DE2432644A1

DE2432644A1 - Derivate von desoxystreptamin enthaltenden aminoglykosid-antibiotikumderivaten und verfahren zu ihrer herstellung

Info

Publication number: DE2432644A1
Application number: DE2432644A
Authority: DE
Inventors: Satoshi Horii; Yukihiko Kameda; Nariakira Mizokami
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1973-07-12
Filing date: 1974-07-08
Publication date: 1975-01-30
Also published as: NL155265B; JPS5644076B2; JPS5035129A; US4065615A; FR2236873B1; AU7106274A; FR2236873A1; GB1480772A; GB1480771A; BE817546A; DE2432644C2; NL7409348A

Description

PATENTANWÄLTE

DR.-ING. VON KREISLER DR.-ING. SCHÖNWALD DR.-ING. TH. MEYER DR. FUES DlPL.-CHEM. ALEK VON KREISLER DIPL.-CHEM. CAROLA KELLER DR.-ING. KLDPSCH DIPL.-ING. SELTlNG

KÖLN 1, DEICHMANNHAUS

öln, den 26.6.1974-/

Takeda Chemical Industries, Ltd.,

27, Doshomachi 2-chome Higashi-ku, Osaka (Japan)

Derivate von Desoxystreptamin enthaltenden Aminoglykosid-Antibiotikumderivaten und Verfahren zu ihrer Herstellung

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Antibiotikumderivaten, insbesondere ein Verfahren zur Herstellung eines neuen Desoxystreptamin enthaltenden Arainoglykosid-Antibiotikumderivats, in dem alle Aminogruppen außer der Aminogruppe in 1-Stellung der Desoxystreptaminkomponente formyliert sind.

1-N-modifizierte Desoxystreptamin enthaltende Aminoglykosid-Antibiotikumderivate haben bekanntlich Aktivität selbst gegen Bakterien, die gegen die UrSprungsantibiotika, in denen die Aminogruppe in der Λ-Stellung der Desoxystreptaminkomponente nicht modifiziert ist, resistent sind.

Bisher wurden einige Verfahren zur selektiven Modifizierung der Aminogruppe in der 1-Stellung.der Desoxystreptaminkomponente eines Desoxystreptamin enthaltenden Aminoglykosid-Antibiotikums vorgeschlagen. Beispielsweise stellt man Butirosin B her, indem man zuerst Tetra-N-benzyloxycarbonyl-3',4-',2",3"-di-0-cyclohexyliden-5"-0-(1-methoxycyclohexylRibostamycin aus Ribostamycin her-

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stellt, das Produkt mit Natriumhydrid behandelt:, das hierbei gebildete 1,6-Cyclocarbaniat weiter mit Bariumhydroxyd behandelt und hierdurch die freie Aminogruppe in der 1-Stellung regeneriert, eine L-4~Phthalimido-2-hydroxybutyrylgruppe in diese Aminogruppe durch Acylierung einführt und schließlich die Schutzgruppen von den Aminogruppen entfernt (Journal of Antibiotics £5 (1972)

Bei einem anderen Verfahren stellt man 1-N-(L-4-- Amino-2-hydroxybutyryl)-kanamycin A her, indem man zuerst 6¹—N-Benzyloxycarbonyl-kanamycin A aus Kanamycin A herstellt, das Produkt mit dem N-Hydroxysuccinimidester von L-4—Benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybuttersä.ure behandelt und abschließend die Benzyloxycarbonylgruppen von den Aminogruppen entfernt (Journal of Antibiotics", 25, (1972) 695). " i

Bei dem erstgenannten Verfahren ist jedoch selektiver Schutz der Hydroxylgruppen der als Ausgangsmaterialien dienenden Aminoglykosid—Antibiotika vor der Herstellung des als Zwischenprodukt gebildeten 1,6-Cyclocarbaaiats erforderlich. Ferner ist das Verfahren nicht auf die selektive Acylierung von Antibiotika der Kanamycingruppe anwendbar, weil keine freie Hydroxylgruppe in der 6-Stellung ihrer Desoxystreptamingruppe vorhanden ist.

Bei dem letztgenannten Verfahren wird eine große Menge von Nebenprodukten einschließlich der Stellungsisomeren des gewünschten 1-N-Acylderivats durch Acylierung im Reaktionsgemisch gebildet, und es ist sehr schwierig, die Nebenprodukte in Verbindungen zu überführen, die zur Verwendung als Ausgangsmaterialien der Acylierungsreaktion zurückgeführt werden können.

Diese bekannten Verfahren sind somit nicht völlig A09885/U12

befriedigend in Bezug auf die Ausbeuten, Reaktionsführung usw. ■ ι

i Es wurde nun überraschenderweise gefunden, daß durch Behandlung der Desoxystreptamin enthaltenden Aminoglykosid-Antibiotikumderivate, in denen alle Aminogruppen formyliert sind, mit einer basischen Substanz, z.B. Ammoniak, die Formylaminogruppe in der 1-Stellung der Desoxystreptaminkomponente deformyliert und hierdurch die freie Aminogruppe mit hoher Selektivität regeneriert und eine hohe Ausbeute erzielt wird. s

Gegenstand der Erfindung ist demgemäß ein Verfahren, das die Herstellung von Desoxystreptamin enthaltenden Aminoglykosid-Antibiotikumderivaten, in denen die Aminogruppe in der 1-Stellung der Desoxystreptaminkomponente frei ist und alle anderen Aminogruppen formyliert sind, in

hoher Ausbeute ermöglicht. j

Die Erfindung umfaßt ferner die neuen Desoxystreptamin enthaltenden Aminoglykosid-Antibiotikumderivate, die sehr wertvoll und wichtig als Zwischenprodukte für die Herstellung von 1-N-modifizierten Desoxystreptamin enthaltenden Aminoglykosid-Antibiotika sind. I

Als Desoxystreptamin enthaltende Aminoglykosid-Antibiotika, die als·Ausgangsmaterialien für das Verfahren gemäß der Erfindung verwendet werden, eignen sich beispielsweise Xylostasin, Ribostamycin, Antibiotika der Neomycingruppe (z.B. Neomycin A, Neomycin B und Neomycin C), Antibiotika der Paromomycingruppe (z.B. Paromomycin I, Paromomycin II und Mannosyl-Paromomycin), Antibiotika der Kanamycingruppe (z.B. Kanamycin A, Kanamycin B und Kanamycin C) und die 3'-Desoxy- und 3',A-'-Di-desoxyderivate dieser Antibiotika, Antibiotika der Gentamicingruppe (z.B. Gentamicin C^,, Gentamicin Cy. , Gentamicin C~ und Sisomicin) und Antibiotika der

