DE3311300C2

DE3311300C2 -

Info

Publication number: DE3311300C2
Application number: DE3311300A
Authority: DE
Inventors: Hajime Urayasu Chiba Jp Kamachi; Jun Yokohama Jp Okumura; Takayuki Kawasaki Jp Naito
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1982-03-29
Filing date: 1983-03-28
Publication date: 1991-05-16
Also published as: IE830687L; GB2117770A; DK161024B; SE8301726D0; ATA110983A; NL8301053A; CS219083A2; GB8308519D0; DK161024C; FI831013L; CH655118A5; DK95383A; GB2117770B; HU189676B; MY8700944A; CA1213883A; BE896292A; IL68244A0; SE8301726L; ES8600312A1

Description

Die Erfindung betrifft Cephalosporinderivate der unten angegebenen allgemeinen Formel I sowie Verfahren zu ihrer Herstellung und antibakterielle Mittel, die diese Verbindungen enthalten.

Die GB-PS 13 99 086 umfaßt eine große Zahl Cephalosporinverbindungen der allgemeinen Formel

worin R ein Wasserstoffatom oder eine organische Gruppe bedeutet, Ra eine veretherte, einwertige, organische Gruppe, die über ein Kohlenstoffatom an das Sauerstoffatom gebundet ist, bedeutet, B für

steht und P eine organische Gruppe bedeutet. Die 2-Aminothiazol- 4-ylgruppe befindet sich jedoch nicht unter den R-Substituenten. Es gibt auch keine Beispiele, worin P als quaternäre Ammoniummethylgruppe, wie in den erfindungsgemäßen Verbindungen, beschrieben ist. Einen ähnlichen Offenbarungsgehalt haben die US-PS 39 71 778 und die Ausscheidungen Nr. 40 24 133, 40 24 137, 40 64 346, 40 33 950, 40 79 178, 40 91 209, 40 92 477 und 40 93 803 davon.

Die US-PS 42 78 793 beschreibt in allgemeiner Form eine große Zahl von Cephalosporinderivaten der allgemeinen Formel

worin die Variablen R₁, R₂, R₃, R₄, X und A die allgemeinen Definitionen der entsprechenden Substituenten der in der vorliegenden Anmeldung beanspruchten Verbindungen der Formel I umfassen. In den 20 Spalten, in denen die verschiedenen Substituenten definiert werden, in der 78seitigen Tabelle mit Strukturformel und in den 225 Beispielen ist jedoch nicht beschrieben, daß A auch eine quaternäre Ammoniummethylgruppe sein kann. Die GB-PS 16 04 971 ist das britische Äquivalent dazu und beschreibt im wesentlichen den gleichen Sachverhalt. Die formal offenbar in keiner Beziehung dazu stehende GB-PS 20 28 305 A hat den gleichen breiten Offenbarungsgehalt, wobei A jedoch nur ein Wasserstoffatom bedeutet.

Die US-PS 42 78 671 beschreibt 7-[2-(2-Aminothiazol- 4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]cephalosporinderivate der allgemeinen Formel

worin R₂NH eine gegebenenfalls geschützte Aminogruppe bedeutet und R₃ für ein Wasserstoffatom oder "den Rest ein nukleophilen Verbindung" steht. Der Ausdruck "Rest einer nukleophilen Verbindung" ist breit definiert, wobei festgestellt wird, daß R³ "alternativ eine quaternäre Ammoniumgruppe sein kann". Dabei werden nur Pyridinium, verschieden substituierte Pyridinium, Chinolinium, Picolinium und Lutidinium als quaternäre Ammoniumgruppen beschrieben. Es fehlt jedoch jeder Hinweis, daß die quaternäre Ammoniumgruppe derjenigen in den erfindungsgemäßen Verbindungen entsprechen kann. Die GB-PS 15 81 854 ist das britische Äquivalent dazu und hat den im wesentlichen gleichen Offenbarungsgehalt. Weitere Patente der gleichen Anmelderin, welche formal in keiner Beziehung hierzu stehen, aber einen ähnlichen Offenbarungsgehalt aufweisen, sind die US-PS 40 98 888 und die Ausscheidungen US-PS 42 03 899, 42 05 180 und 42 98 606, sowie die GB-PS 15 36 281.

Die GB-PS 20 40 921 beschreibt Cephalosporinderivate der allgemeinen Formel

worin Ra und R^b eine C_1-4Alkylgruppe bedeuten oder zusammen mit dem Kohlenstoffatom an das sie gebunden sind, einen C_3-7Cycloalkylidenring bilden und R¹, R² und R³ jeweils eine C_1-4Alkylgruppe bedeuten.

Gegenstand der Erfindung sind Cephalosporinderivate der allgemeinen Formel I

worin R¹ ein Wasserstoffatom oder eine übliche Amino- Schutzgruppe bedeutet, R² und R³ jeweils unabhängig voneinander eine Methyl- oder Ethylgruppe bedeuten und R⁴ eine Methyl-, Ethyl-, n-Propyl-. Isopropyl-, n-Butyl-, Isobutyl-, Allyl-, 2-Butenyl-, 3-Butenyl-, 2-Hydroxyethyl, 3-Hydroxypropyl-, 2-(dimethylamino)ethyl, Pyridylmethyl, Pyridylethyl-, Benzyl- oder Phenethylgruppe bedeutet und deren nichttoxische, pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze, sowie Verfahren zu ihrer Herstellung. In den Rahmen der vorliegenden Erfindung fallen auch die Solvate (einschließlich der Hydrate) der Verbindungen der allgemeinen Formel I, sowie die tautomeren Formen der Verbindungen der Formel I, beispielsweise die 2-Iminothiazolin-4-yl-Form des 2-Aminothiazol-4-yl-Restes. Vorzugsweise bedeutet R¹ ein Wasserstoffatom, R² eine Methylgruppe und R³ eine Methyl- oder Ethylgruppe.

Wie aus der Strukturformel ersichtlich, können die Verbindungen der Formel I in bezug auf die Alkoxyiminogruppe in "syn"- oder "Z"Konfiguration vorliegen. Da die Verbindungen geometrische Isomere darstellen, können sie teilweise auch in Form des "anti"-Isomeren vorliegen. Die Erfindung umfaßt Verbindungen der Formel I, die wenigstens 90% des "syn"-Isomeren enthalten. Vorzugsweise sind die Verbindungen der Formel I "syn"-Isomere, die im wesentlichen frei von den entsprechenden "anti"-Isomeren sind.

