DD237660A5 - Verfahren zur herstellung von purinderivaten - Google Patents

Abstract

Es wird ein Verfahren zur Herstellung neuer Purinderivate beschrieben, die geeignet sind als Arzneimittel zur Behandlung von Autoimmunerkrankungen.

Description

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen

Über 8-Aminguanin, eine Verbindung, die seit der Jahrhundertwende bekannt ist, wird von R. Parks, et al., in Biochem. Pharm., 31 (2), 163 (1982) berichtet, daß sie PNP (Purinnucleosidphosphorylase)-Aktivität besitzt.

9-(2-Furfuryl)guanin ist eine bekannte Verbindung, die beschrieben ist in J. Am. Chem. Soc.,81,3046 (1959), wo jedoch nichts über ihre Anwendbarkeit ausgesagt ist.

Die Verbindung 8-Amino-9-benzylguanin wurde auf dem 16. Annual Graduate Student Meeting in Medicinal Chemistry, University of Michigan, Ann Arbor, Michigan diskutiert. Die erfindungsgemäß herstellbaren Verbindungen unterscheiden sich jedoch sowohl hinsichtlich ihres Herstellungsverfahrens als auch ihrer biologischen Aktivität von dem dort diskutierten 8-Amino-9-benzylguanin.

Bezüglich des erfindungsgemäßen Verfahrens beschreiben Ji-Wang Chern, et al „A Convenient Synthesis of 2-N-Methoxycarbonyl-aminooxazolo[5,4-d]pyrimidines" in J. Het. Chem. 21,1245-6(1984). Eine ähnliche Synthese wird beschrieben von S. Ram, et al, in „A Synthesis of Carbamic Acid [lmidazo-Heteroaromatic]Methyl Ester Derivatives Using Methoxycarbonyl Isothiocyanate," Heterocycles, Bd.22, Nr.8, S.1789-90, wo Methoxycarbonyl-isothiocyanat bei einem Eintopfverfahren als Reagens zur Ringschließung eines o-Diaminopyrimidinderivates verwendet wird, um ein Purinderivat zu erhalten, das die Methoxycarbonylaminogruppe in 8-Stellung enthält. Ferner wird der Mechanismus dieser beiden Synthesen diskutiert von Ji-Wang Chern, et al, in „The Novel Ring Opening of an Oxazolo[5,4-d]Pyrimidine and Subsequent Rearrangement to Form an lmidazo[4,5-d]Pyrimidine," Heterocycles, Bd.22, Nr. 11,1984, S.2439-2441.

In keiner dieser Druckschriften ist irgend etwas über die Reaktionsbedingungen angegeben oder darüber, daß Ar eine heterocyclische aromatische* oder substituierte heterocyclische aromatische Gruppe ist.

* (=Heteroaryl->

Ziel der Erfindung

Das Ziel der Erfindung besteht darin, ein Verfahren zur Herstellung neuer Purinderivate zu entwickeln und dadurch neue wirksame Arzneimittel zur Verfügung zu stellen.

Darlegung des Wesens der Erfindung

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Purinderivaten der Formel

in der Ri OH oder SH ist, R₂ Wasserstoff oder die Gruppe NHR bedeutet, in der R ein Wasserstoffatom ist, oder die Gruppe COR₆, in der R6 eine Ci-C₄-Alkylgruppe, eine Aryl- oder Arylalkylgruppe ist, R₃ ein Wasserstoff- oder Bromatom oder eine Hydroxy-,

Mercapto-oder NHR-Gruppe bedeutet, wobei R Wasserstoff ist oder COR₆, wobei R₆ wie oben definiert ist, η 0 oder 1 undmO, 1, 2 oder 3 bedeutet, mit der Maßgabe, daß m oder η zumindest 1 ist, R₄ und R₅ jeweils unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom, eine Alkylgruppe mit 1 bis 4C-Atomen, eine Hydroxyalkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, eine Aryl-, Arylalkyl- oder Cycloalkylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen bedeuten und Ar eine heterocyclische aromatische Gruppe bedeutet, die gegebenenfalls substituiert ist durch Alkyl-, Alkoxygruppe mit 1-4C-Atomen, -C=C-C=C- gebunden an benachbarte Kohlenstoffatome unter Bildung eines annelierten Benzorestes oder Halogen; sowie der pharmazeutisch verträglichen Säure- oder Basenadditionssalze davon, ausschließlich der Verbindung, in der Ri OH, R₂ Amino, R₃ Wasserstoff, η 0, m 1 und Ar 2-Furanyl ist, d. h. der Verbindung 9-(2-Furanylmethyl)guanin.

Die erfindungsgemäß herstellbaren Verbindungen der Formel I können zusammen mit pharmazeutisch annehmbaren Trägern und/oder Hilfsmitteln zu Arzneimitteln mit einer Einheitsdosis verarbeitet und an den Patienten verabreicht werden. Dabei entspricht die Menge der zur Behandlung der jeweiligen Autoimmunerkrankung erforderlichen Menge. Dabei ist es selbstverständlich, daß ein erfahrener Arzt zunächst weniger als die zur Behandlung wirksame Menge verabreicht und die Dosis erhöht bis der gewünschte Erfolg erzielt wird, wobei darauf geachtet wird, daß die verabreichte Menge geringer ist als die für den Patienten toxische Menge

Die Erfindung betrifft auch die Herstellung der neuen Zwischenprodukte und zwar von

1) eine Verbindung der Formel III, in der R₆ eine Alkylgruppe mit 1 bis 4C-Atomen, eine Aryl-oderArylalkylgruppe, η 0 oder 1 und m 0,1,2 oder 3 ist, mit der Maßgabe, daß m oder η zumindest 1 ist, R₄ R₅ jeweils unabhängig ein Wasserstoffatom, eine Alkylgruppe mit 1 bis 4C-Atomen, eine Aryl-, Arylalkyl- oder Cycloalkylgruppe mit 3 bis 6C-Atomen, eine Hydroxyalkylgruppe mit 1 bis 4C-Atomen, eine Aryl-, Arylalkyl- oder Cycloalkylgruppe mit 3 bis 6C-Atomen, eine Hydroxyalkylgruppe mit 1 bis 4C-Atomen ist und Ar eine heterocyclische aromatische Gruppe, gegebenenfalls substituiert durch Alkyl mit 1 bis 4C-Atomen, Alkoxy mit 1 bis 4C-Atomen oder Halogen, bedeutet;

2) einer Verbindung der Formel II, in der R₆, m, R₄, R₅ und Ar₍wie oben definiert sind und

3) einer Verbindung der Formel IV, in der n, m, R₄, R5 und Ar,wie oben definiert sind. Das erfindungsgemäße Verfahren besteht darin, daß man

A) zur Herstellung einer Verbindung der Formel I, in der Ri OH oder SH ist, R₂ NHR ist, wobei R₍wie oben definiert ist, R3 ein Wasserstoff- oder Bromatom, eine Hydroxyl-, Mercapto- oder NHR-Gruppe ist, wobei R Wasserstoff ist oder COR₆, wobei R₆ wie oben definiert ist, und n, m, R₄, R₆ und Ar ebenfalls^ie oben definiert sind, eine Verbindung der Formel III, in der R₆ n, m, R₄, R₅ und Ar,wie oben definiert sind, erhitzt unter Bildung der Verbindung der Formel I, in der R₁OH und R₃' NHC00R6 bedeutet, wobei R_6>wie oben definiert ist, und gegebenenfalls diese Verbindung umwandelt in eine Verbindung, bei der R₁ S oderSH ist nach Verfahren, die bekannten Verfahren analog sind, und soweit weiter erwünscht, wenn R₃' NHCOOR₆ ist die Verbindung* in eine Verbindung umwandelt, bei der R₃ Wasserstoff oder NHR ist, wobei R Wasserstoff oder COR₆ bedeutet und R_6>wie oben definiert ist, (besonders geeignet zur Herstellung von 8-Amino-9-[(2-thienyl)methyl]guanin);

B) zur Herstellung einer Verbindung der Formel I, in der Ri, R₂, R, R₃, R₄, R₅, m, η und Ar₍wie oben definiert sind, mit der Maßgabe, daß R₃ nicht Br und nicht NHR ist, eine Verbindung der Formel

NBCHO

IV

bei erhöhter Temperatur umsetzt mit Ameisensäure und Formamid unter Bildung einer Verbindung der Formel

5 / η

/6

und gegebenenfalls nach an sich bekannten Verfahren diese Verbindung umwandelt in eine Verbindung der Formel I, in der Ri SH und/oder R₃ Hydroxyl, Mercapto oder NHR ist, wobei R₍wie oben definiert ist, oder in ein pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz oder Basensalz davon;

C) zur Herstellung einer Verbindung der Formel

Ν»

Br

eine Verbindung der Formel O

5 η

in einem organischen Lösungsmittel behandelt mit N-Bromsuccinimid und gegebenenfalls nach an sich bekannten Verfahren die erhaltene Verbindung in ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz oder Basensalz umwandelt;

D) zur Herstellung einer Verbindung der Formel I, in der R₃ NHR ist, wobei R^wie oben definiert ist, eine Verbindung der Formel

in der R₁, R₂, R₄, R₅, n, m und Ar die oben angegebene Bedeutung haben, bei erhöhter Temperatur mit Hydrazin umsetzt und gegebenenfalls mit Raneynickel im einem Alkohol als Lösungsmittel und, wenn dies erwünscht ist, die erhaltene Verbindungen der R Wasserstoff ist, umwandelt in eine Verbindung, in der R COR₆ ist, durch Umsetzung mit einem Alkanoylhalogenid, Aroylhalogenid oder Arylalkanoylhalogenid in Gegenwart einer organischen Base und, wenn dies erwünscht ist, wenn Ri O oder OH ist, diese Verbindung nach an sich bekannten Verfahren umwandelt in eine Verbindung, in der R₁ S oder SH ist, und gegebenenfalls die erhaltene Verbindung nach an sich bekannten Verfahren in ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz oder Basensalz davon umwandelt;

E) zur Herstellung einer Verbindung der Formel III, in der R₆, n, m, R₄, R₅ und Ar die oben angegebene Bedeutung haben, eine Verbindung der Formel II, in der R₆, n, m, R₄, R₅ und Ar die oben angegebene Bedeutung haben, mit einem Kupplungsmittel in Gegenwart eines Lösungsmittels zusammenbringt, unter Bildung der Verbindung der Formel III (das Kupplungsmittel bei diesem Verfahren ist vorzugsweise N^N'-Dicyclohexylcarbodiimid und das Lösungsmittel vorzugsweise wasserfreies Dimethylformamid;

F) zur Herstellung einer Verbindung der Formel II, in der R₆, n, m, R₄, R₅ und Ar₍wie oben definiert sind, eine Verbindung der Formel IV, in der n, m, R₄, R₅ und Ar wie oben definiert sind, in wasserfreiem Methanol mit wasserfreier HCI unter Rückfluß erhitzt, dann basisch macht und mit einem niederen Alkoxycarbonyl-isothiocyanat behandelt, unter Bildung einer Verbindung der Formel II;

G) zur Herstellung einer Verbindung der Formel IV, in der n, m, R₄, R₅ und Ar wie oben definiert sind,

in Stufe (1)2-Amino-6-chipr—4-pyrimidinol in Methoxyethanol in Gegenwart von Triethylamin mit einem Arylalkylamin umsetzt und

in Stufe (2) das Produkt der Stufe (1) mit wäßrigem Natriumnitrit umsetzt und in Stufe (3) das Produkt der Stufe (2) mit Natriumdithionit in Formamid und 90%iger Ameisensäure reduziert unter Bildung einer Verbindung der Formel IV.

