CZ88093A3 - Application of prothrombin fragments - Google Patents
Application of prothrombin fragments Download PDFInfo
- Publication number
- CZ88093A3 CZ88093A3 CZ93880A CZ88093A CZ88093A3 CZ 88093 A3 CZ88093 A3 CZ 88093A3 CZ 93880 A CZ93880 A CZ 93880A CZ 88093 A CZ88093 A CZ 88093A CZ 88093 A3 CZ88093 A3 CZ 88093A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- thrombin
- prothrombin fragments
- activity
- agent
- fragments
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/56—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving blood clotting factors, e.g. involving thrombin, thromboplastin, fibrinogen
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- G01N2333/974—Thrombin
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
- Y10S436/808—Automated or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
- Y10T436/106664—Blood serum or blood plasma standard or control
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
- Y10T436/108331—Preservative, buffer, anticoagulant or diluent
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
Použití protrombinových fragmentů
Oblast techniky
Vynález se týká nového použití protrombinových fragmentů, zejména meizotrombinu, meizotrombinu(desF1) nebo 3e3ich směsi.
Dosavadní stav techniky
Stanovení trombinových substrátů aktivací pomocí trombinu představuje důležitou metodiku pro charakterizaci produktů z krve a plasmy. Například se stanoví koncentrace nebo aktivity fibrinogenu, faktoru V, faktoru VIII nebo proteinu G prostřednictvím aktivace trombinem standardním způsobem v plasmu obsahujících vzorcích.
Trombin je 36kD protein, který hraje ústřední úlohu v
v kaskádě krevního srážení, nebot jeho hlavní funkcí je přeměna fibrinogenu na fibrin, který vytváří za pomoci pov případě trombinem aktivovaného faktoru XIII fibrinovou sít.
^adto trombin aktivuje také krevní faktory jako faktor V, faktor VIII a protein G a působí agregaci trombocytů. Řada jiných proteinů, jako fibronektin, trombospondin a apolipoprotein, různé kolageny, laminin atd (viz tabulka 1, Stocker, 3em.Thr.Hem.17(2)str. 1 1 4 (1991)) mohou byt rovněž štěpeny trombinem. lakové proteiny jsou v dalším popise označovány jako trombinové substráty.
krve
Xa základě svého důležitého postavení se účinnost trombinu in vivo velmi oř tory nebo inhibitory aktivity.
esně reguluje zejména inhibitory substrátů rušivé, nebot výsledky ve jsou ale při stanovení trombinových inhibitory zkreslují ^2
-2nebo se před stanovením musí přidat mnohem větší, přebytkové množství trombinu, aby uvedené inhibitory překryl.
Důležitým inhibitorem trombinu je například heparin spolu s antitrombinem III. Heparin je obsažen prakticky ve všech krevních vzorcích, jestliže se odebraná krev bezprostředně po odběru heparinizuje, aby se zabránilo předčasnému srážení, tj. smísí se s heparinem nebo, jestliže pacientovi byl podáván heparin nspř. pro antikoagulační teraoii.
Vlastním trombin inhibujícím činidlem je antitrombin
III. Heparin potencuje účinek antitrombinu III.
U vzorků krve nebo plasmy, obsahujících heparin je vždy také nebezpečí, že budou získány zkreslené výsledky při stanovení koncentrace trombinu, aktivace trombinového substrátu nebo kinetiky, pokud tyto nebyly nákladnou cestou zbaveny heparinu nebo nebyl heparin neutralizován.
Je proto nutný stupen dalšího zpracování, což je málo výhodné pro diagnostické způsoby, které bv oro rutinní provádění měly být co nejjednodušší. Každý další stupen zpracování znamená nejen vyšší pracovní náklady, ale je také zdrojem chyb při stanovení.
Trombin se v krvi tvoří z neaktivního proteinu, protrombinu, ve více stupních, až do zralého enzymu. Draly enzym je tvořen dvěma řetězci (A- a 3-řetězec), které jsou vzájemně soojeny disulfidcvým můstkem.
Oieizotrombin nebo meizotrombinkdesll ) jsou takové protrombinové fragmenty, které vznikají neúplnou aktivací protrombinu na trombin kviz. obr. 1, Dovle a spol., J. Hiol.Chem. 265 (18), 10693-10701 (1990)). --.eizotrombin (děsil ) vzniká aktivací orotrombinu za nepřítomnosti inhibitoru trombinu. Vzniká přitom nejprve meizotrombin, _7_ který se po odštěpení fragmentu F1 proteolyticky odbourá na meizotrombin(des?1). -Molekulová hmotnost se tak redukuje z asi 72 kD na asi 48 kD. Tyto fragmenty jsou považovány za nestabilní, nebot autokatalyticky degradují, např. meizotrombin se rychle autokatalýzou přemění na -trombin. iueizotrombin a meizotrombin(desFl ) mohou být také vyrobeny působením e^carinu - hadího jedu na protrombin.
Pokusy Doyla a spol. 'ukázaly, že hovězí meizotrombin na rozdíl od protrombinu vykazuje proteázovou aktivitu, která je ve srovnání s trombinem velmi malá.
Meizotrombin je sice schopen malou rychlostí např. štěpit fibrinogen na fibrin nebo aktivovat protein G, avšak neinhibuje se heparinem, nebo inhibiční účinek o mnoho řádů nižší (Stocker a MQller, Thrombosis and Kaemostasis 55 (6), abstrakt 855 (1991)). Ukázalo se ale také, že lidské protrombinové fragmenty jsou podstatně méně stabilní než např. hovězí.
Je ale také známo, že některé hadí jedy štěpí trombinový substrát. Andersson (Kaemostasis 1, 31-43 (1972)) popisuje thrombin like activity mnoha hadích jedů a vyjadřuje ji analogicky k trombinu v NIH jednotkách/ml. Použití hadích jedů v rámci diagnostiky s lidskými Droteiny má však nevýhodu nespecifických vzájemných působení (intraspeciesinterakce). Je proto především při vývoji diagnostického způsobu pro stanovení lidských faktorů snaha, použít jen savčí proteiny, výhodně lidské proteiny. Podstatným oředookladem pro způsob stanovení je jednoznačná reakce použitého oroteinu.
clonou vvnálezu je poskytnout nové použití protrombinových fragmentů, při vyvarování se inhibitory vyvolaných zdrojů chyb. Vynález tak musí umožnit jednoduchou a přesnou metodu stanovení trombinových substrátů.
-4Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je použití protrombinových fragmentů, výhodně lidských protrombinových fragmentů s thrombin like activity, zejména meizotrombinu, meizotrombinu(desPl ) nebo jejich směsi, pro diagnostické účely ke stanovení trombinového substrátu.
3ylo zjištěno, že tyto fragmenty mohou rovněž štěpit substráty, které budou reagovat s trombinem. Thrombin like activity zde znamená proteázovou aktivitu, která umožní štěpení trombinových substrátů, jejich reakční kinetika a reakční parametry, jako pH- aptimum a optimum iontové síly, inhibitory, efektory, allosterické vzájemné působení std. se ale nemusí nezbytně shodovat s trombinovými.
Použití podle vynálezu má tu výhodu, že thrombin like activity jmenovaných substancí je na základě jejich malé aktivity k antitrombinu III na rozdíl od trombinové aktivity necitlivá k heparinu. Diagnostické stanovení za použití uvedených plasmových proteinů je také?£ávislé na obsahu heparinu ve vzorku a proto proveditelné jednoduchým způsobem.
Podle vynálezu se stanoví nejen trombinový suostrát, ale také substance,které nějak vzájemně působí na trcmbinové substráty aktivované podle vynálezu.
Peagens může být také použito k nepřímému stanovení faktorů kaskády srážení aktivovanými trombinovámi substráty.
K faktoru VIII může například být ořidáno činidlo a provést aktivaci in šitu. Je tak možno stanovit faktor IX a dále
Vynález se také týká použití protrombinových fragmentů, výhodně lidských protrombinových fragmentů, s thrcmbi:
like activity, zvláště meizotrombinu, meizotrombinuidesFl) nebo jejich směsí, k aktivaci trombinových substrátů s následujícím. stanovením plasmového proteinu, který soolu a aktivovaným trombinovým substrátem na sebe vzájemně působí přímo nebo nepřímo.
•rodle vynálezu se meizotrombin nebo meizotromoin<des?1), výhodně lidský meizotrombin nebo meizotrombin \desFl), používají jednotlivě nebo jako směs. myto substance mohou být standardizovaným způsobem nastavena pro použití, např. kontrolovaným štěpením, použitím hadích jedů atd., přičemž se s překvapením zjistilo, že vykazují stabilitu nutnou pro diagnostiku.
Také genovou technologií vyrobené proteiny, které na základě své struktury vykazují aktivitu podobnou trombinu a ve srovnání s trombinem mají nižší afinitu k antitrombinu III, jsou pro použití podle vynálezu vhodné.
Vynález zahrnuje dále činidlo, obsahující protrombinové fragmenty, výhodně lidský protrombinový fragment, s thrombin. like activity, zejména meizotrombin, meizotrombin(desF1) nebo jejich směsi, k použití pro diagnostické účely pro stanovení trombinových substrátů a pro aktivaci trombinových substrátů s následujícím stanovením plasmového proteinu, který je ve vzájemném působení s trombinovým substrátem přímým nebo nepřímým způsobem, například proteinů kaskády srážení jako faktoru XA a faktoru *a.
činidla, která ty a budou používán lizována a obsahují substrát oro ooužit obsahují uvedené a podle vynálezu, nepřipadá další protrombinové fragmenjsou popřípadě lyofiaktivovaný trombinový í nro diagnostické účely.
-6Vynález může také obsahovat činidlo, které déle obsahuje jeden nebo více plasmových proteinů, které mohou být aktivovány, Oa^+-ionty a popřípadě fosfolipidy, nebo činidlo, které dále obsahuje detekční činidlo.
lále je možno vyrobit testovací kit, který vedle uvedených reagencií obsahuje ještě detekční činidlo.
Testovací kit obsahuje nejméně
- činidlo, obsahující protrombinové fragmenty s thrombin like activity, zejména meizotrombin, meizotrombin(desF1 ) nebo jejich směsi, nebo
- činidlo, obsahující protrombinové fragmenty s thrombin like activity, zejména meizotrombin, meizotrombin(desFl) nebo jejich směsi, které dále obsahuje jeden nebo více: plasmových proteinů, které mohou být aktivovány a
- detekční činidlo, a může výhodně dále obsahovat
- trombinový substrát.
Volba detekční metody a tím detekčního činidla se přirozeně řídí charakterem stanovované substance ve vzorku. Například se bude stanovovat aktivita aktivovaného proteinu C s chromogenním substrátem 3 2238 (fa Kabi); může se stanovit doba srážení nebo je možno použít značených substancí.
Následujícími příklady je vynález ještě více vysvětlen.
?říkladv provedení vynálezu
1. Výroba meizotrombinu a rozdělení molekulové hmotnosti
1.1. Výroba imobilizovaného ecarinu
Fcarin (fa Pentapharm) se v koncentraci 250 j/ml gelu naváže na 3rCNaktivovanou Sepharosutfy Pharmacia) modle metody
-7νοη 4χθηε s spol. U967).
1.2. Výroba meizotrombinu ml gelu se inkubuje se 4 j protrombinu (z plasmy čištěné adsorpcí na ΡΞΑΞ-Sephadexu a potom dalším chromatografickým jištěním) v 0,021.1 Na-acetátovém pufru, 0,15 -·! NaOl, p
5,2, 1 hodinu při teplotě místnosti. Potom se produkt oddělí filtrací od gelu.
1.3. Pozdělení molekulové hmotnosti
Podle nativní SPS-PASE a imunoblottingu (1. protilátka: anti-F.II, polyklonální z králíkůj 2. protilátka: peroxidasa-konjugovaná anti-králičí protilátka z koz) se stanoví rozdělení molekulové hmotnosti a provede se kvantifikace. Produkt vykazuje následující rozdělení molekulové hmotnosti: thrombin like activity: 67 až 75 kP (31 %), až 50 kP (40 ŽO). Pále bylo nalezeno: TM 00 kP (7 %>), 32 až 38 kP (13 3), A 20 kP (5 ;S).
Odkaz: áxen n. Porath A.P., Ernback J.S., ^‘ature 214, 1 3921404, 1967.
2. Stanovení fibrinogenu
2.1. Poba srážení normální plasmy ml lyofilizované normální plasmy (odkaz Plasma 100 3, fa mmmuno) se rozpustí v 1 ml vody s nebo bez ořidávku heparmu \0j o,3j 1,0 a 2,v j/ml.). 200 /ul olasmy se inkubuje 2 min přf.'37 °0. Potom i sraženina rozpustí ve 200 ul roztoku 5,8 PIH-analog j/ml meizotrombinu, vyrobeného ocele 1., nebo se 3,3 j/o-7 nebo 10,0 NTH-j/ml trombinu (Thrombin *T-eagent, fa -í-mmuno) koagulometrem Schmitger·
Poba do tvorby chuchvalce se měří ross (fa.žnelung). S taoulky 1 je
-8zřejmé, že se době srážení při užití trombinu prodlouží obsahuje-li vzorek hepsrin, zatímco působení meizotromoinu je heparinem sotva ovlivněno.
Tabulka 1 doba srážení (s) ibsah heoarinu ve vzorku (j/ýnl) v, o trombin (HIH-j/ml)
3,3 16,1 56,1 >400 ’400
7,0 15,6 67,4 >400 meizotrombin (NIH-analog j/ml)
5,S 5,5 6,1 7,6 >400 >400
8,0
8,6
2.2. Odběrová křivka oro fibrinosen j-yofilizovaná normální plasma (viz 2.1 ) se rozoustí v ml destilované vody s nebo bez přídavku různých trombinových inhibitorů (vždy 1 j/ml antitrombinu III, heparinu nebo antitrombinu IlI/heparlnového komplexu (Atheolex^,f a. Immuno)) a rozdílně se ředí 0,1 il fosfátovým pufrem (pH 7,5). Smísí se 100 ml vzorky s 50 ml téhož pufru a inkubují se min při 37 0. Po přídavku 150 ml roztoku 10,5 NIH-analog j/ml meizotromoinu (fa Pentapharm) nebo 5 NIH-j/ml trombinu (Ihrombin --eagent -'a.ummuno) se stanoví doba srážení analogicky 2.1.
doba srážení s trombinem (s) přisedá inhibitoru
| vzorek | žádný inhi b. | Atheolex | ΛΓΙΙΙ | heparin |
| konc. | 17,1 | , -* v L· | - a o | > T 3 3 / J V L· |
| 1 :2 | 21,o | 61,5 | \ * 3 Q | oO, 4 |
| 1 :4 | 27,5 | 37,1 | 1 Λ 4 £ . v - | 35,1 |
| 1 :8 | 41 ,5 | 3S,Ó | 54,5 | 48,S |
| doba srážení s meizotrombinem | ||||
| vzorek | žádný inhib. | přísada Atheplex | inhibitoru ΑΓΙΙΙ heparin | |
| konc. | 15,1 | 16,0 | 19,7 | 25,5 |
| 1 :2 | 23,5 | 26,6 | 28,5 | 31,5 |
| 1 :4 | 34,5 | 36,6 | 37,1 | 39,1 |
| 1 :S | 55,1 | 57,5 | 54,0 | 60,5 |
aktivátor kaskády kieizo trombin v diagnostiku jako srážení
Faktor VIII v normální plasmě (viz 2.1) se aktivuje po přídavku 0, 1, 2, o nebo 10 j heparinu/ml meizctrombinam <0j 3 nebo 5 j/ml) vyrobeného oodle 1., a nepřímo stanoví přes faktor Xa a chromogenní substrát. Použije se proto Test Immunochcom FVIIIzC^ (Ih-.XuNO J5G) podle návodu výrobce, přičemž se ·_ ••-y-ij Λ přidá aeizotrombin inidlo 3 se použije bez Polvbrenu ento test obsahuje trombin, čímž je možné přímé srovnání meizotrombinu a trombinu pro stanovení aktivovaných faktorů srážení v testovacím systému
Následující tabulka
o.
U.A. OZj U.
že;přítomnost-10·ΜΒΙΜΙΙΙΗ·!!!·!····«ΙΙΙΜΙ··Ι^^ meizotrombinu je aktivace a stanovení faktoru VIII méně v
ovlivňováno obsahem heparinu v plasmě.
heparin
| íj/ml) | 0 | 1 | 2 | 5 | 10 |
| meizotrombin | |||||
| (NIH-anslog j/c | :1) | ||||
| vývin barvy | (%) | ||||
| 0 | 1 00 | 99 | 95,6 | 80 | 52,1 |
| 3 | 100 | QO | 97,4 | 87,8 | 73,3 |
| 5 | 100 | 100 | 98 | 92,2 | 80,1 |
Claims (4)
- ? Λ Τ Ξ Ν Τ Ο 7 É Μ Α'Ά 0 Κ ϊ1 . Použití protrombinových fragmentů, zejména lidských protrombinových fragmentů, s thrombin like activity, zvláště meizotrombinu, meizotrombinu(desF1 ) nebo jejich směsí, pro diagnostické účely ke stanovení trombinových substrátů.
- 2. Použití protrombinových fragmentů, výhodně lidských protrombinových fragmentů, s Thrombin like activity, zvláště meizotrombinu, meizotrombinuídesFl ) nebo jejich směsí, k aktivaci trombinových substrátů s následujícím stanovením plasmového proteinu, který spolu s aktivovaným trombinovým. substrátem na sebe vzájemně působí přímým nebo nepřímým způsobem.
- 3. Činidlo, obsahující protrombinové fragmenty, výhodně lidské protrombinové fragmenty, s thrombin like activity, zejména meizotrombin, meizotrombinídes?1 ) nebo jejich směsi, pro použití podle nároku 1 nebo 2.
- 4. činidlo podle nároku 3, které nebo více plasmových Droteinů, které 2+Ca -ionty a oopřípadě fosfolioidy.dále obsahuje jeden mohou být aktivovány, ?· činidlo podle nároku 3 nebo 4, která dále obsahuje detekční činidlo.o. testovací kit, obsahující alespoň- činidlo podle nároku 3,- detekční činidlo.-127. Testovací kit, obsahující alespoň- činidlo podle nároku 4,- detekční činidlo.θ· Testovací kit podle nároku 6 nebo 7, dále obsahujíoí-trombinový substrát.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT0100092A AT397391B (de) | 1992-05-15 | 1992-05-15 | Verwendung von prothrombinfragmenten |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ88093A3 true CZ88093A3 (en) | 1993-12-15 |
Family
ID=3504644
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ93880A CZ88093A3 (en) | 1992-05-15 | 1993-05-12 | Application of prothrombin fragments |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5529905A (cs) |
| EP (1) | EP0570355B1 (cs) |
| JP (1) | JPH0630793A (cs) |
| AT (2) | AT397391B (cs) |
| CA (1) | CA2096076A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ88093A3 (cs) |
| DE (1) | DE59309254D1 (cs) |
| DK (1) | DK0570355T3 (cs) |
| ES (1) | ES2126641T3 (cs) |
| FI (1) | FI107409B (cs) |
| HU (1) | HU219457B (cs) |
| MX (1) | MX9302830A (cs) |
| NO (1) | NO308140B1 (cs) |
| SK (1) | SK48893A3 (cs) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4430204A1 (de) * | 1994-08-26 | 1996-02-29 | Behringwerke Ag | Arzneimittel, welches als Gegenmittel für Blut-Antikoagulanzien geeignet ist und seine Verwendung |
| US6165795A (en) * | 1998-06-25 | 2000-12-26 | Cardiovascular Diagnostics, Inc. | Methods for performing fibrinogen assays using dry chemical reagents containing ecarin and magnetic particles |
| DE19904674A1 (de) | 1999-02-04 | 2000-08-31 | Haemosys Gmbh | Verfahren zur Bestimmung der Konzentration von Thrombininhibitoren |
| JP2003504082A (ja) * | 1999-07-09 | 2003-02-04 | コヘージョン テクノロジーズ， インコーポレイテッド | エカリンポリペプチド、エカリンをコードするポリヌクレオチド、及びその利用のための方法 |
| US20050221414A1 (en) * | 2004-03-31 | 2005-10-06 | Katalin Varadi | Kit for measuring the thrombin generation in a sample of a patient's blood or plasma |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4496653A (en) * | 1980-10-09 | 1985-01-29 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process for the determination of antithrombin-BM |
| NL8902406A (nl) * | 1989-09-27 | 1991-04-16 | Hendrik Coenraad Hemker Prof D | Werkwijze voor het bepalen van de endogene trombinepotentiaal van plasma, en bloed alsmede een bij deze werkwijze te gebruiken kit. |
| EP0442843B1 (de) * | 1990-02-14 | 1998-09-09 | Pentapharm A.G. | Inhibitoren zur antikoagulierenden Vorbehandung von Blutproben |
| EP0509086B1 (en) * | 1990-11-05 | 1995-04-12 | Dade Produktions AG | A method to determine the concentration of anticoagulants |
-
1992
- 1992-05-15 AT AT0100092A patent/AT397391B/de not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-05-06 HU HU9301316A patent/HU219457B/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-05-12 CA CA002096076A patent/CA2096076A1/en not_active Abandoned
- 1993-05-12 CZ CZ93880A patent/CZ88093A3/cs unknown
- 1993-05-12 DE DE59309254T patent/DE59309254D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1993-05-12 ES ES93890098T patent/ES2126641T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-05-12 EP EP93890098A patent/EP0570355B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-05-12 DK DK93890098T patent/DK0570355T3/da not_active Application Discontinuation
- 1993-05-12 AT AT93890098T patent/ATE175243T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-05-14 NO NO931772A patent/NO308140B1/no not_active IP Right Cessation
- 1993-05-14 MX MX9302830A patent/MX9302830A/es unknown
- 1993-05-14 SK SK488-93A patent/SK48893A3/sk unknown
- 1993-05-14 JP JP5112798A patent/JPH0630793A/ja active Pending
- 1993-05-14 FI FI932194A patent/FI107409B/fi not_active IP Right Cessation
-
1994
- 1994-12-08 US US08/351,736 patent/US5529905A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AT397391B (de) | 1994-03-25 |
| HU219457B (hu) | 2001-04-28 |
| FI932194A (fi) | 1993-11-16 |
| FI932194A0 (fi) | 1993-05-14 |
| DE59309254D1 (de) | 1999-02-11 |
| FI107409B (fi) | 2001-07-31 |
| HUT64698A (en) | 1994-02-28 |
| CA2096076A1 (en) | 1993-11-16 |
| NO308140B1 (no) | 2000-07-31 |
| NO931772L (no) | 1993-11-16 |
| JPH0630793A (ja) | 1994-02-08 |
| ATE175243T1 (de) | 1999-01-15 |
| ES2126641T3 (es) | 1999-04-01 |
| EP0570355B1 (de) | 1998-12-30 |
| SK48893A3 (en) | 1993-12-08 |
| HU9301316D0 (en) | 1993-09-28 |
| DK0570355T3 (da) | 1999-08-30 |
| NO931772D0 (no) | 1993-05-14 |
| MX9302830A (es) | 1994-05-31 |
| EP0570355A1 (de) | 1993-11-18 |
| ATA100092A (de) | 1993-08-15 |
| US5529905A (en) | 1996-06-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Walker | Protein S and the regulation of activated protein C | |
| Lundblad et al. | The activation of antihemophilic factor (factor VIII) by activated Christmas factor (activated factor IX) | |
| US5051357A (en) | Method and assay using inactivation of factors Va and VIIIa by activated Protein C to diagnose thrombic disease or assay for Protein C and kit therefor | |
| Myrmel et al. | Characteristics of the association between prothrombin fragment 2 and α-thrombin | |
| Chouhan et al. | Simultaneous occurrence of human antibodies directed against fibrinogen, thrombin, and factor V following exposure to bovine thrombin: effects on blood coagulation, protein C activation and platelet function | |
| AU705596B2 (en) | Method for specifically detecting a coagulation factor V which has an increased stability toward activated protein C in the activated state | |
| JP2003517610A (ja) | 血液学的アッセイ及び試薬 | |
| Tamada et al. | Anticoagulant mechanism of sulfonated polyisoprenes | |
| US5726028A (en) | Method for detecting disturbances of the protein c/protein s system | |
| WO1991001382A1 (en) | A method for determining the functional activity of free protein s or protein c in a plasma sample | |
| Saba et al. | The anticoagulant activity of lysosomal cationic proteins from polymorphonuclear leukocytes | |
| Rick et al. | Thrombin activation of factor VIII: the effect of inhibitors | |
| JP2004075680A (ja) | 止血補助因子としてｒｎａを含む医薬製剤 | |
| US5506112A (en) | Reagent used for determining factor VIII activity | |
| CA2100567C (en) | Protein s chromogenic assay | |
| CZ88093A3 (en) | Application of prothrombin fragments | |
| Bertina et al. | The inhibitor of prothrombin conversion in plasma of patients on oral anticoagulant treatment | |
| US5753510A (en) | Calibrator for use in test methods for detecting a defective coagulation factor V | |
| AU707817B2 (en) | A method for the quantification of activated coagulation factor VII (FVIIa) | |
| CZ87893A3 (en) | Fibrinogen determination method | |
| JPH04350560A (ja) | プロテインｓ活性の機能的測定方法 | |
| CA2137342A1 (en) | Test for quantitative thrombin time | |
| JPH1090273A (ja) | 抗トロンビンｉｉｉ含有溶液中のグリコサミノグリカンを定量する方法 | |
| JP2677546B2 (ja) | Ｖｉｉｉ因子フラグメントのコンプレックスの凝固活性剤 | |
| Austen | Clinical Biochemistry of Blood Coagulation |