DE2733867C3

DE2733867C3 - Oleandomycinderivate und diese Verbindungen enthaltende antibakterielle Mittel

Info

Publication number: DE2733867C3
Application number: DE2733867A
Authority: DE
Inventors: Frank Christian New London Conn. Sciavolino
Original assignee: Pfizer Inc
Current assignee: Pfizer Inc
Priority date: 1976-08-06
Filing date: 1977-07-27
Publication date: 1981-08-27
Also published as: LU77939A1; FR2360603A1; AR217652A1; FR2360603B1; US4036853A; DE2733867B2; JPS5321185A; NL173273C; NL7708427A; IE45964B1; AR220904A1; DK148281C; US4110530A; BE857536A; NL173273B; JPS552438B2; ES461210A1; DE2733867A1; IE45964L; GB1530569A

Description

und deren pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze, worin

Ri ein Wasserstoffatom oder einen n-Alkanoylrest

mit 2 oder 3 Kohlenstoffatomen,
R₂ ein Wasserstoffatom oder einen n-Alkanoylrest

mit 2 oder 3 Kohlenstoffatomen,
Z ein Chloratom oder den-N₃ oder Imidazol-1-yl-Rest oder eine der Gruppen -N(R₃J₂, -NHRs, -NH₂, —OR» bedeutet und wobei

R3 einen Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen,

R₄ ein Wasserstoffatom oder den

-SO₂C₆H₄CH₃(P)-ReSt,
jo Rs eine-COR₆-GrUpPe, in der

R₆ ein Wasserstoffatom, einen Alkylrest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen oder den Pyridylrest oder wenn Ri ein Wasserstoffatom und R₂ den Acetylrest darstellt, den Nicotinoylrest bedeutet,

darstellen.

2. Antibakterielles Mittel, enthaltend eine Verbindung gemäß Anspruch 1 als Wirkstoff.

Die Erfindung betrifft Oleandomycinderivate der allgemeinen Formel

CH₂Z

H₃C

HO —

H₃C--

H₃C

CH₃ R₁O

■—O —

CH₃

N(CHj)₂

CH₃

OR₂

50

55

OCH₃

worin Ri ein Wasserstoffatom oder einen n-Alkanoylrest mit

2 oder 3 Kohlenstoffatomen,
R₂ ein Wasserstoffatom oder einen n-Alkanoylrest mit 2 oder 3 Kohlenstoffatomen,

Z ein Chloratom oder den -N₃ oder Imidazol-1-yl-Rest oder eine der Gruppen -N(R₃)₂, -NHR₅, — N H₂, — OR₄ bedeutet und wobei
R₃ einen Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen,
R₄ ein Wasserstoffatom oder den

-SO₂C₆H₄CH₃(P)-ReSt
R₅ eine — COR₆-Gruppe, in der

darstellen, deren pharmazeutisch aiinchiiiuai e Säureadditionssalze und diese Verbindungen enthaltende antibakterielle Mittel.

Oleandomycin, seine Herstellung aus Fermentationsbrühen und seine Verwendung als antibakterielles

Mittel wurde zuerst in der US-PS 27 57 123 beschrieben. Die Struktur des Oleandomycins ist folgende:

N(CH₃J₂

CH,

OH

OCH,

Von dieser Verbindung sind mehrere Derivate bekannt, insbesondere solche, bei denen eine bis drei der freien Hydroxylgruppen in 2', 4" und 11-Stellung zu Acetylestern verestert sind. Zudem sind in der US-PS 30 22 219 ähnliche Derivate beschrieben, bei denen das Acetyl in den vorgenannten Estern durch einen anderen, bevorzugt unverzweigten niederen Alkanoylrest mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen oder den Trifluoracetylrest ersetzt ist.

Ferner sind auch Oleandomycine bekannt, bei denen eines oder mehrere der Wasserstoffatome der vorgenannten Hydroxylgruppen durch eine Tri(niederalkyl)si-IyI- und vorzugsweise eine Trimethylsilylgruppe ersetzt ist bzw. sind. Diese Verbindungen besitzen alle eine antibakterielle Wirksamkeit

Die erfindungsgemäßen Verbindungen vermögen Infektionen zu bekämpfen, die durch entsprechende Erregerorganismen ausgelöst werden, und sind als Antibiotika und antibakterielle Mittel von Wert. Sie sind gut wirksam gegen grampositive Mikroorganismen, sind aber auch gegen gramnegative Mikroorganismen, überraschenderweise insbesondere den Mikroorganismus Neisseriae sicca 66C001 besonders wirksam.

In der folgenden Tabelle sind die Ergebnisse von in vitro-Versuchen mit einigen erfindungsgemäßen Verbindungen und einer Vergleichsverbindung zusammengestellt. Die Untersuchungen erfolgten nach der Methode de· minimalen Hemmkonzentration (MHK) von Ericsson und Sherris (H. M. Ericsson und J. C. Sherris, Acta. Pathol. Microbiol. Scand. Suppl. 217B 64 [1971]).

Tabelle
MHK-Werte

CH₂Z

X,

N(CHj)₂

H₃C	Il	CH₃	R₁O	A
HO--		Vo		ί
H₃C-	V O
H₃C	J-CH₃
	O CH₃X		CH₃

CH₃

OCH₃

Beisp.	Z	Ri	H	Staph.	Staph.	Strep.	E.coli	Kleb-	Salm.	Neisseriae
			Ac	aureus	aureus	py·		siella pn.	typhm.	sicca
			H	01A005*)	01A400R*)	02C203*)	51A226f)	53A009t)	58D009t)	66C00I+)
2	OH	Ac	Ac	6,25	12,5	1,56	>200	>200	>200	0,39
13	Cl	H	Ac	3,12	50	1,56	200	>200	>200	<0,l
5	TsO	Ac		100	>200	3,12	>200	>200	>200	3,12
18	Imidazol-l-yl	H	0,39	6,25	-	>200	>200	>200	<0,l
14	N(CH₃),	II	25	50	50	>200	>200	>200	1,56
	O