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Lividomycingruppe (z.B. Lividomycin A und Lividomycin

Gemäß der Erfindung werden alle Aminogruppen dieser Antibiotika mit Formylgruppen maskiert oder geschützt. Die Einführung von Formylgruppen als Schutzgruppen der Aminogruppen kann erfolgen, indem das Ausgangsmaterial mit einem Formylierungsmittel nach den bisher in der Chemie der Peptidsynthese für den Schutz von Aminogruppen mit Formylgruppen bekannten Verfahren umgesetzt wird. Beispielweise wird das Ausgangsmaterial mit einem Gemisch von Ameisensäure und Essigsäureanhydrid, einem aktiven Ester von Ameisensäure, z.B. p-Nitrophenylformiat, oder einem gemischten Anhydrid von Ameisensäure, z.B. Aceto- · ameisensäureanhydrid, umgesetzt.

Die Reaktion verläuft im allgemeinen befriedigend bei -10 bis 150 C, jedoch kann sie in gewissen Fällen au< bei höherer Temperatur durchgeführt werden.

Bei Verwendung eines aktiven Esters der Ameisensäure können Reaktionslösungsmittel' wie Wasser, Dimethylformamid, Dioxan, Äthylenglykoldimethyläther und Pyridin, oder Gemische von zwei oder mehreren dieser Lösungsmittel verwendet werden. ·

i Die hierbei erhaltenen Derivate der Aminoglykosid-Antibiotika, in denen alle Aminogruppen des eingesetzten Antibiotikums formyliert sind, werden dann mit einer basischen Substanz behandelt. Vorzugsweise werden ; schwach basische Substanzen, z.B. Ammoniak, basische Ionenaustauschharze, Natriumcarbonat, Kaliumcarbonat, Natriumhydrogencarbonat oder Kalxumhydrogencarbonat, verwendet. Stark basische Substanzen, z.B. Alkalihydroxyde, können ebenfalls in etwas geringerer Menge verwendet werden.

Die Reaktion wird vorteilhaft bei einer Temperatur im 409 885/UΪ2 .

Bereich von 0 bis 15O C, vorzugsweise bei einer Temperatur im Bereich von 5 bis 60 C durchgeführt.

Wasser, Als Lösungsmittel eignen sich beispielsweise/Dimethylformamid, Dioxan, Äthylenglykoldimethyläther und Pyridin sowie Gemische von zwei oder mehreren dieser Lösungsmittel. . :

In der beschriebenen 7/eise werden neue Desoxystreptamin enthaltende Aminoglykosid-Antibiotikumderivate erhalten, in denen von allen Formylgruppen der Formylverbindung nur die in die Aminogruppe in der 1-Stellung der Desoxystreptaminkomponente eingeführte Formylgruppe entfernt worden ist. Es gibt Fälle, in denen Verbindungen, in denen die in einige andere Aminogruppen als der Aminogruppe in 1-Stellung eingeführte Formylgruppen entfernt worden sind, als Nebenprodukte erhalten ; werden, aber diese Nebenprodukte können zur Verwendung als Ausgangsverbindungen zurückgeführt werden. ·

Das Verfahren gemäß der Erfindung erfordert somit nicht nur wenig Produktionsstufen, sondern ermöglicht auch die Rückführung der bei der Deformylierungsreaktion gebildeten Nebenprodukte zur Verwendung als Ausgangsmaterialien, so daß das gewünschte Produkt in guten Ausbeuten erhalten werden kann. Ferner ist die Entfernung der Schutzgruppen in einem anschließenden Arbeitsschritt leicht möglich, ohne daß eine katalytische Reduktion vorgenommen werden muß. Die gewünschten Produkte gemäß der Erfindung sind somit sehr wichtig als Zwischenprodukte für die Herstellung von Aminoglykosid-Antibiotika, in denen die Aminogruppe an der 1-Stellung beispielsweise mit einem Acylrest, z.B. einer α-hydroxy-.fi.-maskier ten Aminoalkylcarbonylgruppe, modifiziert ist. ;

Eines der Verfahren, bei denen eine a-hydroxy-XJ.-A09885/U12

maskierte Aminoalkylcarbonylgruppe der Formel

-CO-CH-( CH₂ )_n-X
OH

in der η für 1, 2 oder 5 steht und X eine geschützte Aminogruppe ist, in die Aminogruppe in der 1-Stellung der Desoxystreptaminkomponente eingeführt wird, wird nachstehend beschrieben.

Als Schutzgruppen der Aminogruppe eignen sich alle allgemein in der Chemie' der Peptidsynthese verwendeten Gruppen. Geeignet sind beispielsweise Phthaloyl-, Benzyloxycarbonyl-, tert.-Butylöxycarbonyl- und Trifluoracetylaminogruppen.

Bei einem speziellen Verfahren zur Einführung einer ochydroxy—Ω—maskierten Aminoalkylcarbonylgruppe wird das vorstehend genannte Deformylierungsprodukt mit einem reaktionsfähigen Derivat einer oc-hydroxy-jCl-maskierten Aminocarbonsäure, z.B. einem aktiven Ester dieser Säure, umgesetzt. Beliebige bekannte aktive Ester, z.B. der N-Hydroxysuccinimidester und der p-Nitrophenylester, können verwendet werden. Die Reaktion wird im allgemeinen in Gegenwart eines Lösungsmittels bei einer Temperatur im Bereich von -20° bis 60 C durchgeführt.

Als Lösungsmittel eignen sich beispielsweise Wasser, Dimethylformamid, Dioxan, Chloroform, A'thylenglykoldimethyläther, Tetrahydrofuran und Pyridin. Auf diese Weise werden Verbindungen erhalten, bei denen eine Gruppe der vorstehend genannten Formel in die Aminogruppe in 1-Stellung der Desoxystreptaminkomponente eingeführt worden ist.