Die nichttoxischen, pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalze der Verbindungen der allgemeinen Formel I umfassen die Salze z. B. mit Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Ameisensäure, Salpetersäure, Schwefelsäure, Methansulfonsäure, Phosphorsäure, Essigsäure und Trifluoressigsäure, sowie mit weiteren Säuren, welche auf dem Penicillin- und Cephalosporingebiet verwendet wurden.

Die Verbindungen der Formel I, worin R¹ ein Wasserstoffatom bedeutet, besitzen eine große antibakterielle Aktivität gegen verschiedene Gram-positive und Gram-negative Bakterien und sind zur Behandlung von bakteriellen Infektionen bei Menschen und Tier brauchbar. Die Verbindungen der Formel I können zur parenteralen Verwendung in üblicher Weise unter Verwendung bekannter pharmazeutischer Träger und Exzipientien formuliert werden. Sie können in Dosiseinheitsform in Mehrfach-Dosierungsbehältern dargeboten werden. Die erfindungsgemäßen Mittel können in Form von Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen in öligen oder wäßrigen Trägern vorliegen und können übliche Dispersions-, Suspendier- oder Stabilisierungsmittel enthalten. Die erfindungsgemäßen Mittel können auch in Form eines Trockenpulvers zur Rekonstitution vor Gebrauch, beispielsweise mit sterilem, pyrogenfreiem Wasser, vorliegen. Die Verbindungen der Formel I können auch als Suppositorien unter Verwendung üblicher suppositorischer Basen, wie Kakaobutter oder anderen Glyceriden, formuliert werden. Falls gewünscht, können die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit weiteren Antibiotika, wie Penicillinen oder anderen Cephalosporinen, verabreicht werden.

Wenn die erfindungsgemäßen Mittel in Dosiseinheitsform vorliegen, enthalten sie vorzugsweise ungefähr 50 bis ungefähr 1500 mg an Wirkstoff der Formel I. Die Dosierung der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I ist von solchen Faktoren, wie dem Gewicht und dem Alter der Patienten, sowie von der Art und der Schwere der Krankheit abhängig ist und dem Urteil des Arztes überlassen. Die Dosierung bei Erwachsenen liegt jedoch üblicherweise im Bereich von ungefähr 500 bis ungefähr 5000 mg pro Tag in Abhängigkeit von der Häufigkeit und der Art der Verabreichung. Bei intramuskulärer oder intravenöser Verabreichung an Erwachsene ist eine Gesamtdosierung von ungefähr 750 bis ungefähr 3000 mg pro Tag in unterteilten Dosen normalerweise ausreichend, obwohl höhere tägliche Dosen von einigen der erfindungsgemäßen Verbindungen im Falle von Pseudomonas-Infektionen wünschenswert sein können.

Die bevorzugten Verbindungen der Formel I sind diejenigen, worin R¹ ein Wasserstoffatom bedeutet, R² eine Methylgruppe bedeutet, R³ eine Methyl- oder Ethylgruppe bedeutet und R⁴ eine Methyl-, Ethyl-, 2-Hydroxyethyl-, 2-(Dimethylamino)ethyl, Allyl- oder Pyridylmethylgruppe bedeutet. Besonders bevorzugte Verbindungen sind diejenigen, worin R¹ ein Wasserstoffatom bedeutet, R² und R³ eine Methylgruppe bedeuten und R⁴ eine Methyl-, 2- Hydroxyethyl- oder Allylgruppe bedeutet. Bei den bevorzugtesten Verbindungen steht R¹ für ein Wasserstoffatom und R², R³ und R⁴ stehen für eine Methylgruppe. Zur Bewertung der bevorzugten erfindungsgemäßen Verbindungen wurden die minimalen Hemmkonzentrationen (MIC) der Verbindungen anhand der Zweifach-Reihen Agar-Verdünnungsmethode in Mueller-Hinton-Agar gegenüber 32 Stämmen von Testorganismen in sechs Gruppen bestimmt. Die geometrischen Mittel der in diesem Test erhaltenen MIC-Werte sind in Tabelle 1 zusammengestellt.

Tabelle 1

Die Absorption der bevorzugtesten Verbindung Ia (hergestellt gemäß Beispiel 1) wurde bei Mäusen im Anschluß an eine einzelne intramuskuläre Injektion der Testverbindung (gelöst in 0,1 M Phosphatbuffer; pH 7) bei einer Dosierung von 20 mg/kg bestimmt. Blutproben wurden aus dem Orbitalsinus genommen, in heparinisierte Kapillarröhrchen gegeben und in Mueller-Hinton-Medium unter Verwendung von Morganella Morganii A 9695 als Testorganismus getestet. Die Blutspiegelwerte zu verschiedenen Zeiten, der Wert für die Halbwerts-Zeit (t_1/2) und die Fläche unter der Kurve (AUC) sind in Tabelle 2 zusammengestellt.

Blutspiegelwerte der Verbindung Ia bei Mäusen
Blutspiegel (mcg/ml) Minuten nach Verabreichung
10	14
20	12
30	8.8
40	7.5
50	4.7
60	4.4
90	1.5
120	0.74
t_1/2 (Minuten)	24
AUC mcg · Std./ml	10

Die in vitro-Aktivität der bevorzugtesten Verbindung Ia gegenüber 31 Stämmen von schwierig zu bekämpfenden Bakterien wurde in GC-Agar bestimmt. Die Ergebnisse sind in Tabelle 3 zusammengestellt.

