CZ233799A3 - Peroral pharmaceutical preparations of cyclosporin - Google Patents

Abstract

Perorální cyklosporinocý přípravek se zlepšenou biologickou dostupností cyklosporinu, obsahující cyklosporin, nejménějedno C^alkanolové rozpouštědlo, nejménějednu neiontovou povrchově aktivní látku volenou ze skupiny zahrnující polyoxyethylenové alkoholy amonoesterymastných kyselin s ethoxylovanými C^polyoly; a nejménějeden polyglykol o molekulové hmotnosti v rozrrezí 800 až 10 000 h.j.Oral Cyclosporinocide with Improved Biological the availability of cyclosporine containing cyclosporin is at least one C 1-4 alkanol solvent, at least one nonionic solvent a surfactant selected from the group consisting of polyoxyethylene alcohols of monoester fatty acids ethoxylated C ^ poly polyols; and at least one polyglycol molecular weights in the range of 800 to 10,000 IU.

Description

Oblast technikyTechnical field

Předkládaný vynález se zabývá perorálními farmaceutickými přípravky cyklosporinu.The present invention relates to oral cyclosporin pharmaceutical preparations.

Dosavadní stav technikyBACKGROUND OF THE INVENTION

Navzdory úsilí zamezit odmítnutí implantátu při kontaktu donorové tkáně s hostitelskou, při většině transplantací, kdy je donorový orgán vnesen do těla hostitele, má imunosupresivní terapie kritickou roli při udržení životaschopnosti donorového orgánu v hostiteli. Při transplantacích bylo použito mnoho imunosupresivních činidel jako azathioprin, methotrexat, cyklofosfamid, FK-506, rapamycin a kortikosteroidy. Látky nalézající stále významnější využití v imunosupresivní terapii díky preferenčnímu účinku na reakce zprostředkovávané T-buňkami jsou cyklosporiny.Despite efforts to prevent implant rejection upon donor tissue contact with the host, in most transplants where the donor organ is introduced into the host, immunosuppressive therapy plays a critical role in maintaining the donor organ viability in the host. Many immunosuppressive agents such as azathioprine, methotrexate, cyclophosphamide, FK-506, rapamycin and corticosteroids have been used in transplants. Substances of increasing importance in immunosuppressive therapy due to the preferential effect on T-cell mediated reactions are cyclosporins.

Cyklosporiny patří do skupiny cyklických polypeptidů obsahujících jedenáct aminokyselin a jsou to metabolické produkty houby druhu Tolypocladium Inflatum Gams. Bylo pozorováno, že cyklosporiny reverzibilně inhibují imunokompetentní lymfocyty, zejména T-lymfocyty v Gq nebo Gj fázi buněčného cyklu. Rovněž bylo pozorováno, že cyklosporiny reversibilně inhibují produkci a uvolňování lymfokinů. Ačkoliv je známa řada cyklosporinů, nejrozšířenější využití má Cyklosporin A.Cyclosporins belong to the group of cyclic polypeptides containing eleven amino acids and are metabolic products of the fungus Tolypocladium Inflatum Gams. It has been observed that cyclosporins reversibly inhibit immunocompetent lymphocytes, particularly T cells in the Gq or Gj phase of the cell cycle. It has also been observed that cyclosporins reversibly inhibit the production and release of lymphokines. Although a number of cyclosporins are known, Cyclosporin A has the most widespread use.

·· ··* • · · ··· ·· *

- 2 » ···· • · ·*·· ··· ·· ·· • · · • « · · · • · · 1 • · · · ·· ··- 2 »·················· 1 · ·

Bylo popsáno, že Cyklosporin A prodlužuje přetrvávání alogenních transplantátů kůže, srdce, ledvin, slinivky, kostní dřeně, tenkého střeva a plic. Při alogenních transplantacích Cyklosporin A potlačuje humorální imunitu a do značné míry buněčnou imunitní odpověď, jako je odmítnutí aloimplantátu, prodloužená hypersensitivita, experimentální alergická enceíálomyelitida, Freundova ajuvantní artritida a onemocnění implantát vs. hostitel. Aě s Cyklosporinem A bylo dosaženo významných úspěchů, musí podávání léčiva po transplantaci pokračovat, neboť přínos cyklosporinové terapie je reverzibilní a při přerušení léčby dochází k odmítnutí implantátu.Cyclosporin A has been reported to prolong the persistence of allogeneic transplants of skin, heart, kidney, pancreas, bone marrow, small intestine and lung. In allogeneic transplants, cyclosporin A suppresses humoral immunity and largely cellular immune response, such as allograft rejection, prolonged hypersensitivity, experimental allergic encephalomyelitis, Freund's ajuvant arthritis, and implant versus disease. host. Although significant success has been achieved with Cyclosporin A, drug administration after transplantation must continue because the benefits of cyclosporine therapy are reversible and implant discontinuation upon discontinuation of treatment.

Aě byly vyvinuty cyklosporinové přípravky pro perorální i intravenózní podávání, je perorální podávání výhodnější jak pro jednoduchost aplikace, tak pro lepší přijetí léčiva. Intravenózní aplikace cyklosporinu navíc může vést k anafylaktickým reakcím, vedlejšímu účinku, jaký v případě perorálního podávání nehrozí. V současné době jsou komerčně dostupné perorální cyklosporinové přípravky ve formě měkkých kapslí i jako roztoky a jsou prodávány pod obchodním názvem SANDIMMUNE a NEORAL™.Although ciclosporin formulations have been developed for both oral and intravenous administration, oral administration is preferred for both ease of administration and better drug acceptance. In addition, intravenous administration of ciclosporin may lead to anaphylactic reactions, a side effect that is not likely to occur with oral administration. Currently, oral cyclosporin preparations are available in soft capsule and solution form and are sold under the trade names SANDIMMUNE and NEORAL ™.

Při perorální terapii cyklosporinovými přípravky si musí být lékařský personál i výrobce vědomi mnoha problémů. Biologická dostupnost cyklosporinu v perorálních přípravcích je omezena, protože cyklosporin je nerozpustný ve vodě a ve vodném prostředí má sklon ke krystalizaci. Koncentrace cyklosporinu v perorálních přípravcích je omezena díky hydrofobnímu charakteru cyklosporinové molekuly. Dalším problémem je stabilita pří adjustaci lékových forem a skladování perorálních přípravků. U měkkých želatinových kapslí cyklosporinových přípravků musí být prováděno vzduchotěsné balení, což je prostorově náročné i drahé. Při nízkých teplotách jsou cyklosporinové přípravky nestabilní, neboť dochází k vykrystalování cyklosporinu.In oral therapy with ciclosporin products, the medical staff and the manufacturer must be aware of many problems. The bioavailability of ciclosporin in oral preparations is limited because ciclosporin is insoluble in water and tends to crystallize in an aqueous environment. The concentration of cyclosporin in oral preparations is limited due to the hydrophobic nature of the cyclosporin molecule. Another problem is stability when adjusting dosage forms and storing oral preparations. Soft gelatin capsules of cyclosporin preparations must be airtight, which is both space-intensive and expensive. Cyclosporin formulations are unstable at low temperatures as ciclosporin crystallizes.

Proto je stále žádoucí připravit takové cyklosporinové přípravky, které by řešily alespoň některý, z výše uvedených problémů. Ideální perorální přípravek by měl poskytovat vysokou biologickou dostupnostTherefore, it is still desirable to provide cyclosporin formulations that address at least some of the above problems. An ideal oral formulation should provide high bioavailability

-3#· ΦΦΦ· • * · • ··· • · » • · «·ΦΦ »♦· « ··-3 # · ΦΦΦ · * · · · · · «« ««

Φ Φ • ··· • · · • · ·· Φ · · · · ·

Φ ·· • ΦΦ ·· • Φ

Φ · Φ • Φ ♦ • · Φ •Φ · Φ • Φ

·· cyklosporinu, vysokou koncentraci cyklosporinu a měl by umožnit tvorbu kapalných lékových fórem i tvrdých kapslí.· Cyclosporin, a high concentration of cyclosporin and should allow the formation of liquid drug forums and hard capsules.

Relevantní literatura:Relevant literature:

Physiciaďs Desk Reference (1994), str. 2071-2074 popisuje perorální cyklosporinové přípravky prodávané v současné době pod obchodním názvem SANDIMMUNE.Physicides Desk Reference (1994), pp. 2071-2074 describes oral cyclosporin preparations currently marketed under the trade name SANDIMMUNE.

Perorální cyklosporinové přípravky jsou rovněž uvedeny v souboru NEORAL, (1995)(Sandoz Pharmaceuticals Corporation, East Hanover, New Jersey, 07936).Oral cyclosporin preparations are also disclosed in NEORAL, (1995) (Sandoz Pharmaceuticals Corporation, East Hanover, New Jersey, 07936).

U.S. patenty zabývající se cyklosporiny a jejich deriváty jsou 4 220 641; 4 639 434; 4 289 851 a 4 384 996. U.S. 5 047 396 popisuje intravenózní preparát cyklosporinu. U.S. 4 388 307; 4 970 076 a 4 990 337 popisují perorální cyklosporinové přípravky.U.S. Pat. patents dealing with cyclosporins and derivatives thereof are 4,220,641; 4,639,434; 4,289,851 and 4,384,996. No. 5,047,396 discloses an intravenous preparation of cyclosporin. U.S. Pat. 4,388,307; Nos. 4,970,076 and 4,990,337 disclose oral cyclosporin preparations.

Příprava perorálních tvrdých kapslí je popsána v U.S. 4 822 618; 4 576 284; 5 120 710 a 4 894 235.The preparation of oral hard capsules is described in U.S. Pat. 4,822,618; 4,576,284; 5,120,710 and 4,894,235.

Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION

Vynález poskytuje perorální farmaceutické přípravky cyklosporinu a způsoby jejich použití v imunosupresivní terapii. V předkládaných přípravcích je cyklosporin přítomen v perorálně přijatelném nosiči, který je tvořen nejméně jedním C2-3 alkanolovým rozpouštědlem a nejméně jednou neiontovou povrchově aktivní látkou. Předkládané farmaceutické přípravky mohou dále obsahovat jedno nebo několik přídavných rozpouštědel, což jsou estery mastných kyselin a diolů, výhodně polyglykolů. Cyklosporinové přípravky lze připravit ve formě tvrdých kapslí. Přípravky jsou v podstatě bezvodé, což snižuje sklon cyklosporinu ke srážení a zvyšuje jeho biologickou dostupnost.The invention provides oral cyclosporin pharmaceutical compositions and methods for their use in immunosuppressive therapy. In the present compositions, the cyclosporin is present in an orally acceptable carrier comprising at least one C 2-3 alkanol solvent and at least one nonionic surfactant. The present pharmaceutical compositions may further comprise one or more additional solvents which are esters of fatty acids and diols, preferably polyglycols. Cyclosporin preparations can be prepared in the form of hard capsules. The formulations are essentially anhydrous, which reduces the tendency of cyclosporin to clot and increases its bioavailability.

