DE2338254C3 - Verfahren zur Messung des Plasminogengehaltes - Google Patents
Verfahren zur Messung des PlasminogengehaltesInfo
- Publication number
- DE2338254C3 DE2338254C3 DE19732338254 DE2338254A DE2338254C3 DE 2338254 C3 DE2338254 C3 DE 2338254C3 DE 19732338254 DE19732338254 DE 19732338254 DE 2338254 A DE2338254 A DE 2338254A DE 2338254 C3 DE2338254 C3 DE 2338254C3
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- fibrin
- plasminogen
- formation
- content
- measuring
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 title claims description 19
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 title claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 6
- 229950003499 FIBRIN Drugs 0.000 claims description 21
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 claims description 21
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 claims description 21
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 16
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 claims description 16
- 108010088842 Fibrinolysin Proteins 0.000 claims description 13
- 229940012957 Plasmin Drugs 0.000 claims description 13
- 230000000896 plasminic Effects 0.000 claims description 13
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 claims description 11
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 claims description 10
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 claims description 10
- NKCXQMYPWXSLIZ-PSRDDEIFSA-N (2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-5-amino-2-[[2-[[(2S)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]propanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-m Chemical compound O=C([C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NKCXQMYPWXSLIZ-PSRDDEIFSA-N 0.000 claims description 8
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 claims description 8
- 229940012952 Fibrinogen Drugs 0.000 claims description 8
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 claims description 8
- 229940019698 Fibrinogen containing hemostatics Drugs 0.000 claims description 8
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims description 8
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 claims description 8
- 230000003111 delayed Effects 0.000 claims description 3
- XRZWVSXEDRYQGC-UHFFFAOYSA-N 4-cyclohexylpyrrolidin-1-ium-2-carboxylate Chemical compound C1NC(C(=O)O)CC1C1CCCCC1 XRZWVSXEDRYQGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960005202 Streptokinase Drugs 0.000 claims description 2
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 claims description 2
- MKXZASYAUGDDCJ-SZMVWBNQSA-N Dextromethorphan Chemical compound C1CCC[C@H]2[C@@]3([H])N(C)CC[C@]21C1=CC(OC)=CC=C1C3 MKXZASYAUGDDCJ-SZMVWBNQSA-N 0.000 claims 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 claims 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims 1
- 230000002934 lysing Effects 0.000 claims 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 8
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 7
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 4
- 229960005356 Urokinase Drugs 0.000 description 4
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 4
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 3
- 230000003480 fibrinolytic Effects 0.000 description 3
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N Isoamyl alcohol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 238000004164 analytical calibration Methods 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 2qpq Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010009802 Coagulopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010018987 Haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 208000010125 Myocardial Infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007374 clinical diagnostic method Methods 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N precursor Substances N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Description
3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch ge- 48 Stunden dauern. Bd nahezu allen Verfahren wird
kennzeichnet, daß die Bildung des Fibrins durch zur Plasminogenbestimmung die Auflösung des Fidie
Bestimmung des Zeitpunktes seiner Verfesti- bringerinnsels gemessen, was aber einer Messung nur
gung gemessen und die Verminderung des Pias- 20 schwer zugänglich ist. U. a. beruht daher die Länge
minogengehaltes durch Vergleich des normalen der vorbekannten Verfahren auf der Schwierigkeit,
Verfestigungszeitpunktes mit dem Verfestigungs- die Antiplasmine vom Plasminogen zu trennen, was
Zeitpunkt bei beschleunigter Gerinnung gemessen bisher nut unvollständig gelungen ist.