In vitro Aktivität der Verbindung Ia gegenüber schwierig zu bekämpfenden Bakterien
Testorganismus
Geometrisches Mittel der MIC-Werte (mcg/ml)
S. pyogenes (6 Stämme)
0.013
S. pneumoniae (6)	0.013
N. gonorrhoeae (4)	0.013
N. meningitidis (5)	0.016
H. influenzae (7) (Ampicillin sensitiv)	0.013
H. influenzae (3) (Ampicilin resistent)	0.20

Die Erfindung betrifft auch Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I. Es gibt zwei grundlegende Verfahren für die Umwandlung eines leicht erhältlichen Ausgangs-Cephalosporins in ein anderes Cephalosporin mit verschiedenen Substituenten in 7- und 3-Stellung. Man kann zuerst den 7-Substituenten entfernen und ihn durch den gewünschten 7-Substituenten ersetzen und anschließend den gewünschten 3-Substituenten einführen. Alternativ kann man zuerst den gewünschten 3-Substituenten einführen und anschließend den 7- Substituenten austauschen. Die Verbindungen der Formel I können nach jedem Verfahren hergestellt werden. Beide Verfahren fallen in den Rahmen der Erfindung, vorzugsweise führt man jedoch zuerst den gewünschten 7-Substituenten und anschließend den gewünschten 3-Substituenten ein. Das bevorzugte Verfahren ist nachfolgend im Reaktionsschema 1 zusammengestellt, wohingegen das alternative Verfahren in Reaktionsschema 2 erläutert wird. Die Abkürzung "Tr" bedeutet die Trityl (Triphenylmethyl)- Gruppe, die eine bevorzugte Amino-Schutzgruppe darstellt. Die Abkürzung "Ph" bedeutet die Phenylgruppe. Der -CH(Ph)₂-Rest ist somit die Benzhydrylgruppe, die eine bevorzugte Carboxyl-Schutzgruppe darstellt.

Reaktionsschema 1

Reaktionsschema 2

Obwohl die obigen Reaktionsschemata bevorzugte mehrstufige Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I erläutern, ist festzuhalten, daß auch andere Ausgangsmaterialien und andere Verfahren verwendet werden können, um die in der entscheidenden Stufe jedes Reaktionsschemas verwendeten Zwischenstufen herzustellen. Die entscheidende Reaktionsstufe im Reaktionsschema 1 ist die Umsetzung der Verbindung VII mit dem tertiären Amin. Die Verbindung VII kann auch anhand anderer Verfahren hergestellt werden. In ähnlicher Weise ist die entscheidene Stufe im Reaktionsschema 2 die Acylierung der Verbindung XII mit der Verbindung IV. Die Verbindungen XII und IV können auch anhand anderer Verfahren hergestellt werden.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I werden hergestellt, indem man eine Verbindung der allgemeinen Formel XIV

worin R² die oben angegebenen Bedeutungen besitzt, B¹ eine übliche Carboxyl-Schutzgruppe mit B² eine übliche Amino-Schutzgruppe bedeuten, mit einem tertiären Amin der allgemeinen Formel

worin R³ und R⁴ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, umsetzt, wobei man eine Verbindung der allgemeinen XV

erhält, und anschließend alle Schutzgruppen in an sich bekannter Weise entfernt.

Die Reaktion wird in einem nicht-wäßrigen, organischen Lösungsmittel, wie Methylenchlorid, Chloroform, Ethylether, Hexan, Ethylacetat, Tetrahydrofuran, Acetonitril oder in Mischungen derartiger Lösungsmittel durchgeführt. Die Reaktion erfolgt bequemerweise bei einer Temperatur von ungefähr -10°C bis ungefähr +50°C; vorzugsweise wird die Reaktion bei Raumtemperatur durchgeführt. Pro Mol der Verbindung XIV sollte wenigstens 1 Mol an tertiären Amin verwendet werden; vorzugsweise verwendet man einen ungefähr 50- bis 100%igen Überschuß an tertiären Amin.

Für die obige Reaktion als B¹ brauchbare Carboxylschutzgruppen sind dem Fachmann bekannt und umfassen Aralkylgruppen, wie Benzyl p-Methoxybenzyl, p-Nitrobenzyl und Diphenylmethyl (Benzhydryl); Alkylgruppen, wie t-butyl; Haloalkylgruppen, wie 2,2,2-Trichlorethyl, sowie weitere, in der Literatur, beispielsweise in der GB-PS 13 99 086, beschriebene Carboxyl-Schutzgruppen. Vorzugsweise verwendet man Carboxyl-Schutzgruppen, die leicht durch Behandlung mit Säure entfernt werden können, besonders bevorzugte Carboxyl-Schutzgruppen sind die Benzhydryl- und t-Butylreste.

Als B² brauchbare Aminoschutzgruppen sind ebenfalls bekannt und umfassen z. B. die Tritylgruppe und Acylgruppen, wie die Chloracetylgruppe. Amino-Schutzgruppen, die leicht durch Behandlung mit Säure entfernt werden können, beispielsweise die Tritylgruppe, sind bevorzugt.

Nach einer weiteren Ausführungsform erfolgt die Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I dadurch, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel XVI

oder ein N-Silylderivat davon, worin B¹ ein Wasserstoffatom oder eine übliche Carboxyl-Schutzgruppe bedeutet und R³ und R⁴ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, mit einem acylierenden Derivat einer Säure der allgemeinen Formel XVII

worin B² eine übliche Amino-Schutzgruppe bedeutet und R² die oben angegebenen Bedeutungen besitzt, acyliert, wobei man eine Verbindung der allgemeinen Formel XV

erhält und anschließend alle Schutzgruppen entfernt.

Die acylierenden Derivate der Säure der allgemeinen Formel XVII umfassen Säurehalogenide (insbesondere Säurechloride), gemischte Säureanhydride (wie die mit Pivalinsäure oder einem Haloformat, wie Ethylchlorformat, gebildeten Säureanhydride) und aktivierte Ester (wie solche, die mit N-Hydroxybenztriazol in Gegenwart eines Kondensationsmittels, wie Dicyclohexylcarbodiimid hergestellt werden können). Die Acylierung kann auch bei Verwendung der freien Säure der Formel XVII in Gegenwart eines Kondensationsmittel, wie Dicyclohexylcarbodiimid, Carbonyldiimidazol oder einem Isoxazoliumsalz, erfolgen. Der im Rahmen der Erfindung verwendete Ausdruck "acylierendes Derivat" der Säure der Formel XVII umfaßt auch die freie Säure in Gegenwart eines der oben beschriebenen Kondensationsmittel. Das bevorzugte acylierende Derivat der Säure der Formel XVII ist das Säurechlorid, das vorzugsweise in Gegenwart eines säurebindenden Mittels (und insbesondere in Gegenwart eines tertiären Amins als säurebindendem Mittel, wie Triethylamin, Dimethylanilin oder Pyridin) verwendet wird.