4•9 99*94 • 9 99 * 9

9 • 9999 • 999

9999 9999999 999

9* *9 * *

999 9 9 9998 9 9 9

9 99 9

9 99 9

9· <999 · <99

999999

Stručný popis obrázkůBrief description of the pictures

Obr. 1 znázorňuje maximální koncentraci cyklosporinu (C_max) dosazenou u krys při podávání několika perorálních přípravků předkládaného vynálezu, C_max je relativní hodnota vztažená k C_max pro přípravek SANDIMMUNE ORAL (SO).Giant. 1 depicts the maximum cyclosporin concentration (C _max ) achieved in rats when administering several oral formulations of the present invention, C _max is the relative value relative to C _max for SANDIMMUNE ORAL (SO).

Obr. 2 ukazuje dobu, za kterou je dosaženo C_max (T_max) pro jednotlivé přípravky uvedené na obr. 1, T_max je relativní hodnota vztažená k T_max pro přípravek SANDIMMUNE ORAL (SO).Giant. 2 shows the time taken for C _max (T _max ) for the individual formulations shown in FIG. 1, T _max is the relative value relative to T _max for SANDIMMUNE ORAL (SO).

Obr. 3 ukazuje relativní plochy pod křivkou závislosti průběhu koncentrace na čase (AUC) pro jednotlivé přípravky uvedené na obr. 1, AUC je relativní hodnota vztažená k AUC pro přípravek SANDIMMUNE ORAL (SO).Giant. 3 shows the relative areas under the concentration-time curve (AUC) for the individual formulations shown in FIG. 1, the AUC is the relative value relative to the AUC for SANDIMMUNE ORAL (SO).

Obr. 4 znázorňuje maximální koncentraci cyklosporinu (C_max) dosaženou u lidí při podávání několika perorálních přípravků předkládaného vynálezu, i C_max pro přípravek SANDIMMUNE ORAL (SO) v roztoku (Sand).Giant. 4 shows the maximum cyclosporin concentration (C _max ) achieved in humans by administering several oral formulations of the present invention, as well as C _max for SANDIMMUNE ORAL (SO) in solution (Sand).

Obr. 5 ukazuje dobu za kterou dojde k C_max (T_max) pro jednotlivé přípravky uvedené na obr. 4.Giant. 5 shows the time taken for C _max (T _max ) for the individual formulations shown in FIG. 4.

Obr. 6 ukazuje relativní plochy pod křivkou závislosti průběhu koncentrace na čase (AUC) pro jednotlivé přípravky uvedené na obr. 4.Giant. 6 shows the relative areas under the concentration-time curve (AUC) for the individual formulations shown in FIG. 4.

Popis konkrétního provedení vynálezuDescription of a specific embodiment of the invention

Předkládaný vynález poskytuje perorální farmaceutické přípravky cyklosporinu se zlepšenou biologickou dostupností, které lze připravovatThe present invention provides oral cyclosporin pharmaceutical compositions with improved bioavailability that can be prepared

- 5ve formě kapslí, zvláště tvrdých kapslí. V předkládaném přípravku je cyklosporin přítomen v perorálně přijatelném nosiči, který je tvořen nejméně jedním C2-3 alkanolovým rozpouštědlem a nejméně jednou neiontovou povrchově aktivní látkou. Předkládané farmaceutické přípravky mohou dále obsahovat jedno nebo několik přídavných rozpouštědel, což jsou estery mastných kyselin a diolů, výhodně jednoho nebo několika polyglykolů. Všechny složky předkládaného přípravku jsou farmaceuticky přijatelné. Vedle vysoké biologické dostupnosti zaručují různé šarže předkládaných přípravků reprodukovatelnou absorpci. Předkládané přípravky se používají při imunosupresivní terapii.- 5 in the form of capsules, in particular hard capsules. In the present composition, the cyclosporin is present in an orally acceptable carrier comprising at least one C 2-3 alkanol solvent and at least one nonionic surfactant. The present pharmaceutical compositions may further comprise one or more additional solvents which are esters of fatty acids and diols, preferably one or more polyglycols. All components of the present composition are pharmaceutically acceptable. In addition to the high bioavailability, different batches of the present compositions guarantee reproducible absorption. The present compositions are used in immunosuppressive therapy.

Existuje velké množství cyklosporinů s imunosupresivími účinky, které lze podávat v perorálních přípravcích. Jsou to cyklosporiny typů: Cyklosporin A, Cyklosporin B, Cyklosporin C, Cyklosporin D a Cyklosporin G, i jejich syntetická analoga. Viz Merck Index (1989) 2759. Předkládané perorální přípravky jsou zvláště výhodné pro dodávání Cyklosporinů A. Při podávání těchto přípravků je koncentrace Cyklosporinů v rozmezí 50 až 150mg/ml, obvykle 100 až 150mg/ml vzhledem k objemu složek nosiče přípravku.There are a large number of cyclosporins with immunosuppressive effects that can be administered in oral preparations. These are cyclosporins of the types: Cyclosporin A, Cyclosporin B, Cyclosporin C, Cyclosporin D and Cyclosporin G, as well as their synthetic analogues. See Merck Index (1989) 2759. The present oral formulations are particularly preferred for the delivery of Cyclosporins A. When administered, the concentration of Cyclosporins is in the range of 50-150mg / ml, usually 100-150mg / ml, based on the volume of the carrier components of the formulation.

Nosič přípravku zahrnuje složky: alkanolové rozpouštědlo tvořené až třemi různými C2-.3 alkanoly nesoucími 1 až 2 hydroxylové skupiny, tak, že na 1,5 atomu uhlíku nepřipadne více než 1 hydroxylová skupina. Vhodné alkanoly jsou ethanol a propylenglykol, výhodně ethanol. Celkové množství alkanolového rozpouštědla je nejméně 1 % obj., obvykle 3 % obj., maximálně 95 % obj., obvykle se pohybuje v rozmezí 5 až 75% obj., Častěji 5 až 60% obj., ještě častěji 10 až 60% obj. vzhledem k objemu přípravku. Pokud je alkanolovým rozpouštědlem ethanol, je obsažen v množství 5 až 25 % obj., obvykle 5 až 20 % obj. a ještě častěji 10 až 25 % obj. vzhledem k objemu přípravku. Pokud je alkanolovým rozpouštědlem propylenglykol, je obsažen v množství 5 až 90% obj., obvykle 5 až 85 % obj. a ještě častěji 10 až 50% obj. vzhledem k objemu přípravku.The carrier of the formulation comprises the components: an alkanol solvent consisting of up to three different C2-3 alkanols bearing 1-2 hydroxyl groups so that no more than 1 hydroxyl group falls on 1.5 carbon atoms. Suitable alkanols are ethanol and propylene glycol, preferably ethanol. The total amount of alkanol solvent is at least 1% by volume, usually 3% by volume, up to 95% by volume, usually in the range of 5 to 75% by volume, more often 5 to 60% by volume, even more often 10 to 60% by volume due to the volume of the preparation. When the alkanol solvent is ethanol, it is present in an amount of 5 to 25 vol%, usually 5 to 20 vol%, and more often 10 to 25 vol%, based on the volume of the formulation. When the alkanol solvent is propylene glycol, it is present in an amount of 5 to 90% by volume, usually 5 to 85% by volume, and more often 10 to 50% by volume, based on the volume of the formulation.

Perorálně přijatelný nosič farmaceutického přípravku také obsahuje nejméně jednu neiontovou povrchově aktivní látku, častěji ne • · · · • ·The orally acceptable carrier of the pharmaceutical composition also comprises at least one nonionic surfactant, more often not.

-6více než dvě neiontové polyoxyalkylenové povrchově aktivní látky. Polyoxyalkylenové povrchově aktivní látky mají hydrofilně-lipofílní rovnováhu (HLB) v rozmezí 5 až 20, obvykle 8 až 16. Neiontové polyoxyalkylenové povrchově aktivní látky v předkládaném přípravku jsou výhodně polyoxy ethylenové sloučeniny. Vhodné póly oxyethy lenové sloučeniny jsou ethoxylované alkoholy, tj. polyoxyethylen alkoholy nebo mastné polyoxyethylen alkoholy, kde alkoholová část obvykle obsahuje 10 až 18, častěji 10 až 14 atomů uhlíku, dále etherové a esterové substituční deriváty těchto látek; a polyoxyethylenové deriváty parciálních esterů mastných kyselin, obvykle monoesterů a C4..6 polyolů, obvykle Cg polyolů, kde polyolem mohou být polyolové anhydridy, např. sorbitan. Část molekuly tvořená mastnou kyselinou obvykle obsahuje 10 až 18 atomů uhlíku. Počet ethylenoxidových skupin se pohybuje v rozmezí 2 až 30, obvykle 2 až 25. Výhodné povrchově aktivní látky jsou polyoxyethylen (4) lauryl ether (BRIJ 30) a polyoxyethylen (20) mono sorbitan mono oleát (TWEEN 80). Celkové množství neiontových povrchově aktivních látek v předkládaném přípravku je 5 až 80 % obj., obvykle 5 až 70 % obj., častěji 5 až 65 % obj., výhodně 5 až 60 % obj., výhodněji 20 až 75 % obj. a Často 50 až 80 % obj. vzhledem k objemu přípravku. Je-li v přípravku obsažen TWEEN 80, tvoří obvykle 5 až 80 % obj., častěji 5 až 70 % obj., výhodně 5 až 60 % obj. a výhodněji 10 až 50 % obj. přípravku. Je-li v přípravku obsažen BRIJ 30, tvoří obvykle 10 až 45 % obj., častěji 15 až 40 % obj. přípravku.- more than two nonionic polyoxyalkylene surfactants. The polyoxyalkylene surfactants have a hydrophilic-lipophilic balance (HLB) in the range of 5 to 20, usually 8 to 16. The nonionic polyoxyalkylene surfactants in the present composition are preferably polyoxyethylene compounds. Suitable polyesters of the oxyethylene compound are ethoxylated alcohols, i.e. polyoxyethylene alcohols or fatty polyoxyethylene alcohols, wherein the alcohol moiety typically contains 10 to 18, more typically 10 to 14 carbon atoms, ether and ester substitution derivatives thereof; and polyoxyethylene derivatives of partial esters of fatty acids, usually monoesters and C4-6 polyols, usually C8 polyols, wherein the polyol may be polyol anhydrides such as sorbitan. The fatty acid moiety typically contains 10 to 18 carbon atoms. The number of ethylene oxide groups ranges from 2 to 30, usually from 2 to 25. Preferred surfactants are polyoxyethylene (4) lauryl ether (BRIJ 30) and polyoxyethylene (20) mono sorbitan monooleate (TWEEN 80). The total amount of nonionic surfactants in the present composition is 5 to 80 vol%, usually 5 to 70 vol%, more often 5 to 65 vol%, preferably 5 to 60 vol%, more preferably 20 to 75 vol%, and often 50 to 80% by volume of the formulation. When TWEEN 80 is included in the formulation, it is usually 5 to 80% by volume, more often 5 to 70% by volume, preferably 5 to 60% by volume, and more preferably 10 to 50% by volume of the formulation. If BRIJ 30 is included in the formulation, it is usually 10 to 45% by volume, more often 15 to 40% by volume.

