CZ20023352A3 - Ecteinascidin mající pět spojených kruhů s 1,4-můstkem, farmaceutický prostředek, použití a způsob - Google Patents

Description

Ecteinascidin mající pět spojených kruhů s 1,4-můstkem, FARMACEUTICKÝ PROSTŘEDEK, POUŽITÍ A ZPŮSOB

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká protinádorových derivátů ecteinascidinu.

Dosavadní stav techniky

Ecteinascidiny jsou neobyčejně schopné protinádorové látky izolované z mořské sumky Ecteinascidia turbinata. Některé ecteinascidiny byly popsány v předchozích patentech a ve vědecké literatuře.

US patent č. 5 256 663 popisuje farmaceutické prostředky obsahující látky extrahované z tropického mořského bezobratlovce, Ecteinascidia turbinata, a označuje je jako ecteinascidiny a použití takových prostředků jako antibakteriálních, protivirových a/nebo protinádorových sloučenin u savců.

US patent č. 5 089 273 popisuje nové látky extrahované z tropického mořského bezobratlovce, Ecteinascidia turbinata, a označuje je jako ecteinascidiny 729, 743, 745, 759A, 759B a 770. Tyto sloučeniny jsou použitelné jako antibakteriální a/nebo protinádorová činidla u savců.

US patent č. 5 478 932 popisuje ecteinascidiny izolované z karibské sumky Ecteinascidia turbinata, které poskytují in vivo ochranu proti P388 lymfomu, B16 melanomu, M5076 vaječníkovému zhoubnému nádoru, Lewisově rakovině plic a štěpům z cizí tkáně LX-1 lidské plíce a MX-1 prsní žlázy.

US patent č. 5 654 426 popisuje několik ecteinascidinů izolovaných z karibské sumky Ecteinascidia turbinata, které poskytují in vivo ochranu proti P388 lymfomu, B16 melanomu, M5076 vaječníkovému zhoubnému nádoru, Lewisově rakovině plic a štěpům zcizí tkáně LX-1 lidské plíce a MX-1 prsní žlázy.

US patent č. 5 721 362 popisuje syntetický proces pro výrobu sloučenin ecteinascidinu a jim podobných struktur.

WO 00/69862, ze kterého si předkládaný vynález nárokuje prvenství, popisuje syntézy sloučenin ecteinascidinu z kyanosafiraktinu B.

Zvídavý čtenář je odkázán na: Corey, E. J., J. Am. Chem. Soc., 1996, 118 pp.9202 - 9203; Rinehart, et al., Journal of National Products, 1990, “Bioactive Compounds from Aquatic and • · o ··· !.···· · ··· · · ζ J · · .:.. ..· ............

Terrestrial Sources“, vol. 53, pp. 771 - 792; Rinehart et al., Pure and Appl. Chem., 1990, “Biologically active natural products“, vol. 62, pp. 1277 - 1280; Rinehart et al., J. Org. Chem., 1990, “Ecteinascidins 729, 743, 745, 759A, 759B a 770: Potent Antitumour Agents fřom the Caribbean Tunicate Ecteinascidia turbinata“, vol., 55, pp. 4512 - 4515; Wright et al., J Org. Chem., 1990 “Antitumour Tetrahydroisoquinoline Alkaloids fřom the Colonial Ascidian Ecteinascidia turbinata“, vol. 55, pp. 4508 - 4512; Sakai et al., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1992, “Additional antitumour ecteinascidins from a Caribbean tunicate: Crystal structures and activities in vivo“, vol. 89, 11456 - 11460; Science 1994, “Chemical Prospectors Scour the Seas for Promising Drugs“, vol. 266, pp. 1324; Koenig, K. E., “Asymmetric Synthesis“, ed. Morrison, Academie Press, lne., Orlando, FL, vol. 5, 1985, p. 71; Bartoň, et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans., 1, 1982, “Synthesis and Properties of a Series of Sterically Hindered Guanidine Bases“, pp. 2085; Fukuyama et al., J. Am. Chem. Soc., 1982, “Stereocontrolled Total Synthesis of (+) - Saframycin B“, vol. 104, pp. 4957; Fukuyama et al., J. Am. Chem. Soc., 1990, “Total Synthesis of (+) - Saframycin A“, vol. 112, p. 3712; Saito, et al., J. Org. Chem., 1989, “Synthesis of Saframycins“, vol. 54, 5391; Still, et al., J. Org, Chem., 1978, “Rapid Chromatographic Technique for Preparative Separations with Moderate Resolution“, vol. 43, p. 2923; Kofron, W. G.; Baclawski, L. M., J. Org. Chem., 1976, vol. 41, 1879; Guan et al., J. Biomolec. Struc. & Dynam., vol. 10 pp. 793 - 817 (1993); Shamma et al., “Carbon-13 NMR Shift Assignments of Amines and Alkaloids“, p. 206 (1979); Lown et al., Biochemistry, 21, 419 - 428 (1982); Zmijewski et al., Chem. Biol. Interactions, 52, 361 - 375 (1985); Ito, CRC CRIT. Rev. Anal. Chem., 17, 65 - 143 (1986); Rinehart et al., “Topics in Pharmaceutical Sciences 1989“ pp. 613 - 626, D. D. Breimer, D. J. A. Cromwelin, K. K: Midha, Eds., Amsterdam Medical Press B. V., Noordwijk, The Netherlands (1989); Rinehart et al., “Biological Mass Spectometry“, 233 - 258 eds. Burlingame et al., Elsevier Amsterdam (1990); Guan et al., Jour. Biomolec. Struct. & Dynam., vol. 10 pp. 793 - 817 (1993); Nakagawa et al., J. Amer. Chem. Soc., 111: 2721 - 2722 (1989); Lichter et al., “Food and Drugs from the Sea Proceedings“ (1972), Marině Technology Society, Washington, D. C. 1973, 117 - 127; Sakai et al., J. Amer. Chem. Soc. 1996, 119, 9017; Garcia-Rocha et al., Brit. J. Cancer, 1996, 73: 875 - 883; and Pommier et al., Biochemistry, 1996, 35: 13303 - 13309; Rinehart, K. L., Med. Res. Rev., 2000, 20, 1 - 27 and I. Manzanares et al., Org. Lett., 2000, 2(16), 2545 - 2548.

Nejslibnější ecteinascidin je ecteinascidin 743, který je ve stadiu klinických pokusů pro léčení nádorů. Et 743 tvoří komplex tris(tetrahydroisochinolinfenolové) struktury následujícího obecného vzorce I:

• ·

V současné době je připravován izolací z extraktů mořské sumky Ecteinascidia turbinata. Výtěžek je nízký a hledají se alternativní procesy přípravy.

Ecteinascidiny zahrnují systém pěti spojených kruhů (A) až (E), jak je ukázáno na následující struktuře obecného vzorce XIV:

V ecteinascidinu 743 má 1,4-můstek následující strukturu obecného vzorce IV:

Další známé ecteinascidiny zahrnují sloučeniny s různým můstkovým cyklickým kruhovým systémem, jako se vyskytují v ecteinascidinu 722 a 736, kde má můstek strukturu obecného vzorce V:

• · *·

v ecteinascidinech 583 a 597, má můstek strukturu obecného vzorce VI:

a v ecteinascidinu 594 a 596 má můstek strukturu obecného vzorce VII:

Úplná struktura pro tyto a další podobné sloučeniny je popsána v J. Am. Chem. Soc. (1996) 118, 9017-9023.

Jsou známé další sloučeniny s pěti spojenými kruhovými systémy. Všeobecně jim chybí můstkový kruhový systém, který je přítomen v ecteinascidinech. Zahrnují bis(tetrahydroisochinolinchinon)-protinádorové-antimikrobiální antibiotické safraciny a safřamyciny a mořské přírodní produkty typu renieramicinů a xestomycinů izolované z pěstovaných mikroorganismů nebo hub. Všechny mají všeobecnou dimerickou tetrahydroisochinolinovou uhlíkatou kostru. Tyto sloučeniny mohou být klasifikovány do 4 typů, typ I až IV s ohledem na způsob oxidace aromatických kruhů.

Typ I, dimemí isochinolinchinony, je systém obecného vzorce VIII, který se nejobvykleji vyskytuje v této třídě sloučenin, viz následující tabulka I.

Tabulka I

Struktura typu I antibiotika saframycinu

Substituenty

Sloučenina	R14*	R,4b	R21	R25a	R25b	R25c
saframycin A	H	H	CN	0	0	ch3
saframycin B	H	H	H	0	0	ch3
saframycin C	H	och3	H	0	0	ch3
saframycin G	H	OH	CN	0	0	ch3
saframycin H	H	H	CN	OH	CH2COCH3	ch3
saframycin S	H	H	OH	0	0	ch3
saframycin Y3	H	H	CN	nh2	H	ch3
saframycin Ydi	H	H	CN	nh2	H	C2H5
saframycin Adj	H	H	CN	0	0	c2H5
saframycin Yd2	H	H	CN	nh2	H	H
saframycin Y2b	H	Q*	CN	nh2	H	ch3
saframycin Y2W	H	Q*	CN	nh2	H	C2Hj
saframycin AH2	H	H	CN	H“	OH“	ch3
saframycin AH2Ac	H	H	CN	H	OAc	CH3
saframycin AHi	H	H	CN	OH“	H“	ch3
saframycin AHi Ac	H	H	CN	OAc	H	ch3
saframycin AR3	H	H	H	H	OH	ch3

^a přiřazení jsou zaměnitelná ^b kde skupina Q je obecného vzorce:

Typ I aromatických kruhů se nachází u saframycinů A, B a C; G a H; a S izolovaných ze Streptomyces lavendulae jako minoritní komponenty. Kyano derivát saframycinů A, nazývaný kyanochinonamin, je známý z japonského patentu JP-A2 59/225189 a 60/084288. Saframyciny Y₃, Yd_b Adi a Yd₂ byly produkovány S. lavendulae přímou biosyntézou s vhodným doplněním kultivačního média. Diméiy saframycinů Y₂b a Y_2b.d tvořené spojením dusíku na C-25 jedné sloučeniny a C-14 další sloučeniny byly také produkovány v doplněném kultivačním médiu S. lavendulae. Saframycin ARi (=AH₂), vzniklý mikrobiální redukcí saframycinů A na C-25 pomocí Rhodococcus amidophilus, byl také připraven nestereoselektivní chemickou redukcí saframycinů A borohydridem sodným jako směs epimerů 1:1, po čemž následuje chromatografická separace (druhý izomer AHi je méně polární). Stejnou mikrobiální konverzí byl produkován další redukční produkt saframycinů AR₃, 21-dekyano-25-dihydro-saframycin A, (=25-dihydrosaframycin B). Další možností mikrobiální konverze saframycinů A je použití druhu Nocardia produkujícího saframycin B a dále redukce pomocí druhů Mycobacterium, které produkují saframycin AH^!Ac. Pro biologické studie byly také chemicky připraveny 25-O-acetáty saframycinů AH₂ a ΑΗμ

Sloučeniny typu I obecného vzorce X byly také izolovány z mořských hub. viz tabulka Π.

• ·

Tabulka II

Struktury sloučenin typu I z mořských hub

renieramycin A renieramycin B renieramycin C renieramycin D renieramycin E renieramycin F xestomycin

OH

OC2H5

OH

OC₂H₅

H

OCH₃ och₃

H

H

O

O

H

H

H

H

H

O

O

OH

OH

H

-C(CH₃)=CH-CH₃

-C(CH₃)=CH-CH₃

-C(CHj)=CH-CH3

-C(CH₃)CH-CH₃

-C(CH₃)=CH-CH₃

-C(CH₃)=CH-CH₃

-CHj

Renieramyciny A až D byly izolovány z antimikrobiálního extraktu hub, druhu Reniera sebraných v Mexiku, spolu s biogeneticky odpovídajícím monomemím isochinolinovým renieronem a podobnými sloučeninami. Struktuře renieramycinu A byla původně přiřazena opačná stereochemie na C-3, C-ll a C-13, avšak pečlivá analýza ’Η NMR dat pro nové podobné sloučeniny renieramycinu E a F izolovaných ze stejné houby sebrané uPalau odhalila, že spojení kruhů u renieramycinu bylo identické se saframyciny. Tento výsledek vedl k závěru, že dříve přiřazená stereochemie renieramycinů A až D musí být ta samá, jako u saframycinů.

Xestomycin byl nalezen v houbě, druhu Xestospongia sebrané z vod u Sri Lanky.

Sloučeniny typu II obecného vzorce XI s redukovaným hydrochinonovým kruhem zahrnují saframyciny D a F, izolované z S. lavendulae, a saframyciny Mx-1 a Mx-2, izolované z Myxococcus xanthus. Viz tabulka ΙΠ.

* ·

Tabulka ΠΙ Sloučeniny typu II

Sloučenina	R14·	R14b	R2’	Substituenty R251	R2Sb	R25c
saframycin D	0	0	H	0	0	ch3
saframycin F	O	0	CN	O	O	ch3
saframycin Mx-1	H	och3	OH	H	ch3	nh2
saframycin Mx-2	H	och3	H	H	ch3	nh2

Kostra typu III se nachází v antibiotických safřacinech A a B, izolovaných z pěstované Pseudomonas fluorescens. Tato antibiotika obecného vzorce ΧΠ se skládají z tetrahydroisochinolin-chinonové podjednotky a tetrahydroisochinolinfenolové podjednotky.

ŇHj kde R²¹ je -H v safřacinu A a R²¹ je -OH v safracinu B.

Saframycin R, sloučenina klasifikovaná pouze jako kostra typu IV, byl také izolován ze S. lavendulae. Tato sloučenina obecného vzorce ΧΙΠ se skládá z hydrochinonového kruhu s glykolickým esterovým postranním řetězcem na jednom z fenolických kyslíků a je použitelná jako proléčivo saframycinu A, z důvodů její mírné toxicity.

Tyto známé sloučeniny zahrnují systém pěti spojených kruhů obecného vzorce XIV:

V tomto textu nazýváme tento systém kruhů jako systém pěti spojených kruhů ecteinascidinu, ačkoli bude popsáno, že kruhy A a E jsou fenolické v ecteinascidinech a v některých dalších sloučeninách, zatímco v ostatních sloučeninách, jmenovitě v safřamycinech, kruhy A a E jsou chinolické. Ve sloučeninách jsou kruhy B a D tetrahydro, zatímco kruh Cje perhydro.

Podstata vynalezu

Předkládaný vynález poskytuje sloučeniny mající systém pěti spojených kruhů ecteinascidinu a týká se ecteinascidinů 583 1,4-můstek strukturu obecného vzorce Via:

597. V ecteinascidinech 583 a 597 má

H NH₂

Vlb

Via • ·

Některé sloučeniny tohoto vynálezu mají systém pěti spojených kruhů ecteinascidinu a můstek, který má strukturu obecného vzorce Via s výhodně substituovanou skupinou -NH₂. Tyto sloučeniny mohou být acylovány na -CHNH₂- skupině přítomné v obecném vzorci VI. Další odvozené sloučeniny tohoto vynálezu zahrnují ty, kde tato -CHNH₂- skupina je nahrazena skupinou -CHNHXi nebo -C(X₂)₂-, kde X] nebo X₂ jsou definovány níže. Zbylé substituenty na systému pěti spojených kruhů ecteinascidinu mohou být stejné jako v přírodních sloučeninách, konkrétně přírodních ecteinascidinech, nebo jiné.

Další sloučeniny tohoto vynálezu mají systém pěti spojených kruhů ecteinascidinu a můstek, který má strukturu obecného vzorce VIb, kde -NH₂ skupina na můstku byla nahrazena OH skupinou, která může být výhodně substituována. Tyto sloučeniny mohou být acylovány na -CHOH- skupině přítomné v obecném vzorci VIb. Další odvozené sloučeniny tohoto vynálezu zahrnují ty, kde tato -CHOH- skupina je nahrazena skupinou -CHOXi nebo -C(X₂)₂-, kde Xi nebo X₂ jsou definovány níže. Zbylé substituenty na systému pěti spojených kruhů ecteinascidinu mohou být stejné jako v přírodních sloučeninách, konkrétně přírodních ecteinascidinech, nebo jiné.

Ve sloučeninách tohoto vynálezu může být stereochemie můstkového atomu uhlíku nesoucího -OH nebo -NH₂ skupinu (nebo jejich substituované deriváty) stejná jako v přírodních sloučeninách, konkrétně přírodních ecteinascidinech, nebo jiná.

Ve sloučeninách tohoto vynálezu může být systém pěti spojených kruhů A až E obecného vzorce XIV jako v ecteinascidinech nebo může být jako v jiných podobných sloučeninách. Z tohoto důvodu mohou být kruhy A a E fenolické nebo chinolické; kruhy B a D jsou tetrahydro a kruh Cje perhydro.

Sloučeniny tohoto vynálezu exhibitují protinádorovou aktivitu a vynález poskytuje farmaceutické prostředky sloučenin spolu se způsoby pro přípravu prostředků a způsoby léčení používající sloučeniny nebo prostředky.

Vynález také poskytuje nové polosyntetické a syntetické způsoby výroby sloučenin tohoto vynálezu.

Systém pěti spojených kruhů A až E obecného vzorce XIV je vhodněji jako v ecteinascidinech a je vhodněji substituován v pozicích jiných než 1,4 v přírodě se vyskytujícími substituenty.

V jednom aspektu poskytuje předkládaný vynález nové sloučeniny obecného vzorce:

·· ··

• ·

• · · «· ···· kde:

skupiny substituentů definované Ri, R₂ jsou nezávisle na sobě vybrány zH, C(=O)R', substituovaného nebo nesubstituováného Cl až Cl8 alkylu, substituovaného nebo nesubstituovaného C2 až Cl8 alkenylu, substituovaného nebo nesubstituovaného C2 až Cl8 alkynylu, substituovaného nebo nesubstituovaného arylu; každá z R' skupin je nezávisle na sobě vybrána ze skupiny obsahující H, OH, NO₂, SH, CN, halogen, =0, C(=0)H, C(=0)CH3, C0₂H, substituovaný nebo nesubstituo váný Cl až Cl 8 alkyl, substituovaný nebo nesubstituovahý C2 až Cl8 alkenyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až Cl8 alkynyl, substituovaný nebo nesubstituovaný aryl;

X₂ je OXi nebo N(Xi)₂, kde každý Xi je H, C(-0)R', substituovaný nebo nesubstituovaný Cl až 08 alkyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až Cl8 alkenyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až Cl8 alkynyl, substituovaný nebo nesubstituovaný aryl nebo dvě Xi skupiny, které mohou společně tvořit cyklický substituent na atomu dusíku;

X3 je vybrán z ORi, CN, (=0) nebo H;

X4 je -H nebo Cl až Cl8 alkyl; a

X₅ je vybrán z H, OH nebo ORi (kde ORi je definován výše).

V podobném aspektu vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce:

kde skupiny substituentů definované Rj, R₂, X3, X4 a X₅ jsou definovány výše; a X] je nezávisle vybrán z H, C(=O)R', substituovaného nebo nesubstituovaného Cl až Cl8 alkylu, substituovaného nebo nesubstituovaného C2 až Cl 8 alkenylu, substituovaného nebo • * • *

• · ·· ·* . Z _a · « » * < · * 1 ,* • · · · · · a · ♦ · ♦ ··· ··· ·« ··*· nesubstituovaného C2 až Cl8 alkynylu, substituovaného nebo nesubstituovaného arylu nebo ze dvou X] skupin, které mohou společně tvořit cyklický substituent na atomu dusíku.

Alkyl skupiny mají vhodněji od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku a nejvhodněji 1, 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku. Methyl, ethyl, propyl včetně isopropylu jsou konkrétní vhodné alkylové skupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu. Jak je použito v tomto vynálezu, termín alkyl, pokud není jinak specifikováno, označuje jak cyklickou, tak acyklickou skupinu, ačkoli cyklická skupina bude obsahovat alespoň tříčlenný uhlíkový kruh. Alkylové skupiny mohou mít přímý řetězec, nebo rozvětvený.

Vhodné alkenylové a alkynylové skupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu mají jednu nebo více nenasycených vazeb a od 2 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 2 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 2 do 6 atomů uhlíku a nejvhodněji 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku. Termín alkenyl a alkynyl, jak je použit v tomto vynálezu, označuje jak cyklickou, tak acyklickou skupinu, ačkoli přímé nebo větvené necyklické skupiny jsou všeobecně více vhodné.

Vhodné alkoxyskupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují skupiny mající jeden nebo více atomů kyslíku a od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku a nej vhodněji 1, 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku.

Vhodné alkylthioskupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu mají jednu nebo více thioéterových vazeb a od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku. Konkrétně, alkylthioskupiny mající 1, 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku, jsou vhodné.

Vhodné alkylsulfínylskupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují takové skupiny, které mají jednu nebo více sulfoxidových (SO) skupin a od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku. Konkrétně, alkylsulfínylskupiny mající 1, 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku, jsou vhodné.

Vhodné alkylsulfonylskupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují takové skupiny, které mají jednu nebo více sulfonylových (SO2) skupin a od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku. Konkrétně, alkylsulfonylskupiny mající 1, 2, 3 nebo 4 atomy uhlíku, jsou vhodné.

Vhodné aminoalkylskupiny zahrnují takové skupiny, které mají jednu nebo více primárních, sekundárních a/nebo terciárních aminoskupin a od 1 do 12 atomů uhlíku, více vhodněji od 1 do 8 atomů uhlíku, stále ještě vhodněji od 1 do 6 atomů uhlíku a nejvhodněji 1, • · • ♦ · • · · ··· ·

2, 3 nebo 4 atomy uhlíku. Sekundární a terciární aminoskupiny jsou všeobecně více vhodné než primární aminoskupiny.

Vhodné heteroaromatické skupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují jeden, dva nebo tři heteroatomy vybrané z N, O nebo S atomů a zahrnují například kumarinyl, včetně 8-kumarinylu, chinolinyl včetně 8-chinolinylu, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidyl, furyl, pyrrolyl, thienyl, thiazolyl, oxazolyl, imidazolyl, indolyl, benzofuranyl a benzothiazolyl. Vhodné heteroalicyklické skupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují jeden, dva nebo tři heteroatomy vybrané z N, O nebo S atomů a zahrnují například tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl, morfolinyl a pyrrolidinyl skupiny.

Vhodné karbocyklické arylové skupiny ve sloučeninách předkládaného vynálezu zahrnují jednoduché a vícenásobné kruhové sloučeniny, včetně vícenásobných kruhových sloučenin, které obsahují separátní a/nebo spojené arylové skupiny. Typické karbocyklické arylové skupiny obsahující 1 až 3 separované nebo spojené kruhy a od 6 do 18 atomů uhlíku. Konkrétně vhodné karbocyklické skupiny zahrnují fenyl včetně substituovaného fenylu, jako je 2-substituovaný fenyl, 3-substituovaný fenyl, 2,3-substituovaný fenyl, 2,5-substituovaný fenyl, 2,3,5-susbtituovaný a 2,4,5-substituovaný fenyl včetně těch sloučenin, kde jeden nebo více fenylových substituentů je elektron-odčerpávající skupina, jako je halogen, kyano, nitro, alkanoyl, sulfínyl, sulfonyl a podobně; naftyl včetně 1-naftylu a 2-naftylu; bifenyl;fenathryl; a anthracyl.

Skupiny substituentů definované jako Ri, R2, Xj, X4 a X5 jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny obsahující H, OH, OR', SH, SR', SOR', SO2R', NO2, NH₂, NHR', N(R')₂, NHC(O)R', CN, halogen, =0, substituovaný nebo nesubstituovaný Cl až Cl8 alkyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až Cl8 alkenyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až Cl8 alkynyl, substituovaný nebo nesubstituovaný aryl, substituovaná nebo nesubstituovaná heteroaromatická skupina.

Odkazy v tomto vynálezu na skupiny R' ve sloučeninách předkládaného vynálezu označují specifickou část, která může být substituována v jedné nebo více dostupných pozicích jednou nebo více vhodnými skupinami, například halogenem, jako je fluor, chlor, brom a jod; kyano; hydroxyl; nitro; azido; alkanoyl, jako je Cl až C6 alkanoyl skupina, jako je acyl a podobně; karboxyamido; alkyl skupiny včetně těch skupin, které mají 1 až 12 atomů uhlíku nebo od 1 do 6 atomů uhlíku a více vhodněji 1 až 3 atomy uhlíku; alkenyl a alkynyl skupiny včetně těch skupin, které mají jednu nebo více nenasycených vazeb a od 2 do 12 atomů uhlíku nebo od 2 do 6 atomů uhlíku; alkoxyskupiny mající jeden nebo více atomů kyslíku a od 1 do 12 atomů uhlíku nebo 1 až 6 atomů uhlíku; aryloxy, jako je fenoxy; alkylthioskupiny včetně těch • 999 *· * ·· • · · • · · 9 · · * * ·« ·»·· skupin, které mají jednu nebo více thioéterových vazeb a od 1 do 12 atomů uhlíku nebo od 1 do 6 atomů uhlíku; alkylsulfínylskupiny včetně těch skupin, které mají jednu nebo více sulfinylových skupin a od 1 do 12 atomů uhlíku nebo od 1 do 6 atomů uhlíku; alkylsulfonylskupiny včetně těch skupin, které mají jednu nebo více sulfonylových skupin a od 1 do 12 atomů uhlíku nebo od 1 do 6 atomů uhlíku; aminoalkyl skupiny, jako jsou skupiny mající jeden nebo více atomů dusíku a od 1 do 12 atomů uhlíku nebo od 1 do 6 atomů uhlíku; karbocyklický aryl mající 6 nebo více atomů uhlíku, konkrétně fenyl (například R bude substituovaná nebo nesubstituovaná bifenylová skupina); a aralkyl, jako je benzyl.

Ri je vhodněji C(=O)R', kde R' je vhodněji H nebo substituovaný nebo nesubstituovaný alkyl, více vhodněji acetyl.

R2 je vhodněji H nebo methyl, více vhodněji methyl.

Typicky jeden z Xi nebo X₂ je často atom vodíku. X₂, nebo kde je to možné tak Xi, je vhodněji H; -NHCOalkyl, konkrétně alkyl do 16 atomů uhlíku, jako je 1, 4, 7, 15 atomů uhlíku dlouhý alkyl a může být substituován halogenem, výhodně úplně substituován halogeny; -NHalkylCOOH, konkrétně alkyl do 4 atomů uhlíku; chráněná skupina NHCOC(NH₂)CH₂SH, kde NH₂ a/neboSH jsou chráněné; -NHbiotin; -NHaryl; -NH(aa)_y, kde aa je acyl aminokyseliny a y je vhodněji 1, 2 nebo 3 a kde některá NH2 skupina je výhodně substituována nebo chráněna, jako je amidová terminální skupina nebo Boc skupina; ftaloimido skupina tvořená -NX₂-; alkyl mající vhodněji 1 až 4 atomy uhlíku; arylalkenyl, obzvláště skořicyl, který může být substituován jako 3-trifluormethyl;

Vhodné příklady skupiny X₂ zahrnují NHAc, NHCO(CH2)2COOH, NHCOCH(NHAlloc)CH₂SFm, NHCO(CH₂)i₄CH₃, NHTFA, NHCO(CH₂)₂CH3,

NHCOCH₂CH(CH₃)₂, NHCO(CH₂)6CH₃, NHBiotin, NHBz, NHCOCinn, NHCO-(p-F₃C)Cinn, NHCOVal-NH₂, NHCOVal-N-Ac, NHCOVal-N-COCinn, NHCOVal-Ala-NH₂, NHCOVal-Ala-N-Ac, NHCOAla-NH₂, OH, OAc, NHAc, NHCO(CH₂)₂COOH, NHCOCH(NHAlloc)CH₂SFm, NHCOCH(NH₂)CH₂SFm, NPht, NH-(m-CO₂Me)-Bz, NHCO(CH₂)i₄CH₃, NMe₂, NHTFA, NHCO(CH₂)₂CH₃, NHCOCH₂CH(CH₃)₂, NHCO(CH₂)₆CH₃, NHAlloc, NHTroc, NHBiotin, NHBz, NHCOCinn, NHCO-(p-F₃C)-Cinn, NHCOVal-NH₂, NHCOVal-N-Ac, NHCOVal-N-COCinn, NHCOVal-Ala-NH₂, NHCOValAla-N-Ac, NHCOVal-Ala-N-COCinn, NHCOAla-NH₂, NHCOAla-N-Ac, NHCOAla-NCOCinn, OH, OAc, NHAc, NHCO(CH₂)₂COOH, NHCOCH(NHAlloc)CH₂SFm, NPht spolu s podobnými skupinami, kde počet atomů uhlíku je různý, neboť jsou použity různé skupiny substituentů nebojsou provedeny jiné změny tohoto druhu za vzniku podobných skupin.

X₃ je vhodněji OH nebo CN.

• 4 4 ♦ · · • ··· • · ···· ·· • * • F4

4« 4444

X4 je H nebo Me, vhodněji Me.

X5 je H nebo Cl až Cl8 alkyl, vhodněji H.

V dalším, více obecném aspektu tohoto vynálezu, jsou sloučeniny typicky obecného vzorce XVIIa:

kde

R¹ a R⁴ společně tvoří skupinu obecného vzorce Via nebo VIb:

R⁵ je -H nebo -OH;

R⁷ je -OCH3 a R⁸ je -OH nebo R⁷ a R⁸ společně tvoří skupinu -O-CH₂-O-;

• * c ·

R^I4a a R^14b jsou -H nebo jeden je -H a druhý je -OH, -OCH₃ nebo -OCH₂CH₃ nebo R^14a a R^I4b společně tvoří ketoskupinu; a

R¹⁵je-Hnebo -OH;

R²¹ je -H, -OH nebo -CN;

a deriváty zahrnují obzvláště acylderiváty těchto látek, kde R⁵ je acetyloxy nebo jiná acyloxyskupina do 4 atomů uhlíku a včetně derivátů, kde skupina -NCH₃- na pozici 12 je nahrazena -NH- nebo -NCH₂CH₃- a deriváty, kde -NH₂ skupina ve sloučenině obecného vzorce Via a -OH skupina ve sloučenině obecného vzorce VIb jsou výhodně substituovány.

