CN1975380A - 测定人体血红蛋白的光学检测用试剂配方 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及检测试剂,公开了一种测定人体血红蛋白的光学检测用试剂配方。该试剂配方不含剧毒药品***,包括至少一种氧化还原反应试剂和至少一种多碳裂解剂,并添加至少一种有机扩散剂和至少一种无机稳定剂。该试剂具有使用安全,测量速度快、测试结果准确、灵敏度高、检测范围宽,易于配制且成本较低等优点,很适合在医学诊断上进行血红蛋白现场快速检测。
Description
技术领域
本发明涉及检测试剂,属于医学临床诊断技术领域,是一种测定人体血红蛋白的光学检测用试剂配方。
背景技术
血红蛋白是体内有核红细胞及网织红细胞合成的一种有色素辅基的结合蛋白质,在人体内的主要作用是参与氧气的运输。
缺铁性贫血是常见的危害人群健康的营养问题。血红蛋白含量的测定是评价人群贫血患病率和铁营养状况的基本方法之一。其测定方法以国际血液学会标准化委员会(ICSH)推荐,经世界卫生组织(WHO)认可的氰化高铁血红蛋白(HiCN)分光光度法测定为最标准的方法。但是,由于氰化高铁血红蛋白试剂中含有剧毒药品***(KCN),虽然该试剂中用量极少,不到人体致死量,但如果大量长期使用该试剂,加上废液处理不当,势必会造成环境污染或危害人体,需要专人保管,使用不便;氰化高铁血红蛋白试剂测定时,血红蛋白需要一定的时间转化为氰化高铁血红蛋白(约需5min后比色测定),耗时较长,且配套仪器庞大,不易携带,成本较高,很难普及推广。
发明内容
本发明的目的,就是针对上述测试方法的不足,向临床提供一种不含***(KCN)、价格低廉、容易保存、能快速反应、显色稳定、干扰因素小、优于氰化高铁血红蛋白(HiCN)法的且与常规方法有较高相关性的测试试剂配方,从而建立一种简便快捷的血红蛋白水平现场检测方法,可解决大量的公共卫生现场工作。
本发明的再一目的是提供一种测试试剂配方,该试剂可用于医学临床定量测定血液中的血红蛋白;可进行现场快速检测,满足医学体检的需要并能有效的消除个体间的交叉感染。
为达到以上目的,本发明的技术解决方案是提供一种测定人体血红蛋白的光学检测用试剂配方,其包括至少一种氧化还原反应试剂和至少一种多碳裂解剂,并对这两种试剂进行配比优化后,添加了至少一种有机扩散剂和至少一种无机稳定剂。
所述的光学检测用试剂配方,其所述氧化还原反应试剂,是从黄钠铁矾、三氯化铁、硫酸铁、六氰合铁酸钾、硝酸铁、六氰合钴酸钾、氯化六氨合钴、六亚硝酸合钴酸钾、双环戊二烯基铁中至少选取一种组成。
所述的光学检测用试剂配方,其所选用的氧化还原反应试剂,其浓度在8.0~12.0g/L之间,优选为9g/L。
所述的光学检测用试剂配方,其所述多碳裂解剂,是从十二烷基肌酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、冰醋酸、皂角苷、苯基-4,5-二甲基噻唑氯嗡盐、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺、N-乙酰氨基葡萄塘、3-[2-(4-甲氧基-苯基)-2-氧-乙基]-4,5,6,7-四氢-苯并噻唑溴化物、3-[2-(4-硝基-苯基)-2-氧-乙基]-4,5,6,7-四氢-苯并噻唑溴化物、3-2-萘-2-基-2-氧-乙基)-4,5,6,7-四氢-苯并噻唑溴化物中至少选取一种组成。
所述的光学检测用试剂配方,其所选用的多碳裂解剂,其浓度在10~14g/L之间,优选为13g/L。