Předkládané přípravky případně dále obsahují jedno nebo několik přídavných rozpouštědel, obvykle ne více než tři různá rozpouštědla, častěji ne více než dvě různá rozpouštědla. Vhodná přídavná rozpouštědla zahrnují estery mastných kyselin a dioly, přičemž přídavné rozpouštědlo zahrnuje 100 % esteru mastné kyseliny nebo 100 % diolu nebo jejich kombinaci. V přípravcích obsahujících pouze ester mastné kyseliny, nebo pouze diol, může jít o kombinaci různých esterů mastných kyselin, nebo o kombinaci různých diolů. Celkové množství přídavných rozpouštědel v přípravku se pohybuje v rozmezí 20 až 80 % obj., obvykle 25 až 75 % obj. Jsou-li přídavná rozpouštědla v přípravku obsažena, je obvykle poměr příravných rozpouštědel k rozpouštědlům v rozmezí 1:1 až 15:1, častěji 1:1 až 13:1.Optionally, the present compositions further comprise one or more additional solvents, usually no more than three different solvents, more typically no more than two different solvents. Suitable co-solvents include fatty acid esters and diols, wherein the co-solvent comprises 100% fatty acid ester or 100% diol or a combination thereof. In formulations containing only a fatty acid ester or only a diol, it may be a combination of different fatty acid esters or a combination of different diols. The total amount of co-solvents in the formulation is in the range of 20 to 80% by volume, usually 25 to 75% by volume. If the co-solvents are present in the formulation, the ratio of co-solvents to solvents is usually in the range 1: 1 to 15: 1. more often 1: 1 to 13: 1.

·· ft· • · · <·· ft · • · · <

• · · « ·« ·· • · · · · · • · · · · · · · · • · · · · · • · · · · ······· · · · ·· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

-7Estery mastných kyselin, které mohou sloužit jako přídavná rozpouštědla obsahují obvykle Cj2-18 uhlíkový řetězec, častěji ¢^443, jsou to obvykle mono-estery mastných kyselin a nižších alkanolů. Vhodné estery mastných kyselin obvykle obsahují sudý počet uhlíků v řetězci, řetězec je nasycený nebo nenasycený, obvykle však nemá více než dvě nenasycené polohy. Mastné kyseliny jsou obvykle rostlinného nebo živočišného původu, např. kys. palmitová, stearová, palmitoleová, linoleová, linolenová apod., zvláště myristová a oleová. Alkoholová část esteru mastné kyseliny je obvykle tvořena nižším alkanolem C2-4, obvykle C2-3, rozvětveným nebo nerozvětveným. Vhodné mastné estery jsou isopropyl myristát a ethyl oleát. Je-li přítomen isopropyl myristát, je obsažen v množství 15 až 75 % obj., ethyl oleát je přítomen v množství 15 až 75 % obj. vzhledem k objemu přípravku. Objemový podíl esteru mastné kyseliny k povrchově aktivní látce v přípravku je v rozmezí 1:1 až 8:1, obvykle nepřesahuje 5:1. Ester mastné kyseliny je výhodně bezvodý.The fatty acid esters that may serve as additional solvents typically contain a C 12-18 carbon chain, more often ¢ 443, are usually mono-esters of fatty acids and lower alkanols. Suitable fatty acid esters usually contain an even number of carbons in the chain, the chain being saturated or unsaturated, but usually has no more than two unsaturated positions. The fatty acids are usually of plant or animal origin, for example palmitic, stearic, palmitoleic, linoleic, linolenic and the like, especially myristic and oleic acids. The alcohol part of the fatty acid ester is usually a lower alkanol C2-4, usually C2-3, branched or unbranched. Suitable fatty esters are isopropyl myristate and ethyl oleate. When isopropyl myristate is present, it is present in an amount of 15 to 75% by volume, ethyl oleate is present in an amount of 15 to 75% by volume, based on the volume of the formulation. The volume fraction of the fatty acid ester to the surfactant in the formulation is in the range of 1: 1 to 8: 1, usually not exceeding 5: 1. The fatty acid ester is preferably anhydrous.

Kromě přídavných esterů mastných kyselin předkládané přípravky dále případně obsahují dioly. Dioly jsou výhodně bezvodé. Dioly jako přídavná rozpouštědla jsou obvykle při fyziologických teplotách v kapalném skupenství, jsou to dioly, často Cig_20 dioly, dioly mohou být polyoxyalkylendioly obsahující C2-.3 alkylen, využití však mají i dioly obsahující podstatně více atomů uhlíku. Velikost molekul diolů vhodných jako přídavná rozpouštědla, se obvykle pohybuje v rozmezí 200 až 10 000 h.j., často 300 až 10 000 h.j., častěji 400 až 10 000 h.j., výhodně 800 až 10 000 h.j. Zvláště výhodné dioly jsou póly ethyl englykoly, zvláště polyethylenglykol 200 (PEG200), polyethylenglykol 300 (PEG300), polyethylenglykol 400 (PEG400), polyethylenglykol 600 (PEGgooX polyethylenglykol 1000 (PEGl000f polyethylenglykol 3400 (PEG340Q), polyethylenglykol 8000 (PEGgooo) a pod. Pokud jsou v přípravku přítomny, tvoří dioly 5 až 60 % hmotn./obj., častěji 5 až 55 % hmotn./obj. přípravku. Dioly, zvláště výšemolekulární polyethylenglykoly (např. polyethylenglykoly o molekulové hmotnosti 1000 a více) fungují jako absorbenty vody v přípravcích a tím podstatně snižují možnost vysrážení cyklosporinu z přípravku působenou volnými molekulami vody.In addition to the additional fatty acid esters, the present compositions further optionally comprise diols. The diols are preferably anhydrous. Diols as additional solvents are usually in liquid phase at physiological temperatures, such as diols, often C 18-20 diols, diols may be polyoxyalkylenediols containing C 2-3 alkylene, but diols containing substantially more carbon atoms may also be useful. The size of the diol molecules suitable as co-solvents is usually in the range of 200 to 10,000 hU, often 300 to 10,000 hU, more often 400 to 10,000 hU, preferably 800 to 10,000 hU. Particularly preferred diols are the ethyl englycols, especially polyethylene glycol 200 (PEG200), polyethylene glycol 300 (PEG300), polyethylene glycol 400 (PEG400), polyethylene glycol 600 (PEG 100X polyethylene glycol 1000 (PEG 1000f polyethylene glycol 3400 (PEG340Q), polyethylene glycol 8000 (PEG 100)) and the like. Diols, especially higher molecular weight polyethylene glycols (e.g. polyethylene glycols having a molecular weight of 1000 or more), act as water absorbents in the composition, and are present in the composition, forming 5 to 60% w / v diols, more often 5 to 55% w / v. compositions, thereby substantially reducing the possibility of precipitation of cyclosporin from the composition caused by free water molecules.

-8·· · · · · ·· · · · · · ·-8 ·· · · · · · · · · · · · · ·

Přídavná rozpouštědla dále udělují přípravku vhodné fyzikální vlastnosti jako je viskozita, stabilita a pod. Přípravek dále případně obsahuje další činidla ovlivňující jeho fyzikální vlastnosti jako jsou zahušťovadla, suspenzní činidla, solidifikaění činidla apod., tato činidla zahrnují látky jako akaciová pryskyřice, karboxymethylcelulóza, hydroxypropyl celulóza, lecithin, methylcelulóza, vysokomolekulární polyethylenglykoly (např. polyethylenglykoly o molekulové hmotnosti v rozmezí 1000 až 10 000 h.j., často 1000 až 8000 h.j., častěji 1000 až 6000 h.j.), povidon, alginát sodný, tragant a pod. Předkládané přípravky též obsahují minoritní složky poskytující různé funkce jako inhibitory enzymů, konzervační přísady, antioxidanty, antimikrobiální činidla, stabilizátory, aromatické přísady apod. Celkové množství zahušťovadel a dalších přísad obvykle nepřesahuje 55 % hmotn., často 45 % hmotn., častěji 25 % hmotn. přípravku. Přípravky dále obsahují různé excipienty, jako je v oblasti techniky běžné. Všechny přísady předkládaného přípravku jsou výhodně bezvodé.The co-solvents further impart suitable physical properties to the formulation such as viscosity, stability and the like. Optionally, the composition further comprises other agents affecting its physical properties such as thickeners, suspending agents, solidifying agents, and the like, including agents such as acacia resin, carboxymethylcellulose, hydroxypropyl cellulose, lecithin, methylcellulose, high molecular weight polyethylene glycols (e.g. 1000 to 10,000 IU, often 1000 to 8,000 IU, more often 1000 to 6000 IU), povidone, sodium alginate, tragacanth and the like. The present compositions also contain minor ingredients providing various functions such as enzyme inhibitors, preservatives, antioxidants, antimicrobial agents, stabilizers, flavorings, etc. The total amount of thickeners and other additives usually does not exceed 55% by weight, often 45% by weight, more often 25% by weight. . preparation. The formulations further comprise various excipients, as is conventional in the art. All of the ingredients of the present composition are preferably anhydrous.

V podstatě bezvodé přípravky jsou takové, obsahují-li méně než 1,0 % obj. vody, výhodněji méně než 0,1 % obj. vody.The substantially anhydrous formulations are those containing less than 1.0 vol% water, more preferably less than 0.1 vol% water.

Předkládané přípravky jsou stabilní v širokém rozmezí teplot, stabilitou přípravku je míněna jeho fyzická integrita, tj., že nedochází k vykrystalování cyklosporinové účinné složky z přípravku. Stabilní teplotní rozmezí zahrnuje nízké teploty při skladování, typicky 0 až 15 °C, častěji 2 až 8 °C.The present formulations are stable over a wide range of temperatures, the stability of the formulation being understood to mean its physical integrity, i.e., there is no crystallization of the cyclosporin active ingredient from the formulation. A stable temperature range includes low storage temperatures, typically 0-15 ° C, more typically 2-8 ° C.