Skupina Ri SR4 může být acylována na -CHNH₂- nebo CHOH- skupině přítomné v obecných vzorcích Via a VIb. Jiné substituované sloučeniny tohoto vynálezu zahrnují takové, kde -CHNH₂ skupina Via je nahrazena skupinou -CHNHXi nebo -C(X₂)₂- nebo kde je -CHOH skupina VIb nahrazena CHOXi nebo -C(X₂)₂-, kde Xi a X₂ jsou definovány výše.

Vhodné sloučeniny jsou obecného vzorce XVIIb.

Dále, ve vhodných sloučeninách tohoto vynálezu, R⁷ a R⁸ společně tvoří skupinu -O-CH₂-O-.

Acylderiváty mohou být N-acyl nebo N-thioacyl deriváty těchto látek, stejně jako cyklické amidy. Acylskupiny mohou být například alkanoyl, haloalkanoyl, arylalkanoyl, alkenyl, heterocyklylacyl, aryl, arylaroyl, haloaroyl, nitroaroyl nebo jiné acylskupiny. Acyl skupiny mohou mít vzorec -CO-R^a, kde R^a mohou být různé skupiny, jako je alkyl, alkoxy, alkylen, arylalkyl, arylalkylen, acyl aminokyseliny nebo heterocyklyl, každý výhodně substituovaný halogenem, kyano, nitro, karboxyalkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, heterocyklyl, heterocyloxy, alkyl, amino nebo substituovaná aminoskupina. Další acylující činidla zahrnují isothiokyanáty, jako je aryl isothiokyanát, jmenovitě fenylisokyanát. Alkyl, alkoxy nebo alkylen skupiny R^a mají vhodněji 1 až 6 nebo 12 atomů uhlíku a mohou být lineární, větvené nebo cyklické. Aryl skupiny jsou typicky fenyl, bifenyl, naftyl. Heterocyklické skupiny mohou být aromatické nebo částečně nebo úplně nenasycené a vhodněji mají 4 až 8 atomů v kruhu, více vhodněji 5 až 6 atomů v kruhu s jedním nebo více heteroatomů vybraných z dusíku, síry a kyslíku.

Bez vyčerpávajícího popisu zahrnuje R^a typicky alkyl, haloalkyl, alkoxyalkyl, haloalkoxyalkyl, arylalkylen, haloalkylarylalkylen, acyl, haloacyl, arylalkyl, alkenyl a aminokyselina. Například, R^a-CO- může být acetyl, trifluoracetyl, 2,2,2-trichlorethoxykarbonyl, isovalerylkarbonyl, trans-3 -(trifluormethyl)cinnamoylkarbonyl, heptafluorbutyrylkarbonyl, dekanoylkarbonyl, trans-cinnamoylkarbonyl, butyrylkarbonyl,

-chlorpropyonylkarbonyl, cinnamoylkarbonyl, 4-methylcinnamoylkarbonyl, • · hydrocinnamoylkarbonyl nebo trans-hexenoylkarbonyl nebo alanyl, arginyl, aspartyl, asparagyl, cystyl, glutamyl, glutaminyl, glycyl, histidyl, hydroxypropyl, isoleucyl, leucyl, lysyl, methionyl, fenylalanyl, prolyl, seryl, threonyl, thyronyl, tryptofyl, tyrosyl, valyl stejně jako jiné méně běžné acyly aminokyselin, stejně jako ftalimido a jiné cyklické amidy. Další příklady mohou být nalezeny podle seznamu chránících skupin.

Sloučeniny, kde -CO-R³ je odvozeno od aminokyselin a zahrnují aminoskupinu, mohou samy tvořit acyl deriváty. Vhodné N-acyl sloučeniny zahrnují dipeptidy, které naopak mohou tvořit N-acyl deriváty.

R^14a a R^14b jsou vhodněji vodík. Vhodněji R¹⁵ je vodík. O-acyl deriváty jsou vhodněji alifatické O-acylderiváty, obzvláště acyl deriváty mající 1 až 4 atomů uhlíku a typicky Oacetyl skupinu, jmenovitě na pozici 5.

Vhodné chránící skupiny pro fenoly a hydroxyskupiny zahrnují étery a estery, jako je alkyl, alkoxyalkyl, aryloxyalkyl, alkoxyalkoxyalkyl, alkylsilylalkoxyalkyl, alkylthioalkyl, arylthioalkyl, azidoalkyl, kyanoalkyl, chloralkyl, heterocyklyl, arylacyl, haloarylacyl, cykloalkylalkyl, alkenyl, cykloalkyl, alkylarylalkyl, alkoxyarylalkyl, nitroarylalkyl, haloarylalkyl, alkylaminokarbonylarylalkyl, alkylsulfínylarylalkyl, alkylsilyl a další étery a arylacyl, arylalkyluhličitan, alifatický uhličitan, alkylsulfínylarylalkyluhličitan, alkyluhličitan, arylhaloalkyluhličitan, arylalkenyluhličitan, arylkarbamát, alkylfosfinyl, alkylfosfinthionyl, arylfosfmthionyl, arylalkylsulfonát a další estery. Takové skupiny mohou být výhodně substituované dříve zmíněnou skupinou v R¹.

Vhodné chránící skupiny pro aminy zahrnují karbamáty, amidy a další chránící skupiny, jako je alkyl, arylalkyl, sulfo- nebo halo-arylalkyl, haloalkyl, alkylsilylalkyl, arylalkyl, cykloalkylalkyl, alkylarylalkyl, heterocyklylalkyl, nitroarylalkyl, acylaminoalkyl, nitroaryldithioarylalkyl, dicykloalkylkarboxamidoalkyl, cykloalkyl, alkenyl, arylalkenyl, nitroarylalkenyl, heterocyklylalkenyl, heterocyklyl, hydroxyheterocyklyl, alkyldithio, alkoxynebo halo- nebo alkylsulfínyl arylalkyl, heterocyklylacyl a další karbamáty a alkanoyl, haloalkanoyl, arylalkanoyl, alkenoyl, heterocyklylacyl, aroyl, arylaroyl, haloaroyl, nitroaroyl a další amidy, stejně jako alkyl alkenyl, alkylsilylalkoxyalkyl, alkoxyalkyl, kyanoalkyl, heterocyklyl, alkoxyarylalkyl, cykloalkyl, nitroaryl, arylalkyl, alkoxy- nebo hydroxy-arylalkyl a mnoho dalších skupin. Takové skupiny mohou být výhodně substituovány dříve zmíněnou skupinou v R¹.

• · ·· » · · · · · • · · · · ♦ · · · «· • « · · · ·· · • ···· · · ·· · · • · · · · · · • ··· ·· ··· · · · ·· ····

Příklady takových chránících skupin jsou uvedeny níže v následujících tabulkách.

chránící skupiny pro -OH skupinu

éter	zkratka
methyl
methoxymethyl	MOM
benzyloxymethyl	BOM
methoxyethoxymethyl	MEM
2-(trimethylsilyl)ethoxymethyl	SEM
methylthiomethyl	MTM
fenylthiomethyl azidomethyl kyanomethyl 2,2-dichlor-1,1 -difluorethyl 2-chlorethyl 2-bromethyl	PTM
tetrahydropyanyl	THP
1-ethoxyethyl fenacyl 4-bromfenacyl cyklopropylmethyl alkyl propargyl isopropyl cyklohexyl t-butyl benzyl 2.6- dimethylbenzyl 4-methoxybenzyl o-nitrobenzyl 2.6- dichlorbenzyl	EE
4-methoxybenzyl o-nitrobenzyl 2,6-dichlorbenzyl	MPM ne

• · ·« ♦ ·

3,4-dichlorbenzyl

4-(dimethylamino)karbonylbenzyl

4-methylsulfinylbenzyl Msib

9-anthrylmethyl

4-pikolyl heptafluor-p-tolyl tetrafluor-4-pyridyl

trimethylsilyl	TMS
t-butyldimethylsilyl	TBDMS
t-butyldifenylsilyl	TBDPS
triisopropylsilyl	TIPS
estery arylformiát arylacetát aryllevulinát arylpivaloát arylbenzoát aryl-9-fluorkarboxylát arylmethyluhličitan 1 -adamantyluhličitan	ArOPv
t-butyluhličitan	BOC-OAr
4-methylsulfmylbenzyluhličitan	Msz-Oar
2,4-dimethylpent-3-yluhličitan aryl-2,2,2-trichlorethyluhličitan arylvinyluhličitan arylbenzyluhličitan arylkarbamát	Doc-Oar
dimethylfosfínyl	Dmp-OAr
dimethylfosfínothioyl	Mpt-OAr
difenylfosfinothioyl arylmethansulfonát aryltoluensulfonát	Dpt-Oar

• · • ·

aryí-2-formylbenzensulfonát

chránící skupiny pro -NH2 skupinu
karbamáty	zkratka
methyl
ethyl
9-fluorenylmethyl	Fmoc
9-(2-sulfo)fluorenylmethyl
9-(2,7-dibrom)fluorenylmethyl
17-tetrabenzo[a,c,g,i] fluorenylmethyl	Tbfmoc
2-chlor-3 -indenylmethyl	Climoc
benz[f]inden-3-ylmethyl	Bimoc
2,7-di-t-butyl [9-( 10,10-dioxo-10,10,10,10-	DBD-Tmoc
-tetrahydrothioxanthyl)]methyl
2,2,2-trichlorethyl	Troc
2-trimethylsilylethyl	Teoc
2-fenylethyl	hZ
1 -(1 -adamantyl)-1 -methylethyl	Adpoc
2-chlorethyl
1,1 -dimethyl-2-chlorethyl
1,1 -dimethyl-2-bromethyl
1,1 -dimethyl-2,2-dibromethyl	DB-t-BOC
1,1 -dimethyl-2,2,2-trichlorethyl	TCBOC
1 -methyl-1 -(4-bifenyl)ethyl	Bpoc
1 -(3,5-di-t-butylfenyl)-1 -1 -methylethyl	t-Burmeoc
2-(2'- a4'-pyridyl)ethyl	Pyoc
2,2-bis(4 '-nitrofenyl)ethyl	Bnpeoc
n-(2-pivaloylamino)-1,1 -dimethylethyl
2-[(2-nitrofenyl)dithio]-1 -fenylethyl	NpSSPeoc
2-(n,n-dicyklohexylkarboxamido)ethyl
t-butyl	BOC
1 -adamantyl	1-Adoc
2-adamantyl	2-Adoc

• ·

vinyl	Voc
allyl	Aloe nebo Alloc
1-isopropylallyl	Ipaoc
cinnamyl	Coc
4-nitrocinnamyl	Noc
3-(3 '-pyridyl)prop-2-enyl 8-chinolyl n-hydroxypiperidinyl alkyldithio	Paloc
benzyl	Cbz nebo Z
p-methoxybenzyl	Moz
p-nitrobenzyl p-brombenzyl p-chlorbenzyl 2,4-dichlorbenzyl	PNZ
4-methylsulfinylbenzyl 9-anthrylmethyl difenylmethyl fenothiazinyl-( 10)-karbonyl n'-p-toluensulfonylaminokarbonyl n'-fenylaminothiokarbonyl	Msz

amidy formamid acetamid chloracetamid trifluoracetamid TFA fenylacetamid

3-fenylpropanamid pent-4-enamid pikolinamid

3-pyridylkarboxamid benzamid ♦ ·· · • · ♦ · · ® · · · «*· · » 4··· p-fenylbenzamid n-ftalimid n-tetrachlorftalimid

4-nitro-n-ftalimid n-dithiasukcimid n-2,3-difenylmaleinamid n-2,5 -dimethylpyrrol n-2,5-bis(triisopropylsiloxyl)pyrrol η-1,1,4,4-tetramethyldisilaazacyklopentanový adukt

1,1,3,3-tetramethyl-1,3-disilaisoindolin speciální skupiny chránící -NH skupinu n-methylamin n-t-butylamin n-allylamin n-[(2-trimethylsilyl)ethoxy]methylamin n-3 -acetoxypropylamin n-kyanomethylamin n-( 1 -isopropyl-4-nitro-2-oxo-3-pyrrolin-3-yl)amin n-2,4-dimethoxybenzylamin

2-azanorbomen n-2,4-dinitrofenylamin n-benzylatnin n-4-methoxybenzylamin n-2,4-dimethoxybenzylamin n-2-hydroxybenzylamin n-(difenylmethyl)amin n-bis(4-methoxyfenyl)methylamin n-5-dibenzosuberylamin n-trifenylmethylamin n-[(4-methoxyfenyl)difenylmethyl]amin n-9-fenylflurenylamin n-ferrocenylmethylamin

TCP

Dts

BIPSOP

STABASE

BSB

SEM

Dmb

Bn

MPM

DMPM

Hbn

DPM

DBS

Tr

MMTr

Pf

Fcm * · • · n-2-pikolylamin-n'-oxid η-1,1 -dimethylthiomethylenamin n-benzylidenamin n-p-methoxybenzylidenamin n-difenylmethylenamin n-(5,5-dimethyl-3 -oxo-1 -cyklohexenyl)amin n-nitroamin n-nitrosoamin difenylfosfinamid Dpp dimethylthiofosfinamid Mpt difenylthiofosfinamid Ppt dibenzylfosforamidát

2- nitrobenzensulfenamid Nps η-1 -(2,2,2-trifluor-1,1 -difenyl)ethylsulfenamid TDE

3- nitro-2-pyridinsulfenamid Npys p-toluensulfonamid Ts benzensulfonamid

Vhodné třídy sloučenin tohoto vynálezu zahrnují sloučeniny obecného vzorce XVIIb, kde jeden nebo více, vhodněji všechny následující předpoklady jsou:

aminoskupina v obecném vzorci Vlaje substituována; hydroxyskupina v obecném vzorci VIb je substituována;

R⁵jeOR_t;

R⁷ a R⁸ tvoří společně skupinu -O-CH₂-O-;

R^14a a R^14b jsou obě -H;

R¹⁵ je H; a/nebo R²¹ je OH nebo -CN.

Konkrétní produkty ecteinascidinu tohoto vynálezu zahrnují sloučeniny obecného vzorce

XVIII:

• · • ·

kde R* a R⁴ tvoří skupinu obecného vzorce Via nebo VIb:

Via ^Vlb

R²¹ je -H, -OH nebo -CN, více konkrétně -OH nebo -CN;

a jejich acylderiváty, více konkrétně 5-acylderiváty včetně 5-acetyl derivátu a kde -NH₂ skupina v obecném vzorci Via a -OH skupina v obecném vzorci VIb jsou výhodně substituovány.

Sloučeniny předkládaného vynálezu, jmenovitě s jednou nebo dvěma skupinami Xj mohou být připraveny synteticky z meziproduktů sloučenin (47), což je popsáno v US patent č. 5 721 362 nebo z podobných sloučenin. Z tohoto důvodu poskytuje předkládaný vynález postup, který zahrnuje substituci 1,4-můstkové aminoskupiny podle následujícího reakčního schématu:

H NH₂

kde Xi je definováno výše a ostatní skupiny v molekule mohou být chráněny nebo substituovány podle požadavků nebo jak je vyhrazeno.

Sloučeniny tohoto vynálezu jmenovitě se skupinami X₂ a -OX₂ mohou být připraveny z meziproduktů sloučenin (15) popsaných v US patentu č. 5 721 362 nebo z podobných • · ·· • · ·

sloučenin. Z tohoto důvodu poskytuje předkládaný vynález postup, který zahrnuje substituci 1,4-můstkové aminoskupiny podle následujícího reakčního schématu:

kde Xi je definováno výše a ostatní skupiny v molekule mohou být chráněny nebo substituovány podle požadavků nebo jak je vyhrazeno. Reakce může pokračovat za vytvoření substituentu OXi, kde Xi je vodík a potom následuje konverze na sloučeninu, kde Xi je jiná skupina.

Je zřejmé, že sloučeniny tohoto vynálezu mohou být také připraveny modifikací syntetických kroků uvedených v US patentu č. 5 721 362. Z tohoto důvodu mohou být například různé reaktivní skupiny připojeny na funkční pozici, například na pozici 5 nebo 18.

Více běžný způsob přípravy sloučenin tohoto vynálezu byl poprvé popsán v WO 00/69862, který je začleněn v referenci tohoto vynálezu a ze kterého je nárokováno prvenství.

V typickém způsobu se WO aplikace týká způsobu přípravy sloučeniny se strukturou spojených kruhů obecného vzorce XIV:

který zahrnuje jednu nebo více reakcí vycházejících ze sloučeniny mající kyanoskupinu na pozici 21 obecného vzorce XVI:

kde:

• · ··· ·

R¹ je amidomethylenová skupina nebo acyloxymethylenová skupina;

R⁵ a R⁸ jsou nezávisle na sobě vybrány z -H, -OH nebo -OCOCH2OH nebo R⁵ a R⁸ tvoří společně ketoskupinu a kruh A je p-benzochinonový kruh;

R^14a a R^14b jsou oba dva -H nebo jeden je -H a druhý je -OH, -OCH₃ nebo -OCH₂CH₃ nebo R^l4a a R^14b tvoří společně ketoskupinu; a

R¹⁵ a R¹⁸ jsou nezávisle na sobě vybrány z-H, -OH nebo R¹⁵ a R¹⁸ jsou oba dva ketoskupina a kruh A je p-benzochinonový kruh.

Takové reakce mohou konkrétně poskytovat způsob přípravy výchozích materiálů pro reakce dle schémat I a II spolu s odpovídajícími sloučeninami.

Protinádorová účinnost těchto sloučenin zahrnuje leukémii, nádor plic, nádor tlustého střeva, nádor ledviny, nádor prostaty, nádor vaječníků, nádor prsu, zhoubný nádor a melanom.

Další obzvláště vhodný aspekt předkládaného vynálezu jsou farmaceutické prostředky použitelné jako protinádorová činidla, která jako účinnou složku obsahují sloučeninu nebo sloučeniny tohoto vynálezu, stejně jako způsob pro jejich přípravu.

Příklady farmaceutických prostředků zahrnují některé pevné prostředky (tablety, pilulky, kapsle, granule atd.) nebo kapalné prostředky (roztoky, suspenze nebo emulze) s vhodnými prostředky pro orální, lokální nebo parenterální podávání.

Podávání sloučenin nebo prostředků předkládaného vynálezu může být provedeno nějakým vhodným způsobem, jako je nitrožilní infuze, orální podávání, intraperitoneální a nitrožilní podávání.

Abychom se vyvarovali chyb, jsou stereochemie zjištěné v tomto vynálezu založeny na našem správném pochopení stereochemie přírodních produktů. Pokud by byla chyba objevena ve stereochemii, potom je potřeba provést odpovídající korekci, která bude provedena ve vzorcích v rámci tohoto vynálezu. Tento vynález se také týká stereoisomerů, aby se zjistilo, zda-li jsou syntézy jsou proveditelné.

Detailní popis vhodného postupu

Sloučeniny tohoto vynálezu mohou být synteticky připraveny z meziproduktů sloučenin 47 a 15 popsaných v US patentu č. 5 721 362, sloučeniny 36 popsané v WO 00/69862 a ze sekundárních produktů (v tomto vynálezu očíslovány jako 23 a 24) získané v několika krocích odstraněním chránících skupin použitím AICI3 a sloučeniny 33 popsané v WO 00/69862.

···

9 9

9999

15(10)

36(5)

(23)

(24)

Sloučenina 1 odpovídá syntetickému meziproduktu 47 popsanému v US patentu č. 5 721 362. Sloučeniny 27 a 28 uvedené v tabulce IV jsou popsány jako 35 a 34 v WO 00/69862.

Některé vhodné způsoby výroby sloučeniny obecného vzorce I jsou popsány níže v následujících reakčních schématech s příklady typických skupin substituentů. Tyto typické substituenty nejsou omezeny tímto vynálezem a postup může být chápán ve větším rozsahu bez zvláštního ohledu na označení jednotlivých sloučenin a meziproduktů.

Početné účinné protinádorové sloučeniny byly připraveny z těchto sloučenin a předpokládá se, že mnohem více sloučenin může být připraveno v oblasti tohoto vynálezu.

· · * · • · · 9 Μ ·

9 9 9 · · · · · • · · ···♦ 99 ·«· ·

* ·

Schéma I

4a-i, 4k-l, 4n, 4o

3a-n, 3o

R: a: AcNHb: F3CCONHCH₃(CH₂)₂CONH(CH₃)₂CHCH₂CONHe: CH₃(CH₂)₆CONHf: CH₃(CH₂)j4CONHg: BzNHh: CinnCONHΟ, o i: p-F₃C-CmnCONHj: PhtNk: BiotinCONHI: HO2CCH₂CH₂CONHra: (CH₃)₂Nn: BriNHo:PrNHCinn:

CK'

R:

p: NH₂-ValCONHq: Ac-N-ValCONHr: CinnCO-N-ValCONHs: NH₂-Ala-ValCONHt: Ac-JV-Ala-ValCONHu: CinnCO-A-Ala-VaICONHv: NH₂-AlaCONHw: AcW-AlaCONHx: CinnCO-MAlaCONHy: FmSCH₂CH(NHAlloc)CONHz: FmSCH₂CH(NH₂)CONH7: Boc-JV-ValCONH8: Boc-TV-AlaCONH9: Boc-N-Ala-ValCONH

Schéma ΠΙ

A /°

19,21a, 21c, 21e-f, 211», 2111, 22a*

R^v: a: Acb: F₃CCOc: CH₃(CH₂)₂COe: CH₃(CH₂)₆COf: CH₃(CH₂)_mCOCinn:

Ck¹

15,16*, 17a-c, 17e-f, 17h, 1711,18a* h: CinnCOH:MeSO₂15: H16: H19: HSchéma IV

• · · ··

Typy reakcí jsou následující:

Metody A, B, C, E a M zahrnují různé acylační způsoby s chloridy, anhydridy kyselin, kyselinami nebo sulfonyl chloridy za vzniku amidu nebo esterové vazby.

Metody D a H zahrnují reduktivní alkylační reakce mezi aldehydem a 1 nebo aminem a 5 za vzniku 2m nebo 3o.

Metoda F transformuje sloučeninu 1 na 2n reakcí s BnBr a CS2CO3.

Metoda G zahrnuje odstranění methoxymethylové skupiny (MOM) nebo MOM/terc-butyloxykarbonyl skupiny nebo MOM/allyloxykarbonylové skupiny použitím trimethylchlorsilanu (TMSC1) a jodidu sodného.

Metody I (AgNCb) a J (CuBr) konvertují CN na OH v pozici C-21.

Metoda K zahrnuje hydrolysu karbamátové vazby použitím vodné trifluoroctové kyseliny.

Metoda L konvertuje karbonylovou skupinu na alkohol redukcí s NaCNBH3 za přítomnosti kyseliny octové. Touto reakcí vzniká nové chirální centrum. Z výpočtu stérických účinků a spektroskopických dat se zdá, že hlavní produkt je sloučenina 11, která má R konfiguraci na tomto centru a sekundární produkt 12* má S konfiguraci. Na tomto základě, 13, 15, 17, 19, 21 budou mít R konfiguraci a 14*, 18* a 22* budou mít S konfiguraci. Tato zjištění byla uskutečněna na základě dostupných spektrálních dat a jako taková, za nepřítomnosti specifických studií potvrzujících přiřazení, by měla být považována pouze za prozatímní.

K přípravě dalších sloučenin tohoto vynálezu mohou být použity modifikované postupy. Konkrétně výchozí látky a/nebo činidla a reakce mohou být různé, což poskytuje další kombinace skupin substituentů.

V dalším aspektu je předkládaný vynález orientován na použití známé sloučeniny, safracinu B, také označovanému jako chinonamin, v polosyntetické syntéze.

Všeobecně, vynález se týká polosyntetického postupu pro tvorbu meziproduktů, derivátů a odpovídajících struktur ecteinascidinu nebo jiných tetrahydroisochinolinfenolových sloučenin pocházejících z přírodních bis(tetrahydroisochinolin)alkaloidů.

Vhodné výchozí látky pro polosyntetický postup zahrnují třídy safřamycinových a safřacinových antibiotik dostupných z různých vypěstovaných živných půd a také třídy reineramycinových a xestomycinových sloučenin dostupných z mořských hub.

Obecný vzorec XV pro výchozí sloučeniny je následující:

OCH₃

CH₃.

CH₃O

CH3

R15 kde:

R¹ je amidomethylenová skupina, jako je -CH2-NH-CO-CR^25aR^25bR^25c, kde R^25a a R^25b tvoří ketoskupinu nebo jeden je -OH, -NH2 nebo -OCOCH3 a druhý je -CH₂COCH3, -H, -OH nebo -OCOCH3 tak, že když je R^25a -OH nebo -NH2, potom R^25b není -OH, a R^25c je -H, -CH3 nebo -CH2CH3 nebo R¹ je acyloxymethylenová skupina, jako je -CH₂-O-CO-R, kde R je -C(CH₃)=CH-CH₃ nebo -CH₃;

R⁵ a R⁸ jsou nezávisle na sobě vybrány z -H, -OH nebo -OCOCH₂OH nebo R⁵ a R⁸ jsou oba dva ketoskupina a kruh A je p-benzochinonový kruh;

R^14a a R^14b jsou oba dva -H nebo jeden je -H a druhý je -OH, -OCH3 nebo -OCH₂CH3 nebo R^14a a R^14b tvoří společně ketoskupinu; a

R¹⁵ a R¹⁸ jsou nezávisle na sobě vybrány z-H, -OH nebo R¹⁵ a R¹⁸ jsou oba dva ketoskupina a kruh A je p-benzochinonový kruh; a

R²¹ je -OH nebo -CN.

Všeobecně je obecný vzorec pro tuto třídu sloučenin uveden níže:

x kde skupiny substituentů definované Ri, R₂, R3, R4, R5, Ró, R7, Rs, R9, R10 jsou každý nezávisle na sobě vybrán ze skupiny obsahující H, OH, OCH3, CN, =0, CH3; kde X jsou různé amidy nebo estery obsažené ve zmíněných přírodních produktech; kde každý tečkovaný kruh reprezentuje jednu, dvě nebo výhodně tři dvojné vazby.

9* ·<* t · · » • · » * s»·

4» · ···» *

·· ··

9 »t *» • 9 9

9 9

9 9

9 9 • · »*·<

Takto, podle předkládaného vynálezu, nyní poskytujeme polosyntetické způsoby pro přípravu nových a známých sloučenin. Polosyntetické postupy vynálezu zahrnují množství transformačních kroků za vzniku požadovaného produktu. Každý krok je sám o osobě postupem v souladu s tímto vynálezem. Vynález není omezen postupy, které jsou ukázány a alternativní postupy mohou být provedeny například změnou pořadí transformačních kroků, pokud je to vhodné.

Konkrétně tento vynález zahrnuje poskytnutí výchozí látky, která má kyanoskupinu na pozici 21 obecného vzorce XVI:

kde R¹, R⁵, R⁸, R^14a, R^14b, R¹⁵ a R¹⁸ jsou definovány výše.

Další sloučeniny obecného vzorce XVI s jiným substituentem na pozici 21 mohou také reprezentovat možnou výchozí látku. Všeobecně jsou použitelné některé deriváty schopné nukleofilní substituce na hydroxyskupině na pozici 21 sloučeniny obecného vzorce XV, kde R²¹ je hydroxyskupina. Příklady vhodných substituentů na pozici 21 zahrnují, ale nejsou omezeny na:

thioskupinu;

alkylthioskupinu (alkyl skupina má od 1 do 6 atomů uhlíku);

arylthioskupinu (aryl skupina má od 6 do 10 atomů uhlíku a je nesubstituovaná nebo substituovaná 1 až 5 substituenty vybranými například z alkyl skupiny mající od 1 do 6 atomů uhlíku, alkoxyskupin majících od 1 do 6 atomů uhlíku, halogenů, thioskupin a nitroskupin);

aminoskupinu;

mono- nebo di-alkylaminoskupinu (každá alkylskupina má od 1 do 6 atomů uhlíku); mono- nebo di-arylaminoskupinu (každá aryl skupina je definována výše ve vztahu k arylthioskupinám) α-karbonylalkylskupinu obecného vzorce -C(R^a)(R^b)-C(-O)R^c, kde R^a a R^b jsou vybrány z atomů vodíku, alkylskupin majících od 1 do 20 atomů uhlíku, arylskupin (jak je definováno výše ve vztahu k arylthioskupinám) a aralkylskupiny (ve kterých má alkylskupina od 1 do 4 atomů uhlíku a je substituována arylovou skupinou definovanou výše ve vztahu k arylthioskupinám), s podmínkou, že jeden z R^a a R^b je atom vodíku.

• ·

R^c je vybráno z atomu vodíku, alkylskupiny mající od 1 do 20 atomů uhlíku, arylskupiny (jak je definováno výše ve vztahu k arylthioskupinám), aralkylskupiny (ve kterých má alkylskupina od 1 do 4 atomů uhlíku a je substituována arylovou skupinou definovanou výše ve vztahu k arylthioskupinám), alkoxyskupinu mající od 1 do 6 atomů uhlíku, aminoskupiny nebo mono- nebo di-alkylaminoskupiny, jakje definováno výše.