Die Acylierung mit einem Säurehalogenid kann in wäßrigem Reaktionsmedium erfolgen, ein nicht-wäßriges Medium ist jedoch bevorzugt. Wenn man Säureanhydride, aktivierte Ester, oder die freie Säure in Gegenwart eines Kondensationsmittels zur Acylierung verwendet, sollte das Reaktionsmedium nicht wäßrig sein. Besonders bevorzugte Lösungsmittel für die Acylierung sind halogenierte Kohlenwasserstoffe, wie Methylenchlorid und Chloroform, es können jedoch auch tertiäre Amide, wie Dimethylacetamid oder Dimethylformamid, sowie herkömmliche Lösungsmittel, wie Tetrahydrofuran, Acetonitril, verwendet werden.

Die Acylierung kann bei einer Temperatur von ungefähr -50°C bis ungefähr +50°C durchgeführt werden. Vorzugsweise arbeitet man jedoch bei oder unterhalb Raumtemperatur, am bevorzugtesten von ungefähr -30°C bis ungefähr 0°C. Im allgemeinen ist es bevorzugt, die Verbindung der Formel XVI mit einer ungefähr stöchimetrischen Menge an Acylierungsmittel der Formel XVII zu acylieren, es kann jedoch auch ein geringer Überschuß (beispielsweise 5-25%) an Acylierungsmittel zur Anwendung kommen.

Vorzugweise erfolgt die Acylierung der Verbindungen der Formel XVI in Form ihrer N-Silylderivate (bei Verwendung eines nicht-wäßrigen Reaktionsmediums). Bequemerweise erfolgt die Acylierung in situ, indem man ein geeignetes Silylierungsmittel (beispielsweise N,O-Bistrimethylsilylacetamid) zu der Lösung der Verbindung XVI vor der Zugabe des Acylierungsmittels der Formel XVII zugibt. Vorzugsweise verwendet man ungefähr 3 Mol Silylierungsmittel pro Mol Verbindung XVI, obwohl dies nicht entscheidend ist. Die Silylgruppe läßt sich nach der Acylierung leicht durch Zugabe von Wasser entfernen.

Die bei der Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I zur Anwendung kommenden tertiären Amine der Formel

sind im Handel erhältlich oder können leicht in an sich bekannter Weise hergestellt werden.

Herstellungsbeispiel 1 Ethyl (Z)-2-Methoxyyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl) acetat (IIIa)

Eine Mischung von Ethyl (Z)-2-Hydroxyimino-2-(2-tritylaminothiazol- 4-yl)acetat (II) (5,00 g; 10,0 mmol) CH₃J (2,04 ml; 32,8 mmol) und K₂CO₃ (4,54 g; 32,8 mmol) in trockenem Dimethylsulfoxid (DMSO) (100 ml) wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und anschließend in Wasser (250 ml) gegossen. Der gebildete Niederschlag wird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet, wobei man die Titelverbindung (5,15 g, quantitative Ausbeute) erhält. Schmelzpunkt 115°C (Zersetzung).

NMR: δ^CDCl₃ ppm 1,32 (3H, t), 3,98 (3H, s), 4,30 (2H, q), 6,42 (1H, s), 7,2 (1H, m), 7,25 (15H, s).

Verbindung IIIb wird gemäß obigem allgemeinen Verfahren hergestellt, wobei man jedoch Ethyljod anstelle von Methyljodid verwendet.

Herstellungsbeispiel 2 (Z)-2-Methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure (IVa)

Der gemäß Herstellungsbeispiel 1 hergestellte Ethylester IIIa (6,00 g; 12,7 mmol) in Ethanol (120 ml) wird mit 2N NaOH (12,7 ml) über Nacht bei Raumtemperatur behandelt. Die Reaktionsmischung wird durch Zugabe von gepulvertem Trockeneis auf pH 8 eingestellt. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck verdampft. Den Rückstand löst man in Wasser (100 ml) und säuert die Lösung mit 1N HCl auf pH 2 an und extrahiert dann mit Ethylacetat (3×50 ml). Die vereinigten Extrakte werden mit einer gesättigten wäßrigen NaCl-Lösung gewaschen, getrocknet und verdampft. Der Rückstand wird aus Ethylacetat- Hexan kristallisiert, wobei man 5,56 g (Ausbeute 98%) der Titelverbindung erhält (Schmelzpunkt 138-143°C) (Zersetzung).

NMR: _δCDCl₃ ppm 3,89 (3H, s), 6,52 (1H, s), 7,2 (15H, s).

Verbindung IVb wird gemäß obigem allgemeinen Verfahren hergestellt.

Herstellungsbeispiel 3 Benzhydryl 3-Hydroxymethyl-7-phenylacetamido-3-cephem-4- carboxylat (VIII)

Zu einer Suspension von Weizenkleie (20 g; trocken) in Phosphatpuffer (ph 7; 162,5 ml) gibt man bei Raumtemperatur unter Rühren 7-Phenylacetamidocephalosporan-Säurenatriumsalz (5 g; 12,1 mmol) in einer Portion. Der Verlauf der Reaktion bis zur vollständigen Hydrolyse wird mit HPLC verfolgt (5 Stunden). Die Suspension wird zur Entfernung der Weizenkleie filtriert und das Filtrat wird zur extraktiven Veresterung auf 5-10°C gekühlt. Zu der gekühlten Lösung gibt man Methylenchlorid (32 ml), anschließend eine 0,5 M-Lösung von Diphenyldiazomethan in Methylenchlorid (24 ml). Der pH wird dann mit einer 28%iger Phosphorsäure auf 3,0 eingestellt. Nach einer Stunde läßt man die Temperatur der Reaktionsmischung auf 20°C steigen. Man gibt langsam Heptan (56 ml) zu und filtriert die erhaltene kristalline Titelverbindung ab. Die Ausbeute beträgt 3,0 g (50%).