Předkládané přípravky lze podávat v kapalné formě i v kapslích, např. tvrdých a měkkých kapslích. Způsoby příprav tvrdých kapslí obsahujících kapalný přípravek jsou známé v oblasti techniky, jsou uvedeny např. v U.S. 4 822 618 a 4 576 284, uvedeny v odkazech. Obecně tvrdé kapsle vhodné pro předkládané účely sestávají z dvou částí: pouzdra a čepičky. Pouzdro lze čepičkou těsně uzavřít a celek vytváří prostor o přesně definovaném objemu. Pouzdro i čepička se vyrábějí z hydrofilního polymeru, jako je škrob nebo želatina. Při přípravě tvrdých kapslí se kapalný přípravek vlije do pouzdra a kapsle se uzavře čepičkou. Uzavření musí být těsné, aby nedocházelo k únikuThe present compositions may be administered in liquid form as well as in capsules, such as hard and soft capsules. Methods for preparing hard capsules containing a liquid formulation are known in the art, e.g. Nos. 4,822,618 and 4,576,284, incorporated herein by reference. Generally, hard capsules suitable for the present purposes consist of two parts: a capsule and a cap. The cap can be tightly closed by the cap and the whole creates a space of precisely defined volume. The capsule and cap are made of a hydrophilic polymer such as starch or gelatin. In preparing hard capsules, the liquid preparation is poured into the capsule and the cap is closed with a cap. The closure must be tight to prevent leakage

-9•« · · · · · · • · · · · · · φ · • · · · · « · · · · · · · přípravku z kapsle, viz E.P. 116 744, uvedeno v odkazech. Kapsle musí rovněž zůstat stabilní v kyselém prostředí žaludku a proto musí být potaženy střevním potahem, aby nedocházelo k jejich degradaci. Různé střevní potahy jsou v oblasti techniky známé, viz např. U.S. 5 206 219, uvedeno v odkazech.The capsule formulation, see E.P., &lt; tb &gt; ______________________________________ &lt; tb &gt; 116,744, incorporated herein by reference. The capsules must also remain stable in the acidic environment of the stomach and must therefore be coated with an enteric coating to avoid degradation. Various enteric coatings are known in the art, see e.g. No. 5,206,219, incorporated herein by reference.

Předkládané přípravky lze podávat pacientům spolu s dalšími imunosupresivními činidly, která lze podávat spolu s cyklosporinovými přípravky předkládaného vynálezu. Jsou to např. rapamycin, FK-506, mykolěnolová kyselina, její analoga a deriváty, azathioprin, methotrexat, cyklofosfamid, kortikosteroidy a jiná imunosupresiva ajejich analoga.The present compositions can be administered to patients in conjunction with other immunosuppressive agents that can be administered with the cyclosporin compositions of the present invention. These include, for example, rapamycin, FK-506, mycolenolic acid, analogs and derivatives thereof, azathioprine, methotrexate, cyclophosphamide, corticosteroids, and other immunosuppressants and analogues thereof.

Předkládané přípravky mají využití při imunosupresívní terapii. Imunosupresivní terapie je indikována při široké řadě chorob, jako jsou idiopatický nefrotický syndrom, insulín-dependentní diabetes typ I, Behcetův syndrom, aktivní Crohnova choroba, aplastická anemie, pokročilé kortikosteroid-dependentní astma, psoriáza, revmatoidní artritida, a jiná onemocnění, kde imunitní systém může hrát patogenní úlohu. Velmi zajímavé je využití předkládaných přípravků při transplantacích, jak alogenních tak xenogenních orgánů, tkání nebo buněk, kde imunosuprese je žádoucí kvůli udržení životaschopnosti transplantovaného orgánu, tkáně a buněk po trasplantaci, tj. imunosuprese preventivně zabrání odmítnutí implantátu, nebo onemocnění implantát vs. hostitel, např. po transplantaci kostní dřeně.The present compositions have utility in immunosuppressive therapy. Immunosuppressive therapy is indicated for a wide range of diseases such as idiopathic nephrotic syndrome, insulin-dependent type I diabetes, Behcet's syndrome, active Crohn's disease, aplastic anemia, advanced corticosteroid-dependent asthma, psoriasis, rheumatoid arthritis, and other diseases where the immune system it can play a pathogenic role. Of great interest is the use of the present compositions in transplants of both allogeneic and xenogeneic organs, tissues or cells where immunosuppression is desirable in order to maintain the viability of the transplanted organ, tissue and cells after trasplantation, i.e. immunosuppression prevents implant rejection or implant vs. disease disease. a host, e.g., after a bone marrow transplant.

Při použití předkládaných přípravků pro imunosupresivní terapii je pacientovi perorálně dodáváno účinné množství cyklosporinu, tak aby bylo dosaženo požadované hladiny imunosuprese, podle konkrétního léčeného stavu. Při transplantacích je obvykle počáteční dávka cyklosporinu podávána před operací nebo po chirurgickém zákroku. Po transplantaci donorového orgánu hostiteli se cyklosporin podává pacientovi opakovaně, tj. chronicky, aby byla udržována imunosuprese. Počáteční dávka se podává 4 až 12 h před transplantací v množství 5 až 18 mg/kg tělesné hmotnosti, obvykle 5 až 15 mg/kg. Po operaci se podávají obvykle stejné denní dávky dále po dobu 1 až 3 týdnů, obvykle 1 až 2 týdny. Později se dávky sníží na 3 až 10 mg/kg denně, obvykle 3 • · · · • φ φ φ · φ φ · · · φ φ φ · φ φφφ φ φ φ φφφφ • ΦΦ φφφ φφ φφUsing the present compositions for immunosuppressive therapy, an effective amount of cyclosporin is orally delivered to the patient to achieve the desired level of immunosuppression, according to the particular condition being treated. In transplants, the initial dose of ciclosporin is usually given before or after surgery. Following transplantation of the donor organ to the host, cyclosporin is administered repeatedly, i.e., chronically, to the patient to maintain immunosuppression. The initial dose is administered 4 to 12 hours prior to transplantation in an amount of 5 to 18 mg / kg body weight, usually 5 to 15 mg / kg. After surgery, usually the same daily doses are administered for a further 1 to 3 weeks, usually 1 to 2 weeks. Later, doses are reduced to 3 to 10 mg / kg daily, usually 3 to 10 mg / kg / day, usually 3 to 10 mg / kg daily, usually 3 to 10 mg / kg.

- 10φφ φφ až 6 mg/kg. Rychlost snižování dávek na udržovací hladinu je 3 až 8 % týdně, obvykle 5 % týdně. Dávkování se určuje podle krevní hladiny tak, aby se udržovala koncentrace 100 až 350 ng/ml, dle HPLC, RIA, ELIS A nebo TDx testů. Předkládané přípravky lze podávat spolu s dalšími činidly, v případě že je taková společná léčba doporučena a v oblasti techniky známa. Například lze předkládané přípravky podávat spolu s adrenokortikosteroidy, azathioprinem a pod.- 10φφ φφ up to 6 mg / kg. The rate of dose reduction to maintenance levels is 3 to 8% per week, usually 5% per week. Dosage is determined by blood level to maintain a concentration of 100 to 350 ng / ml by HPLC, RIA, ELIS A or TDx assays. The present compositions may be co-administered with other agents where such co-treatment is recommended and known in the art. For example, the present compositions may be administered together with adrenocorticosteroids, azathioprine, and the like.

Výsledkem podávání předkládaných přípravků při transplantacích je prodloužená životaschopnost transplantovaného orgánu v příjemci, díky potlačení imunitní reakce hostitele na donorový orgán. Prodloužením životaschopnosti je míněno, že donorový orgán zůstává funkční v těle příjemce delší dobu, než by tomu bylo v případě bez aplikace imunosupresivní léčby. Prodloužením životaschopnosti se rozumí udržení životaschopnosti na neurčitou dobu. Donorový orgán lze považovat za životaschopný pokud zůstává v tělesném prostředí hostitele funkční.Administration of the present compositions in transplantation results in prolonged viability of the transplanted organ in the recipient, by suppressing the host's immune response to the donor organ. By prolonging viability, it is meant that the donor organ remains functional in the recipient's body for a longer period of time than would be the case without immunosuppressive therapy. Extending viability means maintaining viability indefinitely. A donor organ can be considered viable as long as it remains functional in the host's physical environment.

Předkládané přípravky lze rovněž připravit jako vodné koloidní disperze cyklosporinových nanočástic, které si zachovávají dobrou biologickou dostupnost. V takovém případě jsou nanočástice v podstatě kulovité, cyklosporin je v nich obsažen v amorfní formě a jejich průměrná velikost je obvykle menší než 1000 nm, větší než 50 nm, obvykle se pohybuje v rozmezí 200 až 800 nm, často 200 až 600 n. Nejméně 50 % hmotn. částic musí být ve vymezeném velikostním rozmezí. Větší Částice jsou přítomny jako agregáty nanočástic o průměrné velikosti průměru menší než 50 um, častěji menší než 25 um. Agregáty obvykle netvoří více než 40 % hmotn. z celkového množství cyklosporinu.The present compositions can also be prepared as aqueous colloidal dispersions of cyclosporin nanoparticles that retain good bioavailability. In this case, the nanoparticles are substantially spherical, the cyclosporin is contained in them in an amorphous form, and their average size is usually less than 1000 nm, greater than 50 nm, usually in the range of 200 to 800 nm, often 200 to 600 n. 50 wt. The particle size must be within the specified size range. Larger particles are present as nanoparticle aggregates with an average diameter of less than 50 µm, more often less than 25 µm. Aggregates generally do not comprise more than 40 wt. of the total amount of cyclosporin.

Přípravek musí obsahovat dostatečné množství amorfních cyklosporinových částic pro požadovaný terapeutický účinek. Protože přípravek se vytváří teprve ve vodném prostředí před podáním, nebo přímo v trávících šťávách, nemůže být koncentrace stanovena, protože není známo zředění v žaludku. Přípravky⁷ ředěné před perorálním podáváním obvykle obsahují 0,01 až 2,5 % hmotn. cyklosporinu, častějiThe formulation must contain sufficient amorphous cyclosporin particles for the desired therapeutic effect. Since the preparation is only formed in an aqueous environment prior to administration, or directly in the digestive juices, the concentration cannot be determined because no stomach dilution is known. Formulations ⁷ diluted prior to oral administration typically contain from 0.01 to 2.5% by weight. cyclosporin, more often

999999 ·· 99 99 ··999999 ·· 99 99 ··

9 9 · 9 · 9 9 ♦9 9 · 9 · 9 9

9 9 9 · 9 9 9 9 · · · ·9 9 9 · 9 9 9 9 · · · ·

999 9 9 99 ··· 9··999 9 9 99 ··· 9 ··

99999 · 9 • 99999 9 9 99 99 9999999 · 9 • 99999

0,01 až 0,5 % hmotn. Teplota při míchání se pohybuje v rozmezí 10 až °C, obvykle 20 až 40 °C. Míchání se obvykle provádí dostatečnou dobu nutnou ke vzniku roztoku.0.01 to 0.5 wt. The stirring temperature is in the range of 10 ° C to 20 ° C, usually 20 ° C to 40 ° C. Stirring is usually performed for a sufficient time to form a solution.

Koloidní amorfní suspenze nanočástit je dostatečně stabilní, aby umožnila určitou prodlevu před vlastním podáním, běžně do 6 h, častěji 3 h.The colloidal amorphous nanoparticle suspension is sufficiently stable to allow some delay before administration, usually within 6 h, more often 3 h.

Další podrobnosti týkající se přípravy a použití nanočásticových cyklosporinových přípravků lze nalézt v PCT/US97/04627.Further details regarding the preparation and use of nanoparticulate cyclosporin formulations can be found in PCT / US97 / 04627.