Takto, v obecném aspektu, se předkládaný vynález týká prostupů, kde první krok je vytvoření derivátu na pozici 21 použitím nukleofilního činidla. Takové sloučeniny označujeme jako sloučeniny, které mají Nuc skupinu na pozici 21. Vhodné výchozí sloučeniny mají strukturu obecného vzorce XIV:

kde alespoň jeden kruh A nebo E je chinolický.

Z tohoto důvodu je možné kromě použití sloučenin, která mají kyanoskupinu na pozici 21, použít i postupy používající jiné sloučeniny obsahující nukleofil, za vzniku podobných sloučenin obecného vzorce XVI, kde pozice 21 je chráněna jinou nukleofilní skupinou, Nuc skupinou na pozici 21. Například sloučenina, která má Nuc skupinu na pozici 21, obecného vzorce XVI s alkylamino substituentem na pozici 21 může vzniknout reakcí sloučeniny obecného vzorce XV, kde R²¹ je hydroxyskupina, s vhodným alkylaminem. Sloučenina, která má Nuc skupinu na pozici 21, obecného vzorce XVI s alkylthio substituentem na pozici 21 může také vzniknout reakcí sloučeniny obecného vzorce XV, kde R²¹ je hydroxyskupina, s vhodným alkanthíolem. Alternativně, sloučenina, která má Nuc skupinu na pozici 21, obecného vzorce XVI s α-karbonylalkyl substituentem na pozici 21 může vzniknout reakcí sloučeniny obecného vzorce XV, kde R²¹ je hydroxyskupina, s vhodnou karbonylovou sloučeninou, typicky za přítomnosti base. Pro jiné sloučeniny, které mají Nuc skupinu na pozici 21, jsou možné další způsoby.

Přítomnost kyanoskupiny na pozici 21 je vyžadována pro některé konečné produkty, jmenovitě ecteinascidin 770 a ftalascidin, zatímco pro jiné konečné produkty vystupuje jako chránící skupina, která může být snadno změněna na jiný substituent, jako je hydroxyskupina. Přijetí sloučeniny, která má kyanoskupinu na pozici 21, jako výchozí látku účinně stabilizuje molekulu během dalších syntetických kroků, dokud není výhodně odstraněna. Další sloučeniny, které mají Nuc skupinu na pozici 21, mohou nabídnout tuto a jiné výhody.

Vhodné výchozí látky zahrnují takové sloučeniny obecného vzorce XV nebo XVI, kde R^14a a R^l4b jsou oba dva atomy vodíku. Vhodné výchozí látky také zahrnují sloučeniny obecného vzorce XV nebo XVI, kde R¹⁵ je atom vodíku. Dále, vhodné výchozí látky zahrnují sloučeniny obecného vzorce XV nebo XVI, kde kruh E je fenolický kruh. Vhodné výchozí látky dále zahrnují sloučeniny obecného vzorce XV nebo XVI, kde alespoň jeden, lépe dva nebo tři z R⁵, R⁸, R¹⁵ a R¹⁸ není vodík.

Příklady vhodných výchozích látek pro tento vynález zahrnují saframycin A, saframycin B, saframycin C, saframycin G, saframycin H, saframycin S, saframycin Y₃, saframycin Ydi, saframycin Adi, saframycin Yd2, saframycin AI12, saframycin AI12AC, saframycin AHi, saframycin AhiAc, saframycin AR3, renieramycin A, renieramycin B, renieramycin C, renieramycin D, renieramycin E, renieramycin F, xestomycin, saframycin D, saframycin F, saframycin Mx-1, saframycin Mx-2, safracin A, safracin B, safracin R. Vhodné výchozí látky mají kyanoskupinu v pozici 21 pro skupinu R .

V obzvláště vhodném aspektu vynález zahrnuje polosyntetický postup, kde transformační kroky jsou aplikovány na safracin B:

Me

Safracin B

Safracin B reprezentuje kruhový systém podobný ecteinascidinům. Tato sloučenina má stejnou pentacyklickou strukturu a stejný způsob substituce v pravém aromatickém kruhu, kruhE.

Více vhodnější výchozí látky tohoto vynálezu mají kyanoskupinu na pozici 21. V současné době je nejvhodnější sloučeninou předkládaného vynálezu sloučenina obecného vzorce 2.

• · • ·

Tato sloučenina je získána přímo ze safřacinu B a je považována za klíčový meziprodukt v polosyntetickém postupu.

sloučenina 2

Kyanosafracin B byl získán fermentací Pseudomonas fluorescens, což je produkční kmen produkující safracin B, a zpracováním kultivační tekutiny za přídavku kyanidových iontů.

Vhodný kmen Pseudomonas fluorescens je kmen A2-2, FERM BP-14, který je použit v proceduře EP-A-055 299. Vhodný zdroj kyanidových iontů je kyanid draselný. V typickém laboratorním provedení je kultivační tekutina zfiltrována a je přidán nadbytek kyanidových iontů. Po vhodné době míchání, jako je 1 hodina, je pH upraveno, řekněme na 9,5, a extrakcí organickým rozpouštědlem vzniká surový extrakt, který může být dále čištěn za vzniku kyanosafracinu B.

Všeobecně, konverze kyanoskupiny na pozici 21 výchozí sloučeniny na produkt tohoto vynálezu zahrnuje:

a) konverzi, pokud je to nezbytné, chinonového systému kruhu E na fenolový systém;

b) konverzi, pokud je to nezbytné, chinonového systému kruhu A na fenolový systém;

c) konverzi fenolového systému kruhu A na methylendioxyfenolový kruh;

d) tvorbu můstkového spiro systému obecného vzorce IV, VI nebo VII přes pozici 1 a pozici 4 kruhu B; a

e) derivatizaci, pokud j e vhodná, j ako j e alkylace.

Krok (a), konverze, pokud je to nezbytné, chinonového systému kruhu E na fenolový systém, může být provedena běžnými redukčními postupy. Vhodné činidlo je vodík na paladiu/uhlíku, ačkoli i další redukční činidla mohou být použita.

Krok (b), konverze, pokud je to nezbytné, chinonového systému kruhu A na fenolový systém, je stejný jako v kroku (a) a není potřeba dalších detailů.

« ·

Krok (c), konverze fenolového systému kruhu A na methylendioxyfenolový kruh, může být proveden několika způsoby, třeba spolu s krokem (b). Například, chinonový kruh A může být demethylován vmethoxy substituent na pozici 7 a redukován na dihydrochinon a zreagován s vhodným elektrofilním činidlem, jako je CH₂Br₂, BrCH₂Cl nebo podobným divalentním činidlem přímo za vzniku methylendioxy kruhového systému nebo s divalentním činidlem, jako je thiokarbonyldiimidazol, se kterým vzniká substituovaný methylendioxy kruhový systém, který může být přeměněn na požadovaný kruh.

Krok (d) je typicky prováděn vhodnou substitucí na pozici 1 s můstkovým činidlem, které může pomáhat vytvářet požadovaný můstek a které vytváří ex-endochinonový methid na pozici 4 a umožňuje methidu, aby reagoval s 1-substituentem za vzniku můstkové struktury. Vhodná můstková činidla jsou obecného vzorce XIX:

Pror' Fu kde Fu označuje chránící skupinu, jako je -NHProt^4a nebo OProt^4b, Prot³ je chránící skupina a tečkovaná Čára ukazuje polohu výhodné dvojné vazby.

Vhodný methid je tvořen hydroxyskupinou na pozici 10 na spojení kruhů A a B za vzniku neúplné struktury obecného vzorce XX:

nebo více vhodněji neúplná struktura obecného vzorce XXI:

kde skupina R je vybrána z obecných vzorců IV, V, VI nebo VII. Pro první dvě takové skupiny, skupina R” typicky nabývá tvaru -CHFu-CH₂-SProt³. Chránící skupiny mohou být potom odstraněny a modifikovány, jak je vhodné, za vzniku požadované sloučeniny.

Typický postup pro krok (d) je uveden v US patentu č. 5 721 362, který je začleněn v referenci. Konkrétní odkaz je na pasáž ve sloupci 8, krok (1) a příklad 33 US patentu a podobné pasáže.

Derivatizace v kroku (e) může zahrnovat alkylaci, například se skupinou R^a-CO-, stejně jako konverzi I2-NCH3 skupiny na 12-NH nebo I2-NCH2CH3. Taková konverze může být provedena před nebo po jiných krocích za použití dostupných způsobů.

Takže může být například přeměněna na meziprodukt Int-25:

Me a z tohoto derivátu je možné vytvořit množství cysteinových derivátů, které mohou být přeměněny na sloučeniny tohoto vynálezu. Vhodné cysteinové deriváty jsou doloženy následujícími dvěmi sloučeninami:

Jeden způsob tohoto vynálezu přeměňuje kyanosafracin B na Int-25 provedením sekvencí reakcí, které nezbytně zahrnují (1) odstranění methoxyskupiny umístěné na kruhu A, (2) redukci kruhu A a vytvoření methylen-dioxyskupiny v jednom kruhu, (3) hydrolysu amidové funkční skupiny umístěné na uhlíku 1, (4) přeměnu výsledné aminoskupiny na hydroxylovou skupinu, viz schéma V.

Schéma V

Φ

··· · · · « · « ···· · · · · · · • · · · « · · «· » · * · · ·» « ♦« · · · · * ·

Způsob umožňující chránění a odstranění chránění primárního alkoholu na pozici 1 v kruhu B sloučeniny Int-25 přímo použitím cysteinového zbytku Int-29 za vzniku meziproduktu Int-27. Cysteinový derivát Int-29 má chráněnou aminoskupinu β,β,β-trichlorethoxykarbonylovou chránící skupinou, která má kompatibilitu s přítomnou allylovou a MOM skupinou. Meziprodukt Int-27 je přímo oxidován a cyklizován. Tyto okolnosti spolu s různou strategií odstraňování chránících skupin v pozdějších krocích syntézy vytvářejí nový a více přizpůsobitelný způsob průmyslovému vývoji než postup, který je uveden V US

721 362.

Konverze sloučeniny mající kyanoskupinu na pozici 2 na meziprodukt Int-25 obvykle zahrnuje následující kroky (viz schéma V):

vytvoření chránící sloučeniny obecného vzorce Int-14 reakcí Int-2 s anhydridem terc-butoxykarbonylové kyseliny;

přeměnu Int-14 na di-chráněnou sloučeninu obecného vzorce Int-15 reakcí s brommethylmethyléterem a diisopropylethylaminem v acetonitrilu;

selektivní eliminaci methoxyskupiny chinonového systému v Int-15 za vzniku sloučeniny obecného vzorce Int-16 reakcí s methanolickým roztokem hydroxidu sodného;

přeměnu Int-16 na methylen-dioxy sloučeninu obecného vzorce Int-18 použitím následující vhodné sekvence: (1) chinonová skupina sloučeniny Int-16 je redukována 10 %

Pd/C v atmosféře vodíku; (2) hydrochinonový meziprodukt je přeměněn na methylendioxy sloučeninu obecného vzorce Int-17 reakcí s bromchlormethanem a hydrogenuhličitanem česným v atmosféře vodíku; (3) Int-17 je přeměněn na sloučeninu obecného vzorce Int-18 chráněním volné hydroxylové skupiny OCH2R skupinou. Tato reakce je provedena s BrCIUR a hydrogenuhličitanem česným, kde R může být aryl, CH=CH₂, OR' atd.

eliminaci terc-butoxykarbonylu a methyloxymethyl chránících skupin Int-18 za vzniku sloučeniny obecného vzorce Int-19 reakcí s roztokem HC1 vdioxinu. Tuto reakci je také možno provést smícháním Int-18 s roztokem trifluoroctové kyseliny v dichlormethanu;

vytvoření thiomočovinové sloučeniny obecného vzorce Int-20 reakcí Int-19 s fenylisothiokyanátem;

přeměnu sloučeniny obecného vzorce Int-20 na amin obecného vzorce Int-21 reakcí s roztokem kyseliny chlorovodíkové v dioxinu;

přeměnu sloučeniny obecného vzorce Int-21 na N-Troc derivát Int-22 reakcí s trichlorethyl chloroformátem a pyridinem;

vytvoření chráněné hydroxyskupiny sloučeniny obecného vzorce Int-23 reakcí Int-22 s brommethylmethyléterem a diisopropylethylaminem;

*· ·· « · · ♦ · • · » « · · • · · · · • ·· * · · ·· ·»♦· přeměnu sloučeniny obecného vzorce Int-23 na N-H derivát Int-24 reakcí s kyselinou octovou a zinkem;

přeměnu sloučeniny obecného vzorce Int-24 na hydroxy sloučeninu obecného vzorce Int25 reakcí s nitridem sodným v kyselině octové. Alternativně může být použit oxid dusičitý ve směsi kyseliny octové a acetonitrilu, po čemž následuje zpracování hydroxidem sodným. Také může být použit nitrit sodný ve směsi anhydrid kyseliny octové-kyselina octová, po čemž následuje zpracování hydroxidem sodným.

Z meziproduktu Int-25 přeměna na konečnou sloučeninu Int-35 nebo Int-36 tohoto vynálezu může potom pokračovat, jak je ukázáno ve schématu VI:

Schéma VI

M« lnt-36

Konverze Int-25 na Int-36 obvykle zahrnuje následující kroky (viz schéma VI): přeměna sloučeniny obecného vzorce Int-24 na derivát Int-30 chráněním primárního hydroxylu (S)-N-2,2,2-trichlorethoxykarbonyl-S-(9H-fluoren-9-ylmethyl)cysteinem Int-29; přeměnu chráněné sloučeniny obecného vzorce Int-30 na fenolový derivát Int-31 rozštěpením alkylové skupiny pomocí tributylcín hydridu a dichlorpaladiabis(trifenylfosfínu);

• ·

• « « « • · « • · · · • · • · · · · · přeměnu fenolové sloučeninu obecného vzorce Int-31 na sloučeninu obecného vzorce Int32 oxidací anhydridem kyseliny benzenselenové při nízké teplotě;

přeměnu hydroxyskupiny sloučeniny obecného vzorce Int-32 na lakton Int-33 následující sekvencí reakcí: (1) reakce sloučeniny obecného vzorce Int-32 s2 ekv. anhydridu kyseliny trifluoroctové a 5 ekv. DMSO; (2) reakce s 8 ekv. diisopropylethylaminu; (3) reakce s 4 ekv. t-butylalkoholu; (4) reakce se 7 ekv. 2-terc-butyl-l,l,3,3-tetramethylguanidinu; (5) reakce s 10 ekv. acetanhydridu;

přeměnu laktonové skupiny sloučeniny Int-33 na hydroxylovou skupinu sloučeniny Int-34 odstraněním MOM chránící skupiny pomocí TMSI;

rozštěpení N-trichlorethoxykarbonyl skupiny sloučeniny obecného vzorce Int-34 na sloučeninu Int-35 reakcí se Zn/AcOH;

přeměnu aminoskupiny sloučeniny Int-35 na odpovídající α-ketolaktonovou skupinu sloučeniny Int-36 reakcí s N-methylpyridiniumkarboxaldehyd chloridem, po čemž následuje reakce s DBU;

Přeměna meziproduktu sloučeniny Int-25 na ET-743 použitím cysteinového derivátu 37 může být provedena podobným způsobem a se sejnými činidly, jako s cysteinovým derivátem Int-29, s výjimkou přeměny (f) a (g). Reakční sekvence se zobrazena na následujícím schématu VII:

Schéma VII

Iat-36

• ·· • · • · · · * « · • · 9 9 9

9 9 9 9 9 9 • · · · · « ·· · 9 9 9 · 99 9 9

Předpokládá se, že tyto syntetické způsoby mohou být snadno modifikovány, konkrétně vhodnými změnami výchozí látky a činidel tak, aby poskytovaly sloučeniny tohoto vynálezu s odlišnými kruhovými systémy nebo funkčními skupinami.

Nové účinné sloučeniny

Bylo zjištěno, že sloučeniny tohoto vynálezu mají účinnost při léčení rakoviny, jako je leukémie, rakovina plic, rakovina tlustého střeva, rakovina ledvin a melonomu.

Z tohoto důvodu poskytuje předkládaný vynález způsob léčení některých savců, jmenovitě člověka, napadeného rakovinou, což zahrnuje podávání napadenému jedinci terapeuticky účinné množství sloučeniny tohoto vynálezu nebo jejího farmaceutického prostředku.

Předkládaný vynález se také týká farmaceutické přípravy, která jako účinnou složku obsahuje sloučeninu nebo sloučeniny tohoto vynálezu, stejně jako postupů pro jejich přípravu.

Příklady farmaceutických prostředků zahrnují některé pevné prostředky (tablety, pilulky, kapsle, granule atd.) nebo kapaliny (roztoky, suspenze nebo emulze) s vhodným podáváním, jako je orální, lokální nebo parenterální podávání a prostředky mohou obsahovat čistou sloučeninu nebo její kombinaci s nějakým nosičem nebo jinými farmakologicky účinnými sloučeninami. Tyto prostředky by měly být sterilizovány, pokud budou podávány parenterálně.

Podávání sloučenin nebo prostředků předkládaného vynálezu může být provedeno některými vhodnými způsoby, jako je nitrožilní infuze, orální podávání, intraperitoneální a nitrožilní podávání. Vhodná frekvence podávání je do 24 hodin, více vhodněji 2 až 12 hodin a nejvhodněji 2 až 6 hodin. Krátký čas infuze, který dovoluje, aby bylo podávání provedeno bez nutnosti zůstat v nemocnici přes noc je obzvláště žádoucí. Ačkoli, infuze mohou trvat 12 až 24 hodin nebo dokonce déle, pokud je to požadováno. Infuze by měla být prováděna ve vhodných intervalech, řekněme od 2 do 4 týdnů. Farmaceutické prostředky obsahující sloučeniny tohoto vynálezu mohou být dodávány liposomovým nebo nanosférovým zapouzdřením, ve sloučeninu trvale uvolňujících prostředcích nebo jinými standardními podávacími způsoby.

Správná dávka sloučenin se bude lišit podle konkrétního prostředku, způsobu podávání a konkrétního místa podávání, stavu pacienta a léčeného nádoru. Další faktor, jako věk, hmotnost, pohlaví, strava, čas podávání, rychlost exkrece, stav pacienta, kombinace léčiv, citlivost pacienta a závažnost onemocnění by měla být vzata na zřetel. Podáváni může být provedeno kontinuálně nebo periodicky v rámci maximální tolerované dávky.

* · • ·

Sloučeniny a prostředky tohoto vynálezu mohou být použity s jinými léčivy a mohou tak poskytovat kombinovanou terapii. Další léčiva mohou tvořit část stejného prostředku nebo mohou být dodána jako samostatný prostředek pro podávání ve stejný nebo jiný čas. Identita jiného léčiva není konkrétně omezena a vhodné jsou:

a) léčiva s antibiotickými účinky, obzvláště ta, která zasahují cytoskeletální prvky včetně mikrotubulových modulátorů, jako je taxanové léčivo (jako je taxol, paclitaxel, taxoter, docetaxel), podofylotoxiny nebo vinca alkaloidy (vincristin, vinblastin);

b) antimetabolická léčiva, jako je 5-fluoruracil, cytarabin, gemcitabin, analogy purinu, jako je pentostatin, methotrexát;

c) alkylační činidla na bázi yperitu obsahující dusík (jako je cyklofosfamid nebo ifosfamid);

d) léčiva, která zasahují DNA, jako je antracyklinové léčivo adriamycin, doxorubicin, farmorubicin nebo epirubicin;

e) léčiva, která zasahují topoisomerasy, jako je etoposid;

f) hormony a agonisté hormonů nebo antagonisté, jako je estrogen, antiestrogen (amoxifen a podobné sloučeniny) a androgen, flutamid, leuprorelin, goserelin, cyprotron nebo octretoid;

g) léčiva, která zasahují signální transduktor v nádorových buňkách včetně derivátů protilátek, jako je herpecin;

h) alkylační léčiva, jako je platina (cis-platina, karbonplatina, oxaliplatina, paraplatina) nebo nitrosomoČovina;

i) léčiva potenciálně působící na metastasy nádorů, jako jsou inhibitory metaloproteinasy;

j) genová terapie a antimediátorová činidla;

k) terapeutické protilátky;

l) jiné bioaktivní sloučeniny mořského původu, jmenovitě didemniny, jako je aplidin;

m) analogy steroidů, konkrétně dexamethason;

n) protizánětlivá léčiva, konkrétně dexamethason;

o) antiemetická léčiva, konkrétně dexamethason.

Předkládaný vynález se také vztahuje na sloučeniny tohoto vynálezu vhodné pro použití pro léčení a pro použití sloučenin pro přípravu prostředků pro léčení rakoviny.

• ♦Φ • * · · · * • · · φ · · · φ · φ φ · • · · · · · • φ φ · φ ··· · ·* · · φφφφ

Cytotoxická aktivita

Buněčné kultury. Buňky byly sklizeny v logaritmické růstové fázi na Eaglově minimálním základovém médiu s Eaglovými doplňkovými solemi s 2,0 mM glutaminem, s neesenciálními aminokyselinami, bez uhličitanu sodného (EMEM/neaa); doplněného o 10 % plodového telecího séra (FCS), a roztoku 10'^{1 2 *} M uhličitanu sodného a 0,1 g/1 penicilinu G a síranu streptomycinu.

Byla provedena jednoduchá rastrovací procedura, aby se zjistily a srovnaly protinádorové aktivity těchto sloučenin a byla použita adaptovaná forma, která byla popsána v Bergeron et al. (1984). Použitá buněčná nádorová linie P-388 (suspenzní kultura lymfoidních plasmatických buněk zDBA/2 myši), A-549 (jednovrstevná kultura rakovinových buněk lidské plíce), HT-29 (jednovrstevná kultura rakovinových buněk lidského tlustého střeva) a MEL-28 (jednovrstevná kultura rakovinových buněk lidského melanomu).

Buňky P-388 byly naočkovány do 16 mm jamek při koncentraci lxlO⁴ buněk na jamku v 1 ml alikvotního média MEM 5FCS obsahujícího příslušné koncentrace léčiva. Jako kontrola růstu byla použita separátní sada bez léčiv zajišťující, aby buňky setrvávaly v exponenciální fázi růstu. Všechna zjištění byla prováděna dvakrát. Po 3 dnech inkubace při teplotě 37 °C v atmosféře o koncentraci 10 % CO2 a 98 % vlhkosti byla přibližná hodnota IC50 zjištěna srovnáním růstu buněk v jamkách s léčivem s růstem buněk v kontrolních jamkách.

A-549, HT-29 a MEL-28 388 byly naočkovány do 16 mm jamek při koncentraci 2xl0⁴ buněk na jamku v 1 ml alikvotního média MEM 10FCS obsahujícího příslušné koncentrace léčiva. Jako kontrola růstu byla použita separátní sada bez léčiv zajišťující, aby buňky setrvávaly v exponenciální fázi růstu. Všechna zjištění byla prováděna dvakrát. Po 3 dnech inkubace při teplotě 37 °C v atmosféře o koncentraci 10 % CO2 a 98 % vlhkosti byly jamky obarveny 0,1 % Genciánovou violetí. Přibližná hodnota IC50 byla zjištěna srovnáním růstu buněk v jamkách s léčivem s růstem buněk v kontrolních jamkách.

1. Raymond J. Bergeron, Paul F. Cavanaugh, Jr., Steven J. Kline, Robert G. Hughes, Jr.,

Gary T. Elliot and Carl W. Porter. Antineoplastic and antiherpetic activity of spermidine catecholamide iron chelators. Biochem. Bioph. Res. Comm. 1984, 121 (3) 848 - 854.

2. Alan C. Schroeder, Robert G. Hughes, Jr. and Alexander Bloch. Effects of Acyclic

Pyrimidine Nucleoside Analoges. J. Med. Chem. 1981, 24 1078 - 1083.

• · ·· ♦ ··♦ ♦ · • · · · ·· ·· ·· • « • · • · • ·«

Příklady biologických účinných sloučenin popsaných v předkládaném vynálezu jsou uvedeny v tabulce IV (IC50 (ng/ml)) na následující stránce.

·· • 4 4 4 · » «·4

94 • 4 4

9 ·

9 4

4 9

4449

DU-145

cř

•A θ'

cř

«Α θ'

O

g

3

tA OK

o cm1“

O

o o

•a o

*A «θ'

s*

£

o

o

o *z?

O

O <a

oo 1 u ω s

o

«Α O*

5-

*A cř

o Τ—»

1

*A θ'

m os

O *»

O

o o

v> cř*

S- o

o Ί»

<ř

o ·»

o

&

o «V

O % ·*<·

o «Α

HT-29

5·

v> cř

o

Ά o

o

g

2

o *w

O «*·

o o c*

ΙΛ o

O *»

<A O~

A. ·“·

•A Ox

o *«. «**«·

o

£

O *w

o w*»

O «Λ

A-549

o*

lA O*

·- O*

2-

s*

g

»α ο

S'

o

O

o o

*A cT

O •K

<a ©*

o_

«a o~

o

o o

o ví

O *·»

g

OO oo cn ώ

S-

Ά o

θ'

*A θ'

o

§

*» θ'

*n o*

o >1

o

o o

»n θ'

*A θ'

o Κ»

<ř

o >»

o o

o v?

O ·>

s

o •A

P?

o <

O <

o <

o <

•íc

ο <

o <

3

o <

o

3

o <

o <

o <

o <

o <

o <

O <

u <

o <

O <

><

X o

X o

X o

X o

X o

δ

X Ο

X o

X o

X o

X o

X o

δ

X o

X o

X o

X o

X o

X o

X o

X O

X o

u s

4A 2

o

V 2

4» 2

«> 2

V 2

v 2

o 2

4> 2

o 2

2

2

i

o 2

o 2

o 2

Q> 2

41 2

v 2

ž

v 2

1 X z %

• X £

ώ 1 s δ

ac § « δ δ «Μ -Ί5 X υ

1 X § <9 -Ti X o ✓ m δ

i o n δ '•í δ

X z § £

1 X § c c 0

t X I i

« X § c *£S Ž

I X 1 | í

I X z c m

• X Ž

i ! cd X z

• X z 8 cd Ϊ ώ <

1 X § 5 c U

1 X i ffl > * ffl < ac z

1 X 0 cd > ά I <

• X i ffl < 8 e c 0

» X § 1. X z

ά z § i u

» X § X δ % § E o.

Sloučenina

cd M·

$

o M-

Ό

$

«+-Ι -*!·

bO Xt

xi

• c-( <fr

Xt

·?

o

O. -5t

cr 'ď

£

=J

> Μ

X ΤΓ

>>

·· ·* • « · · • · · • ··· • * « · · ♦ · · « * ·· ·· • · • · • · • ·· ·** » »

4 ·♦ »···

O K

O

o v.

o Η»

o v.

ί

V» θ'

A.

S-

C3~

o •b.

& ♦—· Λ

5·

3- O

O v?

v\

-

VI

g

O ·*

o v

O «0.

o >»fc

o *.

O V?

v> e>

O ·*

es

ď

O s «Μ

7

3·

VI ©·

o vT

V*

-

v>

2

o

»»·

Λ

5

o ·*>.

O

o ν'»

O

o o

VI θ'

2

§

© *»·

o

o

O ·*.

O o 7

5-

Ί o

o ví*

v%

-

V»

g

o X

·<·

o %

7

2-

o •s. «··

2-

O v>^

o

8

2

O

§ *<

A. ♦“·

o

3

o u-

O 7

cř

*Λ O*

o v>*

v>

-

o

8

Vl ©*

A. r—·

o

o

S-

O v?

V» o'

o ·»

o

o

o s

<b Λ

*m4 ©

V» cř

©

V>

-

2

8

o <

O <

«Se

o <

<j <

o <

o <

o <

X

•2Ž

<

X

o <

4ž

£

O <

O <

o <

o <

U <

O <

O <

I o

X o

δ

§

X o

X O

X o

δ

δ

δ

δ

z υ

δ

δ

z U

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

o S

o 2

o s

Cl 2

W s

s

v s

2

o Σ

X

2

V 2

X

o 2

V 2

2

v 2

o 2

2

2

o 2

v Σ

£

« 2

CA 2

AcO-

'TS· X % δ

< δ 'w-' X υ

1 X Q

B u

£ <8

« 2 < «

X z

X z

X z

X ξ <

» X Z o <

1 X

« X i <w U-

EC § X š δ

• X 1 s S δ '••z

X š s

1 X Z ξ X o

X 0 J5 cu

Á S 0

1 z š

1

« X I

X š 1 S

» X z a S X X

rt —< (N

u CN

ω *—< cn

*4-4 «*4 cs

43 »—« CN

«ΜΟ4 » |'< CN

& CN

r- CN

co CN

Tt CN

αί m

v> CN

vo CM

45 m

o co

•o cn

o fA

(M co

ω> <n

43 CO

»** m

v*» tn

vo

Ai co

rO

·· «· • * · · • · · • · ·· * • · ···· · · ·· ·♦ • 4 4 • · · • · · • · 4 ·· ····

o

V* c?

—

-

—

-

o

-

—

-

o

o «Λ

O *A

5

Ά

•-M o-

O

o

O

1 A

·—» «Γ

1 1

A.

o

«Λ o

-

—

—

-

o

—

-

-

•«•w o

O v>

O tA

<A

5-

<=í v>

Ξ-

o ·»

g O A

©

—

o *·

o

θ'

•a

··

*»*

-

-

o

-

©'

o

O *Λ

o »»<

Ά

o

5*

o v?

