie an 350 ml LPS-1 in Hexan:Essigsäureäthylester (1:1) und Eindampfen der reinen Produktfraktionen (R~ = 0,56 im gleichen lösungsmittel) ergibt einen Feststoff. Durch Digerieren mit Isopropyläther und Trocknen an der Luft werden 0,78 g Produkt als weißer Feststoff vom F.

144- bis 146⁰C erhalten.

E) 3-/Ttert.-But oxyc arbony1)-amino7~7-oxa-2-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro/3.57nonan, Monokaliumsalz 0,78 g (2,15 mMol) Produkt von Teil D) werden in 20 ml wasserfreiem Äthanol aufgeschlämmt und 1 Stunde mit 0,25 g 1C# Palladium auf Aktivkohle und Wasserstoff mit einem Druck von 1 bar behandelt. Dann wird der Katalysator abfiltriert und die flüchtigen Bestandteile unter vermindertem Druck entfernt, wobei ein öl erhalten wird. Dieses wird in 15 ml trockenes Pyridin unter Argon als Schutzgas aufgenommen und 3 Stunden bei 25°C mit 0,69 g (4-,34 mMol) Pyridin-

~ ³³ ~ 36U317

Schwefeltrioxid behandelt. Die flüchtigen Bestandteile werden wieder unter vermindertem Druck entfernt, der Rückstand in Wasser aufgenommen (teilweise Lösung) und der pH-Wert mit 5# Kaiiumbicarbonatlösung auf 6,75 eingestellt. Die erhaltene Aufschlämmung wird auf eine Säule mit 20 ml Dowex AG50 (K⁺) gegossen und mit Wasser vollständig eluiert. Durch Lyophilisierung wird ein Peststoff erhalten, der an einer Säule mit 80 ml HP-20 in einem Gradienten aus Wasser-20^

Aceton:Wasser chromatographiert wird. Lyophilisierung der Produktfraktionen ergibt 0,64 g Produkt als weißer Peststoff.

P) (Z)-/77^JT-(2-Amino-4-thiazolyl-2-oxo-2-/72-oxo-1-(sulfooxy)-7-oxa-1-azaspiro/3.57non-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-oxy_7-essigsäure _y diphenylmethylester-Monokaliumsalz 0,39 g (1,0 mMol) Produkt von Teil E) werden bei -10°C unter Argon mit 2,5 ml trockenem Dichlormethan und 1,0 ml Anisol aufgeschlämmt. Dann wird eine Menge von 6 ml Trifluoressigsäure zugegeben. Nach 1 Stunde bei -10 bis 0 C werden 6 ml trockenes Toluol zugegeben und das Gemisch unter vermindertem Druck bei 10⁰C eingedampft. Digerierung mit Hexan ergibt 3-Amino-7-oxa-2-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro/3.57nonan als weißer Peststoff.

0,42 g (1,0 mMol) (Z)-2-Amino-oc-/7777tdiphenylmethyl)-ox27-carbonyl7-niethyl7-oxy_7-iniino7""4-thiazolessigsäure in 4 ml trockenem Dimethylformamid werden bei -35 C niit 140 /ul (1,0 mMol) Triäthylamin und dann mit 207 Jül (1,0 mMol) Diphenylchlorphosphat behandelt. Nach 1 Stunde Rühren wird eine Lösung des vorstehend genannten 3-Amino-7-oxa-2-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro/3.57nonan in 5 nil trockenes Dimethylformamid gleichzeitig mit 550 /ul (4 mMol) Triäthylamin zugegeben. Die flüchtigen Bestandteile werden danach bei 10⁰C unter vermindertem Druck entfernt, der Rückstand wird in 20 ml Aceton gelöst und mit Wasser bis zur Trübung verdünnt. Der pH-Wert wird mit verdünnter Kaliumbicarbonatlösung auf 6,75 eingestellt und die Lösung durch Dowex AG50

(K⁺) in 50$ Aceton-Wasser geführt. Eindampfen ergibt eine Aufschlämmung, die an einer Säule mit 60 ml HP-20 in einem Gradienten aus Wasser-50# Aceton-Wasser chromatographiert wird. Die Produktfraktionen werden lyophilisiert, wobei 0,39 g Produkt als weißer Feststoff erhalten werden.