Herstellungsbeispiel 4 Benzhydryl 7-Amino-3-chlormethyl-3-cephem-4-carboxylat (V)

Zu einer Aufschlämmung von PCl₅ (8,3 g; 40 mmol) in CH₂Cl₂ (100 ml) gibt man Pyridin (3,2 g; 40 mmol) und rührt die Mischung 20 Minuten bei 20°C. Zu dieser Mischung gibt man unter Rühren bei -40°C auf einmal Benzhydryl 3-hydroxymethyl-7-phenylacetamido-3-cephem-4-carboxylat, hergestellt gemäß Herstellungsbeispiel 3 (5,1 g; 10 mmol). Man rührt die Mischung 15 Minuten bei -10°C und läßt sie 7 Stunden bei -10°C bis -15°C stehen. Zu der gekühlten Lösung (-20°C) gibt man Propan-1,3-diol (10 ml) und läßt die Mischung 16 Stunden bei -20°C stehen und rührt anschließend 20 Minuten bei Raumtemperatur. Die erhaltene Lösung wird mit Eiswasser (2mal 20 ml) und gesättigter wäßriger NaCl (10 ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert. Der gummiartige Rückstand (12 g) wird in einer Mischung von CHCl₃ und n-Hexan (2 : 1) gelöst und unter Verwendung einer Kieselgelsäule (200 g) und unter Verwendung des gleichen Lösungsmittels als Eluierungsmittel chromatographiert. Diejenigen Fraktionen, die die Titelverbindung enthalten, werden im Vakuum verdampft und der Rückstand mit n-Hexan verrieben, wobei man die Titelverbindung (2,1 g; 51%) mit einem Schmelzpunkt von 110°C (Zersetzung) erhält.

IR: ν_KBr 3400, 2800, 1785, 1725 cm^-1.

NMR: _δDMSO-d_₆ + CDCl_₃ ppm
3,69 (2H, s); 4,43 (2H, s); 5,09 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,24 (1H, d; J = 4,5 Hz), 6,87 (1H, s); 7,3 (10H, m).

Herstellungsbeispiel 5 Benzhydryl 3-Chlormethyl-7-[(Z)-2-methoxyimino-2-(2- tritylaminothiazol-4-yl)acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (VIa)

Benzhydryl 7-amino-3-chlormethyl-3-cephem-4-carboxylat, hergestellt gemäß Herstellungsbeispiel 4 (2,29 g; 5,52 mmol) in CH₃CN (57 ml) wird mit Bis(trimethylsilyl)acetamid (BSA; 4,09 ml; 16,6 mmol) 50 Minuten bei Raumtemperatur behandelt, wobei man eine klare Lösung erhält. Zu dieser Lösung gibt man eine Säurechloridlösung, hergestellt aus (Z)-2-Methoxyimino-2-(2-Tritylaminothiazol-4- yl)essigsäure (IVa) (2,04 g; 4,60 mmol) und PCl₅ (1,15 g; 5,52 mmol) in Methylenchlorid (20 ml). Man rührt die Mischung 30 Minuten bei Raumtemperatur, gießt sie in kaltes Wasser (200 ml) und extrahiert mit Ethylacetat (3×100 ml). Die vereinigten Extrakte wäscht man mit wäßriger NaCl, trocknet und verdampft. Der sirupartige Rückstand (4 g) wird über eine Kieselgelsäule (150 g) chromatographiert, indem man nacheinander mit 10 : 1 und 3 : 1 Mischungen von Toluol und Ethylacetat eluiert. Diejenigen Fraktionen, die die gewünschte Verbindung enthalten, werden vereinigt und das Lösungsmittel verdampft, wobei man 2,61 g (68%) der Verbindung VIa in Form eines amorphen Pulvers erhält.

NMR: _δCDCl₃ ppm
3,50 (2H, s); 4,02 (3H, s); 4,33 (2H, s); 4,98 (1H, d); 5,87 (1H, q); 6,65 (1H, s); 6,90 (1H, s); 7,3 (25H, m).

Herstellungsbeispiel 6 Benzhydryl 3-Jodmethyl-7-[(Z)-2-methoxyimino-2-(tritylaminothiazol- 4-yl)acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (VIIa)

Eine Mischung des 3-Chlormethylderivates, hergestellt gemäß Herstellungsbeispiel 5 (VIa) (1,50 g; 1,79 mmol) und NaJ (1,34 g; 8,93 mmol) in Methylethylketon (30 ml) wird eine Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Nach dem Verdampfen des Lösungsmittels löst man den Rückstand in Ethylacetat (100 ml) und wäscht mit Wasser, wäßriger Na₂S₂O₃ und wäßrigem NaCl, trocknet und verdampft, wobei man die Titelverbindung VIIa (1,47 g; 89%) als amorphes Pulver erhält.

NMR: _δCDCl₃ ppm
3,55 (2H, ABq), 4,00 (3H, s), 4,25 (2H, s), 4,97 (1H, d), 5,80 (1H, q), 6,65 (1H, s), 6,90 (1H, s), 7,3 (25H, m).

Herstellungsbeispiel 7 Benzhydryl 3-Chlormethyl-7-[(Z)-2-Ethoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol- 4-yl)acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (VIb)

Zu einer Lösung von (Z)-2-Ethoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol- 4-yl)acetylsäure (IVb) (1,095 g; 2,4 mmol) in Dichlormethan (20 ml) gibt man Phosphorpentachlorid (500 mg). Nach einstündigem Rühren bei Raumtemperatur gibt man die Mischung auf einmal zu einer eisgekühlten Lösung der Verbindung V (1,083 g; 2,4 mmol) und BSA (1 ml) in Dichlormethan (20 ml). Nach 0,5stündigem Rühren gießt man die Reaktionsmischung in 10%ige wäßrige NaHCO₃ (200 ml) und extrahiert mit CHCl₃ (100 ml). Den Extrakt wäscht man mit Wasser, trocknet ihn über MgSO₄, und verdampft unter vermindertem Druck. Der Rückstand wird über eine Kieselgelsäule chromatographiert. Eluierung mit CHCl₃ ergibt VIb als amorphes Pulver; 1,76 g (86%).

NMR: _δCDCl₃ ppm
1,40 (3H, t, CH₂CH₃), 3,53 (2H, ABq, 2-CH₂), 4,37 (2H, s, -CH₂Cl), 4,60 (2H, q, -CH₂CH₃), 4,90 (1H, d, 6-H), 5,89 (1H, d, 7-H), 6,88 (1H, s, Thiazol -H), 6,91 (1H, s, Benzhydryl- CH).

