DE1417030A1 - Verfahren zur biotechnischen Gewinnung von Aminosaeuren - Google Patents

Description

• Verfahren zur biotechnischen Gewinnung von Aminosäuren

  Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur biotech-

  nischen Gewinnung von 1-Glutaminsäure durch Züchten von rIikro-

  or,aiiismen in einem assimilierbare Kohlenstoff- und ßtickstoffver-

  bindungen und anorganische Salze enthaltenden Nährmedium bei pil 6

  bis J .

  Werden i..Lil,-roor@anisrien in einem geeigneten Medium G-ezüch-

  tet, so bilden sicl bekanntlich verschiedene Arten von Aminosäu-

  rE;ii. Die erzeugte L.e%e ist jedoch bisher vergleichsweise sehr

  Ler.t@;, und es sind, keine Berichte bekannt geworden, daß irgend-

  eiiie besondere Aminosäure in größerer Menge in dem Medium nach

  einem üäzun@svez-falireri gebildet worden ist.

  Der Grund für die großen Schwierigkeiten, die die Ansamm-

  luti#j voll Arilirlosäuren in biologischen Systemen bereitet, ist auf

  die Tatsachen zurückgeführt worden, daß Aminosäuren die Bestarid-'

  teile von Proteinen sind, und daß jede in einem Medium üer:estellfi

  te Aminosäure zur Resynthese von Proteinen, Polypeptiden oder

  dergleichen befähiöt ist oder aber zumindest dazu neigt, durch

  verschiedenartige biochemische Umsetzungen in andere Substar:zen

  umgewandelt oder dazu zersetzt zu werden. Mit anderen @iorteri:

  Eine Aminosäure kann in einem Kulturmedium nur sci.werlic,'i ir.

  Form des monomeren Zustands gebildet werden. Unter der Bezeich-

  nung "monomerer Zustand" ist in der vorliegenden Deschreiburl"

  ein monomolekularer Zustand zu verstehen, bei dem die riosäw.-

  re als freie Säure oder als Salz vorliegen kann.

  Aus den vorgenannten Gründen vor allem ist ein Gäruni-s-

  verfahren, also die direkte VerwendunL; der biolcisc'r_ec @iir:=sar.:-

  keiten lebender Mikroorganismen zur Biosynthese und Arisar:r-luri.

  von 1-Glutaminsäure bisher noch nicht vorgesciila@erl @rore-:_. :i e

  bekannte Biosynthese wird in bestimmten enzymatischen S@;tstEY.e@@

  ausgeführt, d.h. es wird zunächst ein besonderes au::i-

  kroorvanismen oder aus tierischen oder pflanzlichen @es:re'@cr-, eX-

  trahiert, worauf das Enzym mit geeigneter- Substraten, z, L. n.it

  4.-Ketoglutarsäure und Ammoniumverbindunde..L, unter sehr @@:z°er:z-

  ten Reaktionsbedingungen umgesetzt wird.

  i

  Ein älterer Vorschlag zur Herstellung vori AWiriosL*iuren

  auf biotechnischem liege richtet sich auf die Züchtun - eines

  Stammes des Aspergillus tarreus unter aeroben Bedingungen in

  einem wässrigen Gährungs=Nährmedium und die Abtrennung der

  Glutaminsäure, nach dem das Gärungsmy sei der S;urehydrol# se

  'unterworfen worden ist. Hierbei wird die Aminosäure fast üus-

  schließlich im Myzel geoildet, zu dessen 111,ufscüluß naturgem@@i:@

  eine Säurehydrolyse unentbehrlich ist. Die--er weitere verfc,it,

  rensschritt macht jedoch das Gewinnungsverfahren komplizierter

  und kostspieliier, was jedoch angesichts des steigenden Bedarfs

  an derartigen Aminosäuren von besonders großer wirtschaftlicher

  Bedeutung ist.