wird. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein
4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch ge- 25 Verfahren zur Messung des Plasminogengehaltes zu
kennzeichnet, daß der Gerinnungsverlauf be- schaffen, das erheblich schneller zu den gewünschten
stimmt wird. Meßergebrissen führt und sich daher für die routine-
5. Verfahren nach den Ansprüchen 1 bis 4, mäßige Plaminogenbestimmung eignet.
dadurch gekennzeichnet, daß Plasminogen vor Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß dadurch ge-
der Fibrinbildung mittels eines Aktivators in 30 löst, daß der Plasminogengehalt durch Bestimmung
Plasmin umgewandelt wird. der Bildung von Fibrin in einer Probe gemessen
6. Verfahren nach Anspruch 1 und wenig- wird.
stens einem der vorausgehenden Ansprüche, da- Insbesondere wird erfindungsgemäß die Bildung
durch gekennzeichnet, daß die Antiplasmine des Fibrins in einer Lösung von Fibrinogen und anti-
durch Iso-amyl-alkohol zur Herstellung des Test- 35 plasminfreiem, plasminaktiviertem Probenplasma
plasmas ausgewaschen werden. unter Beifügung von Thrombin verzögert und der
7. Verfahren nach Anspruch 1 und einem oder Plasminogengehalt durch die Bestimmung der Vermehreren
der vorausgehenden Ansprüche, da- zögerung des Gerinnungszeitpunktes festgelegt.
durch gekennzeichnet, daß die Gefinnungsge- Bei der Erfindung aktiviert man antiplasminfreies schwindigkeit von Plasmaproben Gesunder als 40 Plasminogen, z.B. von einem Patienten vor Ein-Vergleichsgröße verwendet wird. setzen einer konstant gewählten Fibrinbildung zu
durch gekennzeichnet, daß die Gefinnungsge- Bei der Erfindung aktiviert man antiplasminfreies schwindigkeit von Plasmaproben Gesunder als 40 Plasminogen, z.B. von einem Patienten vor Ein-Vergleichsgröße verwendet wird. setzen einer konstant gewählten Fibrinbildung zu
Plasmin, so daß die plasminbedingte Fibrinspaltung mit der Fibrinbildung einsetzt. Die Gerinnung bei
der Fibrinbildung wird durch die Piasminwirkung
45 verzögert, und die Verzögerung der Gerinnung liefert
das Maß für das Plasminogen.
Insbesondere wird erfindungsgemäß die Bildung des Fibrins durch die Bestimmung des Zeitpunktes
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Messung seiner Verfestigung gemessen und die Verminderung
des Plasminogengehaltes. 50 des Plasminogengehaltes durch Vergleich des nor-
Die Erfindung bezieht sich insbesondere auf die malen Verfestigungszeitpunktes mit dem Verfesti-
Bestimmung von Plasminogen im Patientenblut. Sie gungszeitpunkt bei beschleunigter Gerinnung gemes-
ist erforderlich, um eine fibrinolytische oder anti- sen.
fibrinolytische Therapie bei thromboembolisch Er- Statt die Zeitpunkte zu bestimmen, kann man
krankten oder bei Patienten mit globaler Gerinnungs- 55 auch den Gerinnungsverlauf festlegen,
störung dosieren und ihren Verlauf kontrollieren zu Die Fibrinbildung kann konstant vorgegeben wer-
störung dosieren und ihren Verlauf kontrollieren zu Die Fibrinbildung kann konstant vorgegeben wer-
können. den, indem eine konstante Menge Fibrinogen durch
Bekanntlich wird bei der Blutgerinnung durch eine konstante Dosis Thrombin zum Gerinnen ge-Thrombin
das lösliche Fibrinogen in das unlösliche bracht wird. Die Messung der Fibrinverfestigung
Fibrin umgewandelt. Plasmin, welches im Blut als 60 stellt kein Problem dar, weil hierfür Mechaniken in
Plasminogen (Vorstufe) vorliegt und durch Anti- Form der sogenannten Koagulometer (z.B. nach
plasmine blockiert ist, spaltet das Fibringerinnsel wie- Schnittger-Gross) zur Verfügung stehen,
derauf. Durch Waschen von Citratplasma mit 3 Teilen
derauf. Durch Waschen von Citratplasma mit 3 Teilen
In den letzten Jahren ist es auf dieser Grundlage Isö-amyl-alkohol wird die gesamte Antiplasminaktibeispielsweise
gelungen, durch den Plasminaktivator 65 vität eliminiert (The Significance of Plasma Inhibi-Streptokinase
mit Hilfe des körpereigenen Plasmins tor [sj in the Control of Fibrinolytic [Plasmin] Acti-Blutgerinnsel
wieder aufzulösen. Mit dieser Therapie vity in Blood, Monkhouse.F. C. et al., Thrombos.
