CN102300641A - 用于全血计数的微流体设备 - Google Patents

用于全血计数的微流体设备 Download PDF

Info

Publication number
CN102300641A
CN102300641A CN2010800057724A CN201080005772A CN102300641A CN 102300641 A CN102300641 A CN 102300641A CN 2010800057724 A CN2010800057724 A CN 2010800057724A CN 201080005772 A CN201080005772 A CN 201080005772A CN 102300641 A CN102300641 A CN 102300641A
Authority
CN
China
Prior art keywords
passage
microfluidic device
measurement
blood
channel
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2010800057724A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102300641B (zh
Inventor
D·M·佩蒂格鲁
J·D·格怀尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Koninklijke Philips NV
Original Assignee
Koninklijke Philips Electronics NV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Koninklijke Philips Electronics NV filed Critical Koninklijke Philips Electronics NV
Publication of CN102300641A publication Critical patent/CN102300641A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102300641B publication Critical patent/CN102300641B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56966—Animal cells
    • G01N33/56972—White blood cells
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/502769—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by multiphase flow arrangements
    • B01L3/502776—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by multiphase flow arrangements specially adapted for focusing or laminating flows
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/1031—Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects
    • G01N15/12—Investigating individual particles by measuring electrical or magnetic effects by observing changes in resistance or impedance across apertures when traversed by individual particles, e.g. by using the Coulter principle
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1484—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry microstructural devices
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
    • G01N33/721—Haemoglobin
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/80—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood groups or blood types or red blood cells
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2200/00—Solutions for specific problems relating to chemical or physical laboratory apparatus
    • B01L2200/10—Integrating sample preparation and analysis in single entity, e.g. lab-on-a-chip concept
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/06—Auxiliary integrated devices, integrated components
    • B01L2300/0627—Sensor or part of a sensor is integrated
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0809—Geometry, shape and general structure rectangular shaped
    • B01L2300/0816—Cards, e.g. flat sample carriers usually with flow in two horizontal directions
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0861—Configuration of multiple channels and/or chambers in a single devices
    • B01L2300/0864—Configuration of multiple channels and/or chambers in a single devices comprising only one inlet and multiple receiving wells, e.g. for separation, splitting
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0861—Configuration of multiple channels and/or chambers in a single devices
    • B01L2300/087—Multiple sequential chambers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/01—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials specially adapted for biological cells, e.g. blood cells
    • G01N2015/011—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials specially adapted for biological cells, e.g. blood cells with lysing, e.g. of erythrocytes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/01—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials specially adapted for biological cells, e.g. blood cells
    • G01N2015/016—White blood cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/01—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials specially adapted for biological cells, e.g. blood cells
    • G01N2015/018—Platelets
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N2015/1019—Associating Coulter-counter and optical flow cytometer [OFC]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N2015/1024—Counting particles by non-optical means
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T137/00—Fluid handling
    • Y10T137/0318—Processes
    • Y10T137/0402—Cleaning, repairing, or assembling

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Electric Means (AREA)

Abstract

本发明提供一种用于全血计数的微流体设备(10)。该微流体设备(10)包括第一测量通道(11)和与第一测量通道(11)隔开的第二测量通道(12)。该微流体设备(10)进一步包括用于向第一和第二测量通道(11，12)提供全血样品的第一入口(13)、用于向第一通道(11)提供用于白血细胞计数的裂解剂的第二入口(14)、用于向第一通道(11)提供抑制溶液的第三入口(15)，以及用于向第二通道(12)提供用于血红蛋白测量的裂解剂的第四入口(16)。本发明还提供了一种用于形成这种微流体设备(10)的方法和用于使用这种微流体设备(10)进行全血计数测试的方法。