  In Erkenntnis der Nachteile der bekannten Verfahren

  schafft die Erfindung demgegenüber ein Verfahren, welches in-

  folge seiner grundlegend neuartigen Ausbildung zur Erzeugung

  wesentlich größerer Mengen von Aminosäuren in besonders sinn-

  voller und überaus einfacher und damit auch wirtschaftlich

  vorteilhafter Weise befähigt ist.

  Diese Vorzüge der direkten Erzeugung von Aminosäuren,

  insbesondere 1-Glutaminsäure, im Nährsubstrat werden gemäß der

  Erfindung dadurch erreich, daß man als Mikroorganismus B.

  subtilis, B. natto, Bacillus megatllerium, Pseudomonas aerugino-

  sa, Aerobacter aerogenes, Escherichia coli ldr. 116, Ilr. 128,

  lir. 165, i:ikrococcus glutamicus lir. 416, Streptomyces tariashien

  tis 11r. 1056, Nr. 2143, Saccharomyces cereviciae lir. ü13,

  Torupopsis utilis lir. 812, Z"Jygosaccharomyces major, Aspergillus

  oryzae lir. 3181, l;r. 3216, Ilucor javanicus Nr. 3423, Fenicilli-

  um chrysogenum I;r. 4235 oder auch mit Ausnahme der Stimme des

  Aspex L,illus terreus sowie der in der deutschen i=ateutscllrif t

  1;r. 1 088 447 defifiertei. Zikrococcusart "[email protected] g@uta-

  iiicus" Lzw. "Ilihrococcus 534" oder dessen Ilutanten solche wei-

  teren IlikroorLaiiisnen verwendet, welche

  1. Gie I';:.i.l_cit zur r_lduii@ vor-I;etoclutarsäure

  aus I,Lhleii:, cirateii

  ciiie sti:@-.;@: 1-ülui,äI::I11StiLlrE-C1G:y c.uo@euä@e-i@l@tvvität

  .,ur i't 1-,lui=ti ; ei@ Aninierunr, #:c-i' 6C-__etcL-lutarsäure,

  wobei i:-: eiiif:i. von O bis @ auf-

  @'ec::tcr__:@i@ci_ ::irc., Lc;:ie -

  >. die L,`ähi"yheit besitzen, größere l',lengen 1-Glutaniinsäure

  durc;i die Zellwand hindurch ins ledium abzugeben.

  lach einer. weiteren ierkmal der Erfindung haben sich

  zur Verwenc'ung in dem neuen Verfahren 1.likroorganismen folgen-

  der Gattungen als besonders vorteilhaft erwiesen: Bacillus,

  1,1ikrococcus, Pseudomonas, -'L'orulopsis, hhodotorula, Aspergillus,

  i'ucor oder Streptormyces.

  Lie i@ilrooranisr.@eil, die den srezifischen Anforderungen

  dieses er firidungseemäßen Verfahrens L:enüGen, sind au er ordent-

  lich weit verbreitet. Sie sind- nicht auf besondere systemätiscli

  Gruppen bescl_rärikt, sondern sie finden sich ebenso unter den'

  hal@ter ier@, .!e! en sowie unter den PJ.lzen. Aus diesen Gruppen

  sind ir., fclbeL.c?ez-i nur einzelne besonders wesentliche Beispiele

  ,eraus@Egriffen worden:

  Lahterieii:

  _:acillus (insbes. ;3. su' tilis, B. natto, I3, megatlierium),

  1.@C)Glur:, :scl.erici-_ia (insbes. Z. coli), Proteus,

  o,Fseudomonas eptor:: , cos ( C ^), (insbes. i

  aer i@;:iirosa ), n@ctc:acter, , i-icrococcus (insbes. l.=. tlutar.:icus ),

  Aeroäücter (insbe. aerobenes), Sai:.@ciiella, Lactobacillus;

  i

  i

  I

  ä=cc@@aror_:;,-ccs (ir_s'@@.c. @. cerev_ci@:c), lichia, Gci-..izosacciiäro-

  r.:@cES, lorulasis (i:-.si:Es. i. utilis), .;:@=ociutcrula, En6.or°"*ces,

  `@;osaccrarcr::`-ces (ii@s@:es. Z. riajor ), @-@ 1l ia, -;'coderr"@c, 1crül- .