wurden sowohl Thrombosen als auch Herzinfarkte Diathes. haemorrh. 1972, 28, S. 367 bis 375).
Ir« der Regel wird die Messung so ausgelegt, daß
die Btldungsgeschwindigkeit des Fibrins mäßig
schneller verläuft als die Abbaugesch Bindigkeit.
Dss effindungsgcmäßc Verfahren wird an Hand
der Graphik näher erläutert:
Auf der Abszisse ist die Zeit aufgetragen, während die Ordinate die Verfestigung bzw. Gerinnt ng wiedergibtDie
Parallele zur Abszisse, die mit α bezeichnet ist, bedeutet den Endpunkt der Messung im
Koagulometer.
Die mit 1 bezeichnete Kurve zeigt den Verlauf der
Fibrinbildung bei einer Probe, die aus Fibrinogen, Urokinase und Thrombin besteht (ohne Plasmin).
Bei dem Ausführungsbeispiel ist die Messung so ausgelegt, daß die Bildungsgeschwindigkeit des Fibrins»
mäßig schneller verläuft als die Abbaugeschwindigkeit.
Bei normalem Plasminogengehalt (10O0Zo)
ergibt sich die Kurve 3, welche die FibrinbiJdung bei
einer Probe aus Fibrinogen, Plasmin (100»/»), Urokinase
und Thrombin wiedergibt.
Die Kurve 2 zeigt die Bildung von Fibrin in einer Probe aus Fibrinogen, Urokinase und Thrombin, sowie
Plasmin in 50*/»iger Verdünnung.
Die Graphik zeigt, daß die Verminderung des Plasminogen» durch die Bestimmung einer für die
Meßgenauigkeit ausreichenden Verkürzung der Fibrinbildungszcit erreicht wird.
Eine Eichkurve erhält man, wenn man ά;ζ Meßzeiten,
die durch Verdünnung von Plasminogenproben gesunder Versuchspersonen gewonnen werden, in
ein doppelt logarithmisches Millimeterpapier gegen
die prozentuale Verdünnung aufträgt. Die Punkte ergeben dann annäherungsweise eine Gerade.
Nachfolgend wird ein praktisches Beispiel für das erfindungsgeinüße Meßverfahren beschrieben:
Zunächst erfolgt die Zubereitung von antiplasminfreiem
Plasma. Dazu wird Citratplasma etwa I Minute mit 3 Teilen Iso-amy-alkohol geschüttelt und anschließend
bei 3000 U/min für etwa 30 Minuten zentrifugiert. Der Überstand wird abgehebert und verworfen.
Darauf ist eine erneute Zentrifugation fur etwa 3G Minuten bei etwa 4° C erforderlich. Danach
wird der Restüberstand verworfen.
Die eigentliche Messung geschieht wie folgt:
Vorgegeben wird eine definierte Menge Fibrinogen (z. B. 0,1 ml Humanfibnnogen plasminogenfrei der
Firma Behringwerke in einer Konzentration von 200 mg·/·). Eine Probe an ti plasmin freies Patienten-
«o plasma wird hinzugefügt (z. B. 0,1 ml). Hierauf gibt
man einen Plasminaktivator hinzu (z. B. I E Urokinase in 0,1 ml).
Nach einer konstanten Aktivierungszeit (z. B. 30see. bei 37°C) wird Thrombin zugefügt (z.B.