Description

用于全血计数的微流体设备
技术领域
本发明涉及一种微流体方法和设备。更具体地，本发明涉及一种用于全血计数(FBC)的微流体设备、一种形成这种微流体设备的方法，以及使用这种微流体设备进行全血计数测试(FBC测试)的方法。
背景技术
全血计数(FBC)是一种用来测量血液细胞组成的诊断测试。它可以给出病人的关于免疫***状态的信息、关于血液散布氧的能力和/或关于血液有效凝结的能力的信息。照此，它是一种基础测试，经常被用作初始“一般目的”诊断工具或者用作更具目的性的监测方案。包括全血计数作为监测工具的护理周期(care cycle)的实例包括肿瘤学，关节炎和克罗恩氏病。在发达世界中每年进行多达3亿次的FBC测试。
FBC诊断参数和它们的临床指标(clinical indicator)总结在下表1和表2中。这些参数生成自若干单独测量，特别是，白血细胞(WBC)分类计数，红血细胞(RBC)计数，血小板计数和血红蛋白(Hb)测量(同样参见图1)。
表1、有关红血细胞的FBC临床参数
Figure BPA00001426505400011
Figure BPA00001426505400021
Figure BPA00001426505400031
表2、有关白血细胞的FBC临床参数
Figure BPA00001426505400032
Figure BPA00001426505400041
目前，被称为血液分析仪的大型商用实验室仪器被用于自动进行包括FBC的所有测量。这些设备的高成本和复杂性，加上对静脉血的需求，意味着它们大多是大型的集中式设备。
对在近的病人安置中进行FBC，特别是对要求全血计数以监测疾病的进展和/或治疗的应用，有明确的临床需求。已经开发出能够测量FBC的各个组分的微流体护理现场设备。在这方面，可用Hb测量设备、能够进行白血细胞分类的WBC计数器和血小板计数设备，光学地计数并确定红血细胞大小的设备。
对于细胞计数，当前的血液分析仪典型地采用电库尔特计数和/或光学散射方法计数并区分白细胞、计数并确定红血细胞和血小板的大小。
目前只存在很少的微流体库尔特计数器技术的实例。一个实例是把库尔特计数器与Hb测量组合。另一个计数细胞的实例是通过流过阻抗谱法(flow-through impedance spectroscopy)。这是一种新的流式细胞仪分析，特别适用于微流体形式。该技术能够在裂解血中区分出淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞，还能够对红血细胞和血小板进行计数和测大小。
HB测量的当前的“黄金标准”是光度氰化高铁血红蛋白(HbCN)法(参见van K.E and W.G.Zijlstra，Standardization of hemoglobinometry Ⅱ，Thehemiglobincyanide method，Clin Chim Acta，1961，6，p.38-44)。该方法包括红血细胞的化学裂解，以及随后的对所有Hb(这些细胞释放(release with)氰离子)加标签。标签产生最大值处于540nm的确定的吸收分布。通过测量540nm处的光学吸收，可以确定Hb的浓度。此外，HbCN的高稳定性意味着容易提供校准标准。
最普通的红血细胞裂解/氰化物转化试剂被称为Drabkin试剂。Drabkin试剂包含毒性极强的***。这个试剂仅针对全血中的很大的稀释度(1∶251)工作，因为红血细胞裂解依靠试剂的低离子强度来引起渗透压冲击。这个大的稀释度造成这种方法固有的不精确。此外，为了测量540nm处的光学吸收，需要～1cm的很长的光学路径。最后，在一些病理学实例中，浊度能够导致误高的吸收读数，这又将引起不正确的Hb浓度。
为了避免与毒性和浊度相关的问题，开发出很多其他测量Hb的光学装置。这些实例将在下文进行描述。
已知的护理现场设备使用叠氮化钠将Hb转化为叠氮配位Hb衍生物(叠氮高铁血红蛋白，HbN3)。这种方法本身导致短的路径长度(0.1mm)吸收谱，因为干燥试剂移除了对全血稀释的需要。取两个吸收率读数以确定HbN3浓度，即一个在吸收最大值(565nm)以及另外一个在800nm以校正浊度。
对于护理现场WBC/Hb计数器，开发了一种RBC裂解溶液，其保持WBC，同时使用咪唑标记Hb分子。在与上述相似的一种方法中，在两个波长处测量咪唑标记的Hb种类的光学吸收，即一种在吸收峰，另一种校正白血细胞的散射效应(scattering effect)以及浊度。也可以使同样的溶液通过库尔特计数器以进行细胞计数。
另一种已知的裂解/Hb转化(conversion)试剂是基于十二烷基磺酸钠/十二烷基硫酸钠(SLS/SDS)。SDS裂解所有的血细胞并标记Hb以得到SDS配位衍生物。由于SDS是一种表面活性剂分子，浊度校正不是必要的，因此取535nm处的单个吸收读数来确定Hb浓度。这种方法是为高稀释度的Hb设计的，因此出现在HbCN测量中的固有的不准确仍然出现在HbSDS测量中。
上述所有的设备和技术都能够对刺破手指的血液进行特定的测量。然而，上述设备和技术没有一个能立刻测量出对于FBC所需要的所有参数。换句话说，上述设备和技术中没有一个能够在护理现场进行完整的FBC测试。
发明内容