Unter bestimmten Umständen ist es notwendig, entweder N oder O der Zwischenprodukte bei dem obenangegebenen Verfahren mit geeigneten an sich bekannten Schutzgruppen zu schützen. Die Einführung und Entfernung solcher geeigneter Sauerstoff- und Stickstoff schützender Gruppen ist in der organischen Chemie bekannt (s. z. B. [1 ] „Protective Groups in Organic Chemistry," J. F. W. McOmie, Herausg. [New York, 1973], S.43 ff., 95 ff.; [2] J. F.W. McOmie, Advances in Organic Chemistry, Bd.3,191-281 [1963]; [3] R. A. Borssonas, Advances in Organic Chemistry, Bd.3,159-190 [1963] und [4] J. F. W. McOmie, Chem.

+ Ind., 603 [1979]).

Beispiele für geeignete Sauerstoff schützende Gruppen sind die Benzyl-, tert.-Butyldimethylsilyl-, Methyl-, Isopropyl-, Ethyl-, tert.-Butyl-, Ethoxyethyl-Gruppe u.a. Der Schutz einer N-H enthaltenden Gruppe ist für einige der oben beschriebenen erfindungsgemäßen Verfahren erforderlich. Geeignete Stickstoff schützende Gruppen sind die Benzyl-, oder wahlweise die in (2) erhaltene Verbindung oder die entsprechende Nitroverbindung wie 2-Amino-6-substituiertes Amino-5-nitro-4-pyrimidinol hergestellt aus 2-Amino-6-chlor-5-nitro-4-pyrimidinol und Amino A (siehe Erfindungsanspruch unter G) durch katalytische Reduktion behandelt, Triphenylmethyl-, Trialkylsilyl-, Trichlorethylcarbamat-, Trichlorethoxycarbonyl-, Vinyloxycarbamat-Gruppen u.a.

Unter bestimmten Umständen ist es erforderlich, zwei unterschiedliche Sauerstoffatome mit unterschiedlichen Schutzgruppen zu schützen, so daß eine selektiv entfernt werden kann, während die andere erhalten bleibt. Die Benzyl- und tert-Butyldimethylsilylgruppe werden in diesem Falle verwendet. Dabei kann eine in Gegenwart der anderen entfernt werden. Benzyl kann durch katalytische Hydrogenolyse entfernt werden und tert.-Butyldimethylsilyl kann entfernt werden durch Umsetzung mit beispielsweise Tetra-n-butylammonium-fluorid.

Bei dem oben beschriebenen erfindungsgemäßen Verfahren sind die Erfordernisse für Schutzgruppen dem organischen Chemiker allgemein bekannt und folglich ist die Verwendung entsprechender Schutzgruppen notwendigerweise bei den Verfahren der Formelschemata mit eingeschlossen, obwohl nicht ausdrücklich gezeigt.

Die Reaktionsprodukte der angegebenen Umsetzungen werden auf übliche Weise,z. B. durch Extraktion, Destillation, Chromatographie u.a.,isoliert.

Die Salze der Verbindungen der Formel I können hergestellt werden durch Umsetzung der entsprechenden Base mit einer stöchiometrisch äquivalenten Menge der sauren Verbindungen der Formel I, um pharmakologisch annehmbare Salze zu erhalten.

Die erfindungsgemäß herstellbaren Verbindungen können auch in hydratisierter oder solvatisierter Form vorliegen.

Die oben angegebenen Verfahren beginnend mit (G) und über (F) und (E) oder bis und einschließlich (A) zur Herstellung der Verbindungen der Formel I, in der R₁ OH und R₃' NHCOOR₆ ist, wobei R₆wie oben definiert ist, können als Eintopfreaktionen durchgeführt werden.

Ferner kann das niedere Alkoxycarbonyl-isothiocyanat als solches bei dem Verfahren (F) zugegeben werden oder es kann in situ hergestellt werden durch Suspendieren von Kaliumthiocyanat in Acetonitril und Zugabe von Methylchlorformiat zu der Suspension unter Bildung eines Gemisches, das in Gegenwart des basisch gemachten Hydrochloridsalzes der Verbindung der Formel I bei dem oben angegebenen Verfahren (F) unter Rückfluß erhitzt wird.

Die Verbindungen der Formel I und die Zwischenprodukte der Formeln Il und IV können in tautomeren Formen als Purine oder Guanine vorliegen, wie unten gezeigt. Beide Formen sind mit Hilfe des erfindungsgemäßen Verfahrens herstellbar und es wird zwischen diesen Verfahren nicht unterschieden.

5/ η

5/ η

Guanin

Pur in

CNHCOOR,

CH&IHC00R,

Ar—(CH

IV

OH

5; η

Ar—(CH

IV

Der Ausdruck „Alkyl mit 1 bis4C-Atomen" bedeutet eine gerad- oder verzweigtkettige Kohlenwasserstoffkette mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen₍wie ζ. B. Methyl, Ethyl, Propyl, lsopropyl, Butyl, lsobutyl, sek.-Butyl odertert.-Butyl. „Hydroxyalkyl mit 1 bis 4C-Atomen" bedeutet den gleichen Alkylrest mit einer endständigen Hydroxylgruppe.

Der Ausdruck „Aryl" umfaßt einen unsubstituierten oder substituierten aromatischen Ring ,wie den Phenyl ring, der gegebenenfalls substituiert ist durch Halogen z. B. Fluor, Chlor, Brom oder Iod, Alkyl mit 1 bis 4C-Atomen wie Methyl, Ethyl, Hydroxy, Alkoxy mit 1 bis4C-Atomen wie Methoxy oder Ethoxy oder Trifluormethyl.

Der Ausdruck „Arylalkyl" bezeichnet einen aromatischen Ring, der an eine Alkylgruppe mit bis zu 4C-Atomen gebunden ist,wie eine substituierte oder unsubstituierte Phenylethyl-oder Benzylgruppe, wobei die Substituenten an dem aromatischen Ring die gleichen sein können wie oben angegeben.

Der Ausdruck „heterocyclische aromatische Gruppe" bezeichnet einen 5- oder 6gliedrigen aromatischen Ring, der ein oder mehrere Heteroatome,wie Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel enthält. Bevorzugte Reste sind die 2-oder 3-Furanyl-, 2- oder 3-Thienyl-, 2-, 3- oder 4-Pyridyl- oder 2-, 4- oder 5-Thiazolyl-Gruppen.

Pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze sind solche, die abgeleitet sind von anorganischen Säuren₍wie Salzsäure, Schwefelsäure u.a., sowie von organischen Säuren wie Methansulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Weinsäure u.a. Diese Salze können nach Standardverfahren hergestellt werden.

Pharmazeutisch annehmbare Basensalze sind solche, die abgeleitet sind von anorganischen Basen^wie Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid oder Ammoniumhydroxid oder organischen Basen,wie Arginin, N-Methyl-glucamin, Lysin u.a. Diese Salze können nach Standardverfahren hergestellt werden.

Eine bevorzugte erfindungsgemäß herstellbare Gruppe von Verbindungen sind solche der Formel I in der Ri OH oder SH, R₂ Wasserstoff oder NH₂, R3 Wasserstoff, Brom, OH, SH oder NH₂, η O oder 1, m O oder 1 ist, wobei η oder m 1 sein müssen, R₄ und R₅ unabhängig voneinander Wasserstoff C₁-C₄-AIkYl oder d-C₄-Hydroxy alkyl und Ar 2- oder 3-Furanyl,2-oder 3-Thienyl oder 2-, 3- oder 4—Pyridyl oder 2- oder 3-Furanyl, 2-, 4- oder 5—Thiazolyl, 2- oder 3-Thienyl oder 2-, 3- oder 4-Pyridyl ist, (gegebenenfalls) substituiert durch Ci-C₄-Alkyl, oder pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze oder Basensalze.

Eine andere bevorzugte Gruppe erfindungsgemäß herstellbarer Verbindungen sind solche der Formel I, in der Ri OH, R₂ NH₂, R₃ Wasserstoff, Brom oder NH₂ oder OH oder SH, η O oder 1, m O oder 1 ist, wobei η oder m 1 sein müssen, und Ar 2- oder 3-Furanyl, 2- oder 3-Thienyl, 2-, 4— oder 5-Thiazolyl oder 2-, 3- oder 4-Pyridyl oder 2- oder 3-Furanyl, 2- oder 3-Thienyl, 2-, 4- oder 5-Thiazolyl oder 2-, 3-oder 4-Pyridyl (gegebenenfalls) substituiert durch Methyl oder Ethyl ist, oder die pharmazeutisch annehmbaren Säureadditionssalze oder Basensalze.

Besonders bevorzugte erfindungsgemäß herstellbare Verbindungen sind

9-[(3-Pyridyl)methyl]guanin;

9-(2-Thenyl)guanin;

9-[(2-Pyridyl)methyl]guanin;

9-[(5-Ethyl-2-thienyl)methyl]guanin;

8-Brom-9-(2-thienylmethyl)guanin;

8-Brom-9-(5-ethyl-2-thenyl)guanin;

8-Brom-9-(2-furyl)guanin;

8-Brom-9-[(3-pyridyl)methyl]guanin;

8-Amino-9-(5-ethyl-2-thenyl)guanin;

8-Amino-9-(2-thienylmethyl)guanin und

8-Amino-[9-(3-pyridyl)methyl]guanin.

Die am meisten bevorzugte Verbindung ist8-Amino-9-(2-thienylmethyl)guanin.

Die 8-Bromverbindungen sind nicht nur wertvolle pharmakologische Mittel sondern auch wertvoll als Zwischenprodukte zur Herstellung verschiedener erfindungsgemäß erhältlicher Verbindungen.

Die Verbindungen der Formel I können hergestellt werden nach Verfahren B, A und/oder C wie in den folgenden Schemata 1,2 bzw. 3 angegeben.

Allgemein ist das Verfahren A bevorzugt.

I. Schema 1 -Verfahren B

Organische

«f₂'.

Ar

fe

Ar

«. V

b. HNO₂

Cl

'^ίί^¹¹**!!

ICH,]. ι 2 m

Ar

Ar

Aneisensäure

NBS/ÄCOH

H₂N

ι ²

Ar

Formamid

KN

H₂N

I Ar

Ιέ

Ameisensäure

NHCHO N-^HH

Ar

be- :ann

V"

Ic

*· fcjekannt t

HHCOR*

Id

II. Diskussion des Verfahrens B

Verbindungen der oben angegebenen Formel 8 können auch als Ausgangsmaterialien angewandt werden und können hergestellt werden durch Umsetzung von 2-Amino-6-chlor--4-hydroxy-5-nitropyrimidin, der Verbindung der Formel 2 aus J.