Die in dieser V/eise erhaltene Verbindung wird dann einer Reaktion zur Entfernung der Schutzgruppen unterworfen, wobei die Schutzgruppe der geschützten Amino-

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gruppe X und die in die Aminogruppen außer der Aminogruppe in 1-Stellung eingeführten Formylgruppen entfernt und die freien Aminogruppen regeneriert werden. Diese Reaktion kann nach an sich bekannten Verfahren durchgeführt werden. Beispielsweise wird die Verbindung in der unmittelbar vorhergehenden Stufe mit einer basischen Substanz oder deren Salz mit einer Säure behandelt. Vorzugsweise werden hierzu Amine, z.B. Hydrazin und ; Hydroxylamin, ihre Salze, z.B. die entsprechenden Hydrochloride und Acetate, und basische Ionenaustauschharze sowie methanolische Salzsäure, verdünnte Salzsäure, Wasserstoffperoxyd usw. verwendet. Die Entfernung der Schutzgruppe von X und der Formylgruppen kann einstufig oder mehrstufig erfolgen. Die Reaktionstemperatur liegt vorzugsweise im Bereich von 10 bis 150°C. Als Lösungsmittel eignen sich beispielsweise.Wasser und Gemische von Wasser und mit Wasser mischbaren Lösungsmitteln, z.B. Dioxan-Wasser, Äthylenglykoldimethyläther-Wasser und Diinethylformamid-Wasser.

In dieser Weise wird ein Aminoglykosid-Antibiotikum erhalten, in dem eine Gruppe der Formel

-CO-CH-(CH₂)_n-NHp
OH

in der η eine ganze Zahl von 1 bis 3 ist, in die Aminogruppe in der 1-Stellung der Desoxystreptaminkomponente eingeführt worden ist. :

Von diesen auf diese Weise hergestellten 1-N-(rf-Hydroxy-•fl—aminoalkylcarbonyUaminoglykosid-Antibiotika sind 3*-Des oxybutirosin Λ und 3¹-Desoxybutirosin B neue Antibiotika und haben im wesentlichen die gleiche antibakterielle Aktivität wie ihre Ursprungsantibiotika 3'-Desoxyxylostasin bzw. 3'-Desoxyribostamycin. Sie sind außerdem wirksam gegen Bakterien, die gegen ihre Ursprungsantibiotika resistent sind. Beispielsweise sind

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3'-Desoxybutirosin A und 3'-Eesox-ybutirosin B wirksam für die Behandlung von bakteriellen Infektionen, z.B. Harnwegsinfektionen, Bronchialpneumonie, Pyelonephritis und Tonsillitis. Jede dieser Verbindungen kann allein oder in Kombination mit einem Träger in Dosierungsformen wie parenteralen Injektionslösungen in einer normalen Tagesdosis von 100 bis 1000 mg für den Erwachsenen verabreicht werden.

Beisr>iel 1

In 40 ml eines Gemisches von Dimethylformamid und Wasser (1:1) werden 2,45 g Xylostasin und 4,9 g p-Nitrophenylformiat gelöst. Die Lösung wird 20 Stunden bei etwa 20 C stehengelassen und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Nach Zugabe von Äther wird die gebildete Fällung abfiltriert. Die Fällung wird in 10 ml Wasser gelöst und die Lösung durch eine Säule geleitet, die mit dem Ionenaustauschharz "Amberlite CG-50" (H⁺-Form, 45 ml) gefüllt ist, und anschließend mit V/asser gewaschen. Der Ablauf und die Waschflüssigkeiten v/erden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur ^: Trockene eingedampft, wobei 2,85 6 Tetra-N-formylxylostasin in Form eines weißen Pulvers erhalten werden.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G; n-Propanol-Essigsäure-Wasser = 2:1:1) : Ef 0,50

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G; n-Propanol-Pyridin-Essigsäure-»Vasser = 10:10:0,5:10): Rf 0,87

28,5° (c=l in

-1

IR-Absorptionsspektrum (KBr)T*: 1660 cm (C=O)

Element aranalys e Berechnet für C₂₁H₃₄O₁₄N₄ Gefunden:

G	H	N
44,52	6,05	9,89
44,16	6,34	9,43

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In 200 ml 14-%igem wässrigem Ammoniak werden 2,0 Tetra-N-formyl-xylostasin gelöst. Die Lösung wird vier Tage bei etwa 20 C stehengelassen. Das Reaktionsgemisch wird unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird in 10 ml Wasser gelöst und an einer Säule des Ionenaustauscherharzes "Amberlite CG-50" (NH^-Form, 500 ml) unter Verwendung von Wasser als Entwickler chromatography ert. Die Fraktionen von 3,2',6'-Tri-N-formyl-xylostasin werden zusammengegossen und zur Trockene eingedampft, wobei 520 mg eines weißen Pulvers erhalten werden.

= +7,0° (c=1 in H₂O)

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-Wasser = 2:1:1): Rf 0,32

DünnschichtChromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Pyridin-Essigsäure-Wasser = 10:10:0,5:10): Rf 0,4-7

Beispiel 2

In 15 ml eines Gemisches von Dimethylformamid und Wasser (1:1) werden 877 mg 3'-Desoxyxylostasin und 2 g p-Nitröphenylformiat gelöst. Die Lösung wird 20 Stunden bei etwa 20 C gerührt und unter vermindertem Druck eingeengt. Zum Rückstand wird Äthyläther gegeben. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert, in 5 ml Wasser gelöst und über eine Säule des Ionenaustauscherharzes "Amberlite CG-5O" (H⁺-Form, 50 ml) geleitet und dann mit Wasser gewaschen. Der Ablauf und die wässrigen Waschflüssigkeiten werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 1,05 g Tetra-N-formyl-3'-desoxyxylostasin in Form eines weißen Pulvers erhalten werden.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-Wasser = 2:1:1) : Rf 0,57

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Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G₁ n-Propanol-Pyridin-Essigsäure-vVasser = 10:10:0,5:10): Rf 0,91

C	H	£
45,82	6,22	10,18
44,61	6,45	9,81

AJ^ = +28,5° (c=1 in H₂O)
IR-Absorptionsspektrum (KBr):V 1660 cm" (C=O)

Elementaranalyse
Berechnet für C₂₁H ^p₁ ^\
Gefunden:

In 100 ml 1,Obigem wässrigem Ammoniak werden 900 mg Tetra-N-formyl-3'-desoxyxylostasin gelöst. Die Lösung wird 6 Tage bei etwa 20°C stehengelassen. Das Reaktionsgemisch wird unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird in 10 ml Wasser gelöst und die Lösung an einer Säule des Ionenaustauscherharzes "Amberlite CG-50"' (NH^-Form, 200 ml) unter Verwendung von Wasser als Entwickler chromatographiert. Die Fraktionen von 5»2',6*-Tri-N-formyl-J'-desoxyxylostasin werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck eingeengt, wobei 210 mg eines weißen Pulvers erhalten werden.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-Wasser = 2:1:1): Rf 0,37

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Pyridin-Essigsäure-tfasser = 10:10:0,5:10): Rf = 0,6?