•7 NHCH

Ac

6,25

1,56

>200

0,20

Fortsetzung

Beisp.	y	R₁	R:	Slaph.	Slaph.	Strep.	li.culi	Kleb-	SaIm.	Neisseriae
				aureus	aureus	py.		siella pn.	t> phm.	sicta
				01AU05*)	01A-UX)R*	) O2C2O3")	51 A226t)	5.VM)(Wt)	5XDUO9T)	66O)')l +1
16	NHCOCH₃	H	Ac-	3,12	3,12	0,10	200	200	200	-
15	NH(Nicotinoyl)	H	Ac	25	100	12,5	>200	>200	>200	1,56
Il	NH₂	H	Ac-	6,25	25	50	>200	>20l)	>200	<0,l'.l
9	N₃	H	Ac	3,1	12.5	3.1	>200	>200	>200	0,20
	TAO (bekannt)	-	-	3,12	6.25	0.78	> 5OM	50 m	50M	50

*) Gram-positiv.
t) Gram-negativ.
M Der Test wurde bei diesem Versuch nur bis 50 durchgeführt, aber frühere F.rgebnisse /eigen keine MHK-Aktiviuil be

einem Wert von 200.
IAO = Triacetyloleandomycin. /um Vergleich.

Ferner wurde die Fähigkeit einiger erfindungsgemäßer Verbindungen, gegen in vivo-lnfektionen zu schützen, durch subkutane oder orale Verabreichung an 2> Mäuse bestimmt, die mit Staph. aureus 01A005 infiziert waren. Unter Anwendung des Testverfahrens von Retsema (J. A. Retsema und Mitarbeitern in Antimicr. Agents and Chemother., 9, 975 [1976]) wurde bestimmt, daß insbesondere jo

8,8a-Desoxy-8-azidomethyl-4"-acetyl-

oleandomycin (Beispiel 9),
8,9a-Desoxy-8-hydroxymethyl-2'-acetyl-

oleandomycin (Beispiel 2), π

8,8a-Desoxy-8-chlormethyl-4"-acetyl-

oleandomycin (Beispiel 13),
8,8a-Desoxy-8-(imidazol-1-yl)methyl-

4"-acetyloleandomycin (Beispiel 8) und
8,8a-Desoxy-8-(N-acetyl)aminomethyl-4"-acetyl-oleandomycin (Beispiel 16)

Schutz gegen Infektion boten, der -mit dem natürlichen Oleandomycins vergleichbar war.

Zur wirksamen prophylaktischen und infektionshem- 4^r> menden in vivo-Verwendung können die erfindungsgemäßen Oleandomycin-Verbindungen in üblicher Weise mit einem inerten, pharmazeutisch annehmbaren Träger oral oder parenteral verabreich: werden. Die übliche Verabreichungsdosis für menschliche Patienten liegt im Bereich von etwa 500 —2000 mg pro p. o. pro Tag und bevorzugt in etwa einer bis vier Dosen. Diese Dosierung kann jedoch etwas mit dem Gewicht der behandelten Person variieren; im allgemeinen können etwa 10 - 40 mg/kg Körpergewicht pro Tag verabreicht werden.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können mit üblichen inerten pharmazeutischen Hilfsstoffen, wie Lactose, Mannit und Stärke, kombiniert und zu Dosierungsformen wie Tabletten, Kapseln formuliert t>o werden. Für parenterale Verabreichung können diese Verbindungen mit einem üblichen inerten, parenteral annehmbaren Träger, wie Wasser, Salzlösung, Sesamö!, Propylenglykol verarbeitet werden. Diese verschiedenenen pharmazeutischen Dosierungsformen werden b5 nach in der Pharmazie bekannten Methoden zubereitet.

Die erfindungsgemäßcn Oleandomycinderivate werden aus natürlichem Oleandomycin und seinen acylierten Derivaten, in denen eine oder beide Hydroxylgruppen in 2'- und 4"-Steliung mit Alkanoylgruppen mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen acyliert sind, nach üblichen Methoden hergestellt. Die Verfahren, nach denen die acylierten Derivate des natürlichen Oleandomycins hergestellt werden, sind in der US-PS 30 22 219 beschrieben.

Ein Vergleich zwischen der Struktur der erfindungsgemäßen Verbindungen der angegebenen allgemeinen Formel und der Struktur des Oleandomycins zeigt, daß die Unterschiede der ersteren gegenüber dem Oleandomycin in der nachstehenden Teilstruktur B und in den Gruppen Ri und R₂ liegen.

CH₁Z

Struktur B

Deshalb werden nachfolgend die erfindungsgemäßen Verbindungen durch die Tetlstruktur B dargestellt.

In den folgenden Ausführungen sollen veresterte Derivate oder Esterderivate Oleandomycin-Verbindungen bedeuten, in denen eine oder zwei der Hydroxylgruppen in 2'- und 4"-Stellung mit n-Alkanoylgruppen mit 2 oder 3 Kohlenstoffatomen verestert sind. Zudem ist jede der (in 2'- und 4"-Stellung) unveresterten Verbindungen gemäß der Erfindung, sofern nicht anders angegeben, in irgendeines der beanspruchten Esterderivate, wie oben definiert, überführbar, und zwar nach dem Verfahren der US-PS 30 22 219, auf das hiermit Bezug genommen wird.

Die nachstehende Reaktion 1 veranschaulicht die Herstellung des erfindungsgerriäßen 8,8a-Desoxy-8-hydroxymethyl-oleandomycins gemäß Formel C oder von dessen entsprechenden 2'-Acyl- oder 2',4"-Diacyl-derivaten durch übliche reduktive Spaltung des 8,8a-Epoxids natürlichen Oleandomycins, eines entsprechenden 2 -Acyloleandomycins oder 2',4"-Diacyl-oleandomycins mit üblichen Reagentien, die eine selektive Reduktion des Epoxids zum primären Alkohol bewirken. Solche typische Reagentien sind Metallamalgame, wie Zink-

amalgam, Magnesiumanialgam und insbesondere AIn miniumamalgam.