所述的光学检测用试剂配方,其所述有机扩散剂,是从亚甲基二萘磺酸钠、甘油-桂酸酯、聚甘油脂肪酸、聚氧化乙烯烷基酚醚、十八碳酰胺、聚氧乙烯(4)山梨醇酐单月桂酸酯、曲拉通、乙二醇一丁醚、脂肪酸聚氧乙烯醚、十二烷基叔胺盐、4-乙烯基吡啶、椰子酸二乙醇胺缩合物、顺丁烯二酸二仲辛酯磺酸钠、十二烷基硫酸二乙醇胺盐、十八烷基甲苯磺酸钠、油磺酸钠中至少选取一种组成。
所述的光学检测用试剂配方,其所选用的有机扩散剂,其浓度在0.10~0.50g/L之间,优选为0.50g/L。
所述的光学检测用试剂配方,其所述的无机稳定剂,是从凝胶、精氨酸、草酸、8-羟基喹啉、EDTA、氨水-氯化氨、Ca(H2PO4)2-CaHPO4、硼酸、磷酸、乙酸、氢氧化钠、Na2CO3-NaHCO3、NaH2PO4-Na2HPO4、乙酸钠、脱氧胆酸钠、氯化钡、三乙醇胺、蔗糖磷酸、甘氨酸、醋酸钠中至少选取一种组成。
所述的光学检测用试剂配方,其所选用的无机稳定剂,其浓度在2.0~6.0g/L之间,优选为5.0g/L。
所述的光学检测用试剂配方,其所选用的无机稳定剂,能调节该光学检测用试剂的pH值,其pH值在6.5~7.5之间。
附图说明
图1是利用本发明试剂配方检测血红蛋白与ADVIA 120生化分析仪的相关性测试示意图。
具体实施方式
本发明提出了一种测定人体血红蛋白的光学检测用试剂配方,该配方至少包括以下四种试剂:
至少一种氧化还原反应试剂,所述氧化还原反应试剂从黄钠铁矾、三氯化铁、硫酸铁、六氰合铁酸钾、硝酸铁、六氰合钴酸钾、氯化六氨合钴、六亚硝酸合钴酸钾、双环戊二烯基铁中选取,所用浓度在8.0~12.0g/L选取,优选为9g/L。
该试剂与血红蛋白反应可使最终产物发生颜色变化,颜色深浅与血液中血红蛋白成比例,利用光的反射吸收原理即可定量检测血液中血红蛋白。
至少一种多碳裂解剂,所述多碳裂解剂从十二烷基肌酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、冰醋酸、皂角苷、苯基-4,5-二甲基噻唑氯嗡盐、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺、N-乙酰氨基葡萄塘、3-[2-(4-甲氧基-苯基)-2-氧-乙基]-4,5,6,7-四氢-苯并噻唑溴化物、3-[2-(4-硝基-苯基)-2-氧-乙基]-4,5,6,7-四氢-苯并噻唑溴化物、3-2-萘-2-基-2-氧-乙基)-4,5,6,7-四氢-苯并噻唑溴化物中选取,浓度在10~14g/L之间取定,优选为13g/L。
该试剂的存在可对血液中的红细胞进行裂解,从而释放出血红蛋白。
至少一种有机扩散剂,所述有机扩散剂从亚甲基二萘磺酸钠、甘油-桂酸酯、聚甘油脂肪酸、聚氧化乙烯烷基酚醚、十八碳酰胺、聚氧乙烯(4)山梨醇酐单月桂酸酯、曲拉通、乙二醇一丁醚、脂肪酸聚氧乙烯醚、十二烷基叔胺盐、4-乙烯基吡啶、椰子酸二乙醇胺缩合物、顺丁烯二酸二仲辛酯磺酸钠、十二烷基硫酸二乙醇胺盐、十八烷基甲苯磺酸钠、油磺酸钠中选取,浓度在0.10~0.50g/L之间取定,优选为0.50g/L。
所选用的无机扩散剂可使所滴加试样能够快速散开,与反应试剂充分接触,缩短反应时间。
至少一种无机稳定剂,所述无机稳定剂从凝胶、精氨酸、草酸、8-羟基喹啉、EDTA、Tris-HCL、氨水-氯化氨、Ca(H2PO4)2-CaHPO4、硼酸、磷酸、乙酸、氢氧化钠、Na2CO3-NaHCO3、NaH2PO4-Na2HPO4、乙酸钠、脱氧胆酸钠、氯化钡、三乙醇胺、蔗糖磷酸、甘氨酸、醋酸钠中选取,所用浓度在2.0~6.0g/L之间取定,优选为5.0g/L。
所用无机稳定剂可增加从红细胞中释放出来的血红蛋白分子的稳定性,使显色稳定,并且此无机稳定剂还有调节试剂pH的功能,调节试剂pH值在6.5~7.5之间。
下面结合具体实施例对本发明进行描述:
实施例1
以下列化合物所示浓度制备了一种试剂:
化合物 浓度
六氰合铁酸钾 9g/L