Herstellungsbeispiel 8 Diphenylmethyl 7-[(Z)-2-Ethoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol- 4-yl)acetamido]-3-jodmethyl-3-cephem-4-carboxylat (VIIb)

Eine Mischung von VIb, hergestellt gemäß Herstellungsbeispiel 7 (1,07 g; 12,5 mmol) und NaJ (562 mg; 2,75 mmol) in Aceton (20 ml) wird eine Stunde gerührt. Man filtriert die Mischung und gießt das Filtrat in Wasser und extrahiert in Ethylacetat. Die organische Schicht wäscht man nacheinander mit 5%iger wäßriger Na₂S₂O₃, Wasser und gesättigter wäßriger NaCl, trocknet über MgSO₄ und verdampft, wobei man 1,04 g (89%) der Verbindung VIIb erhält.

NMR: _δCDCl₃ ppm
3,55 (2H, q, 2-CH₂), 4,27 (2H, s, CH₂I), 5,02 (1H, d, 6-H), 5,87 (1H, d, 7-H), 6,68 (1H, s, Thiazolring H), 6,93 (1H, s, Benzhydryl-CH).

Beispiel 1 7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-(trimethylammonium(methyl-3-cephem-4-carboxylat (Ia)

Eine 1M-Lösung von Trimethylamin in Diethylether (1 ml; 1 mmol) gibt man unter Rühren zu einer Suspension von Benzhydryl3-jodmethyl-7-[(Z)-2-methoxyimino-2-(2- tritylaminothiazol-4-yl)acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (VIIa) (468 mg; 0,5 mmol) in Diethylether (30 ml) und rührt die Mischung 1,5 Stunden. Das ausgefallene quaternäre Salz (XVa) wird abfiltriert (410 mg; 82% Ausbeute), man gibt Trifluoressigsäure (TFA) (3 ml) zu. Diese Mischung rührt man 1,5 Stunden bei Raumtemperatur und verdampft dann zur Trockene unter vermindertem Druck unterhalb von 20°C. Den Rückstand verreibt man mit Ether und filtriert das ausgefallene TFA-Salz ab (Ausbeute 365 mg), löst es in einer geringen Menge Methanol und chromatographiert es über eine Säule aus HP-20 Harz (1,8 ×20 cm). Man eluiert die Säule mit Wasser (ca. 1 l) und anschließend mit 30%igem wäßrigem Methanol (0,5 l). Das methanolische Eluat verdampft man unter vermindertem Druck unterhalb 40°C. Der Rückstand wird gefriergetrocknet, wobei man die rohe Titelverbindung (Ausbeute 129 mg) erhält. Das Verhältnis Δ²/Δ³-Isomeren im Rohprodukt ist 1 : 2, bestimmt durch HPLC. Das Produkt wird durch HPLC gereinigt [Lichrosorb RP-18, 8×300 mm, eluliert mit 1/100M NH₄H₂PO₄ (pH 7,2) : CH₃OH=85 : 15]. Das HPLC-Eluat wird über eine Säule aus HP-20 (1,8×15 cm) chromatographiert, um anorganische Salze zu entfernen. Die Säule eluiert man mit Wasser (0,5 l) und anschließend mit 30%igem wäßrigen Methanol (0,5 l). Das methanolische Eluat verdampft man unter vermindertem Druck unterhalb 40°C. Der Rückstand wird gefriergetrocknet, wobei man die Titelverbindung (Ia) als amorphes Pulver erhält. Ausbeute 75 mg (33%, bezogen auf VIIa). Das Produkt zersetzt sich allmählich oberhalb 160°C. Geschätzte Reinheit 80%.

NMR: _δD₂O ppm 3,25 (9H, s, N⁺(CH₃)₃), 4,10 (3H, s, OCH₃), 5,47 (1H, d, 4 Hz, 6-H), 5,96 (1H, d, 4 Hz, 7-H), 7,10 (1H, s, Thiazol-H).

Beispiel 2 7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-[N,N-dimethyl-N-(2-hydroxyethyl)ammonium]methyl-3- cephem-4-carboxylat (Ib)

Man wiederholt das in Beispiel 1 beschriebene allgemeine Verfahren, wobei man jedoch anstelle des darin verwendeten Trimethylamins die äquimolare Menge an N,N- Dimethylethanolamin verwendet. Das Rohprodukt hat ein Δ²:Δ³-Verhältnis von 1 : 2. Nach der Reinigung erhält man die Titelverbindung, die sich oberhalb 160°C zersetzt, in 17%iger Ausbeute. Geschätzte Reinheit 90%.

Beispiel 3 7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-(N,N-dimethyl-N-allylammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (Ic)

Man wiederholt das in Beispiel 1 beschriebene allgemeine Verfahren, wobei man jedoch anstelle des darin verwendeten Trimethylamins eine äquimolare Menge von N,N-Dimethylallylamin verwendet. Das Rohprodukt hat ein Δ²:Δ³-Verhältnis von 1 : 4,5. Nach der Reinigung erhält man die Titelverbindung, die sich oberhalb 150°C zersetzt, in 14%iger Ausbeute. Geschätzte Reinheit 80%.

Beispiel 4 7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-[N,N-dimethyl-N-(3-pyridylmethyl)ammonium]methyl-3- cephem-4-carboxylat (Id)

Man wiederholt das in Beispiel 1 beschriebene Verfahren, wobei man jedoch anstelle des Trimethylamins eine äquimolare Menge von 3-(Dimethylaminomethyl)pyridin verwendet. Das Rohprodukt hat ein Δ²:Δ³-Verhältnis von 1 : 4,3. Nach der Reinigung erhält man die Titelverbindung, die sich oberhalb 170°C zersetzt in einer Ausbeute von 17%. Geschätzte Reinheit 75%.

Beispiel 5 7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-[N,N-dimethyl-N-(2-dimethylaminoethyl)ammonium]methyl- 3-cephem-4-carboxylat (Ie)

Man wiederholt das in Beispiel 1 beschriebenen allgemeine Verfahren, wobei man jedoch anstelle des Trimethylamins eine äquimolare Menge von 1,2-Bis(dimethylamino)ethan verwendet. Das Rohprodukt hat ein Δ²:Δ³-Verhältnis von 1 : 1. Nach der Reinigung erhält man die Titelverbindung, die sich oberhalb von 150°C zersetzt, in einer Ausbeute von 14%. Geschätzte Reinheit 65%.