CIU)II

ΛΙ-amalgani

Oleandonncin

X-llydroxymeihyloleandomvcin C

Die Reaktion 1 wird in der Weise durchgeführt, «aß Olcandomycin oder ein entsprechendes Acylderivai mit dem Metallamalgam in einem Oleandomycin lösenden Lösungsmittel, wie Äikanoi. Äther, ieuciilem Äther. Benzol, wäßrigem Alkanol, Tetrahydrofuran. wäßrigem Tetrahydrofuran, Dioxan, wäßrigem Dioxan oder Gemischen dieser Lösungsmittel behandelt wird, bis die Reaktion im wesentlichen abgeschlossen ist. Der Temperaturbereich für die Umsetzung reicht von Raumtemperatur bis zum Rückfluß des Lösungsmittels, wobei im allgemeinen bei Raumtemperatur gearbeitet wird.

Nach dem Abtrennen der komplexen anorganischen Salze kann das Verfahrensprodukt isoliert und nach geeigneten Methoden gereinigt werden, die von den physikalischen Eigenschaften des Produkts abhängen, zum Beispiel durch Umkristallisieren. Lyophilisieren. Chromatographie. Hochdruck! Iu SMpk ei t sch rom a iographie und Extrahieren.

Das erfindungsgemäße 8,8a-Desoxy-8-chlormethyl· oleandomycin der folgenden Formel D oder deren

entsprechende Esterderivate werden gemäß nachstehender Reaktion .? durch Umsetzung von 8,8a-Desoxy-8-hydroxymelhyl-oleandomyein oder einem entsprechenden Esterderivat mit N-Chlorsuccinimid und Triphenylpliosphin in einem polaren aprotischen Lösungsmh.iel. wie Dimethylformamid, bei Temperalliren von — 30"Cbis Raumtemperatur, hergestellt.

CIU)H

CH₃CI

Vl

OlcMiidomvcin C

Oleandomvein D

Ist die Reaktion im wesentlichen beendet, kann das Produkt durch Verteilen des Reaktionsrückstands zwischen einer gepufferten, basisch-wäßrigen Phase und einer organischen Phase, in der das Produkt löslich ist, isoliert werden. Die endgültige Reinigung erfolgt durch Chromatogiaphie, Kristallisieren. Lyophilisieren oder Hochdruck-Flüssigkeitschromatographie, wobei die Wahl der geeigneten Methode von den physikalischen Eigenschaften des Produkts abhängt.

Die Herstellung der erfindungsgemäßen 8.8a-Desoxy-8-(p-toluol-sulfonyloxy)-methyl-oleandomycine der nachstehenden Struktur E oder von deren entsprechenden Esterderivaten nach der folgenden Reaktion 3 erfolgt durch Umsetzung von S.Sa-Desoxy-e-hydroxymethyl-oleandomyein. Formel C, oder einem entsprechenden Esterdcnvat mit p-CH J-OH₄SOz-Cl als Sulfonierungsmiuel:

ClLOH

Oleandomvcin C

CIL — -CH,- SO;C1

Oleandoirn ein H

Man arbeitet in der Weise, daß 8-1 iydrow-oleandomycin (C) oder ein entsprechendes Esterderivat desselben mit etwa einen- Äquivalent Tosylchlurid in einem organischen Amin-Lösungsmittel, wie Triäthyiamin. Pyridin oder Luticin, und das gegebenenfalls mit einem inerten organischen Lösungsmittel, wie Chloroform. Benzol. Methylenchlorid oder Toluol verdünnt ist. umgesetzt wird.

Das Reaktionsprodukt kann durch Verteilen des

RcäkliGnSgcITiiSCheS ZWiSChcn CiPiCT gCpufiCPtCn. bssisch-wäßrigen Phase und einer organischen Phase isoliert werden, in der das Verfahrensprodukt löslich ist. worauf dieses wie üblich durch Chromatographie. Kristallisieren oder Lyophilisieren gereinigt wird, wobei die Wahl der Methode von den physikalischen Eigenschaften des Produkts abhängt.

Die Herstellung des erfindungsgemäßen 8.8a-Desoxy-8-(imidazo!-i-yl)methyl-oleandomycins der nachstehenden Formel G oder von dessen entsprechenden Esterderivaten erfolgt durch Ersatz der 8-p-Tosyloxygruppe von 8.8a-Desoxy-8-(p-tosyloxy)methyl-oleandomycin. der Formel E. oder von dessen Esterderivaten durch Imidazo!.

Dabei wird eine Lösung des betreffenden Oleandomycins (E) und von Imidazo! in einem polaren, aprotischen Lösungsmittel, wie Dimethylformamid oder Dimethylsuifoxid, bei Temperaturen von 25-100^cC erwärmt, bis die Umsetzung im wesentlichen abge-

g p

kann durch Verteilen des Reaktionsrückstands zwischen einer gepufferten, basisch-wäßrigen Phase und einer organischen Phase erfolgen, in der das Verfahrensprodukt löslich ist. wobei Äthylacetat typisch ist. Das anfallende Rohprodukt wird entweder durch Chromatographie, Umkristallisieren oder Lyophilisieren gereinigt, wobei die Wahl der Methode von den physikalischen Eigenschaften des Produkts abhängt.

CHjOSO: — CJL —

^ — N

lrr.idazol

Oleandomycin

Oleandomvcin G

Durch Ersatz der Tosyloxygrtippe von Oleandomyein S.Ha-Dcsoxy-S-azidoniethyl-olcandomycin H oder die E oder vcn dessen entsprechenden f-lstcrtlcrivatcn entsprechenden Esterderivate wie folgt: durch das A/klion crhiilt man das erfindiingsgemiiöe

CH.O-Ibs

C)

Oleandomvein V.