  1 @ CA f I

  ail@e

  i-_llcor (iilsbeS. 11. javal7.icuS), .i111@@@uS, £1sperr;illus (inS;@vS.

  A. or.l--ac), iieur os porä, i'enicilliuni (insbes. P. clir# so#eriur_1) .

  Diese Gruppen enthalten lilliY'OUraniSITleTI, die die oben erir@@tiiitet-_

  )e-i c)iocae'aisczien l'orderun#-en erfüllen und für die ..er stel-

  L « deu

  lull.- Voll 1-Glut:_#_@iTIS#Ltre eIi,!1..üer VUrllee"i1C-.eil .t'@rfl@lduil. Ver-

  iL._b #Y' ;@1.nOä.#U --il Ui- litlbeLTIC:T- u@ltez'sclüedlich sein! l#ÜT#ilerl.

  .Ule rrL1fu"tl", Gle-seY' 1-11LY'UOT'-dT@1@@eT_ aui: ihre @-i1.ridl_li-Lel

  -.;T. t'._11::r1'.Lt --uI' 'i1Üuii:@@ von o£-i@e to.-1-L. tarüw@@Y'e aus i@t@leTl-

  1.ij'Clratett in de-L. sp'cer ez'lictterten Beispielen ir,i einzelnen

  äescliriebeii. Die Stärke der 1-Glutariinsäure=Dehydrogenase-Ak-

  tivit4:t, hauptsächlich die Aktivität einer bestimmten -tasse

  zur rei.'@u'Ltive@t 1"i..tinieru@l der ixe tolutar saure ist en.- mit

  @@U'1'E@1= 2`- @ü1'",ä01 E; Z 't' Jilc.L@Tl VOTll-CY11.1-E.üTI_1@@S@@UT'e v er'JUnderi. Solde

  1 Ei 1 1 w - e m T aT#islaus sind sehr wic_L-

  t-# @:r Volt i-G@@t-ta@zinsäl@re.

  E#. s tttY'su?-Lr@ t l@aT@Tl in äe@annter :eise

  (iLI I: sein, ca 3 es @i1' :@aciisdes je.-eilige @:

  i @=r'o0r i)es@[email protected]@'@,

  4@11z'.@ ts üol-@'T:: 1 @urc:1 der @eeeilien @i.trc#or@;anisr@<us ZU

  lkr-I#l-er voll sticll-stoffhalti@-en

  4i;!;SGTi@:.@, ü«c@-'@«lii@:ci--,en ubstaiizeii oder sonsti-eri bekannten

  4@L{@)@@u-aIl:::-., @tr :1i Ut'@"-n1S@US @-rfor(,_erl-! C_1 @1iiC!, "u LeE_1

  c;Jell iieY'deil. Der @i011le@i1@`C@rat@@@fluech.üel eines j

  @i.@t;J iveivt @-@ all"erteill.eit zur ildurl; von or;anisc:ien

  ;,juF)Ntr,-=t saue' Lid- clion, s wur= le @euriden, cla

  von l-@"1Llti;r.irl.s@@ure -k.}etY'äcl:Ilicri durch den plI-@Jert

  des Substrats im -ierlauf der Ga,run.- beeinflußt zrgr-ü. Juieil-

  dun-- wird i;eür'@sti,t, wenn der pI-#-iert epischere @, c.1_-# ,v

  einestellt wübei der optirlale art @:: w üciyei@ eti@a

  7,C 1 i - ü,r .. n

  utra- lley .'eL=;_a der vorliebeLden .rf-ir.:Iurz :.rt f_Er

  H-@'ert z,,!ecLr_@a@i _erjreise üurch U_va't@ eir_Er 'verq@Inc L<<-,z;,

  @ntlt, L _f cer_ =-'cci:c=_ ycn

  6,5 bis 3,5 unduf diese :iL-l'se 1-111't; G- E

  bebildeteJ--l'.etolutar:@"@uy°E .. @ir,_-# cr@ei@ l( sis@,r-o __

  Stickstoffrest durcl die .iT@:uri der .t=_i:@= a_

  der

  enthalten ist, ver'turcen, die @:c@üi@@ @cr. 1-_d-uzt

  bewirkt. Ir_-_ol. E ü.er- stav=ei_

  säure-Leiiydro=enase der

  des optimalen r=-'@,ereicls T.i-raerl eUe

  f °-

  :jünschten 1 eber:r°e@,_+>icr_e_ . @rriiiert, so dIc @ut#

  rebilct'un;# @.@#.et-#_iJr c:_erz@süct#reakticr-ci# er, e- t #._-s

  G:,:Z _-i-

  dun- voü t-Lü t .@@i<xspa'e i_ _rc;"er i:ene

  ,uS@@r:.i':Ci_

  des werdet. inGCc@ Jll 1 t_6 r_

  ubstrat die erforüerlics:e i@er:.e an=r_er@i@i==_icr_c_

  werden. iieerlelr@sa@le üerwenciun@ vcrl .Al--

  hallen liegt ejerifalls inr=erhalt ües Z--ereic-_s c_er e@rl@@6r@t3.@r@

  :Ir f i n dunT .

  iiie iz, uem ;Lastrat an@[email protected] üüEZ,

  deren Salz wir«--t axac_@. einem f*:ierfiir ;eeibl@eta@_FT=a=__tcil -lea_

  :fahren bewoizrieiä, z.3. nac-: einem

  .gas errlucuriseüiä@e `verfair.r@ ist aUct_ tuL@

  anderer Aiiinc:ureii als 1-Ülutari.risi#ure Y:i@@.cüu.sür. : s -L-_>iüieri

  z.B. solche Grranismeu ausgewählt i-:erderl, diel -r@etGsic#r-eil,

  wie Brenztraubensäure, Uxale-siGsäure usw. aus Kohlenhydraten

  bilden und außerdem eine stake Aktivität für die reduktive

  Aminierunä der genannten oL-I-'etosäuren haben, wobei die erst-

  sprechenden Aminosäuren, wie z.B. Alanin, Aspargiiisäüre usw.,

  in dem Substrat durc:= @cei,nete pr@-re@;elun des G@irunsmediums

  L,ebildet und anehüuf t werden könne(,.

  Zum besseren Verständnis der vorlie,-,#eudeu ürfindun

  dienen die fol;enden Beispiele, jeweils in Verbindung des i

  Verfahrens mit. der Ilerstelluii.,- von 1-Glut,minsäure:

  Beispiel -1

  Verschiedenartite I«iikroor-;anismeii i.;urdeii auf äse beider:

  oben er@,räiil@teil spe-ifiscüen biociE:_:.iseileil @@'üii@i_citeti unter-

  - ,;

  sucht, und es wurdet.cei@:r@etc [email protected]

  den spezifiscaen biocaer.iscaen VoraussetzucLer_ l;urder_ ;je

  folgt untersucht.

  Das trerfa:_3'ei: Zur Er*1Ifui-i.der zu= :il@_uri voll

  NL-iL-eto@lutarsäni-c aus @oi_lellii5.c@rate@ ist de:

  h,e:.u wurde Z.3. e_n Stare: durci. Schütteli_ultur iii einem flüssi-

  t.en @rec:-.um C--ezüc#.tet, das Zuckersubstanzen unü andere 'di.rstoffe

  et_taielt. Die @ewütaci=te Säurc murde nach papiercaroria-

  torapüiscaeT_ *-erfaaren urtersuc:_t; weist( Iioti:etlc@i, wurde auci

  die color--nel.2'.-:LSc_=G- ^@,:antlta@:' G @@II13 se üac:_

  a2i`eWeilGOt.