G) (Z)-/77^-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-/72-oxo-1-(sulfooxy)-7-oxa-1-azaspiro/3.£7non-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-ox27-essigsäure

0,39 g (0,57 mMol) Produkt von Teil F) werden in 6 ml trockenem Dichlormethan und 1,5 ml Anisol bei -10°C unter Argon als Schutzgas aufgeschlämmt und mit 10 ml Trifluoressigsäure behandelt. Nach 1 Stunde werden 12 ml trockenes Toluol zugegeben und die flüchtigen Bestandteile werden bei 10⁰C unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wird zweimal mit Hexan gewaschen, dann in Wasser aufgenommen und der pH-Wert mit verdünnter Kaliumbicarbonatlösung auf 6,75 eingestellt. Chromatographie an HP-20 in Wasser ergibt das Produkt im Gemisch mit anorganischen Bestandteilen. Das unreine Produkt wird lyophilisiert, in Wasser aufgenommen und der pH-Wert mit verdünnter Salzsäure auf 2,5 eingestellt. Chromatographie an HP-20 in einem Gradienten aus Wasser-50# Aceton:Wasser und Lyophilisierung der reinen Produktfraktionen ergibt 177 mg Titelverbindung als als weißes Pulver.

Analyse für C₁₄H₁₇N₅O₁₀S₂* 2,08 H₅O: ber.: C 32,53 H 4,13 N 13,55
gef.: 32,53 3,52 13,18

Beispiele

/3S(Z) ,AS7-/77^:T-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-/72-oxo-1-(sulfooxy)-6-thia-1-azaspiro^3.fJ;7oct-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-oxy_>7-essigsäure - Dikaliumsalz

A) N-(tert.-Butoxycarbonyl)-oc-(3-hydroxy-2,3,4,5-tetrahydro-3-thiofuranyl)-glycin-benzylester

"³⁵~ 36H317

Eine Lösung von 17,5 ml (0,125 Mol) Diicopropylamin in 300 ml trockenem Tetrahydrofuran wird bei -35⁰C unter Argon mit 70 ml (0,12 Mol) 1,71 M n-Butyllithium in Hexan behandelt, 20 Minuten gerührt, dann auf -70⁰C abgekühlt und mit einer Lösung von 13,3 g (0,03 Mol) tert.-(Butyloxycarbonyl)-glycin-benzylester in 60 ml Tetrahydrofuran behandelt. Nach 45 Minuten bei -70⁰C wird die dunkelgelbe Lösung mit einer Lösung von 5,0 g (0,049 Mol) 3-Tetrahydrothiofuranon in 50 ml Tetrahydrofuran behandelt. Die Lösung wird auf -10⁰C erwärmt, wobei die klare dunkle gelbe Färbung in ein klares Braun überging. Nach 20 Minuten bei -10°C werden 7,2 g (0,12 Mol) Eisessig in 20 ml Tetrahydrofuran zugegeben und das erhaltene trübe hellgelbe Gemisch in 1 Liter Wasser gegossen und mit Essigsäureäthylester extrahiert.

Die organische Schicht wird mit 5# Natriumbicarbonatlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und zu einem öl eingedampft. Chromatographie in Hexan:Essigsäureäthylester (2:1) an 900 ml LPS-1 ergibt teilweise Trennung der Verunreinigungen vom Produkt. Eindampfung der Fraktionen mittlerer Polarität (R_f = 0,22 bis 0,60) und Digerierung mit Isopropyläther ergibt insgesamt 6,61 g Produkt als weißer Peststoff vom F. 101 bis 102⁰C. -

B) N- (tert. -But oxy carbonyl) -ex. -(3-hydroxy-2,3,4,5-tetrahydro-3-thiofuranyl)-glycin

Eine Aufschlämmung von 2,65 g (7,22 mMol) Produkt von Teil A) in 20 ml Wasser werden mit 1,0g (7,8 mMol) Kaliumbicarbonat und dann mit 15 ml Methanol behandelt. 14 Stunden Rühren bei 25°C ergibt eine homogene Lösung, die mit Wasser verdünnt und mit Essigsäureäthylester extrahiert wurde. Die wäßrige Schicht wird mit 10$ Kaliumbisulfatlösung angesäuert, mit Natriumchlorid gesättigt und mit Essigsäureäthylester extrahiert. Trocknen über Natriumsulfat und Eindampfen der organischen Schicht sowie Digerieren des Rückstandes mit Isopropyläther ergibt 1,25 g Produkt als weißer Feststoff vom F. 116 bis 118⁰C.