皂角苷 13g/L
NaH2PO4-Na2HPO4 5.0g/L
曲拉通X-100 0.50g/L
将以上试剂按所示浓度进行混合,并调节pH在6.5~7.5之间,从而制备出一种血红蛋白测试试剂。利用该试剂,通过光学检测,在北京医院临床检验检疫中心与ADVIA 120生化检测仪做对比实验,响应时间60s,对比结果如图1所示,两种试剂测试结果相关系数达到0.986,获得了较好的检测效果,可以满足现场快速检测的需要。
以上实施例只是为了说明本发明,而不是对本发明的限制。在上述说明的基础上,可以对本发明作许多改进和改变。在所附权利要求书的范围内,本发明可以有不同于上述的其它实现方式,选用其它试剂、改变试剂浓度等方法均在本发明专利要求范围之内。
Claims (10)
1.一种测定人体血红蛋白的光学检测用试剂配方,其特征在于,包括至少一种氧化还原反应试剂和至少一种多碳裂解剂,并对这两种试剂进行配比优化后,添加了至少一种有机扩散剂和至少一种无机稳定剂。
2.如权利要求1所述的光学检测用试剂配方,其特征在于,所述氧化还原反应试剂,是从黄钠铁矾、三氯化铁、硫酸铁、六氰合铁酸钾、硝酸铁、六氰合钴酸钾、氯化六氨合钴、六亚硝酸合钴酸钾、双环戊二烯基铁中至少选取一种组成。
3.如权利要求2所述的光学检测用试剂配方,其特征在于,所选用的氧化还原反应试剂,其浓度在8.0~12.0g/L之间,优选为9g/L。
4.如权利要求1所述的光学检测用试剂配方,其特征在于,所述多碳裂解剂,是从十二烷基肌酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、冰醋酸、皂角苷、苯基-4,5-二甲基噻唑氯嗡盐、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺、N-乙酰氨基葡萄塘、3-[2-(4-甲氧基-苯基)-2-氧-乙基]-4,5,6,7-四氢-苯并噻唑溴化物、3-[2-(4-硝基-苯基)-2-氧-乙基]-4,5,6,7-四氢-苯并噻唑溴化物、3-2-萘-2-基-2-氧-乙基)-4,5,6,7-四氢-苯并噻唑溴化物中至少选取一种组成。
5.如权利要求4所述的光学检测用试剂配方,其特征在于,所选用的多碳裂解剂,其浓度在10~14g/L之间,优选为13g/L。
6.如权利要求1所述的光学检测用试剂配方,其特征在于,所述有机扩散剂,是从亚甲基二萘磺酸钠、甘油-桂酸酯、聚甘油脂肪酸、聚氧化乙烯烷基酚醚、十八碳酰胺、聚氧乙烯(4)山梨醇酐单月桂酸酯、曲拉通、乙二醇一丁醚、脂肪酸聚氧乙烯醚、十二烷基叔胺盐、4-乙烯基吡啶、椰子酸二乙醇胺缩合物、顺丁烯二酸二仲辛酯磺酸钠、十二烷基硫酸二乙醇胺盐、十八烷基甲苯磺酸钠、油磺酸钠中至少选取一种组成。
7.如权利要求6所述的光学检测用试剂配方,其特征在于,所选用的有机扩散剂,其浓度在0.10~0.50g/L之间,优选为0.50g/L。
8.如权利要求1所述的光学检测用试剂配方,其特征在于,所述的无机稳定剂,是从凝胶、精氨酸、草酸、8-羟基喹啉、EDTA、氨水-氯化氨、Ca(H2PO4)2-CaHPO4、硼酸、磷酸、乙酸、氢氧化钠、Na2CO3-NaHCO3、NaH2PO4-Na2HPO4、乙酸钠、脱氧胆酸钠、氯化钡、三乙醇胺、蔗糖磷酸、甘氨酸、醋酸钠中至少选取一种组成。
9.如权利要求8所述的光学检测用试剂配方,其特征在于,所选用的无机稳定剂,其浓度在2.0~6.0g/L之间,优选为5.0g/L。
10.如权利要求1、8或9所述的光学检测用试剂配方,其特征在于,所选用的无机稳定剂,能调节该光学检测用试剂的pH值,其pH值在6.5~7.5之间。
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