DE1808834C3

DE1808834C3 - Stabilisiertes, wäßriges Präparat der Enzyme Protease, a -Amylase oder deren Gemische

Info

Publication number: DE1808834C3
Application number: DE1808834A
Authority: DE
Inventors: Jim Smither Berry; Charles Bruce Mccarty
Original assignee: Procter and Gamble Co
Current assignee: Procter and Gamble Co
Priority date: 1967-11-15
Filing date: 1968-11-14
Publication date: 1980-04-24
Also published as: AT314450B; DE1808834A1; US3557002A; DE1808834B2; DK132030B; NL162690C; NO128370B; BE723873A; FI49179B; NL162690B; GB1242596A; NL6816356A; FR1599043A; FI49179C; SE360675B; DK132030C; CH534702A

Description

(a) der Gehalt an aktivem Enzym 0,001 bis 1,0% beträgt und es

(b) 65 bis 97% Wasser,

(c) 2 bis 27% eines Stabilisierungsmittels in der zur Stabilisierung erforderlichen Menge, nämlich Monohydroxyalkohole mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen Alkoxymonohydroxyalkohole der allgemeinen Formel

R₁-O-R₂-OH

worin R₁ einen Alkyl- oder einen Alkoxyalkylrest mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen und 0 bis 1 Ätherbindungcn und R2 einen Alkylenrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeuten oder Dialkylglykoläther der allgemeinen Formel

R₁O(CH₂CH₂O)₁R₂

worin R₁ und R₂ jeweils Alkylreste mit 1 bis etwa 4 Kohlenstoffatomen und χ = 1 bis etwa 10 bedeuten, und

(d) 0 bis 15% eines nichtionischen oder zwitterionischen Detergens enthält. ^¹

2. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es im Fähe eines Gehaltes an α-Amylase 2 bis 15% eines nichtionischen oder zwitterionischen Detergens einhält. π

3. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Stabilisierungsmittel Methanol, Äthanol, Isopropanol, Propanol, 3-Propoxypropanol, Diäthylenglykolmonobutyläther oder Äthylenglykoldimethy lather isl.

4. Präparat nach Anspruch I, dadurch gekennzeichnet, daß

(a) der Gehalt an aktivem Enzym 0,01 bis 0,5% beträgt, und es

(b) 72 bis 95% Wasser. . ^Vl

(c) als Stabilisierungsmittel Methanol, Äthanol, Isopropanol, Propanol, 3-Propoxypropanol oder Diäthylenglykclmonobutyläthcr, wobei das Methanol in Mengen von etwa 16% bis 27%, das Äthanol in Mengen von etwa '3 bis 19%, das i'ropanol in Mengen von etwa 2 bis 8%, das Isopropanol in Mengen von etwa 4 bis 22%, das Propoxypropanol in Mengen von etwa H bis 17% und der Diäthylcnglykolmonobiilyläthcr in Mengen von 8 bis 17% verwendet " wurden, und

(d) 4 bis 10% eines nichtionischen oder zwitterionischen Detergens enthält.

5. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daS sein pH-Wert zwischen 5,0 und lö.ö liegt.

b. Präparat nach Anspruch I, dadurch gekennzeichnet, daß sein pH-Wert zwischen 6,5 und 8,5 liegt· μ

7. Präparat nach Anspruch I, dadurch gekennzeichnet, daß die Protease eine alkalische Protease, nämlich Subtilisin, BPN', Elastase, Kcratinase.

Carboxypeptidase, Aminopeptidase, Aspergiliopeptidase A und Aspergillopeptidase B, ist,

8. Präparat nach Anspruch I, dadurch gekennzeichnet, daß das Stabilisierungsmittel Methanol, Äthanol oder Isopropanol ist, wobei das Methanol in Mengen von etwa 17 bis 25 Gew.-% des Präparates, das Äthanol in Mengen von etwa 6 bis 18 Gew.-% des Präparates und das Isopropanol in Mengen von etwa 9 bis etwa 20 Gew.-% des Präparates verwendet werden.

9. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es eine wirksame Menge eines Konservierungsmittels enthält.

Die Erfindung betrifft ein stabilisiertes, wäßriges Präparat der Enzyme Protease, α-Amylase oder deren Gemische, das dadurch gekennzeichnet ist, daß, bezogen auf das Gewicht des Präparates,

(a) der Gehalt an aktivem Enzym 0,001 bis 1,0% beträgt und es

(b) 65 bis 97% Wasser,

(c) 2 bis 27% eines Stabilisierungsmittels in der zur Stabilisierung erforderlichen Menge, nämlich Monohydroxyalkohole mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkoxymonohydroxyalkohole der allgemeinen Formel

R₁-O-R₂-OH

worin R₁ einen Alkyl- oder einen Alkoxyalkylrest mit 1 bis 8 Kohlenstoffatomen und 0 bis 1 Ätherbindungen und R₂ einen Alkylenrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeuten oder Dialkylglykoläther der allgemeinen Formel

R₁O(CH₂CH₂O)₁R₂

worin R₁ und R₂ jeweils Alkylreste mit 1 bis etwa 4 Kohlenstoffatomen und χ = 1 bis etwa 10 bedeuten, und

(d) 0 bis 15% eines nichtionischen oder zwitterionischen Detergens enthält.

Enzyme werden im allgemeinen in Form trockener Pulver gehandelt. Die pulverförmigen Enzympräparate müssen vor hohen Temperaturen und hoher relativer Feuchtigkeit geschützt werden, andernfalls werden die Enzyme rasch abgebaut und/oder desaktiviert (siehe z. B. Alcalasc, Industriepublikation der Firma Novo Industri A/S, Kopenhagen, Dänemark). Wäßrige Enzympräparate sind nicht allgemein verfügbar, da die Enzyme in einem wäßrigen Milieu rasch abgebaut und/oder desaktiviert werden.

Es sind bereits Versuche durchgeführt worden, um Enzyme in wäßrigen Lösungen zu stabilisieren. Siehe US-PS 32 96 094, in welcher vorgeschlagen wird, speziell hydrolysiertes und löslich gemachtes Kollagen und Glycerin zur Stabilisierung wäßriger Lösungen von proteolytischen Enzymen zu verwenden. Diese Methode der Stabilisierung der Enzyme erfordert jedoch große Mengen an Glycerin, ζ. B. 35 bis 60 Gew.-% der gesamten Lösung und erhöht dadurch die Kosten der Enzymlösung erheblich.

Gemäß der US-PS 30 95 358 wird Sorbit zur Stabilisierung wäßriger lösungen verwendet, die Enzyme, wie Papain und Gemische aus Protease und Amylasc. erhalten aus Bacillus subtilis. enthalten. Diese

Methode erfordert ebenfalls große Mengen (65 bis 90 Gew--% einer 60%tgen Sorbitlösung) des Stabilisierungsmittels Sorbit. Das große Volumen an Sorbit, das zur Stabilisierung der Enzyme in wäßrigen Lösungen erforderlich ist, wirkt als Verdünnungsmittel und trägt erheblich zu den Kosten des Präparates bei.