36U317

C) N-(Triphenylmethoxy)-N -(tert.-butoxycarbonyl)-<x-(3-hydroxy-2,3_t4,5-tetrahydro-3-thiofuranyl)-glycinamid Ein Gemisch von 0,92 g (3,32 mMol) Produkt von Teil B) und 0,91 g (3,33 mMol) hydriertem Hydroxybenzotriazol in 30 ml Tetrahydrofuran wird bei O⁰C mit 0,68 g (3,30 mMol) Dicyclohexy!harnstoff behandelt. Nach 1 Stunde bei O⁰C werden 0,91 g (3,30 mMol) o-Tritylhydroxylamin zugegeben und das Gemisch 18 Stunden bei 0 bis 25°C gerührt. Die Aufschlämmung wird unter vermindertem Druck zu einem Feststoff eingedampft, der mit 300 ml 2% Methanol in Dichlormethan digeriert und filtriert wird. Das Filtrat wird mit 5# Natronlauge gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und zu einem Feststoff eingedampft. Eine Aufschlämmung dieses Feststoffs wird auf eine Säule mit 800 ml LPS-1 in 1# Methanol/Dichlormethan aufgebracht. Das Produkt wird mit dem gleichen Lösungsmittel eluiert, die reinen Fraktionen (R_f = 0,46 in 2% Methanol/Dichlormethan) vereinigt und zu 1,62 g Produkt als weißer Feststoff vom F. 220 bis 225°C eingedampft.

D) 1-(Triphenylmethoxy)-3-/Ctert.-butoxycarbonyl)-amino7-2-oxo-6-thia-1 -azaspiro/3 · 4_7octan

Eine Lösung von 0,28 g (3,0 mMol) destilliertem 2-Picolin in 2 ml trockenem Dichlormethan wird bei -70⁰C mit einer Lösung von 0,14 g (1,2 mMol) Chlorsulfonsäure in 1 ml Dichlormethan behandelt. Dann wird das Gemisch 1/2 Stunde auf 25°C erwärmt. Das homogene Gemisch wird dann mit einer Aufschlämmung von 0,53 g (1,0 mMol) Produkt von Teil C) in 5 ml Dichlormethan versetzt und das Gemisch 3 Stunden kräftig unter Rückfluß erhitzt. Die erhaltene klare Lösung wird unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft, der Rückstand mit einem Gemisch aus 2 ml Wasser, 7 ml Methylisobutylketon und 0,52 g (3,8 mMol) Kaliumcarbonat überschichtet. Das erhaltene Gemisch wird 3 Stunden unter Argon unter Rückfluß gekocht und kräftig gerührt, dann abgekühlt, die Schichten getrennt, die organische Schicht über Natriumsulfat getrocknet und zu einem Schaum eingedampft. Digerieren

mit Isopropyläther ergibt einen Feststoff, der in Hexan: Essigsäureäthylester (2:1) aufgenommen und durch ein kurzes Bett aus LPS-1 gewaschen wurde. Eindampfen und Digerieren mit Isopropyläther ergibt 0,19 g Produkt als weißer Feststoff vom F. 204- bis 205⁰C.

.-Butoxycarbonyl)-amino7-6-thia-2-oxo-1-hydroxy-1 -azaspir o/3 · 47octan
Eine Aufschlämmung von 0,41 g (0,79 mMol) Produkt von Teil D) in 15 ml 80# Essigsäure (20# Wasser) wird 1 Stunde bei 25°C gerührt. Eindampfen unter vermindertem Druck ergibt einen weißen Feststoff, der in Essigsäureäthylester aufgenommen und mit 5$ Natriumbicarbonatlösung gewaschen wird. Die wäßrige Schicht wird abgetrennt, mit Kochsalz gesättigt und wiederholt mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die Extrakte werden über Natriumsulfat getrocknet, eingedampft und der Rückstand mit Isopropyläther und Hexan digeriert, wobei 0,275 g Produkt vom F. 155 bis 157⁰C erhalten werden.

F) 3-/£tert.-Butoxycarbonyl)-amino/-6-thia-2-oxo-1-( sulf ooxy )-1 -azaspiro^3.4_7oct an, tetrabutylammoniumsalz 0,23 g Produkt von Teil E) werden zu einer vorher hergestellten Aufschlämmung von 0,31 g (2,7 mMol) Chlorsulfonsäure und 0,5 g (6,3 mMol) Pyridin in 8 ml Dichlormethan bei 25°C gegeben und das Gemisch 2 1/2 Stunden gerührt. Dann werden unter Schütteln 6 ml 10% Kaliumbisulfatlösung und 0,34 g (1»0 mMol) Tetrabutylammoniumhydrogensulfat zugegeben. Die Schichten werden getrennt und die wäßrige Schicht viermal mit Dichlormethan extrahiert. Die organischen Extrakte werden über Natriumsulfat getrocknet, eingedampft, 16 Stunden bei O⁰C mit Essigsäureäthylester übernchichtet, filtriert und zu 0,63 g Produkt als Schaum eingedampft .
35