  r=ehüET'@ V @@i @-het@aütar#

  aus `ei-l3211t, >licher

  LInn Z:""ti >@t? 4iG 1-Glutarüns.rc-De_:#Täreetiase-@rlz tit it'@,T

  auf dl-

  der rEQL@i,-tlveti @ur:ii@r;;I:;_@^

  _. _=-@kei@: äei°o@-@=ct;.@@.utarsäurt @etr_::i... ü---e

  durch Ammoiiialsahsorption in einem @,tealztioiiseriisch, wie unten

  beschrieben, mit der intakter. Zelle oder dem intakten Tiysel

  durclibefüt@rt. Die -,uaiitative Untersuchun ` der AmmoniakaL-

  sorption wurde na ca dezi in "i:icrodiffusiori Analysis and

  Volumetric Error" (L.J. Conway, London Crosby Lockwood and

  Son Ltd., 1950) beschriebenen Verfahren durchgeführt.

  Lin zu untersuchender l=iliroor,-anismus #.:urde aber

  Sciüttelkultur in einen Suüstrat unterzogen, welches z.B.

  Glucosebouillon, I@oji-Lytralt oder Czapek-Lösuncwar, und

  nach 20- bis 40-stündiger: 'fiüc'fiter: wurde die 'LJ'elle oder das

  :.ysel aczentrifugiert und mit 'Büsser "ewasclierl. Zie Zelle oder

  c'as iiysel t:urden dann irl einer Pliospfat-Fufferlösung vom pll-

  ;Ert S suspendiert. Las zur Untersuclung der @eriannten EnzyN-

  Gl@,tivität verwendete i@ea-tior@s:eT::iscil @i r folgei)ües:

  `.'a@e11e 1

  dcs -_teekticT.Ls"-emisciles

  Y'ez-,iicndete Men",e

  1 ccr:

  r--::etc._iät'1-;(.:ni1c-L_'c-2@@ ..:[email protected] 1 ccm

  [email protected] 1 CCTri

  1v C

  ..e_l@t

  ,@eiaici: (fcuc__te l_-J@.'-@J :.:V/cc::. 1 ccTL

  i==csjüat-rufferlc 1/1: A . 1 5 CCTTi

  ., cc1@

  .üer p@i-@r-t des@eahtions,erisclies vlurde auf j,0 ein-e-

  #-tollt wund dieses aus 10 cctl, auf;eiillt.

  hs i"urder. zuleiclier Zeit zwei Ver-leiciisversuche an-

  Vestell-t. gei der ehien Lösun4 i.urde Glukose und bei der

  mLC'ererl -ösun;; sowohl Glukose als aucl-l@k-l@etoglutarsäure aus

  dem obigen Reaktionsgemisch weggelassen. Die letztere Vergleichs-

  lösung ergab die zugrundeliec;ende l Biene an Ammoniaka'osorption

  bei dieser @j.itsetzun. Jas .@ealtionseiaich wurde 1 Stunde lang

  ;gei 37°G s-te'tetielasse-@l. Die 1_ene des: veri@rauclitenAt1tr@;otlial@s

  de -ze"::essen, ut1 üic #enannten@lz#i::a?_tiritten zu -##estimrr.eri.

  sinCz iL1 1'abolle @.L@SciIIll':I@@l@°Stellt.

  wurde gemessen, um die genannten Ensyaaktivitäten.$u bestimen.Die-Frgebnisse Bind in Tabelle 2 iusammengestellt. -

  Tabelle 2

  ' Ammoniakabsorption (jelacm)* '

  Organismus -

  ReaJctiona- 8eaktions_ Stärke

  . emisch (a) gemisch(b) der En-

  ' Glukose Zkei e Glu- sy@akti-

  enthaltend) kose)- - Tität -

  N l. Bacillus subti@.is Ia. 3369 28 5 +.

