DE2264638C2 - 5'-acetyl-2,2'-cyclocytidine derivatives - Google Patents

Description

NYNY

(D(D

HOH₂CHOH ₂ C

(II)(II)

CH₃COOCH₂' OCH ₃ COOCH ₂ 'O

CH3COOCH3 OCH3COOCH3 O

OHOH

in der Y ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxygruppe, X ein Wasserstoffatom oder ein Fluoratom bedeuten und mindestens einer der Reste X und Y von Wasserstoff verschieden ist, und ihre Salze mit pharmazeutisch geeigneten Säuren.in which Y is a hydrogen atom or a hydroxyl group, X is a hydrogen atom or a fluorine atom and at least one of the radicals X and Y is different from hydrogen, and their salts with pharmaceutically acceptable acids.

2. Verfahren zur Herstellung von 5'-Acetyl-2,2'-cyclocytidin-Derivaten nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man ein 2,2'-Cyclocytidin-Derivat der allgemeinen Formel2. Process for the preparation of 5'-acetyl-2,2'-cyclocytidine derivatives according to claim 1, characterized in that a 2,2'-cyclocytidine derivative is used the general formula

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OHOH

in welcher X und Y die angegebene Bedeutung haben, mit Eisessig im Überschuß unter Erhitzen umsetzt.in which X and Y have the meaning given, with glacial acetic acid in excess with heating implements.

Die Erfindung betrifft neue 2,2'-Cyclocytidin-Derivate und ein Verfahren zu ihrer Herstellung.The invention relates to new 2,2'-cyclocytidine derivatives and a method for their production.

Die Verbindung 2,2'-Cyclocytidin ist als carcinostatisch wirksames Mittel bekannt. Ihre Herstellung durch Umsetzung von Cytidin mit einem aus Dimethylformamid und Phosphoroxychlorid erhaltenen Vilsmeier-Haack-Reagenz wurde in J. Org. Chem. Vol. 37, Nr. 2, 1972, Seiten 284 bis 288, beschrieben.The compound 2,2'-cyclocytidine is known to be a carcinostatic agent. Your manufacture by Reaction of cytidine with a Vilsmeier-Haack reagent obtained from dimethylformamide and phosphorus oxychloride was described in J. Org. Chem. Vol. 37, No. 2, 1972, pages 284-288.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue Derivate des 2,2'-Cyclocytidins zur Verfügung zu stellen, die besonders gute pharmakologische Wirksamkeit besitzen.The invention is based on the object of providing new derivatives of 2,2'-cyclocytidine, which have particularly good pharmacological effectiveness.

(D(D

in der X ein Wasserstoffatom oder ein Fluoraiom und Y ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxygruppe bedeuten, und mindestens einer der Reste X und Y von Wasserstoff verschieden ist.in which X is a hydrogen atom or a fluoroaiom and Y represent a hydrogen atom or a hydroxyl group, and at least one of X and Y of Hydrogen is different.

In der angegebenen Formel I werden die erfindungsgemäßen 2,2'-Cyclocytidinderivate in Form der freien Base gezeigt. Da jedoch die meisten Verbindungen dieser Gruppe in Form der freien Base instabil sind, wird bevorzugt, diese Produkte in Form von Salzen mit pharmazeutisch geeigneten Säuren herzustellen. Im Einzelfall kann frei gewählt werden, welche Form jeweils in dem betreffenden Fall geeignet ist. DieIn the formula I given, the 2,2'-cyclocytidine derivatives according to the invention are in the form of the free Base shown. However, since most of the compounds in this group are unstable in the form of the free base, will prefers to prepare these products in the form of salts with pharmaceutically acceptable acids. in the Individual cases can be freely chosen which form is suitable in each case. the

jo Erfindung umfaßt daher sowohl die freit· Base als auch die Salze dieser Base. Als Säuren können pharmazeutisch geeignete anorganische Säuren, wie Schwefelsäure, Chlorwasserstoffsäure oder organische Säuren, wie Ameisensäure, gewählt werden.jo invention therefore includes both the free base and the salts of this base. The acids can be pharmaceutically suitable inorganic acids such as sulfuric acid, Hydrochloric acid or organic acids such as formic acid can be selected.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen haben biologische Eigenschaften, die sie als Antivirusmittel, Antitumor- und Antikrebsmittel geeignet machen. Sie sind nicht nur in Form therapeutischer Zubereitungen, sondern auch als Zwischenprodukte für therapeutische Mittel geeignet.The compounds of the invention have biological properties that make them antiviral, antitumor and make anti-cancer drugs suitable. They are not only in the form of therapeutic preparations, but also suitable as intermediates for therapeutic agents.

Sie besitzen eine Antikrebswirkung, die der von Arabinosylcytosin, das als wirksames Krebsmittel bekannt ist, sowie der von 2,2'-Cyclocytidin überlegen ist, wie der folgende Vergleichsversuch zeigt.They have anti-cancer effects similar to that of arabinosylcytosine, which is an effective anti-cancer agent is known, as well as that of 2,2'-cyclocytidine is superior, as the following comparative experiment shows.

VergleichsversuchComparative experiment

Die Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Verbindungen gegen Leukämie wurde mit der von Arabinosylcytosin, das eines der üblichen wirksamen Arzneimittel für Leukämie darstellt, und mit der von 2,2'-Cyclocytidin verglichen. Die Ergebnisse wurden an der L 1210-Leukämie der Maus aufgezeigt.The effectiveness of the compounds according to the invention against leukemia was compared with that of arabinosylcytosine, which is one of the common effective drugs for leukemia, and with that of 2,2'-cyclocytidine compared. The results were based on the L 1210 leukemia shown by the mouse.

Als Versuchstiere wurden Gruppen von 6 männlichen und weiblichen BDF-Mäusen mit einem Gewicht von 20±2g benutzt. Den Mäusen wurden 1 χ ΙΟ⁵ L 1210-Leukämiezellen intraperitoneal implantiert. Die zu prüfende Verbindung wurde dreimal täglich während 5 Tagen intraperitoneal injiziert, womit 24 Stunden nach der Transplantation begonnen wurde. Die Antitumor-Wirksamkeit wurde durch die prozentuale Erhöhung der Überlebenszeit (ILS) bewertet.Groups of 6 male and female BDF mice weighing 20 ± 2 g were used as test animals. ^{1 5} L 1210 leukemia cells were implanted intraperitoneally in the mice. The test compound was injected intraperitoneally three times a day for 5 days starting 24 hours after transplantation. The antitumor effectiveness was assessed by the percentage increase in survival time (ILS).

Die prozentuale Erhöhung der Überlebenszeit wurde nach folgender Gleichung berechnet:The percentage increase in survival time was calculated using the following equation:

ILS % = 100ILS% = 100

(Durchschnittliche Überlebenszeit _ (Durchschnittliche Überlebenszeit der behandelten Gruppe, Tage) der nicht-behandelten Gruppe, Tage) Durchschnittliche Überlebcnszeit der nicht-behandelten Gruppe, Tage(Average survival time - (average survival time of the treated group, days) of the non-treated group, days) Average survival time of the non-treated group, days

Verbindunglink

Dosis
(mg/kg/Tag)dose
(mg / kg / day)

ILS %ILS%

5'-Acetyl-2,2'-cycIo- 1005'-acetyl-2,2'-cyclo-100

cytidin 300cytidine 300

S'-Acetyi-N-'-hydroxy- 100S'-Acetyi-N-'-hydroxy-100

2,2'-cyclocytidin 3002,2'-cyclocytidine 300

S'-Acetyl-i-fluor- 30S'-acetyl-i-fluoro-30

2,2'-cycIocytidin 1002,2'-cyclocytidine 100

Arabinosylcytosin 50
100Arabinosylcytosine 50
100

2,2'-Cyclocytidin 302,2'-cyclocytidine 30

2,2'-Cyclocytidin 1002,2'-cyclocytidine 100

2,2'-Cyclocytidin 3002,2'-cyclocytidine 300

70 20070 200

80 25080 250

60 95 70 50 40 70 15060 95 70 50 40 70 150

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können hergestellt werden, indem man eine Verbindung der allgemeinen Formr'The compounds of the invention can be prepared by a compound of general form

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N'N '

-X-X

HOHaC OHOHaC O

OHOH

in der X und Y die angegebene Bedeutung haben, mit Eisessig im Überschuß unter Erhitzen umsetzt.in which X and Y have the meaning given, reacted with excess glacial acetic acid with heating.

Untersuchungen der Anmeldern haben gezeigt, daß die Acetylierung nach den herkömmlichen Verfahren in Gegenwart von Basen, z. B. durch Umsetzung mit Essigsäureanhydrid in Pyridin, undurchführbar ist, weil das 2,2'-Cyclocytidin-Derivat gegenüber Basen instabil ist.Investigations by the applicants have shown that the acetylation according to the conventional methods in Presence of bases, e.g. B. by reaction with acetic anhydride in pyridine, is impracticable because the 2,2'-cyclocytidine derivative is unstable towards bases.

Gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren ist zu bevorzugen, den Eisessig in der etwa 10- bis 200fachen Gewichtsmenge des als Ausgangsmaterial verwendeten 2,2'-Cyclocytidin-Derivats einzusetzen. Die bevorzugte Erhitzungstemperatur beträgt 80 bis 150°C, doch wird aufgrund der leichten Durchführbarkeit das Arbeiten bei Rückflußtemperatur stärker bevorzugt.According to the method according to the invention, it is preferable to use the glacial acetic acid in about 10 to 200 times To use the amount by weight of the 2,2'-cyclocytidine derivative used as the starting material. The preferred one The heating temperature is 80 to 150 ° C, but because of the easy workability, the work becomes more preferred at reflux temperature.

Die Reaktion wird vorzugsweise über einen Zeitraum von 30 Minuten bis 10 Stunden durchgeführt. Im Einzelfall wird jedoch die Dauer in geeigneter Weise je nach dem Fortschreiten der Reaktion bemessen.The reaction is preferably carried out over a period of 30 minutes to 10 hours. in the In individual cases, however, the duration is measured in a suitable manner depending on the progress of the reaction.

Nach vervollständigter Reaktion können die Produkte abgetrennt werden, indem man die erhaltene Lösung des Produkts abkühlt, wodurch Kristalle abgeschieden werden. Es ist aber auch möglich, die Produkte in der Weise zu erhalten, daß man bei vermindertem Druck den Eisessig abdestilliert und sodann ein geeignetes organisches Lösungsmittel oder Wasser dem Rückstand zusetzt, wodurch die Kristalle zur Abscheidung kommen.After the reaction is complete, the products can be separated off by using the resulting solution the product cools, causing crystals to separate out will. But it is also possible to obtain the products in such a way that one under reduced pressure the glacial acetic acid is distilled off and then a suitable organic solvent or water is added to the residue clogs, causing the crystals to separate out.

Die Salzfonn des 5'-Acetyl-2,2^r-cyclocytidin-Derivats kann unter Verwendung eines Ionenaustauscher-Htrzes in die Form der freien Base oder in die Form eines Salzes mit einer anderen pharmazeutisch geeigneten Säure umgewandelt werden.The Salzfonn of the 5'-acetyl-2,2 ^r -cyclocytidin derivative may be performed using an ion exchange Htrzes in the form of the free base or in the form of a salt with another pharmaceutically acceptable acid converted.

Die Erfindung wird durch die nachstehenden Beispiele veranschaulicht.The invention is illustrated by the following examples.

Beispielexample

Jeweils 1 g der nachstehend unter a) bzw. b) genannten Ausgangsverbindung wurde mit 150 ml Eisessig unter Erhitzen vermischt, wodurch die Verbindung in dem Eisessig aufgelöst wurde. Die Lösung wurde 3 Stunden am Rückfluß gekocht, wobei sie von Wasser befreit wurde. Die resultierende Reaktionslösung wurde über Nacht in einem Kühlschrank gelassen, wodurch prismeniörmige Kristalle der entsprechenden 5'-Acetyl-Verbindung zur Abscheidung kamen.In each case 1 g of the starting compound mentioned below under a) or b) was mixed with 150 ml Glacial acetic acid mixed with heating, thereby dissolving the compound in the glacial acetic acid. The solution was refluxed for 3 hours, during which time it was freed from water. The resulting reaction solution was left in a refrigerator overnight, producing prismatic crystals of the corresponding 5'-acetyl compound came to the deposition.

Nach der beschriebenen Arbeitsweise wurden hergestellt: According to the procedure described, the following were produced:

a) 5'-Acetyl-N⁴-hydroxy-2,2'-cyclocytidin-hydrochlorid aus N"'-Hydroxy-2,2'-cyclocytidin-hydrochlorid in einer Ausbeute von 0,51 g (44,3%); Ultraviolett-Absorption: /^',' 253 mu ^pll! 242· 273 m:ia) 5'-acetyl-N ⁴ -hydroxy-2,2'-cyclocytidine hydrochloride from N "'- hydroxy-2,2'-cyclocytidine hydrochloride in a yield of 0.51 g (44.3%); Ultraviolet absorption: / ^ ',' 253 mu ^pll! 242 x 273 m: i

Infrarot-Absorption: Ester-Carbonyl-Absorption J'> bei 170 cm 'Infrared absorption: ester carbonyl absorption J '> at 170 cm'

Papierchror.iatographie (Lösungsmittel n-BuOH zu H₂O = 36:14) R_rWert = 0,20Paper chromatography (solvent n-BuOH to H ₂ O = 36:14) R _r value = 0.20

Elementaranalyse: C(%) H(%) N(%)
₄₍₎ Berechnet fürElemental analysis: C (%) H (%) N (%)
_{4 ()} Calculated for

C_nII₁₄O₆N₃CI 41.33 4,41 !3,14C _n II ₁₄ O ₆ N ₃ CI 41.33 4.41! 3.14

gefunden 41,47 4,35 13,32found 41.47 4.35 13.32

b) 5'-Acetyl-5-fluor-2,2'-cyclocytidin-hydrochlorid aus 5-Fluor-2,2'-cyclocytidin in einer Ausbeute von 0,48 g (42%);b) 5'-Acetyl-5-fluoro-2,2'-cyclocytidine hydrochloride from 5-fluoro-2,2'-cyclocytidine in one yield of 0.48 g (42%);

Ultraviolettabsorption: ";" ^rll! 230; 264 nvxUltraviolet Absorption: ";" ^rll! 230; 264 nvx

Infrarotabsorption: Ester-Carbonyl-Absorption bei 1770 cm 'Infrared absorption: ester carbonyl absorption at 1770 cm '

Papierchromatographie (Lösungsmittel n-BuOH zu H₂O = 86 : 14): R_rWert 0,22Paper chromatography (solvent n-BuOH to H ₂ O = 86:14): R _r value 0.22

Elementaranalyse: C(%) H(%) N(%)
Berechnet fürElemental analysis: C (%) H (%) N (%)
Calculated for

C₁₁H,,O<N,FCI 41,07 4,07 13,06C ₁₁ H ,, O <N, FCI 41.07 4.07 13.06

y> gefunden 41,21 4,12 13,03 y> found 41.21 4.12 13.03

Claims (1)

Patentansprüche:Patent claims: 1. 5'-Acetyl-2^'-cycIocytidin-Derivate der allgemeinen Forme!1. 5'-Acetyl-2 ^ '- cycIocytidine derivatives of the general Shape! NYNY Gegenstand der Erfindung sind 5'-Acetyl-2,2'-cyclocytidinderivate der allgemeinen FormelThe invention relates to 5'-acetyl-2,2'-cyclocytidine derivatives the general formula