G) 3-Amino-6-thia-2-oxo-1-(sulfooxy)-1-azaspiro/5.47octan Eine Lösung von 0,65 g Produkt von Teil F) in 5 ml Dichlormethan und 1 ml Anisol wird bei O⁰C mit 4· ml Trifluoressigsäure behandelt. Nach 1,75 Stunden wird die erhaltene Aufschlämmung mit Dichlormethan verdünnt und filtriert. Nach dem Waschen mit Dichlormethan und Äther wird ein weißer Feststoff erhalten. Trocknen an der Luft ergibt 110 mg Produkt vom F. 150 bis 155°C

H) /3S(Z),4-S7-/77i-(2-Amino-4--thiazolyl)-2-oxo-2-/72-oxo-1 -( sulf ooxy ) -6-thia-1 -azaspir o^3 · 4_7oct-3-yl7-amino7-äthy-Iiden7-amino7-ox27-essigsäure-Diphenylester-Monokaliumsalz 0,21 g (0,5 mMol) (Z)-2-Amino-ot-^7Z7Ztdiphenylniethyl)-OX27-C arbonyl7~met hy l7-ox27-imino7-^/i—thiazole s s igs äure und 0,053 g (0,52 mMol) Triethylamin in 3 ml trockenen Dimethylformamid werden bei -4-0⁰C unter Argon mit 0,134- g (0,5 mMol) Diphenylchlorphosphat behandelt und 1 Stunde bei -4-0 bis -2O⁰C gerührt. Die erhaltene Lösung wird dann mit einer Lösung von 0,11 g (0,4-3 mMol) Produkt von Teil G) in 1 ml Dimethylformamid und dann mit 0,1 g (1 mMol) Triäthylamin versetzt. Nach 15 Minuten bei -15⁰C werden die flüchtigen Bestandteile bei 15 C unter vermindertem Druck entfernt, das erhaltene gummiartige Produkt wird in Aceton aufgenommen und mit genügend Wasser versetzt, daß ein trübes Gemisch vom pH 3 »4-5 entsteht. Der pH-Wert wird mit Kaliumbicarbonatlösung auf 6,75 eingestellt. Das Gemisch wird durch Dowex AG50 (K⁺) in Aceton:Wasser (1:1) geführt. Das Eluat wird zu einer Aufschlämmung eingeengt. Chromatographie an HP-20 mit Graduenteneluierung mit Wasser-Aceton und Lyophilisierung der Produktfraktionen (R^ = 0,7 in Essigsäureäthylester!Essigsäure:Wasser:Butanol (5:1:1*1) ergibt 0,21 g Produkt als weißer Feststoff.

36U317

I) /3S(Z)_i4S7~/77^:T-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-^72-oxo-1 - ( sulf ooxy )-6-thia-1-azaspir o^5 · ^7oct-3-yl7~amino7-äthyliden7-amino7-ox£7-essigsäure, Dikaliumsalz Eine Aufschlämmung von 0,21 g (0,3 mMol) Produkt von H) in 8 ml Dichlormethan und 1,5 ml Anisol wird bei -10⁰C mit 8 ml Trifluoressigsäure "behandelt. Nach 15 Minuten werden 8 ml trockenes Toluol zugegeben und das Gemisch bei 15°C unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird mit Hexan gewaschen. Durch Zugabe von Wasser entsteht ein unlöslicher gummiartiger Stoff. Der pH-Wert wird von 1,50 auf 6,75 eingestellt, wobei eine leicht trübe Lösung erhalten wird. Chromatographie an HP-20 in Wasser und Lyophilisierung der Produktfraktionen (R~ = 0,25 in Essigsäureäthylester:Essigsäur^:Wasser:Butanol (5*1:1:1) ergibt 118 mg Produkt als weißer Peststoff. Die Analyse des Produktes zeigt korrekt die Anwesenheit von 2,55 Mol Wasser. Analyse für C₁₅H₁₅N₅OqS₅K₂. 2,55 H₂O: ber.: C 25,87 H 3,02 N 11,60 S 15,93 K 12,96 gef.: 25,86 2,70 11,48 15,96 13,31.