  (ATCC ' Nr. 15z44)

  2. Bacillus natto r. 3349 . ' 16 -

  (ATCC Nr. 1524y - . - . :,;..

  3. Bacillus ne atherium Ir. 3345

  (ATCC Nr. 1A77) 15 . - ,_- . ..=4 +

  . .1.:

  4. Ps eudomonas aeruginusa Er.3951 . _ . - .- . . , ;

  (ATCC Nr. 15246) 35 ._.5 5. Aerobacter aerogenes Nr. 3060

  42 - . . = ( =

  (ATCC Br:.1524? . .._., . .. _ _ -

  6. Escherichia coli Er. 116 18 - - = _ - : - 5 - .

  7, w - ir. 128 (K-12) , 52 ' -_ . -12 _` _ - - +++.

  w - Kr. 165 32 $ . " . _ . .- ++ .`

  g. Micrococcus g1utaaicus Nr. 534 y8 ' .. - - . --16- +++++;(ATCC Nr. 13032) .

  Micrococcus glutamicus Nr. 416 82 14 : - - : .++ h

  11. Streu tomyces tansahiensis gr.1056 42 . - :.@. - . . : .5_- _ : - - --_ - ,--_

  (ATt: Nr.15238)

  12. Streptomaces tanashiensisb.2143 17 : _ . -. . . . 4

  13. Saccharomacee cerevicise Ir.618 4 @+

  (äTCC Nr.15248)- _

  14. ru o ais uti#,ie Xr.812 62 .# "i6

  WC r.152391-

  15 . accharoa es ma jor g.5601 . 42 ,#,#,

  UM, Nr.15249

  16. Aapergillus orysae h.3181 . 26 . 12

  17' (ATCC Nr.15240) xr.3216 :. 46 . .-.:.:,:.. . 16

  .1 l,Nun ei r@242@ Kr.3423 48 .. @:.:@ ,14 - - . - .-+++ z

  19." Penioillium chrxsegeua h.4235 32 . . . . . 12 - - -:

  204 Peslcillium [email protected] _ . . s. . . - .

  (AM gr.15241)

  Die i@ex:Ge des &,sorbiert:er.@ot@a'<_s i:uree n ech f ol,,ender

  Gleicl@un@ berec_net:

  Imiizouiahaüsorftiotl = (Gefundene rleli`e) - (zu4'ruriö("Lelle-te Henbge)

  Die zu--runde,t-;le@;te:[email protected] dera:@@ot.iahabsor,tietl ist "eieben,

  wellnd-1,eto,-ltitarsäur e und Glukose aus dem vollatäildi@@eri

  [email protected] weL;i#,elasserl werden. Die einzelneu Worte der

  zu.rundegeleLteii Ieni_-e des ai)sorbierten kruictiial_s sind riicl_t

  in dieser Tabelle aufLefücirt.

  *+ stellt 1 -)is 20 j CGr AI:li:ainiakabsL-rc.tioii i21 eine'.:I .

  I@eal@tions@er@' s c:: (a ) dar.

  Die

  2 auf,..tfä!.rteti zr@e::.I.=:se zeiLz-ct=, da:.J t~ic

  Stä11:E der

  jede':. Stamm sei st innerhali: ücr L-leicl--eti Art starr. veränderlic:1

  ist, und a@ic@er@:rseits, c- a# ätellur=:i

  in System und der litärf.e der Ltlc;;r"uir_1@2@@ ;_c* te:@t. Ls

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  In Tabelle 3 sind die Mengen an 1-Glutaminsäure ange--eben, die durch Mikroorganismen mit starker zduktiver Aminierungsaktivität und durch solche, die diese nicht besitzen, gebildet werden. Die angesammelte Menge an l-Glutaminsäure wurde nach dreitägigem Schütteln der Kultur analysiert.