Die beiden vorgenannten Literaturstellen veranschaulichen die erheblichen Probleme, denen man sich bei Versuchen zur Stabilisierung wäßriger Lösungen von Enzymen gegenübersieht:

(I) Unkosten und (2) außerordentliche Verdünnung des wäßrigen Produktes mit einem Stabilisierungsmittel.

Das erfindungsgemäße stabilisierte wäßrige Präparat der Enzyme Protease, α-Amylase oder deren Gemische ermöglicht es, die Probleme zu meistern, denen man sich aufgrund des Standes der Technik gegenübersieht. Die erfindungsgemäß verwendeten Stabilisierungsmittel betragen nur 2 bis 27%, bezogen auf das Gewicht des Enzympräparates. Diese Stabilisierungsmittel stehen zu tragbaren Preisen bequem zur Verfugung. Die erfindungsgemäß eingesetzten Protease stabilisierenden Verbindungen besitzen wertvolle Lösungsir,"tteleigenschaften und sind daher besonders erwünscht, wenn das Präparat zur Anwendung in Wasch- und Reinigungsmitteln vorgesehen ist Die Alkohole, z. B. Äthanol, sind auch ausgezeichnete Adstringentien und üben so eine wertvolle Funktion aus, wenn das erfindungsgemäße Präparat als Mundwasser verwendet wird. Ein Zusatz der gegebenenfalls vorgesehenen nichtionischen oder zwitterionischen Detergenskomponenten erhöht die Stabilität der Enzyme in dem wäßrigen Präparat, verleiht ihm wünschenswerte oberflächenaktive Eigenschaften und erhöht die Reinigungskraft dieses Präparates.

In der Figur sind die stabilisierenden Wirkungen verschiedener Konzentrationen von erfindungsgemäßen Stabilisierungsmitteln in einer wäßrigen Lösung dargestellt, die 1% Alcalase(6% kristallines Enzym) und 5% äthoxyliertcn Talgalkohol (I Mol Talgalkohol, der mit 30 Mol Äthylenoxid älhoxylierl ist) enthält und auf einen pH-Wert von pH 7,0 eingestellt ist. Es ist zu ersehen, daß die bevorzugten Stabilisierungsmittel, d. h. Methanol, Äthanol und Isopropanol verwendet werden können, um während langer Lagerzeiträumc die Enzymstabilität auf ein Maximum zu bringen.

In der Zeichnung ist auf der Ordinate die verbleibende Enzymaktivität nach 5wöchiger Lagerung bei einet Temperatur von 38° C aufgetragen und auf der Abszisse der Prozentgehalt des Stabilisierungsmittels.

Körnige, enzymhaltig." Detergensmischungen sind in Europa seit mehreren Jahren in Verwendung und wurden in letzter Zeit auch in den Vereinigten Staaten von Amerika gebräuchlich. Diese enzymhaltigen körnigen Detergensmischungen sind insbesondere bei der Entfernung von Flecken aus Geweben, festen Haushaltsgegenständen, Böden und Wänden wirksam. Diese körnigen Detergensmischungen sind jedoch bei der Verwendung in kleinem Maßstab, z. B. bei der Fleckenentfernung, unbequem zu handhaben.

Die oben beschriebenen Nachteile werden mit den erfindungsgemäßen Präparaten vermieden. Das erfindungsgemäße wäßrige Präparat der Enzyme Protease, α-Amylase oder deren Gemische ist zweckmäßig als Fleckentfernungsmittel, als Zusatz für Detergentien, als Wasch- und Reinigungsmittel oder als Mundwasser verwendbar. Außerdem sind die Enzyme in den erfindungsgemäßen Frinaraten während langer Lager-/cigen stabil.

Dieses Präparat enthält drei wesentliche Hauptbestandteile: Wasser, aktive Enzyme und .Stabilisierungsmittel. Nicntionische oder zwitterionische Detergentien können den Präparaten als wahlweise zuzufügende Komponenten zugesetzt werden. Diese Komponenten und die Anwendungsniengen derselben sind nachstehend näher erläutert.

Wasser stellt einen überwiegenden Anteil der erfindungsgemäßen Präparate dar und wird in Mengen von 65 bis 97 Gew.-% des Präparates und vorzugsweise in Mengen von 72 bis 95% verwendet. Entionisiertes Wasser wird zwar bevorzugt, doch ist dessen Anwendung nicht zwingend.

Die Enzyme, die in wäßriger Lösung erfindungsge-

n maß stabilisiert werden, sind die alkalischen, neutralen und sauren Proteasen sowie a-Amylasen oder deren Gemische. Proteasen nach diesen Klassifikationen leiten sich im allgemeinen von Pilzen und Bakterien ab. Enzyme, die von pflanzlichen und tierischen Quellen stammen, können hier ebenfalls verwendet werden, sind aber nicht so bequem in die obigen alkalischen, neutralen und sauren Unterklassen einzuteilen. Diese Enzyme sind im pH-Bereich von etwa 3 bis 11 und bei Temperaturen im Bereich von etwa 4,4" C bis etwn 77° C

j5 aktiv. Optimale Aktivität dieser Proteasen zeigt sich im allgemeinen im pH-Bereich von etwa 5,0 bis 10 und vorzugsweise von 6,0 bis 9,5.

Die Proteasen sind beim Abbau von Proteinschmutz besonders wirksam. Die Proteasen katalysieren die

jo Hydrolyse der Peptidbindung von Proteinen, Polypeptiden und verwandter Verbindungen. Auf diese Weise werden freie Amino- und Carboxygruppen erhalten, und die langkettigen Proteinstrukturen werden zu verschiedenen kürzeren Ketten verkleinert. Diese kürzeren

i'i Ketten können leicht mit Wasser oder wäßrigen Delergensmischungen aus deren Umgebung entfernt werden.

Die alkalischen Proteasen sind besonders bevorzugte Enzyme zur Verwendung im Rahmen der Erfindung.

Alkalische Proteasen, die zur Anwendung im Rahmen de^r Erfindung geeignet sind, umfassen Subtilisin, BPN', Elastase, Keratinase, Carboxypeptidase, Aminopeptidase, Aspergillopeptidase A und Aspergillopeptidase B, Substilisin und BPN' werden besonders bevorzugt

η verwendet. Die alkalischen Proteasen werden deswegen im Rahmen der Erfindung insbesondere bevorzugt, da sie im pH-Bereich normaler Detergenskomponenten, d. i. pH 7,5 bis pH 10.5, optimale Aktivität zeigen und die alkalischen Proteasen zeigen in den erfindungsgemäßen

>o Präparaten eine überraschende Stabilität.

Die neutralen Proteasen, die im Rahmen der Erfindung verwendet werden können, umfassen KoIIngenase. Chymotrypsin und Trypsin und solche proteolytischen Enzyme, die aus Streptomycesspecies isoliert sind. Sowohl Chymotrypsin als auch Trypsin zeigen im neutralen bis alkalischen Bereich optimale Aktivität.