Následující příklady slouží jen jako ilustrace a v žádném případě nejsou vymezením vynálezu.The following examples are for illustrative purposes only and are not to be construed as limiting the invention.

Příklady provedení vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

Bylo připraveno několik cyklosporinových přípravků předkládaného vynálezu. Biologická dostupnost cyklosporinu v těchto přípravcích byla sledována na krysách i lidech.Several cyclosporin formulations of the present invention have been prepared. The bioavailability of ciclosporin in these formulations was studied in both rats and humans.

1. Perorální cyklosporinové přípravkyOral cyclosporin preparations

Byly připraveny následující přípravky Cyklosporinu A. Ve všech přípravách bylo do 1 1 volumetrické nádoby dáno určené množství Cyklosporinu A, povrchově aktivní látka a ethanol nebo propylenglykol. Konečný objem byl do 1 1 doplněn příslušným objemem esteru mastné kyseliny a/nebo diolu.The following Cyclosporin A preparations were prepared. In all formulations, a specified amount of Cyclosporin A, a surfactant, and ethanol or propylene glycol were placed in a 1 L volumetric flask. The final volume was supplemented to 1 L with an appropriate volume of fatty acid ester and / or diol.

99999999

9 9 · » 9 · ► 9 9 9 9 » 9 9 19 9 9 9 9 9 9 9 9 9

99 ► 9 9 <98 ► 9 9 <

> 9 9 4> 9 9 4

Přípravek Preparation Složení Ingredients 19 19 Dec CsA EtOH Tween 80 IM CsA EtOH Tween 80 IM 100 mg 0,1 ml 300 mg do 1 ml 100 mg 0.1 ml 300 mg to 1 ml (10 % hmotn./obj.) (10%) (0,278 ml) <(0,622 ml) (531 mg) (10% w / v) (10%) (0.278 ml) <(0.622 ml) (531 mg) 20 20 May CsA EtOH Brij 30 IM CsA EtOH Brij 30 IM 100 mg 0,05 ml 350 mg do 1 ml 100 mg 0.05 ml 350 mg to 1 ml (10 % hmotn./obj.) (5 %) (0,368 ml) <(0,582 ml) (496 mg) (10% w / v) (5%) (0.368 ml) <(0.582 ml) (496 mg) 21 21 CsA PG Brij 30 IM CsA PG Brij 30 IM 100 mg 0,05 ml 350 mg do 1 ml 100 mg 0.05 ml 350 mg to 1 ml (10 % hmotn./obj.) (5 %) (0,368 ml) <(0,582 ml) (496 mg) (10% w / v) (5%) (0.368 ml) <(0.582 ml) (496 mg) 22 22nd CsA EtOH Tween 80 EO CsA EtOH Tween 80 EO 100 mg 0,1 ml 300 mg do 1 ml 100 mg 0.1 ml 300 mg to 1 ml (10 % hmotn./obj.) (10 %) (0,278 ml) <(0,622 ml) (541 mg) (10% w / v) (10%) (0.278 ml) <(0.622 ml) (541 mg) 23 23 CsA EtOH Brij 30 EO CsA EtOH Brij 30 EO 100 mg 0,05 ml 350 mg do 1 ml 100 mg 0.05 ml 350 mg to 1 ml (10 % hmotn./obj.) (5 %) (0,368 ml) <(0,582 ml) (506 mg) (10% w / v) (5%) (0.368 ml) <(0.582 ml) (506 mg) 24 24 CsA PG Brij 30 EO CsA PG Brij 30 EO 100 mg 0,05 ml 350 mg do 1 ml 100 mg 0.05 ml 350 mg to 1 ml (10 % hmotn./obj.) (5 %) (0,368 ml) <(0,582 ml) (506 mg) (10% w / v) (5%) (0.368 ml) <(0.582 ml) (506 mg)

- 13·· ··»· ·· ·· ·· • · · · * · « · » ·«·· · · · · · · · · · * · · · · · · · ··· ··· • · · · · * · · ······ ·» ♦ · · · ·*- 13·· ··"· ·· ·· ·· • · · · * · " · " ·"·· · · · · · · · · · * · · · · · · · ··· ··· • · · · * ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ *

Přípravek Preparation Složení Ingredients 33 33 CsA EtOH Brij 30 CsA EtOH Brij 30 100 mg 0,1 ml 350 mg 100 mg 0.1 ml 350 mg (10 % hmotn ./obj.) (10%) (0,368 ml) (10% w / v) (10%) (0.368 ml) IM IM do 1 ml to 1 ml <(0,742 ml) (633 mg) <(0.742 ml) (633 mg) 34 34 CsA EtOH Brij 30 EO CsA EtOH Brij 30 EO 100 mg 0,1 ml 150 mg do 1 ml 100 mg 0.1 ml 150 mg to 1 ml (10 % hmotn./obj.) (10%) (0,158 ml) <(0,742 ml) (646 mg) (10% w / v) (10%) (0.158 ml) <(0.742 ml) (646 mg) 35 35 CsA EtOH Tween 80 PG CsA EtOH Tween 80 PG 100 mg 0,105 ml 500 mg do 1 ml 100 mg 0,105 ml 500 mg to 1 ml (10 % hmotn./obj.) (10,5 %) (0,463 ml) <(0,437 ml) (453 mg) (10% w / v) (10.5%) (0.463 ml) <(0.437 ml) (453 mg) 36 36 CsA EtOH Tween 80 PG EO CsA EtOH Tween 80 PG EO 100 mg 0,1 ml 300 mg 100 mg do 1 ml 100 mg 0.1 ml 300 mg 100 mg to 1 ml (10 % hmotn./obj.) (10%) (0,278 ml) (0,097 ml) <(0,525 ml) (465 mg) (10% w / v) (10%) (0.278 ml) (0.097 ml) <(0.525 ml) (465 mg) 37 37 CsA EtOH Tween 80 PEG 400 EO CsA EtOH Tween 80 PEG 400 EO 100 mg 0,1 ml 300 mg 100 mg do 1 ml 100 mg 0.1 ml 300 mg 100 mg to 1 ml (10 % hmotn./obj.) (10%) (0,278 ml) (0,088 ml) <(0,534 ml) (464 mg) (10% w / v) (10%) (0.278 ml) (0.088 ml) <(0.534 ml) (464 mg)

fc« fc· fcfc fcfc • fcfc fcfcfcfc fc fcfcfcfc fc fcfc ·fc «fc · fcfc fcfc • fcfc fcfcfcfc fc fcfcfcfc fc fcfc ·

- 14fcfc fc·*· • · • · · · • · · fc · fc ·· fcfc fcfc fcfc- 14fcfc fc · fcfc fcfc fcfc

Přípravek Preparation Složení Ingredients 38 38 CsA CsA 100 mg 100 mg (10 % hmotn./obj.) (10% w / v) EtOH EtOH 0,1 ml 0.1 ml (10%) (10%) Brij 30 Brij 30 300 mg 300 mg (0,316 ml) (0.316 ml) PG PG 100 mg 100 mg (0,097 ml) (0.097 ml) EO EO do 1 ml to 1 ml <(0,487 ml) (424 mg) <(0.487 ml) (424 mg) 39 39 CsA CsA 100 mg 100 mg (10 % hmotn./obj.) (10% w / v) EtOH EtOH 0,1 ml 0.1 ml (10%) (10%) Brij 30 Brij 30 300 mg 300 mg (0,316 ml) (0.316 ml) PG PG 200 mg 200 mg (0,193 ml) (0.193 ml) EO EO do 1 ml to 1 ml <(0,391 ml) (340 mg) <(0.391 ml) (340 mg) 40 40 CsA CsA 100 mg 100 mg (10 % hmotn./obj.) (10% w / v) PG PG 300 mg 300 mg (0,290 ml) (0.290 ml) Brij 30 Brij 30 300 mg 300 mg (0,316 mi) (0.316 mi) EO EO do 1 ml to 1 ml <(0,394 ml) (343 mg) <(0.394 ml) (343 mg) 41 41 CsA CsA 100 mg 100 mg (10 % hmotn./obj.) (10% w / v) EtOH EtOH 0,05 ml 0.05 ml (5 %) (5%) Brij 30 Brij 30 150 mg 150 mg (0,158 ml) (0.158 ml) Tween 80 Tween 80 100 mg 100 mg (0,093 ml) (0.093 ml) EO EO do 1 ml to 1 ml <(0,649 ml) (565 mg) <(0.649 ml) (565 mg) 42 42 CsA CsA 100 mg 100 mg (10 % hmotn./obj.) (10% w / v) PG PG 0,05 ml 0.05 ml (5 % hmotn.) (5 wt.%) Brij 30 Brij 30 150 mg 150 mg (0,158 ml) (0.158 ml) Tween 80 Tween 80 100 mg 100 mg (0,093 ml) (0.093 ml) EO EO do 1 ml to 1 ml <(0,649 ml) (565 mg) <(0.649 ml) (565 mg)

- 15·· ···· • · • · · · • · · · • · · • φ ·φ · • ό · · • · * * *· 44 • •Φ- 15 · · φ φ φ ό ό * * * * * 44 44 44 44 44 44 44 44

Přípravek Preparation Složení Ingredients 44- tekutina 44- fluid CsA EtOH Tween 80 peg₄₀₀ CsA EtOH Tween 80 peg ₄₀₀ 100 mg 0,125 ml 400 mg do 100 ml 100 mg 0.125 ml 400 mg to 100 ml (10 % hmotn./obj.) (12,5 %) (0,371 ml) <(0,529ml) (601 mg) (10% w / v) (12.5%) (0.371 ml) <(0.529ml) (601mg) 44-tvrdé 44-hard CsA CsA 100 mg 100 mg (10 % hmotn./obj.) (10% w / v) kapsle capsule EtOH Tween 80 PEG400 PEG1000 EtOH Tween 80 PEG400 PEG1000 0,125 ml 400 mg 0,25 ml 0,25 ml 0.125 ml 400 mg 0.25 ml 0.25 ml (12,5 %) (0,371 ml) (12.5%) (0.371 ml) 45 45 CsA EtOH Tween 80 CsA EtOH Tween 80 100 mg 0,10 ml 300 mg 100 mg 0,10 ml 300 mg (10 % hmotn./obj.) (10%) (0,278 ml) (10% w / v) (10%) (0.278 ml) PG PG asi 250 mg about 250 mg (0,243 ml) (0.243 ml) PEG400 PEG400 asi 250 mg about 250 mg (0,220 ml) (0.220 ml) 46 46 CsA EtOH Tween 80 PG CsA EtOH Tween 80 PG 100 mg 0,10 ml 100 mg do 1,0 ml 100 mg 0.10 ml 100 mg to 1.0 ml (10 % hmotn./obj.) (10%) (0,093 ml) (0,807 ml) (10% w / v) (10%) (0.093 ml) (0.807 ml) 48 48 CsA EtOH Tween 80 CsA EtOH Tween 80 100 mg 0,10 ml 200 mg 100 mg 0,10 ml 200 mg (10 % hmotn./obj.) (10 %) (0,278 ml) (10% w / v) (10%) (0.278 ml) PG PG asi 250 mg about 250 mg (0,243 ml) (0.243 ml) peg₄₀₀ peg ₄₀₀ asi 250 mg about 250 mg (0,220 ml) (0.220 ml)

·· ·· « · * ♦ • 9 9 9 • · · · » · «·· ·· «· * ♦ • 9 9 9

I · · · ·I · · · ·

ί.ί.