  Tabelle 3

  -----------------------------------------------------------

  Organismus Stärke der Bildung von 1-Glutamin-

  enzymatischen säure (m 100 ccm)

  Aminierung Substrat A* Substrat

  B**

  ------------------------------------------------------------

  1. Bacillus subtilis Ilr.

  3369 (ATCC Nr. 15244) ++ 420 - '

  2@leysr,nltl" 51)r. 3349 + 40 -

  3. Lscherichia coli Nr. 116 + 60 -

  4. Escliericiiia coli Nr. 12c

  (K-12) +++ 410 -

  5. 1_lcroccccus glutamicus

  jlr. 54 (A@'CC 1:r.13032) +++++ 9£30 . -

  u. i:icroccccus c,-luta:#iicus

  r. 41c +++-@- 420 -

  7. Streptcm-ces tatiasliiei_:;is

  @yr. 15L TCC l@r. 1523G) +++ 360 -

  c. ätreptoiace+ariasnieiai;@ i

  :r. 2143 + 40 -

  i

  >. Torulopsis utilis @:r. L12 I

  ( i @C 1;r. 1323: ) ++++ 670 -

  10.hspergillus oryzae _;r.

  3181 + - 30

  11.kspez :illus or" zae '£:r.

  321e: YAHC @,r. 1G@r@-) +++ - 520

  7,40 i

  ci_r- ci_Un_

  -T 4 .

  Substrat 11 ent@lwlt 50 g Glukose, 5 g Peilton, 5 g Karnstoff, 1,0 g i'2I#P04, 0, 1 L h,Ig504. 7T-20 und wird mit Wasser auf 1 Liter aufgefüllt.
• Substrat B enthält 50 g Glukose, 10g Maislaune, 15 1; Amrlöniumsulfat, 1,0 c h2 1'ü4, 0,1 g [email protected] und wird mit Wasser auf 1 Liter aufgefüllt, und während des Züchtens werden knrrioiiial. oder I#'atronlauye in solcher i,Ienge zugee:len, daß cLer pE'-Wert des I.17ediums im Bereich von b95 - 89-5 lie;,t.

  Dach den Er-eänissemvon `.üabelle 5 ist der L',Usairruileri@@an!;

  z-,tischen der Strhe der erizyriatiscierl @@iinierun`skapazität der

  irlta:@teil Zelle oder deS iritakteu i1@ s eis und der tatsächlich -e-

  @ilc'F teil 1-Glutaizins@@ure (d.h. also der An

  narir2luI1g) in C!er

  L'c:iiittell#.ultur@4ärtiiiv offensicltlici. Aus den oben er1Clterier-

  .r.__e'.@nissen 1-.ir#, offenbar, da3 die beiden spezifischer bioche-

  T:1SCü°tl .ii'iti@it@iteil eines iii'äroor@atiisnius eli,e direktee@le'1UT1"

  zur von 1-GlutaiiinsiLire haben.

  @.@e. elr_n :. c.es @ti-;lertes ekles GGrungs:r@lectiuras.

  Lie verweiiCLeten härlrsubstrate waren die gleichen wie die

  ;_l_1' .Le"ulieru11j des -o-'-Wertes des liediunls auf

  2, > während der G-ä rUn @ hÖnnel- alle Arten von Stoffen, äie

  ._=@i iüc:lell t.chstoff erltilalten, L1nCi@rilrloriilimionen bilden können

  ,#u den i;z@-.@el:'t nach der allLaliscllen ,.<'r'eite verscrlieben, Z.b.

  (i;:@2)2i;U, (@@@4)2CG5 usw., veri@;enftt werden. Verschie@-

  @.e<<t. il4)2@;i;4, `II4C1 und i:1141:03, l.-Önnen

  ".:,@a:::rie<< iiüi: 'LaustiseL.t@tl Älkalier1 verwendet werden. Die Haupt-

  ücleutur:der @@e@el un;@,. des pII-vlertes lievt in der Zuführung der

  erforderlichen Lerire TNH 4-Ionen zu dem 1..edium und der leicizei-

  tigen 3egünstiL;uri-; der enzymatischen imsetzunz"dc-ci:S Ansar_ir:-

  luno von 1-Ülutainat. Die Erebnisse siria. in Tabelle 4 aufre-

  iUhrt.