Cl I,N,

C)

N« Oleandomvcin H

Die erl'indungsgemiißen Verbindungen, bei denen 7. einen angegebenen Aminrest darstellt, werden in üblicher Weise aus 8.8a-Desoxy-8-azidomeihy!-o!eandomycin oder einem entsprechenden Esterderivat durch Reduzieren des Azids sowie gegebenenfalls durch Kondensation des anfallenden 8,8a-Desoxy-8-aminomethyl-oleandomycins oder dessen entsprechenden Esterderivats mit entsprechenden Amidierungsmitteln hergestellt. Dabei erhält man 8,8a-Desoxy-8-aminomethyl-oleandomycin I, ein entsprechendes 8.8a-Desoxy-8-N-(dialkyl)aminomethyl-oleandomycin, Formel ], ein entsprechendes S.Sa-Desoxy-S-N-iRbCOJ-aminomethyloleandomycin, Formel L, sowie die entsprechenden Esterderivate. Die Herstellung einer jeden dieser Oleandomycin-Verbindungen wird nachfolgend erläutert.

8-Azidomethyl-oleandomycin, Formel H, oder ein entsprechendes Esterderivat wird unter normalem oder Niederdruck- (bis zu 7 bar) zu 8,8a-Desoxy-8-aminomethyl-oleandomycin, Formel 1, oder einem entsprechenden Esterderivat gemäß Reaktion 6 katalytisch mit Wasserstoff reduziert.

CH,N,

6.

Oleandomycin II CH₁NH,

Oleandomycin I

Das betreffende Oleandomycin, Formel H. wird in einem Lösungsmittel, wie Wasser, Methanol. Äthanol, Isopropanol oder deren Gemische unter Mitwirkung eines Edelmetallkatalysators, wie Palladium/Kohle, Platinoxid, hydriert. Nach beendeter Hydrierung erfolgt die Isolierung der Reaktionsprodukte durch Chromatographie, Lyophilisieren oder Umkristallisieren, wobei die Wahl der Methode von den physikalischen Eigenschaften des Produkts abhängt.

Eine entsprechende Verbindung der Formel I kann durch reduktive Aminierung des entsprechenden 8a-Aldehyd-oleandomycins hergestellt werden. Das 8-Hydroxymethyl-oleandomycin, Formel C, wird zum entsprechenden 8a-Aldehyd-oleandomycin durch Oxydation nach der Jones-Reaktion, der Dimethylsulfoxid- und Carbodiimid-Reaktion oder der Chromtrioxid-Hydrochloridsalz-Reaktion nach Corey oxydiert. Dieser 8a-A!dehyd wird dann durch Behandeln mit Ammoniak unter den Bedingungen einer katalytischen Hydrierung in das ea-Aminomethyl-oleandomycin, Formel I, übergeführt.

Die entsprechenden N-Dialkyl-e.ea-desoxy-S-aminomethyl-oleandomycin-Verbindungen, Formel J, oder deren entsprechende Esterderivate erhält man aus e.ea-Desoxy-S-azidomethyl-olaeandomycin, Formel H, oder entsprechenden Esterderivaten durch katalytischrcduktive Alkylierung, wie sie unter 7 dargestellt ist.

Nach der oben angegebenen katalytischen Hydriermethode zur Herstellung von Oleandomycin, Formel I, hydriert man 8-Azidomethyl-oleandomycin, Formel H, oder ein Esterderivat desselben unter Verwendung eines entsprechenden n-Alkanals mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen in einem Lösungsmittel in situ zu S.Sa-Desoxy-e-aminomethyl-oleandomycin, Formel I. oder einem Esterderivat desselben und führt dann mit dem betreffenden n-Alkanal eine reduktive Alkylierung durch:

CH₂N₃

7.

CH₂NH₂

Oleandomycin H

CH₂N(Alkyl)₂

Oleandomycin J

worin Alkyl einen Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen bedeutet

Das alkylierte Derivat wird durch Verteilen des Reaktionsrückstands zwischen einer gepufferten, basisch-wäßrigen Phase und einer organischen Phase isoliert in der das Produkt löslich isu Dann wird das Verfahrensprodukt durch Umkristallisieren oder Chromatographie gereinigt wobei die Wahl der Methode von den physikalischen Eigenschaften des Produkts abhängt

Il

Die nachstehenden Amid-(R(,CO —)-Derivate der Formel L von S.Sa-Desoxy-S-aminomethyl-oleandomycin, F^?ormel !,oder von deren Esterderivaten erhält man durch Umsetzung eines Oleandomycins der Formel 1

oder von dessen Esterderivaten mit einem entsprechenden Acylierungsmittel gemäß der folgenden Reaktionsgleichung:

CH₁NII,

CH₃NHCR,,

Acylierungsmittel

Olciindomycin I

Oleandomycin L

wobei Rt, die oben angegebene Bedeutung besitzt.

Bei dieser üblichen Methode wird verdünntes Alkali oder ein organisches Amin, wie Pyridin, Triäthylamin oder Lutidin als Base im Falle der Verwendung eines entsprechenden Säurechlorids als Acylierungsmittel zum Neutralisieren des gebildeten Chlorwasserstoffs verwendet. Die Wahl der Base hängt von der Art des Produkts und der verwendeten Reaktionskomponente ab. Zudem kann das organische Amin auch als Lösungsmittel wirken oder mit einem inerten organischen Lösungsmittel, wie Chloroform, Benzol oder Methylenchlorid, verdünnt werden. Mit Wasser mischbare oder unmischbare Lösungsmittel, wie Tetrahydrofuran oder Chloroform, werden mit dem verdünnten Alkali verwendet. Im Falle der Verwendung von entsprechenden Anhydriden oder gemischten Anhydriden als Acylierungsmittel kann ein Lösungsmittel, in dem sowohl das Oleandomycin, Formel I, als auch die Reaktionskomponente löslich sind, eingesetzt werden.