本发明实施例的一个目的是提供一种用于全血计数(FBC)的微流体设备、一种形成这种微流体设备的方法和一种使用这种微流体设备进行全血计数测试的方法。
上述目的通过按照本发明的方法和设备来完成。
用于全血计数的微流体设备包括：
-第一测量通道；
-第二测量通道，与第一测量通道隔开；
-第一入口，用于向第一和第二测量通道提供全血样品；
-第二入口，用于向第一通道中提供用于白血细胞计数的裂解剂；
-第三入口，用于向第一通道提供抑制溶液；和
-第四入口，用于向第二通道提供用于血红蛋白测量的裂解剂。
第一和第二测量通道的隔开允许使用不同的化学反应，还允许通过不同的检测装置对粒子进行检测(特别是对具有不同特性的细胞进行检测)，检测装置例如阻抗测量装置和/或光学检测装置。
微流体设备可进一步包括用于在第一通道的末端确定白血细胞分类计数的装置。
更优选地，用于确定白血细胞分类计数的装置是阻抗测量装置。
微流体设备可包括用于在第二通道的末端确定红血细胞特性的装置。
更优选地，用于确定红血细胞特性的装置包括光学测量装置。红血细胞计数、血小板计数和Hb可以精确检测。
微流体设备可进一步包括处于第二测量通道和光学测量装置之间的微流体腔。
微流体设备可包括微流体稀释器(diluter)以使得能够进行大稀释(largedilution)。在标准实验室程序中，大稀释以连续方式进行，在该方式中，稀释通过进行若干较小稀释来完成(使得对于1∶10000稀释，可进行样品的四个连续1∶10稀释)。这样的过程需要熟练的个人进行许多移液步骤，经常使用大量试剂和时间。在将这样的稀释实验方案(protocol)移至微流体形式过程中，例如为了在(将由不熟练的个人使用的)医疗设备中使用，期望减少使用的试剂量(降低整个设备的成本)并最小化运行设备所需要的时间(快速启动)。另外，由于使用了上述的裂解设备，如果这样的设备使用尽可能少的流体力学泵，则这在成本方面将是优选的。这种设备将应用于护理现场血液分析仪，其中血液内的红血细胞的数量使得大稀释成为必需。
对于微流体设备为了成本原因，期望的是，不仅微流体地实现裂解，还使用尽可能少的流体力学泵实现裂解。更优选地，微流体设备已被设计成仅使用单个流体力学泵，其适用于在微流体设备的排废出口上抽吸。
根据本发明实施例的微流体设备和方法能够从刺破手指的血液测量对于护理现场的FBC设备需要的所有参数，即它能够测量WBC分类计数、血小板计数、RBC计数和Hb。
本发明进一步涉及用于制造用于全血计数的微流体设备的方法，根据本发明的该方法包括：
-提供第一测量通道；
-提供第二测量通道，该第二测量通道与第一测量通道隔开；
-提供第一入口，其用于向第一和第二测量通道提供全血样品；
-在第一测量通道处提供第二入口，其用于向第一通道提供用于白血细胞计数的裂解剂；
-在第一测量通道处提供第三入口，其用于向第一通道提供抑制溶液；以及
-在第二测量通道处提供第四入口，其用于向第二通道提供用于血红蛋白测量的裂解剂。
本发明进一步涉及一种用于进行全血计数的方法，该方法包括：
-向微流体设备的第一和第二测量通道提供血液样品，第一和第二测量通道相互隔开；
-向第一通道中的血液样品提供适用于白血细胞的裂解剂；
-向第一通道中的血液样品提供抑制溶液；
-向第二通道中的血液样品提供用于血红蛋白的裂解剂；
-在第一通道的末端进行确定白血细胞计数的测量；以及
-在第二通道的末端进行确定红血细胞特性的测量。
优选地，确定白血细胞计数的测量是通过阻抗测量进行。
优选地，确定红血细胞特性的测量是通过光学测量进行。
在本方法的有利实施例中，通过提供蚁酸和皂角苷的混合物来向第一通道中的血液样品提供适用于白血细胞的裂解剂。
在本方法的有利实施例中，通过提供氯化钠和碳酸氢钠的溶液来向第一通道中的血液样品提供抑制溶液。
在本方法的有利实施例中，通过提供磷酸盐缓冲盐水中的SLS溶液来向第二通道中的血液样品提供用于血红蛋白的裂解剂。
本发明具体的和更优选的方面记载在所附的独立权利要求和从属权利要求中。来自从属权利要求的特征可适当地与从属权利要求的特征以及其他从属权利要求的特征结合，而不仅仅是明确地记载在权利要求中。
尽管在本领域中，设备已经持续改进、变化和革新，本构思被认为代表大量新的和新颖的改进，包括与现有实践的偏离，导致提供了这种性质的更高效、稳定和可靠的设备。
根据下面详细的描述，结合附图来考虑，本发明上面的和其他的特性、特征和优点将变得清楚明白，所述附图通过实例的方式图示了本发明的原理。本说明仅出于实例的目的而给出，并不限制本发明的范围。下面引用的参考图涉及附图。
附图说明
图1图示了对于全血计数所需要的不同测量；
图2为流过阻抗谱；
图3示意性图示了根据本发明一个实施例的微流体设备10；
图4图示了根据本发明一个实施例的微流体设备中的第一测量通道的实施(A)，以及既用于裂解又用于抑制的微流体设备中的片流界面(sheat flowinterface)。
图5A和B图示根据本发明一个实施例的微流体设备中血红蛋白测量的构思。
图6示出根据本发明实施例的血红蛋白检测的光学测量结果。
图7示出通过微流体设备10的流速的示范性实施例。
图8A示出使用标准工作台“批量”制备(bench′bulk′preparation)技术的3部分阻抗谱。