Claims (13)

36U317 ^^.■-.όηξμ B6 *-0'Mn 1987 u.Z.: U 487 (Ra/H) Case: E.R. SQUIBB & SONS, INC. Princeton, New Jersey, V.St.A. "O-sulfatierte ß-Lactam-Hydroxamsäuren" Patentansprüche

1. O-sulfatierte ß-Lactam-Hydroxamsäure der allgemeinen Formel I

v™

H-O-

SO₃H ,

oder ihre pharmazeutisch verträglichen Salze, in der R/j einen Acylrest bedeutet, η und m unabhängig voneinander den Wert 1, 2 oder haben und X eine gesättigte Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindung bedeutet, η und m unabhängig voneinander den Wert 1,2,3 oder A-haben, die Summe von η + m ^ 5 ist und X -0-, -S- oder O Il

-8- darstellt,

η und m unabhängig voneinander den Wert 1, 2 oder haben, die Summe von η + m < 4 ist und X

?2 ?3 "²" 36H317

-CH- oder -N- bedeutet,

η und m unabhängig voneinander den Wert 1 oder 2 haben, die Summe von η + m ■< 3 ist und X OR.

ir ι ^

-G-N- darstellt, oder

η und m jeweils den Wert 1 haben und X -S-C^-S, 0 0 0 0 Ri₁P R*.

I! Il Il Il J T^-Il I ^

-S-CH₀-S-, -S-CH₀-S- oder -N-C-N- bedeutet,

£- Il C- Il

0 0

IQ R2 einen Alkyl-, Aryl-, Hydroxyl-, Alkoxy-, Alkanoyloxy-, Carbamoyloxy-, Alkanoylamino- oder Ureidorest darstellt,

Β.-, ein Wasserst off atom, einen Alkyl-, Aryl-, Alkanoyl- oder Carbamoylrest bedeutet, und

!5 R^ ein Wasserstoffatom, einen Alkyl- oder Arylrest darstellt.

2. Verbindungen nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel I₁ in der Ry. einen Rest der allgemeinen Formel XII bedeutet,

(XII)

in der Y^, und Y₀ jeweils unabhängig voneinander Wasserst off atome oder Methylgruppen bedeuten, oder Y^ und Y2 zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind, eine Cyclopropyl-, Cyclobutyl- oder Cyclopentylgruppe darstellen, und Y^ eine Hydroxyl-, Amino- oder

QQ Hydroxylaminogruppe bedeutet.

3. Verbindungen nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel I₁ in der η und m jeweils unabhängig voneinander den Wert 1, 2 oder 3 haben und X eine gesättigte Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindung bedeutet.

⁵ 36U317

4-, Verbindungen nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel I, in der η und m jeweils unabhängig voneinander den Wert 1, 2, 3 oder 4- haben, die Summe von η + m -f 5 ist und X -0-, -S- oder

0

Il

-S- bedeutet.

ti

5. Verbindungen nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel I, in der η und m jeweils unabhängig voneinander den V/ert 1, 2 oder 3 haben, die Summe von η + m <_ 4- ist und X

-CH- oder -N- bedeutet.

6. Verbindungen nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel I, in der η und m unabhängig voneinander den Wert 1 oder haben, die Summe von η + m ■* 3 ist und X

-C-N- darstellt.
20

7. Verbindungen nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel I, in der η und m den Wert 1 haben und X -S-CH₂-S-,

0 S 0 0 R₄O R₄ -S-CH₀-S-, -S-CH₀-S- oder -N-C-N- darstellt.

c- ii <- H

OO

8. (Z)-/77^;T-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-/22-oxo-1-

( sulf ooxy )-1 -azaspir o£>. 47oct-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-oxy_7-essigsäure oder ein Salz davon.

9. (Z)-/[77^-(2-Amino-'4-thiazolyl)-2-oxo-2-/7S-oxo-1 (sulfooxy)-1-azaspiro^3.27hept-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-ox27-essigsäure oder ein Salz davon.

10. (Z)-/77T-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-/72-oxo-1-( sulf ooxy)-7-oxa-1 -azaspiro/3. 5>7non-3-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-oxy7--essigsäure oder ein Salz davon.

~⁴~ 36U317

11. /^S(Z),4§7-^77^-(2-Amino-4-thiazolyl)-2-oxo-2-/72-oxo-1-(culfooxy)-6-thia-1-azaspiro/5.47oct-;5-yl7-amino7-äthyliden7-amino7-oxy_7-essigsäure oder ein Salz davon.

12. Eine Verbindung nach Anspruch 1 bis 11 zur Verwendung als pharmazeutischer Wirkstoff.

13. Eine Verbindung nach Anspruch 1 bis 11 zur Verwendung bei der Behandlung von bakteriellen Infektionen.

Arzneimittel, gekennzeichnet durch einen Gehalt an einer Verbindung nach Anspruch 1 bis 11 und übliche Träger-, Hilfs- und Zusatzstoffe.