- 16·· ···· • · • · · ·- 16 ·· ····

9 9 9 9 99

999 999 99 99999 99 99 99

Přípravek Preparation Složení Ingredients 49 49 CsA EtOH Tween 80 PG CsA EtOH Tween 80 PG 100 mg 0,10 ml 600 mg do 1,0 ml 100 mg 0,10 ml 600 mg to 1.0 ml (10 % hmotn./obj.) (10%) (0,558 ml) (0,342 ml) (10% w / v) (10%) (0.558 ml) (0.342 ml) 50 50 CsA EtOH Tween 80 PG CsA EtOH Tween 80 PG 100 mg 0,10 ml 300 mg do 1,0 ml 100 mg 0,10 ml 300 mg to 1.0 ml (10% hmotn ./obj.) (10%) (0,278 ml) (0,622 ml) (10% w / v) (10%) (0.278 ml) (0.622 ml) 51 51 CsA EtOH Tween 80 PG CsA EtOH Tween 80 PG 100 mg 0,10 ml 200 mg do 1,0 ml 100 mg 0,10 ml 200 mg to 1.0 ml (10 % hmotn./obj.) (10%) (0,186 ml) (0,714 ml) (10% w / v) (10%) (0.186 ml) (0.714 ml) 52 52 CsA EtOH Tween 80 PG CsA EtOH Tween 80 PG 100 mg 0,05 ml 400 mg do 1,0 ml 100 mg 0.05 ml 400 mg to 1.0 ml (10 % hmotn./obj.) (5 %) (0,371 ml) (0,579 ml) (10% w / v) (5%) (0.371 ml) (0.579 ml) 100 100 ALIGN! CsA EtOH Tween 80 peg₃₀₀ PEGgoooCsA EtOH Tween 80 peg ₃₀₀ PEG 100 125 mg 0,125 ml 200 mg asi 0,44 mg asi 0,11 mg 125 mg 0.125 ml 200 mg about 0.44 mg about 0.11 mg (12,5 % hmotn./obj.) (12,5 %) (0,186 ml) (12.5% w / v) (12.5%) (0.186 ml) 101 101 CsA EtOH Tween 80 peg₃₀₀ PEG₈oooCsA EtOH Tween 80, PEG _300, PEG ₈ ooo 125 mg 0,125 ml 100 mg asi 0,52 mg asi 0,13 mg 125 mg 0.125 ml 100 mg about 0.52 mg about 0.13 mg (12,5 % hmotn./obj.) (12,5 %) (0,093 ml) (12.5% w / v) (12.5%) (0.093 ml)

φφ φφφφ ·· φφ ·· *♦ • φφ φφφ φφφφ φ φφφ φ φ φφφ φ φ φ φ φ φφφ φφ φφ φφφ φφφ φ φφφφφ · φ φφφφ φφφ φφ φφ φφ φφφ φ · · φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ

Přípravek Preparation Složení Ingredients 102 102 CsA CsA 125 mg 125 mg (12,5 % hmotn./obj.) (12.5% w / v) EtOH EtOH 0,125 ml 0.125 ml (12,5 %) (12.5%) Tween 80 Tween 80 100 mg 100 mg (0,093 ml) (0.093 ml) peg₃₀₀ peg ₃₀₀ asi about 0,585 mg 0.585 mg ΡΕθδοοο ΡΕθδοοο asi about 0,065 mg 0.065 mg 103 103 CsA CsA 125 mg 125 mg (12,5 % hmotn./obj.) (12.5% w / v) EtOH EtOH 0,125 ml 0.125 ml (12,5 %) (12.5%) Tween 80 Tween 80 400 mg 400 mg (0,372 ml) (0.372 ml) PEG₃₀₀ PEG ₃₀₀ asi about 0,28 mg 0.28 mg PEG₃4ooPEG ₃ 4oo asi about 0,07 mg 0.07 mg 104 104 CsA CsA 125 mg 125 mg (12,5 % hmotn./obj.) (12.5% w / v) EtOH EtOH 0,15 ml 0.15 ml (15%) (15%) Tween 80 Tween 80 100 mg 100 mg (0,093 ml) (0.093 ml) peg₃₀₀ peg ₃₀₀ asi about 0,496 mg 0.496 mg PEGgooo PEGgooo asi about 0,124 mg 0.124 mg 105 105 CsA CsA 125 mg 125 mg (12,5 % hmotn./obj.) (12.5% w / v) EtOH EtOH 0,15 ml 0.15 ml (15%) (15%) Tween 80 Tween 80 400 mg 400 mg (0,372 ml) (0.372 ml) PEG_3OoPEG ₃₀ o asi about 0,256 mg 0.256 mg PEG_34OoPEG _34O o asi about 0,064 mg 0.064 mg 106 106 CsA CsA 125 mg 125 mg (12,5 % hmotn./obj.) (12.5% w / v) EtOH EtOH 0,125 ml 0.125 ml (12,5 %) (12.5%) Tween 80 Tween 80 400 mg 400 mg (0,372 ml) (0.372 ml) peg₃₀₀ peg ₃₀₀ asi about 0,329 mg 0.329 mg PEG₈oooPEG ₈ ooo asi about 0,021 mg 0.021 mg

«« ·· ·· • · · · · · · • ···· · · · · ♦ · ···· • <«· • <<• <<<<<<

• · · ·• · · ·

Přípravek Preparation Složení Ingredients 107 107 CsA EtOH Tween 80 CsA EtOH Tween 80 112 mg 0,158 ml 800 mg 112 mg 0.158 ml 800 mg (11,2 % hmotn./obj.) (15,8%) (0,744 ml) (11.2% w / v) (15.8%) (0.744 ml) 108 108 CsA CsA 112 mg 112 mg (11,2 % hmotn./obj.) (11.2% w / v) EtOH EtOH 0,158 ml 0.158 ml (15,8%) (15.8%) Tween 80 peg₃₀₀ PEGgoooTween 80 Peg ₃₀₀ PEGgooo 700 mg asi 0,105 mg asi 0,045 mg 700 mg about 0.105 mg about 0.045 mg (0,651 ml) (0.651 ml) 109 109 CsA CsA 112 mg 112 mg (11,2 % hmotn./obj.) (11.2% w / v) EtOH EtOH 0,158 mí 0.158 mi (15,8%) (15.8%) Tween 80 peg₃₀₀ PEGgoooTween 80 Peg ₃₀₀ PEGgooo 700 mg asi 0,075 mg asi 0,075 mg 700 mg about 0.075 mg about 0.075 mg (0,651 ml) (0.651 ml) 110 110 CsA CsA 112 mg 112 mg (11,2 % hmotn./obj.) (11.2% w / v) EtOH EtOH 0,158 ml 0.158 ml (15,8%) (15.8%) Tween 80 peg₃₀₀ PEGgoooTween 80 Peg ₃₀₀ PEGgooo 600 mg asi 0,20 mg asi 0,05 mg 600 mg about 0.20 mg about 0.05 mg (0,558 ml) (0.558 ml) 111 111 CsA CsA 112 mg 112 mg (11,2 % hmotn./obj.) (11.2% w / v) EtOH EtOH 0,158 ml 0.158 ml (15,8%) (15.8%) Tween 80 peg₃₀₀ PEG₈oooTween 80, PEG _300, PEG ₈ ooo 600 mg asi 0,15 mg asi 0,10 mg 600 mg about 0.15 mg about 0.10 mg (0,558 ml) (0.558 ml)

9999

9 9 99 9 9

9 9 99 9 9

- 19• 9 9 9 99- 9 • 9 9 9 99

9 9 999 » 9«9,999 »9«

9 9 9 9 99

9 9 ·9 9 ·

9999

99

9999

Přípravek Preparation Složení Ingredients 112 112 CsA EtOH Tween 80 peg₃₀₀ PEGsoooCsA EtOH Tween 80 peg ₃₀₀ PEG 500 112 mg 0,158 ml 500 mg asi 0,315 mg asi 0,035 mg 112 mg 0.158 ml 500 mg about 0.315 mg about 0.035 mg (11,2 % hmotn./obj.) (15,8%) (0,465 ml) (11.2% w / v) (15.8%) (0.465 ml) 113 113 CsA EtOH Tween 80 peg₃₀₀ PEG_34OoCsA EtOH Tween 80 peg ₃₀₀ PEG ₃₄ 112 mg 0,158 ml 500 mg asi 0,245 mg asi 0,105 mg 112 mg 0.158 ml 500 mg about 0.245 mg about 0.105 mg (11,2 % hmotn./obj.) (15,8%) (0,465 ml) (11.2% w / v) (15.8%) (0.465 ml) 114 114 CsA EtOH Tween 80 PEG₃oo PEG₈oooCsA EtOH Tween 80 PEG _{3 and} PEG ₈ ooo 125 mg 0,158 ml 300 mg asi 0,385 mg asi 0,165 mg 125 mg 0.158 ml 300 mg about 0.385 mg about 0.165 mg (12,5 % hmotn./obj.) (15,8%) (0,279 ml) (12.5% w / v) (15.8%) (0.279 ml) 115 115 CsA EtOH Tween 80 peg₃₀₀ PEGgoooCsA EtOH Tween 80 peg ₃₀₀ PEG 100 125 mg 0,158 ml 300 mg asi 0,33 mg asi 0,22 mg 125 mg 0.158 ml 300 mg about 0.33 mg about 0.22 mg (12,5 % hmotn./obj.) (15,8%) (0,279 ml) (12.5% w / v) (15.8%) (0.279 ml) 116 116 CsA EtOH Tween 80 peg₃₀₀ PEGsoooCsA EtOH Tween 80 peg ₃₀₀ PEG 500 125 mg 0,158 ml 400 mg asi 0,225 mg asi 0,225 mg 125 mg 0.158 ml 400 mg about 0.225 mg about 0.225 mg (12,5 % hmotn./obj.) (15,8%) (0,372 ml) (12.5% w / v) (15.8%) (0.372 ml)

• ♦ · • « * · · • · · ♦ ·· ··• * • «♦ ♦ · · ·

-20·· ··>· • · • · ·· «· · • « · · • · · · • · ·♦ ··-20 ·· ··· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

PG = propylenglykol; EtOH = ethanol; Brij 30 = polyoxyethylen (4) laurylether; Tween BO polyoxyethylen (20) monosorbitan mono-oleát; IM = isopropyl myristát; EO = ethyl oleátPG = propylene glycol; EtOH = ethanol; Brij 30 = polyoxyethylene (4) lauryl ether; Tween BO polyoxyethylene (20) monosorbitan monooleate; IM = isopropyl myristate; EO = ethyl oleate