图8B示出在微流体裂解和抑制之后血液的阻抗谱。
图8C示出过程中的微流体裂解和抑制步骤的显微图。
图9示出微流体稀释器100的实施例。
图10示出工作中的稀释器的显微镜图像。
图11图示集成的微流体裂解、稀释和血红蛋白测量设备的实施例。
图12示出利用微流体设备得到的实验的细胞计数。
在不同的附图中，相同的附图标记表示相同或类似的元件。
具体实施方式
本发明将关于具体的实施例并参照特定附图进行描述，但本发明不限于此，而是仅由权利要求限定。所描述的附图仅是示意性的，并且是非限制性的。在附图中，为了图示目的，有些元件的大小可能被夸大，而没有按照比例画出。尺寸和相对尺寸不对应于发明实践的实际减少。
此外，虽然本文中描述的一些实施例包括一些特征，但不包括其它实施例中所包括的其他特征，但是不同实施例的特征的组合在本发明的范围内，并形成不同的实施例，这为本领域人员所理解。例如，在下面的权利要求中，可以以任意组合使用任何所要求保护的实施例。
本发明提供了一种用于全血计数(FBC)的微流体设备、一种形成这种微流体设备的方法、以及一种使用这种微流体设备进行全血计数测试(FBC测试)的方法。
若干因素阻止了FBC测试在护理现场设置中运行。首先，购买和保养血液分析仪器的成本具有阻止作用。熟练的技师也被要求进行质量控制分析以保证测试给出准确度和精确度可接受的结果。对于测试需要大量的(4ml)静脉血液样品，并且需要中央实验室密封装置(containment)和消毒设施来处理这些具有潜在感染性的样品。血液分析仪非常大并且通常包含复杂精密的光学器件，这意味着它们的便携性能很有限。一种已知的分析仪类型，即Chempaq分析仪，能够测量WBC(白血细胞)分类计数、血小板计数和血红蛋白(Hb)，但是，无论如何，不能测量RBC(红血细胞)指数。
根据本发明实施例的一种微流体设备和方法能够从刺破手指的血液测量对于护理现场的FBC设备需要的所有参数，即它能够测量WBC分类计数、血小板计数、RBC计数和Hb。
护理现场设备的一个关键障碍已经是没有一个能够实现能够处理刺破手指的血液(即体积约10μm到50μl的血液)的基于微流体的集成的Hb、RBC计数、血小板计数和白血细胞分类的设备。这种情况的首要原因是难以组合对于WBC分类和对于以微流体形式标记和检测Hb所需的样品制备步骤。其原因在于：
在Hb的叠氮测量情况下对干燥试剂的需要与“湿”微流体***不相容，而对于利用微流体阻抗/库尔特计数器的校准和测量，需要所述“湿”微流体***。
在当前十二烷基硫酸钠(SDS)和/或氰化高铁血红蛋白(HbCN)转化测量中对大稀释/长光学路径长度的需要意味着它们与简单的微流体***不相容。对很浅的通道(例如直径约为50μm的通道)的要求意味着如果尝试测量微流体通道中的这些强稀释溶液中的一种的吸收率，则将会得到非常不准确的Hb浓度。
对于旨在处理全血以从相同样品测量WBC计数和Hb的化学溶液，有得到错误的Hb测量的危险，这归因于WBC的光学散射。
很多Hb标记溶液，包括试图用叠氮化物或咪唑标记的那些溶液，都不能标记包括硫血红蛋白和碳氧血红蛋白的Hb的特定种类。这导致针对具有这些Hb种类的高等级的患者样品的Hb读数的误差。
浊度引起的问题也导致不实的高Hb读数。
根据本发明实施例的微流体设备和方法解决了上述所有问题(进一步看)。
在第一方面，本发明提供一种用于全血计数的微流体设备。该微流体设备10包括：
-第一测量通道11，
-第二测量通道12，其与第一测量通道11不同并与第一测量通道11隔开；
-第一入口13，其向第一和第二测量通道提供全血样品；
-第二入口14，其向第一通道提供白血细胞计数的裂解剂；
-第三入口15，其向第一通道提供抑制溶液；和
-第四入口16，其向第二通道提供用于血红蛋白测量的裂解剂。
根据本发明实施例的微流体设备包括两个微流体样品制备实验方案的组合。在将样品传递到阻抗测量装置(进一步看，例如阻抗分光镜)之前，第一实验方案对红血细胞裂解进行小心控制，被设计成保留白血细胞，以便WBC分类测量。第二实验方案使用SLS(十二烷基磺酸钠)方法裂解红血细胞并标记Hb，该方法要求低的稀释系数和因此短路径长度吸收谱(进一步看)。
两个隔开的测量通道的使用有一个优势，就是它允许每一种裂解溶液要么专门适合于WBC分类计数，要么专门适合于Hb测量。这种隔开意味着消除了先前与微流体形式的集成Hb测量关联的问题，特别是WBC散射、浊度和短路径长度/高稀释度的冲突要求。
图2示出了“Impedance spectroscopy flow cytometry：on-chip label-free celldifferentiation”，Cheung，K.，S.Gawad，and P.Renaud，Cytometry A，2005.65(2)：p.124-132”中描述的阻抗测量装置。图2示出了微流体通道的侧视图和在测量电极和参考电极之间通过的样品细胞。细胞信号是测量两个电极对之间的电流差的锁定放大器的输出。通过这种方式可以对不同细胞实施阻抗谱研究。