A «·«

o «k

g O 7

o'

»·

o_ ^a»

o

O%

*n

—

—

—

-

O

—

-

cf

o

O •Λ

o

*A

o

θ'

A

o

o o o 7

•M θ'

«·*

A

o

Ά O

-

-

-

—

o

«η

-

-

o*

o

s

A. *·

<A

θ'

£

o

o

X

θ'

-

A

o <

O <

tí <

o <

<3

Q <

o <

o <

<

o <

o <

o <

a <

o <

3

Q <

o <

u <

«2

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

δ

z u

δ

z u

δ

δ

δ

z u

g

δ

41 2

v 2

1

2

š

2

o 2

£

Š

4) 2

2

2

O 2

o 2

O 2

o 2

v 2

o 2

2

2

2

v 2

2

< z Λ **« X u

X ξ OQ

• α.

• X § T3 * X Z

X l « > t z ύ <

1 X l *o3 | 0

x δ o «α > tb < k. X z

1 X § I i

1 X Z § 3 > i O

X z 8 so < a ÍC Z

ύ Z § 1 ξ

« X ! 1 á c c 0

a X < X 9 £

g X £ X 9 υ CA ,E Pu

1 X 1 υ

1 o X

Ó X *

•

á % u-

š CM -7J δ £ o

I 7ϊ δ H δ

X □ X u

c c *« υ

a ««1 O V3 w 2

s < «

ε m

O eA

o **>

<x

cr m

m

M <n

CO

> m

Λ

X m

>» m

N m

oo Oí

* Ό ♦«M

«a r-

£

o r* «a

O r- «“<

Uh Γ f“W

X« r- v—|

r—4 r-

« <4 00 ·«*

• »

Λ • · • · • · • · · ·

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Metoda A: Do roztoku 1 ekv. sloučeniny 1 (23 pro tvorbu 25) odpařeného spolu sbezvodým toluenem vCH₂Cl₂ (0,08 M) v atmosféře argonu bylo přidáno 1,2 ekv. anhydridu. Po reakci byla provedena TLC a reakce byla ukončena kyselinou nebo bází, směs byla extrahována CH₂C1₂ a organické vrstvy byly vysušeny Na₂SO4. Po chromatografii byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 2a (použitím Ac₂O jako anhydridu): ^lH NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,77 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,53 (bd, 1H),

5,18 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,58 (ddd, 1H), 4,52 (bs, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,19 - 4,15 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 3,54 - 3,43 (m, 2H), 2,93 (bd, 2H), 2,35 - 2,02 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,89 (s,

3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,5, 168,7, 168,4, 149,7, 148,5, 145,8, 141,0, 140,4,

131,0, 130,5, 125,7, 124,5, 120,3, 117,9, 113,5, 113,4, 102,0, 99,1, 61,4, 60,3, 59,6, 58,8, 55,0, 54,5, 52,1, 41,8, 41,3, 32,6, 23,7, 20,9, 20,2, 16,1, 9,5; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C35H40N4O10S: 708,2. Nalezeno (M+H⁺): 709,2.

Sloučenina 2b (použitím (F₃CCO)₂O jako anhydridu): *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,74 (s, 1H), 6,41 (bd, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,05 (d, 1H), 4,60 (bp, 1H), 4,54 - 4,51 (m, 1H), 4,36 - 4,32 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,48 - 3,43 (m, 2H), 2,99 - 2,82 (m, 2H), 2,46 - 2,41 (m, 1H), 2,30 - 2,03 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,04 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 168,9, 168,5, 156,3, 155,8, 155,3,

149,3, 148,5, 146,0, 141,2, 140,6, 132,0, 130,2, 124,8, 120,2, 117,9, 113,2, 102,1, 99,2, 61,5, 60,6, 59,7, 59,1, 58,7, 57,5, 54,9, 54,6, 52,9, 42,0, 41,4, 31,6, 23,8, 20,2, 14,1, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C35H37F3N4O10S: 762,2. Nalezeno (M+H⁺): 763,2.

·· *·

Sloučenina 21 (použitím anhydridu kyseliny jantarové); *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,79 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,63 (bd, 1H), 5,18 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,59 - 4,53 (m, 2H), 4,35 (d, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,21 - 4,17 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,54 - 3,44 (m, 2H), 2,92 (bd, 2H), 2,69 - 2,63 (m, 2H), 2,53 - 2,48 (m, 2H), 2,38 - 2,07 (m, 2H), 2,28 (s, 6H), 2,18 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C37H42N4O12S: 766,2. Nalezeno (M+H⁺): 767,3.

Sloučenina 25 (ze sloučeniny 23 použitím 1 ekv. Ac₂O jako anhydridu); ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,59 (s, 1H), 5,97 (dd, 2H), 5,87 (s, 1H), 5,53 (s, 1H), 5,51 (d, 2H), 5,00 (d, 1H), 4,62 - 4,58 (m, 1H), 4,44 (s, 1H), 4,31 (s, 1H), 4,29 (d, 1H), 4,16 (d, 1H), 4,09 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,54 - 3,52 (m, 1H), 3,44 3,42 (m, 1H), 2,93 - 2,91 (m, 2H), 2,46 (dd, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,23 (dd, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,90 (s, 1H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,1, 169,0, 148,3, 146,4, 146,0, 143,0, 136,4, 130,7, 129,2, 120,4, 119,0, 118,1, 112,4, 112,3, 107,8, 101,4, 61,1, 60,5, 59,2, 58,8, 54,7, 54,5, 51,6, 43,3, 41,4, 31,4, 23,8, 22,9, 16,2, 8,7; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^H^N^S: 580,2. Nalezeno (M+H⁺): 581,3.

Příklad 2

Metoda B: Do roztoku 1 ekv. 1 (2p pro 2t a 9 a 11 pro 13e-f) a 1,5 ekv. kyseliny dvakrát odpařené s bezvodým toluenem v CH₂C1₂ (0,05 M) v atmosféře argonu byly přidány 2 ekv. DMAP a 2 ekv. EDC.HC1. Reakční směs byla míchána po dobu 3 hodin a 30 minut. Po této době byla směs zředěna CH₂C1₂, promyta nesyceným vodným roztokem chloridu sodného a organická vrstva byla vysušena Na₂SC>4. Po chromatografii byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 2e (použitím CH₃(CH₂)₆CO₂H jako kyseliny): ^]H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,76 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,50 (bd, 1H), 5,18 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,60 (ddd, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 4,18 (dd, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,48 - 3,43 (m, 2H), 2,93 (bd, 2H), ·» ·♦ ♦ ·

2,29 - 1,99 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,31-1,23 (m, 10H), 0,89 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,9, 170,6, 168,4, 149,6, 148,5, 145,8, 141,0 140,4, 130,9, 130,5, 125,7, 124,5, 120,4, 117,9, 113,4, 102,0, 99,2, 61,5, 60,2, 59,6,

59.3, 58,7, 57,5, 55,0, 54,5, 51,9, 41,8, 41,4, 36,4, 32,7, 31,7, 29,3, 29,1, 25,4, 23,7, 22,6,

20.3, 16,1, 14,0, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C41H52N4O10S: 792,3. Nalezeno (M+H⁺):

793.3,

Sloučenina 2f (použitím CH₃(CH₂)6CO₂H jako kyseliny): ’H CH3<CH2>14 _zNHq^Z _{nmr (3θ0 MHz}, _{CDCl3); δ 6 76 (s> 1H)> 6 θ5 (dd}, _{2H)j 5 5θ} .Me (bd, 1H), 5,18 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,60 (ddd, 1H), 4,56 - 4,50 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,28 (bs, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,28 (bs, 1H), 4,20 (d, 1H), 4,18 (dd, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,54 - 3,44 (m, 2H), 2,93 - 2,92 (bd, 2H), 2,37 - 2,01 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,28 (3H), 2,18 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,60 - 1,56 (m, 2H), 1,40 - 1,20 (m, 24H), 0,88 (t, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C49H₆₈N40ioS: 904,5. Nalezeno (M+H⁺): 905,5.

Sloučenina 2g (použitím PhCO₂H jako kyseliny): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,69 - 7,66 (m, 2H), 7,57 - 7,46 (m, 3H), 6,69 (s, 1H), 6,35 (d, 1H), 6,06 (dd, 2H), 5,14 (dd, 2H), 5,07 (d, 1H), 4,76 (dt, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,36 - 4,33 (m, 2H), 4,24 - 4,18 (m, 2H), 3,62 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 3,49 - 3,46 (m, 2H), 2,94 (bd, 2H), 2,62 -2,55 (m, 1H), 2,28 - 1,93 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,5, 168,4, 166,4, 149,3, 148,4, 145,9, 141,1, 140,6, 134,5, 134,2, 131,6,

131,4, 130,5, 128,6, 126,9, 125,2, 124,5, 120,7, 118,0, 113,4, 102,0, 99,2, 61,6, 60,2, 59,8,

59,2, 58,6, 57,4, 55,0, 54,6, 53,2, 41,9, 41,4, 32,9, 23,9, 20,2, 15,7, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C40H42N4O10S: 770,3. Nalezeno (M+H⁺): 771,3.

Sloučenina 2k (použitím (+)-biotinu jako kyseliny): ^jH NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,78 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 6,00 (s, 1H), 5,80 (s, 1H), 5,39 (bd, 1H), 5,18 (dd, 3H), 4,78 (d, 1H), 4,64 - 4,51 (m, 3H), 4,34 - 4,28 (m, 3H),

4,19 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,47 - 3,39 (m, *· ·« • « · * v · ·

999 ·

9999 99 » ♦♦ • · • « • · • ·

2H), 3,19 - 3,13 (m, 1H), 3,02 - 2,74 (m, 4H), 2,28 - 1,47 (m, 1OH), 2,28 (s, 6H), 2,14 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,3, 171,3, 165,6, 163,7, 149,6, 148,4, 145,9, 141,0, 140,5, 131,1, 130,7, 125,8, 124,8, 120,2, 118,4, 113,7, 113,3, 102,0, 99,1, 61,5, 61,4,

61,3, 60,0, 59,6, 59,3, 58,4, 57,4, 56,1, 55,2, 54,6, 51,8, 42,2, 41,3, 41,1, 35,2, 32,1, 28,2,

28,1, 25,4, 24,0, 20,3, 16,1, 9,5; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C43H52N6O11S2: 892,3. Nalezeno (M+H⁺): 894,1.

Sloučenina 2t (ze sloučeniny 2p použitím Ac-L-alaninu ^AcHN jako kyseliny): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,74 (s, 1H),

6,60 - 6,56 (m, 1H), 6,26 (bt, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,58 (bt, 1H), 5,17 (dd, 2H), 5,00 (d, 1H), 4,64 - 4,60 (m, 1H), 4,56 (bp, 1H), 4,48 (dt, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,20 4,14 (m, 2H), 4,12 - 4,05 (m, 1H), 3,75, 3,76 (2s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,47 - 3,42 (m, 2H), 2,98 - 2,89 (m, 2H), 2,42 1,98 (m, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,36, 1,33 (2d, 3H), 1,06, 1,03 (2d, 3H), 0,94, 0,93 (2d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,9, 170,2, 169,6, 169,7, 168,5, 149,6, 148,6, 145,9, 141,1, 140,5, 131,8, 130,3, 125,4, 124,4,

120,3,117,9, 113,4,102,0, 99,2, 61,5, 60,2, 59,6, 59,4, 59,3, 58,5, 57,8, 57,7, 57,4, 54,9, 54,5, 52,0, 51,9, 48,9, 48,8, 42,0, 41,3, 32,7, 32,2, 32,1, 23,8, 23,1, 23,1, 20,3, 19,2, 19,2, 19,1,

18,4, 17,7, 17,7, 16,2, 9,5. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C4₃H₅4N₆Oi2S: 878,3. Nalezeno (M+H⁺): 879,2.

Sloučenina 2w (použitím Ac-L-alaninu jako kyseliny): NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,89, 6,77 (2s, 1H), 6,25 (dd, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,72, 5,55 (2bd, 1H), 5,22 - 5,13 (2dd, 2H), 5,02, 5,01 (2d, 1H), 4,60 - 4,18 (m, 7 H), 3,77, 3,74 (2s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,48 - 3,43 (m, 2H), 2,93 - 2,91 (bd, 2H), 2,42 - 1,98 (m, 2H), 2,42, 2,37 (2s, 3H), 2,29, 2,28 (2s, 3H), 2,17, 2,15 (2s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,99, 1,97 (2s, 3H),

1,46, 1,22 (2d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,5, 170,1, 169,9, 169,3, 169,2, 168,6,

149.8, 149,4, 148,7, 148,5, 145,9, 141,1, 140,5, 140,4, 132,0, 131,6, 130,6, 130,2, 125,5,

124.9, 124,4, 120,4, 120,2, 117,9, 113,6, 113,4, 102,0, 99,2, 61,6, 61,5, 60,4, 60,3, 59,6, 59,5,

59,4, 59,2, 58,8, 58,3, 57,5, 55,0, 55,0, 54,6, 52,2, 51,8, 48,6, 48,5, 42,1, 42,0, 41,4, 32,5, *· «4 4 · ·· *· · é * ·· ·· · · 9 · · » · · · » « ··♦ « · · t · · · • · « · · · · ···« ·· >Λ· «·« 4« Μ··

32,4, 23,8, 23,7, 23,2, 23,2, 20,3, 19,9, 19,8, 16,0, 15,9, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C38H45N5O11S: 779,3. Nalezeno (M+H⁺): 780,2.

1Γ™* ΝΗ_λ ^ζ

Sloučenina 2y (použitím FmSCH2CH(NHAlloc)-CO₂H jako kyseliny): ’H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7,77 - 7,67 (m, 4H), 7,42 - 7,26 (m, 4H), 6,75 (s, 1H), 6,12 (bd, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,97 - 5,88 (m, 1H), 5,53 (bd, 1H), 5,35 - 5,21 (m, 2H), 5,15 (dd, 2H), 4,99 (d, 1H), 4,61 - 4,55 (m, 4H), 4,34 (d, 1H), 4,30 (s, 1H),

4,20 - 4,17 (m, 4H), 3,70 (s, 3H), 3,54 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,45 - 3,40 (m, 1H), 3,21 - 3,14 (m, 1H), 3,04 2,83 (m, 5H), 2,41 - 2,03 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C54H₅₇N₅Oi2S2: 1031,3. Nalezeno (M⁺): 1032,2.

Sloučenina 7 (použitím Boc-L-valinu jako kyseliny): ‘H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,80 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,86 (bd, 1H), 5,15 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,98 (bd, 1H), 4,63 - 4,60 (m, 1H),

4,55 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,30 (s, 1H), 4,22 - 4,16 (m, 2H), 3,83 (dd, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,48 - 3,42 (m, 2H), 2,93 - 2,90 (m, 2H), 2,41 - 2,03 (m, 3H), 2,41 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,01 (d, 3H), 0,87 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,4, 170,2, 168,5, 165,2, 155,3, 148,6,145,9,141,1, 140,5, 131,6, 130,4, 125,5, 124,5, 120,5, 118,0, 113,5, 113,4, 102,0, 99,2, 61,6, 60,0, 59,6,

59,3, 58,4, 57,5, 55,0, 54,6, 52,1, 42,0, 41,4, 32,7, 31,6, 28,3, 23,8, 20,2, 19,1, 17,5, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C43H₅₅N₅Oi2S: 865,4. Nalezeno (M+H⁺): 866,3.

Sloučenina 8 (použitím Boc-L-alaninu jako kyseliny): ’H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,81 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,86 (bp, 1H), 5,16 (dd, 2H), 5,03 (bp, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,56 - 4,50 (m, 2H), 4,34 (d, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,20 - 4,15 (m, 2H), 3,98 - 3,78 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 3,47 - 3,43 (m, 2H), 2,91 (bd, 2H), 2,37 - 2,02 (m, 2H), 2,37 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,37 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,5, 170,1,

168,4, 154,6, 149,5, 148,5, 145,8, 141,0, 140,4, 131,3, 130,4, 125,6, 124,4, 120,3, 117,9,

113.3, 101,9, 99,1, 61,4, 60,1, 59,6, 59,2, 58,5, 57,4, 54,9, 54,4, 52,1, 49,9, 41,8, 41,3, 32,4,

28.3, 23,8, 20,2, 19,5, 16,1, 9,5. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C41H51N5O12S: 837,3. Nalezeno (M+H⁺): 838,4.

BocHN

Sloučenina 9 (použitím Boc-L-alaninu jako kyseliny): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,76 (s, 1H), 6,66 (bd, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,58 (bd, 1H), 5,17 (dd, 2H), 5,01 (d, 1H), 4,99 (bp, 1H), 4,66 - 4,63 (m, 1H), 4,56 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,19 - 4,05 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,47 - 3,42 (m, 2H), 2,92 - 2,89 (m, 2H), 2,44 - 2,02 (m, 3H), 2,44 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s,

3H), 1,41 (s, 9H), 1,32 (d, 3H), 1,03 (d, 3H), 0,93 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ

172,1, 170,2, 169,7, 168,5, 149,7, 148,7, 145,9, 141,0, 140,5, 132,0, 130,2, 125,3, 124,4, 120,3,117,9,113,5, 102,0, 99,2, 61,5, 60,2, 59,6, 59,4, 58,5, 57,7, 57,4, 55,0, 54,6, 51,9, 50,2, 42,0, 41,4, 32,7, 32,2, 28,2, 23,8, 20,3, 19,1, 18,1, 17,8, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C46H60N6O13S: 936,4. Nalezeno (M⁺): 937,2.

Sloučenina 13e (použitím 5 ekv. CH3(CH₂)₅CO₂H jako kyseliny, 7 ekv. DMAP a 7 ekv. EDC-HC1): *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,68 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 - 4,98 (m, 2H), 4,56 (bp, 1H), 4,34 (d, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 4,11 (dd, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,42 - 3,39 (m, 1H), 2,89 - 2,87 (m, 2H), 2,32 - 1,96 (m, 4H), 2,30 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,60

- 1,55 (m, 2H), 1,32 - 1,23 (m, 8H), 0,90 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,5,168,6, 167;l, 148,9, 148,2, 145,8, 141,1, 140,6, 130,7, 125,3, 125,1, 124,7, 120,9, 118,1, 113,6,

113.1, 102,0, 99,2, 71,4, 61,5, 60,0, 59,8, 59,2, 58,6, 57,4, 55,0, 54,6, 41,6, 41,5, 33,8, 31,7,

29.1, 28,9, 24,7, 23,9, 22,6, 20,2, 15,9,14,0, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C41H51N3O11S:

793,3. Nalezeno (M+H⁺): 794,9.

Sloučenina 13f (použitím 4 ekv. CH₃(CH₂)i4CO₂H jako kyseliny, 6 ekv. DMAP a 6 ekv. EDCHC1): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,68 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 - 4,98 (m, 2H), 4,56 (bp, 1H), 4,34 (d, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 4,12 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,45 - 3,41 (m, 1H), 2,89 - 2,87 (m, 2H), 2,37 1,96 (m, 4H), 2,30 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,63 - 1,58 (m, 2H), 1,35 - 1,23 (m, 24H), 0,88 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3):

172,6, 168,6, 167,1, 148,9, 148,2, 145,8, 141,1, 140,6, 130,7, 125,3, 125,1, 124,7, 120,9,

118,1, 113,6, 113,1, 102,0, 99,2, 71,4, 61,5, 60,0, 59,8, 59,2, 58,6, 57,4, 55,0, 54,6,41,6, 41,5,

33,9, 31,9, 31,7, 30,9, 29,7,29,5, 29,3, 29,3, 29,2, 29,1,24,7, 23,9, 22,7,20,2, 15,9, 14,1, 9,6.

Příklad 3

Metoda C: Do roztoku 1 ekv. 1 odpařeného dvakrát spolu s bezvodým toluenem v CH₂C1₂ (0,05 M) v atmosféře argonu bylo přidáno 1,05 ekv. anhydridu kyseliny fialové. Po 30 minutách byla reakční směs ochlazena na 0 °C a bylo přidáno 2,5 ekv. Et₃N a 1,5 ekv. ClCO₂Et. O 5 minut později byla reakční směs zahřáta na pokojovou teplotu a míchána po dobu 7 hodin. Potom byla zředěna CH₂C1₂, promyta nasyceným vodným roztokem NaHCO₃ a organická vrstva byla vysušena Na₂SO4. Po chromatografii (hexan/EtOAc, 3:2) byla získána sloučenina 2d v 85 % výtěžku.

Sloučenina 2j: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,91 - 7,70 (m, 4H), 6,67 (s, 1H), 6,06 (dd, 2H), 5,19 (dd, 2H), 5,05 (d, 1H),

4,64 - 4,62 (m, 2H), 4,37 (d, 1H), 4,32 (s, 1H), 4,20 (d, 1H), 4,12 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,50 (d, 1H), 3,41 3,40 (m, 1H), 2,85 - 2,83 (m, 2H), 2,36 - 2,11 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,05 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C41H40N4O11S: 796,2. Nalezeno (M+H⁺): 797,2.

Příklad 4

Metoda D: Do roztoku 1 ekv. 1 v CH₃CN/CH₂C1₂ 3:1 (0,025 M) v atmosféře argonu byl přidán 1 ekv. formalinového roztoku (37 %) a 1 ekv. NaCNBH₃. Roztok byl míchán při pokojové teplotě po dobu 30 minut. Potom byly přidány 2 ekv. kyseliny octové a roztok • · změnil barvu na oranžovo-žlutou a reakční směs byla míchána po dobu 1 hodiny a 30 minut. Po této době byla reakční směs zředěna CH₂C1₂, zneutralizována NaHCO₃ a extrahována CH₂C1₂. Organická vrstva byla vysušena Na₂SO4. Po chromatografii byla získána čistá sloučenina.

Me_x Me N O^Z

Sloučenina 2m: NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,66 (s, 1H),

6,03 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 4,98 (d, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,32 (d, 1H), 4,25 (s, 1H), 4,15 - 4,13 (m, 1H), 3,95 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,54 - 3,41 (m, 3H), 2,92 - 2,80 (m, 2H),

2,33 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,17 - 2,07 (bp, 6H), 2,16 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,86 (dd, 2H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro

C35H₄₂N4O₉S: 694,3. Nalezeno (M+H⁺): 695,3.

Příklad 5

Metoda E: Do roztoku 1 ekv. 1 (3p pro 3q-r, 3s pro 3u, 3v pro 3x, 11 pro 13c, 13h, 131 a 24 pro 26) vCH₂C1₂ (0,08 M) v atmosféře argonu bylo při pokojové teplotě přidáno 1,1 ekv. pyridinu. Potom byla reakční směs ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přidáno 1,1 ekv. chloridu kyseliny octové. O 5 minut později byla reakční směs zahřáta na pokojovou teplotu a míchána po dobu 45 minut. Potom byla zředěna CH₂C1₂, promyta nasyceným vodným roztokem NaCl a organická vrstva byla vysušena Na₂SC>4. Po chromatografii byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 2c (použitím butyryl chloridu): *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,76 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,52 (bd, 1H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,61 (ddd, 1H), 4,52 (bp, 1H),

4.34 (dd, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 4,17 (dd, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,47 - 3,43 (m, 2H), 2,92 (bd, 2H),

2.34 - 1,98 (m, 4H), 2,28 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,71 - 1,58 (m, 2H), 0,96 (t, 3H); ¹³C NMR (75

MHz, CDCI3): δ 171,7, 170,6, 168,4, 149,6, 148,5, 145,8, 141,0, 140,4, 131,0, 130,5, 125,7,

124,6, 120,4, 117,9, 113,4, 102,0, 99,1, 61,5, 60,1, 59,6, 59,2, 58,6, 57,4, 55,0, 54,5, 51,9,

41,8, 41,3, 38,2, 32,7, 23,7, 20,2, 18,8, 16,1, 13,7, 9,5. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C37H44N4O10S: 736,3. Nalezeno (M+H⁺): 737,2.

• 9 • ···

Sloučenina 2d (použitím isovaleryl chloridu): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,76 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,50 (bd, 1H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 (d, 1H), 4,63 (ddd, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,35 (dd, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,20 (d, 1H), 4,18 (dd, 1H), 3,76 (s, 3H),

3,56 (s, 3H), 3,47 - 3,43 (m, 2H), 2,92 (bd, 2H), 2,30 - 1,92 (m, 5H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 0,99 (d, 3H), 0,93 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCb): δ 171,3, 170,6, 168,4, 149,6, 148,5, 141,0,

140,5, 130,9, 130,5, 125,7, 124,6, 120,4, 118,0, 113,5, 113,4, 102,0, 99,2, 61,5, 60,1, 59,6,

59,3, 58,6, 57,5, 55,0, 54,6, 51,8, 45,6, 41,9, 41,4, 31,8, 25,8, 23,8, 22,5, 22,4, 20,2, 16,3, 9,6.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C38H46N4O10S: 750,3. Nalezeno (M+H⁺): 751,3.

Sloučenina 2h (použitím cinnamoyl chloridu): ^]H NMR (300 MHz, CDCb): δ 7,61 (d, 1H), 7,55 - 7,51 (m, 2H), 7,44 - 7,37 (m, 3H), 6,85 (s, 1H), 6,24 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,72 (d, 1H), 5,16 (dd, 2H), 5,05 (d, 1H), 4,71 (ddd, 1H), 4,54 (bp, 1H), 4,35 (dd, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,22 - 4,17 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,48 - 3,44 (m, 2H), 2,97 - 2,95 (m, 2H),

2,51 - 2,45 (m, 1H), 2,27 - 2,03 (m, 1H), 2,27 (s, 6H), 2,19 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCb): δ 170,5, 168,4, 164,5, 149,7, 148,5, 145,8, 142,1, 141,0, 140,4, 134,7,

131,1, 130,5, 129,8, 128,8, 127,9, 125,5, 124,4, 120,4, 119,7, 118,0, 113,4, 113,3, 102,0, 99,1,

61,4, 60,3, 59,6, 59,2, 58,8, 57,4, 54,9, 54,5, 52,6, 41,7, 41,4, 32,7, 23,8, 20,2, 16,3, 9,6. ESIMS m/z: Vypočteno pro C42H44N4O10S: 796,3. Nalezeno (M+H⁺): 797,2.

Sloučenina 2i (použitím trans-3-(trifluormethyl)cinnamoyl chloridu): ’H NMR (300 MHz, CDCb): δ 7,82 - 7,51 (m, 5H), 6,85 (s, 1H), 6,29 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,75 (d, 1H), 5,17 (dd, 2H), 5,05 (d, 1H), 4,73 - 4,69 (m, 1H), 4,55 (bp, 1H), 4,36 (d, 1H), 4,39 (s, 1H), 4,23 - 4,18 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,48 - 3,44 (m, 2H), 2,96 (bd, 2H), 2,49 - 2,44 (m, 1H), 2,27 - 2,04 (m, 1H),

2,27 (s, 6H), 2,19 (s, 3H), 2,04 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCb): δ 170,3, 168,4, 163,8,

149,7, 148,5, 145,9, 141,1, 140,5, 135,5, 134,6, 131,6, 131,0, 130,6, 129,5, 126,3, 126,2,

125,6, 124,4, 123,7, 123,6, 121,5, 120,3, 117,9, 113,5, 113,3, 102,0, 99,2, 61,4, 60,4, 59,6,

59,2, 58,9, 57,5, 54,9, 54,5, 52,6, 41,8, 41,4, 32,6, 23,8, 20,3, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C43H43N4F3O10S: 864,3. Nalezeno (M+H⁺): 865,0.

Sloučenina 3q (ze sloučeniny 3p použitím acetyl chloridu): *H NMR (300 MHz, CDClj): δ 6,54 (s, 1H), 6,08 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,81 (s, 1H), 5,59 (d, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,67 (dt, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,26 (dd, 1H), 4,21 - 4,16 (m, 1H), 4,09 (dd, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,45 - 3,42 (m, 2H), 2,91 2,88 (m, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,29 - 1,98 (m, 3H), 2,29 (s, 3H),

2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,06 (d, 3H), 0,96 (d,

3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,2, 169,5, 168,6,

148,1, 145,9, 143,3, 141,1, 140,4, 130,4, 130,1, 120,4, 120,2,118,5,118,0,113,5,102,0, 61,4,

60,4, 59,3, 58,8, 57,7, 54,7, 54,6, 51,8, 42,0, 41,5, 32,7, 32,3, 23,8, 23,3, 20,5, 19,1, 18,0,

16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C38H45N5O10S: 763,3. Nalezeno (M+H⁺): 764,3.

Sloučenina 3r (ze sloučeniny 3p použitím cinnamoyl chloridu): *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7,59 (d, 1H), 7,50 - 7,46 (m, 2H), 7,37 - 7,34 (m, 3H), 6,57 (s, 1H), 6,42 (d, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,81 (s, 1H),

5,64 (d, 1H), 5,03 (d, 1H), 4,70 - 4,67 (m, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,30 - 4,24 (m, 3H), 4,21 - 4,17 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,45 (bd, 2H), 2,92 - 2,89 (m, 2H), 2,56 (s, 3H), 2,28

- 2,03 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,10 (d, 3H), 1,00 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 170,2, 170,1, 169,4, 168,5, 165,3, 148,1, 145,9, 143,4, 141,2, 140,4,

134,8, 130,5, 130,1, 129,7, 128,8, 127,8, 120,6, 120,4, 120,2, 118,5, 118,0, 113,5, 113,5, 102,0, 61,4, 60,4, 59,4, 58,9, 57,7, 54,7, 54,6, 51,9, 42,0, 41,5, 32,7, 23,8, 20,5, 19,2, 18,0,

16,4, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro Cas^NsOioS: 851,3. Nalezeno (M+H⁺): 852,3.