= +7,5° (c=1 in H₂O)

Beispiel $

In 10 ml eines Gemisches von Dimethylformamid und Wasser (1:1) werden 500 mg $'-Desoxyribostamycin und 1,5 g p-Nltrophenylformiat gelöst. Die Lösung wird 20 Stunden bei etwa 20⁰C stehengelassen. Das Reaktions-

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gemisch wird unter vermindertem Druck eingeengt. Nach Zusatz von Äthyläther wird die hierbei gebildete Fällung abfiltriert. Die Fällung wird in 5 ml Wasser gelöst und die Lösung über eine Säule des Ionenaustauscherharzes "Amberlite CG-50" (H⁺-Form, 50 ml) geleitet, worauf mit Wasser gewaschen wird. Der Ablauf und die wässrigen Waschflüssigkeiten werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 580 mg Tctra-N-f orrayl-3'-desoxyribostaiiiycin in Form eines weißen Pulvers erhalten v/erden.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-Wasser = 2:1:1): RfO,51

ßjf = +59,4° (c = 1 in H₂O)

Elementaranalyse Berechnet, für C₃₁H₅₄O₁ N^ Gefunden:

	C	H	22	N	18
45	,82	6,	51	10,	98
44	,90	6,	9,

In 50 ml 1,0?oigem wässrigem Ammoniak werden 500 mg Tetra-N-fonayl-J'-desoxyribostamycin gelöst. Die Lösung wird 6 Tage bei etwa 20⁰C stehengelassen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird in 5 ml Wasser gelöst und an einer Säule des Ionenaustauscherharzes "Amberlite CG-50" (NH^-Form, 100 ml) unter Verwendung von Wasser als Entwickler chromatographiert. Die Fraktionen von 3,2',6'-Tri-N-formyl-3¹-desoxyribostamycin werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 114 mg eines weißen Pulvers erhalten werden.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-Wasser = 2:1:1): Rf 0,36

= +11,0° (c-1 in H₂O)

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Beispiel 4

In 50 ml eines Gemisches von Dimethylformamid und Wasser (1:1) werden 2,0 g Kanamycin A und 4 g p-Nitrophenylformiat gelöst. Me Lösung wird 16 Stunden bei etwa 20°C stehengelassen und unter vermindertem Druck eingeengt. Zum Rückstand wird Äther gegeben. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert, in 10 ml Wasser gelöst und über eine Säule des Ionenaustauscherharzes "Amberlite CG-50" (H⁺-Form, 50 ml) geleitet. Der Ablauf und die wässrigen Waschflüssigkeiten werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 2,3 g Tetra-N-f orraylkanamy ein A in Form eines weißen Pulvers erhalten werden.

DünnschichtChromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-Wasser = 2:1:1): Rf 0,41

C	H	N
44,29	6,08	9,39
43,86	6,22	9,10

ψ = +93,5° (c=1 in H

Elementaranalyse:
Berechnet für C₂₂H₅₆O₁₅N
Gefunden:

In 5OO ml Wasser werden 5 S Tetra-N-formyl-kanamycin A gelöst. Der Lösung werden 10 ml des Harzes "Amberlite IRA-410" (OH~-Form) zugesetzt. Das Gemisch wird 8 Stunden der Reaktion bei 20 C unter Rühren überlassen und zur Entfernung des Harzes filtriert. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft und der Rückstand in 50 ml Wasser gelöst und an einer Säule des Harzes "Amberlite CG-50" (NH^-Form, 500 ml) unter Verwendung von Wasser als Entwiekler chromatographiert. Die Fraktionen von 3,6',3"-Tri-N-formyl-kanamycin A werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 1,1 g eines weißen Pulvers erhalten werden.

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Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G; n-Propanol-Essigsäure-Wasser = 2:1:1): Rf 0,29

DU^ = +119,1° (c=1 in H₂O)

Beispiel 5

In 150 ml eines Gemisches von Dimethylformamid und Wasssr (1:1) werden 6,0 g Ribostamycin und 12,0 g p-Nitrophenylformiat gelost. Die Losung wird 20 Stunden bei etwa 20 C stehengelassen und unter vermindertem Druck eingeengt. Nach Zugabe von Äther zum Rückstand wird die hierbei gebildete Fällung abfiltriert, in 30 ml Wasser gelöst und über eine Säule des Harzes "Amberlite CG-50" (H⁺-Form, 160 ml) geleitet und anschließend mit Wasser gewaschen. Der Ablauf und die wässrige Waschflüssigkeit werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 7,0 g Tetra-N-formyl-ribostamycin in Form eines weißen Pulvers erhalten werden. !

Dünnschichtchrornatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-Wasser = 2:1:1): Rf 0,54-

ß⁴ = +39,7° (c=1 in H₂O)
IR-Absοrptions Spektrum (KBr):"^ 1660 cm" (C=O)

El em ent ar analyse (J H -E

Berechnet für C₂I^A⁰IV ⁴⁴'5^{2 6}>°5 9,89 Gefunden: . 4-3,84- 6,31 9,53

In 5OO ml 1%igem wässrigem Ammoniak werden 5,0 g Tetra-N-formyl-ribostamycin gelöst. Die Lösung wird 6 Tage bei etwa 20 C stehengelassen und dann unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird in 25 ml Wasser gelöst und an einer Säule des Harzes "Amberlite CG-50" (NH⁺-Form, 250 ml) unter Verwendung

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von Wasser als Entwickler chroniatographiert. Die Fraktionen von 3,2' ,ö'-Tri-N-formyl-ribostamycin werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 1,25 g eines weißen Pulvers erhalten werden.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-Wasser =2:1:1): Rf 0,59

£kj^ = +18,8° (c=1 in H₂O)

Beispiel 6

In 125 ml eines Gemisches von Dimethylformamid und Wasser (1:1) werden 5»0 g Kanamycin B und 10,0 g p-Nitrophenylformiat gelöst. Die Lösung wird 16 Stunden bei etwa 20°C gerührt und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Nach Zusatz von Äther zum Rückstand wird die hierbei gebildete Fällung abfiltriert, in 25 ml Wasser gelöst, über eine Säule des Harzes "Amberlite CG-50" (H⁺-FoMi, 150 ml) geleitet und anschließend mit Wasser gewaschen. Der Ablauf und die Waschflüssigkeit werden zusammengegossen und zur Trockene eingedampft, wobei 5»9 S Penta-N-formyl-kanamycin B in Form eines weißen Pulvers erhalten werden.

DünnschichtChromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-Wasser = 2:1:1): Rf 0,47

/Ä7^ = +119° (c=1 in H₂O)

Elementaranalyse: £ H H

Berechnet für C₂₅H₃₇N₅O₁₅: 44-,3O 5,98 11,23 Gefunden: 43,11 6,26 10,73

In 250 ml 1%igem wässrigem Ammoniak v/erden 2,5 S Penta-N-formyl-kanamycin B gelöst. Die Lösung wird 7 Tage bei etwa 20°C stehengelassen. Das erhaltene Gemisch wird

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unter vermindertem Druck zur Trockene eingedamipft. Der Rückstand wird in 25 nil Vvasser gelöst und an einer Säule des Harzes "Amberlite CG-50" (NH^-Form, 250 ml) unter Verwendung von Wasser als Entwickler chromatographiert. Die Fraktionen von 3,2',6',3"-Tetra-N-formylkanamycin B werden zusammengegossen und zur Trockene eingedampft, wobei 530 mg eines weißen Pulvers erhalten werden.

/Ö/Jp = +100,5° (c=1 in H₂O) ,

Beispiel 7

In 20 ml eines Gemisches von Dimethylformamid und Wasser (1:1) werden 0,630 g 3¹ -Desoxykanamycin B und 2,4 g p-Nitrophenylformiat gelöst. Die Lösung wird 16 Stunden bei etwa 20°C stehengelassen. Das erhaltene Gemisch wird unter vermindertem Druck eingeengt. Nach Zugabe von Äther zum Rückstand wird die hierbei gebildete Fällung abfiltriert, in 5 ml Wasser gelöst, über eine Säule des Harzes "Amberlite CG-50" (H⁺-Form, 50 ml) geleitet und anschließend mit V/asser gewaschen. Der Ablauf und die Waschflüssigkeit werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 0,94 g Penta-N-formyl-3'-desoxykanamycin B in Form eines weißen Pulvers erhalten werden.

Dünnschichtchroraatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-Y/asser = 2:1:1): Rf 0,44

jp = +113,3° (c=1 in H₂O)

Elementaranalyse: G_ H N

Berechnet für C_2xH₇₇N₅O₁₄: 45,4? 6,14 11,53 Gefunden: " 44,21 6,38 11,19

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In 100 ml 1%igem wässrigem Ammoniak werden 0,8 g Penta-N-formyl-3^l-desoxykanamycin B gplöst. Die Lösung v/ird 7 Tage bei etwa 20 C stehengelassen. Das erhaltene Gemisch wird unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wird in 10 ml Wasser gelöst und an einer Säule des Harzes "Amberlite CG-50" (NH^-Form, 100 ml) unter Verwendung von V/asser als Entwickler chromatographiert. Die Fraktionen von 3,2',6*,5"-Tetra-N-formyl-3'-desoxykanamycin B werden zusammengegossen und zur Trockene eingedampft, wobei 168 mg eines weißen Pulvers erhalten werden.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, n-Propanol-Essigsäure-tfasser =2:1:1): Hf 0,32

/Ö7Jjp = + 116,7° (c=1 in H₂O)

Beispiel 8

In 75 ml N,N-Dimethylformamid werden 15iO g Xylostasin suspendiert. Der Suspension werden 30 ml Acetoameisensäureanhydrid zugetropft, während mit Eis gekühlt und gerührt wird. Das Gemisch wird 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und eingeengt. Durch Zugabe von Äthylacetat zum Rückstand v/erden 21,8 g Per-F,0-formylxylostasin als Fällung abgeschieden.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G; n-Propanol-Pyridin-Essigsäure-'vVasser = 10:10:0,5:10): Ef 0,91

IR-Absorptions Spektrum (KBr)V max cm" : 1660 (-CO-NH-),

1730 (-CO-O-)

/cc/^² = 29,0° (c=1, in H₅O)

In 100 ml 1%igem wässrigem Ammoniak v/erden 2-,0 g Per-W,0-formylxylostasin gelöst. Die Lösung wird 2,5 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen und dann mit Essigsäure auf pH 6,0 eingestellt. Die Lösung wird durch eine

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mit 100 ml Aktivkohle gefüllte Säule geleitet und anschließend mit Wasser und 10%igem wässrigem Methanol gewaschen. Die Säule Wird mit 50%igem wässrigem Methanol eluiert und der Ablauf unter vermindertem Druck eingeengt. Durch Gefriertrocknen des Rückstandes werden 1,7 g N-Tetraformyl-xylostasin (Rf 0,87)^x erhalten. Diese Verbindung kann auf die in Beispiel 1 beschriebene V/eise in 3i2*,6*-Tri-N-formylxylostasin umgewandelt werden.