图3示意性图示了根据本发明一个实施例的微流体设备10。该微流体设备10包括第一微流体通道11和第二微流体通道12。该第二微流体通道12与第一微流体通道11不同并与第一微流体通道11隔开。微流体设备10包括第一入口13，其用于向第一和第二测量通道11、12提供全血样品。血液样品可通过刺破患者手指得到，因为对于用根据本发明实施例的微流体设备进行FBC测试，仅需要有限量的血液，即体积约为10μm至50μl。第二和第三入口14、15设在第一通道11处。第二入口14用于向第一通道11提供用于WBC分类计数的裂解剂；而第三入口15用于向第一通道11提供抑制溶液。在第一通道11的末端，可以提供用于确定WBC分类计数的装置，例如阻抗测量装置17；而在第二通道12的末端，可以提供用于确定红血细胞特性(即RBC计数、HB和血小板计数)的装置，例如光学测量装置18。
在第二方面，本发明还提供一种用于进行全血计数的方法。该方法包括：
-向微流体设备10的第一和第二测量通道11、12提供血液样品，第一和第二测量通道11、12相互隔开；
-向第一通道11中的血液样品提供适用于白血细胞的裂解剂；
-向第一通道11中的血液样品提供抑制溶液；向第二通道12中的血液样品提供用于血红蛋白的裂解剂；
-在第一通道11的末端进行确定白血细胞计数的测量；以及
-在第二通道12的末端进行确定红血细胞特性的测量，即确定RBC计数、血小板计数和Hb的测量。
图4示意性地图示了在第一测量通道11中发生了什么。全血样品通过第一入口13移送至第一通道11(由图4中的附图标记20指示)。全血样品可通过刺破患者手指得到，因为对于用根据本发明实施例的微流体设备进行FBC测试，仅需要有限量的血液，即体积约为10μm至50μl。可以以已知流速(例如3μl/min)向第一通道11提供全血样品。例如蚁酸和皂角苷的混合物的裂解剂可通过第二入口14提供给第一测量通道11中的血液样品(由图4中的附图标记21指示)。这可以以例如37μl/min的限定流速进行。裂解剂通过扩散在微流体“蛇形”进程19的长度上与全血样品混合并裂解存在于全血样品中的所有红血细胞。蛇形进程的长度和通道尺寸被选为使得裂解剂和血液之间的接触时间在5秒和7秒之间，例如为6秒。在蛇形进程19的末端，以例如16.3μl/min的限定流速向第一通道11中的血液样品提供抑制溶液，例如包括氯化钠和碳酸氢钠的溶液(由图4中的附图标记22指示)。血液样品然后被转移至测量装置17以测量WBC分类。根据本发明的实施例，将测量WBC分类的测量装置17可为阻抗测量装置。
图5示意性图示了在第二测量通道12中发生了什么。全血样品通过第一入口13移送至第二测量通道12(由图5B中的附图标记20指示)。由于向第二测量通道12提供全血样品也是通过第一入口13进行的，根据本发明的实施例，血液样品可同时提供给第一和第二测量通道11、12。向第二测量通道12提供血液样品可以以例如1μl/min的流速完成。
不同微流体通道中的流速可以不同。当设计使一个通道中的流相对于其它通道中的流(一个或多个)缓慢的***时，通常的做法是引入某种形式的流体力学阻力。这或者通过改变管的长度(管越长，阻力越大，流越慢)，或者通过减小通道的其他尺寸中的一个(通道的制作方法一般规定要调整的是通道宽度)来实现。
通过第四入口16向第二测量通道12中的血液样品提供用于Hb测量的裂解剂，例如磷酸盐缓冲盐水(PBS)中150mM SLS的溶液，也称为SLS试剂(由图5B中的附图标记23指示)。这可以以例如4μl/min的不变流速进行。裂解剂通过扩散在微流体“蛇形”进程24的长度上与全血样品混合并裂解所有的红血细胞、血小板和白血细胞。PBS的使用是必要的，以防止Hb在第二测量通道12中沉淀。在本实例中主要使用的裂解剂为SLS，其也标记Hb。在第二测量通道12的末端，借助于测量装置18确定红血细胞的特性，即RBC计数、血小板计数和Hb。根据本发明的实施例，测量装置18可以是光学测量装置18。在光学测量装置18的情况下，根据本发明的实施例，在微流体“蛇形”进程24的末端，第二测量通道12可打开进入微流体腔25。可以与本发明的实施例一起使用的光学测量装置18可能实施方式在图5A中示出。来自光源27(例如脉冲LED源)的波长535nm处的准直光26可以以直角导向微流体腔25，其中它通过经裂解的血液样品。因此准直光26首先通过滤光器28而发送。然后借助于光圈29可将准直光26导向微流体设备10的微流体腔25。透过设备10的光30通过透镜31而发送，并然后使用放大的光电二极管32进行测量。
微流体腔25的深度可在50μm至200μm之间，于是通过微流体腔25的光的光学路径长度也在50μm和200μm之间。如果所需的稀释倍数较高，则可以使用微流体腔25的较大深度。
因为WBC测量和RBC测量相互隔开，可以进行可靠的FBC测试，该FBC测试在结束时立即给出FBC测试的所有参数的结果。
利用根据本发明实施例的微流体设备10和方法，不需要校正浊度，因为SLS的高浓度将分离任何细胞片段(cell fragment)，否则这些细胞片段将导致光散射。相似地，因为所有的WBC被破坏，不会发生由于白细胞的存在而引起的散射损失。
图6示出了从如上所述的集成Hb测量得到的典型数据。图6A示出了微流体样品制备和光学测量示出在临床相关范围上比尔-朗伯(Beer-Lambert)曲线上的良好线性性能。这些数据来自全血样品。图6B示出来自微流体设备的裂解产物UV/VIS谱(其中吸收峰处于535nm)，其证实所有Hb都成功转化为SLS配位的种类。800nm处的零基线表明没有来自WBC散射的贡献。