Chem. Soc, 1962, S. 4186, mit dem entsprechenden Heteroaryl(alkyl)amin der Formel 3 in Gegenwart einer organischen Base bei erhöhter Temperatur. Die erhaltene Verbindung der Formel 4 wird dann mit Natriumdithionit und Ameisensäure behandelt und anschließend mit Ameisensäure und Formamid bei erhöhter Temperatur unter Bildung der Verbindung der Formel 8.

Alternativ können Ausgangsmaterialien der Formel 8. hergestellt werden nach einem modifizierten Verfahren von CW. Noelland, R.K.Robins in J. Med. Chem., 5, 558, (1962), ausgehend von einer Verbindung der Formel 5, die mit einem entsprechenden Heteroarylalkylamin der Formel 5 umgesetzt wird und anschließend mit salpetriger Säure unter Bildung von 5-Nitrosopyrimidin, 6, das reduziert und zum Ringschluß gebracht wird durch Behandlung mit Natriumdithionit, Ameisensäure und Formamid, wie oben beschrieben.

Die Heteroaryl(alkyl)amine der Formel 3 sind entweder im Handel erhältlich oder können nach an sich bekannten Verfahren hergestellt werden.

Die Behandlung der Verbindung der Formel 8 mit N-Bromsuccinimid in Essigsäure, Dimethylformamid oder Methanol ergibt eine Verbindung der Formel la, die dann mit Hydrazinhydrat behandelt wird unter Bildung des Hydrazins oder direkt des 8-Aminoderivats der Formel 1 b. Die Reaktion der 8-Bromverbindung mit Hydrazin kann vollständig zu der 8-Aminoverbindung führen. So kann, wenn die 8—Hydrazinverbindung erhalten wird diese weiter mit Raneynickel umgesetzt werden, um die Reduktion zu vervollständigen und die gewünschte 8-Aminoverbindung zu erhalten. Verbindungen der Formel 1 b können weiter nach an sich bekannten Verfahren umgesetzt werden, um die Rg-Substituenten der Formel 1 d zu erhalten oder wenn R-i O ist, kann die Verbindung in eine Verbindung der Formel 1 c umgewandelt werden, in der R₁ S ist, durch Umsetzung dieser Verbindung mit P₂Ss in Gegenwart einer Base wie Pyridin (Beispiele sind angegeben).

III. Schema 2 - Verfahren A

Ar

^XXI

H H^M^Cl CH₃O-^OH, A (125* C) -

J₁ Rückfluß: 18.h

KHO₃ H₂SO₄

2" CH₃OH

ΗΗ^Λν^ΗΗαΐ°

. BCOOH, HCOMlI₂

ioo-i40*c;iu

IV

^IV* n^sA'm '^2BC1 α. ijoM.³ - --^->^™ IVb

_ η .

nur kurze Zeit beständig

ΓK₆OOCSCS ^wr f (K₆ - CE₃ or Et)

IWCOOI₆ ο j°

OCt

III ..^^?H ⁰^ -.!I^H^F II

Ar—tCH,

* J muß nicht ^?iso- nruß nicht isoliert

* liert werden werden

A IShr -

,-«ei

Ar-^CH

V ⁵/ⁿ

10··

IV. Schema 3 - Verfahren C

-11 - ΔΛΙ 0OU

ν^ν^ν/

Br

Cl

JCiO

Ar {CH

2⁷In

I) Chromatographische Trennung

2) HCl

"""tO

Cl

Ar—ICH

Ar—fCH

NBS

Ar—4CH

¹J

Ar

5/η

-12- Z3/ bbU

Allgemein werden die Verfahren nach der Erfindung^ie in Schema 2 oben angegeben, folgendermaßen durchgeführt. Ein 2-Amino6-chlor—4-pyrimidinol, das in Form des Monohydrats vorliegen kann, wird in Methoxyethanol in Gegenwart von überschüssigemAmin oder einer organischen Base wie Triethylamin suspendiert. Die Verbindung der Formel XXX mit n,m, R₄, R₅ und Ar wie oben definiert, wird zu der Suspension zugegeben und optimal auf eine Temperatur erhitzt, bei der die Suspension unter Rückfluß siedet. Das Sieden unter Rückfluß wird fortgesetzt bis die Dünnschicht-Chromatographie, beispielsweise mit 20% Methanol in Methylenchlorid, zeigt, daß die Reaktion zur Bildung einer Verbindung der Formel XX, in der m, n, R₄, R₅ und Ar₍wie oben definiert sind, vollständig ist.

Das Reaktionsgemisch, das die Verbindung der Formel XX enthält, wird dann mit Wasser verdünnt und mit Natriumnitrit in Gegenwart von Essigsäure behandelt. Eine Nitrosoverbindung der Formel X, bei der wieder n, m, R₄, R₅ und Arjwie oben definiert sind, wird erhalten durch Behandlung mit dem Nitrit, wie aus einer Farbänderung und Ausfällung hervorgeht. Die Temperatur bei der Behandlung ist etwa Raumtemperatur.

Das Behandlungsgemisch, in dem die Nitrosoverbindung der Formel X enthalten ist, wird mit Natriumdithionit in einem Lösungsmittelgemisch wie Formamid/Ameisensäure bei einer Temperatur von 60 bis90°C, vorzugsweise von 70 bis80°C, zusammengebracht. Die Temperatur wird dann auf den Siedepunkt des Lösungsmittelgemisches, etwa 130 bis 14O⁰C, während bis zu einer Stunde, vorzugsweise zumindest 20 min, erhöht oder bis die Farbe des die Nitrosoverbindung enthaltenden oben beschriebenen Gemisches verschwindet und ein anorganisches Salz ausfällt. Das Produkt dieses Zusammenbringens ist eine Verbindung der Formel IV, in der n, m, R₄, R₅ und Ar₍wie oben definiert sind.

Anschließend wird die Verbindung der Formel IV getrocknet und in einem wasserfreien Lösungsmittel.wie Methanol, Ethanol u.a. suspendiert. Die Suspension wird dann mit einer trockenen Säure wie HCI behandelt zur Bildung des sauren Salzes der Formel IVa, wobei n, m, R₄, R₅ und An/vie oben definiert sind, oder eines Salzes entsprechend der zur Behandlung verwendeten Säure.

Das Salz IVa wird mit einem konzentrierten Gemisch von NH₄OH und 97% Hydrazin behandelt, um eine Base der Formel IVb zu erhalten, bei der n, m, R₄, R₅ und Ar wie oben definiert sind. Die Base ist instabil wird jedoch beispielsweise im Vakuum über P₂O₅ getrocknet.

Die getrocknete freie Base IVb wird zu einer Lösung von R₆OOCNCS zugegeben, wobei R6 wie oben definiert ist. Die Lösung von ReOOCNCS kann hergestellt werden durch Suspendieren von Kaliumthiocyanat in einem Lösungsmittel wie Acetonitril und Behandeln mit etwas weniger als einem Äquivalent CICOOR₆, wobei R₆ wie oben definiert ist, etwa 1 h unter Rückfluß anschließend gekühlt und dann gerührt, um sicherzustellen, daß das gesamte Alkylchlorformiat umgesetzt ist, bevor die Base IVb zugegeben wird. Die Reaktion der getrockneten freien Base IVb mit dem R₆OOCNCS wird auf Vollständigkeit durch Dünnschicht-Chromatographie unter Verwendung von Kieselsäure in 20% Methanol in Methylenchlorid überwacht, um eine Verbindung der Formel Il zu erhalten, in der R₆, n, m, R₄, R₅ und Ar wie oben definiert sind.

Ein Gemisch der Verbindung der Formel Il un,d eines Kupplungsmittels.wie KN'-bicyclohexylcarbodiimid in einem

Lösungsmitteh/vie wasserfreiem Öimethylformamid.wird bei etwa Raumtemperatur gerührt bis die Reaktion vollständig ist, wie durch Dünnschicht-Chromatographie gezeigt wird, unter Bildung einer Verbindung der Formel III in der R₆, n, m, R₄, R₅ und Ar,wie oben definiert sind.

Das Reaktionsgemisch, in dem die Verbindung der Formel III enthalten ist, und wasserfreies Kaliumcarbonat werden in einem Lösungsmittel,wie wasserfreiem Methanol.suspendiert und unter Rückfluß erhitzt bis die Dünnschicht-Chromatographie zeigt, daß die Reaktion eine Verbindung der Formel I ergeben hat, in der R₁0 oder OH, R₃' NHCOOR₆ ist, wobei R₆,wie oben definiert ist, und n, m, R₄, R₅ und Ar ebenfalls wie oben definiert sind.

Die Verbindung der Formel I, in der R₁ O oder OH ist und R₃' NHCOOR₆ ist, kann dann, wenn dies erwünscht ist, verwendet werden, um nach bekannten Verfahren eine Verbindung der Formel I herzustellen, bei der R₃ NHR ist, wobei R die oben angegebene Bedeutung besitzt, außer COOR₆.

Änlich kann eine Verbindung der Formel I, in der Ri S oder SH ist, nach bekannten Verfahren hergestellt werden aus Verbindungen der Formel I, bei denen R₁ O oder OH ist.

Die Herstellung von Verbindungen IV, II, III und I kann in einem Topf durchgeführt werden. Die Trennung und Reinigung jeder der Verbindungen IV, II, III oder I kann jedoch auch nach bekannten Verfahren durchgeführt werden, wenn dies erwünscht ist.

Allgemein wird das in dem Schema 3 Verfahren C angegebene Verfahren folgendermaßen durchgeführt.

Ein Gemisch aus 2-Amino-6-chlorpurin, Kaliumcarbonat und dem Ausgangsmaterial der als 2 in Schema 3 Verfahren C angegebenen Formel, das im allgemeinen im Handel erhältlich ist oder nach bekannten Verfahren hergestellt werden kann, wird etwa 2 bis 48 h unter Stickstoff gerührt. Ein Gemisch von 7 und 9 substituierten Chlorpurinen, die den Formeln 4 und 5 in Schema 3 Verfahren C entsprechen, wird erhalten. Die gewünschte Verbindung der Formel 4 wird abgetrennt und mit einer wäßrigen Säure wie HCI behandelt und anschließend eine schwache Lösung einer Base wie NaOH zugegeben. Das Gemisch wird erhitzt, um sicherzustellen, daß es neutralisiert ist und anschließend auf übliche Weise das gewünschte Produkt der Formel I isoliert, wobei R₃ Wasserstoff ist. Die anschließenden Reaktionen zur Bildung von Verbindungen der Formel 7 und 8 wie in Schema 3 Verfahren C beschrieben, werden durchgeführt wie oben für die entsprechenden Stufen in Schema 1 Verfahren Bangegeben.

Es hat sich gezeigt, daß die erfindungsgemäß herstellbaren Verbindungen eine deutliche Enzymhemmwirkung und cytotoxische Aktivität besitzen. Bei dem Purinnucelosid-phosphorylase (PNP-4) Enzym-Assay wurde eine vollständige Hemmung bei einer Konzentration von weniger als etwa 300/xmol mit bestimmten erfindungsgemäß erhältliche Verbindungen erzielt. PNP-4-Aktivität wurde radiochemisch gemessen, durch Messung der Bildung von [¹⁴C]-Hypoxanthin aus [¹⁴C]-lnosin [Biomedicine, 33, 39 (1980)] unter Verwendung von Humanerythrocyten als Enzymquelle. Die gleichen Verbindungen erwiesen sich auch bei Standardversuchen (HTBA-1) [Science, 214,1137, (1981)] als selektiv cytotoxisch gegenüber T-Zellen in Gegenwart von 2'-Desoxyguanosin in einem ähnlichen Konzentrationsbereich und nicht toxisch gegenüber B-Zellen in Gegenwart der gleichen Menge 2'-Desoxyguanosin. Repräsentative Beispiele sind zusammen mit ihrer Aktivität in der Aktivitätstabelle angegeben.

Aktivitätstatelle

Beispiel . Nr-

Ar"

Herstellungsyerfahren v-'ξ

PNP-4 IC₅₀(yM)

HTBA-I

T-Zellen + dGuo (10 pM) IC50 (μM)

1		3-Py I	B	21,9 I	54,1
2 or 9a		2-Th i	A or B	0,17 I	0,83
3	16Ae	2-Th-5-Et	B	0,93 I	4,15 .
9b	16Af	2-Fu	B or A	O7 25 j	2,57
9c	3-Th	A, B, or C	0r085 J	0,49
9d	2-Th-3-CH3|	B	4,05.	8,6
16Ad	3-TH-2-CH3I	A	1,72	18,2
16Ac	CH2-2-Th	A	6,25	17,6
16Ak	3-TH-5-CH3I	A	0,63	2,8
16Ag		A	8,45	>12,5
9e		3	1140
|2-Th-5-Me	I A
[2-Py	I A	I 4,6

pyridin , Th = Thiophen , Fu = Furan

Da T-Zellen eine zentrale Rolle bei der Immunreaktion spielen, wird die Verwendung der erfindungsgemäß herstellbaren Verbindungen in Betracht gezogen zur Immunregulation bei Autoimmunerkrankunge^wie rheumatischer Arthritis, systemischem Lupus erythematodis, entzündlichen Blasenkrankheiten, Multipler Sklerose, Myasthemia gravis, Transplantationen, juvenilem Diabetes, Krebs und Viruserkrankungen. Die erfindungsgemäß herstellbaren Verbindungen können daher in Form von Arzneimitteln, die diese Verbindungen der Formel I enthalten, angewandt werden zur Behandlung von Erkrankungen wie Autoimmunerkrankungen, die durch eine annomalen Immunreaktion hervorgerufen werden bei Warmblütern. Dabei werden diese Eigenschaften der erfindungsgemäß herstellbaren Verbindungen ausgenutzt, indem einem Warmblüter eine wirksame Menge eines Arzneimittels verabreicht wird, das als Wirkstoff mindestens etwa 0,1 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht des Mittels, mindestens einer erfindungsgemäß herstellbaren Verbindung erhält. Die Arzneimittel können auf geeignete Weise hergestellt werden, vorzugsweise zusammen mit einem inerten Träger zur oralen, parenteralen, ophthalmischen, topischen Verabreichung oder als Suppositorien. Zum Beispiel können die erfindungsgemäß herstellbaren Verbindungen in Dosisformen wie Tabletten oder Sirups verarbeitet werden durch Vermischen mit einem inerten pharmazeutischen Träger wie Lactose oder einfachem Sirup nach an sich bekannten Verfahren. Für injizierbare Dosisformen werden sie mit Trägern.wie Wasser, Propylenglykol, Erdnußöl, Sesamöl u.ä^zubereitet. Bei diesen Dosisformen beträgt die Menge an Wirkstoff etwa 0,05 bis O,5g/Dosiseinheit.

-14- Z37 6ÖU

Ausführungsbeispiele

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele näher erläutert

Beispiel 1

9-[(3-Pyridinyl)methyl]guanin

3-Pyridylmethylamin (15,8ml; 0,1517 mol) wurde zu einer Suspension von 2-Amino-6-chlor-4-hydroxy-5-nitropyrimidin (14,45g; 0,0758mol) in Isopropanol (600ml) zugegeben. Das Gemisch wurde 2h unter Rückfluß erhitzt und dann über nacht bei Raumtemperatur gerührt, wobei das Produkt 2-Amino-4-hydroxy-6-[(3-pyridyl)methylamino]-5-nitropyrimidin auskristallisierte. Das Produkt wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet. Das rohe Nitropyrimidin (25,32g), das wie oben erhalten worden war, wurde in 150ml Formamid und 50ml 90%iger Ameisensäure suspendiert und die Suspension im Wasserbad auf 70°C erwärmt Natriumdithionit wurde vorsichtig zu der warmen Suspension gegeben und das Gemisch 15 bis 20min zum Sieden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde mit 300 ml heißem Wasser verdünnt, mit Aktivkohle behandelt und dann weitere 20 bis 25 min zum Sieden erhitzt, durch Kieselgur (Celite) filtriert abgekühlt und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhielt Formamidopyrimidin, das abfiltriert, mit Aceton gewaschen und unter Vakuum bei 56°C getrocknet wurde.

Das oben erhaltene Produkt wurde erneut in 100ml Formamid und 8ml Ameisensäure suspendiert und 3,5h unter Rückfluß erhitzt, auf 400 ml Eiswasser ausgegossen und dann filtriert. 2maliges Umkristallisieren aus siedendem Wasser ergab eine analytisch reine Probe des gewünschten Produktes (4,5g) Fp. >300°C.

Beispiel 2

Das in Beispiel 1 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden 9-(heterocyclischen, aromatischen oder substituierten heterocyclischen aromatischen)-Methylguanine ausgehend von entsprechenden heterocyclischen, aromatischen oder substituierten heterocyclischen aromatischen Methylaminen.

9-(2-Thienylmethyl)guanin, Fp. >300⁰C

9-[(2-Pyridinyl)methyl]guanin, Fp. >300°C

9-(2-Furanylmethyl)guanin, Fp. 296-299°C, (Zers.)

(bekannt: J. Am. Chem. Soc, 1959,81:3046)

9-[(3-Methyl-2-thienyl)methyl]guanin, Fp. >290°C (Zers.)

9[(2-Methyl-3-thienyl)methyl]guanin, Fp. >270°C (Zers.)

9-[(Benzo[b]thien-3-yl)methyl]guanin, Fp. >300°C (Zers.) .

9_(3_Thienylmethyl)guanin, Fp. 320-322⁰C (Zers.) *

Beispiel 2A

2-Amino-9-[(2-thienyl)methyl]-6-chlorpurin

Ein Gemisch aus2-Amino-6-chlorpurin (Aldrich Chemical Co.) (7,47g; 0,44mol), Kaliumcarbonat (6,64g, 0,048mol) und 3-Thenylbromid (s. US-PS 3746724) (7,8g; 0,44mol) in DMF (200ml) wurde 48h bei Raumtemperatur unter Stickstoff gerührt. Das Gemisch wurdefiltriert und das Fi Itrat unter Vakuum zurTrockene eingedampft, Ethylether zugegeben und der Niederschlag abfiltriert, wobei man ein Gemisch von 7 und 9 substituierten Chlorpurinen erhielt. Eine Probe des reinen 9-lsomeren wurde hergestellt durch Chromatographie über Siiicagel mit 5% Methanol/Methylen-chlorid als Eluens, um es von dem 7-lsomer abzutrennen. Eine analytisch reine Probe wurde erhalten durch Umkristallisieren aus einem Aceton/Methanol-Gemisch. Ausbeute 2,36g, Fp.: erweicht bei 185⁰C (Zers.) und schmilzt dann bei 203 bis 204°C (Zers.).

Beispiel 2 B

Das in Beispiel 2 A beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden 2-Amino-9-[(heteroaryl oder substituierten heteroaryl)methyl]-6-chlorpurine, ausgehend von den entsprechendenen Heteroaryl- oder substituierten Heteroarylmethylhalogeniden.

2-Amino-9-[(2,5-dimethyl-3-thienyl)methyl]-6-chlorpurin, Fp. 190-192⁰C (Ausgangsmaterial 2,5-Dimethyl-3-thenyl-chlorid hergestellt nach Buu-Hoi und Nguyen-Hoan, Rec. Trav. Chim, 1949, 68:5).

2-Amino-9-(3-furanylmethyl)-6-chlorpurin (Ausgangsmaterial 3-Furfurylchlorid hergestellt nach S.P.Tanis,Tet. Letts, 1982,

Beispiel 2C 9-[(2,5-Dimethyl-3-thienyl)methyl]guanin

Ein Gemisch aus 2-Amino-9-[(2,5-dimethyl-3-thienyl)methyl]-6-chlorpurin (3,8g, 0,0129mol) und 2η HCI wurde 3h auf dem Dampfbad und dann eine weitere Stunde unter Rückfluß erhitzt. Am Ende dieser Zeit wurde 1 η NaOH-Lösung zu der Lösung gegeben bis diese basisch war und das Gemisch weitere 5 min erhitzt. Das Gemisch wurde dann mit Essigsäure angesäuert, gekühlt und filtriert, wobei man 3,6g des Produktes erhielt. Eine analytisch reine Probe wurde erhalten durch Chromatographie über Siiicagel unter Verwendung von 10% Methanol/Chloroform als Eluens, Fp. >300°C (Zers.).

Beispiel 2 D

Das in Beispiel 2 C beschriebene Verfahren wurde wiederholt, zur Herstellung von 9(3-Thenyl)guanin, Fp. 320-322⁰C (Zers.)

Beispiel 2 E 9-(3-Furanylmethy!)guanin

Das rohe2-Amino-9-(3-furfuryl)-6-chlorpurin (4,74g, 0,019 mol) wurde in 175ml Methanol suspendiert und eine Lösung von Natriummethoxid, die hergestellt worden war aus 1,75g (O,076g-Atom) Natriummetall und 75ml Methanol wurde langsam zu der Suspension zugegeben und anschließend 2-Mercapto-ethanol (6,1 ml = 6,8g; 0,087 mol und 0,35 ml Wasser). Das Reaktionsgemisch wurde unter Stickstoffatmosphäre 2 h unter Rückfluß erhitzt und dann eine zusätzliche Menge von Natriummethoxid aus 1,14g (O,05g-Atom) Natrium und 25ml Methanol zugegeben. Nach weiterem 2,5h langem Sieden unter Rückfluß wurde das Reaktionsgemisch unter Vakuum auf 75ml eingeengt und dann mit 200 ml Wasser verdünnt und mit Essigsäure auf einen pH-Wert von 5,5 angesäuert. Der weiße Niederschlag wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Man erhielt 4,05g Fp. 308-310⁰C

Beispiel 3 9-[(5-Ethyl-2-thienyl)methyl]guanin

2-Amino-6-chlor-4-pyrimidinol-monohydrat (22,96g; 0,1193mol) wurde in 300ml Methoxyethanol suspendiert und 5-Ethyl-2-thenylamin (16,58g; 0,1193mol) hergestellt aus 2-Ethylthiophen nach (JACS, 1948,70:4018) zu der Suspension gegeben. Die erhaltene Lösung wurde 1 h unter Rückfluß erhitzt und dann 16,8ml Triethylamin zugegeben und weitere 18h unter Rückfluß erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde in 600 ml Eiswassergegossen, mit 100 ml Essigsäure verdünnt und dann mit einer Lösung von 16g Natriumnitrit in 100ml Wasser behandelt. Das Gemisch wurde 1,5h bei Raumtemperatur gerührt und die erhaltene lachsfarbene Nitrosoverbindung abfiltriert und mit Wasser gewaschen.

Das rohe Nitrosopyrimidin wurde dann mit Natriumdithionit in 200ml Formamid und 100ml 90%iger Ameisensäure bei 70⁰C reduziert und dann 20 min zum Sieden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde mit 300 ml Wasser verdünnt und weitere 30 min zum Sieden erhitzt, heiß filtriert und dann im Kühlschrank auskristallisieren gelassen. Das rohe N-Formyl-Derivat (28g) wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen, an der Luft getrocknet und dann aus 10 ml Ameisensäure und 100 ml Formamid durch 1 stündiges Sieden unter Rückfluß cyclisiert. Das heiße Reaktionsgemisch wurde auf 500 ml Eiswasser gegossen, wobei man das rote Guanin erhielt, das dann durch Lösen in siedender 1,5n HCI, Behandeln mit Aktivkohle und Ausfällen mit Ammoniumhydroxid gereinigt wurde. Das rohe Guanin wurde dann in heißer 1 η NaOH-Lösung erneut gelöst, mit Aktivkohle behandelt, filtriert und das Filtrat mit Essigsäure angesäuert, wobei man das gewünschte Produkt erhielt, das in der nächsten Stufe ohne weitere Reinigung verwendet wurde.

Beispiel 4

Das in Beispiel 3 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung von 9-(2-Thenyl)guanin, Fp. > 300 ⁰C, ausgehend von 2-Amino-6-chlor-4-pyrimidinol und 2-Thenylamin.

Beispiel 5 8-Brom-9-(2-thienylmethyl)guanin

N-Bromsuccinimid (2,82g; 15,7mmol) wurde zu einer kalten (0⁰C) Suspension von 9-(2-Thenyl)guanin (3,5g; 14,1 mmol) in 100 ml DMF gegeben und das Gemisch 30 min bei 0⁰C und dann 24h bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit 75ml Wasser verdünnt und filtriert. Beim Umkristallisieren des Produktes aus DMF erhielt man die analytisch reine Probe, Ausbeute 3,1 g, Fp. 294-295°C (Zers.).

Beispiele

Das im Beispiel 5 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden 8-Brom-9-[(substituierten heteroaryl)methyl]guanine, ausgehend von entsprechenden 9-[(substituierten Heteroaryl)methyl]guaninen.

8-Brom-9-(5-ethyl-2-thienylmethyl)guanin

8-Brom-9-(2-furanylmethyl)guanin, Fp. >340°C,

8-Brom-9-[(2-Methyl-3-thienyl)methyl]guanin, Fp. >280°C (Zers.).

8-Brom-9-[(benz[b]thien-3-yl)methyl]guanin, Fp. 258-260⁰C (Zers.).

Beispiel 7 8-Brom-9-[(3-pyridinyl)methyl]guanin

N-Bromsuccinimid (1,59g; 8,95mmol) wurde zu einer Suspension von 9-[(3-Pyridyl)methyl]guanin (2,0g; 8,14mmol) in 20ml Eisessig gegeben und das Gemisch 3,5 h bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wurde unter vermindertem Druck eingeengt und dann mit Wasser verdünnt und filtriert. Das rohe Produkt wurde mit Wasser verrieben, filtriert und mit Wasser gewaschen und getrocknet. Ausbeute 1,91 g, Fp. >300°C.

Beispiele 8-Amino-9-{5-ethyl-2-thienylmethyl)guanin

Ein Gemisch aus 8-Brom-9-(5-ethyl-2-thenyl)guanin (6,5g; 18,3mmol) und 60% wäßrigem Hydrazin (200ml) wurde unter Stickstoffatmosphäre 20 h unter Rückfluß erhitzt. Dann wurden 50 ml 2-Methoxyethanol zugegeben und weitere 48 h ander offenen Luft unter Rückfluß erhitzt. Die orangebraune Lösung wurde abgekühlt, mit 150 ml Wasser verdünnt und im Kühlschrank über Nacht auskristallisieren gelassen. Das so erhaltene Produkt wurde in das Hydrochloridsalz umgewandelt durch Umkristallisieren aus siedendem Isopropanol und 1 η HCI. Ausbeute 0,49g, Fp. 215-218°C (Zers.).

- io- £.oi oou

Beispiel 9

Das im Beispiel 8 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden 8-Amino-9-[(substituierten heteroaryl)methyl]guaninen, ausgehend von entsprechenden 8-Brom-9-[(substituierten heteroaryl)methyl]guaninen: 8-Amino-9-[(3-pyridyl)methyl]guanin, Fp. >300°C, sowie der weiteren Verbindungen a bis e.

a. 8-Amino-9-(2-thenyl)guanin oder8-Amino-9-[(2-thienyl)-methyl]guanin als Hydrochloridsalz · 0,5H₂O, Fp. 223-226°C (Zers.).

b. S-Amino-g^-furanylmethyllguanin-monohydrochlorid · 1,0H₂O, Fp. 197-199°C(Zers.).

c. 8-Amino-9-[3-thienyl)methyl]guanin monohydrochlorid-monohydrat, Fp. 275-278°C(Zers.).

d. 8-Amino-9-[(3-methyl-2-thienyl)methyl]guanin · 0,25H₂O, Fp. 290°C (Zers.).

e. 8-Amino-9-[(benzo[b]thien-3-yl)methyl]guanin · 0,5H₂O, Fp. >300°C (Zers.).

Die AusgangsmaterialienjWie 2-, 3- oder 4-Pyridylmethylamine, 2-Thenylamin, das auch als 2-(Aminomethyl)thiophen oder

2-Thiophenmethylamin bezeichnet wird, und 2-Furfurylamin sind im Handel erhältlich (z. B. von Aldrich Chemical Company). Die substituierten Thenylamine wurden hergestellt aus den substituierten Thiophenen nach allgemeinen Verfahren. (H. D. Hartough und S. L. Meisel, J. Am. Chem. Soc, 1948,70:4018).

2-Amino-6-chlor-4-hydroxy-5-nitropyrimidin wurde hergestellt nach einem Verfahren, wie es beschrieben ist von A. Stuart and H.C.S.Wood,J.Chem. Soc, 1963:4186.

2-Amino-6-chlor-4-pyrimidinol-monohydrat ist im Handel von Aldrich Chemical Company.

Beispiel 10

2-Arhino-4-[[(2-thienyl)methyl]amino]-5-(formamido)-6-pyrimidinol (Schema 2 Formel IV, in der η = 1, m = 0, R₄ = R₅ = H,Ar = 2-Thienyl)

2-Amino-6-chlor-4-pyrimidinol-monohydrat (85%, 100,0g 0,5197moi) wurde in 700ml Methoxyethanol suspendiert und 2-Thiophenmethylamin (96%, 61,3 g, 0,5197 mol) zu der Suspension gegeben. Das Gemisch wurde 2 h unter Rückfluß erhitzt und dann 73 ml Triethylamin (d = 0,726,0,52 mol) zugegeben und weitere 18h unter Rückfluß erhitzt.

Die Reaktion wurde durch Dünnschichtchromatographie (TLC) überwacht: 20% Methanol/CHCl3. Das Reaktionsgemisch wurde in 1000ml Eiswassergegossen, mit 400ml Essigsäure verdünnt und dann mit einer Lösung von 80g (1,16mol) Natriumnitrit in 300 ml Wasser behandelt. Das Gemisch wurde 4h bei Raumtemperatur gerührt, und die erhaltene rötliche Nitroseverbindung (X) wurde abfiltriert und mit Wasser gewaschen (die Reaktion wurde überwacht durch Beobachtung der Farbänderung bei der Bildung des Niederschlags).

Das rohe Nitros pyrimidin der Formel X, (Schema 2, Formel X, η = 1,m = 0, R₄ und R₅ = H und Ar = 2-Thienyl), das wie oben hergestellt worden war, wurde in zwei Teile geteilt und jeder mit Natriumdithionit (>90%, 70 g, 0,36 mol) in 300 ml Formamid und 300 ml 90%iger Ameisensäure bei 80°C reduziert und dann 20 min zum Sieden erhitzt. Die Temperatur betrug zu diesem Zeitpunkt etwa 130-140 °C. Die Reaktion war vollständig, als die rote Farbe vollständig verschwunden war und anorganisches Salz ausfiel. Das Reaktionsgemisch wurde mit 300 ml Wasser verdünnt und weitere 30 min zum Sieden erhitzt, heiß filtriert und dann im Kühlschrank auskristallisiert. Die Reaktion wurde auf Vollständigkeit durch Dünnschichtchromatographie (TLC) (SiO₂; 20% CH₃OH in CHCI₃) überwacht. Das rohe N-Formylderivat2-Amino-4[[(2-thienyl)methyl]amino]-5-(formamido)-6-pyrimidinol, (100g) wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet und in den meisten Fällen für die nächste Stufe ohne weitere Reinigung verwendet.

Beispiel 10A

Das in Beispiel 10 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung von 2-Amino[[(3-thienyl)-methyl]amino]-5-(formamido)-6-pyrimidinol, ausgehend von 3-Thiophen-methylamin und 2-Amino-6-chlor-4-pyrimidinol.

Beispiel 11 2-Amino-4-[[(2-furanylmethyl)amino]-5-(formamido)-6-pyrimidinol

Ein Gemisch aus 2-Amino-6-chlor-5-nitro-4-pyrimidinol (J.Chem. Soc, 1962, S.4186) (31,5g; 0,15mol), Methanol (1 200ml) und Furfurylamin (29,1 g; 0,3mol) wurde 6h gerührt und unter Stickstoffatmosphäre am Rückfluß erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde abgekühlt, filtriert, mit Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet. Man erhielt 34,43g eines gelben Feststoffes, Fp. 286-289^cC (Zers.), der für die nächste Umsetzung verwendet wurde.

Das rohe Nitropyrimidin (33,9g; 0,135 mol) wurde in 200 ml Formamid und 145 ml 88%iger Ameisensäure suspendiert und dann auf 80°C erwärmt. Natriumdithionit (57 g; 0,327 mol) wurde langsam zu der warmen (80-85 "C) Suspension innerhalb von 50 min zugegeben und die Temperatur (—85⁰C) weitere 30 min beibehalten, das Gemisch dann mit 1200 ml siedendem Wasser verdünnt und weitere 20 min auf etwa 85°C gekühlt, wobei lohfarbene Kristalle entstanden. Das Produkt wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und unter Vakuum über Nacht über P₂O₅ getrocknet. Ausbeute 23,4g, Fp. 246-247°C (Zers.). In den meisten Fällen wurden diese Verbindungen ohne Charakterisierung für die weiteren Reaktionsfolgen verwendet.

Beispiel 11A

Das im Beispiel 11 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden 2-Amino-4-[[(heteroaryl oder substituierten heteroaryl)methyl]amino]-5-(formamido)-6-pyrimidinole, (Tabelle 1) ausgehend von entsprechenden Heteroaryl- oder substituierten Heteroaryl-methylaminen und 2-Amino-6-chlor-5-nitro-4-pyrimidinol.

TABELLE 1 _: O

JL

*** Il

NHCHO

2-Tlrienyl

bzw. ,

3-Thienyl 3-Furanyl

methyl

3-He-2-thienyl 2-Me-3-thienyl

,ΧΝΗ N I

I—

Ar

,JO

Ar

5-Me-2-thienyl

TABELLE 1 (Fortsetzung)

2-Pyridihyl

Benzo[b]thien-2-yl

2-Thiazolyl 4-&iazolyl (3-Thienyl)methyl

5-Me-3-thienyl

TABELLE 1 (Fortsetzung)

bzw

Ar

5-Me-2-furanyl

4-Me-3-thienyl

4-Me-2-thienyl

Beispiel 12

2,5-Diamino-4r[(2-thienylmethyl)amino]pyrimidin-6-ol-dihydrochlorid (Schema 2, Formel IVa, η = 1, m = 0, R₄ = R₅ = H und . Ar = 2-Thienyl) ' .

Das entsprechend Beispiel 10 hergestellte roheN-Formylderivat (40g, 0,1508 mol) wurde in 500 ml wasserfreiem Methanol suspendiert und ein Strom von trockenem HCI-Gas durch die Lösung geleitet, während das Gemisch unter Rückfluß siedete. Die Reaktion wurde 2,5 h fortgesetzt, wobei eine klare Lösung entstand und anschließend ein kristalliner Niederschlag. Das Gemisch wurde im Eisbad gekühlt und kristallisiert. Man erhielt das Salz 2,5-Diamino-4-[(2-thienylmethyl)amino]pyrimidin-6-oldihydrochlorid, (28,6g). Beim Einengen der Mutterlauge erhielt man eine weitere Menge des Salzes (8,65g). Gesamtausbeute 37,25g, (79%). Das Produkt wurde ohne weitere Reinigung weiter verwendet.

Wahlweise wurde das N-Formylderivat mit 5% methanolischer HCI (Gas) unter Rückfluß erhitzt, um das gewünschte Diamin · 2 HCI-SaIz zu erhalten.

Beispiel 12A

Das im Beispiel 12 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden 2,5-Diamino-4-[[(heteroaryl oder substituierten heteroaryl)methyl]amino]pyrimidin-6-ole als Dihydrochloridsalze (Tabelle 2), ausgehend von dem entsprechenden 2-Amino-4-[[(heteroaryl- oder substituierten heteroaryl)methyl]amino]-5-(formamido)-6-pyrimidinol (Tabelle 1).

-HCl

Ar 3-Thienyl

bzw.

Ar

TABELLE 2 (Fortsetzung)

2-Furanyl 3-Furanyl

//Λ

Ar

bzw.

Ar

(2-Thienyl)methyl

3-Me-2-thienyl H₃C

2-Me-3-thienyl

5-Me-2-thienyl JLX

S' CH.

2-Pyridinyl

Benzo[b]thien-2-yl

TABELLE 2 (Fortsetzung) 2-T.hiazolyl

5-Me-3-thienyl 5-Me-2-furanyl 4-Me-3-thienyl

Ar -Z^- Ar

4-Thiazolyl _N

{3-ihienyl)methyl

-H₂C

CH₃

:h₃

4-Me-2-thienyl

CH₃

Beispiel 13

Methyl-[[[2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-4-[(2-thienylmethyl)-amino]-5-pyrimidinyl]amino]thioxomethyl]carbamat (Schema 2, Formel II, R₆ = Methyl, η = 1, m = 0, R₄ = R₅ = H und Ar = 2-Thienyl)

Das rohe Dihydrochloridsalz, das entsprechend Beispiel 12 hergestellt worden war, (37,2g, 0,12 mol) wurde in 300 ml Wasser suspendiert und dann mit einem Gemisch von konzentriertem NH₄OH und 97%igem Hydrazin (3:1) (40ml) basisch gemacht, um die freie Base zu erhalten, die im Vakuum über P₂Os 20 h getrocknet wurde. Ausbeute 26,1 g (97 %) der in Schema Il als Verbindung IVb bezeichneten Verbindung, bei dem, m, R₄, R₅ und Ar wie oben definiert sind. Diese freie Base war instabil.

Eine Suspension von Kaliumthiocyanat (18,1 g; 0,186mol) in Acetonitril (250ml) wurde mit Methylchlorformiat (99%) (13,8ml, 0,177 mol) behandelt und das Gemisch 1 h unter Rückfluß erhitzt, gekühlt und dann zur Entfernung anorganischer Salze filtriert.

Das leuchtend gelb gefärbte Filtrat wurde über Nacht bei Raumtemperatur unter Stickstoff gerührt. Es ist darauf zu achten, daß das gesamte Methylchloroformiat reagiert hat, bevor weitergearbeitet wird. Die trockene Base (26,1 g) wurde zu der Lösung von Methoxycarbonylisothiocyanat gegeben und weitere 36h bei Raumtemperatur unter Stickstoff gerührt. Die Reaktion wurde auf Vollständigkeit durch Dünnschichtchromatographie (SiO₂,20% CH₃OH in CHCI₃) überwacht. Das Produkt wurde abfiltriert und mit Methanol gewaschen und ergab dasThioharnstoffderivatMethyl-[[[2-amino,1,6-dihydro-6-oxo-4-[(2-thienylmethyl)-amino]-5-pyrimidinyl]amino]thioxomethyl]carbamat. Ausbeute 37,4g (96%), Fp. 225-226°C; (96,6% rein nach HPLC).

Wahlweise können die Nitro- oder Nitrosopyrimidine katalytisch reduziert und unmittelbar mit Ethoxycarbonylisothiocyanat umgesetzt werden, um das Thioharnstoffderivat zu erhalten.

Das Produkt wurde ohne weitere Reinigung für die nächste Stufe übernommen.

Beispiel 13A

Das in Beispiel 13 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden Methyl- (oder Ethyl-)-[[[2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-4-[[(heteroaryl oder substituierten heteroaryDmethylJaminol-B-pyrimidinyn-aminol-thioxomethylJcarbamate (Tabelle 3), ausgehend von den entsprechenden 2,5-Diamino-4-[[(heteroary! oder substituierten heteroaryOmethylJaminolpyrimidin-e-ol-dihydrochlorid-salzen (Tabelle 3).

TABELLE 3 i.

HJj- -γ— NH-C-NHCOOR₆

Ar bzw. Ar

2-Thienyl Γ "\ _Et

3-Thienyl / v\ CH₃

2-Furanyl

3-Furanyl

// W

Ep. 246-249^eC

TABBIjLS 3 (Fortsetzung)

(2-Thienyl)methyl

CH 3

Fp. 234-239⁰C (lers . )

2-Me-3-thienyl

5-Me-2-thienyl

2-Me-2-thienyl

bzw.

Ar

CH.

CH3

Fp.

(Zers.)

CH3, Fp.> 227-230 ⁰C

(Zersi) Et

2-Pyridinyl

CH3

Benzo[b]thien-2-yl

CH 3

2-Thiazolyl.

CH₃ Ep.214-215^eC

4-Thiazolyl

CH₃

217-218^eC

(3-Thienyl·)methyl

-H₂C-CH₃

TABELLE 3 (Fortsetzung)

5-Me-3-thienyl (J H CH3

bzw. Ar — Ar

5-Me-2-furanyl , > CH3

// \\ Fp. 228-229'C

H_ (Zers.)

4-Me-3-thienyl -^ r^^CH3 ^CH3' ^Et

4-Me.-2-thienyl

CH3, Et

Beispiel 14

Methyl-[5-amino-7-[(2-thienylmethyl)amino]-oxazolo[5,4-d]-pyrimidin-2-yl]carbamat (Schema 2, Formel III, Rs = Methyl, η = Λ.

m = O, R₄= R₅= H und Ar = 2-Thienyl)

Ein Gemisch des entsprechend Beispiel 13 hergestellten Thioharnstoffderivats (35g; 0,096mol) und N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) (59,4g, 0,288mol) wurde in 1 800ml trockenem DMFsuspendiert und 24h bei Raumtemperatur gerührt. Der Verlauf der Reaktion wurde durch Dünnschichtchromatographie (SiO₂; 20% CH₃OH in CHCI₃, überwacht. Das DMF wurde unter Vakuum vollständig abdestilliert und der Rückstand zweimal mit CH₂CI₂ verrieben, um das gewünschte Carbamat Methyl-[5-amino-7-[(2-thienylmethyl)amino]oxazolo[5,4-d ]pyrimidin-2-yl]carbamatzu erhalten. Ausbeute 27,8g (90%) Fp. 300⁰C, Reinheit 97,6% (HPLC)

Dieses Produkt wurde ohne weitere Reinigung für die nächste Stufe verwendet.

Beispiel 14A

Das in Beispiel 14 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden Methyl- (oder Ethyl-)-[5-amino-7-[[(heteroaryl oder substituierten heteroaryO-methyllaminoloxazoloIS^-djpyrimidin^-yncarbamate (Tabelle 4), ausgehend von den entsprechenden Methyl- (oder Ethyl-)-[[[2-amino-1,6-dihydro-6-oxo-4-[[(heteroaryl-oder substituierten heteroaryDmethynaminol-B-pyrimidinyU-aminol-thioxomethyncarbamaten (Tabelle 3).

-25- Δύί ODU

TABELLE

NHCOOR₆

bzw.: Ar

R6

2-Thienyl

Et

3-Thienyl

CH 3

2-Furanyl

CH₃

3-Furanyl

CH 3

. 288-291^eC (Zers.)

(2- Thionyl) methyl

CH₃

Fp. >270°C (Zers.)

2-Me-3-thienyl

CH₃

Fp. >270^eC (Zers.)

TABELLE 4 (Fortsetzung)

bzw. Ar

5-Me-2-thienyl

CH.CH₃, Et Fp-. >250^eC (Zers.)

2-Pyridinyl

BenzoCbithien-2-yl

CH₃

2-.Thiazolyl

N-CH₃

4-Thiazolyl

CH₃

(3-Thienyl)methyl

—Η.

5-Me-3-thienyl

CH₃

CM₃

TABELLE 4 (Fortsetzung)

tew. Ar E.6

5-Me-2-furanyl CH3

5-Me-2-thienyl . CH3, Et

5-Me-3-thienyl V ^?^El CH3

4-Me-2-thienyl _rTT _ Et

Fp .> 260 ⁰C (Zers.)

Beispiel 15 Methyl-[2-amino-6,9-dihydro-6-oxo-9-(2-thienylmethyl)-1 H-purin-8-yl]carbamat (Schema 2, Formel I, R₃ = NHCOOR₆, R₆ = Methyl, η = 1, m = 0, R₄ = R₅ = H und Ar = 2-Thienyl

Ein Gemisch des entsprechend Beispiel 14 hergestellten Oxazolocarbamates (25g; 0,078 mol) und wasserfreiem K₂CO₃ wurde in wasserfreiem Methanol suspendiert und 8h unter Rückfluß erhitzt. DerVerlauf der Reaktion wurde durch das oben erwähnte Dünnschichtchromatographie-System überwacht. Das Reaktionsgemisch wurde dann unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft und der Rückstand in Ammoniumchloridlösung (16,8g; 0,312mol in 200ml Wasser) gelöst. Der erhaltene Niederschlag wurde gesammelt und getrocknet. Man erhielt 24,39g des Methyl[2-amino-6,9-dihydro-6-oxo-9-(2-thienylmethyl)-1 H-purin-8-yl]carbamates, manchmal verunreinigt mit der 8-Aminoverbindung, und zwar in diesem Beispiel 89,58% Carbamat und 9,54% 8-Aminoverbindung, 8-Amino-9-[(2-thienyl)methyl]guanin oder Formel I, bei der R₃ NH₂ ist. Dieses Produkt wurde ohne weitere Reinigung für die nächste Stufe verwendet.

Beispiel 15A

Das in Beispiel 15 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden Methyl- (oderEthyl-)[2-amino-6,9-dihydro-6-oxo-9-[(heteroaryl oder substituierten heteroaryl)methyl-1 H-purin-8-yl]-carbamate (Tabelle 5) ausgehend von den entsprechenden Methyl- (oder Ethyl-)-[5-amino-7-[[(heteroaryl oder substituierten heteroaryl)methyl]-amino]oxazolo[5,4-d]pyrimidin-2-yl]-carbamaten (Tabelle 4).

TABELLE

^N^>—NHCOORg

L-Ar

2-Thienyl

bzw.

Ar

//WEt, Fp >250*C (Zers.)

3-Thienyl

CH 3

2-Furanyl

CH3

Fp. >300"C (Zers.)

3-Furanyl

CH3

Fp. >270'C (Zers.)

(2-ihienyl)methyl

CH₃

2-Me-3-thienyL

CH 3

TABELLE 5 (Fortsetzung)

— ΔΪ3— CnJ ä

bzw. Ar

5-Me-2-thienyl

CH. CH₃, Et

Fp; >250*C

(-Zers.)

2-Pyridinyl

N-CH₃

BenzoCb]thien-2-yl

CH₃

2-Ihiazolyl

CH₃

4-Thiazolyl

CH₃

(3-fhienyl)methyl —H C

CH₃

5-ifia-3-thienyi

S' CH. CH₃

TABELLE 5 (Fortsetzung)

bzw.

Ar

5-Me-2-furanyl

CH3 Fp. >250'C

(Zers.)

4-Me-3-thienyl

XJ'

CH3, Et

4-Me-2-thienyl

CH3, Et

Beispiel 16

8-Amino-9-[(2-thienyl)methyl]guanin (Schema 2, Formel I, R₃ = NH₂, η = 1, m = 0, R₄ = R₅ = H und Ar = 2-Thienyl).

Das entsprechend Beispiel 13 hergestellte roheCarbamat (89,5% Carbamat plus 9,5% der-8-Aminoverbindung) (20,39g; 0,Ö64mol) aus der oben angegebenen Reaktion wurde in 125ml Isopropanol suspendiert und 125ml (0,125mol) 1 η HCI zugegeben und das Gemisch ungefähr 20h unter Rückfluß erhitzt. Die Reaktion wurde durch Dünnschichtchromatographie überwacht (SiO₂; 20% MeOH in CHCl₃; CH₃CN :HOAc:H₂O 8:1:1) als eine klare Lösung entstanden war. Beim Abkühlen kristallisierte das Produkt aus der Lösung als Hydrochloridsalz von 8-Amino-9[(2-thienyl)-methyl]guanin aus. Ausbeute 15,1 g (76%), Reinheit 98% nach HPLC, Fp. 219-222°C (Zers.)

Die Hydrolyse wurde auch in 10%iger methanolischer Natriumhydroxidlösung unter Rückflußtemperatur durchgeführt und anschließende Neutralisation und Umkristallisation aus einem entsprechenden Lösungsmittel.

Beispiel 16A

Das in Beispiel 16 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden 8-Amino-9[(heteroaryl oder substituierten heteroaryl)methyl]guanine (Tabelle 6), ausgehend von den entsprechenden Methyl- (oder Ethyl-)[2-amino-6,9-dihydro-6-oxo-9-[(heteroaryl oder substituierten heteroaryl)methyl-1 H-purin-8-yl]-carbamaten (Tabelle 5).

TABELLE

Fp. ⁰C

2-FuranyI

253-7

TABELLE 6 (Fortsetzung)

a. 3-Thienyl

b. 3-Furanyl

KCl

Ar

bzw» *

I \

HCl 275-8 (d)

Fp. ⁸C

293-4 (Zers.) -

c. (2-thieayl)methyl

HCl-H₂O

Μ

-H₂C

153-5 (Zers.)

d. 2-Me-3-thienyl

HCl 266-8 CZers.)

e. 5-Me-2-thienyl

>2b0

f. 2-Pyridinyl

1. 5 HCl* 0.25 H₂ ⁰ 270-2 (Zers.-)

g. BenzoCbjthien-2-yl

0.25 H2O

>300 (Zers.)

TABELLE 6 (Fortsetzung)

h. 2-Thiazolyl

bzw.

1> 2 HCl l_f2 H2O

- 'C >250

i. 4-Thiazolyl

1,1 HCl 0_Λ3 .Η20

>250

j. (3-Thienyl)methyl

k. 5-Me-3-thienyl

HCl

H₂O

177-83

HCl Of 5 H2O 212-5. (Zers,)

1. 5-Me-2-furanyl

r\

HCl · 1, H₂O

212-4 (Zers.)

ra". 4-Me-3-thienyl

Ti 0.9 HCl 1.25 H₂O

>240 (Zers,)

n. 4-Me-2-thienyl

Beispiel 17 2,8-Diamino-1,9-dihydro-9-(2-thienyl)methyl-6H-purin-6-thion

Ein Gemisch aus P₂S₅ (2,4g; 10,95mmol), Pyridin (30ml) und 8-Amino-9[(2-thienyl)methyl]-guanin (1,5g; 4,87 mmol) wurde 4,5h unter Rückfluß erhitzt und dann in 200 ml siedendes Wasser gegossen und 1 h am Sieden gehalten. Das Gemisch wurde über Nacht bei Raumtemperatur stehen gelassen. Der ausgefallene Niederschlag wurde gesammelt, in 1 η NaOH gelöst, mit Aktivkohle behandelt, filtriert und mit Eisessig auf einen pH-Wert von 5,4 angesäuert. Der ausgefallene Feststoff wurde gesammelt, in 1 η HCI gelöst, mit Aktivkohle behandelt, filtriert und mit NH₄OH auf pH 7,07 neutralisiert, wobei man 542 mg des gewünschten Produktes erhielt, Fp. >300°C.

Beispiel 17A

Das in Beispiel 17 beschriebene Verfahren wurde wiederholt zur Herstellung der folgenden 2,8-Diamino-1,9-dihydro-9-[(heteroaryl oder substituierten heteroaryl)-methyl]-6H-purin-6-thione, ausgehend von den entsprechenden 8-Amino-9[(heteroaryl-oder substituierten heteroaryl)alkyl]guaninen.

2,8-Diamino-1,9-dihydro-9-(3-thienylmethyl)-6H-purin-6-thion · 0,5H₂O, Fp. 275⁰C (Zers.). 2,8-Diamino-1,9-dihydro-9-[2-(2-thienyl)ethyl]-6H-purin-6-thion · 0,25H₂O, Fp. >260°C (Zers.).

Beispiel 18

2-Amino-7,9-dihydro-9-(2-thienylmethyl)-1 H-purin-6,8-dion

Ein Gemisch aus8-Brom-9-[(2-thienyl)methyl]guanin (siehe Beispiel 5) (3,12g; 9,56mmol), Essigsäureanhydrid (75ml),'Eisessig (75m|) und wasserfreiem Natriumacetat (14,9g; 0,1816mol) wurde 20h unter Rückfluß erhitzt. Die entstandene dunkle Lösung wurde dann unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde in 150 ml wäßrigem Methylamin gelöst, bei Raumtemperatur 48h gerührt und dann 2,5 h unter Rückfluß erhitzt. Das Methylamin wurde unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand aus einem siedenden Methanol-Wasser-Gemisch umkristallisiert. Man erhielt 1,23g des analytisch reinen Produktes, Fp. >300°C.

Beispiel 19 2-Amino-1,7,8,9-tetrahydro-9-(2-thienylmethyl)-8-thioxo-6H-purin-6-on

Ein Gemisch aus8-Brom-9[(2-thienyl)methyl]-guanin (siehe Beispiel 5) (2,0g; 6,13mmol), DMF (250ml) und Thioharnstoff (0,93g; 12,26mmol) wurden 20 h unter Rückfluß erhitzt und dann das Lösungsmittel unter vermindertem Druck bis zur Trockne des Produktes abgedampft. Der Rückstand wurde in 1 η NaOH gelöst, mit Aktivkohle behandelt, filtriert und mit Eisessig (AcOH) angesäuert, wobei ein blaßgelber Feststoff entstand. Eine analytisch reine Probe wurde hergestellt durch Wiederholung des Reinigungsverfahrens. Ausbeute709mg; Fp. >280°C.

Beispiel 20 N,N'-[6,9-Dihydro-6-oxo-9-(2-thienylmethyl)-1H-purin-2,8-di-yl]bis-acetamid Ein Gemisch aus 8-Amino-9-[(2-thienyl)methyl]-guanin (0,5g; 1,88mmol), DMF (10ml), Pyridin (5ml) und Essigsäureanhydrid (5 ml) wurde 36 h bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wurde mit 50 ml Ether verdünnt und filtriert, um das analytisch reine Produkt zu erhalten, Fp. 243-244°C.

Ausgangsmaterialien

Die Ausgangsmaterialien wurden folgendermaßen unter Anwendung bekannter Verfahren oder nach Verfahren, die bekannten Verfahren analog sind, hergestellt.

5-Methyl-2-thienylmethylamin, H.Hartough etal, J.Am. Chem.Soc, 1948,70:4018.

Benzo[b]thiophen-2-yl-mehtylamin, D. Shirley et al, J. Am. Chem. Soc, 1952,74:664.

3-Methyl-2-thienylmethylamin, H.Hartough etal, J.Am.Chem.Soc, 1948,70:4018.

Benzo[b]thiophen-3-yl-methylamin wurde hergestellt durch Gabriel-Synthese aus der entsprechenden Chlorverbindung (W.King et al, J.Org.Chem., 1948,13:635).

2-Methyl-3-thienylmethylamin wurde hergestellt durch Reduktion des entsprechenden Nitrils mit Lithiumaluminiumhydrid (LAH) (M.Janda etal, Coll.Czech.Comm., 1974,39:959).

2-(2-Thienyl)ethylamin und 2-(3-Thienyl)ethylamin wurden hergestellt nach W. Hertz et al, in J.Am. Chem. Soc, 1951,73:351.

2-Methyl-4-thienyl-methylamin wurde hergestellt durch Reduktion von 2-Methyl-4-cyano-thiophen, das aus der entsprechenden 4-Bromverbindung (Y. Goldfarbetal, Zh. Obs. Khim. 1964,34:969) und CuCN erhalten worden war, mit LAH.

3-Methyl-4-thienylmethylamin wurde folgendermaßen ähnlich hergestellt

4-Methyl-2-thienylmethylamin wurde hergestellt durch Reduktion des entsprechenden Aldoximes mit LAH.

2- und 4-Thiazolylmethyl-amine wurden hergestellt nach R.G. Jones et al, J. Am. Chem. Soc, 1950,72:4526.