und eine Base ist nicht notwendig. Solche Lösungsmittel sind z. B. Methanol, Äthanol, Äthylacetat, Aceton, Isopropanol, n-Propanol, Chloroform, Methylenchlorid,

2Ii Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethoxyäthan und Methyläthylketon. Es kann bei Reaktionstemperaturen von der Temperatur eines Eisbades bis zur Rückflußtemperatur des Lösungsmittels gearbeitet werden, im allgemeinen liegt sie bei Raumtemperatur. Das erhaltene Reaktions-

2) produkt kann zwischen einer gepufferten, basisch-wäßrigen Phase und einer organischen Phase verteilt werden, in der das Verfahrensprodukt löslich ist, zum Beispiel Chloroform oder Äthylacetat. Das angefallene Rohprodukt kann dann durch Chromatographie, Lypo-

jii philisieren, Umkristallisieren, Hochdruck-Flüssigkeitschromatographie oder Extraktion/Verdampfung gereinigt werden, wobei die Wahl der Methode von den physikalischen Eigenschaften des Produktes abhängt.
Die oben beschriebenen Verfahren sind in dem

Γ) nachstehenden Reaktionsschema zusammengefaßt:

CH₂CI

Schema
naliirl. Oleandomycin

CH₂OH

CH₂OSO₂-C₆H₄-CH₃(P)

5.

6.

CM;N(Alkvl):

8.

CH₂N = CHN(R₁):

9.

7.

CH₂NH,

I!

CH₂NHCR,,

10.

Die pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze der erfindungsgemäßen Verbindungen werden in üblicher Weise dadurch hergestellt, daß man eine Lösung eines entsprechenden Oleandomycinderivais in einem Lösungsmittel, wie Aceton, mit einer stöchiometrisch äquivalenten Menge einer Mineralsäure, wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Phosphor- oder Schwefelsäure, einer organischen Säure, wie Asparaginsäure, Zitronensäure, Weinsäure, Gluconsäure, Bernsteinsäure und Stearinsäure, oder einer Alkylschwefelsäure, wie Laurylschwefelsäure. versetzt. Das Salz scheidet sich nach der Neutralisierungsreaktion oder, wenn nötig, nach teilweisem Verdampfen der Reaktionslösung, ab und die Verbindung kann dann durch Filtrieren, Zentrifugieren oder Lyophilisieren gewonnen werden.

Beispiel 1

8,8a-Desoxy-8-hydioxymethyl-2'.4"-diacetyloleandomycin

Zu einer Suspension von 10 g amalgamiertem Aluminium (hergestellt aus Quadraten von 6,35 mm bzw. ¹A Zoll Aluminiumfolie nach der Methode von Ferris, Sanchez und Manusco, Org, Syn, Coll. Band V, S. 32) in 200 ml 10% wäßrigem Tetrahydrofuran wurde bei Raumtemperatur in einem 1-1-Dreihals-Rundkolben, der mit einem mechanischen Rührer ausgestattet war, eine Lösung aus 5,0 g (6,4 mMol) 2',4"-Diacetyloleandomycin in 50 ml 10% wäßrigem Tetrahydrofuran gegeben. Die erhaltene Suspension wurde bei Raumtemperatur 48 Stunden gerührt, und die Aluminiumsalze wurden durch Filtrieren durch Diatomeenerde abgetrennt. Das Filtrat wurde einem Äthylacetat/Wasser-Gemisch (2:1) zugesetzt, und die organische Phase wurde abgetrennt und zweimal mit Wasser und einmal mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, dann über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, filtriert und das Lösungsmittel unter vermindertem Druck aus dem Filtrat verdampft. Das erhaltene Material wurde auf eine Kieselgelsäule gebracht und mit Äthylacetat eluiert, wobei 850 mg der Titelverbindung als weißer Schaum erhalten wurden. Das NMR-Spektrum der Verbindung zeigte die folgenden charakteristischen Signale.

NMR (CDClj)o ppm: 5,43(1 H) ni; 3,40(3H) s:

2.25 (6H) s; 2.10 (3H) s: 2,0b (JH) s.

Beispiel 2
8,Sa-DeSOXy-S-hydroxy methy 1-2'-acetyloleando my ei η

Gemäß der Arbeitsweise des Beispiels 1 wurde bei Verwendung von 2'-Acetyloleandomycin die Titelverbindung erhalten. Sie zeigte das folgende charakteristische NMR-Spektrum:

NMR,CDCl₃,ό ppm: 5.46(1 H) m: 3,46(311) s;

2,30 (6H) s; 2,08 (3H) s.

Ausbeute 94%.

Beispiel 3
8,8a-Desoxy-8-hydroxymethy!oleandopi\<-in

Gemäß Beispiel 1 wurde be; Verv.end.ing von Oleandomycin die Titelverbindung erhalten. De Ausbeute betrug 60%. Die Verbindung hatte die lobenden charakteristischen Signale im NMR-Spektrum:

NMR. CDCl₃, ό ppm: 5.40(1 H) m;4.95 (1 H) m:

4.20 (1 H) d; 3.36 (3H) s: 2,23 (6H) s.