对于微流体设备，出于成本原因，期望的是，不仅微流体地实现裂解，还使用尽可能少的流体力学泵实现裂解。因此，在图7的有利实施例中，微流体设备被设计成仅使用单个在微流体设备的排废出口上吸取的流体力学泵200。参与反应的三种溶液(血液、裂解试剂和抑制试剂)在大气压下存储在微流体设备内的贮液器中。当来自这些贮液器的试剂朝向检测芯片行进时，其流速(单位为μl/min)由以下指定：
针对芯片处检测的细胞的最佳流速；和
不同试剂应被混合的比率(参见图7)。
在试剂必须相互接触达限定的时间的场合，这通过结合流速和通道尺寸被合并到设计中，因此，在图7中所示的设计中，通过使用200×100μm通道的8.8cm段获得在向血液中添加裂解溶液(流＝17.76μl/min)之后的六秒接触时间。
在混合了试剂的场合(例如在裂解试剂被引入血液，或者抑制试剂被引入裂解产物的场合)，通过调整到来的流体通道中的试剂的流速来得到正确的混合比率。根据适当的微流体公式，通过通道高度、宽度或者长度的变化来调谐通道的流体阻力，以实现这个调整。在图7中，指示了通过微流体设备的流速的实例，其中针对通过检测芯片的检测的期望流速25μl/min。其他流速由相对于25μl/min涉及的试剂的期望混合比率来限定。
在图7中所示的微流体设备中，裂解试剂和抑制试剂从反应通道的两端加入。这将帮助混合血液和添加的试剂。可以期望的是，仅从一端引入试剂或沿着反应通道的长度多次引入相同的试剂。在这是必需的场合，对所描述的相似设计方法将是可应用的。
使用所述设计基本原理制作的微流体设备可以以一般用于微构造设备的材料中的任一种来制造。
在图8A中示出了使用标准工作台“批量”制备技术的3部分阻抗谱。图8B示出了在微流体裂解和抑制之后血液的阻抗谱。图8C示出了操作中微流体设备的微流体裂解和抑制步骤的显微图。裂解后的血液的阻抗谱表明与那些在使用标准实验室程序进行裂解时所得到的良好符合的细胞数量(比较图8B和图8A)，并且比例与那些在人血液中预期的比例一致。这些结果证明，可以使用平衡的流体阻力***、并仅在单个注射泵的控制下在微流体***内完成微流体裂解。
根据本发明的微流体设备使得能够进行大稀释。在标准实验室程序中，大稀释以连续方式进行，其中稀释通过进行若干较小稀释来完成(使得对于1∶10000稀释，可进行样品的四个连续1∶10稀释)。这样的过程需要熟练的个人进行许多移液步骤，经常使用大量试剂和时间。在将这样的稀释实验方案(protocol)移至微流体形式过程中，例如为了在(将由不熟练的个人使用的)医疗设备中使用，期望减少使用的试剂量(降低整个设备的成本)并最小化运行设备所需要的时间(快速启动)。另外，由于使用了上述的裂解设备，如果这样的设备使用尽可能少的流体力学泵，则这在成本方面将是优选的。这种设备将应用于护理现场血液分析仪，其中血液内的红血细胞的数量使得大稀释成为必需。
如使用标准实验室技术，微流体平台上的稀释通过一连串较小的稀释进行(这可以通过任意组合来进行，使得可通过四个1∶10稀释，两个1∶100稀释或者任何其他实现1∶10000稀释的组合来实现1∶10000稀释)。快速启动和最小试剂使用通过在每个稀释步骤之前丢弃多数样品(从而在每个稀释步骤，只有少量已经稀释的样品进一步稀释)来实现。因为使用裂解设备，两种试剂(血液和稀释液)在大气压下存储在流体块上的贮液器中。通过流过阻抗谱来检测经稀释的血液(检测芯片再次集成在微流体块上)。
在这种情况下，通过微流体块的流速由对于阻抗芯片处的检测期望的速率以及由所需要的稀释比率来指定。图9示出了微流体稀释器100的实例。因此，对于通过检测芯片处40μl/min期望流速的四个连续1∶10稀释的1∶10000稀释，通过流体块的流速如图9中所示。在这个实例中，血液以4μl/min进入设备并以1∶10稀释。在图9中所示的设备中，在每个稀释步骤之后，有停留时间为30秒的通道以方便血液与稀释液的混合(这可以通过构建到设备中、可能减少在这些部分中所需时间的能起作用的混合结构替代)。在经历进一步的稀释步骤之前，9/10的现已稀释的血液被引导成废弃物，1/10继续沿着设备经历另外的1∶10稀释。这个过程沿着流体块重复直到血液被稀释10000倍，其中血液被引导通过阻抗芯片并被检测。废弃物在每个进程被组合起来并被直接引导至废弃物注射器(绕过芯片)。
在稀释器设备内，流体通道的相对流速再次通过修改流体阻力来控制，修改流体阻力通过根据上述公式调整流体通道的长度、宽度和高度来完成。在这个结构中发现的更复杂的流体阻力网络使得使用大量可能的设计工具(例如电路模拟器)成为必要。
图10示出了正在工作的稀释器的微观图像。进程1-3对应图9中的不同位置。
上述的各个基本项(微流体红血细胞裂解、血红蛋白检测和1∶10000稀释)可以使用针对上面的设备描述的相同设计基本原理进行组合。
图11在操作的相关部件的显微图中示出微流体块和血液/试剂流。
图12示出利用这个***得到的实验细胞计数。
将理解的是，尽管已经在本文中针对根据本发明的设备讨论了优选实施例、特定的结构和配置以及材料，仍可进行形式和细节上的各种改变或修改，而不背离由所附权利要求限定的本发明的范围。