Test-Thrombin der Firma Behringwerke, 0,3 E in 0,1 ml) und das automatische Zählwerk des Koagulators
wird in Gang gesetzt.
Auf der zuvor ermittelten Eichkurve wird das zur Meßzeit zugehörige Plasminogen in Prozent abge-
ao lesen.
Die durch das erfindungsgemäße Verfahren erzielbaren Vorteile bestehen vor allem darin, daß die in
den meisten Kliniken vorhandenen üblichen Koagulometer zur Durchführung des erfindungsgemäßen
»5 Verfahrens benutzt werden können. Der Test ist auch
sehr einfach in der Handhabung, so daß er in den Labors von medizinisch technischen Assistentinnen
durchgeführt werden kann.
Die Verkürzung der Meßzeit gegenüber den eingangs als bekannt vorausgesetzten Verfahren macht
das erfindungsgemäße Verfahren für Routinezwecke geeignet. Das erfindungsgemäße Verfahren ist außerdem
nennenswert billiger.
Durch das erfindungsgemäße Verfahren wird es möglich, die Tests in der klinischen Diagnostik z. B.
in Form käuflicher Testsets einzuführen, um z. B. durch Dosierung von Streptokinase nach der Höhe
des aktuellen Plasminogenspiegels diese Therapie zu verbessern und Komplikationen zu verringern.
Hierzu 1 Blatt Zeichnungen
Claims (2)
1. Verfahren zur Messung des Plasminogen- darauf, daß bisher die routinemäßige PIasminoPen-
gehaltes, dadurch gekennzeichnet, daß 5 bestimmung nicht möglich ist, aber bei zunehmender
der Piasminogengehali durch Bestimmung der Plasniinaktivierung die Verbletungsgeralir an-c^.
Bildung von Fibrin in einer Probe gemessen Es sind zwar verschiedene Verfahren zur Mes-
wird. sung des Plasminogengehaltes bereits bekannt, z.B.
2." Verfahren nach Anspruch 1, dadurch ge- der Clot lysis time Recorder Fa. Medicon Ltd.,
kennzeichnet, daß die Bildung des Fibrins in ίο Glasgow, Scotland, der Enzo-Diffusion Fibrin-Plat-
einer Lösung von Fibrinogen und antiplasmin- ten-Test der Fa; Hyland, Travenol International
freiem, plasminaktiviertem Probenplasma unter GmbH, München, und der Plasmmogen-Platten-Test
Beifügung von Thrombin verzögert und der Pias- der Fa. Behringwerke, Marburg, Lahn. Diese Ver-
minogengehalt durch die Bestimmung der Ver- fahren sind für Routinezwecke ungeeignet., weil sie
lögerung des Gerinnungszeitpunktes festgelegt 15 einerseits zu aufwendig sind und andererseits zu viel
wird. Zeit erfordern, d.h. in der Regel zwischen 6 und
Priority Applications (11)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19732338254 DE2338254C3 (de) | 1973-07-27 | Verfahren zur Messung des Plasminogengehaltes | |
| DE2431342A DE2431342C3 (de) | 1973-07-27 | 1974-06-29 | Verfahren zur Messung des Plasminogengehaltes durch Bestimmung der Bildung von Fibrin in einer Probe |
| CH1010674A CH607055A5 (de) | 1973-07-27 | 1974-07-23 | |
| DK401374A DK401374A (de) | 1973-07-27 | 1974-07-25 | |
| NL7410099A NL7410099A (nl) | 1973-07-27 | 1974-07-26 | Werkwijze voor het meten van het plasminogeen- gehalte. |
| AT616374A AT337908B (de) | 1973-07-27 | 1974-07-26 | Verfahren zur messung des plasminogehaltes |
| GB3334274A GB1471742A (en) | 1973-07-27 | 1974-07-29 | Process for measuring the plasminogen content of a plasma sample |
| IT69407/74A IT1032522B (it) | 1973-07-27 | 1974-07-29 | Composizione per la misurazione del tenore di plasminogeno |
| BE147048A BE818211A (fr) | 1973-07-27 | 1974-07-29 | Procede pour la determination de la teneur du sang en plasminogene |