Beispiel 4

8.8a-Desoxy-8-tosyloxymethyi-2'.4 -diacetyloleandomycin

Zu einer Lösung von p-Toluolsulfonylchlorid (988 mg. 5,16 mMol) in 3 ml Pyridin, die auf O⁰C gekühlt war. wurden 2,0 g (2,58 mMol) gemäß Beispiel 1 erhaltenes

8,8a-Desoxy-8-hydroxymethyl-2'.4"-diacetyloleandomyein als Feststoff auf einmal zugegeben. Nach dreistündigem Rühren bei 0⁼C wurde die Lösung in ein Gemisch aus Äthylacetat und Wasser gegossen und der pH mit gesättigter Natriumbicarbonatlösung auf 8,5 eingestellt. Die organische Phase wurde abgetrennt und nacheinander mit Wasser, verdünnter Salzsäure von pH 3.5, Wasser. Natriumbicarbonatlösung von pH 8.5 und gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen. Eindampfen der organischen Schicht unter vermindertem Druck

ergab 2.30 g weißen Schaums, der -in einer 15 χ 8.5 cm-Kieselgelsäule Chromatographien u uidc. Durch Eluiion mi' Äthylacetat und Accm in einem Verhältnis vor, 9 : 1 wurden nach Verdampfen des Lösungsminels 1,62 g der Titelverbindung als weißer Schaum erhalten. Das NMR-Spektrum der Verbindung zeigte die folgeiiden charakteristischen Signale:

NMR (CDCIi)O ppm: 7.56 (4H) ς: 5,35(1 H) m:
3,35 (3H) s; 2,43 (3H) S: 2.25 (6H) s:
2,10(3H) s: 2.05 (3H) s.

Beispiel 5

8.8a-Desoxy-8-tos>loxymethyi-2'-acetylolejndomycin

Nach der Arbeitsweise des Beispiels 4 wurde die Titelverbindung aus dem nach Beispiel 2 erhaltenen S.Sa-Desoxy-S-hydroxymeihyl^'-acetyloleandomyein
hergestellt. Das NMR-Spektrum der Verbindung zeigte die folgenden charakteristischen Signale:

NMR (CDClj) d ppm: 7.56 (4H): 5.38 (1 H) m;
3,43 (3H) s: 2,46 (3H) s: 2.30 (6H) v.
2,05 (3H) s.

Beispiel b

8,8a-Desoxy-8-hydroxymeth\l-4"-aceiy]-oleandomycin

Eine Lösung von 3.4 3 g (4,4 mMol) gemäß Beispiel 1 erhaltenem 8,8a-Desoxy-8-hydro\ymethyl-2',4"-diaccthyioleandomycin in 50 ml Methanol wurde bei Raumtemperatur 20 Stunden gerührt. Nach Verdampfen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck wurde die Titelverbindung in Form eines weißen Schaums erhalten. Das NMR-Spektrum der Verbindung zeigte die folgenden charakteristischen Signale:

NMR (CDClj) <5 ppm: 5.43(1 H) m: 3.35 (3H) s:
2,28 (6H) s: 2,08 (3H) s.
Ausbeute: 35%.

Beispiel 7
S.Sa-Desoxy-S-tosyloxymeihyioleandoinycin

Unter Anwendung der Arbeitsweise des Beispiels 6 wurde nach Beispiel 5 erhaltenes 8.8a-Desoxy-8-tosyloxymethyl-2'-acetyl-oleandomycin in die Titelverbindung übergeführt. Die Verbindung zeigte die folgenden charakteristischen NMR-Signale:

NMR (CDClj) d ppm: 7.56 (4H) q; 5.43 (1 H) m;
3,40(3H) s: 2,43 (3H) s: 2,31 (6H) s.

Beispiel 8

8,8a- Desoxy-8-tosyloxy methyl -4" -acc ty I-oleandomycin

Unter Anwendung der Arbeitsweise des Beispiels 6 wurde gemäß Beispiel 4 erhaltenes 8,8a-Desoxy-8-tosyloxymethyl-2',4"-diacetyloleandomyciti in die Titeiverbindung übergeführt. Die Verbindung zeigte die folgenden charakteristischen NMR-Signalc:

NM R (CDCI ι) Λ ppm: 7,5b (4H) q:i,38 (I H) m:
3.36 (3H) s; 2.43 (3H) s: 2.31 (bH) s;
2,10(3H)s.

Beispiel 9

S.Sa-Desoxy-S-azidomethyl^'-acetyloleandomycin

Eine Lösung von 2,65 g (3 mMol) gemäß Beispiel 8 erhaltenen S.Sa-Desoxy-S-tosyloxymethyW-acetyloleandomy.ins in 30 ml Dimethylsulfoxid wurde in einem 200-ml-Dreihalskolben, ausgestattet mit einem Magnetrührer. Thermometer und einer Stickstoffzuleitung, mit 585 mg (9 mMol) festem Natriumazid in einer Menge versetzt. Der Kolben wurde in ein Ölbad eingetaucht und 5.5 Stunden auf 50⁰C erwärmt, dann wurde der Inhalt in ein Gemisch aus Eis, Wasser und Äthylacetat gegossen und der pH mit Natriumbicarbonat auf 8,5 eingestellt. Die organische Phase wurde abgetrennt und zweimal mit gleichen Volumina Wasser, einmal mit einem gleichen Volumen gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, dann über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, filtriert und das Lösungsmittel unter vermindertem Druck aus dem Filtrat verdampft, wobei 2,25 g der Titelverbindung in Form eines weißen Schaums erhalten wurden. Die Substanz zeigte eine starke Bande im Infrarotspektrum bei 2095 cm-' sowie die folgenden charakteristischen Signale im NMR-Spektrum:

NMR (CDClj) ό ppm: 5,46 (1 H) m: 3.33 (3H) s:
2.28(6H)s:2,10(3H)s.

Beispiel 10
S.Sa-Desoxy-S-azidomethyloieandomycin

Unter Anwendung der Arbeitsweise des Beispiels 9 wurde gemäß Beispiel 7 erhaltenes 8,8a-Desoxy-8-tosyloxymethyloleandomycin in die Titelverbindung übergeführt. Das IR-Spektrum dieser Verbindung zeigte eine starke Bande bei 2100 cm ' und das NMR-Spektrum hat die folgenden charakteristischen Signale:

NMR (CDClj) <) ppm: 5,11 (1 H) m; 3,45 (3H) s:

2.30 (6H) s.