Claims (15)

1.一种用于全血计数的微流体设备(10)，该微流体设备(10)包括：
-第一测量通道(11)，
-第二测量通道(12)，其与第一测量通道(11)隔开；
-第一入口(13)，用于向第一和第二测量通道(11、12)提供全血样品；
-第二入口(14)，用于向第一通道(11)中提供用于白血细胞计数的裂解剂；
-第三入口(15)，用于向第一通道(11)提供抑制溶液；以及
-第四入口(16)，用于向第二通道(12)提供用于血红蛋白测量的裂解剂。
2.根据权利要求1所述的微流体设备(10)，进一步包括用于在第一通道(11)的末端确定白血细胞分类计数的装置(17)。
3.根据权利要求2所述的微流体设备(10)，其中用于确定白血细胞分类计数的装置(17)是阻抗测量装置(17)。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的微流体设备(10)，进一步包括用于在第二通道(12)的末端确定红血细胞特性的装置(18)。
5.根据权利要求4所述的微流体设备(10)，其中用于确定红血细胞特性的装置(18)包括光学测量装置。
6.根据权利要求5所述的微流体设备(10)，其中该微流体设备(10)进一步包括位于第二测量通道(11)和光学测量装置(18)之间的微流体腔(25)。
7.根据前述权利要求中任一项所述的微流体设备(10)，包括微流体稀释器(100)。
8.根据前述权利要求中任一项所述的微流体设备(10)，进一步包括单个流体力学泵(200)。
9.用于制造用于全血计数的微流体设备(10)的方法，该方法包括：
-提供第一测量通道(11)；
-提供第二测量通道(12)，第二测量通道(12)与第一测量通道(11)隔开；
-提供第一入口(13)，其用于向第一和第二测量通道(11、12)提供全血样品；
-在第一测量通道(11)处提供第二入口(14)，其用于向第一通道(11)提供用于白血细胞计数的裂解剂；
-在第一测量通道(11)处提供第三入口(15)，其用于向第一通道(11)提供抑制溶液；和
-在第二测量通道(11)处提供第四入口(16)，其用于向第二通道(12)提供用于血红蛋白测量的裂解剂。
10.用于进行全血计数的方法，该方法包括：
-向微流体设备(10)的第一和第二测量通道(11、12)提供血液样品，第一和第二测量通道(11、12)相互隔开；
-向第一通道(11)中的血液样品提供适合于白血细胞的裂解剂；
-向第一通道(11)中的血液样品提供抑制溶液；
-向第二通道(12)中的血液样品提供用于血红蛋白的裂解剂；
-在第一通道(11)的末端进行确定白血细胞计数的测量；和
-在第二通道(12)的末端进行确定红血细胞特性的测量。
11.根据权利要求10的方法，其中进行确定白血细胞计数的测量通过阻抗测量进行。
12.根据权利要求10或11的方法，其中进行确定红血细胞特性的测量通过光学测量进行。
13.根据权利要求10至12中任一项所述的方法，其中向第一通道(11)中的血液样品提供适合于白血细胞的裂解剂通过提供蚁酸和皂角苷的混合物来进行。
14.根据权利要求10至13中任一项所述的方法，其中向第一通道(11)中的血液样品提供抑制溶液通过提供氯化钠和碳酸氢钠溶液来进行。
15.根据权利要求10至14中任一项所述的方法，其中向第二通道(12)中的血液样品提供用于血红蛋白的裂解剂通过提供磷酸盐缓冲盐水中SLS的溶液来进行。
CN201080005772.4A 2009-01-27 2010-01-26 用于全血计数的微流体设备 Active CN102300641B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP20090151420 EP2216095A1 (en) 2009-01-27 2009-01-27 Microfluidic device for full blood count
EP09151420.8 2009-01-27
PCT/IB2010/050327 WO2010086786A1 (en) 2009-01-27 2010-01-26 Microfluidic device for full blood count