• ·

Sloučenina 3u (ze sloučeniny 3s použitím cinnamoyl chloridu): 'H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7,63 (d, 1H), 7,50 - 7,47 (m, 2H), 7,38 - 7,35 (m, 3H), 6,62 (d, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,41 (d, 1H), 6,35 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,82 (s, 1H), 5,60 (d, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,68 - 4,60 (m, 2H), 4,58 (bp, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,26 (dd, 1H), 4,21 - 4,15 (m, 2H), 4,10 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,45 - 3,43 (m, 2H), 2,91 - 2,88 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,30 - 2,03 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,41 (d, 3H), 1,04 (d, 3H), 0,94 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,8, 170,2, 169,6, 168,5, 165,4, 148,0,

145,9, 143,3, 141,6, 141,1, 140,5, 134,7, 130,6, 129,8, 129,8, 128,8, 127,8, 120,3, 120,1,

118,7, 118,0, 113,5, 102,0, 61,5, 60,3, 59,4, 58,8, 57,8, 54,7, 54,6, 51,9, 49,0, 42,1, 41,5, 32,6,

32,3, 23,8, 20,5, 19,2, 18,6, 17,7, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C48H54N6O11S:

922,4. Nalezeno (M+H⁺): 923,1.

Sloučenina 3x (ze sloučeniny 3v použitím cinnamoyl chloridu): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,60 (d, 1H), 7,49 - 7,46 (m, 2H), 7,37 - 7,34 (m, 3H), 6,59 (s, 1H), 6,48 (d, 1H), 6,39 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,84 (s, 1H), 5,58 (d, 1H), 5,03 (d, 1H), 4,64 - 4,59 (m, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,36 - 4,8 (m, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,26 (d, 1H), 4,22 - 4,17 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,45 - 3,43 (m, 2H), 2,92 (d, 2H), 2,53 (s, 3H), 2,28 - 2,03 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,54 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,4, 170,1, 168,6, 164,9,

148,2, 145,9, 143,2, 141,1, 134,8, 130,5, 130,0, 129,7, 128,8, 127,8, 120,4, 120,4, 120,0,

118,8, 118,0, 113,6, 113,4, 102,0, 61,4, 60,6, 60,4, 59,3, 59,1, 54,8, 54,6, 51,7, 48,7, 41,9, 41,5, 32,5, 23,8, 20,5, 20,0, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C43H45N5O10S: 823,3. Nalezeno (M+H⁺): 824,3.

Sloučenina 13c (ze sloučeniny 11 použitím 20 ekv. butyryl chloridu a 30 ekv. pyr): Ή NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,68 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 (bt, 1H), 5,01 (d, 1H),

4,57 (bp, 1H), 4,34 (dd, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,19 (d, 1H), 4,12 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,45 - 3,42 (m,

1H), 2,88 (bd, 2H), 2,30 -2,16 (m, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 2,02 - 1,96 (m, 1H), 1,68 - 1,56 (m, 2H), 0,98 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,5,

168.8, 167,3, 149,1, 148,4,146,0, 141,3, 140,9, 131,0, 125,6, 125,0, 121,2, 118,3, 113,8,

113,3, 102,2, 99,4, 71,7, 61,7, 60,3, 60,0, 59,4, 58,8, 57,6, 55,2, 54,9, 41,9, 41,7, 36,1, 32,0,

24.2, 20,5, 18,5, 16,1, 13,9, 9,8. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C37H43N3O11S: 737,3. Nalezeno (M+Na⁺): 760,2.

Sloučenina 13h (ze sloučeniny 11 použitím 5 ekv, cinnamoyl chloridu, 7,5 ekv. pyr a CH₃CN jako spolurozpouštědla): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,68 (d, 1H), 7,56 - 7,53 (m, 2H), 7,43 - 7,39 (m, 3H), 6,72 (s, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,22 - 5,13 (m, 3H), 5,04 (d, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,31 (s, 1H), 4,21 (d, 1H), 4,15 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,57 (s,

3H), 3,48 (d, 1H), 3,43 - 3,39 (m, 1H), 2,90 - 2,88 (m, 2H), 2,47 - 2,41 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,07 - 2,03 (m, 1H), 2,04 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ

168,6, 167,1, 165,6, 148,8, 148,2, 145,7, 141,1, 140,6, 134,4, 130,9, 130,7, 130,4, 128,9,

128.2, 128,1, 125,2, 124,7, 120,9, 118,1, 117,3, 113,7, 113,1, 102,0, 99,2, 71,9, 61,5, 60,0,

59.8, 59,3, 58,5, 57,4, 54,9, 54,6, 41,7, 41,5, 31,8, 23,9, 20,2, 16,0, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C42H43N₃0uS: 797,3. Nalezeno (M+H⁺): 798,8.

Sloučenina 131 (ze sloučeniny 11 použitím 5 ekv. methansulfonyl chloridu a 5 ekv. Et₃N jako báze): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ

6,65 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,00 (d, 1H), 4,93 (dd, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,34 (dd, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,16 - 4,12 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,44 - 3,39 (m, 1H),

3,11 (s, 3H), 2,96 - 2,81 (m, 2H), 2,50 - 2,42 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,04 - 1,97 (m, 1H), 2,03 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C34H39N3O12S2: 745,2. Nalezeno (M+H⁺): 746,2.

Sloučenina 26 (ze sloučeniny 24 použitím 1,05 ekv. acetyl chloridu a bez báze): *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,51 (s, 1H), 6,05 (d, 2H), 5,95 (s, 1H), 5,60 (d, 1H), 5,59 (bp, 1H), 5,03 (d, 1H), 4,58 - 4,53 (m, 2H), 4,27 (s, 1H), 4,26 (d, 1H), 4,20 • · • ·

4,16 (m, 2H), 3,43 - 3,42 (m, 2H), 2,90 - 2,88 (m, 2H), 2,27 - 2,11 (m, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,85 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,4, 169,5,

168,9, 145,8, 144,5, 140,9, 140,4, 139,9, 127,1, 123,6, 120,1, 119,8, 119,2, 118,1, 113,5,

113,4, 102,0, 61,3, 60,4, 59,2, 58,9, 54,7, 54,5, 52,0, 41,7, 41,4, 32,3, 23,5, 22,8, 20,6, 16,2, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₂H₃₄N₄O9S: 650,2. Nalezeno (M+H⁺): 651,3.

Příklad 6

Metoda F: Do roztoku 1 ekv. 1 vDMF (0,03 M) v atmosféře argonu bylo při pokojové teplotě přidáno 0,9 ekv. Cs₂CO₃ a 0,9 ekv. BnBr. Po 2 hodinách a 30 minutách byla reakce ukončena 1 μΐ AcOH zředěným hexanem/EtOAc (1:3). Potom byla reakční směs ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přidáno 1,1 ekv. chloridu kyseliny octové. 0 5 minut později byla reakční směs zahřáta na pokojovou teplotu a míchána po dobu 45 minut. Potom byla promyta H₂O a extrahována hexanem/EtOAc (1:3). Organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po chromatografii byla získána čistá sloučenina 2n.

Sloučenina 2n: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,32 - 7,20 (m, 5H), 6,56 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,15 (dd, 2H), 5,04 (d, 1H), 4,51 (bp, 1H), 4,32 (d, 1H), 4,25 - 4,23 (m, 2H), 4,12 (dd, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,62 (dd, 2H), 3,56 (s, 3H), 3,44 - 3,40 (m, 2H),

3,38 - 3,20 (m, 1H), 3,19 - 2,84 (m, 2H), 2,36 - 1,91 (m, 2H),

2,29 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,91 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,7,

168.6, 149,3, 148,2, 145,6, 140,9, 140,4, 139,9, 131,5, 130,3, 128,3, 128,1, 126,9, 124,9,

124.7, 120,9, 118,1, 113,8, 113,2, 101,9, 99,1, 61,5, 59,7, 59,6, 59,5, 59,2, 58,9, 57,4, 54,9,

54.7, 51,3, 41,5, 41,4, 33,3, 23,8, 20,3, 15,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₄oH₄₄N₄Ot)S:

756,3. Nalezeno (M+Na⁺): 779,2.

Příklad 7

Metoda G: Do roztoku 1 ekv. 2a-n, 2t, 2w, 2y, 11, 12*, 13a-c, 13e-f, 13h, 131, 14a* nebo 7-9 v CH₃CN/CH₂C1₂ 5:4 (0,026 M) v atmosféře argonu bylo při pokojové teplotě přidáno 6 ekv. Nal a 6 ekv. čerstvě destilovaného TMSC1. Po 20 minutách byla reakce ukončena přidáním nasyceného vodného roztoku Na₂S₂O₄, zředěna CH₂C1₂, promyta Na₂S₂O₄ (3x) nebo NaCl. Vodná vrstva byla extrahována CH₂C1₂. Organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po

chromatografii byly získány čisté sloučeniny 3a-n, 3p, 3s-t, 3v-w, 3y-z, 15, 16*, 17a-c, 17e-f, 17h, 171, 18a*.

Sloučenina 3a (z 2a): ‘H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,78 (s, 1H), 5,52 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H),

4,58 (ddd, 1H), 4,53 (bs, 1H), 4,27 - 4,25 (m, 2H), 4,19 - 4,15 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,44 - 3,43 (m, 2H), 2,92 - 2,90 (m, 2H),

2,36 - 2,02 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,88 (s, 3H); ^,3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,5, 168,8, 168,4, 148,1, 145,8, 143,1, 141,0, 140,3, 130,7,

129,9, 129,0, 120,3, 119,0, 117,9, 113,5, 102,0, 61,3, 60,3, 60,2, 59,3, 58,9, 24,7, 54,5, 51,9,

41,8,41,4, 32,4, 23,7, 22,8, 20,4, 16,0, 9,5; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C33H36N4O9S: 664,2. Nalezeno (M+H⁺): 665,2.

Sloučenina 3b (z 2b): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,52 (s, 1H), 6,41 (bd, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,72 (s, 1H), 5,05 (d, 1H),

4,60 (bp, 1H), 4,54 - 4,51 (m, 1H), 4,32 (s, 1H), 4,26 - 4,18 (m, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,46 - 3,42 (m, 2H), 2,97 - 2,80 (m, 2H), 2,44 - 2,38 (m, 1H), 2,30 - 2,03 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 168,8,

168,5, 156,3, 155,8, 155,3, 147,6, 146,0, 143,1, 141,2, 140,5, 130,5, 129,9, 120,7, 120,6,

120,1, 118,0, 117,9, 113,2, 101,1, 61,4, 60,7, 60,1, 59,5, 58,9, 54,6, 54,5, 52,8, 42,0, 41,5,

31,9, 23,8, 20,4, 15,6, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C33H33F3N4O9S: 718,2. Nalezeno (M+H⁺): 719,2.

Sloučenina 3c (z 2c): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,54 (s, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,82 (s, 1H), 5,49 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H),

4,61 (ddd, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,27 - 4,24 (m, 2H), 4,19 - 4,15 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,44 - 3,41 (m, 2H), 2,90 (bd, 2H), 2,31 1,94 (m, 4H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,67 - 1,57 (m, 2H), 0,95 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz,

CDCI3): δ 171,8, 170,5, 148,0, 145,8, 143,1, 141,0, 140,4, 130,8, 129,0, 120,4, 120,2, 119,0,

118,0, 113,4, 102,0, 61,4, 60,2, 59,4, 58,9, 54,7, 54,5, 51,7, 41,8, 41,4, 38,2, 32,6, 23,8, 20,5, ··· · ·· ·· • · · • * * • · · • · · >· ·««*

18,8, 16,0, 13,7, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C35H40N4O9S: 692,2. Nalezeno (M+H⁺):

693,9.

Sloučenina 3d (z 2d): ‘H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,54 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,76 (s, 1H), 5,48 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H),

4,66 - 4,60 (m, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,27 - 4,23 (m, 2H), 4,19 4,15 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,44 - 3,42 (m, 2H), 2,90 (bd, 2H),

2,33 - 1,90 (m, 5H), 2,33 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 0,98 (d, 3H), 0,92 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDClj): δ 171,3, 170,6, 168,5, 148,0, 145,8, 143,1, 141,1,

140,4, 130,8, 129,0, 127,6, 120,5, 120,3, 119,1, 118,0, 113,5, 102,0, 74,2, 61,4, 60,3, 59,4,

58,8, 54,7, 54,6, 51,7, 45,5, 41,9, 41,5, 32,7, 25,8, 23,8, 22,5, 22,4, 20,5, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C36H42N4O9S: 706,3. Nalezeno (M+Na⁺): 729,2.

Sloučenina 3e (z 2e): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,54 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,75 (s, 1H), 5,48 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,60 (ddd, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,27 - 4,24 (m, 2H), 4,19-4,15 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,48 - 3,42 (m, 2H), 2,91 (bd, 2H), 2,32 - 1,97 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,62 - 1,41 (m, 2H), 1,390 - 1,25 (m, 8H), 0,89 (t,

3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,0, 170,6, 168,4, 148,0, 145,8, 143,1, 141,0, 140,4,

130,8, 129,0, 120,4, 120,2, 119,0, 118,0, 113,7, 113,5, 102,0, 61,4, 60,3, 59,4, 58,9, 54,7,

54,6, 51,8, 41,8, 41,5, 36,3, 32,6, 31,7, 29,3, 29,1, 25,4, 23,8, 22,6, 20,5, 16,1, 14,0, 9,6. ESIMS m/z: Vypočteno pro C35H40N4O10S: 748,3. Nalezeno (M+H⁺): 749,3.

^-(CHaJuCHa

Sloučenina 3f (z 2f): 'H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,55 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,73 (s, 1H), 5,48 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,60 (ddd, 1H), 4,56 - 4,50 (bp, 1H), 4,28 - 4,24 (m, 2H), 4,20 - 4,14 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,44 - 3,40 (m, 2H), 2,92 - 2,90 (bd, 2H), 2,35 - 1,95 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,62 - 1,58 (m, 2H), 1,38 - 1,20 (m, 24H), 0,88 (t, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro

C₄7H₆4N4O₉S: 860,4. Nalezeno (M+H⁺): 861,5.

• 9 • · a · » · • · · a ··· • · a · · a · · «« ···♦

Sloučenina 3g (z 2g): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,69 7,66 (m, 2H), 7,57 - 7,45 (m, 3H), 6,48 (s, 1H), 6,35 (d, 1H), 6,06 (dd, 2H), 5,70 (s, 1H), 5,07 (d, 1H), 4,78 - 4,74 (m, 1H),

4,58 (bp, 1H), 4,33 (s, 1H), 4,26 - 4,18 (m, 3H), 3,61 (s, 3H), 3,47 - 3,45 (m, 2H), 2,92 (bd, 2H), 2,60 - 2,53 (m, 1H), 2,28 1,93 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,93 (s,

3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,7, 170,5, 166,4, 147,7, 145,9, 143,0, 141,1, 140,5,

134,2, 131,6, 130,8, 129,4, 128,6, 127,0, 120,4, 118,5, 118,0, 113,7, 113,4, 102,0, 61,5, 60,3,

60,1, 59,7, 58,8, 54,7, 53,1, 41,9, 41,5, 32,8, 23,9, 20,4, 15,6, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C38H38N4O9S: 726,2. Nalezeno (M+H⁺): 727,2.

Ph Sloučenina 3h (z 2h): ^]H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7,60 (d, 1H), 7,54 - 7,51 (m, 2H), 7,44 - 7,38 (m, 3H), 6,63 (s, 1H), 6,22 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,79 (s, 1H), 5,73 (d, 1H), 5,05 (d, 1H), 4,71 (ddd, 1H), 4,55 (bp, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,26 (s, 1H), 4,21 4,17 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,48 - 3,42 (m, 2H), 2,95 - 2,93 (m, 2H), 2,49 - 2,44 (m, 1H), 2,29 - 2,03 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 170,4, 168,4, 164,5, 148,1,

145.8, 143,1, 142,0, 141,0, 140,4, 134,7, 130,8, 129,8, 129,2, 128,8, 127,9, 120,2, 119,8,

118.9, 118,0, 113,6, 113,3, 102,0, 61,4, 60,4, 60,2, 59,4, 59,0, 54,6, 54,6, 52,5, 41,8, 41,5,

32,6, 23,8, 20,5, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C40H40N4O9S: 752,2. Nalezeno (M+Na⁺): 775,8.

Sloučenina 3i (z 2i): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,82 (s, 1H), 7,66 - 7,51 (m, 4H), 6,64 (s, 1H), 6,26 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,77 (s, 1H), 5,74 (d, 1H), 5,05 (d, 1H), 4,72 (ddd, 1H), 4,56 (bp, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,26 (dd, 1H), 4,22 - 4,16 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,46 - 3,44 (m, 2H), 2,94 (bd, 2H), 2,47 - 2,40 (m, 1H), 2,30 - 2,03 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,3, 163,9, 148,1, 143,1,

141,1, 140,4, 135,6, 131,7, 130,9, 129,5, 129,0, 126,2, 123,6, 121,7, 120,3, 118,0, 113,3, *» ·· i _A • · « · ·· * • · · · • ··· · ;

• · * • · 4 · * t e · * * ·« • · * ··»·

102,0, 99,2, 61,4, 60,5, 60,2, 59,4, 59,1, 54,7, 54,6, 52,5, 41,8, 41,5, 32,6, 23,8, 20,5, 16,2,

9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C41H39N4F3O9S: 820,2. Nalezeno (M+H⁺): 821,3.

Sloučenina 3j (z 2j): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,77 - 7,68 (m, 4H), 6,26 (s, 1H), 6,06 (dd, 2H), 5,77 (s, 1H), 4,98 (d, 1H),

4,61 - 4,55 (m, 2H), 4,33 - 4,21 (m, 2H), 4,09 (d, 1H), 4,97 (dd, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,47 - 3,31 (m, 2H), 2,93 - 2,77 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,33 - 2,14 (m, 2H), 2,23 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,05 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C39H36N4O10S: 752,2. Nalezeno (M+H⁺): 753,2.

Sloučenina 6: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,95 (dd, 1H),

7,66 - 7,45 (m, 3H), 6,13 (s, 1H), 6,07 (dd, 2H), 5,88 (d, 1H), 5,64 (s, 1H), 5,06 (d, 1H), 4,83 - 4,81 (m, 1H), 4,53 (bp, 1H),

4,30 - 4,17 (m, 4H), 3,79 (s, 3H), 3,61 (s, 3H), 3,45 - 3,40 (m, 2H), 2,94 - 2,85 (m, 2H), 2,29 - 2,04 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,04 (s, 6H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C40H40N4O11S: 784,2. Nalezeno (M+H⁺): 785,1.

Sloučenina 3k (z 2k): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ

7,78 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H),

5,38 (bd, 1H), 5,29 (bs, 1H), 5,15 (d, 1H), 4,66 (m, 1H), 4,60 (bp, 1H), 4,55 - 4,51 (m, 1H), 4,40 (d, 1H),

4.34 - 4,29 (m, 2H), 4,25 (s, 1H), 4,14 (d, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,43 - 3,39 (m, 2H), 3,09 - 3,05 (m, 1H), 2,96 - 2,90 (m, 3H), 2,70 (d, 1H), 2,34 - 1,94 (m, 4H),

2.34 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,02 (s, 3H),

1,81 - 1,25 (m, 6H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,5, 170,8, 168,7, 163,8, 148,8, 145,8,

142.8, 141,1, 140,3, 131,2, 128,9, 120,7, 120,3, 120,1, 118,3, 113,5, 102,0, 61,9, 61,2, 60,2,

59.8, 59,4, 59,4, 56,4, 55,1, 54,7, 51,3, 41,8, 41,4, 41,1, 34,5, 32,6, 27,8, 27,7, 25,0, 24,1,

20,7, 16,1, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C41H48N6O10S2: 849,0. Nalezeno (M+H⁺): 850,0.

** ·* -i • 9 9 * • · · i ··· « * • · * ···· ·« ** * •4 Μ > * · » · >· ř ® * • · » ·« ···· co₂h

Sloučenina 31 (z 21): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,57 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,90 (bp, 1H), 5,63 (bd, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,60 - 4,55 (m, 2H), 4,27 - 4,17 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,47 3,39 (m, 2H), 2,90 (bd, 2H), 2,68 - 2,61 (m, 2H), 2,58 - 2,02 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 176,4, 170,5, 170,2, 168,6, 148,1,

145,8, 143,1, 141,0, 140,3, 130,7, 129,2, 120,3, 120,0, 119,0,

118,0, 113,5, 113,3, 102,0, 61,3, 60,4, 60,3, 59,2, 58,9, 54,6, 54,4, 51,9, 41,8, 41,4, 32,3, 30,2,

29,6, 29,1, 28,3, 23,7, 20,5, 16,0, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃5H₃8N₄0nS: 722,2. Nalezeno (M+H⁺): 723,2.

Sloučenina 3m (z 2m): ^!H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,45 (s, 1H), 6,02 (d, 2H), 5,67 (s, 1H), 4,98 (d, 1H), 4,55 (bp, 1H), 4,27 - 4,22 (m, 2H), 4,14 (d, 1H), 3,94 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,65 3,38 (m, 3H), 2,96 - 2,79 (m, 2H), 2,44 - 2,02 (m, 7H), 2,34 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,88 - 1,82 (m, 1H);

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^H^N^gS: 650,2. Nalezeno (M+H⁺): 651,3.

Sloučenina 3n (z 2n): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,31 7,21 (m, 5H), 6,37 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,67 (s, 1H), 5,04 (d, 1H), 4,52 (bp, 1H), 4,24 - 4,22 (m, 3H), 4,11 (dd, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,62 (dd, 2H), 3,42 - 3,41 (m, 2H), 3,19 - 3,18 (m, 1H), 3,03 - 2,83 (m, 2H), 2,34 - 2,30 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,05 - 2,02 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,7, 168,5, 147,7, 145,6, 142,9, 141,0, 140,4, 140,1, 130,6, 129,3,

128.2, 128,2, 126,8, 120,7, 118,2, 118,0, 113,8, 113,3, 101,9, 99,1, 61,5, 60,1, 59,6, 59,5,

59.2, 54,7, 51,3, 41,6, 41,5, 33,4, 23,8, 20,5, 15,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃gH4oN40gS: 712,3. Nalezeno (M+H⁺): 713,3.

• *

H₂N 'nh

OíZ''ή HO, AcO

OMe

“j-Me

Sloučenina 3p (z 7): ^!H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,73 (bp, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,03 (d, 1H), 4,64 (dt, 1H), 4,55 (bp, 1H), 4,31 (s, 1H), 4,26 (dd, 1H), 4,21 (d, 1H), 4,17 (dd, 1H),

3,76 (s, 3H), 3,49 - 3,42 (m, 2H), 2,99 (d, 1H), 2,90 - 2,88 (m, 2H), 2,47 - 1,97 (m, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 0,97 (d, 3H), 0,79 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 173,6,170,4, 168,5, 147,6, 145,9, 143,1, 141,1, 140,5,

130,8, 129,0, 120,8, 120,6, 118,8, 118,0, 113,5, 113,3, 102,0, 61,5, 60,6, 60,2, 60,0, 59,6,

58,6, 54,7, 54,6, 51,9, 52,0, 41,5, 33,0, 31,6, 23,9, 20,4, 19,6, 16,8, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C36H43N5O9S: 721,3. Nalezeno (M+H⁺): 722,2.

Sloučenina 3s (z 9 použitím 9 ekv. TMSC1 a Nal. Reakce byla ukončena solným roztokem a Na₂CO3): ^lH NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7,74 (d, 1H), 6,55 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,61 (d, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,68 - 4,64 (m, 1H), 4,57 (bp, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,27 (dd, 1H), 4,20 - 4,16 (m, 2H), 4,04 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,52 - 3,43 (m, 3H), 2,91 - 2,89 (m, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,29 - 2,02 (m, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H),

1,33 (d, 3H), 1,07 (d, 3H), 0,97 (d, 3H); ¹³C

NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 175,2, 170,2, 170,2,

168,5, 148,0, 145,9, 143,3, 141,1, 140,4, 130,4, 130,1, 120,4, 120,2, 118,5, 118,0, 113,5, 102,0, 61,5, 60,4, 60,3, 59,4, 58,8, 57,4, 54,7, 54,6, 51,8, 50,9, 42,0, 41,5, 32,7, 32,2, 23,8,

21,8, 20,5, 19,3, 18,0, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C39H48N6O10S: 792,3. Nalezeno (M+H⁺): 793,3.

Sloučenina 3t (z 2t): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,59 (bd, 1H), 6,53 (s, 1H), 6,28 - 6,22 (m, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,89 (s, 1H), 5,60, 5,58 (2d, 1H), 5,01 (d, 1H), 4,66 - 4,62 (m, 1H), 4,57 (bp, 1H), 4,50 - 4,43 (m, 1H), 4,28 (s, 1H),

4,25 (d, 1H), 4,20 - 4,12 (m, 2H), 4,09 - 4,04 (m, 1H), 3,78,

3,77 (2s, 3H), 2,28 - 1,98 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16, 2,15 (2s, 3H), 2,03, 2,02 (2s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,36, 1,32 (2d,

3H), 1,05, 1,03 (2d, 3H), 0,93 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,9, 170,1, 169,7,

169,6, 168,5, 148,0, 145,9, 143,2, 141,1, 140,4, 130,6, 129,8, 120,3, 120,2, 118,7, 118,0, ··

113,4, 102,0, 61,4, 60,3, 60,3, 59,4, 58,8, 57,7, 57,6, 54,6, 54,5, 51,9, 48,9, 48,9, 42,0, 41,5,

32,6, 32,3, 32,2, 23,8, 23,1, 20,5, 19,2, 19,1, 19,1, 18,5, 17,7, 17,7, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C41H50N6O11S: 834,3. Nalezeno (M+H⁺): 835,3.

Sloučenina 3v (z 8; reakce byla ukončena solným roztokem a Na₂CO₃): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,70 (bp, 1H), 6,52 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,03 (d, 1H), 4,58 - 4,53 (m, 2H), 4,30 (s, 1H), 4,25 (dd, 1H), 4,20 - 4,14 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,45 3,42 (m, 2H), 3,30 (dd, 1H), 2,90 - 2,88 (m, 2H), 2,38 - 2,00 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,03 (s, 3H),

1,25 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 175,0, 170,3, 168,4, 147,6, 145,9, 143,1, 141,1,

140,5, 130,8, 129,0, 120,9, 120,5, 118,7, 118,0, 113,5, 113,3, 102,0, 61,5, 60,2, 60,1, 59,6,

58,8, 54,8, 54,6, 52,1, 50,8, 41,9, 41,5, 32,7, 23,9, 21,6, 20,4, 16,1, 9,6. ESI-MS m/z:

Vypočteno pro C^H^NsOgS: 693,2. Nalezeno (M+H⁺): 694,3.

AcHN

Sloučenina 3w (z 2w; reakce byla ukončena solným roztokem): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,67, 6,55 (2s, 1H),

6,30 (m, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,86, 5,79 (2s, 1H), 5,65, 5,54 (2bd, 1H), 5,03, 5,02 (2d, 1H), 4,60 - 4,17 (m, 7H), 3,79, 3,76 (2s, 3H), 3,45 - 3,40 (m, 2H), 2,92 - 2,85 (bd, 2H), 2,46 - 1,95 (m, 2H), 2,46, 2,40 (2s, 3H), 2,17, 2,15 (2s, 3H), 2,02 (s, 3H),

1,98, 1,95 (2s, 3H), 1,45, 1,20 (2d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,5, 170,1, 169,9,

169,1, 168,6, 148,2, 147,7, 145,9, 143,2, 141,1, 140,4, 130,9, 130,4, 130,0, 129,8, 120,8, 120,3, 118,8, 118,0, 113,6, 113,4, 102,0, 61,5, 61,4, 60,5, 60,4, 59,3, 59,1, 58,7, 54,8, 54,6,

51,9, 51,7, 48,5, 42,1, 41,9, 41,5, 32,4, 32,3, 23,8, 23,2, 20,5, 19,9, 16,0, 15,8, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^HuNsOioS: 735,3. Nalezeno (M+H⁺): 736,2.

o 7 \-o

Sloučenina 3y (z 2y): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,77 7,68 (m, 4H), 7,42 - 7,26 (m, 4H), 6,53 (s, 1H), 6,05 (bd, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,96 - 5,87 (m, 1H), 5,74 (s, 1H), 5,58 (bd, 1H), 5,38 - 5,20 (m, 2H), 5,00 (d, 1H), 4,60 - 4,55 (m, 4H), 4,33 4,08 (m, 6H), 3,73 (s, 3H), 3,44 - 3,42 (m, 2H), 3,19 - 3,13 (m, 1H), 3,05 - 2,83 (m, 5H), 2,38 - 2,02 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,24 • · • · (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C52H53N5O11S2: 987,3. Nalezeno (M+H⁺): 988,1.

(s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,03 Nalezeno (M+H⁺): 904,2.

Sloučenina 3z byla také získána reakcí 2y: *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7,76 (d, 2H), 7,66 (dd, 2H), 7,42 - 7,30 (m, 4H), 6,49 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,67 (bp, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,59 - 4,54 (m, 2H), 4,30 (bs, 1H), 4,25 - 4,23 (dd, 1H), 4,19 - 4,09 (m, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,68 - 3,43 (m, 2H), 3,33 (dd, 1H), 3,14 - 2,85 (m, 5H), 2,46 (dd, 1H), 2,35 - 2,24 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,24 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C48H49N5O9S2: 903,3.

Sloučenina 15 (z 11): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,74 (s, 1H), 5,04 (d, 2H), 4,54 (bp, 1H),

4,26 - 4,23 (m, 2H), 4,20 - 4,14 (m, 2H), 4,02 - 3,96 (m, 1H),

3,78 (s, 3H), 3,42 - 3,39 (m, 2H), 2,93 - 2,90 (m, 2H), 2,31 2,03 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,03 (s,

3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C31H33N3O9S: 623,2. Nalezeno (M+H⁺): 624,2.

Sloučenina 16* (z 12*): *H NMR (300 MHz, 45 °C, CDCI3): δ 6,49 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,67 (s, 1H), 4,94 (bd, 1H), 4,47 (s, 1H), 2,24 - 4,17 (m, 3H), 4,05 (d, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,57 - 3,55 (m, 2H), 3,40 - 3,37 (m, 1H), 2,98 - 2,90 (m, 1H), 2,73 (d, 1H), 2,51 - 2,47 (bm, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,15 (s, 3H),

2,02 (s, 3H), 1,66 (dd, 1H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C31H33N3O9S: 623,2. Nalezeno (M+H⁺): 624,3.

Sloučenina 17a (z 13a): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,50 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,67 (s, 1H), 5,02 - 4,99 (m, 2H), 4,56 (bp, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,25 (dd, 1H), 4,17 (d, 1H), 4,11 (dd, 1H),

3,79 (s, 3H), 3,44 - 3,41 (m, 2H), 2,88 - 2,86 (m, 2H), 2,31 1,97 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,03 (s,

3H), 1,97 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 169,7, 168,5, 167,0, 147,2, 145,7, 142,9, • ·

141,1, 140,6, 130,9, 128,7, 121,2, 120,7, 118,1, 118,0, 113,5, 102,0, 71,6, 61,4, 60,2, 60,0,

59,9, 59,0, 54,7, 54,6, 41,6, 41,5, 31,5, 23,9, 20,5, 20,3, 15,8, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C33H35N3O10S: 665,2. Nalezeno (M+H⁺): 666,1.

Sloučenina 17b (z 13b): NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,46 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,68 (s, 1H), 5,09 (bt, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,62 (bp, 1H), 4,31 (s, 1H), 4,24 (dd, 1H), 4,19 - 4,14 (m, 2H),

3,77 (s, 3H), 3,46 - 3,40 (m, 2H), 2,93 - 2,75 (m, 2H), 2,44 2,37 (dd, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 2,04 (m, 1H), 2,04 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ

168.6, 164,9, 147,0, 145,9, 142,9, 141,2, 140,7, 132,2 (CF3?), 130,6, 129,5, 125,1 (CF3?),

121.6, 120,5 (CF3?), 118,0, 117,3, 113,7, 113,3, 113,3 (CF3?), 102,1, 74,8, 61,4, 60,6, 60,1,

59,9, 58,9, 54,6, 41,7, 41,6, 31,0, 23,9, 20,4, 15,5, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C33H32F3N3O10S: 719,2. Nalezeno (M+H⁺): 720,2.

Sloučenina 17c (z 13c): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,47 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,66 (s, 1H), 5,02 - 4,99 (m, 2H), 4,57 (bp, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,24 (dd, 1H), 4,18 (d, 1H), 4,11 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,45 - 3,41 (m, 2H), 2,87 - 2,85 (m, 2H),

2,31 - 1,99 (m, 4H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,67 - 1,55 (m, 2H), 0,97 (t, 3H); ¹³C NMR (75

MHz, CDCI3): δ 172,3, 168,5, 167,0, 147,2, 145,8, 142,9, 141,1, 140,6, 131,0, 128,8, 121,2,

120,8, 118,1, 118,1, 113,6, 113,1, 102,0, 71,4, 61,4, 60,2, 59,9, 59,9, 58,8, 54,8, 54,7, 41,6,

35,9, 31,7, 24,0, 20,4, 18,2, 15,8, 13,7, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C33H39N3O10S:

693,2. Nalezeno (M+H⁺): 694,2.

Sloučenina 17e (z 13e): *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,47 (s, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,66 (s, 1H), 5,02 - 4,98 (m, 2H), 4,56 (bp, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,24 (dd, 1H), 4,17 (d, 1H), 4,10 (dd, 1H),

3,79 (s, 3H), 3,44 - 3,42 (m, 2H), 2,87 - 2,85 (m, 2H), 2,30 1,98 (m, 4H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,61 - 1,57 (m, 2H), 1,31 - 1,23 (m, 8H), 0,89 (t, 3H); ¹³C

172,6, 168,5, 167,0, 147,2, 145,8, 142,9, 141,1, 140,6, 130,0, • · • ·

128,7, 121,2, 120,8, 118,1, 118,1, 113,6, 113,1, 102,0, 71,4, 61,4, 60,2, 59,9, 58,8, 54,8, 54,7,

41,6, 33,8, 31,7, 31,6, 29,1, 28,9, 24,7, 24,0, 22,6, 20,4, 15,8, 14,1, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C39H47N3O10S: 749,3. Nalezeno (M+H⁺): 750,9.

OMe

AcO\ s

Sloučenina 17f (z 13f): 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,48 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,66 (s, 1H), 5,02 - 4,98 (m, 2H), 4,57 (bp, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,25 (dd, 1H), 4,17 (d, 1H), 4,10 (dd, 1H),

3,79 (s, 3H), 3,44 - 3,40 (m, 2H), 2,87 - 2,85 (m, 2H), 2,37 1,98 (m, 4H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,62 - 1,55 (m, 2H), 1,35 - 1,26 (m, 24H), 0,88 (t, 3H); ¹³C

NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,6, 168,6, 167,1, 147,2, 145,7, 142,8, 141,0, 140,6, 130,9,

128,7, 121,2, 120,7, 118,1, 117,9, 113,5, 113,1, 102,0, 71,4, 61,4, 60,3, 59,8, 58,8, 54,7, 54,6,

41,6, 33,8, 31,9, 31,6, 29,7, 29,5, 29,4, 29,3, 29,2, 24,6, 23,9, 22,7, 20,5, 15,9, 14,1, 9,6. ESIMS m/z: Vypočteno pro C47H6₃N₃OioS: 861,4. Nalezeno (M+H⁺): 862,3.

Sloučenina 17h (z 13h): 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,64 (d, 1H), 7,55 - 7,52 (m, 2H), 7,43 - 7,40 (m, 3H), 6,51 (s, 1H), 6,28 (d, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,70 (s, 1H), 5,17 (bt, 1H), 5,04 (d, 1H), 4,58 (bp, 1H), 4,30 (s, 1H), 4,26 (d, 1H), 4,20 (d, 1H), 4,14 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,45 (d, 1H), 3,42 - 3,39 (m, 1H), 2,92 - 2,80 (m, 2H), 2,42 (dd, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,15 (s, 3H),

2,09 - 2,04 (m, 1H), 2,04 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,5, 167,0, 165,6, 147,2,

145.8, 145,6, 142,9, 141,1, 140,6, 134,5, 131,1, 130,4, 128,9, 128,8, 128,1, 121,1, 120,8,

118,1, 118,0, 117,4, 113,6, 113,1, 102,0, 71,9, 61,5, 60,3, 59,9, 58,7, 54,7, 54,7, 41,7, 41,6,

31.8, 24,0, 20,4, 15,9, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C40H39N3O10S: 753,2. Nalezeno (M+H⁺): 754,7.

Sloučenina 171 (z 1311): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,43 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,70 (s, 1H), 5,00 (d, 1H), 4,94 - 4,90 (m, 1H), 4,59 (bp, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,24 (d, 1H), 4,17 - 4,11 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,46 (d, 1H), 3,45 - 3,39 (m, 2H), 3,10 (s, 3H), 2,94 - 2,78 (m, 2H), 2,50 - 2,42 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,08 - 2,03 (m, 1H), 2,03 (s, 3H); ^I3C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 168,8,

166,9, 147,8, 146,1, 143,2, 141,4, 140,8, 130,7, 129,4, 121,3, 120,5, 118,2, 118,0, 113,6,

113,3, 102,3, 77,4, 61,4, 61,0, 60,5, 60,1, 59,6, 55,0, 54,8, 41,8, 41,7, 39,6, 33,0, 24,3, 20,6, 16,0, 9,8. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C32H35N3O11S2: 701,2. Nalezeno (M+Na⁺): 724,6.

Sloučenina 18a* (z 14a*): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,49 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,69 (s, 1H), 4,50 - 4,06 (m, 7H), 3,80 (s, 3H), 3,53 (d, 1H), 3,41 - 3,38 (m, 1H), 2,96 - 2,87 (m, 1H), 2,75 (d, 1H), 2,33 - 1,84 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,30 (s, 3H),

2,14 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,94 (s, 3H); ESI-MS m/z:

665,2. Nalezeno (M+H⁺): 666,7.

Příklad 8

Metoda H: Do roztoku 1 ekv. 5 v CH₃CN (0,05 M) v atmosféře argonu byl při pokojové teplotě přidán amin a 3 ekv. AcOH. Po 40 minutách bylo přidáno 1,5 ekv. NaCNBH₃ a roztok byl míchán po dobu 40 minut. Potom byla reakční směs zředěna CH2CI2, zneutralizována NaHCO₃ a extrahována CH2CI2. Organická vrstva byla vysušena Na2SO4. Po chromatografii byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 3o (použitím propylaminu): ^!H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,51 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,71 (s, 1H), 5,01 (d, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,24 - 4,19 (m, 3H), 4,10 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,41 - 3,40 (m, 2H), 3,17 - 3,16 (m, 1H), 3,00 - 2,82 (m, 2H), 2,46 - 1,97 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,16 (s,

3H), 2,02 (s, 3H), 1,44 - 1,25 (m, 2H), 0,84 (t, 3H); ^I3C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 172,5,

168.6, 147,6, 145,5, 142,9, 140,8, 140,4, 130,6, 129,1, 120,8, 120,7, 118,2, 113,7, 113,2,

101,9, 61,4, 60,1, 60,0, 59,5, 59,0, 54,7, 54,6, 49,2, 41,5, 32,9, 23,8, 23,3, 20,6, 15,7, 11,7,

9.6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C34H40N4O8S: 664,3. Nalezeno (M+H⁺): 665,3.

Příklad 9

Metoda I: Do roztoku 1 ekv. 3b-i, 3k-l, 3q, 3s, 3u-v, 3x-y nebo 15 vCH₃CN/H₂O 3:2 (0,009 M) bylo přidáno 30 ekv. AgNO₃. Po 24 hodinách byla reakce ukončena přidáním směsi 1:1 nasyceného vodného roztoku NaCI a NaHCO₃, míchána po dobu 10 minut a • · · · zředěna a extrahována CH₂CI₂. Organická vrstva byla vysušena Na₂SO4. Po chromatografii byly získány čisté sloučeniny 4b-i, 4k-l, 4q, 4s, 4u-v, 4x-y nebo 19.

Sloučenina 4b: t_R = 48,2 min [HPLC, Symmetry 300 Cl8, 5 pm, 250x4,6 mm, λ = 285 nm, průtok = 1,2 ml/min. teplota = 40 °C, grád.: CH₃CNaq.-NH4OAc (lOmM), 1 % DEA, pH = 3,0, 10 % - 60 % (90’)]; *H NMR (300 MHz, CDClj): δ 6,53 (s, 1H), 4,69 (bd, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,69 (bp, 1H), 5,17 (d, 1H), 4,81 (s, 1H), 4,52 - 4,46 (m, 3H), 4,16 - 4,10 (m, 2H), 3,74 (s,

3H), 3,51 - 3,48 (m, 1H), 3,25 - 3,20 (m, 1H), 2,83 - 2,80 (m, 2H), 2,45 - 2,40 (m, 1H), 2,29 2,02 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 168,8, 168,6, 156,8, 156,3, 155,7, 147,4, 145,7, 142,9, 141,1, 140,9, 131,2, 129,7,

120,8, 120,7, 117,9, 114,9, 112,7, 101,9, 81,4, 62,0, 60,1, 57,7, 57,6, 56,0, 54,8, 52,9, 42,2,

41,3, 29,7, 23,6, 20,5, 15,6, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₂H₃4F₃N30ioS: 709,2. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 692,2.

Sloučenina 4c: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,70 (s, 1H), 5,57 (bd, 1H), 5,15 (d, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,61 - 4,57 (m, 1H), 4,50 - 4,42 (m, 2H), 4,15 - 4,07 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,49 - 3,47 (m, 1H), 3,23 - 3,15 (m, 1H), 2,85 - 2,82 (m, 2H), 2,32 - 1,98 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,65 - 1,58 (m, 2H), 0,96 (t,

3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,8, 170,5, 147,9, 145,6, 143,0, 141,0, 140,8, 131,6,

128,8, 121,0, 120,7, 118,9, 115,3, 101,8, 81,5, 61,6, 60,3, 57,8, 57,6, 56,0, 55,0, 51,9, 42,0,

41,3, 38,3, 32,6, 23,7, 20,5, 18,9, 16,1, 13,8, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C34H41N3O10S:

683,2. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 666,3.

Sloučenina 4d: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,72 (bs, 1H), 5,55 (bd, 1H), 5,15 (d, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,64 - 4,60 (m, 1H), 4,48 - 4,42 (m, 2H), 4,17 - 4,12 (m, 1H), 4,09 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,53 - 3,48 (m, 1H), 3,27 3,20 (m, 1H), 2,90 - 2,75 (m, 2H), 2,34 - 1,91 (m, 5H), 2,34 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 0,98 (d, 3H), 0,93 ·· ·· • · ♦

(d, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C35H43N3O10S: 697,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 680,0.

Sloučenina 4e: 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,56 (s, 1H), 6,02 (d, 2H), 5,70 (s, 1H), 5,55 (bd, 1H), 5,15 (d, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,61 - 4,55 (m, 1H), 4,50 - 4,42 (m, 2H), 4,17 - 4,14 (m, 1H), 4,08 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,51 - 3,48 (m, 1H), 3,26 3,19 (m, 1H), 2,86 - 2,79 (m, 2H), 2,32 - 1,98 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,65 - 1,58 (m,

2H), 1,37 - 1,22 (m, 8H), 0,89 (t, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C38H49N3O10S: 739,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 722,3.

<CH₂)₁₄CH₃ OMe

Me ~J-Me

Sloučenina 4f: *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,56 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,70 (s, 1H), 5,57 - 5,53 (bd, 1H), 5,14 (d, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,58 (ddd, 1H), 4,47 - 4,43 (m, 2H), 4,18 - 4,13 (m, 1H), 4,08 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,50 - 3,46 (m, 1H), 3,25 - 3,19 (m, 1H), 2,28 - 2,82 (m, 1H), 2,32 - 1,95 (m, 4H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,40 - 1,20 (m, 26H), 0,88 (t, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C46H65N3O10S: 851,4. Nalezeno (MH₂O+H⁺): 834,5.

Sloučenina 4g: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,70 - 7,67 (m, 2H), 7,56 - 7,45 (m, 3H), 6,49 (s, 1H), 6,42 (d, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,66 (s, 1H), 5,20 (d, 1H), 4,82 (s, 1H), 4,73 (dt, 1H), 5,52 - 4,45 (m, 2H), 4,16 - 4,10 (m, 2H), 3,61 (s, 3H), 3,52 (bd, 1H), 3,27 - 3,22 (m, 1H), 2,90 - 2,85 (m, 2H), 2,62 2,56 (m, 1H), 2,28 - 1,92 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,92 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ

17O',4, 168,5, 166,4, 147,6, 145,7, 142,9, 141,1, 140,9, 134,4, 131,5, 129,3, 128,6, 127,0, 125,1, 121,2, 120,5, 115,1, 112,6, 101,8, 81,5, 61,6, 60,1, 57,9, 56,0, 55,0, 53,3, 42,1, 41,3, 32,7, 23,9, 20,4, 15,6, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C37H39N3O10S: 717,2. Nalezeno (MH₂0+H⁺): 699,9.

AcO\ Š Me • ·

• · · · · • · « · · · · ·

Sloučenina 4h: ^!H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,60 (d, 1H), 7,55 - 7,51 (m, 2H), 7,44 - 7,38 (m, 3H), 6,55 (s, 1H), 6,25 (d, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,80 (d, 1H), 5,71 (s, 1H), 5,18 (d, 1H),

4,79 (s, 1H), 4,69 (ddd, 1H), 4,49 - 4,43 (m, 2H), 4,16 - 4,09 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,51 - 3,49 (m, 1H), 3,26 - 3,20 (m, 1H), 2,89 - 2,86 (m, 2H), 2,52 - 2,47 (m, 1H), 2,29 - 2,03 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 170,4, 168,5, 164,5, 147,9, 145,6, 143,0, 141,8, 141,5, 141,0,

140.8, 134,8, 131,6, 129,7, 129,0, 128,8, 127,9, 121,0, 120,5, 120,1, 118,7, 115,2, 112,7,

101.8, 81,6, 61,7, 60,2, 57,7, 57,6, 56,0, 54,9, 52,7, 42,0, 41,3, 32,5, 23,7, 20,5, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C39H41N3O10S: 743,2. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 726,3.

··· ·

Η NH

OMe

Sloučenina 4i: *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 7,83 (s, 1H), 7,65 - 7,51 (m, 4H), 6,65 (s, 1H), 6,29 (d, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,81 (d, 1H), 5,71 (s, 1H), 5,18 (d, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 - 4,67 (m, 1H), 4,49 - 4,47 (m, 2H), 4,16 4,09 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,51 - 3,49 (m, 1H), 3,23 3,20 (m, 1H), 2,88 - 2,86 (m, 2H), 2,47 - 2,33 (m, 1H),

2,30 - 2,02 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C40H40N3F3O10S: 811,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 794,2.

Sloučenina 4k: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,32 (bp, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,54 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,48 (bd, 1H), 5,14 (d, 1H), 4,75 (s, 1H), 4,68 - 4,63 (m, 1H), 4,55 - 4,45 (m, 3H), 4,33 (dd, 1H), 4,22 (bp, 1H), 4,05 (dd, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,53 3,45 (m, 1H), 3,22 - 3,13 (m, 1H), 3,10 - 3,02 (m, 1H), 2,94 - 2,84 (m, 3H), 2,66 (d, 1H), 2,34 - 1,91 (m, 4H), 2,34 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,10 (bs, 3H),

2,01 (bs, 3H), 1,75 - 1,22 (m, 6H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,0, 170,4, 163,7,148,9,

145,5, 142,7, 141,1, 140,5, 131,8, 128,8, 122,2, 120,3, 112,6, 101,7, 82,0, 62,1, 60,1, 59,7,

57,2, 56,4, 55,7, 55,3, 51,2, 41,9, 41,2, 41,1, 34,3, 32,9, 27,8, 27,5, 24,8, 23,9, 20,7, 16,2, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C40H49N5O11S2: 840,0. Nalezeno (M-H₂0 ⁺): 822,3.

*· »

Vypočteno pro C34H39N3O12S

Sloučenina 41: 'H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,58 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,82 - 5,72 (bm, 2H), 5,15 (d, 1H), 4,79 (bs, 1H), 4,57 - 4,45 (m, 3H), 4,22 - 4,15 (bp, 1H), 4,11 (dd, 1H),

3,78 (s, 3H), 3,59 - 3,49 (bp, 1H), 3,30 - 3,23 (bp, 1H), 2,91 2,83 (m, 2H), 2,68 - 2,45 (m, 4H), 2,35 - 2,02 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,01 (s, 3H); ESI-MS m/z:

713,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 696,2.

Sloučenina 4q: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,55 (s, 1H), 6,07 (d, 1H), 6,02 (d, 2H), 5,75 (s, 1H), 5,64 (d, 1H), 5,15 (d, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,67 - 4,62 (m, 1H), 4,50 - 4,45 (m, 2H),

4,14 - 4,09 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,51 - 3,47 (m, 1H), 3,25 3,20 (m, 1H), 2,85 - 2,82 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,29 - 1,98 (m, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,98 (s, 3H),

1,06 (d, 3H), 0,97 (d, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C37H46N4O11S: 754,3. Nalezeno (MH₂O+H⁺): 737,3.

Sloučenina 4u ESI-MS m/z: Vypočteno pro C47H₅5N₅Oi₂S: 914,0. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 897,0.

• »

Sloučenina 4v: ^!H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,70 (bp, 1H), 6,54 (s, 1H), 6,02 (d, 2H), 5,16 (d, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,55 4,48 (m, 3H), 4,15 - 4,07 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,52 - 3,49 (m, 1H), 3,32 - 3,21 (m, 2H), 2,85 - 2,80 (m, 2H), 2,31 - 2,02 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,26 (d, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C33H40N4O10S:

684,2. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 667,2.

Sloučenina 4x ESI-MS m/z: Vypočteno pro C42H46N4O11S:

814,9. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 797,9.

Sloučenina 4y: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,77 - 7,67 (m, 4H), 7,42 - 7,28 (m, 4H), 6,55 (s, 1H), 6,18 - 6,06 (bp, 1H), 6,02 (dd, 2H), 6,03 - 5,86 (m, 1H), 5,70 (bs, 1H), 5,58 (bd, 1H), 5,35 - 5,20 (m, 2H), 5,15 (d, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,60 - 4,55 (m, 3H), 4,46 (d, 1H), 4,20 - 4,11 (m, 4H), 3,73 (s, 3H), 3,49 - 3,47 (m, 1H), 3,21 - 3,15 (m, 2H), 3,06 - 2,70 (m, 6H), 2,38 - 2,11 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,11 (s,

3H), 2,02 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 169,8, 168,9, 147,8, 145,8, 145,7, 143,0,

141,0, 140,8, 132,5, 131,4, 127,5, 127,1, 127,0, 125,0,120,6, 119,8, 117,9, 115,1, 101,8, 81,4,

65,8, 61,6, 60,3, 57,8, 55,9, 55,0, 54,4, 52,4, 47,0, 42,1, 41,3, 37,2, 36,5, 33,3, 23,6, 20,4,

16,1, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro CsiH54N40i2S₂: 978,3. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 961,3.

Sloučenina 19: *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,58 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,71 (s, 1H), 5,16 (d, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,47 4,43 (m, 2H), 4,15 - 4,11 (m, 1H), 4,08 (dd, 1H), 4,01 - 3,96 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,49 - 3,45 (m, 1H), 3,21 - 3,17 (m, 1H), 2,88 - 2,83 (m, 2H), 2,35 - 2,02 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, ·» • ·

3H), 2,17 (s, 3H), 2,02 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C30H34N2O10S: 614,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 597,1.

Příklad 10

Metoda J: Do roztoku 1 ekv. 3a, 3n-p, 3r, 3t, 17a, 17cc, 17e-f, 17h, 1711 nebo 18a* vTHF/H₂O 4:1 (0,03 M) bylo přidáno 5 ekv. CuBr. Po 24 hodinách byla reakční směs zředěna CH₂C1₂, promyta nasyceným vodným roztokem NaHCO₃ a NaCl a organická vrstva byla vysušena Na₂SC>4. Po chromatografii byly získány čisté sloučeniny 4a, 4n-p, 4r, 4t, 21a, 21c, 21e-f, 21h, 2111 nebo 22a*.

^Hy^NHAC OMe ''^z| HO.

AcO\ s Me. JLQ.. ~

OH

Sloučenina 4a: t_R = 24,6 min [HPLC, Symmetry 300 Cl8, Me 5 μηι, 250x4,6 mm, λ = 285 nm, průtok = 1,2 ml/min. teplota = 40 °C, grád.: CH₃CNaq.-NH₄OAc (lOmM), 1 %

DEA, pH = 3,0, 10 % - 60 % (90’)]; ^!H NMR (300 MHz, CDCb): δ 6,57 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,79 (bs, 1H), 5,60 (bd,

1H), 5,15 (d, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,56 (ddd, 1H), 4,46 - 4,43 (m, 2H), 4,15 (dd, 1H), 4,09 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,49 - 3,47 (m, 1H), 3,23 - 3,20 (m, 1H), 2,91 - 2,76 (m, 2H), 2,31 - 2,11 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,89 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 170,4, 168,8, 168,5, 148,0, 145,6, 143,0, 141,0, 140,7, 131,5, 128,8, 120,9,

120,6, 118,9, 115,2, 112,7, 101,8, 81,5, 61,6, 60,2, 57,7, 57,4, 55,9, 55,0, 52,1, 52,0, 41,3,

32,4, 23,6, 22,9, 20,5, 16,1, 9,5. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₂H₃7N₃OioS: 655,2. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 638,1.

Sloučenina 4n: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,29 - 7,21 (m, 5H), 6,39 (s, 1H), 5,99 (dd, 2H), 5,66 (s, 1H), 5,16 (d, 1H), 4,74 (s, 1H), 4,52 (d, 1H), 4,44 (bp, 1H), 4,12 (d, 1H), 4,03 (dd, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,64 (dd, 2H), 3,48 - 3,47 (m, 1H), 3,21 3,17 (m, 2H), 2,95 (d, 1H), 2,84 - 2,75 (m, 1H), 2,35 - 2,30 (m,

1H), 2,30 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,07 - 2,01 (m, 1H), 2,01 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); ^,3C NMR (75 MHz, CDCb): δ 172,6, 168,6, 147,6, 145,4, 142,8, 140,9, 140,8, 140,2, 131,3, 130,8, 129,1,

128,8, 128,2, 126,8, 121,4, 120,9, 117,9, 115,6, 112,4, 101,7, 81,8, 60,9, 60,1, 59,5, 57,8,

57,6, 56,1, 54,9, 51,4, 41,8, 41,3, 33,3, 23,6, 20,6, 15,2, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C37H41N3O9S: 703,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 686,7.

• ·

8i .· ··.; ♦ • · • » · · · ·

Sloučenina 4o: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,53 (s, 1H), 6,00 (dd, 2H), 5,69 (bp, 1H), 5,14 (d, 1H), 4,74 (s, 1H), 4,44 4,49 (m, 2H), 4,13 (bd, 1H), 4,04 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,49

- 3,47 (m, 1H), 3,22 - 3,16 (m, 2H), 2,96 - 2,75 (m, 2H), 2,51

- 2,02 (m, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,42 - 1,25 (m, 2H), 0,86 (t, 3H); ESI-MS m/z:

Vypočteno pro C33H41N3O9S: 655,3. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 638,3.

Sloučenina 4p: *H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,67 (bp, 1H), 6,52 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,67 (bp, 1H), 5,16 (d, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,63 - 4,60 (m, 1H), 4,49 (d, 1H), 4,45 (bp, 1H), 4,16 (d, 1H), 4,08 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,52 - 3,9 (m, 1H), 3,25 3,20 (m, 1H), 3,00 (d, 1H), 2,85 - 2,82 (m, 2H), 2,32 - 2,02 (m, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 0,99 (d, 3H), 0,81 (d, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro

C35H44N4O10S: 712,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 695,2.

Sloučenina 4r: ^JH NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,59 (d, 1H), 7,49 - 7,46 (m, 2H), 7,36 - 7,34 (m, 3H), 6,58 (s, 1H), 6,42 (d, 1H), 6,34 (d, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,79 (s, 1H), 5,69 (d, 1H), 5,15 (d, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,70 - 4,65 (m, 1H),

4,50 - 4,47 (m, 2H), 4,28 (dd, 1H), 4,15 (d, 1H), 4,10 (dd, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,49 (d, 1H), 3,25 - 3,22 (m, 1H), 2,85 2,83 (m, 2H), 2,57 (s, 3H), 2,28 - 2,14 (m, 3H), 2,28 (s,

3H), 2,14 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,10 (d, 3H), 1,01 (d, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ

170,1, 170,0, 168,6, 165,2, 148,0, 145,7, 143,2, 141,12, 140,84, 134,8, 131,2, 129,9, 129,6,

128,8, 127,8, 120,8, 120,7, 120,6, 118,4, 115,3, 112,7, 101,8, 81,5, 61,7, 60,4, 57,8, 57,7,

57,5, 56,0, 55,0, 52,0, 42,2, 41,3, 32,7, 32,6, 23,7, 20,5, 19,2, 18,0, 16,4, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C44H50N4O11S: 842,9. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 825,3.

• · ·· ·* ··*·

Sloučenina 4t: ^JH NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,54 (s, 1H), 6,49 (d, 1H), 6,21 - 6,16 (m, 1H), 6,07 - 5,96 (m, 2H), 5,78 (s, 1H), 5,63 (bd, 1H), 5,14 (d, 1H), 4,81, 4,78 (2s, 1H), 4,64

- 4,60 (m, 1H), 4,53 - 4,08 (m, 6H), 3,78, 3,7s (2s, 3H), 3,65

- 3,45 (m, 1H), 3,33 - 3,22 (m, 1H), 2,90 - 2,66 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,28 - 1,99 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,16, 2,13 (2s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,37, 1,34 (2d, 3H), 1,08 - 1,03 (m,

3H), 0,96 - 0,93 (m, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 171,8, 170,1, 169,6, 169,5, 169,5,

168.7, 147,9, 145,7, 143,1, 141,0, 140,8, 131,3, 129,6, 120,7, 120,4, 118,5, 115,2, 112,6,

101.8, 81,4, 61,6, 60,4, 60,3, 57,7, 57,6, 57,5, 55,9, 54,9, 51,9, 48,9, 48,9, 42,2, 41,3, 32,5,

32,3, 23,6, 23,2, 20,5, 19,2, 19,1, 18,6, 17,7, 17,6, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro

C40H51N5O12S: 825,3. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 808,3.

Sloučenina 21a: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,52 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,64 (s, 1H), 5,13 (d, 1H), 5,00 (t, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,48 - 4,45 (m, 2H), 4,15 - 4,12 (m, 1H), 4,02 (dd, 1H),

3.79 (s, 3H), 3,50 - 3,47 (m, 1H), 3,22 - 3,17 (m, 1H), 2,82 2.79 (m, 2H), 2,30 - 1,98 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H),

2,15 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,98 (s, 3H); ESI-MS m/z:

Vypočteno pro C₃₂H36N₂0nS: 656,2. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 639,2.

Sloučenina 21c: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,45 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,63 (s, 1H), 5,13 (d, 1H), 5,03 (t, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,50 - 4,48 (m, 2H), 4,14 (bd, 1H), 4,02 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,51 - 3,49 (bd, 1H), 3,21 - 3,12 (m, 1H), 2,85 - 2,75 (m, 2H), 2,31 - 2,02 (m, 4H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,66 - 1,56 (m, 2H), 0,97 (t, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,4, 168,6, 166,9, 147,1, 145,6,

142,8, 141,1, 131,8, 128,6, 125,1, 121,4, 115,4, 101,8, 81,5, 71,6, 61,2, 60,2, 58,2, 57,9, 56,1,

55,0, 41,8, 41,4, 36,0, 31,6, 23,9, 20,4, 18,3, 15,8, 13,7, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃4H4oN₂OiiS: 684,2. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 667,2.

• •a ·

Sloučenina 21e: ^!H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,49 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,63 (s, 1H), 5,13 (d, 1H), 5,02 (t, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,47 - 4,46 (m, 2H), 4,13 (dd, 1H), 4,02 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,50 - 3,49 (m, 1H), 3,21 - 3,19 (m, 1H), 2,81 - 2,78 (m, 2H), 2,30 - 2,02 (m, 4H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,62 - 1,54 (m, 2H), 1,32 - 1,25 (m, 8H), 0,90 (t, 3H); ^,3C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,6, 168,6,

166,9, 147,1, 145,5, 142,8, 141,1, 141,0, 131,7, 128,6, 121,4, 117,9, 115,4, 112,3, 101,8, 81,5,

71,5, 61,2, 60,2, 58,1, 57,9, 56,1, 55,0, 41,8, 41,4, 33,9, 31,7, 31,6, 29,1, 28,9, 24,7, 23,9,

22,6, 20,4, 15,8, 14,1, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C3₈H48N₂0iiS: 740,3. Nalezeno (MH₂O+H⁺): 723,2.

Sloučenina 21f: ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,50 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,63 (s, 1H), 5,13 (d, 1H), 5,02 (t, 1H), 4,77 (bs, 1H), 4,50 - 4,48 (m, 2H), 4,16 - 4,12 (m, 1H), 4,02 (dd, 1H),

3,79 (s, 3H), 3,51 - 3,49 (m, 1H), 3,22 - 3,19 (m, 1H), 2,82 2,77 (m, 2H), 2,37 - 2,02 (m, 7H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,65 - 1,59 (m, 2H), 1,40 -1,16 (m, 24H), 0,88 (t,

3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C4óH64N₂OioS: 852,4. Nalezeno (M-H₂O+H⁺): 835,4.

Sloučenina 21h: ^!H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,64 (d, 1H), 7,55 - 7,52 (m, 2H), 7,42 - 7,40 (m, 3H), 6,54 (s, 1H), 6,30 (d, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,65 (s, 1H), 5,19 - 5,16 (m, 2H), 4,79 (s, 1H), 4,50 - 4,49 (m, 2H), 4,15 (d, 1H), 4,05 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,51 (d, 1H), 3,22 - 3,19 (m, 1H), 2,89 - 2,76 (m, 2H), 2,45 - 2,41 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,13 (s, 3H),

2,13 - 2,03 (m, 1H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃):

δ 168,6, 166,9, 165,7, 147,1, 145,5, 145,4, 142,8, 141,1, 141,0, 134,6, 131,9, 130,3, 128,9,

128,1, 121,3, 117,6, 115,4, 112,3, 101,8, 81,5, 72,0, 61,2, 60,3, 58,2, 57,9, 56,1, 55,0, 41,9,

41,4, 31,8, 23,9, 20,4,15,9, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C39H40N2O11S: 744,2. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 727,2.

«* ·· ·· • · · *

·· · ·

Sloučenina 2111: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,45 (s, 1H), 6,01 (dd, 2H), 5,68 (s, 1H), 5,12 (d, 1H), 4,92 (t, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,53 - 4,42 (m, 2H), 4,15 - 4,03 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,51 - 3,48 (m, 1H), 3,24 - 3,20 (m, 1H), 3,10 (s, 3H), 2,83 - 2,78 (m, 2H), 2,50 - 2,42 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,17 (s,

3H), 2,08 - 2,03 (m, 1H), 2,03 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C31H36N2O12S2: 692,2. Nalezeno (M-H₂0+H⁺): 675,2.

Sloučenina 22a*: ‘H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,50 (s, 1H), 6,02 (dd, 2H), 5,67 (s, 1H), 4,73 (bp, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,48 4,38 (m, 4H), 4,12 - 4,10 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,61 - 3,59 (m, 1H), 3,22 - 3,18 (m, 1H), 2,89 - 2,80 (m, 1H), 2,70 (d, 1H),

2,33 - 1,86 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,12 (s, 3H),

2,01 (s, 3H), 1,94 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C32H36N2O11S: 656,2. Nalezeno (MH₂O+H⁺): 639,2.

Příklad 11

Metoda K: Roztok 7 v CH2CI2/H2O/TFA 2:1:4 (0,013 M) byl míchán po dobu 15 minut při pokojové teplotě. Potom byla reakční směs zředěna CH₂C1₂, zneutralizována nasyceným vodným roztokem NaHCO₃ a Na₂CO₃ a extrahována CH2CI2. Organická vrstva byla vysušena Na2SO4. Po chromatografíi (CH₂Cl₂/MeOH) byla získána čistá sloučenina 2p.

Sloučenina 2p: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,93 (bp, 1H), 6,72 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,15 (dd, 2H), 5,03 (d, 1H), 4,66 4,63 (m, 1H), 4,54 (bp, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,32 (s, 1H), 4,23 (d, 1H), 4,17 (dd, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,49 - 3,42 (m, 2H), 3,04 (d, 1H), 2,93 - 2,90 (m, 2H), 2,28 - 2,03 (m, 3H), 2,28 (s, 6H), 2,14 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 0,97 (d, 3H), 0,77 (d, 3H);

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C38H47N5O10S: 765,3. Nalezeno (M+H⁺): 766,3.

Příklad 12

Metoda L: Do roztoku 10 vCH₃CN (0,03 M) byly přidány 2 ekv. NaCNBH3 a 4 ekv. AcOH. Po 4 hodinách byla směs zředěna CH2CI2, zneutralizována nasyceným vodným

«· ·« » · » 1 «t ·· • « · k ··· * ř· ·· roztokem NaHCO₃ a extrahována CH₂Cl₂. Organická vrstva byla vysušena Na₂SO₄. Po chromatografii (hexan/EtOAc 2:1) byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 11: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,77 (s, 1H), 6,03 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,04 (d, 1H), 4,53 (bp, 1H), 4,34 (d, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,20 (d, 1H), 4,19 (dd, 1H), 4,01 (bdd, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,55 - 3,39 (m, 2H), 2,94 - 2,91 (m, 2H), 2,30 - 1,98 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,20 (s,

3H), 2,03 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 172,6, 168,6, 149,6, 148,3, 145,7, 141,0,

140,4, 131,6, 130,3, 124,8, 124,7, 120,5, 118,0, 113,3, 102,0, 99,1, 69,8, 61,4, 60,4, 59,6,

59,1, 59,0, 57,4, 54,9, 54,6, 41,4, 41,4, 35,0, 23,8, 20,3, 15,7, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₃H₃₇N₃O₁₀S: 667,3. Nalezeno (M+H⁺): 668,2.

Sloučenina 12*: ’H NMR (300 MHz, 45 °C, CDC1₃): δ 6,70 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 4,88 (bd, 1H), 4,49 (bs, 1H),

4,33 (bd, 1H), 4,27 - 4,24 (m, 1H), 4,24 (s, 1H), 4,08 (d, 1H),

3,79 (s, 3H), 3,60 - 3,55 (m, 2H), 3,56 (s, 3H), 3,42 - 3,39 (m, 1H), 3,00 - 2,91 (m, 1H), 2,76 (d, 1H), 2,50 - 2,42 (m, 1H),

2,32 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,66 (dd, 1H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₃H₃₇N₃Oi₀S: 667,3. Nalezeno (M+H⁺): 668,2.

Příklad 13

Metoda M: Do roztoku 1 ekv. 11 pro 13a-b nebo 12* pro 14* vCH₂Cl₂ (0,1 M) v atmosféře argonu bylo přidáno 30 ekv. pyridinu. Potom byla reakční směs ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přidáno 20 ekv. anhydridu a 5 ekv. DMAP. O 5 minut později byla reakční směs zahřáta na pokojovou teplotu a míchána po dobu 24 hodin. Potom byla reakce ukončena přidáním NaCl, extrahována CH₂C1₂, a organické vrstvy byly vysušeny Na₂SO4. Po chromatografii byla získána čistá sloučenina.

Sloučenina 13a (použitím Ac₂O): ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,70 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,02 - 4,99 (m, 2H), 4,56 (bp, 1H), 4,34 (dd, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,18 (d, 1H),

4,14 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,46 - 3,39 (m, 2H),

o 7 V-0 • 9 • 99 9

2,90 - 2,87 (m, 2H), 2,30 - 1,96 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,99 (s, 3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 169,7, 167,1, 148,9, 148,2, 145,9, 141,2, 140,6, 130,7, 130,7, 125,3, 124,6, 120,8, 118,1, 113,5, 113,1, 102,0, 99,2, 71,6, 61,4, 60,0, 59,9,

59,2, 58,7, 57,4, 55,0, 54,6, 41,5, 31,6, 23,9, 20,3, 20,2, 15,8, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₅H₃₉N₃O₁₁S: 709,6. Nalezeno (M+H⁺): 710,2.

Sloučenina 13b (použitím (F₃CCO)2O): 'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,67 (s, 1H), 6,04 (dd, 2H), 5,17 (dd, 2H), 5,10 (bt, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,62 (bp, 1H), 4,34 - 4,32 (m, 2H), 4,19 4,15 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,47 (d, 1H), 3,44 3,41 (m, 1H), 2,94 - 2,77 (m, 2H), 2,47 - 2,37 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,07 - 2,04 (m, 1H), 2,04 (s,

3H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,7, 164,9, 148,7, 148,2, 145,9, 141,2, 140,7, 131,6, 130,3, 125,7, 124,0, 120,6, 118,0, 113,3, 102,1, 99,2, 74,7, 61,4, 60,5, 60,0, 59,1, 59,2, 58,7,

57,4, 54,9, 54,6, 41,7, 41,5, 31,1, 23,9, 20,2, 15,5, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₅H₃₆F₃N₃OnS: 763,2. Nalezeno (M+H⁺): 764,2.

Sloučenina 14a* (použitím Ac₂O): *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,71 (s, 1H), 6,05 (dd, 2H), 5,16 (dd, 2H), 4,65 4,10 (m, 7H), 3,79 (s, 3H), 3,57 - 3,54 (m, 1H), 3,56 (s, 3H), 3,43 - 3,40 (m, 1H), 2,97 - 2,88 (m, 1H), 2,78 (d, 1H), 2,33 1,82 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H), 1,94 (s, 3H); ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃₅H₃₉N₃O_HS:

709,6. Nalezeno (M+H⁺): 710,7.

Sloučeniny 23 a 24:

Sloučenina 23: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,52 (s, 1H), 5,95 (dd, 2H), 4,97 (d, 1H), 4,42 (d, 1H), 4,28 (bs, 2H), 4,15 (d, 1H), 4,05 (dd, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,51 - 3,50 (m, 1H), 3,40 3,39 (m, 1H), 3,27 (t, 1H), 2,91 - 2,89 (m, 2H), 2,38 - 2,36 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,14 (s, 3H); ^,3C NMR (75

MHz, CDC1₃): δ 173,9, 148,1, 146,2, 146,1, 142,8, 136,2, 130,4, 129,5, 120,8, 118,2, 112,7, *>

• · · 4 • · · • «·· · * · ···« ** *

·· ··· •*W ·* « · '9 • · Φ • · · • β · ·· ····

112,7, 107,7, 101,3, 61,1, 60,9, 60,4, 59,4, 58,8, 54,6, 54,6, 53,5, 43,3, 41,4, 33,0, 23,9, 15,7,

8,7; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C29H32N4O7S: 580,2. Nalezeno (M+H⁺): 581,3.

Sloučenina 24: *H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,40 (s, 1H), 6,02 (d, 2H), 5,00 (d, 1H), 4,46 (bp, 1H), 4,24 (s, 1H), 4,21 4,14 (m, 3H), 3,39 - 3,37 (m, 2H), 3,29 (t, 1H), 2,93 - 2,78 (m, 2H), 2,31 - 2,03 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,25 (bs, 3H), 2,14 (s, 6H); ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 173,6, 168,9, 145,6,

145.3, 140,9, 140,2, 139,3, 126,1, 123,9,120,2, 119,7, 118,1, 117,7, 113,6, 113,3, 101,9, 61,3,

60.3, 59,1, 59,1, 54,7, 54,6, 53,3, 41,9, 41,4, 33,0, 23,5, 20,5, 16,8, 9,6; ESI-MS m/z: Vypočteno pro C30H32N4O8S: 608,2. Nalezeno (M+H⁺): 609,3.

Příklad 14

Sloučenina Int-14

Do roztoku Int-2 (21,53 g, 39,17 ml) v ethanolu (200 ml) byl přidán terc-butoxykarbonyl anhydrid (7,7 g, 35,25 ml) a směs byla míchána po dobu 7 hodin při teplotě 23 °C. Potom byla reakční směs zkoncentrována ve vakuu a zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografii (SÍO2, hexan:ethylacetát 6:4) za vzniku Int-14 (20,6 g, 81 %) jako žluté pevné látky.

Rf: 0,52 (ethylacetát:CHCl₃ 5:2).

‘H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,49 (s, 1H), 6,32 (bs, 1H), 5,26 (bs, 1H), 4,60 (bs, 1H),

4,14 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,81 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,7 (s,

3H), 3,34 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,18 - 3,00 (m, 5H), 2,44 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,82 (s, 3H), 1,80 - 1,65 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,86 (d, J = 5,7 Hz, 3H) ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 185,5, 180,8, 127,7, 155,9, 154,5, 147,3, 143,3, 141,5,

135,3, 130,4, 129,2, 127,5, 120,2, 117,4, 116,9, 80,2, 60,7, 60,3, 58,5, 55,9, 55,8, 54,9, 54,4, 55,0, 41,6, 40,3, 28,0, 25,3, 24,0, 18,1, 15,6, 8,5.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃4H₄3N₅O8: 649,7. Nalezeno (M+H)⁺: 650,3.

Příklad 15

Sloučenina Int-15

K míchanému roztoku Int-14 (20,6 g, 31,75 ml) v CH₃CN (159 ml) byl přidán při teplotě 0°C diisopropylethylamin (82,96 g, 476,2 ml), methoxymethylen bromid (25,9 g, 317,5 ml) a dimethylaminopyridin (155 mg, 1,27 ml). Směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 24 hodin. Reakce byla ukončena při teplotě 0 °C vodným roztokem 0,1 N HCI (750 ml) (pH = 5) a směs byla extrahována CH2CI2 (2 x 400 ml). Organická fáze byla vysušena (síranem sodným) a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografíí (SiO₂, gradient hexan:ethylacetát 4:1 do hexan:ethylacetát 3:2) za vzniku Int-15 (17,6 g, 83 %) jako žluté pevné látky.

Rf: 0,38 (hexamethylacetát 3:7).

’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,73 (s, 1H), 5,35 (bs, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,50 (bs, 1H), 4,25 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,84 (bs, 1H), 3,82 - 3,65 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,39 - 3,37 (m, 1H), 3,20 - 3,00 (m, 5H), 2,46 (d, J = 18 Hz, 1H),

2,33 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,85 (s, 3H), 1,73 - 1,63 (m, 1H), 1,29 (s, 9H), 0,93 (d, J = 5,1 Hz, 3H) ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 185,4, 180,9, 172,4, 155,9, 154,5, 149,0, 148,4, 141,6,

135,1, 131,0, 129,9, 127,6, 124,4, 123,7, 117,3, 99,1, 79,3, 60,7, 59,7, 58,4, 57,5, 56,2, 55,9, 55,0, 54,2, 50,0, 41,5, 39,9, 28,0, 25,2, 24,0, 18,1, 15,6, 8,5.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C36H47N5O9: 693,8. Nalezeno (M+H)⁺: 694,3.

Příklad 16

Sloučenina Int-16

lnk-15 hV-i6

Do nádoby obsahující bit-15 (8 g, 1,5 ml) v methanolu (1,6 1) byl přidán vodný roztok 1 M hydroxidu sodného (3,2 1) při teplotě 0°C. Reakční směs byla míchána po dobu 2 hodin při této teplotě a potom byla reakce ukončena upravením pH na 5 přidáním 6 M HC1. Směs byla extrahována ethylacetátem (3 x 1 1) a spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem sodným a zkoncentrovány ve vakuu. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografii (SÍO2, gradient CHCb do CHC^ethylacetát 2:1) za vzniku Int-16 (5,3 mg, 68 %).

Rf: 0,48 (CH₃CN:H₂O 7:3, RP-C18) ’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,73 (s, 1H), 5,43 (bs, 1H), 5,16 (s, 2H), 4,54 (bs, 1H), 4,26 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,84 (bs, 1H), 3,80 - 3,64 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,41 - 3,39 (m, 1H), 3,22 - 3,06 (m, 5H), 2,49 (d, J = 18,6 Hz, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,30 - 2,25 (m, 1H), 2,24 (s, 3H), 1,87 (s, 3H), 1,45 - 1,33 (m, 1H), 1,19 (s, 9H), 1,00 (br d, J = 6,6 Hz,

3H) ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 184,9, 180,9, 172,6, 154,7, 151,3, 149,1, 148,6, 144,7, 132,9, 131,3, 129,8, 124,5, 123,7, 117,3, 116,8, 99,1, 79,4, 59,8, 58,6, 57,7, 56,2, 55,6, 54,9,

54,5, 50,1, 41,6,40,1, 28,0, 25,3, 24,4,18,1,15,7, 8,0.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C35H45N5O9: 679,7. Nalezeno (M+H)⁺: 680,3.

Příklad 17

Sloučenina Int-17

IdL- ie WV- 17

Do odplyněného roztoku sloučeniny Int-16 (1,8 g, 2,64 ml) v DMF (221 ml) bylo přidáno 10 % Pd/C (360 mg) a směs byla míchána v atmosféře vodíku (atmosférický tlak) po dobu 45 minut. Reakční směs byla zfiltrována přes celit v atmosféře argonu do nádoby obsahující bezvodý CS2CO3 (2,58 g, 7,92 ml). Potom byl přidán bromchlormethan (3,40 ml, 52,8 ml) a nádoba byla uzavřena a reakční směs byla míchána při teplotě 100 °C po dobu 2 hodin. Reakce byla ochlazena, zfiltrována přes celit a promyta CH2CI2. Organická vrstva byla zkoncentrována a vysušena (síranem sodným) za vzniku hit-17 jako hnědého oleje, který byl použit v dalším kroku bez dalšího čištění.

Rf: 0,36 (hexan:ethylacetát 1:5, S1O2).

*H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,68 (s, 1H), 6,05 (bs, 1H), 5,90 (s, 1H), 5,79 (s, 1H), 5,40 (bs, 1H), 5,31 - 5,24 (m, 2H), 4,67 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,07 (bs, 1H), 4,01 (bs, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,64 - 2,96 (m, 5H), 2,65 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 2,01 - 1,95 (m, 1H), 1,28 (s, 9H), 0,87 (d, J = 6,3 Hz, 3H) ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 172,1, 162,6, 154,9, 149,1, 145,7, 135,9, 130,8, 130,7, 125,1, 123,1, 117,8, 100,8, 99,8, 76,6, 59,8, 59,2, 57,7, 57,0, 56,7, 55,8, 55,2,49,5, 41,6, 40,1,

36,5, 31,9, 31,6, 29,7, 28,2, 26,3, 25,0, 22,6, 18,2, 15,8, 14,1, 8,8.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C36H47N5O9: 693,34. Nalezeno (M+H)⁺: 694,3.

• · • ·

Příklad 18

fot-18

Do nádoby obsahující roztok Int-17 (1,83 g, 2,65 ml) v DMF (13 ml) byl přidán CS2CO3 (2,6 g, 7,97 ml) a allylbromid (1,15 mol, 13,28 ml) při teplotě 0 °C. Výsledná směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 1 hodiny. Reakční směs byla zfiltrována přes celit a promyta CH₂C1₂. Organická vrstva byla vysušena (síranem sodným) a zkoncentrována. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografii (SiO₂, CHCI3:ethylacetát 1:4) za vzniku Int-18 (1,08 g, 56 %) jako bílé pevné látky.

Rf: 0,36 (CHCb.-ethylacetát 1:3).

’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,70 (s, 1H), 6,27 - 6,02 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 5,83 (s, 1H), 5,37 (dd, J, = 1,01 Hz, J₂ = 16,8 Hz, 1H), 5,40 (bs, 1H), 5,25 (dd, Ji = 1,0 Hz, J₂ = 10,5 Hz,

1H), 5,10 (s, 2H), 4,91 (bs, 1H), 4,25 - 4,22 (m, 1H), 4,21 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,14 - 4,10 (m, 1H), 4,08 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,00 (bs, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,59 (s, 3H), 3,56 - 3,35 (m, 2H), 3,26 - 3,20 (m, 2H), 3,05 - 2,96 (dd, Ji = 8,1 Hz, J₂ = 18 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 1,91 - 1,80 (m, 1H), 1,24 (s, 9H), 0,94 (d, J = 6,6 Hz,

3H) ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 172,0, 154,8, 148,8, 148,6, 148,4, 144,4, 138,8, 133,7, 130,9, 130,3, 125,1, 124,0, 120,9, 117,8, 117,4, 112,8, 112,6, 101,1, 99,2, 73,9, 59,7, 59,3,

57,7, 56,9, 56,8, 56,2, 55,2, 40,1, 34,6, 31,5, 28,1, 26,4, 25,1, 22,6, 18,5, 15,7, 14,0, 9,2.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C39H51N5O9: 733,4. Nalezeno (M+H)⁺: 734,4.

Příklad 19

Sloučenina Int-19

\ηΐΊ8 tat-19

Do roztoku Int-18 (0,1 g, 0,137 ml) v dioxanu (2 ml) byla přidána 4,2 M HCl/dioxan (1,46 ml) a směs byla míchána po dobu 1,2 hodiny při teplotě 23 °C. Reakce byla ukončena při teplotě 0 °C přidáním nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (60 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 70 ml). Organické vrstvy byly vysušeny (síranem sodným) a zkoncentrovány ve vakuu za vzniku Int-19 (267 mg, 95 %) jako bílé pevné látky, která byla použita v další reakci bez dalšího čištění.

Rf: 0,17 (ethylacetát:methanol 10:1, S1O2).

*H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,49 (s, 1H), 6,12 - 6,00 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 5,86 (s, 1H),

5,34 (dd, J = 1,0 Hz, J = 17,4 Hz, 1H), 5,25 (dd, J = 1,0 Hz, J = 10,2 Hz, 1H), 4,18 - 3,76 (m, 5H), 3,74 (s, 3H), 3,71 - 3,59 (m, 1H), 3,36 - 3,20 (m, 4H), 3,01 - 2,90 (m, 1H), 2,60 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,97 - 1,86 (m, 1H), 0,93 (d, J = 8,7 Hz, 3H)

13, ^JC NMR (75 MHz, CDCI3): δ 175,5, 148,4, 146,7, 144,4, 142,4, 138,9, 133,7, 131,3, 128,3, 120,8, 117,9, 117,4, 113,8, 112,4, 101,1, 74,2, 60,5, 59,1, 56,5, 56,1, 56,3, 56,0, 55,0, 50,5,41,6, 39,5,29,5, 26,4, 24,9,21,1,15,5,9,33.

ÉSI-MS m/z: Vypočteno pro C32H39N5O6: 589. Nalezeno (M+H)⁺: 590.

Příklad 20

Sloučenina Int-20 ·· ·♦ * » · • · * • · · * • · ·

Do roztoku Int-19 (250 mg, 0,42 ml) v CH₂C1₂ (1,5 ml) byl přidán fenylisothiokyanát (0,3 ml, 2,51 ml) a směs byla míchána při 23 °C po dobu 1 hodiny. Reakční směs byla zkoncentrována ve vakuu a zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografíí (SiO₂, gradient hexan do 5:1 hexan:ethylacetát) za vzniku Int-20 (270 mg, 87 %) jako bílé pevné látky.

Rf: 0,56 (CHCl₃:ethylacetát 1:4).

’H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8,00 (bs, 1H), 7,45 - 6,97 (m, 4H), 6,10 (s, 1H), 6,08 - 6,00 (m, 1H), 5,92 (s, 1H), 5,89 (s, 1H), 5,82 (s, 1H), 5,40 (dd, J - 1,5 Hz, J = 17,1 Hz, 1H), 3,38 (bs, 1H), 5,23 (dd, J = 1,5 Hz, J = 10,5 Hz, 1H), 4,42 - 4,36 (m, 1H), 4,19 - 4,03 (m, 5H), 3,71 (s, 3H), 3,68 - 3,17 (m, 4H), 2,90 (dd, J - 7,8 Hz, J = 18,3 Hz, 1H), 2,57 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,90 (dd, J = 12,3 Hz, J = 16,5 Hz, 1H), 0,81 (d, J = 6,9 Hz, 3H).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 178,4, 171,6, 148,6, 146,8, 144,3, 142,7, 138,7, 136,2, 133,6, 130,7, 129,8, 126,6, 124,2, 124,1, 120,9, 120,5, 117,7, 117,4, 116,7, 112,6, 112,5, 101,0, 74,0, 60,6, 59,0, 57,0, 56,2, 56,1, 55,0, 53,3, 41,4, 39,7, 26,3, 24,8, 18,3,15,5, 9,2.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^HuNeOňS: 724,8. Nalezeno (M+H)⁺: 725,3.

Příklad 21

Sloučenina Int-21 ·· ·· > · ·

Me

Me lnt-20

Do roztoku Int-20 (270 mg, 0,37 ml) v dioxanu (1 ml) byla přidána 4,2 M HCl/dioxan (3,5 ml) a reakční směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 30 minut. Potom byl přidán ethylacetát (20 ml) a H₂O (20 ml) a organická vrstva byla dekantována. Vodná fáze byla zalkalizována nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (60 ml) (pH = 8) při teplotě 0°C a potom byla extrahována CH₂C1₂ (2 x 50 ml). Spojené organické extrakty byly vysušeny (síranem sodným) a zkoncentrovány ve vakuu. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografii (SiO₂, ethylacetát:methanol 5:1) za vzniku sloučeniny Int-21 (158 mg, 82 %) jako bílé pevné látky.

Rf: 0,3 (ethylacetát:methanol 1:1).

*H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,45 (s, 1H), 6,12 - 6,03 (m, 1H), 5,91 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 5,38 (dd, Ji = 1,2 Hz, J₂ = 17,1 Hz, 1H), 5,24 (dd, J, = 1,2 Hz, J₂ - 10,5 Hz, 1H), 4,23 - 4,09 (m, 4H), 3,98 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 3,90 (bs, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,36 - 3,02 (m, 5H), 2,72 - 2,71 (m, 2H), 2,48 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,85 (dd, Ji = 11,7 Hz, J₂ = 15,6 Hz, 1H).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 148,4, 146,7, 144,4, 142,8, 138,8, 133,8, 130,5, 128,8,

121,5, 120,8, 118,0, 117,5, 116,9, 113,6, 112,2, 101,1, 74,3, 60,7, 59,9, 58,8, 56,6, 56,5, 55,3, 44,2,41,8, 29,7, 26,5, 25,7, 15,7, 9,4.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C^H^NziOs: 518,3. Nalezeno (M+H)⁺: 519,2.

• ·

Příklad 22

Sloučenina Int-22 » · ····

Me

Do roztoku Int-21 (0,64 g, 1,22 ml) v CH₂C1₂ (6,13 ml) byl přidán pyridin (0,104 ml, 1,28 ml) a 2,2,2-trichlorethylchloroformát (0,177 ml, 1,28 ml) při teplotě -10 °C. Směs byla míchána při této teplotě po dobu 1 hodiny a potom byla reakce ukončena přidáním 0,1 N HC1 (10 ml) a extrahována CH2CI2 (2x10 ml). Organická vrstva byla vysušena síranem sodným a zkoncentrována ve vakuu. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂, hexan:ethylacetát 1:2) za vzniku Int-22 (0,84 g, 98 %) jako bílé pěny.

Rf: 0,57 (ethylacetát:methanol 5:1).

*H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,50 (s, 1H), 6,10 - 6,00 (m, 1H), 6,94 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,73 (bs, 1H), 5,37 (dq, J, = 1,5 Hz, J₂ = 17,1 Hz, 1H), 5,26 (dq, Jj = 1,8 Hz, J₂ = 10,2 Hz, 1H), 4,60 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,22 - 4,10 (m, 4H), 4,19 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,02 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,37 - 3,18 (m, 5H), 3,04 (dd, J, = 8,1 Hz, J₂ = 18 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,85 (dd, J, = 12,3 Hz, J₂ = 15,9 Hz, 1H).

^I3C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 154,3, 148,5, 146,7, 144,5, 142,8, 139,0, 133,8, 130,7,

128.7, 121,3, 120,8, 117,8, 117,7, 116,8,112,7, 101,2, 77,2, 74,3, 60,7, 59,9, 57,0, 56,4, 55,3,

43.3.41.7, 31,6, 26,4, 25,3, 22,6, 15,9,14,1, 9,4.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C32H35CI3N4O7: 694,17. Nalezeno (M+H)⁺: 695,2.