Beispiel 11
8,8a-Desoxy-8-aminomethyl-4"-acetyloleandomycin

Zu einer Lösung von 9.34 g (12,3 mMol) gemäl: Beispiel 9 erhaltenem 8,8a-Desoxy-8-azidomethyl-4"-acetyloleandomycin in 200 ml Methanol wurden 9,0 g 10%iges Palladium auf Kohle gegeben und das Gemisch 1 Stunde mittels Wasserstoff auf einer Hydrier-Schüttelvorrichtung hydriert. Dann wurde der Katalysator au; der Reaktionslösung durch Filtrieren durch Diatomeenerde entfernt, das Lösungsmittel aus dem Filtrai abgedampft und unter vermindertem Druck (0,018 mbar) wurde der Rückstand an einer 80 χ 4,5 cm-Säule an hydroxypropyliertem Dextrangel durch EIution mit Tetrahydrofuran Chromatographien, wöbe nach Verdampfen des Elutionsmittels 7,6 g der Titelverbindung in Form eines weißen Schaums anfielen. Die Substanz zeigte die folgenden charakteristischer NMR-Signale:

NMR (CDCi₃) (5 ppm: 5,30 (1 H) m: 3.36 (3H) s:

2,30(6H)s;2.10(3H)s.

lic ι s ρ ι c 1 12
e.Sa-Desoxy-S-aniiiiomethyloleandoniyciii

Unter Anwendung der Arbeitsweise des Beispiels 11 wurde gemäß Beispiel 10 erhaltenes 8.8a-Desoxy-8-azi

130 235/21

domethyl-oleandomycin in die Titelverbindung übergeführt Die Verbindung zeigte das folgende charakteristische NMR-Teilspektrum:

NMR (CDCb) ö ppm: 5,13(1 H) m; 3,38 (3H) s:

2,26 (6H) s. ^

Beispiel 13
8,8a-Desoxy-8-chlormethyl-4"-acetyloleandomycin

Eine Lösung von 2,5 g (3,23 mMol) nach Beispiel 1 i< > erhaltenen 8,8a-Desoxy-8-hydroxymethyl-2',4"-diacetyloleanaomycins in 8 ml Dimethylformamid in einem 50-ml-Dreihalsrundkolben, versehen mit einem Magnetrührer, Thermometer und Stickstoffeinlaß, wurde auf O⁰C gekühlt und mit 861 mg (6,46 mMol) N-Chlorsuccin- π imid versetzt. Nach 10 Minuten Rühren bei 0°C wurde die Lösung auf - 10⁰C gekühlt, und 1,69 g (6,46 mMol) festes Triphenylphosphin wurde in kleinen Anteilen im Verlauf von über 30 Minuten zugesetzt, wobei die Temperatur der Lösung zwischen —10 und 0°C Jii gehalten wurde. Als die Zugabe beendet war, wurde das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur sich erwärmen gelassen, und es wurde weitere 30 Minuten gerührt. Das Gemisch wurde dann in ein Zweiphasengemisch aus Äthylacetat und Wasser (2/1) gegossen, der pH auf 8,5 eingestellt, un die organische Phase wurde mit Wasser und gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen. Die organische Phase wurde über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, zur Entfernung des Trocknungsmittels filtriert, und das Lösungsmittel wurde aus dem Filtrat jn unter vermindertem Druck verdampft, wobei als Rückstand 2,6 g eines weißen Produktes erhalten wurden. Dieses Produkt wurde in 50 ml Methanol aufgenommen und bei Raumtemperatur 20 Stunden gerührt. Das Lösungsmittel wurde aus der Reaktionslö- r> sung unter vermindertem Druck verdampft und der Rückstand an hydroxypropyliertem Dextrangel mit Methanol als Elutionsmittel Chromatographie«, wobei man nach Abdampfen des Elutionsmittels 1,24 g der Titelverbindung in Form eines weißen Schaums erhielt. Die Verbindung zeigte die folgenden charakteristischen NMR-Signale:

NMR(CDCl₃) ö ppm: 5,43(1 H) m: 3.33(3H) s;
2,28 (6H) s; 2.06 (3H) s.

45

Beispiel 14

8,8a-Desoxy-8-dimethylaminomethyl-4"-acetyloleandomycin

Zu einer Lösung von 1,51 g (2,0 mMol) nach Beispiel 9 >o erhaltenen 8,8a-De:soxy-8-azidomethyl-4"-acetyloleandomycins in 30 ml Methanol wurden 1,5 ml einer 37%igen wäßrigen Formaldehydlösung (ca. 20 mMol Formaldehyd) und 1,5 g 10% Palladium auf Kohle gegeben, und das Gemisch wurde über Nacht bei einem > > Druck von 3,45 bar auf einer I lydrier-Schüttelvorrichtung mittels Wasserstoff hydriert. Nach dem Entfernen des Katalysators aus dem Reaktionsbrei durch Filtration über Diatomeenerde und Verdampfen des Lösungsmittels aus dem Filtrat unter vermindertem Druck wi wurde der Rückstand zunächst aus Äthylacetat kristallisiert und dann aus Isopropylalkohol umkristallisiert. Man erhielt 800 mg Titel'verbindung vom F. 180,5 bis 182⁰C. Die Verbindung zeigte die folgenden charakteristischen NMR-Signale: tv>

^;l)s;

Beispiel 15

"'. .,,(. ipm: 5,53(1 H.·
2.31 (611) s; 2.20 (IbH) s; 1,26(3H)s.