2. Studie biologické dostupnosti u přípravků 19-24 a 33-422. Bioavailability studies for formulations 19-24 and 33-42

Byla studována biologická dostupnost cyklosporinu v přípravcích 19-24 a 33-42. Jako míra biologické dostupnosti byly stanoveny následující farmakokinetické parametry: (a) maximální koncentrace cyklosporinu v krvi (C_max); (b) doba nutná pro dosažení C_max (T_max);The bioavailability of ciclosporin in formulations 19-24 and 33-42 was studied. The following pharmacokinetic parameters were determined as a measure of bioavailability: (a) maximum cyclosporin blood concentration (C _max ); (b) the time taken to reach C _max (T _max );

(c) relativní plochy pod křivkou závislosti průběhu koncentrace na čase (AUC). Kromě přípravků 19-24 a 33-42 byla stejná stanovení provedena pro cyklosporin v přípravku SANDIMMUNE Oral Solution (SO) pro srovnávací účely. Pro testování výše uvedených přípravků byla připravena pokusná zvířata. Krysy Sprague Dewley, které dosud nepřišly do styku s CsA, o hmotnosti 250-350 g byly krmeny peletizovanou standardní stravou (Agway 3000, Granviile Milí, Greensboro, NC) a vodou ad libitum. Jeden den před experimentem byla do pravé jugulární a pravé femorální žíly pod lehkou anestezií etherem zavedena gumová kanyla. Po nočním přerušení dodávky potravy byl dávkovacím zařízením podán CsA.(c) the relative area under the concentration-time curve (AUC). Except for Formulations 19-24 and 33-42, the same determinations were made for cyclosporin in SANDIMMUNE Oral Solution (SO) for comparative purposes. Experimental animals were prepared for testing the above preparations. Sprague Dewley rats not yet in contact with CsA weighing 250-350 g were fed a pelletized standard diet (Agway 3000, Granviile Mili, Greensboro, NC) and water ad libitum. One day before the experiment, a rubber cannula was inserted into the right jugular and right femoral vein under light ether anesthesia. After overnight interruption of food supply, CsA was administered via a dosing device.

Po podání byly odebírány 200 z/1 krevní vzorky z jugulární žíly do 0,5 ml polypropylenových mikrocentrifugačních zkumavek obsahujících 0,3 mg lyofilizované EDTA/Na a zahřívány 10 s. Krevní vzorky od zvířat léčených předkládanými přípravky byly odebírány 0, 0,5, 1, 2, 4, 8, 12, 24, 36, 48 a 72 hodin po podání.After administration, 200 z / l jugular vein blood samples were collected into 0.5 ml polypropylene microcentrifuge tubes containing 0.3 mg lyophilized EDTA / Na and heated for 10 s. Blood samples from animals treated with the present compositions were collected at 0.5, 1, 2, 4, 8, 12, 24, 36, 48 and 72 hours after administration.

CsA včetně některých metabolitů byl stanovován v krvi fluorescentním polarizačním imunotestem (FPI)(TDx, Abbot Lab). Stručně, 150 «1 krevního vzorku bylo kvantitativně přeneseno do 1,5 ml mikrocentrifugačních zkumavek. Buňky byly lyžovány a rozpuštěny s 50 «1 solubilizačního činidla obsahujícího povrchově aktivní látku. Proteiny byly pak vysráženy 300 ul acetonitrilu. Po centrifugaci byl na supematantu proveden test FPI na Autoanalyzátoru TDx, postupem dleCsA, including some metabolites, was determined in the blood by a fluorescent polarization immunoassay (FPI) (TDx, Abbot Lab). Briefly, 150 L of blood sample was quantitatively transferred to 1.5 ml microcentrifuge tubes. Cells were lysed and dissolved with 50 L of surfactant-containing solubilizing agent. The proteins were then precipitated with 300 µl of acetonitrile. After centrifugation, the FPI test on the TDx Autoanalyzer was performed on the supernatant according to the procedure described in FIG

9999

-21 »9 ί·«· 99 ·>-21 »9 ί · 99 ·>

• * · · 9 ·9

9·9 9 9 »99 • 9 9 9 9*9 · 9 9 9 »99

9 9 9 99

9999 999 »9 999999 999

99

99 doporučení Abbott Diagnostics. Protože byl test TDx původně vyvinut pro lidskou krev, byly některé postupy pozměněny. Byla připravena řada standardních roztoků o známé koncentraci CsA, přidáním známého množství CsA do krysí krve zreagované s EDTA. Kde se dalo předpokládat že koncentrace CsA přesáhne 1,0 Mg/ml, byly vzorky lOx zředěny 0,1 mol.H fosfátovým pufrem o pH 7,0. Pro zředěné vzorky, tj. 10 % obj. krysí krve a 90 % obj. fosfátového pufru, byla vynesena jiná kalibrační křivka s využitím řady standardních roztoků obsahujících známé množství CsA.99 Abbott Diagnostics recommendations. Since the TDx assay was originally developed for human blood, some procedures have been modified. A number of standard solutions of known CsA concentration were prepared by adding a known amount of CsA to EDTA-reacted rat blood. Where it was expected that the CsA concentration would exceed 1.0 Mg / ml, the samples 10x were diluted with 0.1 mol.H phosphate buffer pH 7.0. For diluted samples, i.e. 10% rat blood and 90% phosphate buffer, another calibration curve was plotted using a series of standard solutions containing a known amount of CsA.

Farmakokinetické parametry byly získány z nonkompartmentních analýz. Maximální koncentrace (C_max) a doba nutná k jejímu dosažení (T_max) byly stanoveny posouzením profilu časové závislosti koncentrace pro každou krysu. Plocha pod křivkou závislosti koncentrace na čase (AUC) od času 0 do konce měření (AUC()_t) byla vypočtena metodou lineární lichoběžníkové projekce. Zbytková plocha pod koncem křivky (AUCq.qq) byla stanovena jako poměr poslední pozorované koncentrace (C ) k rychlostní konstantě prvního řádu popisující terminální eliminační fázi koncentračního profilu (λ_ζ). Rychlostní konstanta λ_ζ byla stanovena z log-lineární regrese dat časového průběhu koncentrace (tj. poslední 3 až 5 údajů podle analyzovaného profilu). Celková plocha (AUC^qq) byla vypočtena jako součet AUCo-t a AUC_t_oo·Pharmacokinetic parameters were obtained from non-compartmental analyzes. The maximum concentration (C _max ) and the time to reach it (T _max ) were determined by assessing the concentration-time profile of concentration for each rat. The area under the concentration-time curve (AUC) from time 0 to the end of the measurement (AUC () - t) was calculated by the linear trapezoidal projection method. The residual area under the end of the curve (AUCq.qq) was determined as the ratio of the last observed concentration (C) to the first order rate constant describing the terminal elimination phase of the concentration profile (λ _ζ ). The rate constant λ _ζ was determined from the log-linear regression of the concentration-time data (ie the last 3 to 5 data according to the analyzed profile). The total area (AUC ^ QQ) was calculated as the sum of AUC t and AUC _t · _oo

Výsledky pro každý přípravek byly porovnány s výsledky získanými pro SO a jsou znázorněny na obr. 1-3. Výsledky ukazují, že většina přípravků vede k vyšší biologické dostupnosti cyklosporinů proti srovnávacímu SANDIMMUNE Oral Solution (SO), jak naznačují vyšší hodnoty AUC u předkládaných přípravků.The results for each formulation were compared to those obtained for SO and are shown in Figures 1-3. The results show that most preparations lead to higher bioavailability of cyclosporins over the comparative SANDIMMUNE Oral Solution (SO), as indicated by higher AUC values for the present preparations.

3. Studie biologické dostupnosti u přípravků 35, 43-46 a 48-52 u lidí3. Bioavailability studies for formulations 35, 43-46 and 48-52 in humans

Testování bylo provedeno na skupině 48 zdravých mužů o stáří 19 až 55 let s hmotností lišící se maximálně o 20 % od ideální váhy. Byly provedeny studie s jednou dávkou, bez příjmu potravy, náhodné, dvojitěTesting was performed on a group of 48 healthy men aged 19 to 55 years with a weight differing by a maximum of 20% from the ideal weight. Single-dose, non-food, random, double-dose studies were conducted

- 22«« 9999 »· ·* ** *· « « 9 9 9 9 9 9 9 9- 22 «« 9999 »· · * * * *« «9 9 9 9 9 9 9 9

999 · · ··· · · · · • · · · · ft · · ··* ···999 · ··· · · · · · · · · ·

9 9 9 9 9 ft · ·*·< ftft* ft· ft* 4« ·· slepé a trojitě zkřížené. 48 mužů bylo náhodně rozděleno do 6 skupin po9 9 9 9 9 ft · · * · <ftft * ft · ft * 4 «·· blind and triple crossed. 48 men were randomly divided into 6 groups of

8. Každá skupina dostala jednu 300 mg dávku cyklosporinu z výše uvedených přípravků, nebo SANDIMMUNE Oral Solution (SO), při třech různých příležitostech, vždy po sedmidenní přestávce.8. Each group received one 300 mg dose of ciclosporin from the above, or SANDIMMUNE Oral Solution (SO), on three different occasions, after a seven-day break.

Testovaní jedinci byly požádáni, aby 10 h před a 4 h po podání preparátu nejedli. Pít vodu mohli dle chuti, vyjma 1 h před a 2 h po podání. Před podáním byly odebrány 15 ml krevní vzorky. Pro podání byly připraveny následující dávky: 3 ml alikvotu přípravku (300 mg) bylo smícháno s 200 ml ředidla a podáno perorálně. Byly odebírány 10 ml vzorky krve v čase t = 0, 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 20 a 24 h. Po skončení pokusu byl též odebrán 15 ml krevní vzorek.Test subjects were asked not to eat 10 h before and 4 h after administration. They could drink water to taste except 1 hour before and 2 hours after administration. 15 ml blood samples were taken prior to administration. The following doses were prepared for administration: 3 ml aliquots of the preparation (300 mg) were mixed with 200 ml diluent and administered orally. 10 ml blood samples were taken at time t = 0, 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 20 and 24 h. ml blood sample.

Koncentrace cyklosporinu A v celkové krvi byla stanovena TDx (Abbott Diagnostics, N. Chicago, IL) dle pokynů výrobce.Cyclosporin A concentration in total blood was determined by TDx (Abbott Diagnostics, N. Chicago, IL) according to the manufacturer's instructions.