• ·

Příklad 23

Sloučenina Int-23 • · ·· ····

Do roztoku Int-22 (0,32 g, 0,46 ml) v CH₃CN (2,33 ml) byl přidán diisopropylethylamin (1,62 ml, 9,34 ml), brommethylmethyléter (0,57 ml, 7,0 ml) a dimethylaminopyridin (6 mg, 0,046 ml) při teplotě 0 °C. Směs byla zahřívána při teplotě 30 °C po dobu 10 hodin. Potom byla reakční směs zředěna dichlormethanem (30 ml) a nalita do vodného roztoku HC1 opH = 5 (10 ml). Organická vrstva byla vysušena síranem sodným a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku za vzniku zbytku, který byl čištěn sloupcovou chromatografii (SÍO2, hexamethylacetát 2:1) za vzniku Int-23 (0,304 g, 88 %) jako bílé pěny.

Rf: 0,62 (hexan:ethylacetát 1:3).

^]H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,73 (s, 1H), 6,10 (m, 1H), 5,94 (d, J - 1,5 Hz, 1H), 5,88 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,39 (dq, J, = 1,5 Hz, J₂ = 17,1 Hz, 1H), 5,26 (dq, Ji = 1,8 Hz, J₂ = 10,2

Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,61 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,55 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 4,25 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,22 - 4,11 (m, 4H), 4,03 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,38 - 3,21 (m, 5H), 3,05 (dd, Ji - 8,1 Hz, J₂ = 18 Hz, 1H), 2,65 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,79 (dd, Ji = 12,3 Hz, J₂ = 15,9 Hz, 1H);

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 154,3, 148,6, 148,4, 144,5, 139,0, 133,6, 130,6, 130,1,

125,07, 124,7, 124,0, 121,1, 117,7, 112,6, 101,2, 99,2, 77,2, 74,4, 74,1, 59,8, 59,8, 57,7, 57,0, 56,8, 56,68, 55,3, 43,2, 41,5, 26,4, 25,2, 15,9, 9,3.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C34H39CI3N4O8: 738,20. Nalezeno (M+H)⁺: 739,0.

Příklad 24

Sloučenina Int-24

9 ·· 99 ·· » · * « · · · · • 9 9 9 9 9

9 9 9 9

999 99 9 9 9 9 9 99

Do suspenze Int-23 (0,304 g, 0,41 ml) v 90 % vodné kyselině octové (4 ml) byl přidán práškový zinek (0,2 g, 6,17 ml) a reakce byla míchána po dobu 7 hodin při teplotě 23 °C. Směs byla zfiltrována přes celit, který byl promyt CH₂C1₂. Organická vrstva byla promyta vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (pH = 9) (15 ml) a vysušena síranem sodným. Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku za vzniku Int-24 (0,191 g, 83 %) jako bílé pevné látky.

Rf: 0,3 (ethylacetát:methanol 5:1).

^lH NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,68 (s, 1H), 6,09 (m, 1H), 5,90 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,83 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,39 (dq, J, - 1,5 Hz, J₂ = 17,1 Hz, 1H), 5,25 (dq, J, = 1,5 Hz, J₂ = 17,1 Hz, 1H), 5,25 (dq, J, = 1,5 Hz, J₂ = 10,2 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,22 - 4,09 (m, 3H), 3,98 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,89 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,37 - 3,17 (m, 3H), 3,07 (dd, J, = 8,1 Hz, J₂ = 18 Hz, 1H), 2,71 (m, 2H), 2,48 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,80 (dd, Ji = 12,3 Hz, J₂ - 15,9 Hz, 1H) ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 148,5, 148,2, 144,3, 138,7, 133,7, 130,7, 129,9, 125,0, 123,9, 121,3, 117,9, 117,5, 113,6, 112,0, 101,0, 99,2, 74,0, 59,8, 59,7, 58,8, 57,6, 57,0, 56,2, 55,2, 44,2, 41,5, 31,5, 26,4, 25,6, 22,5, 16,7, 14,0, 9,2.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₃iH₃gN4O6: 562,66. Nalezeno (M+H)⁺: 563,1.

Příklad 25

Sloučenina Int-25

H₂O, THF, AcOH, NaNO₂ 3h,0°C.

Do roztoku Int-24 (20 mg, 0,035 ml) v H₂O (0,7 ml) a THF (0,7 ml) byl přidán NaNO₂ (12 mg, 0,17 ml) a 90 % vodný roztok AcOH (0,06 ml) při teplotě 0 °C a směs byla míchána při teplotě 0 °C po dobu 3 hodin. Po zředění CH₂C1₂ (5 ml) byla organická vrstva promyta vodou (1 ml), vysušena síranem sodným a zkoncentrována ve vakuu. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂, hexan:ethylacetát 2:1) za vzniku Int-25 (9,8 mg, 50 %) jako bílé pevné látky.

Rf: 0,34 (hexan:ethylacetát 1:1).

'H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,71 (s, 1H), 6,11 (m, 1H), 5,92 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,42 (dq, J, = 1,5 Hz, J₂ = 17,1 Hz, 1H), 5,28 (dq, Jj = 1,5 Hz, J₂ = 10,2 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,26 - 4,09 (m, 3H), 4,05 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,97 (t, J = 3,0 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,67 - 3,32 (m, 4H), 3,58 (s, 3H), 3,24 (dd, J, = 2,7 Hz, J₂ = 15,9 Hz, 1H), 3,12 (dd, Ji - 8,1 Hz, J₂ = 18,0 Hz, 1H), 2,51 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,83 (dd, J, = 12,3 Hz, J₂ = 15,9 Hz, 1H) ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 148,7, 148,4, 138,9, 133,7, 131,1, 129,4, 125,1, 123,9,

120,7, 117,6, 117,5, 113,2, 112,3, 101,1, 99,2, 74,0, 63,2, 59,8, 59,7, 57,9, 57,7, 57,0, 56,5, 55,2,41,6,29,6, 26,1,25,6,22,6, 15,7, 9,2.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C31H37N3O7: 563,64. Nalezeno (M+H)⁺: 564,1.

100

Příklad 29

Sloučenina Int-29

2,2,2-triohlorethyl chlormravenčan

NaH, THF, reflux

Výchozí látka (2,0 g, 5,90 ml) byla přidána do suspenze hydridu sodného (354 mg, 8,86 ml) v THF (40 ml) při teplotě 23 °C, potom byl do suspenze přidán allylchloroformát (1,135 ml, 8,25 ml) při teplotě 23 °C a směs byla refluxována po dobu 3 hodin. Suspenze byla ochlazena, zfiltrována, pevná látka byla promyta ethylacetátem (100 ml) a filtrát byl zkoncentrován. Surový olej byl převrstven hexanem (100 ml) nechán stát přes noc při teplotě 4 °C. Potom bylo rozpouštědlo dekantováno a světle žlutá usazenina byla promyta CH2CI2 (20 ml) a vysrážena hexanem (100 ml). Po 10 minutách bylo rozpouštědlo znovu dekantováno. Tento postup byl opakován, dokud nevznikla bílá pevná látka. Ta byla zfiltrována a vysušena za vzniku požadované sloučeniny Int-29 (1,80 g, 65 %) jako bílé pevné látky.

'H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,74 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,62 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 7,33 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,30 (t, J - 6,3 Hz, 2H), 5,71 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 4,59 (m, 1H), 4,11 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 3,17 (dd, J = 6,0 Hz, J - 2,7 Hz, 2H), 3,20 (dd, J = 5,4 Hz, J = 2,lHz,2H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ 173,6, 152,7, 144,0, 139,7, 137,8, 126,0, 125,6, 123,4,

118,3, 73,4, 52,4, 45,5, 35,8, 33,7.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C20H18CI3NO4S: 474,8. Nalezeno (M+Na)⁺: 497,8

101

Příklad 30

Sloučenina Int-30 • « • · • · • * »♦ ·»··

Byla vytvořena azeotropická směs sloučeniny Int-25 (585 mg, 1,03 ml), sloučeniny Int-29 (1,47 mg, 3,11 ml) a bezvodého toluenu (3x10 ml). Do roztoku Int-25 a Int-29 v bezvodém CH2CI2 (40 ml) byl přidán DMAP (633 mg, 5,18 ml) a EDC.HC1 (994 mg, 5,18 ml) při teplotě 23 °C. Reakční směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 3 hodin. Směs byla rozdělena nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a vrstvy byly odděleny. Vodná vrstva byla promyta CH2CI2 (50 ml). Spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem sodným, zfiltrovány a zkoncentrovány. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografii (ethylacetát/hexan 1:3) za vzniku Int-30 (1,00 g, 95 %) jako světle žluté pevné látky.

^lH NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,72 (m, 2H), 7,52 (m, 2H), 7,38 (m, 2H), 7,28 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,03 (m, 1H), 5,92 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,79 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,39 (m, 1H), 5,29 (dq, J = 10,3 Hz, J = 1,5 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,73 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,66 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,36 - 3,96 (m, 9H), 3,89 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 3,33 (m, 1H), 3,20 (m, 2H), 2,94 (m, 3H), 2,59 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,83 (dd, J = 16,0 Hz, J = 11,9 Hz, 1H).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 169,7, 154,0, 148,8, 148,4, 145,7, 144,5, 140,9, 139,0,

133.7, 130,9, 130,6, 127,6, 127,0, 124,8, 124,6, 124,1, 120,8, 119,9, 118,2, 117,7, 117,3,

112.7, 112,1, 101,3, 99,2, 74,7, 73,9, 64,4, 59,8, 57,7, 57,0, 56,8, 55,4, 53,3,46,7, 41,4, 36,5,

34.7, 31,5, 26,4, 24,9, 22,6, 15,7, 14,0, 9,1.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C₅,H₅3C1₃N₄0,oS: 1020,4. Nalezeno (M+H)⁺: 1021,2

102

Příklad 31

Sloučenina Int-31

M *» • 9 9 « * · · * » * * · • · ••a· »«

9 » • » a • · • a * «·· 9

Do roztoku Int-30 (845 mg, 0,82 ml), kyseliny octové (500 mg, 8,28 ml) a (PPh₃)₂PdCl₂ (29 mg, 0,04 ml) v bezvodém CH₂C1₂ byl při teplotě 23 °C přidán po kapkách Bu₃SnH (650 mg, 2,23 ml). Reakční směs byla míchána při této teplotě po dobu 15 minut za tvorby bublin. Surový produkt byl ochlazen vodou (50 ml) a extrahován CH₂C1₂ (3 x 50 ml). Organické vrstvy byly vysušeny síranem sodným, zfíltrovány a zkoncentrovány. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (ethylacetát/hexan v gradientu od 1:5 do 1:3) za vzniku sloučeniny Int-31 (730 mg, 90 %) jako světle žluté pevné látky.

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 7,72 (m, 2H), 7,56 (m, 2H), 7,37 (m, 2H), 7,30 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 5,89 (s, 1H), 5,77 (s, 1H), 5,74 (s, 1H), 5,36 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,73 (m, 1H), 4,48 (d, J - 11,9 Hz, 1H), 4,08 (m, 4H), 3,89 (m, 1H), 3,86 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 3,38 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,02 - 2,89 (m, 4H), 2,67 (s, 1H), 2,61 (s, 1H), 2,51 (dd, J = 14,3 Hz, J = 4,5 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,83 (m, 1H).

NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,2, 152,5, 148,1, 146,2, 144,4, 144,3, 143,3, 139,6, 134,6, 129,7, 129,6, 126,2, 125,6, 123,4, 123,3, 121,6, 118,5, 116,3, 110,7, 110,2, 105,1,99,4,

98,5, 75,2, 73,3, 61,7, 58,4, 57,9, 56,3, 56,1, 55,1, 54,7, 53,9, 51,9, 45,2, 40,1, 35,6, 33,3,

24,8, 23,3, 14,5, 7,3.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C48H49CI3N4O10S: 980,3. Nalezeno (M+H)⁺: 981,2.

103

Příklad 32

Sloučenina Int-32 *» » Λ 4 • » · • *·· * • · »·«· »« * ·>

»· ·© • · • ·

Ο · **· ··· ·· # · • · 4 • ♦ · • · »· ····

lot-31 toV-32

Do roztoku Int-31 (310 mg, 0,32 ml) vbezvodém CH2CI2 (15 ml) byl při teplotě -10 °C přidán kanylou 70 % roztok anhydridu kyseliny benzenselenové (165 mg, 0,32 ml) v bezvodém CH₂C1₂ (7 ml) a teplota byla udržována při -10 °C. Reakční směs byla míchána při teplotě -10 °C po dobu 5 minut. Potom byl při této teplotě přidán nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (30 ml). Vodná vrstva byla promyta více CH₂C1₂ (40 ml). Organické vrstvy byly vysušeny síranem sodným, zfiltrovány a zkoncentrovány. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografii (ethylacetát/hexan v gradientu od 1:5 do 1:1) za vzniku Int-32 (287 mg, 91 %, HPLC: 91,3 %) jako světle žluté pevné látky jako směs dvou isomerů (65:35), které byly dále použity v dalším kroku.

'H NMR (300 MHz, CDCI3): δ (Směs izomerů) 7,76 (m, 4H), 7,65 (m, 4H), 7,39 (m, 4H), 7,29 (m, 4H), 6,62 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 5,79 - 5,63 (m, 6H), 5,09 (s, 1H), 5,02 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,99 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,80 - 4,63 (m, 6H), 4,60 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,38 (d, J = 12,8 Hz, J = 7,5 Hz, 1H), 4,27 (dd, J = 12,8 Hz, J = 7,5 Hz, 1H), 4,16 - 3,90 (m, 10H), 3,84 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,50 (s, 3H), 3,49 (s, 3H), 3,33 - 2,83 (m, 14H), 2,45 - 2,18 (m, 2H), 2,21 (s, 6H), 2,17 (s, 6H), 1,77 (s, 6H), 1,67 (m, 2H).

’>³C NMR (75 MHz, CDCI3): δ (Směs izomerů) 168,6, 168,4, 158,6, 154,8, 152,8, 152,5,

147,3, 147,2, 146,8, 144,1, 144,0, 140,8, 139,7, 137,1, 129,8, 129,3, 128,4, 128,7, 126,5,

125,5, 123,7, 123,6, 123,5, 123,4, 122,2, 121,3, 118,3, 115,8, 115,5, 110,2, 106,9, 103,5,

103.2, 100,1, 99,6, 97,9, 97,7, 93,8, 73,4, 70,9, 69,2, 64,9, 62,5, 59,3, 58,9, 58,4, 56,7, 56,3,

56.2, 55,4, 55,2, 55,1, 54,9, 54,7, 54,3, 54,1, 53,8, 52,8, 45,5, 40,5, 40,0, 39,8, 35,8, 35,5,

33,9, 33,7, 30,1, 28,8, 24,2, 24,1, 21,2,14,5,14,4,12,7, 6,0, 5,7.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C48H49CI3N4O11S: 996,3. Nalezeno (M+H)⁺: 997,2

104

Příklad 33

Sloučenina Int-33

Int-32 Int-33

Reakční nádoba byla dvakrát zahřáta, několikrát vyčištěna vakuem/argonem a byla udržována v atmosféře argonu po dobu reakce. Do roztoku DMSO (39,1 mg, 0,55 ml, 5 ekv.) v bezvodém CH₂C1₂ (4,5 ml) byl při teplotě -78 °C přikapáván anhydrid kyseliny triflátové (37,3 mg, 0,22 ml, 2 ekv.). Reakční směs byla míchána při teplotě -78 °C po dobu 20 minut, potom byl při této teplotě přidán kanylou roztok Int-32 (110 mg, 0,11 ml, HPLC: 91,3 %) v bezvodém CH₂C1₂ (1 ml jako hlavní přídavek a 0,5 ml na promytí). Během přidávání byla teplota udržována při -78 °C v obou nádobách a barva se změnila ze žluté na hnědou. Reakční směs byla míchána při teplotě -40 °C po dobu 35 minut. Během této doby se barva roztoku změnila ze žluté na tmavě zelenou. Po této době byl po kapkách přidán iPr₂NEt (153 mg, 0,88 ml, 8 ekv.) a reakční směs byla udržována při teplotě 0 °C po dobu 45 minut a barva roztoku se změnila na hnědou. Potom byl po kapkách přidán t-butanol (41,6 ml, 0,44 ml, 4 ekv.) a 2-t-butyl-l,l,3,3-tetramethylguanin (132,8 ml, 0,77 ml, 7 ekv.) a reakční směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 40 minut. Po této době byl po kapkách přidán anhydrid kyseliny octové (104,3 mg, 1,10 ml, 10 ekv.) a reakční směs byla udržována při teplotě 23 °C po dobu 1 hodiny. Potom byla reakční směs zředěna CH₂C1₂ (20 ml) a promyta nasyceným vodným roztokem NH₄C1 (50 ml), hydrogenuhličitanem sodným (50 ml) a chloridem sodným (50 ml). Spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem sodným, zfíltrovány a zkoncentrovány. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografíí (eluent: ethylacetát/hexan gradient 1:3 do 1:2) za vzniku sloučeniny Int-33 (54 mg, 58 %) jako světle žluté pevné látky.

• · ·· ··

105

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,85 (s, 1H), 6,09 (s, 1H), 5,99 (s, 1H), 5,20 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,03 (m, 1H), 4,82 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,35 - 4,17 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,45 (m, 2H), 2,91 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,12 (m, 2H), 2,03 (s, 3H).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 168,5, 167,2, 152,7, 148,1, 147,1, 144,5, 139,6, 139,1,

130,5, 129,0, 123,7, 123,5, 123,3, 118,8, 116,5, 112,1, 100,6, 97,8, 73,3, 60,5, 59,4, 59,2,

58,3, 57,6, 57,4, 56,1, 53,3, 53,1, 40,6, 40,0, 31,0, 22,2,18,9, 14,4, 8,1.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C36H39CI3N4O11S: 842,1. Nalezeno (M+H)⁺: 843,1 • ·

106

Příklad 34

Sloučenina Int-34

Me

TMSCI, Nal CH₂Cl2, CH₃CN

lnV~ 33 34

Do roztoku Int-33 (12 mg, 0,014 ml) v suchém dichlormethanu (1,2 ml) a HPLC acetonitrilu (1,2 ml) byl přidán při teplotě 23 °C jodidu sodného (21 mg, 0,14 ml) a čerstvě destilovaného (přes hydrid vápenatý za atmosférického tlaku) trimethylsilylchloridu (15,4 mg, 0,14 ml). Reakční směs se zbarvila do oranžova. Po 15 minutách byl roztok zředěn dichlormethanem (10 ml) a promyt vodným nasyceným roztokem Na₂S₂O₄ (3 x 10 ml). Organická vrstva byla vysušena síranem sodným, zfiltrována a zkoncentrována. Byla získána sloučenina Int-34 (13 mg, kvantitativně) jako světle žlutá pevná látka, která byla dále použita bez dalšího čištění.

*H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,85 (s, 1H), 6,09 (s, 1H), 5,99 (s, 1H), 5,27 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,03 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,34 (m, 1H), 4,27 (bs, 1H), 4,18 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,44 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 2,91 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,03 (s, 3H).

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C3₄H35N₄OioS: 798,1. Nalezeno (M+H)⁺: 799,1

107

Příklad 35

Sloučenina Int-35

1<*S- 34 \ot-35

Do roztoku Int-34 (13 mg, 0,016 ml) ve směsi kyseliny octové /H2O (90:10, 1 ml) byl přidán práškový zinek (5,3 mg, 0,081 ml) při teplotě 23 °C. Reakční směs byla zahřívána při teplotě 70 °C po dobu 6 hodin. Po této době byla ochlazena na 23 °C, zředěna CH2CI2 (20 ml) a promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (15 ml) a vodným roztokem Et₃N (15 ml). Organická vrstva byla vysušena síranem sodným, zfíltrována a zkoncentrována. Zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografíi se silikagelem-NH₂ (eluent: ethylacetát/hexan gradient od 0:100 do 50:50) za vzniku sloučeniny Int-35 (6,8 mg, 77 % po dvou krocích) jako světle žluté pevné látky.

^!H NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 6,51 (s, 1H), 6,03 (dd, J = 1,3 Hz, J = 26,5 Hz, 2H), 5,75 (bs, 1H), 5,02 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,25 (m, 2H), 4,18 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,12 (dd, J = 1,9 Hz, J = 11,5 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,40 (m, 2H), 3,26 (t, J - 6,4 Hz, 1H), 2,88 (m, 2H), 2,30 - 2,10 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,02 (s, 3H).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 174,1, 168,4, 147,8, 145,4, 142,9, 140,8, 140,1, 131,7,

130,2, 129,1, 128,3, 120,4, 118,3, 117,9, 113,8, 111,7, 101,7, 61,2, 59,8, 59,2, 58,9, 54,4, 53,8, 54,4, 41,3, 41,5, 34,1, 23,6, 20,3, 15,5, 9,4.

ESI-MS m/z: Vypočteno pro C31H34N4O8S: 622,7. Nalezeno (M+H)⁺: 623,2.

108

Příklad 36

Sloučenina Int-36

\rfe- 35 - 36

Do roztoku N-methylpyridin-4-karboxaldehyd jodidu (378 mg, 1,5 mmol) vbezvodém DMF (5,8 ml) byl přidán bezvodý toluen (2x10 ml), aby se odstranila voda azeotropickou směsí toluenu a vody. Roztok Int-35 (134 mg, 0,21 mmol), do kterého byl předtím přidán bezvodý toluen (2 x 10 ml), bezvodý CH2CI2 (destilovaný přes CaFh, 7,2 ml), byl přidán kanylou při teplotě 23 °C do tohoto oranžového roztoku. Reakční směs byla míchána při teplotě 23 °C po dobu 4 hodin. Po této době byl při teplotě 23 °C po kapkách přidán DBU (32,2 ml, 0,21 mmol) a reakční směs byla míchána při této teplotě po dobu 15 minut. Do reakční směsi byl přidán nasycený vodný roztok šťavelové kyseliny (5,8 ml) a směs byla míchána po dobu 30 minut při teplotě 23 °C. Potom byla reakční směs ochlazena na teplotu 0 °C a potom byl po částech přidán NaHCO₃ a nasycený vodný roztok NaHCO₃. Směs byla extrahována EÍ2O. K2CO3 byl přidán do vodné vrstvy a ta byla extrahována Et2O. Spojené organické vrstvy byly vysušeny MgSC>4 a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (AcOEt/hexan z 1/3 do 1/1) za vzniku sloučeniny Int-36 (77 mg, 57 %) jako světle žluté pevné látky.

*H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 6,48 (s, 1H), 6,11 (d, J - 1,3 Hz, 1H), 6,02 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 5,70 (bs, 1H), 5,09 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 4,66 (bs, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,27 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,21 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,54 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 3,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 2,88 - 2,54 (m, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,04 (s, 3H). ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃): δ 186,7, 168,5, 160,5, 147,1, 146,4, 142,9, 141,6, 140,7,

130,4, 129,8, 121,7 (2C), 120,0, 117,8, 117,1, 113,5, 102,2, 61,7, 61,4, 60,3, 59,8, 58,9, 54,6,

109 ···« ·· ··· ··· ·· ····

41,6, 36,9, 29,7, 24,1, 20,3, 15,8, 14,1, 9,6. ESI-MS m/z: Vypočteno pro C31H31N3O9S: 621,7. Nalezeno (M+H)⁺: 622,2.

Hlavní odkazy Evropský patent 309 477.

US patent 5 721 362.

Skai, R., Jares-Erijman, E. A., Manzanares, I., Elipe, Μ. V. S., and Rinehart, K. L., J. Am. Chem. Soc. (1996) 118, 9017 - 9023.

Martinez, E. J., Owa, T., Schreiber, S. L. and Corey, E. J., Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 1999, 96, 3496-3501.

Japonský patent JP-A2 59/225189.

Japonský patent JP-A2 60/084288.

Arai, T.: Kubo, A. In The Alkaloids, Chemistry and Pharmacology; Brossi, A. Ed.; Academie: New York, 1983, Vol 21; pp. 56 - 110.

Remers, W. A.: In The Chmeistry of Antitumour Antibiotics; Vol.2; Wiley; New York, 1988, pp. 93 - 118.

Gulavita N. K.; Scheuer, P. J.: Desilva, E. D. Abst. Indo-United States Symp. on Bioactive Compounds from MArine Organisms, Goa, India, Feb. 23 - 27, 1989, p. 28.

Arai, T.; Takahashi, K; Kubo, A., J. Antibiot., 1977, 30, 1015 - 1018.

Arai, T.; Takahashi, K.; Nakahara, S.: Kubo, A., Experientia 1980, 36, 1025 - 1028.

Miakmi, Y.; Takahashi, K; Yazawa, K.; Hour-Young, C.; Arai, T.; Saito, N.; Kubo, A., J.

Antibiot., 1988,41,734-740.

Arai, T.;Takahashi, K.; Ishiguro, K.; Yazawa, K., J. Antibiot., 1980, 33, 951 - 960.

Yazawa, K.; Takahashi, K.; Mikami, Y.; Arai, T.; Saito, N.; Kubo, A., J. Antibiot., 1986,

39,1639- 1650.

Arai, T.; Yazawa, K.; Takahashi, K.; Maeda, A.; Mikami, Y., Antimicrob. Agent Chemother., 1985, 28, 5 - 11.

Takahashi, K.; Yazawa, K.; Kishi, K.; Mikami, Y.; Arai, T.; Kubo, A., J. Antibiot., 1982, 35, 196-201.

Yazawa, K.; Azalka, T.; Takahashi, K.; Mikami, Y.; Arai, T., J. Antibiot., 1982, 35, 915 917.

Frincke, J. M.; Faulkner, D. J., J. Am. Chem., 1989, 54, 5822 - 5824.

Kubo, A.; Saito, N.; Kitahara, Y.; Takahashi, K.; Tazawa, K.; Arai, T., Chem. Pharm.

Bull., 1987,35,440-442.

110

Trowitzsch-Kienast, W.; Irschik, H.; Reichenback, H.; Wray, V.; Hofle, G., Liebigs Ann. Chem., 1988, 475 -481.

Ikeda, Y.; Idemoto, H.; Hirayama, F.; Yamamoto, K.; Iwao, K.; Asano, T.; Munakata, T., J. Antibiot., 1983, 36, 1279 - 1283.

Asaoka, T.; Yazawa, K.; Mikami, Y. Arai, T.; Takahashi, K., J. Antibiot., 1983, 36, 1184 1194.

Munakata et al., US patent 4,400, 752,1984.

Y. Ikeda et al., The Journal of Antibiotics, Vol XXXVI, N°10,1284, 1983.

R. Cooper, S. Unger, The Journal of Antibiotics, VOL XXXVIII, N°l, 1985.

Corey et al., US patent 5 721 362, 1998.

Corey et al., J. Am. Chem. Soc., vol 118, p. 9202 - 9204,1996.

Proč. Nati. Acad. Sci. USA. Vol. 96, pp. 3496 - 3501, 1999.

Claims (10)

1. PATENTOVÉ NÁROKY · 'Urv

   1. Ecteinascidin mající pět spojených kruhů s 1,4-můstkem, který má strukturu obecného vzorce Via nebo VIb:

   H NH₂

   VIb

   Via a sloučeniny, kde -NH₂ nebo -OH skupiny na 1,4-můstku jdou derivatizovány; s výjimkou ecteinascidinu 583 nebo 597 a s výjimkou sloučenin 14, 15 nebo 47 US patentu č. 5 721 362.
2. 2. Sloučenina podle nároku 1, kde ecteinascidin mající pět spojených kruhů má obecný vzorec XIV:

   kde kruhy A a E jsou fenolické; kruhy B a D jsou tetrahydro a kruh C je perhydro.
3. 3. Sloučenina podle nároku 2, kde substituenty na pozicích 5, 6, 7, 8, 12, 16, 17, 18 a 21 jsou takové, které známe v ecteinascidinu.
4. 4. Sloučenina podle nároku 3, kde substituenty na pozicích 5, 6, 7, 8, 12, 16,17 a 18 jsou takové, které známe v ecteinascidinu.
5. 5.

   Sloučenina podle nároku 3 nebo 4, kde ecteinascidin je ecteinascidin 743.

   • · · · · • · · · φ φ · φφφ φ

   112 .· ··: · :

   ••ΦΦ ·· ··· ·
6. 6. Sloučenina podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, kde -NH₂ nebo -OH skupina na 1,4-můstku je derivatizována.
7. 7. Sloučenina podle nároku 6, kde skupina -CHNH₂- na 1,4-můstku je nahrazena skupinou -C(X₂)₂-, kde X₂ je OXi nebo N(Xj)₂, kde každý Xj je nezávisle na sobě H, C(=O)R', substituovaný nebo nesubstituovaný Cl až 08 alkyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až 08 alkenyl, substituovaný nebo nesubstituovaný C2 až 08 alkynyl, substituovaný nebo nesubstituovaný aryl nebo dvě Xj skupiny mohou společně tvořit cyklický substituent na atomu dusíku.
8. 8. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že zahrnuje ecteinascidin mající pět spojených kruhů s 1,4-můstkem, který má strukturu obecného vzorce Via nebo VIb a sloučeniny, kde -NH₂ nebo -OH skupiny na 1,4-můstku jdou derivatizovány; s výjimkou ecteinascidinu 583 nebo 597 společně s farmaceuticky přijatelným nosičem.
9. 9. Použití ecteinascidinu vyznačující se tím, že zahrnuje pět spojených kruhů s 1,4-můstkem, který má strukturu obecného vzorce Via nebo VIb a sloučeniny, kde -NH₂ nebo -OH skupiny na 1,4-můstku jdou derivatizovány; s výjimkou ecteinascidinu 583 nebo 597 pro přípravu léčiva pro léčení nádoru.
10. 10. Způsob léčení nádoru vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství ecteinascidinu, který má pět spojených kruhů, s 1,4-můstkem, který má strukturu obecného vzorce Via nebo VIb a sloučeniny, kde -NH₂ nebo -OH skupiny na 1,4-můstku jsou derivatizovány; s výjimkou ecteinascidinu 583 nebo 597.