8,8a- Desoxy-8-(N-nicotinoyl)-aminomethyl-4"-acet> I-oieandomycin

Zu einer Lösung von 500 mg (0.685 mMol) 8,8a-Desoxy-8-aminomethyl-4"-acety!oleandoniycin 11 in 100 ml 25vol.-prozentigen wäßrigen Tetrahydrofurans wurde In wäßrige Natriumhydroxidlösung gegeben, um den pH auf 9 einzustellen. Zu dieser basischen Lösung wurde eine Lösung von 1,71 mMol Nicotinoylchlorid in 30 ml trockenem THF gegeben, und die Lösung wurde gerührt, bis die Umsetzung im wesentlichen beendet war, festgestellt durch den Unterschied im Rf-Wert der Flecke des Produkts und des Ausgangsmaterials bei der Dünnschichtchromatographie. Das THF wurde dann im Vakuum entfernt, und die erhaltene wäßrige Schicht wurde mit 100 ml Äthylacetat bedeckt, wobei die wäßrige Schicht bei pH 9 gehalten wurde. Nach dem Extrahieren der wäßrigen Schicht mit 2 χ 50 ml-Portionen Äthylacetat wurden die organischen Schichten vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert, um das Trocknungsmittel zu entfernen. Entfernen des Lösungsmittels aus dem Filtrat durch Vakuumverdampfung führte zu einem Rückstand, der in einer 25-g-Säule an Kieselgel/Chloroform Chromatographien wurde. Elution mit Chloroform und dann mit 2% Methanol in Chloroform und anschließendes Entfernen des Lösungsmittels aus den Produktfraktionen erlaubte die Isolierung der Titelverbindung. Sie zeigte die folgenden charakteristischen NMR-Signale:

NMR (CDCl₃) ό ppm:8,10(1 H) m; 7,26(3H) ni;

5,08 (1 H) m; 3,35 (3H) S; 2,30 (6H) s;

2,10(3H)s.

Beispiel 16

8,8a-Desoxy-8-(N-acetyl)aminomethyl-4"-acetyloleandomycin

Zu einer Lösung von 500 mg (0,685 mMol) gemäß Beispiel 11 erhaltenen 8,8a-Desoxy-8-aminomethyl-4"-acetyloleandomycins in 5 ml Methanol wurden 75 mg (0,75 mMol) Essigsäureanhydrid in 0,5 ml Methanol zugetropft. Nach 30 Minuten Rühren wurde ein Dünnschichtchromatogramm einer Probe der Ausgangs-Oleandomycinverbindung und der Reaktionslösung auf Kieselgelplatten unter Verwendung eines Lösungsmittelsystems aus Chloroform und Methanol im Verhältnis 9 :1 entwickelt, wobei sich zeigte, daß keine restliche Ausgangsverbindung vorhanden war. Dann wurden der Reaktionslösung 20 ml Wasser und 50 ml Äthylacetat zugesetzt, wobei der pH der wäßrigen Phase auf 9 eingestellt wurde. Die wäßrige Phase wurde zweimal mit je 30 ml Äthylacetat extrahiert, und die vereinigten organischen Extrakte wurden über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach Absaugen des Trocknungsmittels und Abdampfen des Lösungsmittels aus dem Filtrat im Vakuum wurde ein Rückstand erhalten, der an einer 40 x3,5-cm-Kieselgel-Säule Chromatographien wurde. Durch Elution mit einem Lösungsmittelsystem aus Chloroform und Methanol im Verhältnis 98 : 2 unter Auffangen von 10-ml-Fraktionen wurden 340 mg der Titelverbindung erhalten (in den Fraktionen 300 bis 311). Sie hatte die folgenden charakteristischen NMR-Signale:

NlVi.; , ;U .,,< > ppm: fc>, 15 (111),.,, 3,Jj(I H) m;
3,36 (1 H) s; 2,28 (6H) s; 2,10 (3H) s;
1,90 (3H) s.

Beispiel 17

8,8a-Desoxy-8-(N-formyl)arninomethyl-4"-%acetyloleandomycin

Nach der Arbeitsweise des Beispiels 16 wurde gemäß Beispiel 11 erhaltenes 8,8a-Desoxy-8-aminomethyl-4"-acetyloieandomycin anstelle mit Essigsäureanhydrid mit Acetameisensäureanhydrid zur Titelverbindung formyliert. Die Ausbeute betrug 90%. Die Verbindung hatte die folgenden charakteristischen N M R-Signale:

NMR (DCCIj)O ppm:8.08(1 H) m;6.96(1 H) s;
5,30 (1 H) m; 3,38 (3H) S; 2,30 (6H) s;
2,11(3H)s,

Beispiel 18

8,8a-Desoxy-8-(imidazol-1-yl)methyl-4"-acety ·-
oleandomycin

Zu einer Lösung von 2,5 g (2,8 mMol) gemäß Beispiel 8 erhaltenen 8,8a-Desoxy-8-tosyloxymethyl-4"-acetyloleandomycins in 25 ml Dimethylsulfoxid wurden 1,906 g (28 mMol) Imidazol zugesetzt. Die Lösung wurde auf 50°C erwärmt und 65 Stunden gerührt. Nach dem Abkühlen wurde die Reaktionsiösung in ein Zweiphasengemisch aus 50 ml Wasser und 100 ml Äthylacetat gegossen, wobei der pH mittels 1 η NaOH auf 9,5 eingestellt wurde. Die organische Sicht wurde zweimal mit jeweils 25 ml Wasser und dann mit 25 ml gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen. Die organische Schicht wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, das Trocknungsmittel abfiltriert und das Lösungsmittel unter Vakuum aus dem Filtrat entfernt. Der erhaltene Rückstand wurde an einer mit 50 g Kieselgel gefüllten Säule Chromatographien. Die Trennung erfolge an einer eOxS-cm-Kieselgel-Säule unter Eluieren mit einem Lösungsmittelsystem aus Chloroform/Methanol im Verhältnis 95 : 5 unter Auffangen von 10-ml-Fraktionen. Das Produkt war in den Fraktionen 201 — 300.

So wurde 1,0 g der Titelverbindung erhalten. Die Verbindung hatte die folgenden charakteristischen NMR-Signale:

NMR (CDCi₃) ό ppm: 7,55 (1 H) a; 7,00(2H) bs;
5,46 (1 H) m; 3,40 (3H) s; 2,33 (6H) s;
2,13 (3H) s.

Claims

Patentansprüche: 1. Oleandomycinderivate der allgemeinen Formel

CH₂Z N(CH₃),

OR₂

CH₃