Non-kompartmentní farmakokinetická analýza byla provedena standardním postupem. Z dat časového průběhu koncentrace byla stanovena maximální koncentrace (C_max) a doba jejího dosažení (T_max). Plocha pod křivkou závislosti koncentrace na čase (AUC) byla vypočtena metodou lineární lichoběžníkové projekce k poslednímu bodu koncentrace na hranici citlivosti (25 ng/ml) a extrapolována k nekonečnu. Pozorované hodnoty C_max, T_max a AUC byly zprůměrovány. Průměrné hodnoty pro každý přípravek jsou uvedeny v obr. 4-6. Výsledky ukazují, že pro každý testovaný přípravek bylo dosaženo C_max dvakrát rychleji, než pro srovnávací SANDIMMUNE (SO). Pozorovaná AUC u testovaných přípravků minimálně o 2000 ng h/ml vyšší než u SANDIMMUNE (SO) za stejných podmínek. Z uvedeného vyplývá, že přípravky 35, 43-46 a 48-52 poskytují lepší biologickou dostupnost než SANDIMMUNE Oral Solution (SO).Non-compartmental pharmacokinetic analysis was performed using standard procedures. The maximum concentration (C _max ) and the time to reach it (T _max ) were determined from the concentration time course data. The area under the concentration-time curve (AUC) was calculated by the linear trapezoidal projection to the last concentration point at the sensitivity limit (25 ng / ml) and extrapolated to infinity. The observed C _max , T _max and AUC values were averaged. Mean values for each formulation are shown in Figure 4-6. The results show that for each test preparation C _max was achieved twice as fast as for the comparative SANDIMMUNE (SO). The observed AUC of the test products was at least 2000 ng h / ml higher than that of SANDIMMUNE (SO) under the same conditions. It follows that formulations 35, 43-46 and 48-52 provide better bioavailability than SANDIMMUNE Oral Solution (SO).

·♦ ·««« *· »* ·· «4· ♦ · «4 4 4 4 4 4

9 9 9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9

999 9 9 999 9 9 9 9999 9 9 999 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 ··· ···9 9 9 9 9 9 9 ··· ···

9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9

9·99 999 99 99 99 999 99 99 99 99 99

- 234. Fyzikální charakteristiky kapalných přípravků 35 a 44 v nízkých teplotách.Physical characteristics of liquid formulations 35 and 44 at low temperatures.

Kapalné přípravky cyklosporinu 35 a 44 a srovnávací NEORAL Oral Solution byly skladovány v různých teplotách a stanoveny jejich fyzikální vlastnosti. Konkrétně kapalné přípravky Cyklosporinu A 35 a 44 a NEORAL Oral Solution byly skladovány přes noc při teplotách 10 °C a při 2 až 8 °C. přípravek 44 a NEORAL ztuhly, přípravek 35 nikoliv, pouze došlo ke zvýšení viskozity. Vychlazený přípravek 35 nejevil žádné známky precipitace cyklosporinu. Po vyjmutí přípravků do prostředí o laboratorní teplotě roztál přípravek 44 dříve než srovnávací NEORAL Oral Solution.The liquid preparations of cyclosporin 35 and 44 and the comparative NEORAL Oral Solution were stored at different temperatures and their physical properties determined. In particular, the liquid formulations of Cyclosporin A 35 and 44 and NEORAL Oral Solution were stored overnight at 10 ° C and 2 to 8 ° C. formulation 44 and NEORAL solidified, formulation 35 not, only viscosity increased. Chilled formulation 35 showed no signs of cyclosporine precipitation. After removal of the formulations into the ambient temperature environment, formulation 44 thawed earlier than the comparative NEORAL Oral Solution.

Při sladování při teplotě 2 až 8 °C NEORAL Oral Solution ztuhl do pasty, přípravky 35 a 44 zůstaly ve formě viskózních kapalných přípravků a nevykazovaly žádné známky precipitace cyklosporinu A.During malting at 2 to 8 ° C, NEORAL Oral Solution solidified into a paste, preparations 35 and 44 remained in the form of viscous liquid preparations and showed no signs of cyclosporin A precipitation.

Z těchto výsledků a úvah je zřejmé, že nové cyklosporinové přípravky poskytují vysokou biologickou dostupnost. Přes vysokou koncentraci cyklosporinu jsou stabilní při skladování za nízkých teplot v mrazničkách. Předkládané přípravky lze podávat ve formě kapslí, včetně tvrdých kapslí, poskytujících jednoduché skladování a používání.From these results and considerations, it is apparent that the novel cyclosporin formulations provide high bioavailability. Despite the high concentration of cyclosporin, they are stable when stored at low temperatures in freezers. The present compositions may be administered in the form of capsules, including hard capsules, for ease of storage and use.

Všechny publikace a patentové přihlášky citované v tomto popise jsou uvedeny v odkazech.All publications and patent applications cited in this specification are incorporated by reference.

Ačkoliv byl kvůli jasnosti a pochopení předkládaný vynález podrobněji ilustrován na příkladech, je odborníkovi v oboru zřejmé, že v rámci uvedených poznatků lze provádět určité změny či modifikace, aniž by výsledek přesáhl ideu nebo rozsah patentových nároků.Although the present invention has been illustrated in more detail by way of example for clarity and understanding, it will be apparent to those skilled in the art that certain changes or modifications may be made within the scope of the present disclosure without departing from the spirit or scope of the claims.

·· 9999 ·· ·· >· *9 · 9 · 9 9 9999·· 9999 ·· ··> · * 9 · 9

999 9 9 999 9 9 9 9999 9 9 999 9 9 9 9

999 99 99 999 999999 99 99 999 999

99999 9 999999 9 9

9999 9·· 99 99 99 999900 9 ·· 99 99 99 99

-24Průmyslová využitelnost-24Industrial applicability

Vynález přináší farmaceuticky využitelné perorální přípravky cyklosporinu a způsoby jejich použití v imunosupresivní terapii. Díky vhodným složkám se předkládané přípravky vyznačují vysokou stabilitou a biologickou dostupností cyklosporinu.The invention provides pharmaceutically useful oral cyclosporin formulations and methods for their use in immunosuppressive therapy. Due to suitable ingredients, the present compositions are characterized by high stability and bioavailability of cyclosporine.

Claims (15)

PATENTOVÉ NÁROKYPATENT CLAIMS 1. Perorální cyklosporinový přípravek, vyznačující se tím, že obsahuje:An oral cyclosporin preparation comprising: cyklosporin;cyclosporin; nejméně jedno C2-.3 alkanolové rozpouštědlo nejméně jednu neiontovou povrchově aktivní látku volenou ze skupiny zahrnující polyoxyethylenové alkoholy a monoestery mastných kyselin s ethoxylovanými €4.5 polyoly; a nejméně jeden polyglykol o molekulové hmotnosti v rozmezí 800 až 10 000 h.j.at least one C 2-3 alkanol solvent at least one nonionic surfactant selected from the group consisting of polyoxyethylene alcohols and monoesters of fatty acids with ethoxylated C 4.5 polyols; and at least one polyglycol having a molecular weight in the range of 800 to 10,000 h. 2. Přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že polyglykol zahrnuje polyethylenglykol.The composition of claim 1, wherein the polyglycol comprises polyethylene glycol. 3. Přípravek podle nároku 2, vyznačující se tím, že alkanolové rozpouštědlo tvoří 5 až 75 % obj ./obj. přípravku.A formulation according to claim 2, wherein the alkanol solvent comprises 5 to 75% v / v. preparation. 4. Přípravek podle nároku 2, vyznačující se tím, že alkanolové rozpouštědlo tvoří 10 až 25 % obj ./obj. přípravku.The composition of claim 2, wherein the alkanol solvent is 10-25% v / v. preparation. 5. Přípravek podle nároku 4, vyznačující se tím, že alkanolové rozpouštědlo je absolutní ethanol.The formulation of claim 4, wherein the alkanol solvent is absolute ethanol. - 266. Přípravek podle nároku 2, vyznačující se tím, že uvedená nejméně jedna neiontová polyoxyalkylenová povrchově aktivní látka tvoří 5 až 80 % hmotn./obj. přípravku.- 266. The composition of claim 2, wherein said at least one nonionic polyoxyalkylene surfactant is from 5 to 80% w / v. preparation. 7. Přípravek podle nároku 2, vyznačující se tím, že uvedená nejméně jedna neiontová polyoxyalkylenová povrchově aktivní látka tvoří 10 až 50 % hmotn./obj. přípravku.The composition of claim 2, wherein said at least one nonionic polyoxyalkylene surfactant is from 10 to 50% w / v. preparation. 8. Přípravek podle nároku 2, vyznačující se tí m, že uvedená nejméně jedna neiontová polyoxyalkylenová povrchově aktivní látka tvoří 20 až 75 % obj./obj. přípravku.8. The composition of claim 2, wherein said at least one nonionic polyoxyalkylene surfactant is from about 20% to about 75% v / v. preparation. 9. Přípravek podle nároku 2, vyznačující se tím, že uvedená nejméně jedna neiontová polyoxyalkylenová povrchově aktivní látka je volená ze skupiny zahrnující polyoxyethylen (20) mono sorbitan mono oleát a polyoxyethylen (4) lauryl ether.The composition of claim 2, wherein said at least one nonionic polyoxyalkylene surfactant is selected from the group consisting of polyoxyethylene (20) mono sorbitan monooleate and polyoxyethylene (4) lauryl ether. 10. Přípravek podle nároku 2, vyznačující se tím, že uvedený nejméně jeden polyethylenglykol je tvořen polyethylenglykolem o molekulové hmotnosti v rozmezí 1000 až 8000 h.j. .The composition of claim 2, wherein said at least one polyethylene glycol is a polyethylene glycol having a molecular weight in the range of 1000 to 8000 i. . 11. Přípravek podle nároku 2, vyznačující se tím, že uvedený nejméně jeden polyethylenglykol je tvořen směsí dvou různých polyethylenglykolů o různých molekulových hmotnostech.11. The composition of claim 2 wherein said at least one polyethylene glycol is a mixture of two different polyethylene glycols of different molecular weights. 12. Přípravek podle nároku 2, vyznačující se tím, že uvedený nejméně jeden polyethylenglykol tvoří 20 až 80 % hmotn./obj. přípravku.Composition according to claim 2, characterized in that said at least one polyethylene glycol constitutes 20 to 80% w / v. preparation. 13. Přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že koncentrace cyklosporinu je 100 mg/ml, absolutního ethanolu 12,5 % obj. a polyoxyethylen (20) mono sorbitan mono-oleátu 400 mg/ml.A formulation according to claim 1 wherein the concentration of cyclosporin is 100 mg / mL, absolute ethanol is 12.5% v / v, and polyoxyethylene (20) mono sorbitan monooleate 400 mg / mL. • · ··• · ·· -π-π 14. Přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, zeje adjustován ve tvrdých kapslích.14. A formulation according to claim 1, characterized in that it is adjusted in hard capsules. 15. Perorální cyklosporinový přípravek obsahující cyklosporin a farmaceuticky přijatelný nosič, vyznačující se tím, že je v podstatě bezvodý.15. An oral cyclosporin preparation comprising cyclosporin and a pharmaceutically acceptable carrier, which is substantially anhydrous. 16. Použití perorální ho cyklosporinového přípravku podle kteréhokoliv z nároků 1 až 15.Use of an oral cyclosporin preparation according to any one of claims 1 to 15.