  Tauelle 4

  -----------------------------------------------------------------

  ph IlicIl t

  f ere_elt-____=_='=1

  iiediurrür:,-,arilsroLzs i.en-en von ilen@en von ver- _i.@sbeutE@

  1-Gluta;.=-rI- 1-Glutarir,- ürauc_- f v;.r-

  s r

  S #1,L_ re s@Li'-- te "£- #rduc:-tE

  .#,.# :6ZCv

  cc:":)

  BBacillus siit-Liti,'r.

  7 '" n f l @@ ; @-

  5JÖi (;i.LlrC i.r. 1524r) 2c= @r!J L@ 4

  1 ; , J

  i;icrecüccus = ='.utaEicus

  Irr. 35@(@i`@:%% i:r. 1>'J32) 21;,.% _..., "2

  Torulopsis utilis

  Q12 @C Er. 13239) 23 6l Ü 3f@ @L@J

  -----------------------------------------------------------------

  Asper@illus orjzae

  -;r. 3216 (rTGO ;r. 13240) 11> 52-:i 3e4 15,

  B "ucor javanicus

  j r. 3cJ 15242) 3 34Ü 3, 2 1J ,

  -------------------------------------------------------------------

  (Lieusararel:,vtzung dor Substr=te h L=tzc@. @, sia@'- @_e@eic_@Ei1

  in Tabelle 3).

  Tabelle 4 zeit, daß eine Gärung unter pnauer Uebelung des p11-Wertes für eine beträchtliche Ansammlung von 1-Glutamin.-säure in den wichtig ist, während hei fehlender pWegelung auch der Organismus, der sonst die genannte Säure bildet, diese nict ansammelt.
• i

Claims (1)

1. a tc%taitül-'1''@ r c:rfclirt:ii ";uT' biotecliilieolleil lerc tc.l.L,ull_ üri 1-Glvt: @..@ l@- ur$ von I.likroorl;üiii;:Ineii in @11?E:lt a;lr'[email protected]'@ :_ 1'@: t.LCI:Stoff veroir" uti! ,Ei: und 1.311c@,1'@;cT11 -cLe `.1 I:uci @_l:l @: r.?c ,,@: t!:c:@-_i ,.r.@, I eudomonas @lel'uiilcr@a, f@erobactel@ gar: i'c. ;cne:., @;rlr@i°ic@.'l: coli hr. 116, Iir. 12_E, Er. 165, LI_utz:i._c; :-r. 1;tr,clitomyces t81;@@_lfii!t1.,`; 'r. 10;9, 143 1'c.:..2ac:cereviciae Ur. tAC), Toruror:si s u t1.:1_:i;@ ! Er. me j o1', J :;se I'r. 1 1, Ir.@ 1c 1 : c:c;r.variic;la Jr. 34ü7 i cr@icl 1 i1@;: i @, c ,rys(ii .EU:ui: Er. j=v.v auch lait 1:u:3iiehrne dei' tc;rrE:us ;;u>,[email protected] -:lcr in der deutsche 1i i-atetitsciri.ft ill': 1 Gi: 447 defiii.(3i-teii i:il,.rococcusart "Ilikxö occlis glutar,@i c;us" hzw. "III:.rcc;c.ccus @J" oder äe::sen I_utaiitc:l EolcLE frei tercl: Iil@rc@- organismEl: i E.r%:elidet, welche 1. die fäligkeit zur ßilduU vcri oL-Ketoglutartrurt aus Kohlehydraten 2. eine eterke 1-Glutamipeäure-deliydroLEnase-.Aktivität zur reduhtiveli Ärinierung der,t -I_ctoglutersäure, wobei im l@äürsui@strat einen I--;lert voll G his 9 auf- recl_tr-.:@lial.teri Z:@1cI, sowie 3. i.=: durch dir-, 1=.ellr:alld hindurc.: