CZ288448B6 - Pentapeptide hydrochloride, processes of its preparation and intermediates therefor - Google Patents
Pentapeptide hydrochloride, processes of its preparation and intermediates therefor Download PDFInfo
- Publication number
- CZ288448B6 CZ288448B6 CZ19963260A CZ326096A CZ288448B6 CZ 288448 B6 CZ288448 B6 CZ 288448B6 CZ 19963260 A CZ19963260 A CZ 19963260A CZ 326096 A CZ326096 A CZ 326096A CZ 288448 B6 CZ288448 B6 CZ 288448B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- val
- pro
- formula
- compound
- meval
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
Description
Oblast techniky
Vynález se týká hydrochloridu pentapeptidu, způsobů jeho výroby a meziproduktů vhodných pro jeho výrobu.
Dosavadní stav techniky
V PCT přihlášce WO 93/23424 jsou popsány účinné látky na bázi peptidů, které vykazují zajímavé antineoplastické aktivity. Zvláště dobrou účinnost vykazují pentapeptid z příkladu 234 uvedené přihlášky, který má následující vzorec:
Me2Val znamená N,N-dimethyl-L-valin, MeVal znamená N-methyl-L-valin a Bzl znamená benzylový zbytek.
Peptid je možno vyrobit podle uvedené PCT přihlášky způsobem v pevné fázi, který vychází z prolinu. Účinná látka přitom vzniká ve špatném výtěžku a v nečisté formě. Nezbytné je nákladné chromatografické čištění. Způsob v pevné fázi je navíc vhodný jen pro výrobu malých množství substance. Dosud se nepodařilo vyrobit substanci z příkladu 234 WO 93/23424 v krystalické formě. Účinná látka je ve formě pryskyřice. Proto je úplné oddělení zbytků rozpouštědla obtížné. Nákladné stupně čištění (sušení postřikem, sušení vymražováním) jsou nezbytné. Ztíženo je další galenické zpracování substance. Pro zkoušení a zavedení substance jsou potřebná větší množství substance. Pro její výrobu je potřebný technicky proveditelný způsob, který poskytne účinnou látku pokud možno v krystalické formě.
Nyní byl nalezen způsob, který poskytuje účinnou látku prostou racemizace ve vysoké čistotě, takže substance může být bez obtíží převedena na krystalickou sůl, hydrochlorid.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je hydrochlorid pentapeptidu vzorce I
Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBzl. HC1 (I), který je v krystalické formě.
Podstatou vynálezu je také způsob výroby této sloučeniny vzorce I, který spočívá v tom, že ze sloučeniny obecného vzorce II
Z-Val-Val-MeVal-Pro-OR1 (II), kde
-1 CZ 288448 B6
R1 znamená Ci_5-alkylskupinu a
Z představuje benzyloxykarbonylovou chránící skupinu, která je na fenylovém kruhu popřípadě substituována, buď
A) a) se odštěpí chránící skupina Z na N-konci za vzniku sloučeniny obecného vzorce ΙΠ
Val-Val-MeVal-Pro-OR1 (III), kde
R1 má význam uvedený výše, a na takto získané sloučenině výše uvedeného obecného vzorce III
1) volná aminoskupina na N-konci se dvakrát methyluje, za vzniku sloučeniny obecného vzorce IV
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OR‘ (IV), kde
R1 má význam uvedený výše,
2) ve sloučenině výše uvedeného obecného vzorce IV se alkoxyskupina -OR1 na C-konci hydrolyzuje působením báze, za vzniku sloučeniny vzorce V
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OH (V),
b) takto získaná sloučenina výše uvedeného vzorce V se deprotonuje působením báze na sloučeninu obecného vzorce VI
Me2Val-Val-MeVal-Pro-CTM+ (VI), kde
NT znamená K+, Na+, Li+ nebo amoniový ion, jako +NH(C2Hs)3, která se nechá reagovat s chloridem kyseliny vzorce C1COR2, kde R2 znamená terc.butyl, 2ethylhexyl, CM-alkoxyskupinu, methoxyskupinu, ethoxyskupinu nebo isobutoxyskupinu, nebo se sloučenina vzorce IV
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OR’ (IV), kde
R1 má význam uvedený výše, přímo nechá reagovat s tímto chloridem kyseliny vzorce C1COR2, kde R2 má výše uvedený význam,
-2CZ 288448 B6 vždy za vzniku směsného anhydridu obecného vzorce VII
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OR2 kde
R2 má význam uvedený výše, který se kopuluje s prolinbenzylamidem vzorce XII (VII),
(XII) za vzniku sloučeniny výše uvedeného vzorce I, nebo
B a) se odstraní alkoxyskupina -OR1 na C-konci, za vzniku sloučeniny obecného vzorce IX
Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH (IX), kde
Z má význam uvedený výše,
b) takto získaná sloučenina výše uvedeného obecného vzorce IX se převede na směsný anhydrid obecného vzorce X
Z-Val-Val-MeVal-Pro-O-CO-R2 (X), kde
Z a R2 mají význam uvedený výše, takto získaná sloučenina výše uvedeného obecného vzorce X se kopuluje s prolinbenzylamidem, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XI
Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBzl (XI), kde
Z má význam uvedený výše, a takto získaná sloučenina výše uvedeného obecného vzorce XI
1) zbaví se chránící skupiny Z na N-konci a
2) dvakrát se methyluje na volné aminoskupině na N-konci, za vzniku sloučeniny vzorce I a takto získaná sloučenina se převede na svůj hydrochlorid.
-3CZ 288448 B6
Podle výhodného provedení způsobu se tetrapeptidkarboxylové kyseliny obecného vzorce V nebo IX za účelem kopulace s prolibenzylamidem nejprve převedou na směsný anhydrid s kyselinou pivalovou.
Podstatou vynálezu je také sloučenina vzorce
Z-Val-Val-MeVal-Pro-OR1 (Π),
Val-Val-MeVal-Pro-OR1 (ΙΠ),
MezVal-Val-MeVal-Pro-OR2 (VII),
Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH (IX),
Z-Val-Val-MeVal-Pro-O-CO-R2 (X),
Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBzl (XI), kde
R1, R2 a Z mají výše uvedený význam, jako meziprodukt pro výrobu předmětného hydrochloridu pentapeptidu.
Způsob A probíhá podle následujícího reakčního schéma:
| Z - Val - Val- MeVal - Pro - OR1 | (Π) |
| Val - Val - MeVal - Pro - OR' | (ΠΙ) |
| i | |
| Me2Val - Val - MeVal - Pro - OR1 | (IV) |
| 1 | |
| Me2Val - Val - MeVal - Pro - OH | (V) |
| 4 | |
| Me2Val - Val - MeVal - Pro - 0®M® | (VI) |
| Me2Val - Val - MeVal - Pro - OCOR2 | (VII) |
| H 0 | (XII) |
Me2Val - Val - MeVal - Pro - Pro - NHBzl x HC1 (I)
Substituenty mají ve výše uvedeném schématu, jakož i v celém popise následující významy:
R1: Ci_5-alkyl, jako methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, terc.butyl, isobutyl, pentyl a zejména methyl a ethyl,
R2: terc.butyl, 2-ethylhexyl, Ci^alkoxy jako methoxy, ethoxy, isobutoxy,
Z: benzyloxykarbonyl, na fenylovém kruhu popřípadě substituovaný halogenem, Ci-4-alkylem, Ci_4-alkoxy, Cj^-acyloxy nebo nitro a zejména 2-C1, 3-C1, 4-C1, 4—Br, 4-CH3O-, 4CHjCOO-, 2-NO2 a 4-NO2,
-4CZ 288448 B6
M*, K+, Na+, Li+ nebo amoniový iont jako +NH(C2H5)3
Bzl: benzyl
Me: methyl.
Tetrapeptid vzorce II se rozpustí ve vhodném rozpouštědle např. alkoholu - jako je methanol, ethanol, isopropanol, butanol, etheru - jako THF, dioxan, MTBE, esteru - jako ethylacetátu, nebo ledové kyselině octové. Po přídavku vhodného katalyzátoru jako např. Pd/C nebo Pt/C se při teplotě mezi 0 a 50 °C, výhodně mezi 10 a 30 °C zavádí vodík. Zavádění vodíku může být prováděno za normálního tlaku nebo zvýšeného tlaku až 1 MPa. Reakce může být urychlena, když se odvádí určité množství odpadního plynu. Po ukončení spotřeby vodíku se přidají 2 až 5 ekvivalentů formaldehydu ve formě vodného roztoku nebo i plynné formě nebo ve formě paraformaldehydu. Potom se dále zavádí za výše popsaných podmínek vodík. Pak se odfiltruje katalyzátor. Sloučenina IV může být přečištěna kiystalizací jako hydrochlorid ze vhodného rozpouštědla nebo směsi rozpouštědel. Přitom se osvědčil isopropanol/methyl-terc.butylether. Stopy Z-tetrapeptidových esterů II ve IV se nechají odstranit extrakčním dělicím způsobem.
Zmýdelnění esteru IV se provádí ve vhodném rozpouštědle jako např. je alkohol jako methanol, ethanol, isopropanol, etheru jako je MTBE, THF, dioxan, uhlovodíku jako je toluen, xylen, nebo chlorovaném uhlovodíku jako je 1,2-dichlorethan, methylenchlorid, chloroform, snebo bez přídavku vody a s vhodnou bází jako je NaOH, KOH, LiOH. Esterové štěpení může být také prováděno kyselinami. Pro R1 = terc.butyl jsou proto zvláště vhodné CF3CO2H a roztok HC1 v dioxanu.
Získaná tetrapeptidová sloučenina V musí být dále kopulována a prolinbenzylamidem vzorce ΧΠ na pentapeptid I. Při takových kopulačních reakcích dochází snadno k racemizaci. g. Pettit a spol. (J. Am. Chem. Soc. 113, 6692-3 (1991)) proto používají pro analogickou kopulaci s tetrapeptidovou kyselinou vzorce V jako kopulační činidlo DEPC [(OEt)2POCN]. DEPC není ve velkých množstvích obchodně dostupný. Metoda proto vyžaduje přídavné způsobové stupně s jedovatými fosforovými a kyanidovými činidly. Odpady, obsahující kyanid, působí problémy při jejich odstraňování. Způsob je proto pro technické provedený nevhodný. Peptidovou kopulační metodou, která je zvláště jednoduše realizovatelná v technickém měřítku, je metoda směsného anhydridu (viz např. J. meienhofer v The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology, sv. 1., Academie Press, Orlando, 1979, str. 264-314). Přitom se kyselina vzorce V deprotonuje se vhodnou bází, např. terciárním aminem jako je triethylamin, N-methylmorfolin, dicyklohexylethylamin, diisopropylethylamin na VI. Estery vzorce IV mohou také reagovat s bázemi jako je NaOH, KOH, LiOH přímo na soli VI. Sloučeniny VI reagují s chloridem kyselin C1COR2 na směsný anhydrid vzorce VII. Vedle pivaloylchloridu mohou být také použity jiné chloridy kyseliny jako např. chlorid kyseliny 2-ethylhexanové, ethylester kyseliny chlormravenčí, methylester kyseliny chlormravenčí, isobutylester kyseliny chlormravenčí. Směsné anhydridy mají velmi silný sklon k racemizaci (viz např. J. Meienhofer v The Peptides, sv. 1, Academie Press, Orlando, 1979, str. 276 a dále).
Tetrapeptidivá kyselina V se nyní překvapivě nechá metodou směsného anhydridu reagovat zcela bez racemizace. Zvláště dobré výsledky se získaly se směsným anhydridem, který byl vyroben z V a pivaloylchloridu. Na rozdíl od novějších publikovaných výsledků (N.L. Benoiton a spol., Can. J. Chem. 65, 619-625 (1987)) poskytuje reakce s pivaloylchloridem, co do selektivity a výtěžku, lepší výsledky než reakce s estery kyseliny chlormravenčí. Výroba směsného anhydridu VII a následující kopulace s prolinbenzylamidem se provádí při teplotách od -20 do +5 °C ve vhodném rozpouštědle jako dioxanu, NMP, THF, toluenu, methylenchloridu, dimethylformamidu. Místo prolinbenzylamidu XII může být také použita vhodná sůl této sloučeniny jako např. hydrogensulfát, methylsulfonát, hydrochlorid nebo hydrobromid. Přitom musí být přidán další ekvivalent báze, např. triethylamin. Po uskutečněné peptidové kopulace a běžném extrakčním
-5CZ 288448 B6 zpracování se surový produkt rozpustí ve vhodném rozpouštědle, například uhlovodíku - jako toluenu, xylenu-, nebo v etheru - jako diethyletheru, THF, dioxanu, methyl-terc.butyletheruketonu - jako acetonu, methylethylketonu, diethylketonu, cyklohexanonu-, nebo v chlorovaných rozpouštědlech - jako je methylenchlorid, chloroform, 1,2-dichlorethan. Zaváděním plynného
| HC1 nebo přidáváním roztoku HC1 ve vhodném rozpouštědle jako např. THF, methanolu, isopropanolu, n-pentanolu, diisopropyletheru, se vyloučí hydrochlorid I. Zvláště vhodným se přitom ukázal způsob, při kterém se volná báze pentapeptidu nejprve rozpustí v methylethylketonu a pak se přidá roztok HC1 v isopropanolu. | |
| Způsob B probíhá podle následujícího schéma: | |
| Z - Val - Val - MeVal - Pro - OR1 I | (II) |
| Ψ Z - Val - Val - MeVal - Pro - OH I | (IX) |
| Ψ Z-Val-Val-MeVal-Pro-O-CO-R2 + XII I | (X) |
| ψ Z - Val - Val - MeVal - Pro - Pro - NHBzl I | (XI) |
| ψ Me2Val - Val - MeVal - Pro - Pro - NHBzl x HC1 | (I) |
Zmýdelnění esteru Π, výroba směsného anhydridů X a peptidová kopulace na XI se provádí analogicky syntézní sekvenci IV -> V -> VI -> VII -> I. Odštěpení Z-chránicí skupiny a dimethylace vedou k I analogicky reakci II -> III -> IV.
Také ve způsobené variantě B probíhá metoda směsného anhydridů překvapivě bez racemizace. Proti výsledkům publikovaným Benoitem se se směsným anhydridem, který byl vyroben z kyseliny IX a pivaloylchloridu, dosáhnou lepší výsledky.
Pro výrobu peptidu I potřebný výchozí materiál lije možno vyrobit ze Z-Val-O-CO-R2 (vzorec XIII) a Val-MeVal-Pro-OR1 vzorce XIV.
Nový způsob poskytuje účinnou látku v krystalické formě. Peptid může být dále přečištěn jednoduchým způsobem rekrystalizací. Následné chromatografické stupně Čištění nejsou nezbytné.
Sloučenina vzorce I je účinná proti pevným tumorům (tumoiy v plicích, prsou, žaludku, měchýři, konečníku, děloze, prostatě), proti leukémii, lymfomu a jiným neoplastickým chorobám.
Následující příklady osvětlují blíže vynález.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1 (způsob A)
A. Výroba výchozích materiálů
a. Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe (II, R1 = Me)
Do 400-litrového hydrogenačního kotle se umístí 39,6 kg (83,3 mol) Z-Val-MeVal-Pro-OMe (VIII) ve 320 1 methanolu spolu se 4 kg 5% palladia na uhlí. Potom se za chlazení na 20 až 30 °C přidává tak dlouho vodík, až v reakčním roztoku již dále není prokazatelný žádný edukt. Katalyzátor se při odplynění obsahu kotle odfiltruje. Pro zpracování se zahustí ve 400-1 smaltovaném
-6CZ 288448 B6 kotli při vakuu vodní pumpy až na 50 1. Potom se přidá 50 l toluenu a extrahuje se 40 1 2N HCI. Toluenová fáze se ještě jednou extrahuje 40 1 IN kyseliny chlorovodíkové a pak se odplyní. Spojené kyselé vodné fáze se zavedou zpět do kotle, podvrství 40 ml methylenchloridu a potom upraví přídavkem 50% hydroxidu sodného za silného míchání a chlazení na pH 9. Po oddělení fází se methylenchloridová fáze odplyní a vodná fáze se ještě dvakrát znovu extrahuje vždy 40 1 methylenchloridu. Spojený methylenchloridový roztok produktu se promyje do neutrality vodou. Potom se methylenchloridová fáze zahustí na 90 1. Získá se Val-MeVal-PrO-OMe (XIV, R1 = CH3).
Výtěžek 24,2 kg = 85,2%.
Ve 4001itrovém kotli se rozpustí 17,84 kg (70,88 mol) Z-valin a 459 kg (74,42 mol) triethylaminu ve 1701 methylenchloridu. K tomuto roztoku se přidá při -5 až -10 °C 8,58 kg (70,88 mol) chloridu kyseliny pivalové. Po 2 hodinách trvání reakce při -5 °C se přidá při -5 °C roztok 24,2 kg Val-MeVal-Pro-OMe v 86 1 methylenchloridu. Po dalších 2 h při -5 °C se nechá ohřát na 20 °C a při této teplotě se míchá 12 h. Pro zpracování se přidá 50 1 vody. Po oddělení vodné fáze se organická fáze extrahuje jednou 40 1 2N kyseliny chlorovodíkové a dvakrát vždy 40 1 2N hydroxidu sodného. Po promytí do neutrální reakce organické fáze vodou se rozpouštědlo methylenchlorid oddestiluje a smísí se se 300 1 diisopropyletheru. Emulze produkovaného oleje se pro krystalizaci produktu zahřeje na 60 °C, smísí se s očkovacími krystaly a 7 hodin se udržuje při 60 °C. Pro doplnění krystalizace se dále míchá 5 h při 50 °C a 5 h při 40 °C a pak se ochladí na 20 °C. Suspenze krystalů se odfiltruje přes 120 1 tlakový filtr a suší se v proudu dusíku.
Výtěžek: 32,2 kg = 79%
Teplota tání: 134 až 135 °C
b. Prolinbenzylamid-hydrochlorid (XII x HCI)
K roztoku 99,7 g Z-prolinu a 58 ml triethylaminu v 1 1 CH2CI2 se při -10 až -15 °C přikape 48,2 g chloridu kyseliny pivalové. Míchá se 45 min při -10 °C a pak se přidá během 0,5 h při -10 °C 42,8 g benzylaminu v 500 ml CH2C12. Míchá se 1 h při teplotě místnosti. CH2Cl2-roztok se pak promyje dvakrát 500 ml vody, dvakrát 500 ml 10% vodného roztoku NaHCO3, dvakrát 500 ml vody, dvakrát 500 ml 5% vodného roztoku kyseliny citrónové a dvakrát 500 ml vody, suší se nad síranem sodným a odpaří. Zbyde 120 g zbytku, kteiý se vyjme do ethylacetátu. Kethylacetátovému roztoku se přidá 1,2 1 n-heptanu, hodinu se míchá, odsaje a suší při 50 °C ve vakuu.
Výtěžek: 110 g, 81,3%
T.t. 93 až 94 °C
110 g takto získaného Z-prolinbenzylamidu se rozpustí v 1,5 1 methanolu. Při přídavku 0,5 g Pd/C (10%) se zavádí vodík. Roztok přijme při teplotě místnosti během 1,5 h 0,5 1 H2. Po odfiltrování katalyzátoru a odpaření zbude 4,6 g žlutého oleje.
413 g takto získaného prolinbenzylamidu se rozpustí ve 400 ml isopropanolu. Přidá se 630 ml nasyceného roztoku HCI v isopropanolu, vzniklá suspenze se 2 h míchá při 0 až 5 °C, odsaje se a dvakrát promyje 250 ml isopropanolu. Zbytek se suší při 50 °C ve vakuu. Získá se 401 g prolinbenzylamid-hydrochloridu; ao20: -45°.
B. Výroba konečného produktu
a.l
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OMe x HCI (IV, R1 = Me)
-7CZ 288448 B6
Do 400-litrového hydrogenačního kotle se umístí 20 kg (34,8 mol) Z-Val-Val-MeVal-ProOMe (II, Rl = Me) ve 2001 methanolu spolu se 2 kg 5% palladia na uhlí. Potom se za chlazení na 20 °C zavádí tak dlouho vodík, až vreakčním roztoku již dále není prokazatelný žádný edukt. Potom se přidá 8,46 kg 37% (104 mol) vodného roztoku formaldehydu a dále se hydrogenuje do ukončení spotřeby vodíku při 20 °C. Katalyzátor se při odplynění obsahu kotle odfiltruje. Pro zpracování se zahustí ve 400-1 smaltovaném kotli při vakuu vodní pumpy až na 501. Potoip se přidá 200 1 isopropanolu a znovu se odpaří na 50 1. Pak se rozpustí ve 135 1 methyl-terc.butyletheru a za chlazení se přidá při 20 °C ekvivalent isopropanolického HCI. Vzniklá suspenze se ještě dále míchá 3 až 4 h při 20 °C a 2 h při 0 až 5 °C a pak se filtruje přes 1201itrový tlakový filtr. Filtrační koláč se jednou promyje 50 litry čerstvého methyl-terc.butyletheru.
Výtěžek 16,2 kg = 92,3 %.
Teplota tání: 224 °C (rozklad)
a.2
Mezistupeň Val-Val-MeVal-Pro-OMe (III, R1 = CH3) byl popřípadě izolovatelný, jestliže se po prvním hydrogenačním stupni postupovalo následovně:
Reakční roztok se zbaví katalyzátoru a odpaří se. Zbytek se vyjme do ethylacetátu. Ethylacetátový roztok se dvakrát extrahuje 2N kyselinou chlorovodíkovou. Kyselá vodná fáze se upraví na pH 9 hydroxidem sodným a dvakrát se extrahuje methylenchloridem. Methylenchloridová fáze se pak promyje do neutrální reakce a odpaří se.
HPLC 96,8 % ‘H-NMR (400 MHz, CDCl3/TMS,nt.):
δ (ppm): 0,84 - 1,08 (m, 18H); 1,45 - 1,6 (s, široký, NH?I: 1,85 - 2,15 (m, 4H); 2,18 - 2,38 (m, 3H); 3,14 (s, N-CHQ: 3,25 (d, 1H); 3,65 - 3,75 (m, 1H); 3,73 (s, O-CHŮ: 3,9 - 4,05 (m, 1H); 4,38 - 4,45 (m, 1H); 4,73 - 4,83 (m, 1H); 5,12 (d, 1H); 7,9 (d, NH)
a.3
Výroba Me2Val-Val-MeVal-Pro-OMe x HCI (IV x HCI, R1 = Me) se může také provést podle následujícího předpisu, při kterém byly mezistupně izolace a čištění Z-Val-Val-MeVal-ProOMe (II, R*=Me) vypuštěny:
Ve 41itrové baňce se rozpustí 128 g (0,51 mol) Z-valinu a 55,1 g (0,54 mol) triethylaminu v 1,2 1 methylenchloridu. K tomuto roztoku se přidává při -5 °C až -10 °C 62,1 g (0,51 mol) chloridu kyseliny pivalové. Po 2 h reakce při -5 °C se přidá roztok 174,6 g (0,51 mol) Val-MeVal-ProOMe v 0,8 1 methylenchloridu, míchá se další 2 hodiny při -5 °C a pak po ohřátí na 20 °C dalších 12 hodin. Potom se obsah smísí se 370 1 vody. Po oddělení fáze se methylenchloridová fáze promyje jednou 290 ml 2N kyseliny chlorovodíkové, dvakrát vždy 290 ml 2N hydroxidu sodného a třikrát 370 ml vody. Potom se rozpouštědlo - methylenchlorid - odpaří a smísí se se 31 methanolu. K tomuto roztoku se přidá směs 30 g 5% palladiového uhlí ve 110 ml vody a hydrogenuje se při 25 °C pomocí zaplynovávacího míchadla a vodíkové byrety až do spotřeby ekvivalentu vodíku. Potom se přidá 123 g (1,53 mol) 37% vodného roztoku formaldehydu a hydrogenuje se až do příjmu dalších 2 ekvivalentů vodíku. Potom se katalyzátor oddělí a odpaří se zbytek na rotační odparce. Zbylý olej se rozpustí v 670 ml isopropanolu a 2,6 1 methylterc.butyletheru. K tomuto roztoku se přidá ekvivalent isopropanolické HCI. Vzniklá suspenze se dále míchá více než 12 h při 200 °C a pak se odsaje. Filtrační koláč se promyje malým množstvím methyl-terc.butyletheru a pak se suší ve vakuové sušárně při 40 °C.
-8CZ 288448 B6
Výtěžek: 182,8 g = 71 %
Teplota tání: 224 °C (rozklad) b: Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBzl x HC1 (I)
Do 4001itrového kotle se předloží 15,9 kg (31,5 mol) Me2Val-Val-MeVal-Pro-OMe x HC1 (IV x HC1, R1 = CH3) spolu se 1401 toluenu a 15 1 methanolu. Přidá se 3,15 kg (76,38 mol) pelet hydroxidu sodného. Po úplném zmýdelnění, tj. po 3 h při 20 °C se neutralizuje přídavkem isopropanolické HC1. Potom se azeotropně destiluje s toluenem při 100 Pa až je prostý alkoholu a vody. Oddestilované rozpouštědlo se opatrně nahradí toluenem. Potom se přidá 80 1 methylenchloridu a 6,44 kg (63,0 mol) triethylaminu (obsah: 99 %), ochladí se na -5 °C a při této teplotě se přidá 3,84 kg (31,5 mol) chloridu kyseliny pivalové. Po dvou hodinách reakce se při -5 °C až 0 °C přidá po částech 7,6 kg (31,5 mol) Pro-NHBzl x HC1. Po 2 h míchání při -5 °C se nechá reakce ohřát na 20 °C a nechá se reagovat ještě dalších 6 h. Potom se přidaný methylenchlorid oddestiluje při 500 Pa a přidá se 80 1 toluenu. Pak se přidá 50 1 vody a hodnota pH vodné fáze se nastaví na 9. Po silném míchání se vodná fáze oddělí a organická fáze se promyje jednou 25 1 vody. Pak se organická fáze extrahuje dvakrát vždy 50 1 2N kyseliny chlorovodíkové. Produkt zpětně 3x extrahuje z kyselé vodné fáze po nastavení pH na hodnotu 5 vždy 50 1 methylenchloridu. Po promytí methylenchloridu do neutrální reakce vodou se methylenchlorid oddestiluje a nahradí se 1801 methylethylketonu. Roztok se ohřeje na 40 °C a smísí s ekvivalentem (31,5 mol) isopropanolické HC1. Vzniklá suspenze se ohřeje na 60 °C a pak se bez dalšího přívodu tepla 12 h míchá. Pak se ochladí na 20 °C a míchá se dalších 5 h. Potom se ochladí na 5 °C a filtruje se přes 1201itrový tlakový filtr. Filtrační koláč se promyje 60 1 čerstvého, 5 °C studeného methylethylketonu. Po předsušení na filtru se produkt suší do konstantní hmotnosti ve vakuové sušárně.
Výtěžek: 14,36 kg = 67 %
Teplota tání: 214 °C
Příklad 2 (způsob B)
a. Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH (IX)
Ve 21itrové baňce se rozpustí 117 g (0,2 mol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe (Π, R1 = Me, příklad lAa) v 900 ml methanolu a 47,5 ml vody. Potom se přidá 18 g (0,45 mol) pelet hydroxidu sodného a 12 h se míchá při 20 °C. Pro zpracování se přidá 250 ml vody a methanol se oddestiluje. Pak se přidá tolik ethylacetátu, že dojde k čistému oddělení fází (asi 500 ml). Ethylacetátová fáze se oddělí. Vodná fáze se okyselí kyselinou chlorovodíkovou na pH 1 a dvakrát se extrahuje 500 ml methylenchloridu. Organická fáze se pak odpaří dosucha.
Výtěžek: 105 g = 96,4% 'H-NMR (200 MHz, CDClj/TMSint.) δ (ppm): 0,6 - 1,2 (m, 18H); 1,7 - 2,45 (m, 7H); 3,2 (s, N-CHA 3,55 - 3,95 (m, 2H); 4,05 - 4,2 (m, IH); 4,35 - 4,5 (m, IH); 4,68 - 4,85 (m, IH); 4,98 - 5,2 (m, 3H); 5,93 (d, Val-INH); 7,2 7,4 (m, 5H); 7,53 - 7,68 (Val-2NH); 9,6 -10,2 (s, široký, COOH)
b. Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBzl (XI) g Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH (8,75 mmol) (IX) se rozpustí v 50 ml CH2C12, přikape se 1,79 g (17,5 mmol) triethylaminu, ochladí se na 10 °C a při této teplotě se přikape 1,08 g (8,75 mmol) chloridu kyseliny pivalové. Po 2 h míchání při 10 °C se při této teplotě přikape roztok 2,11 g
-9CZ 288448 B6 (8,75 mml) Pro-NHBzl x HC1 v 10 ml methanolu, 2 h se míchá při 10 °C a přes noc při teplotě místnosti.
Reakční směs se promyje 3krát vždy 50 ml vody, jednou 50 ml vody při pH 9 a ještě dvakrát vždy 50 ml vody. Methylenchloridový roztok se odpaří na rotační odparce. Zbyde 5,3 g (81,4 %) kiystalického produktu (čistota: 88,7 %).
Teplota tání: 118 až 122 °C.
c. Me2Val-V al-MeVal-Pro-Pro-NHBzl x HC1 (I) g Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBzl (XI) se rozpustí ve 200 ml methanolu. Přidají se 2 g 5% palladia na uhlí (rozmícháno se 20 ml vody) a hydrogenuje se při 20 °C až do ukončení spotřeby vodíku. Pak se přidá 6,5 g 37% vodného roztoku formaldehydu a hydrogenuje se dále až do ukončení spotřeby vodíku. Pak se katalyzátor oddělí a reakční roztok se odpaří. Zbytek se vyjme do toluenu, opět se odpaří, ještě jednou se smísí se 200 ml toluenu a filtruje se. Toluenový roztok se pak extrahuje 2x 50 ml 2N kyseliny chlorovodíkové. Kyselá vodná fáze se uvede na pH 9 hydroxidem sodným a třikrát se extrahuje methylenchloridem. Methylenchloridová fáze se promyje vodou do neutrální reakce a odpaří se. Surová báze se vyjme do roztoku 150 ml methylethylketonu a 7,5 ml isopropanolu. Z tohoto roztoku se vyloučí přídavkem 4 g 25% isopropanolické HC1 při 40 °C sůl produktu. Suspenze se dále míchá 3 h při 20 °C a jednu hodinu při 0 až 5 °C a pak se odsaje.
Výtěžek: 0,1 g
Obsah: 99,1 % (HPLC - plošná procenta)
Teplota tání. 214 °C (rozklad)
Claims (4)
1) zbaví se chránící skupiny Z na N-konci a
1) volná aminoskupina na N-konci se dvakrát methyluje, za vzniku sloučeniny obecného vzorce IV
MezVal-Val-MeVal-Pro-OR1 (IV), kde
R1 má význam uvedený výše,
1. Hydrochlorid pentapeptidu vzorce I
Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBzl. HC1 (I), kteiý je v krystalické formě.
2) dvakrát se methyluje na volné aminoskupině na N-konci, za vzniku sloučeniny vzorce I a takto získaná sloučenina se převede na svůj hydrochlorid.
2) ve sloučenině výše uvedeného obecného vzorce IV se alkoxyskupina -OR1 na C-konci hydrolyzuje působením báze, za vzniku sloučeniny vzorce V
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OH (V),
b) takto získaná sloučenina výše uvedeného vzorce V se deprotonuje působením báze na sloučeninu obecného vzorce VI
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OM* (VI), kde
M+ znamená K+, Na+, Li+ nebo amoniový ion, jako +NH(C2H5)3, která se nechá reagovat s chloridem kyseliny vzorce C1COR2, kde R2 znamená terc.butyl, 2ethylhexyl, Ci^-alkoxyskup inu, methoxyskupinu, ethoxyskupinu nebo isobutoxyskupinu, nebo se sloučenina vzorce IV
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OR’ (IV), kde
R1 má význam uvedený výše, přímo nechá reagovat s tímto chloridem kyseliny vzorce C1COR2, kde R2 má výše uvedený význam, vždy za vzniku směsného anhydridu obecného vzorce VII
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OR2 (VII), kde
-11CZ 288448 B6
R2 má význam uvedený výše, který se kopuluje s prolinbenzylamidem vzorce XII (XII) za vzniku sloučeniny výše uvedeného vzorce I, nebo
B) a) se odstraní alkoxyskupina -OR1 na C-konci, za vzniku sloučeniny obecného vzorce IX
Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH (IX), kde
Z má význam uvedený výše,
b) takto získaná sloučenina výše uvedeného obecného vzorce IX se převede na směsný anhydrid obecného vzorce X
Z-Val-Val-MeVal-Pro-O-CO-R2 (X), kde
Z a R2 mají význam uvedený výše, takto získaná sloučenina výše uvedeného obecného vzorce X se kopuluje s prolinbenzylamidem, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XI
Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBzl (XI), kde
Z má význam uvedený výše, a takto získaná sloučenina výše uvedeného obecného vzorce XI
2. Způsob výroby hydrochloridu pentapeptidu vzorce I podle nároku 1
Me2Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBzl. HC1 (I), vyznačující se tím, že ze sloučeniny obecného vzorce II
Z-Val-Val-MeVal-Pro-OR1 (II), kde
R1 znamená Ci_5-alkylskupinu a
Z představuje benzyloxykarbonylovou chránící skupinu, která je na fenylovém kruhu popřípadě substituována,
-10CZ 288448 B6 buď
A) a) se odštěpí chránící skupina Z na N-konci za vzniku sloučeniny obecného vzorce ΙΠ
Val-Val-MeVal-Pro-OR1 (ΙΠ), kde
R1 má význam uvedený výše, a na takto získané sloučenině výše uvedeného obecného vzorce ΠΙ
3. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že se tetrapeptidkarboxylové kyseliny obecného vzorce V nebo IX za účelem kopulace s prolinbenzylamidem nejprve převedou na směsný anhydrid s kyselinou pivalovou.
-12CZ 288448 B6
4. Sloučenina vzorce
Z-Val-Val-MeVal-Pro-OR1(II),
Val-Val-MeVal-Pro-OR1 (III),
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OR2 (VII),
Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH(IX),
Z-Val-Val-MeVal-Pro-O-CO-R2(X),
Z-Val-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBzl(XI), kde
R1, R2 a Z mají v nároku 2 uvedený význam, jako meziprodukt pro výrobu hydrochloridu pentapeptidu podle nároku 1.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE4415997A DE4415997A1 (de) | 1994-05-06 | 1994-05-06 | Neuer peptidischer Wirkstoff und dessen Herstellung |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ326096A3 CZ326096A3 (en) | 1997-04-16 |
| CZ288448B6 true CZ288448B6 (en) | 2001-06-13 |
Family
ID=6517453
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19963260A CZ288448B6 (en) | 1994-05-06 | 1995-04-26 | Pentapeptide hydrochloride, processes of its preparation and intermediates therefor |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5864012A (cs) |
| EP (1) | EP0758342B1 (cs) |
| JP (1) | JPH09512803A (cs) |
| KR (1) | KR100336139B1 (cs) |
| CN (1) | CN1113067C (cs) |
| AT (1) | ATE188485T1 (cs) |
| AU (1) | AU688037B2 (cs) |
| BG (1) | BG61610B2 (cs) |
| BR (1) | BR9507623A (cs) |
| CZ (1) | CZ288448B6 (cs) |
| DE (2) | DE4415997A1 (cs) |
| DK (1) | DK0758342T3 (cs) |
| ES (1) | ES2141351T3 (cs) |
| FI (1) | FI119642B (cs) |
| GR (1) | GR3032630T3 (cs) |
| HR (1) | HRP950271B1 (cs) |
| HU (1) | HU220875B1 (cs) |
| IL (1) | IL113544A (cs) |
| MX (1) | MX9605402A (cs) |
| NO (1) | NO317728B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ285092A (cs) |
| PL (1) | PL180652B1 (cs) |
| PT (1) | PT758342E (cs) |
| RU (1) | RU2153504C2 (cs) |
| SI (1) | SI9520061B (cs) |
| TW (1) | TW408132B (cs) |
| WO (1) | WO1995030691A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA953584B (cs) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4415998A1 (de) * | 1994-05-06 | 1995-11-09 | Basf Ag | Neue Tetrapeptide, ihre Herstellung Verwendung |
| TW474946B (en) * | 1995-12-15 | 2002-02-01 | Basf Ag | Novel compounds, the preparation and use thereof |
| US20010009901A1 (en) | 1996-12-11 | 2001-07-26 | Basf Aktiengesellschaft Germany | Antineoplastic peptides |
| US7304750B2 (en) * | 1999-12-17 | 2007-12-04 | Nektar Therapeutics | Systems and methods for non-destructive mass sensing |
| KR20020066476A (ko) * | 2001-02-12 | 2002-08-19 | 쥬가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 펩타이드 유도체의 제조방법 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IL105651A (en) * | 1992-05-20 | 1998-07-15 | Basf Ag | History of dolastatin preparation and pharmaceutical preparations containing them |
-
1994
- 1994-05-06 DE DE4415997A patent/DE4415997A1/de not_active Withdrawn
-
1995
- 1995-04-26 CN CN95193411A patent/CN1113067C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1995-04-26 MX MX9605402A patent/MX9605402A/es unknown
- 1995-04-26 CZ CZ19963260A patent/CZ288448B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1995-04-26 RU RU96123123/04A patent/RU2153504C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1995-04-26 DK DK95917963T patent/DK0758342T3/da active
- 1995-04-26 JP JP7528639A patent/JPH09512803A/ja active Pending
- 1995-04-26 EP EP95917963A patent/EP0758342B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-04-26 NZ NZ285092A patent/NZ285092A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-04-26 ES ES95917963T patent/ES2141351T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-04-26 WO PCT/EP1995/001577 patent/WO1995030691A1/de active IP Right Grant
- 1995-04-26 PT PT95917963T patent/PT758342E/pt unknown
- 1995-04-26 HU HU9603067A patent/HU220875B1/hu unknown
- 1995-04-26 US US08/732,453 patent/US5864012A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-04-26 DE DE59507578T patent/DE59507578D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-04-26 KR KR1019960706259A patent/KR100336139B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1995-04-26 PL PL95321159A patent/PL180652B1/pl unknown
- 1995-04-26 AT AT95917963T patent/ATE188485T1/de active
- 1995-04-26 BR BR9507623A patent/BR9507623A/pt not_active Application Discontinuation
- 1995-04-26 SI SI9520061A patent/SI9520061B/sl unknown
- 1995-04-26 AU AU24083/95A patent/AU688037B2/en not_active Ceased
- 1995-04-28 IL IL11354495A patent/IL113544A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-05-03 TW TW084104427A patent/TW408132B/zh not_active IP Right Cessation
- 1995-05-04 ZA ZA953584A patent/ZA953584B/xx unknown
- 1995-05-04 HR HR950271A patent/HRP950271B1/xx not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-11-05 FI FI964448A patent/FI119642B/fi not_active IP Right Cessation
- 1996-11-05 NO NO19964688A patent/NO317728B1/no not_active IP Right Cessation
- 1996-11-06 BG BG100961A patent/BG61610B2/bg unknown
-
2000
- 2000-02-10 GR GR20000400328T patent/GR3032630T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0260118B1 (en) | Selective amidination of diamines | |
| IE60128B1 (en) | Hydroxylamine derivatives,their preparation and use as medicaments | |
| DK151968B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af pentapeptidet h-arg-x-asp-y-tyr-r ved oploesningssyntese | |
| JPH01157998A (ja) | Ｌ−プロリン誘導体及びその製造方法並びにそれを含有する医薬組生物 | |
| HU182866B (en) | Process for preparing new tetrapeptide derivatives | |
| Pozdnev | Activation of carboxylic acids by pyrocarbonates. Synthesis of arylamides of N‐protected amino acids and small peptides using dialkyl pyrocarbonates as condensing reagents | |
| JPH02292245A (ja) | 保護されたアミノ酸及びその製造方法 | |
| CZ288448B6 (en) | Pentapeptide hydrochloride, processes of its preparation and intermediates therefor | |
| JP4452329B2 (ja) | 新規テトラペプチド、その製造及び使用 | |
| CA2223911C (en) | The preparation of active peptides | |
| SE461042B (sv) | Peptider med tillvaextbefraemjande aktivitet jaemte veterinaera kompositioner innehaallande naemnda peptider | |
| US3948971A (en) | N-protected-α-amino acid compounds | |
| GB2127831A (en) | Intermediates in the preparation of caerulein | |
| US5945543A (en) | Process for producing α-(N,N dialkyl)-amino carboxlic acid amides | |
| OA11369A (en) | Process for thepreparation of azacycloalkylalkanoyl pseudotetrapeptides. | |
| JPH082916B2 (ja) | ペプチド誘導体類及びそれらの製造方法 | |
| CA2189690C (en) | Novel active peptide and its preparation | |
| JPH07316193A (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 | |
| DK149631B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af h-sar-lys-sar-gln-nh2 | |
| SI8811355A (en) | Process for preparing of L-alanine-L-proline derivatives | |
| Sureshbabu et al. | HOAt. DCHA as co-coupling agent in the synthesis of peptides employing Fmoc-amino acid chlorides as coupling agents: Application to the synthesis of β-casomorphin | |
| JPS6115080B2 (cs) | ||
| JPS6197A (ja) | 生物学的に活性なトリデカペプチド |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20150426 |