3,2',6'-Tri-N-formylxylostasin kann auch unmittelbar aus Per-N,0-formylxylostasin wie folgt hergestellt werden:

In 1,3 1 10^igem wässrigem Ammoniak werden 13»O g Per-Ν,Ο-formylxylostasin gelöst. Die Lösung wird 5 Tage bei etwa 20 G stehengelassen. Das Gemisch wird unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft.' Der Rückstand wird in 10 ml Wasser gelöst und die Lösung an einer Säule, die mit dem Harz "Amberlite CG-50" (NH*-Form, 2 1) gefüllt ist, unter Verwendung von Wasser als Entwickler chromatographiert, wobei Tetra-N-formylxylostasin (Rf 0,87)^Xv 0,15 g 1,2',6'-Tri-N-formyl- ; xylostasin (Rf 0,58)*, 2,5 g 3,2',6»-Tri-N-formylxylostasin (Rf 0,47)* und 0,68 g 1,3,6'-Tri-N-formylxylostasin (Rf 0,71)^K in dieser Reihenfolge eluiert werden. Die Chromatographie wird unter Verwendung von 2%igem wässrigem Ammoniak anstelle von Wasser fortgesetzt, wobei 1,3,2'-Triformylxylostasin (Rf 0,52)^x, Di-N-formylxylostasin, Mono-N-formyl-xylostasin usw. eluiert werden.

Die Fraktionen des Tetra-N-formyl-xylostasins enthalten Ammoniumformiat. Zur Entfernung des Ammoniumformiats werden die Fraktionen mit Essigsäure auf pH 6,S eingestellt, an einer mit Aktivkohle gefüllten Säule adsorbiert, mit Wasser und 10%igem Methanol gewaschen und dann mit 50%igem wässrigem Methanol eluiert, Der Ablauf wird unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft und gefriergetrocknet, v/ob ei 2,3 g Tetra-N~f ormyl-

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xylostasin erhalten werden.

Die Fraktionen, die die deformylierten Verbindungen außer dem gewünschten 3,2',6^f-Tri-N-formyl-xylostasin enthalten, werden zusammengegeben und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. 3»6 g des Rückstandes werden in N,N-Dimethylformamid suspendiert. Der Suspension werden 1,2 ml Acetoaineisensäureanhydrid zugetropft, während gekühlt und gerührt wird. Das Gemisch wird 6 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und unter vermindertem Druck eingeengt. Zum Rückstand wird Äthylacetat gegeben, wobei 4,1 g Per-N,0-forinyl-xylostasin erhalten werden.

Das erhaltene Per-N,O-formyl-xylostasin und Tetra-N-formyl-xylostasin können als Ausgangsmaterial für die Herstellung von 3i2',6*-Tri-N-formyl-xylostasin verwendet werden.

Bei der DUnnschichtchromatographie an Kieselgel G unter Verwendung von n-Propanol-Pyridin-Essigsäure-Wasser = 10:10:0,5:10 ermittelter Rf-Wert.

Beispiel 9 ^;

In 2,6 1 10%igem v/ässrigem Ammoniak werden 26,0 g Tetra-N~formyl-3'-cLesoxyxylostasin gelöst. Die Lösung wird 5 Tage bei Raumtemperatur stehengelassen und dann unter vermindertem Druck zur Trockene eingeengt. Der Rückstand wird in 20 ml Wasser gelöst und an einer Säule des Harzes "Amberlite GG-50" (NH^-Form, 4- 1) unter Verwendung von Wasser als Entwickler chromatographiert, wobei nicht umgesetztes Tetra-N-formyl-J'-desoxy-xylostasin, eines der Stellungsisomeren des gewünschten 3,2',6'-Tri-N-forrayl-3'-desoxyxylostasin, 5,9 g 3,2',6'-Tri-N-formyl-3'-desoxyxylostasin und ein weiteres Stellungsisomeres des 3,2' ,6'-Tri-Ii-formylderivats in dieser

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Reihenfolge eluiert werden.

Die Chromatographie wird unter "Verwendung von 2%igem wässrigem Ammoniak anstelle von 7/asser forgesetzt, wobei weitere Tri-N-formylderivate, Di-N-formylderivate und Mono-N-formylderivate eluiert werden.

Die Fraktionen des Tetra-N-formyl-3'-desoxyxylostasins v/erden in der in Beispiel 8 beschriebenen V/eise gereinigt, wobei 4,8 g des gewünschten Produkts erhalten werden.

Die Fraktionen der deformylierten Verbindung außer dem gewünschten 3,2',6'-Tri-N-formyl-3¹-desoxycylostasin werden zusammengegeben und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. 11,5 S des hierbei erhaltenen Rückstandes werden in 60 ml Ν,Ν-Dimethylformamid suspendiert, worauf 4,0 ml Acetoameisensäureanhydrid zugetropft werden, während mit Eis gekühlt und gerührt wird. Das Gemisch wird 6 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und unter vermindertem Druck eingeengt. Zum Rückstand wird Äthylacetat gegeben, wobei 12,7 6 Per-N,0-formyl-3'-desoxyxylostasin erhalten werden.

Das in dieser Weise erhaltene Per-N,0-formyl-3'-desoxyxylostasin und Tetra-N-formyl-3'-desoxyxylostasin können als Ausgangsmaterial für die Herstellung von 3,2',6'-Tri-N-f ormyl-3 '-desoxyxylostasin verwendet v/erden.

Vergleichsbeispiel 1

In 20 ml Dimethylformamid werden 800 mg 3,2',6'-Tri-N-formyl-xylostasin und 800 mg N-Hydroxysuccinimidester von L-JPhthalimido-2-hydroxybuttersäure gelöst. Die Lösung wird über Nacht bei etwa 20⁰C stehengelassen und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Nach Zugabe von Äthylacetat wird die hierbei gebildete Fällung abfil-

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triert. Me Fällung wird in 50 ml 80%igem Äthanol, das 2 % Hydrazinhydrat enthält, gelöst. Die Lösung wird über Wacht bei etwa 20⁰C stehengelassen. Das Reaktionsgemisch wird zur Entfernung der Fällung filtriert und das Filtrat zur Entfernung des Äthanols unter vermindertem Druck eingedampft. Dem erhaltenen Rückstand werden 50 ml einer 5%igen wässrigen Lösung von Hydrazinhydrat zugesetzt. Das Gemisch wird mit Essigsäure auf pH 6,0 eingestellt und 5 Stunden am Rückflußkühler erhitzt. Die Zugabe von Wasser zum Reaktionsgemisch und das Einengen unter vermindertem Druck werden wiederholt. Der Rückstand wird in 100 ral Wasser gelost. Die Lösung wird auf eine Säule des Harzes "CM-Sephadex" (NH*-Forni, 130 ml) aufgegeben. Nach einer Wäsche mit Wasser wird die Elution mit 0,4-%igem wässrigem Ammoniak vorgenommen. Die Fraktionen von Butirosin A werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 560 mg eines weißen Pulvers erhalten werden. '

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, obere Schicht des Chloroform-Methanol-Gemisches-17/&Lges y/ässriges

Ammoniak : 2:1:1): Rf 0,28
» +23,7ⁿ(c=1 in H₂O)

Infrarotspektrum (KBr): 33?O, 2938, 1650, 1580, 154-5»

1100, 1026 cm"¹

Ejlementaranal.yse: CJ H N

Berechnet für ^C21^H41°12^N5^{: 4}^⁴⁰ ^*⁴⁴ Gefunden: 44,64 7,4-5 12,31

Vergleichsbeispiel 2

In 20 ml Dimethylformamid werden 300 mg 3,2* ,6'-TrI-IT-formyl-5'-desoxyxylostasiH und 350 mg li-Hydroxysuccinimidester von L-4—Phthalimido-2-hydroxybuttersäure gelöst. Die Lösung wird über Nacht bei etwa 20 C stehen·

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gelassen und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wird mit Äthylacetat .versetzt und die hierbei gebildete Fällung abfiltriert und in 30 ^ml 10%igem wässrigem Hydrazinhydrat gelöst. Die Lösung wird mit Essigsäure auf pH 6,0 eingestellt und dann 16 Stunden am Rückflußkühler erhitzt. Die gebildete Fällung wird abfiltriert. Das Filtrat wird mit Wasser auf 200 ml verdünnt und über eine Säule des Harzes "Amberlite CG-50" (NH^-Form, SO ml) geleitet. Die Säule wird mit 50 ml Wasser gewaschen, woraxif mit 0, Seigern wässrigem Ammoniak eluiert wird. Die Fraktionen von 3'-Desoxybutirosin A werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck eingedampft, wobei 254- mg eines weißen Pulvers erhalten v/erden.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, obere Schicht des Cnloroform-Methanol-Gemisches-17%iges Ammoniak = 2:1 :1): Rf 0,30

^ = +24,3° (c=1 in H₂O)

Infrarotsprektrum (KBr): 33?O, 2935, 1650, 1580, 134-5, 1100, .1026 cm"¹

Elementaranalyse: G_ H N

Berechnet für C₂₁H₄₁O₁₁N₅: 4-6,74- 7,66 12,98 Gefunden: 4-5,59 7,71 12,67

Vergleichsbeispiel 5

In 5 ml Dimethylformamid werden 100 mg 3,2',6'-Tri-N-formyl-3¹-desoxyribostamycin und I30 mg N-Hydroxysuccinimidester von L-4--Phthalimido-2-hydroxybuttersäure gelöst. Die Lösung wird über Nacht bei etwa 20⁰C stehengelassen. Das Reaktionsgemisch wird unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, worauf Äthyläther zugesetzt wird. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert und in I5 ml 10?oigem wässrigem Hydrazinhydrat

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gelöst. Die Lösung wird mit Essigsäure auf pH 6,0 eingestellt und dann 16 Stunden am Rückflußkühler erhitzt. Die gebildete Fällung wird abfiltriert. Das Piltrat wird mit 7/asser auf 100 ml verdünnt und auf eine Säule des Harzes "Amberlite CG-50" (NHj-Porm, 50 ml) aufgegeben. Die Säule wird mit 250 ml Wasser und dann mit 50 ml 0,4#igem wässrigem Ammoniak gewaschen. Die Elution wird mit 0,8%igem wässrigem Ammoniak durchgeführt. Die Fraktionen von J'-Desoxybutirosin B werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 82 mg eines weißen Pulvers erhalten werden.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G: obere Schicht des Chloroform-Methanol-Gemisches-^i^iges wässriges Ammoniak = 2:1:1): RfO,29

/ή/ψ = +31,8° (c=1 in H₂O)

Infrarotspektrum (EBr): 3370, 2935, 1650, 1580, 134-5, 1100, 1026 cm"¹

Elementaranalys e	: C	H	N	98
Berechnet für C_p	₁H₄₁0₁₁N₅: 46,74-	7,66	12,	23
Gefunden:	45,61	8,02	12,
	Vergleichsbeisniel	4

In 10 ml Dimethylformamid werden 300 mg 3,6',3"-Tri-N-formyl-kanamycin A und 3OO rag N-Hydroxysuccinimidester von L-4-Phthalimido-2-hydroxybuttersäure gelöst. Die Lösung wird über Nacht bei etwa 20°C stehengelassen und unter vermindertem Druck eingeengt. Zum Rückstand wird Äthylacetat gegeben. Die gebildete Fällung wird in 30 ml einer 10%igen wässrigen Lösung von Hydrazinhydrat gelöst. Die Lösung wird mit Essigsäure auf pH 6,0 einge stellt und 6 Stunden am Bückflußkühler erhitzt. Die gebildete Fällung wird abfiltriert und das Filtrat mit

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Wasser auf JOO ml verdünnt und auf eine Säule des Harzes "AraberIite CG-50" (NH^-Form, 50 ml) aufgegeben. Die Säule wird mit 250 ml V/asser und dann mit 500 ml 0,4%igem wässrigem Ammoniak gewaschen und mit 0,8%igem wässrigem Ammoniak eluiert. Die Fraktionen von 1-N-(L-4--Amino-2-hydroxybutyryl)-kanamycin A werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft, wobei 244 mg eines weißen Pulvers erhalten werden. ;

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G; ober Schicht aus Chloroform-Iviethanol-Gemisch-^TOiges wässriges Ammoniak - 2:1:1): Ef 0,24

/"s/jf = +87,7° (c = 1 in H₂O) ■

Infrarotspektrum (KBr): 3400, 2935, 1650, 1570, 134-5* 1090, 1o25 cm"*¹

!Elementaranalyse: (3 H_ N_ ■

Berechnet für C₂₂E₄₅N₅O₁₅.2H₂Q: 42,51 7,62 11,27 ; Gefunden: 4-2,6^ 7,81 11,35 :

Vergleichsbeispiel 5

In 15 ml Dimethylformamid werden 50 mg 3*2*,6'-Tri-N-formylribostamycin und 500 mg N-Hydroxysuccinimidester von L-4-Phthalimid-2-hydroxybuttersäure gelöst. Die Lösung wird über Nacht bei etwa 20 C stehengelassen und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Dem Rückstand wird Sthylacetat zugesetzt. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert und dann in 50 ml einer 1Q#igen v/ässrigen Lösung von Hydrazinhydrat gelöst. Die Lösung wird mit Essigsäure auf pH 6,0 eingestellt und 6 Stunden am Rückflußkühler erhitzt. Die gebildete Fällung wird abfiltriert. Das FiItrat wird mit 500 ml Wasser verdünnt und: auf eine Säule des Harz-es^!fAmberlite CG-50" (NH₄-Form, 100 ml) aufgegeben. Die Säule wird mit 5OO ml

Wasser und 500 ml 4%igem wässrigem Ammoniak gewaschen und dann mit 0,8%igem wässrigem Ammoniak eluiert. Die das Butirosin B enthaltenden Fraktionen werden zusammengegossen und unter vermindertem Druck eingeengt, wobei 402 mg eines weißen Pulvers erhalten werden.

Dünnschichtchromatographie: (Kieselgel G; obere Schicht aus Chloroform-Methanol-Gemisch-17%iges wässriges Ammoniak = 2:1:1): Hf 0,31

Die gleichzeitig auf der gleichen Platte durchgeführte Chromatographie von Butirosin A, 3'-Desoxybutirosin A und 3'-Desoxybutirosin B ergibt Ef-Werte von 0,32, 0,31

bzw. 0,3,1.
gel

(Kiesel G, Chloroform-Methanol-28^iges wässriges Ammoniakwasser = 1:4:2:1): Hf-0,17

Ο^υ (c=1 in H₂O)
Infrarot Spektrum (KBr): V 1650 cm"*¹ (C=O)

Elementaranalyse: C^ H N

Berechnet für C₂₁H₄₁N₅O₁₂^H₂O: 42,63 7,67 11,84 Gefunden: 42,83 7,51 11,44

Vergleichsbeispiel 6

Auf die in Vergleichsbeispiel 5 beschriebene Weise werden 383 mg 1-N-(L-4-Amino-2-hydroxybutyryl)-kanamycin B in Form eines weißen Pulvers aus 500 mg 3,2^f,6',3"-Tetra-N-formyl-kanamycin B und 600 mg N-Hydroxysuccinimidester von L-4-Pththalimid-2-hydroxybuttersäure erhalten.

Dünnschichtchromatographie (Kieselgel G, obere Schicht von Chloroform-Methano.l-Gemisch-17?oiges wässriges Ammoniak = 2:1:1): Rf 0,29; (Kieselgel G, Chloroform-Methajiol-28%iges wässriges Ammoniak-Wasser = 7:4:2:1):

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Rf 0,15

ψ °

ψ = +84,1° (c=1 in H₂O)

Infrarotspektrum (KBr): 1650 cm (C=O)

Elementaranalyse: .9. H

Berechnet für C₂₂H₄₄N₆O₁₂.^2H ₂ ^C°3^: ^⁰»^{68 6}>⁸3

Gefunden: . 40,14 6,77 11,61

Vergleichsbeispiel 7

Auf die in Vergleichsbeispiel 5 beschriebene V/eise ■ werden 60 mg 1-N-(L-4-Amino-2-hydroxybut3Tyl)-3'-desoxykanamycin B in Form eines weißen Pulvers aus 85 mg j 3,2',6',3"-Tetra-N-formyl-3^l-desoxykanamycin B und 100 mg. N-Hydroxysuccinimidester von L—4-Phthalimido-2-hydroxy-

buttersäure erhalten. i

DünnschichtChromatographie (Kieselgel G; obere Schicht
aus Chloroform-Methanol-Gemisch-17%iges wässriges ; Ammoniak = 2:1:1): Rf 0,30; (Kieselgel G, Chloroform-Methanol-28%iges wässriges Ammoniak-Wasser = 1:4:2:1): j Rf 0,15 I

α7ψ = +75,4° (c=1 in H₂O)

1 '

Infrarotspektrum (KBr): 1650 cm (C=O) j

Elementaranalyse: C_ H_ N |

Berechnet für C₂₂H₄₄N₆O₁₁^H₂CO₅: 41,62 6,98 12,13

Gefunden: 41,11 6,92 11,78

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Claims

Patentansprüche

1. Verfahren zur Herstellung von Desoxystreptamin enthaltenden Aminoglykosid-Antibiotikumderivaten, in denen die Aminogruppen, außer der Aminogruppe in der 1-Stellung der Desoxystreptaminkomponente,, formyliert sind, dadurch gekennzeichnet, daß man ein Desoxystreptamin enthaltendes Aminoglykosid-Antibiotikumderivat, in dem alle Aminogruppen formyliert sind, mit einer basischen Substanz behandelt.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß als basische Substanz Ammoniak verwendet wird;

j5. Verfahren nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß man ein Desoxystreptamin enthaltendes Aminoglykosid-Antibiotikumderivat, in dem alle Aminogruppen-formyliert sind, verwendet, das durch Umsetzen eines Aminoglykosid-Antibiotikums, das die Desoxystreptaminkomponente in seinem Molekül enthält, mit einem Formylierungsmittel hergestellt worden ist.

4. Verfahren nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, ' daß p-Nitrophenylformiat als Formylierungsmittel verwendet wird.

5. Derivate von Desoxystreptamin enthaltenden Aminoglykosid-Antibiotikumderivaten, in denen die Aminogruppen,außer der Aminogruppe in der 1-Steilung der Desoxystreptaminkomponente. im Aminoglykosid-Antibiotikum formyliert sind.

6. ;5,2',6' -Tri-N-formyl-xylostasin

7. ^^',ä'-Tri-N-formyl-jj'-desoxyxylostasin

8. 3j2^!,6'-Tri-N-formyl-3¹-desoxyribostamycin

9. 3,6^!,^"-Tri-N-formyl-kanamycin A
10. 3,2^f,6^f-Tri-N-formyl-ribostamycin

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11. 3*2',6',3"-Tetra-N formyl-kanamycin B

12. 3,2*,6',^"-Tetra-N-formyl-^'-desoxykanamycin B 13· 3*-Desoxybutirosin A

14. J'-Desoxybutirosin B

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