Beispiel 6 7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3- (N,N-dimethyl-N-ethylammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (If)

Man wiederholt das in Beispiel 1 beschriebene allgemeine Verfahren, wobei man jedoch anstelle des Trimethylamins eine äquimolare Menge von N,N-Dimethylethylamin verwendet. Das Rohprodukt hat ein Δ²:Δ³-Verhältnis von 1 : 1. Nach der Reinigung erhält man die Titelverbindung, die sich oberhalb von 150°C zersetzt, in einer Ausbeute von 15%. Geschätzte Reinheit 77%.

Beispiel 7 7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-(N,N-diethyl-N-methylammonium)methyl-3-cephem- 4-carboxylat (Ig)

Man wiederholt das in Beispiel 1 beschriebene allgemeine Verfahren, wobei man jedoch anstelle des Trimethylamins eine äquimolare Menge von Diethylmethylamin verwendet. Das Rohprodukt hat ein Δ²:Δ³-Verhältnis von 1 : 1. Nach der Reinigung erhält man die Titelverbindung, die sich oberhalb von 150°C zersetzt, in einer Ausbeute von 10%. Geschätzte Reinheit 65%.

Beispiel 8 7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]- 3-(trimethylammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (Ih)

Man wiederholt das in Beispiel 1 beschriebene Verfahren, wobei man jedoch anstelle von Benzhydryl3-Jodmethyl- 7-[(Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl) acetamido]-3-cephem-4-carboxylat (VIIa) eine äquimolare Menge der entsprechenden Ethoxyiminoverbindung (VIIb) (hergestellt gemäß Herstellungsbeispiel 8) verwendet. Das Rohprodukt hat ein Δ²:Δ³-Verhältnis von 3 : 1. Nach der Reinigung erhält man die Titelverbindung, die sich oberhalb von 150°C zersetzt, in einer Ausbeute von 3%. Geschätzte Reinheit 70%.

Spektrale Daten für die Verbindungen der Beispiele 2-8 (a) Infrarot-Spektren (KBr)

Alle Produkte ergeben ähnliche Infrarot-Spektren: 1770-1775 cm^-1 (β-Lactam C=O), 1660 cm^-1 (CONH), 1610 cm^-1 (COO^-).

(b) Ultraviolett-Spektren (1/15 M Phosphatpuffer; pH 7)

Alle Produkte, außer denjenigen des Beispiels 4, hatten ähnliche Spektren: 235 nm (ε 15 700-16 400), 257 nM (ε 15 400-16 000). Die Verbindung des Beispiels 4 hatte folgende Werte: 235 nM (ε 17 600), 255 nM (ε 18 600, sh), 260 nM (ε 19 000), 266 nM (ε 17 900, sh).

(c) NMR-Spektren (D₂O)

Es wurde gefunden, daß man das Δ²:Δ³-Verhältnis und die Produktausbeute verbessern kann, wenn man das Filtrat des ursprünglich ausgefallenen quaternären Salzes (XV) kurze Zeit stehen läßt und erneut durch ein Bett der ursprünglich erhaltenen Verbindung XV filtriert; insbesondere verbessert sich die Ausbeute, wenn man die erneute Filtration mehrere Male wiederholt. Die Ausbeute kann auch etwas erhöht werden, wenn man eine geringe Menge des ursprünglichen tertiären Amins zu dem Filtrat gibt. Dies wird anhand des folgenden Beispiels, das eine Variation des Beispiels 1 darstellt, erläutert.

Beispiel 9 7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-(trimethylammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (Ia)

Eine Lösung von Trimethylamin (1M-Lösung in Ether, 10 ml) wird unter Rühren auf einmal zu einer Lösung der Jodverbindung VIIa (4,68 g; 5 mmol) in Ether (500 ml) gegeben. Man rührt die Mischung 10 Minuten und filtriert das ausgefallene quaternäre Salz (XVa) und wäscht mit einer geringen Menge Ether. Man vereinigt das Filtrat und die Waschflüssigkeiten und läßt sie weitere 10 Minuten bei Raumtemperatur stehen. Der zweite ausgefallene Niederschlag wird durch die gleiche Nutsche abgesaugt, auf der der erste Niederschlag in Form eines Bettes aufbewahrt wird. Das Filtrat wird im Abstand von 10 Minuten drei Mal in der gleichen Weise filtriert, wobei man das quaternäre Salz (XVa) (3,58 g: 72% aus VIIa) erhält. Zu dem letzten Filtrat gibt man eine Trimethylaminlösung (1M-Lösung in Ether, 2 ml) und wiederholt die gleiche Filtration weitere drei Mal in 10-Minuten-Abständen, wobei man weiteres XVa erhält (0,56 g; 11%). Zu dem erhaltenen Filtrat gibt man erneut eine 1M Trimethylaminlösung (1 m) und wiederholt die Filtration zweimal in 10-Minuten-Abständen, wobei man eine dritte Charge an XVa (0,134 g; 2,7%) erhält. Die Gesamtausbeute an XVa beträgt 4,27 g (86%).

Eine Mischung von XVa (4,20 g; 4,22 mmol), Anisol (1 ml) und TFA (40 ml) wird 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man verdampft die Mischung unter vermindertem Druck unterhalb 20°C und verreibt den dunklen Rückstand mit Isopropylether (300 ml), um das TFA-Salz (3,50 g) auszufällen, das abfiltriert und unter vermindertem Druck getrocknet wird. Man löst das TFA-Salz in Methanol (50 ml), behandelt mit einer geringen Menge Aktivkohle und filtriert. Man engt das Filtrat unter verringertem Druck ein und gibt zu den Konzentraten Natrium 2-Ethylhexanoat (1M-Lösung in Ethylacetat, 15 ml. Man verdünnt die Mischung mit Ethylacetat (300 ml), wobei die rohe Titelverbindung (2,36 g; geschätzte Reinheit 50%) ausfällt. Man filtriert ab, wäscht mit einer geringen Menge Ethylacetat und trocknet. Das Verhältnis von Δ² Isomer zu Δ³ Isomer des Rohprodukts ist 1 : 4 (HPLC, Lichrosorb RP-18; mobile Phase, 1/100M Ammoniumphosphatpuffer, pH 7 - CH₃ OH, 90 : 10; Retentionszeit, Δ² Isomer 6′ 54′′, Δ³ Isomer 8′ 29′′).