Bevorzugte erfindungsgemäß herstellbare Verbindungen sind 9-[(3-Pyridinyl)methyl]guanin, 9-[(2-Thienyl)methyl]guanin, 9-[(2-Pyridinyl)methyl]guanin,9-[(5-Ethyl-2-thienyl)methyl]guanin,8-Brom-9-(2-thienylmethyl)guanin,8-Brom-9-[(5-Ethyl-2-thienyl)methyl]guanin, 8-Brom-9-(2-furanylmethyl)guanin, 8-Brom-9-[(3-pyridinyl)methyl]guanin, 8-Amino-9-[(5-ethyl-2-thienyl)methyl]guanin, 8-Amino-[9-(2-thienyl)methyl]guanin, das Monohydrochlorid-Hemihydrat, 8-Amino-[9-(3-pyridinyl) methyl]guanin,9-[(3-methyl-2-thienyl)methyl]guanin,9-[(2-Methyl-3-thienyl)methyl]guanin, 9-[(Benzo[b]thien-3-yl)methyl]guanin,9-(3-Thienyl)methyl-guanin,9-[(2,5-Dimethyl-3-thienyl)methyl]guanin,9-(3-Furanylmethyl)guanin,8-Brom-9- (2-furanylmethyl)guanin,8-Brom-9-[(2-methyl-3-thienyl)methyl]guanin, 8-Brom-9-[(benzo[b]thien-3-yl)methyl]guanin,8-Brom-9-i(2-thienvl)methvllauanin.

8-Amino-9-(2-furanylmethyl)guanin und das Monohydrochloridhydrat, 8-Amino-9-[(3-thienyl)methyl]guanin und das Monohydrochlorid-monohydrat, 8-Amino-9-[(3-methyl-2-thienyl)methyl]guanin und das 0,25 Hydrat, 8-Amino-9-[(benzo[b]thien-3-yl)methyl]guanin und das Hemihydrat, Methyl[2-amino-6,9-dihydro-6-oxo-9-(2-thienylmethyl)-1 H-purin-8-yl]carbamat, Ethyl[2-amono-6,9-dihydro-6-oxo-9-(2-thienylmethyl-1 H-purin-8-yl]carbamat, 8-Amino-9-[(3-furanyl)methyl]guanin und das Hydrochlorid, 8-Amino-9-[2-(2-thienyl)ethyl]guanin und das Hydrochlorid, 8-Amino-9-[(2-methyl-3-thienyl)methyi]guanin und das Hydrochlorid, 8-Amino-9-[(5-methyl-2-thienyl)methyl]guanin, 8-Amino-9-[(2-pyridinyl)methyl]guanin und das 1,5HCI · 0,25H₂O Salz, 8-Amono-9-[benzo[b]thien-2-yl)methyl]guanin und das 0,25 Hydrat, 8-Amino-9-[(2-thiazolyl)methyl]guanin, 8-Amino-9-[4-thiazolyl)methyl]guanin, 8-Amino-9-[(2-(3-thienyl)ethyl]guanin und das 0,9HCI-Monohydrat, 8-Amino-9-[(5-methyl-3-thienyl)guanin und das Hydrochlorid-Hemihydrat, 8-Amino-9-[(5-methyl-2-furanyl)methyl]guanin und das Hydrochlorid-1,15-Hydrat, 8-Amino-9-[(4-methyl-3-thienyl)methyl]guanin, 8-Amino-9-[(4-methyl-2-thienyl)methyl]guanin,2,8-Diamino-1,9-dihydro-9-(2-thienylmethyl)-6H-purin-6-thion, 2,8-Diamino-1,9-dihydro-9-(3-thienylmethyl)-6H-purin-6-thion,2,8-Diamino-1,9-dihydro-9-(2-(2-thienyl)ethyl]-6H-purin-6-thion, 2-Amino-7,9-dihydro-9-(2-thienylmethyl)-1H-purin-6,8-dion,2-Amino-1,7,8,9-tetrahydro-9-(2-thienylmethyl)-8-thioxo-6H-purin-6-on, N,N'-[6,9-Dihydro-6-oxo-9-(2-thienylmethyl)-1 H-purin-2,8-diyl]bisacetamid.

Formelschema

NHCOOR,

ti

Ar —fCH.

NHCNHCOOR,

Ar tCH

5 η

HCHO

NH

Ar—(CH.

5 η

Claims (1)

1. Erfindungsanspruch:

   Verfahren zur Herstellung von Purinderivaten der Formel

   in der R₁ OH oder SH ist, R₂ Wasserstoff oder die Gruppe NHR bedeutet, in der R ein Wasserstoffatom oder die Gruppe CORe ist, in der R₆ eine Ci-Q-Alkylgruppe, eine Aryl- oder Arylalkylgruppe ist, R₃ ein Wasserstoff- oder Bromatom oder eine Hydroxy-, Mercapto- oder NHR-Gruppe bedeutet, wobei R Wasserstoff ist oder COR₆, wobei R₆ wie oben definiert ist, η 0 oder 1 und m 0,1, 2 oder 3 bedeutet, mit der Maßgabe, daß m oder η zumindest 1 ist, R₄ und R₅ jeweils unabhängig voneinander ein . Wasserstoffatom, eine Alkylgruppe mit 1 bis 4C-Atomen, eine Hydroxyalkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, eine Aryl-, Arylalkyl- oder Cycloalkylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen bedeuten und Ar eine Heteroaryl-Gruppe bedeutet, die gegebenenfalls substituiert ist durch Ci-C₄-Alkyl-, Ci-C₄-Al koxy, -C=C-C=C- gebunden an benachbarte Kohlenstoff atome unter Bildung eines annelierten Benzorestes, oder Halogen, sowie der pharmazeutisch verträglichen Säure- oder Basenadditionssalze davon, ausschließlich der Verbindung, in der R, OH, R₂ Amino, R3 Wasserstoff, η 0, m 1 und Ar2-Furanylist, gekennzeichnet dadurch, daß man

   A) zur Herstellung einer Verbindung der Formel I, in der n, m, Ri, R₂, R₃, R₄, R5 und Ar,wie oben definiert sind, eine Verbindung der Formel III,

   —/

   NHCOOR-

   III

   in der R6, n, m, R₄, R₅ und Ar,wie oben definiert sind, in Gegenwart einer Base wie K₂CO₃ in einem alkoholischen Lösungsmittel, wie MethanoLerhitzt unter Bildung der Verbindung der Formel I, in der Ri OH und R₃ NHCOR₆ bedeutet, wobei R₆,wie oben definiert ist, und gegebenenfalls diese Verbindung umwandelt in eine Verbindung, bei der Ri S oder SH ist, nach an sich bekannten Verfahren und, soweit erwünscht, wenn R₃ NHCOR₆ ist, die Verbindung in eine Verbindung umwandelt, bei der R₃ Wasserstoff oder NHR ist, wobei R Wasserstoff oder COR₆ bedeutet und R₆₁WJe oben definiert ist,

   B) zur Herstellung einer Verbindung der Formel I, in der R₂ = NH₂ ist und Ri R, R₃, R₄, R₅, m, η und Ar wie oben definiert sind oder der tautomeren Form, wenn R₁ = OH ist, entsprechend der Formel I a

   Ia

   eine Verbindung der Formel IV

   HCHO

   IV

   wobei n, m, R₄, R₅ und Ar,wie oben definiert sind, bei erhöhter Temperatur umsetzt mit Ameisensäure und Formamid unter Bildung einer Verbindung der Formel I oder la, in der R₃ = H und R₂ = NH₂ ist und gegebenenfalls nach an sich bekannten Verfahren diese Verbindung umwandelt in eine Verbindung der Formel I, bei der R₃ = Br ist und weiter in eine Verbindung, bei der R = NHR ist, wobei R,wie oben definiert ist, oder in ein pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz oder Basensalz davon;

   C) zur Herstellung einer Verbindung der Formel I a, in der R₃ = Br ist und R₄, R₅, η und m,wie oben definiert sind, eine Verbindung der Formel I a, in der R₃ = H ist, in einem organischen Lösungsmittel behandelt mit N-Bromsuccinimid und gegebenenfalls nach an sich bekannten Verfahren, die erhaltene Verbindung in ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz oder Basensalz umwandelt

   D) zur Herstellung einer Verbindung der Formel I, in der R₃ NHR ist, wobei R_%wie oben definiert ist, eine Verbindung der Formel IA, in der R₃ = Br ist und R₂ = NH₂ ist und R₄, R₅, n, m und Ar die oben angegebene Bedeutung haben, bei erhöhter Temperatur mit Hydrazin umsetzt und gegebenenfalls mit Raneynickel in einem Alkohol als Lösungsmittel und, wenn dies erwünscht ist, die erhaltene Verbindung, in der R Wasserstoff ist, umwandelt in eine Verbindung, in der R = COR₆ ist, durch Umsetzung mit einem Alkanoylhalogenid, Aroylhalogenid oder Arylalkanoylhalogenid in Gegenwart einer organischen Base und, wenn dies erwünscht ist, wenn R₁ = O oder OH ist, diese Verbindung nach an sich bekannten Verfahren umwandelt in eine Verbindung, in der Ri = S oder SH ist, und gegebenenfalls die erhaltene Verbindung nach an sich bekannten Verfahren in ein pharmazeutisch annehmbares Säureadditionssalz oder Basensalz davon umwandelt;

   E) zur Herstellung einer Verbindung der Formel III, in der R₆, n, m, R₄, R₅ und Ar die oben angegebene Bedeutung haben, eine Verbindung der Formel Il

   NHCNHCOOR₆

   Ar—(CH.4-

   in der R₆, η, m, R₄, R₅ und Ar die oben angegebene Bedeutung haben, mit einem Kupplungsmittel wie N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid in Gegenwart eines Lösungsmittels zusammenbringt;

   F) zur Herstellung einer Verbindung der Formel II, in der R₆, n, m, R₄, R₅ und Ar wie oben definiert sind, eine Verbindung der Formel IV, in der n, m, R₄, R_s und Ar₍wie oben definiert sind, in wasserfreiem Methanol mit wasserfreier HCI umsetzt, die erhaltene Verbindung der Formel IVa

   ^2HC1 IVa

   in der R₄, R₅, n, m und An/vie oben definiert sind, dann mit Hydrazin in wäßrigem NH₄OH und anschließend mit einem niederen Alkoxycarbonylisothiocyanat R₆OOCNCS behandelt;

   G) zur Herstellung einer Verbindung der Formel IV, in dem, m, R₄, R₅ und Ar,wie oben definiert sind, (1)2-Amino-6-chlor-4-pyrimidinol mit einem Arylalkylamin der Formel

   in der R₄, R₅, η und m,wie oben definiert sind umsetzt, (2) das Produkt der Stufe (1) mit wäßrigem Natriumnitrit umsetzt und (3) das Produkt der Stufe (2) mit Natriumdithionit in Formamid und Ameisensäure umsetzt.

   Hierzu 1 Seite Formeln

   Anwendungsgebiet der Erfindung

   Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung von Purinderivaten. Die so erhaltenen Verbindungen und ihre pharmazeutisch annehmbaren Salze sind geeignet zur Behandlung von Autoimmunerkrankungen wie Arthritis, systemischem Lupus erythematodes, entzündlichen Blasenerkrankungen, Multipler Sklerose, juvenilem Diabetes sowie bei Transplantationen gegen Virusinfektionen und Krebs.