Beispiele saurer Proteasen, die zur Verwendung im Rahmen der Erfindung geeignet sind, umfassen Pepsin. Papain und Bromelin. Sowohl Papain als auch Bromelin

bo zeigen im sauren bis neutralen Bereich optimale Aktivität.

Die Λ-Amylasen werden in den erfindungsgemäßen Präparaten ebenfalls stabilisiert. Alle Λ-Amylasen zeigen im sauren Bereich optimale Aktivität. Die

b¹; Λ-Amylasen sind speziell zum Abbau von Stärkemolekülen gut geeignet, da sie in der Stärke die a-i.4-glykosidischen Bindungen angreifen. Die verbleibenden kürzeren Ketten werden aus deren Umgebung

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mit Wasser oder wäßrigen Lösungen der Detergentien leicht entfernt. Dir Λ-Amylnsen können aus tierischen Quellen. Getreidekörnern. Bakterien oder Pilzquellcn erhalten werden.

Im Handel erhältliche En/.ymniischungcn. die die oben beschriebenen Enzyme enthalten, sind für die Anwendung im Rahmen der Erfindung geeignet. Diese handelsüblichen Enzymmischungen werden im allgemeinen in trockener, pulverisierter Form gehandelt und enthalten etwa 2% bis 80% aktive F.nzymc in Kombination mit einem inerten, pulverförmigen Trager, wie Natrium- oder Calciumsulfat oder Natriumchlorid, als restlichen. 20% bis 98% ausmachenden Bestandteil. Der Gehalt an aktivem Enzym in den handelsüblichen Enzymmischungen ist das Ergebnis der angewendeten Herstellungsmethoden und stellt kein kritisches Merkmal dar, solange das Endprodukt gemäß der Erfindung den ai'igcgcuciici'i Speziellen Lpi/.ymgciitm üüfwciSi. DiO unlöslichen, inerten Materialien werden im allgemeinen aus dem erfindungsgemäßen Präparat entfernt, um ein Präparat mit befriedigendem klarem Aussehen, das frei von Fällungen ist, zu liefern.

Besondere Beispiele von im Handel erhältlichen Enzymmischungen sind nachstehend angegeben, wobei die Herstellerfirmen in Klammer beigefügt worden sind: Alcalase (Novo Industri. Kopenhagen. Dänemark); Maxatase (Koninklijke Nederlandsche Gist-En Spiritusfabriek N. V., Delft, Niederlande): Protease B-4000 und Protease AP (Schweizerische Ferment A. G., Basel, Schweiz); CRD-Protease (Monsato Company, St. Louis. Missouri); Viokase (VioBin Corporation. Monticello. Illinois): Pronase-P. Pronase-E. Pronase-AS und Pronase-AF (sämtliche hergestellt von der Kaken-Chemical Company. Japan): Bioprase (Nagase & Co.. Ltd.. Osaka, lapan); Rapidase P-2000 (Rapidase. Seclin. Frankreich); Takamine, Bromelain 1 : 10. HT proteolytisches Enzym 200. Enzym L-W und Λ-Amylase (Miles Chemical Company, Elkhart. Indiana. USA): Rhozyme P-11-Konzentrat, Pectinol. Rhozyme PF. Rhozyme |-25(Rohm & Haas. Philadelphia, Pennsylvania, USA); (Rhozyme PF und 1-25 haben Salz- und Maisstärketräger und stellen Proteasen mit Diastaseaktivität dar); Amprozyme 200 (Jacques Wolf & Company: ein Betrieb der Nopco Chemical Company. Newark. New Jersey. USA) und Wallerstein 627-P (Wallerstein Company, Staten Island. New York).

CRD-Protease (auch bekannt als Monsanto DA-10) ist eine brauchbare pulverförmige Enzymmischung. Die CRD-Protease wird angeblich durch Mutation eines Bacillus subti'-s erhalten. Es ist aus neutralen und alkalischen Proteasen und Λ-Amylase zusammengesetzt. Die neutrale Protease hat ein Molekulargewicht von etwa 44 000 und enthält 1 bis 2 Atome Zink je Molekül. Die CRD-Protease kann in wäßrigen Systemen, wie in jenen gemäß der Erfindung, verwendet werden. Der Gehalt an aktivem Enzym CRD-Protease. auf Basis von Gew.-%. liegt im allgemeinen im Bereich von etwa 20% bis 75%.

Pronase-P, Pronase-E, Pronase-AB und Pronase-AF sind pulverförmige Enzymgemische, die auch mit Vorteil im Rahmen der Erfindung verwendet werden können. Diese Enzyme werden der Kulturbrühe des Streptomyces Griseus erhalten, der für die Herstellung von Streptomycin Verwendung findet. Sie werden durch eine aufeinanderfolgende Behandlung in einer Harzsäule isoliert Die Hauptkomponente der Pronase ist eine neutrale Protease, Streptomyces Griseus-Protease. Diese Enzymmischung enthält ein Caiciumsalz als Stabilisator und ist innerhalb eines weiten pH-Bereiche! recht gut stabil. /.. B. bei pi I-Werten von 4 bis 10, und is innerhalb eines Temperaturbereiches von IO"Cbis66 ( ziemlich stabil.

Ein weiteres Enzymgemisch, das für die erfindungsgc mäßen Präparate bevorzugt verwendet wird, is Alcalase (Novo Industri A/S, Kopenhagen, Dänemark) die als proteolytisches Enzympräparat beschrieben wird, das durch Submersfermcntation eines speziellen Stammes von Bacillus subtilis hergestellt wird. Die primäre Enzymkomponcite von Alcalasc ist Siibtilisin Außer Proteasen enthält Alcalasc geringe Mengen an (X-Amvlase. Alcalase ist ein feines graues, freifließendei Pulver, das einen Gchal! an kristallinem aktiven Enzymen von etwa 6% aufweist. Der Rest des Pulver; umfaßt in erster Linie Natriumsulfat, Calciumsulfat unc verschiedene inerte organische Trägermarterialien. Al

IiIIdAC /.CIgI aUUklgVtTUIIfllft-llv ^iui/llliuf mi u«~·· *-· ι

dungsgemäßen wäßrigen Präparaten.
.'Ii Biophase ist ein pulverförmiges Enzymgemisch, da« alkalische Proteasen (BPN') und und a-Amylaser enthält. Dieses Enzymgemisch kann mit oder ohm Verdünnungsmittel, wie Natrium- und Calciumsulfat erhalten werden.

ji Zur Erzielung bester Ergebnisse enthält das crfin dungsgemäße Präparat vorzugsweise 0,01 bis etwa 0,' Gew % aktive Enzyme, bezogen auf das Gewicht de Präparates. Wird eines der bevorzugten Enzymgcmi sehe verwendet, so enthält das erfindungsgemäßi in Präparat vorzugsweise etwa 0,1% bis 4,0%' de« Enzymgemisches, wie es in dei im Handel vertriebener Form erhältlich ist. z. B. mit etwa 2% bis 80% aktivci Enzymen. Der Gehalt an aktivem Enzym des erfin dungsgemäßen wäßrigen Enzymgcmischs liegt jeden ii falls, wie oben angegeben, im Bereich zwischen 0,001 ⁰A und 1%.

Die Stabilisierungsmittel, die die oben beschriebener Enzyme stabilisieren, sind Monohydroxyalkohole mit bis 4 Kohlenstoffatomen, Alkoxymonohydroxyalkoholc jo oder Dialkylglykoläther. Besondere Beispiele geeigne ter Monohydroxyalkohole umfassen
Methanol. Äthanol. Propanol,
Isopropanol. Butanol und Isobutanol.
Alkoxymonohydroxyalkohole umfassen
-; i Methoxymethanol, 2-Methoxyäthanol,

3-Methoxypropanol,2-Methoxypropanol.
Äthoxymethanol. 2-Äthoxyäthanol,
3-Äthoxypropanol. 2-Äthoxypropanol,
Propoxymethanol, 2-Propoxyäthanol,
ίο 3- Propoxypropanol, 2- Propoxypropanol,

Butoxymethanol, 2-Butoxyäthanol,
3-Butoxypropanol, 2-ButoxypropanoI und
Diäthylenglykolmonobutyläther.
Beispiele von Dialkylglykoläthern der allgemeiner Formel

R₁O(CH₂CH₂O)₁R₂

worin Ri, R₂ und χ die vorstehend angegebener Bedeutungen haben, sind
Äthylenglykoldimethyläther,
Ä thy lenglykoldiäthyläther,
Äthylenglykoldi-n-propyläther,
Diäthylenglykoldimethyläther,
Triäthylenglykoldimethyläther.der
Methyläther

von hexaoxyäthyleniertem Butanol oder der
Butyläther
von decaoxy-äthyleniertem Butanol.

licvoi/ugte Stabilisierungsmittel zur Verwendung im KaIimen der Erfindung sind

Methanol. Äthanol. Isopropanol,
Propanol. 3-Propoxypropanol.
Dia thylenglykolmonobu ty lather oder
Älhylenglykiildimethylälher

Methanol. Äthanol und Isopropanol werden /iir Verwendung im Rahmen der Erfindung besonders bevorzugt. Methanol und die von Methanol abgeleiteten Stabilisierungsmittel sollen wegen ihres giftigen Charakters nicht in wäßrigen Enzympräparaten verwendet werden, die in den Körper gelangen können.

Die enzymstabilisiereiiden Verbindungen, wie sie

Ta be I lc I

vorstehend beschrieben sind, können in den erfindungsgemäßen Präparaten in wirksamen Mengen verwendet werden, die im Bereich von etwa 2 bis etwa 27 Gew.-"/», bezogen auf das Gewicht des Präparates, liegen.

Um jedoch optimale Stabilisicrungswirkungen während langer Lagerzeiten bei hohen Temperaturen zu erhalten, sollen die Stabilisierungsmittel in den nachstehenden Anwendungsbereichen benutzt werden. Die bevorzugten Anwendungsbereiche, wie sie in der nachstehenden Tabelle 1 für Methanol. Äthanol und Isopropanol angegeben sind, verleihen den wäßrigen Enzympräparaten eine solche Haltbarkeit, daß etwa SO"·'» EnzymaktiviüH nach 5wöchiger Lagerung bei 38 C vorliegt.

Stabilisierungsmittel	Anwendungsbereich	Bevorzugter Anwendungs
	!Π llC\V.-'"n	bereich in tiew.-"/,,
	des lin/ympräparates	des lin/ympriiparatcs
Methanol	ΙΊ-27	17-25
Äthanol	3-1')	6-18
Propanol	2- 8	-
Isopropanol	4-22	⁽) 20
3-Propoxy propanol	8-17	-
Diätlivlenglvkolmonobutvliitlier	8 17	-

Wasserlösliche nichtionische und zwitterionische D..crgentien können als gegebenenfalls vorliegende Bestandteile benutzt werden. Diese Dctcrgcniien erhöhen die l.agerstabilität der im Rahmen der Erfindung verwendeten Enzyme und verbessern die Detergcnskennmcrkniale des Präparats signifikant. Wegen dieser wertvollen Merkmale wird es bevorzugt, nichtionischc und zwitterionische Detergentien den wäßrigen Enzympräparaten gemäß der Erfindung, insbesondere denjenigen mit einem Gehalt an ct-Amylase. einzuverleiben. Die nichtionischen und zwitterionischen Detergentien werden in Mengen von 0 bis 15%. vorzugsweise 4 bis 10%. bezogen auf das Gewicht des Enzympräparates, verwendet. Wird Λ-Amylase verwendet, so werden 2 bis 15% des nichtionischen oder zwitterionischen Detergens bevorzugt.

Beispiele geeigneter nichtionischer Mittel zur Verwendung im Rahmen der Erfindung umfassen:

(1) Die Polyäthylenoxidkondensate von Alkylphenolen. z. B. die Kondensationsprodukte von Alkalphenolen mit einer Alkylgruppe. die etwa 6 bis 12 Kohlenstoffatome in gerader oder verzweigter Kette aufweist, mit Äthylenoxid, wobei dieses Äthylenoxid in Mengen vorliegt, die 5 bis 25 Mol Äthylenoxid je Mol Alkylphenol entsprechen. Der Alkylsubstituent in solchen Verbindungen kann beispielsweise von polymerisieriem Propylen. Diisobutylen. Octen oder Nonen abgeleitet sein.

(2) Solche nichtionischen synthetischen Detergentien, die aus der Kondensation von Äthylenoxid mit den Produkten stammen, die durch Umsetzung von Propylenoxid und Äthylendiamin erhalten werden. Beispiele hierfür sind Verbindungen, die etwa 40 bis etwa 80 Gew.-% Polyoxyäthylen enthalten und ein Molekulargewicht von etwa 5000 bis etwa 11 000 haben und aus der Umsetzung von Äthylenoxidgruppen mit einer hydrophoben Base stammen, die aus dem Reaktionsprodukt von Äthylendiamin und überschüssigem Propylenoxid besteht, wobei die Base ein Molekulargewicht in der Größenordnung von 2500 bis 3000 aufweist: solche Verbindungen haben sich z. B. als zufriedenstellend erwiesen.

(3) Das Kondensationsprodukt eines Mols aliphatischen Alkohols mit 8 bis 22 Kohlenstoffatomen in entweder gerader oder verzweigter Kette mit 5 bis 40 Mol Äthylenoxid, z. B. ein Kokosnußalkohol-Äthylenoxid-Kondensat mit 5 bis 40 Mol Äthylenoxid je Mol Kokosnußalkohol, wobei die Kokosnußalkoholfraktion 10 bis 14 Kohlcnstoffatome aufweist.

(4) Unsubstituierte Amide und Monoäthanol- und Diäthanolamide von Fettsäuren, die Säurereste mi; etwa 8 bis etwa 22 Kohlenstoffatomen aufweisen. Diese ArvlrPStP Iritrn sirh ühlirhfiru/pic νιΛη notiirli^h vorkommenden Glyceriden (z. B. Kokosnußöl. Palmöl. Sojabohnenöl und Talg) ab. können aber auch synthetischen Ursprungs sein (z. B. solche, die durch Oxydation von Erdöl oder durch Hydrieren von Kohlenmonoxid nach dem Fischer-Tropach-Verfahren entstehen).

(5) Langkettige tertiäre Aminoxide der allgemeinen Formel

R'(0R⁴)

ve

N R³

worin R¹ einen Alkylrest mit etwa 8 bis 22 Kohlenstoffatomen. R² und R³ jeweils Methyl-, Äthyloder Hydroxyäthylreste, R⁴ Äthylen und π = 0 bis etwa 10 bedeuten. Der Pfeil in der Formel ist eine übliche Darstellung einer semipolaren Bindung. Spezielle Beispiele der Aminoxiddetergentien umfassen: Dimethyldodecylaminooxid und Bis-(2-hydroxyäthyl)-dodecylaminoxid.

(6) Langkettige tertiäre Phosphinoxide der allgemeinen Formel

RR R"P^ O.

worin R einen Alkyl-. Alkenyl- oder Monohydroxyalkylrest mit 10 bis 22 Kohlenstoffatomen in der Kettenlänge und R' und R" jeweils Alkyl- oder Monohvdroxvalkvl-

Gruppen mil I bis 3 Kohlenstoffatomen bedeuten. Der Pfeil in der Formel ist eine übliche Darstellung einer semipolarcn Bindung. Beispiele geeigneter Phosphinoxide sind in der US-Patentschrift 33 04 263 angegeben und umfassen: Dimethyldodecylphosphinoxid und Bis (2-hydroxyäthyn-clodccylphosphinoxid. (7) I.angkeltige.Sulfoxide der allgemeinen Formel

ΙΓ S K"

worin K' einen Alkylrest mit etwa IO bis 22 Kohlenstoffatomen, 0 bis etwa 5 Ätherbindungen und 0 bis elwa 2 Hydroxylsubslituentcn bedeutet, wobei mindestens einer der Reste R' einen Alkylresi darstellt, der 0 Ätherbindungen und etwa 10 bis 18 Kohlcnstoffatomc aufweist, und worin R¹' einen Alkylrest mit I bis 3 Kohlenstoffatomen und I bis 2 Hydroxylgruppen ist. Spezielle Beispiele dieser Sulfoxide sind: Dodecylmethylsulfoxid und 3-rlydroxytridecylmethylsulfoxid.

Die zwitterionischen synthetischen Detergentien, die erfindungsgemäß verwendet werden können, sind allgemein Derivate aliphatischer quaternärer Ammonium-, Phosphonium- und Sulfoniumverbindungen, in welchen der aliphatische Rest geradkettig oder verzweigtkettig sein kann und worin einer der aliphatischen Substituenten etwa 8 bis 22 Kohlenstoffatome enthält und einer eine anionische, wasserlöslichmachende Gruppe aufweist,/. B.
Carboxy-, Sulfo-, Sulfato-,
Phosphato- oder Phosphono-Gruppe.

Beispiele von Verbindungen, die unter diese Definition fallen, sind

3-(N,N-Dimethyl-N-hexadecylammonio)-propan-l-sulfonaiund
3-(N,N-Dimethyl-N-hcxadeeylammonio)-2-hydroxypropan-l-sulfonat.

Hinsichtlich weiterer Beispiele zwitterionischcr synthetischer Detergentien, siehe kanadische Patentschrift 7 08 147. Auf diese Angaben in der Literatur wird besonders Bezug genommen.

Mischungen verschiedener nichtionischer Detergentien oder Mischungen nichtionischer Detergentien und zwitterionischer Detergentien können mit Vorteil im Rahmen der Erfindung verwendet werden.

Die verschiedenen Komponenten der erfindungsgemäßen Enzympräparate können in beliebiger Reihenfolge vermischt werden.

Es wird jedoch bevorzugt, die Alkohol-Wasser-Mischung zuerst herzustellen und die Enzyme zuzusetzen, um irgendwelchen Abbau oder irgendwelche Desaktivierung in Lösungen zu vermeiden, die überwiegend aus entweder Wasser oder Alkohol bestehen. Die gegebenenfalls anzuwendenden Deteigenskomponenten können zu beliebigei Zeit zugesetzt werden.

Der pH-Wert des stabilisierten wäßrigen Enzympräparats gemäß der Erfindung beträgt im allgemeinen etwa 5,0 bis 10,0 und vorzugsweise etwa 6,5 bis 8,5. Im bevorzugten pH-Bereich werden maximale Slabilisierungswirkungen erhalten. Der pH-Wert kann mittels einer Base, z. B. Natrium- oder Kaliumhydroxid, erhöht, oder mit einer Säure, z. B. Chlorwasserstoffsäure, erniedrigt werden.

Obgleich es nicht zwingend ist, wird es auch bevorzugt, daß diesem Präparat ein Konservierungsmittel zugesetzt wird, um Bakterien und Pilzwachstum zu verhindern. Ein besonders gutes Konservierungsmittel ist Phenylmereuriacetat, das im allgemeinen im Rahmen der Erfindung in Mengen verwendet wird, die etwa 10 bis 40 Teile/Million des Präparates betragen. Es kann ein beliebiges Konservierungsmittel, das mit diesen Präparaten verträglich ist. verwendet werden.

Das erfindungsgemäße Enzympräparat, das Wasser, Stabilisierungsmittel, Enzyme und gegebenenfalls nichtionische und/oder zwitterionische Detergentien enthält, kann als Fleckentferner, Dctergenszusatz oder als Detergensmischung verwendet werden. Das Präparat kann in eine Sprühdose abgepackt und zweckmäßigerweise zur Entfernung relativ kleiner Flecken aus Geweben verwendet werden, oder es kann auch in größeren Mengen als Detergenszusatz Anwendung finden. Dieses Präparat kann an Stelle von Hypochloritbleichmitteln eingesetzt werden, da es viele der Flecken entfernt, die diese Bleichmittel entfernen, und als weiteren Vorteil die Eigenschaft hat, daß es Fluoreszenzstoffe und Weißgrad erhöhende Mittel nicht angreift oder abbaut. Mit dem Zusatz der gegebenenfalls anzuwendenden nichtionischen und/oder zwitterio nischen Delergentien kann dieses Präparat als einziges Dctergcns bei einem Waschverfahren benutzt werden.

Das Präparat ist auch zur Verwendung als Mundwasser geeignet. Das Alkoholstabilisierungsmiiicl. vorzugsweise Äthanol, wirkt als ein Adstringens, während die Enzyme bei der Entfernung von Zahnbehg wirksam sind und Nahrungsmitteltcilchcn aus den Zahnfleischspalten und Schleimschichtcn aus dem Mund entlcrncn.

Die folgenden Beispiele dienen der Erläuterung der Erfindung. Alle Angaben betreffend Teile, Prozentsätze und Verhältnisse beziehen sich, soweit nichts anders angegeben ist, auf Gewicht.

Die folgenden Präparate (Beispiele I bis 29) wurden hergestellt und in geschlossenen Glasflaschen während der angegebenen Zeitabschnitte gelagert. Die Beispiele 1,2, 10 und 24 stellen keine, die Erfindung erläuternden Beispiele dar. sondern «erden lediglich /ii Vergleichs /u ecken angeführt.

Beispiel
Nr.

Stabil isierungsmitle I Gew.-%⁴)

TAE₃(J)AI- HiO cahisc³)

Lagerung Lagerung bei 27 C Lagerung bei 38 C

bei 10 C

Wo- 8 Wo- 3 Wo- 6 Wo- 8 Wo- ό Wo- 2 Wo- 3 Wo- 5 Wo- 8 Wochen then chen chen chcn chen then chen chen chcn

3 5% Äthanol 5

4 10% Äthanol 5

98	85	—	75
99	11	-	50
89	-	98	-
84		95	_

69
91

12

46 69 57 41

Il

12

!■'orlsci/.iing

Bei- Stabilisierungsmittel

(iew.-"/„')

X Reaktivität')

IM) Lagerung Lagerung hei 27 l' lagerung bei 38 C

calase^:) bei IO C

3 Wo- 8 Wo- 3 Wo- 6 Wo- 8 Wo- ft Wo- 2 Wo- 3 ΛΌ- 5 Wo- 8 Wochen dien dien dien dien dien dien dien chen ehe η

I) I: I * Ci 11 J KLMNO I'

5	15% Äthanol	5 I	79	99 -	_	100	-	-	81	70	50
6	5% Methanol	5 I	89	78	-	51	-		33	0	0
7	10% Methanol	5 I	84	90 -	-	70	-		48	9	0
8	15% MeJiiinol	5 I	79	92 -	-	78	-	-	55	29	0
9	20% Methanol	5 I	74	...	-■	-	-	78	-	69	-
10	30% Methanol	5 I	64	_	-	-		20	-	2	-
Il	5% lsopropunol	5 I	89	98	-	83	-	-	54	41	30
12	10% Isopropanol	5 I	84	105		85	--	-	68	48	37
13	15% Isv/iropanol	5 1	79	109 -	-	110	-	-	65	55	36
14	4% Propanol	5 I	90	-	72	-	19	55	-	-	-
15	7% Propanol	5 I	87	-	91	-	54	46	-	-
16	2% n-Butanol	5 1	92	-	76	-	0	36	-	-	-
17	4% n-Hutanol	5 I	90	_	59		0	15	-	-	-
i8	10% Äthanol	I I	88	-	90	-	73	-	59	45	34
19	10% Äthanol	5 I	84	-	HK)	-	97*)	-		61	47
20	20% Äthanol	I I	78	-	HX)	-	--	-		25')
21	20% Äthanol	5 I	74	-	80	-	-	-	-	15')	-
22	20% Äthanol	0 I	79	-	80	-	-	-	-	40	-
23	10% 3-Propoxy-	S i	84		-	-	84**)	-	-	-	-
	propanol
	N.tch 22 Wochen erhaltener Wert.
■"■)	Nach 12 Wochen erhaltener Wert.
+ )	Nach 4 Wochen erhaltener Wert.

Beispiel (iewichts-%

Stabilisieruniisniiltel

HAPS¹)

Alcalase

II.()

24	12%	Diülhylcnglykol- monobulyliilhcr	3.25
25	12%	3-Propoxy propanol	3,25
26	3%	Äthylenglykol- monobutyläther	3,25
27	3%	Diäthylenglykol- monobutyläther
	15%	Äthanol	3,25
28	10%	3-Propoxypropanol	5
29		3,25

95,75 83,75

S3.75

89.75

79
85,75

% Rcstaklivitat	38 (
Lagerung in Wochen hei	4
27 C	-
3 S 12
23
88

KK)

88

89

KK) 84

Fußnoten zu den Beispielen I bis 29:

') TAEii, = I Mol Talgalkohol, der mit 30 Molen Äthylenoxyd äthoxyliert ist.
) Alcalase = ein im Handel erhältliches proteolytisches Enzympräparat mit einem Gehalt an kristallinem Enzym von etwa 6%.

³) % Restaktivität, bestimmt nach der Azocoll-Methode. Die Azocoll-Methode beruht aufder Freisetzung eines wasserlöslichen Farbstoffes aus einem wasserunlöslichen ProteinfarbstolTsubstrat (Azocoll) durch ein proteolytisches Enzym. Die Menge des unter sorgfältig geregelten Bedingungen freigesetzten FarbstofTes wird speklrophotometrisch gemessen. Die enzymatischc Aktivität wird aus der Menge an freigesetztem Farbstoff berechnet. Die Anfangsaktivität entspricht 100%.

⁴)30 ppm Phcnylmercuriacetat wurden jedem Präparat zugesetzt, um Bakterien- und Pilzwachstum zu verzögern. Der pH-Wert jedes Präparates der Beispiele i bis 29 wird auf pH 7,0 gehauen.

⁵) HAPS = 3-(N,N-Dimethyl-N-alkylammonio)-2-hydroxypropan-l-sulfonat, worin sich die Alkvlgruppe von einem Mittelschnitt-Kokosnußalkohol: 2% C,„. 66% Ci₃. 23% C,₄ und 9% C₁₆ ableitet.

Wie ans Beispiel 2 hervorgeht, werden i'mieasen (Alcalase) rasch i:¹ wäßriger Lösung abgebaut und/oder desaktiviert. falls kein Stabilisierungsmittel vorhanden ist. Nach dreiwöchiger Lagerung bei 38 C waren nahezu 90% der Enzymaktivität verlorengegangen. Unter milderen Bedingungen, d.h. bei 10 C und 27 C. war der Verlust an Enz\makiivitäi geringer, aber der Verlust war selbst unter diesen milden Bedingungen sehr wesentlich.

Die Zugabe eines nichtionischen Detergens. TAEw. zur wäßrigen Enzymlösung (Beispiel I) hindert den Abbau und/oder die Desaktivierung der Enzyme bei niedrigen Lagertemperaturen: bei hohen Lagenemperaturen scheint jedoch das nichtionische Detergens die Abbau- und/oder Desaktivierungsgeschwindigkeit der Enzyme zu erhöhen.

Die Zugabe der erfindungsgemäßen Stabilisierungsmittel bei den Beispielen 3 bis 23 und 25 bis 29 führte stets zu einer erhöhten Enzymstabiliiäi bei Lagerbedingungen von tO"C. Um jedoch eine signifikant erhöhte Enzymstabilität bei höheren Temperaturen zu erhalten, müssen die bevorzugten Stabilisierungsmittel, d. s.

Methanol. Äthanol, fYopanol, Isopropanol, 3-Propo\y propanol oder Diäihylenglykolmonobuiyläther in der hier beschriebenen Anwendungsbereichen benutz werden. Die Beispiele 4. 5. 9, II. 12 und I. > veranschaulichen den bevorzugten Stabilisierungscffek der besonders bevorzugten Stabilisierungsmittel Me thanol. Äthanol und Isopropanol bei hohen Temperatii reu (8 Wochen Lagerung bei 38C).

Es wurden die folgenden stabilisierten vväßrigei

m Enzympräpaiate (Beispiele 30 bis 77) hergestellt. Ii jedem Beispiel w iirde das Wasser und das Stabilisie rungsmittel innig gemischt, mit nichtionischem ode zwitterionischem Detergens versetzt und zuletzt dii Enzyme zugesetzt. Die Enzyme wurden in jeden

Ii Beispiel während der Lagerung bei hoher Temperalu (38 C) und während der Lagerung bei niedrige Temperatur (10 C) stabilisiert. Alle wirkten gin nl> Fleckentferner. Detergcnszusäize und als Detergentiei als solche. Die nichtionischen (TAEjo) und dii

2<i zwitterionischen (HAPS) Zusätze erhöhten die Lager Stabilität in jedem ("alle.

Beispiel Nr.	Gew.-%	Isopropanol	3-Propoxy- propanol	Nichtionischer oder zvvitterionischer Zusatz	HAPS^:)	Enzym	Amylasc'¹)	H₂O⁵
		C	D	TAE,,,¹)	F		Il
	Stabilisierungsmittel	_		E	_	Alcalasf')	_
A	Äthanol	-	-	5	-	C)	-	J
30	B	-	-	9	-	I	-	84
Jl	IO	-	-	5	-	I	-	80
32	10	10	-	9	-	I	-	7')
33	15	10	-	5	-	I	-	75
34	15	15	-	9	-	I	-	84
35	-	15	-	5	-	I	-	80
36	-	-	10	9	-	I	-	79
37	-	-	10	5	-	I	-	75
38	-	-	15	9	-	I		84
39	-	-	15	5	-	I	-	80
40	-	-	-	9	-	I	0.	79
41	-	-	-	5	-	I	0.	75
42	-	-	-	9	-	I	0.	83.9
43	10	-	-	5	-	I	0.	79,9
44	10	10	-	9	-	I	0,	78.9
45	15	IO	-	5	-	I	0.	74.9
46	15	15	-	9	-	I	0.	83.9
47	-	15	-	5	-	I	0.	79.9
48	-	-	10	9	-	1	0.	78.9
49	-	-	IO	5		I	0.	74.9
50	-		15	9		I	0.	83.9
51	-		15	5		I	(I.	79.9
52	-		-	l)	>	I		/H.')
53	-				9	I		7-1.9
54						I		S4
55	Kl				I		SI)
V>	Kl			I		"<>
15

15

Fortsetzung

Beispiel Nr.	Gew.-%	3-Propoxy- propanol	Nichlionischer oder zwitterionischer Zusatz	Enzym	Amy läse⁴)	H₃O⁵)
	Stabilisierungsmittel	D	TAEj₁₁ ¹) HAPS¹)		H
	Äthanol Isopropanol		E F	Alcalase¹)
A	B C	G	J

58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77

10 10 15 15

10 10 15 15 5 9 5 9 5 9 5 9 5 9 5 9 5 9 5 9 5 9 5 9

0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1

84

80

79

75

84

80

79

75

83,9

79,9

78,9

74,9

83,9

79,9

78,9

74,9

83,9

79,9

78.9

74,9

Fußnoten zu den Beispielen 30 bis 77:

')TAE_W = Talgalkohol, der mit 30 Molen Äthylenoxyd äthoxyliert ist.

²) HAPS = 3~(N,N-Dimethyl-N-alkylammonio)-2-hydroxypropan-l-suironat, worin die Alkylgruppe vom Mittelschnilt-Kokos-

nußalkohol: 2% C_1n. 66% C₁,, 23% C₁₄ und 9% C₁₆ abgeleitet ist.
') Alcalasc = siehe Beispiele I bis 29.
⁴) Wallerstcin-baklericllc <r-Amylase, Chargen-Nr. 4S46A.
') Jedes Präparat der Beispiele 30 bis 77 enthielt 30 ppm Phenylmcrcuriacetat. Die pll-Wcrle dieser Präparate wurden auf

7,0 gehalten.

Beispiel

Kin stiibiles wäßriges l'n/ympräparat wurde erfin-(liingsgciniiD iius folgenden Komponenten angcsct/.t:

Komponente Gew.-"/.

Alcalasc (6% kristallines Enzym)

TAR₁₀

Äthanol Wasser

Phcnylmercuriacetat

1%

5% 10% 84% 30 ppm

bO

der pH Wert dieses Präparates wurde mit Nairiimiln droxid auf 7.0 eingestellt.

Dieses Präparat wurde für Reihen von f'leckenlferniings- und Waschtesis. wie naehstchcnd angegeben, verwendet. Ähnlich verschmutzte Tücher wurden in wäßrigen Lösungen, enthüllend äquivalente Mengen von IV₄ Bechern einer handelsüblichen Dctcrgcnsmischung (Tide-) in bO.64 i Wasser mit einer Härte von b.7 bei 54 C während 10 Minuten gewaschen.

Das erfindungsgemäße Präparat wurde in der vorliegenden Form verwendet, d. h. es erfolgte keine Verdünnung bei den Durchfcuchiungsvorgängen in der 5. Minute. 30. Minute und nach 3 Stunden. Etwa U₂ ml bis etwa I ml des Präparates wurden direkt auf jeden fleck oder verschmutzten Bereich von etwa 5 bis 10 cm-' aufgesprüht. Die verschmutzten Tücher wurden während der angegebenen Zeitabschnitte liegengelassen und dann in der oben beschriebenen Weise in der handelsüblichen DiMergensmischung gen aschen.

Das Präparat wurde auch als Zusatz /w der handelsüblichen Dolergensmischung verwendet, I.tu a 1.2 ml des erfindungsgemäßen Präparats wurden je 3.7Ή des Waschwassers bei diesen Wasehvorgängen μ rwendcl. Die Ergebnisse sind nachstehend zusammengestellt:

I a	17	Beispiel 78	Mögliche	18 08	70	834	18	5 Min.	30 Min.	3 Stunden
I	Recken	Bewertung				Befeuchten,	Befeuchten,	Befeuchten,
t			Waschen	Waschen	dann	dann	dann
			mit Tide®	mit Tide»	Waschen	Waschen	Waschen
*^}.*				plus Präparat	mit Tide⁸	mit Tide«	mit Tide«
	Protein	80			54	61	68
.'5	Pigment	35			19	21	21
	T-Oberhemd + Kissenbezug¹)	20	30	49	10	10	14
	Synthetischer Schmutz')	10	12	15	5	5	7
^;	EMPA BlutNr. 1I2¹)	10	4	8	8	10	9
	Salatwürze	5	2	1	4	4	4
	Andere Flecken'¹)	25	5	6	17	19	22
	Baumwolltüchcr')	5	3	4	2	2	3
	Hemd kragen⁶»	5	12	16	3	4	2
	Gesamtbewertung	195	I	2	122	136	150
			1	-
		101

¹) StolTstücke uus natürlich verschmutzten T-Oberhemden und Kissenbezügen.

^:) Stoffstücke mit speziellem synthetischem Schmutz.

') Blutgetränkte Tücher, die von der Eidgenössischen Malerialprüfungs- und Versuchsanstalt für Industrie, Bahnwesen und

Gewerbe, Schweiz, erhalten wurden.

^A) Tücher, die mit 5 verschiedenen Arten von Schmutz verunreinigt sind.
^) Reine Baumwolltücher, die zur Ermittlung der relativen Redeposition verwendet wurden. ⁶J Natürlich verschmutzte Hemdkragenslücke.

Die mögliche 'icuricilung für Protein leitet sich von folgendem ab: Ib gesonderte und verschiedene Proleinfleckcn wurden auf jedes Proteinprüftuch aufgebracht. Jeder Fleck wurde nach dem Waschvorgang visuell an I land einer von 0 bis 5 reichenden S.;ala eingestuft. Eine Beurteilung von 5 gibt eine vollständige Entfernung an (die »mögliche Bewertung«), während 0 keine Entfernung bedeutet. Beurteilungen zwischen 0 und 5 geben dazwischenliegende teilweise Entfernung an. Die mögliche Proteinbeurteilung von 80 wird erhalten, indem die 16 Flecken mit den 5 möglichen Bewertungspunkten je Fleck multipliziert werden. Die möglichen Bewertungen für die anderen Flecken werden in gleicher Weise berechnet. Die Gesamtbewertungen

)o sind ein Maß für ein breites Reinigungsspektrum.

Die Zugabe des erfindungsgemäßen Präparats zum Waschwasscr, das das handelsübliche Detergens enthielt, erhöhte die Bewertung (Tide®+ Präparat) gegenüber dem Waschen mit Dclcrgcns (Waschen mit Tide*)

i^ri um etwa 40%, woraus ein signifikanter Vorteil bei der Reinigung ersichtlich ist. Wendete man ein 5 Minuten dauerndes Durchfeuchten an, so wurde die Gcsamtbewertung (5 Min. Befeuchten, dann irischen mit Tidc^w) um 70% gegenüber der Bewertung mit Tide® erhöhl.

während ein Befeuchten während 30 Min. oder 3 Stunden die Gcsaniibewcrtung um nahezu 100"/» gegenüber der Bewertung des Waschcns mil Tide® allein erhöht.

Beispiel 79
Fin Mundwas.scrpräpnrat wird aus den folgenden Komponenten angesetzt:

Komponenten	Gew.-"/.
Äthanol	16,50
Wasser	79,10
Monsanto CRD Protease (DA-IO)	2,00
(34% Enzym)
GeschmackstofT, Farbstoffe und Süßungs	2,15
mittel
Natriumhydroxid zur Einstellung eines	0,25
pH-Wertes von 7,0

Die Enzyme sind während langer l.ageriings/.cilriiu-HiC bei relativ hohen Temperaturen stabil. Die Mischung isl /iir Entfernung von /ahnbelag von den /ahnen.

Nahriingslcilchcn aus /ahnfleisehspalicn und Schleim belag im Mund brauchbar.

I» e i s ρ i e I KO

Im wesentlichen gleiche Ergebnisse wie in dun mische an 1Stelle von Alcalase und Monsanto CRI)-Pmvorstehenden Beispielen wurden erhallen, wenn man lease (DA-IO) verwendete, in dem die Enzyme in clic folgenden En/vme oder handelsüblichen Enzymge- wäßriger Lösung stabilisiert wurden:

Subiilisin. UPN', Elastase, Keratinase.

Carboxypeptidase, Aminopeptidase, Aspcrgfllopepiidase A.Aspcrgillopcpiidasc B.

Collagenase. Chymotrypsin. Trypsin.

Pepsin. Pu pain, Bromclin, Maxatase, Proicasc B-4000, Proicase AP. Alcalase.

CRD Proicase. Viiikasc. Pronase-P.

Promise-E. Pronase-AS. Pronase-AF, Bioprasc. Rapidase P-2000,Takamin.

IITproleolylisehes En/ym 2000. En/yni.

I.-W. Rhozym P-I !-Konzentrat. Peotinol.

Rh(i/yni PF, Rho/ym J-25 und Amprozym 200. Im wesentlichen gleiche Ergebnisse wie in den verstehenden Beispielen wurden erhallen, wenn ilk· übrigen vorstehend genannten Stabilisierungsmittel anstelle jener in den vorstehenden Beispielen eingesetzt wurden, indem die Enzyme in wäßriger Lösung stabilisiert wurden.

Im wesentlichen gleiche Ergebnisse wie in den vorstehenden Beispielen wurden erhalten, wenn ma·') die übrigen vorstehend genannten nichtionischen tinu /witterionischen Detergentien anstelle des Talgalkohols, der mit JO Mol Äthylenoxid je Mol Talgalkohol

-> iithoxylieri ist. und des 3-(N.N-Dimethyl-N-mittelschnittkokosnußalkylammonio)-2-hydroxypropaii-1 ·
sulfonais einsetzte, indem die stabilisierenden Wirkungen der Alkohole und Alkoxyalkohole erhöht wurden.
Geniäü den Beispielen 3 bis 24 und 2b bis 78 wurden

in die Enzyme im wäßrigen Präparat stabilisiert, falls kein nichtionisches oder zwitterionisches Produkt in der wäßrigen Lösung enthalten ist.

Ähnliche Ergebnisse wie in den Beispielen 1 bis 79 wurden erhalten, wenn der pH-Wert der erfindungsge-

Π mäßen Präparate auf 6,5, 8,0 und 8.5 eingestellt wurde, wobei die Enzyme für lange Zeitriumc stabilisiert wurden. Die Enzymstabilisierung wurde auch gemäß den Beispielen I bis 79 erhalten, wenn der pH-Wert der Präparate auf 5.0.9.0 und lO.Oeingesieü' wurde.

Hierzu 1 Blatt Zeichnungen

Claims

IO 15 25 Patentansprüche:

1. Stabilisiertes, wäßriges Präparat der Enzyme Protease, α-Amylase oder deren Gemische, dadurch gekennzeichnet, daß, bezogen auf das Gewicht des Präparates,