| FR7426268A FR2238933B1 (de) | 1973-07-27 | 1974-07-29 | |
| US05/541,335 US4011142A (en) | 1973-01-27 | 1975-01-15 | Process for measuring the plasminogen content of a sample |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19732338254 DE2338254C3 (de) | 1973-07-27 | Verfahren zur Messung des Plasminogengehaltes | |
| DE2431342A DE2431342C3 (de) | 1973-07-27 | 1974-06-29 | Verfahren zur Messung des Plasminogengehaltes durch Bestimmung der Bildung von Fibrin in einer Probe |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE2338254A1 DE2338254A1 (de) | 1975-02-13 |
| DE2338254B2 DE2338254B2 (de) | 1975-05-22 |
| DE2338254C3 true DE2338254C3 (de) | 1976-01-15 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69018910T2 (de) | Verfahren zur Bestimmung des endogenen Thrombinpotentials von Plasma und Blut und Reagenziensatz zur Verwendung in besagtem Verfahren. | |
| DE69721203T2 (de) | Verfahren zur Herstellung eines Gewebeklebers, dessen Koagulation durch Zugabe von Calciumionen erfolgt | |
| DE2619667C2 (de) | Pharmazeutisches Mittel | |
| EP0040799B1 (de) | Stabilisiertes Thrombinpräparat | |
| DD208811A5 (de) | Verfahren zur herstellung von gewebsthromboplastin | |
| Zimmermann et al. | The effect of bezafibrate on the fibrinolytic enzyme system and the drug interaction with racemic phenprocoumon | |
| Roberts et al. | Survival of transfused factor X in patients with Stuart disease | |
| DE2431342C3 (de) | Verfahren zur Messung des Plasminogengehaltes durch Bestimmung der Bildung von Fibrin in einer Probe | |
| DE68912115T2 (de) | Ausscheidungsverfahren für die herstellung von thromboplastinreagenzien. | |
| EP0016962B1 (de) | Mittel zur Entfernung von Ascorbinsäure aus wässrigen Flüssigkeiten | |
| DE60032001T2 (de) | Verfahren zur stabilisierung von thrombin | |
| EP0062310B1 (de) | Reagens zur optischen Bestimmung des Blutgerinnungsverhaltens | |
| DE2641840A1 (de) | Thrombose-test | |
| DE2338254C3 (de) | Verfahren zur Messung des Plasminogengehaltes | |
| EP3489692A1 (de) | Prothrombinzeit-reagenz enthaltend einen eisenchelator | |
| Bowers et al. | Use of the activated clotting time in anticoagulation monitoring of intravascular procedures. | |
| WO1993016390A1 (de) | Verfahren zur bestimmung von hirudin und synthetischen trhombininhibitoren | |
| EP0281089B1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Faktor VIII:C-Mangelplasma und ein so erhaltenes Mangelplasma | |
| CH617013A5 (de) | ||
| DE3786098T2 (de) | Bestimmungstest für der Thrombose verwandte Materialien. | |
| DE2622180C3 (de) | Verfahren zur Bestimmung des fibrinstabilisierenden Faktors (Fakt XIID, insbesondere im menschlichen Blut | |
| AT212979B (de) | Reagens zur Kontrolle der Gerinnungsfähigkeit des Blutes und seine Herstellung | |
| Preston et al. | Heparinised clotting factor concentrates in patients with Christmas disease and liver disease | |
| DE1200019B (de) | Diagnosereagens zur Bestimmung von Faktoren der Blutplasmakoagulation und Verfahren zu seiner Anwendung | |
| Blanke et al. | Diagnostic value of thrombin-antithrombin III complex in pulmonary embolism and in deep vein thrombosis—comparison with fibrinopeptide A, platelet factor 4, and β-thromboglobulin |