Man löst das Rohprodukt (2,36 g) in einer geringen Menge Wasser und reinigt es mittels HPLS (Waters Associates, System 500, PrepPAK 500/C₁₈; mobile Phase, 7% Methanol). Das, das Produkt enthaltende HPLC-Eluat engt man unter vermindertem Druck unterhalb 35°C ein. Das Konzentrat wird gefriergetrocknet, wobei man die Titelverbindung in einer Ausbeute von 959 mg (42%, bezogen auf das Jodid VIIa) als amorphes Pulver erhält. Geschätzte Reinheit 80% (mittels HPLC). Das Verhältnis von Δ² Isomer zu Δ³ Isomer ist 1 : 17. Die Verbindung zersetzt sich allmählich oberhalb 160°C.

Claims

1. Cephalosporinverbindungen der allgemeinen Formel I worin
R¹ ein Wasserstoffatom oder eine übliche Amino-Schutzgruppe bedeutet,
R² und R³ jeweils unabhängig voneinander eine Methyl- oder Ethylgruppe bedeuten, und R₄ eine Methyl-, Ethyl-, n-Propyl-, Isopropyl-, n-Butyl-, Isobutyl-, Allyl-, 2-Butenyl-, 3-Butenyl-, 2-Hydroxyethyl-, 3-Hydroxypropyl-, 2-(Dimethylamino)ethyl-, Pyridylmethyl-, Pyridylethyl-, Benzyl- oder Phenethylgruppe bedeutet oder deren nichttoxische, pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze oder Solvate.

2. Verbindung nach Anspruch 1, nämlich 7-[(Z)-2-(2- Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(trimethylammonium)- methyl-3-cephem-4-carboxylat oder ein nichttoxische, pharmazeutisch verträgliches Säureadditonssalz oder Solvat davon.

3. Verbindung nach Anspruch 1, nämlich 7-[(Z)-2-(2-aminothiazol- 4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[N,N-dimethyl- N-(2-hydroxyethyl)ammonium]methyl-3-cephem-4- carboxylat oder ein nichttoxisches, pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz oder Solvat davon.

4. Verbindung nach Anspruch 1, nämlich 7-[(Z)-2-(2- Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(N,N- dimethyl-N-allylammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat oder ein nichttoxisches, pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz oder Solvat davon.

5. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise eine Verbindung der Formel XIV worin
R² die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen besitzt,
B¹ eine übliche Carboxylschutzgruppe und B² eine übliche Aminoschutzgruppe bedeuten, mit einem tertiären Amin der allgemeinen Formel worin
R³ und R⁴ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen besitzen, zu einer Verbindung der allgemeinen Formel XV umsetzt und anschließend alle Schutzgruppen in an sich bekannter Weise entfernt und/oder falls gewünscht, die Verbindungen der Formel I in ein nichttoxisches, pharmazeutisch verträgliches Salz oder Solvat überführt.

6. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Ansprüche 1 bis 4 dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise eine Verbindung der allgemeinen Formel XVI oder ein N-Silylderivat davon, worin
B¹ ein Wasserstoffatom oder eine übliche Carboxyl- Schutzgruppe bedeutet und
R³ und R⁴ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen besitzen, mit einem acylierenden Derivat einer Säure der allgemeinen Formel XVII worin
B² eine übliche Amino-Schutzgruppe bedeutet und
R² die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen besitzt, acyliert, wobei man eine Verbindung der allgemeinen Formel XV erhält und anschließend alle Schutzgruppen in an sich bekannter Weise entfernt und/oder falls gewünscht, die Verbindungen der Formel I in ein nichttoxisches, pharmazeutisch verträgliches Salz oder Solvat davon, überführt.

7. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I worin
R¹ ein Wasserstoffatom bedeutet,
R² eine Methylgruppe bedeutet,
R³ eine Methyl- oder Ethylgruppe bedeutet und
R⁴ eine Methyl-, Ethyl-, 2-Hydroxyethyl-, 2-(Dimethylamino) ethyl-, Allyl- oder Pyridylmethylgruppe bedeutet, oder den nichttoxischen, pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalzen oder Solvaten davon, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise eine Mischung von Benzhydryl 7-amino-3-chlormethyl-3-cephem-4-carboxylat und Bis-(Trimethylsilyl)acetamid mit einem Säurechlorid von (Z)-2-Methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol- 4-yl)essigsäure in einem organischen Lösungsmittel zu dem entsprechenden 3-Chlormethyl-3-cephemderivat umsetzt, dieses anschließend mit einem Alkalimetalljodid in einem organischen Lösungsmittel zu dem entsprechenden 3-Jodmethyl-3-cephemderivat umsetzt, dieses anschließend in einem organischen Lösungsmittel mit Trimethylamin oder N,N-Dimethylethanolamin oder N,N-Dimethylallylamin oder 3-(Dimethylaminomethyl)pyridin oder 1,2-Bis(dimethylamino)ethan oder N,N-Dimethylethylamin oder Diethylmethylamin zu dem entsprechenden quaternären Salz umsetzt und schließlich das quaternäre Salz deblockiert, wobei man
7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-(trimethylammonium)methyl-3-cephem-4-carboxylat (Ia) oder
7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-[N,N-Dimethyl-N-(2-hydroxyethyl)ammoniuml]methyl-3- cephem-4-carboxylat (Ib) oder
7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-(N,N-dimethyl-N-allylammonium)methyl-3-cephem-4- carboxylat (Ic) oder
7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-[N,N-Dimethyl-N-(3-pyridylmethyl)ammonium]methyl-3- cephem-4-carboxylat (Id) oder
7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-[N,N-Dimethyl-N-(2-dimethylaminoethyl)ammonium]methyl- 3-cephem-4-carboxylat (Ie) oder
7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-(N,N-Dimethyl-N-ethylammonium)methyl-3-cephem- 4-carboxylat (If) oder
7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetamido]- 3-(N,N-Diethyl-N-methylammonium)methyl-3-cephem-4- carboxylat (Ig)
erhält und/oder falls gewünscht, die Verbindungen der Formeln (Ia) bis (Ig) in ein nichttoxisches, pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz oder Solvat davon überführt.

8. Antibakterielles Mittel, enthaltend eine antibakteriell wirksame Menge wenigstens einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4 und einen inerten pharmazeutischen Träger.