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102300641A true CN102300641A (zh) 2011-12-28
CN102300641B CN102300641B (zh) 2015-07-01

Family

ID=40666882

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201080005772.4A Active CN102300641B (zh) 2009-01-27 2010-01-26 用于全血计数的微流体设备

Country Status (4)

Country Link
US (2) US10191054B2 (zh)
EP (2) EP2216095A1 (zh)
CN (1) CN102300641B (zh)
WO (1) WO2010086786A1 (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103084229A (zh) * 2012-01-16 2013-05-08 中国科学院深圳先进技术研究院 微流控芯片、血细胞分析***以及血细胞分析方法
CN104297497A (zh) * 2013-07-16 2015-01-21 成都深迈瑞医疗电子技术研究院有限公司 血液分析方法、控制装置和血液细胞分析仪
CN105728069A (zh) * 2016-01-30 2016-07-06 深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司 用于快速自检血液的多通道微流控芯片
CN107923905A (zh) * 2015-06-20 2018-04-17 卡皮泰奈尔公司 血浆分离微流体设备

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AP3522A (en) 2010-11-09 2016-01-11 Gen Hospital Corp Counting particles using an electrical differential counter
US9522396B2 (en) 2010-12-29 2016-12-20 S.D. Sight Diagnostics Ltd. Apparatus and method for automatic detection of pathogens
EP2490005A1 (en) * 2011-02-18 2012-08-22 Koninklijke Philips Electronics N.V. Microfluidic resistance network and microfluidic device
EP2490020A1 (en) 2011-02-18 2012-08-22 Koninklijke Philips Electronics N.V. Measurement chip, microfluidic device and method of measurement chip manufacture
CN104094099B (zh) * 2011-04-15 2017-05-03 罗氏血液诊断股份有限公司 测量细胞体积和成份
US8475739B2 (en) 2011-09-25 2013-07-02 Theranos, Inc. Systems and methods for fluid handling
US9810704B2 (en) * 2013-02-18 2017-11-07 Theranos, Inc. Systems and methods for multi-analysis
WO2013098821A1 (en) 2011-12-29 2013-07-04 Parasight Ltd. Methods and systems for detecting a pathogen in a biological sample
WO2015073952A1 (en) * 2013-11-15 2015-05-21 University Of Maryland Integrated and standalone label and reagent-free microfluidic devices and microsystems for differential white blood cell counts
EP2999988A4 (en) 2013-05-23 2017-01-11 S.D. Sight Diagnostics Ltd. Method and system for imaging a cell sample
IL227276A0 (en) 2013-07-01 2014-03-06 Parasight Ltd A method and system for obtaining a monolayer of cells, for use specifically for diagnosis
US10831013B2 (en) 2013-08-26 2020-11-10 S.D. Sight Diagnostics Ltd. Digital microscopy systems, methods and computer program products
BR112016017466B1 (pt) 2014-01-30 2021-05-18 Hewlett-Packard Development Company, L.P. dispositivos de captação microfluídica e método
JP2017520776A (ja) 2014-04-25 2017-07-27 ヒューレット−パッカード デベロップメント カンパニー エル．ピー．Ｈｅｗｌｅｔｔ‐Ｐａｃｋａｒｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｃｏｍｐａｎｙ， Ｌ．Ｐ． 診断カセット
EP3186778B1 (en) 2014-08-27 2023-01-11 S.D. Sight Diagnostics Ltd. System and method for calculating focus variation for a digital microscope
US20170059590A1 (en) 2015-08-27 2017-03-02 Ativa Medical Corporation Fluid holding and dispensing micro-feature
US11071982B2 (en) 2015-08-27 2021-07-27 Ativa Medical Corporation Fluid holding and dispensing micro-feature
US9366606B1 (en) 2015-08-27 2016-06-14 Ativa Medical Corporation Fluid processing micro-feature devices and methods
ES2687422T3 (es) * 2015-09-07 2018-10-25 Miltenyi Biotec Gmbh Cartucho desechable para electroporación
CN108474934B (zh) 2015-09-17 2022-01-18 思迪赛特诊断有限公司 用于检测身体样本中实体的方法和设备
US10207266B2 (en) 2015-09-29 2019-02-19 Foxconn Interconnect Technology Limited Microfluidic device for detecting cells of blood
CA3018536A1 (en) 2016-03-30 2017-10-05 S.D. Sight Diagnostics Ltd Distinguishing between blood sample components
WO2017195205A1 (en) 2016-05-11 2017-11-16 S.D. Sight Diagnostics Ltd Sample carrier for optical measurements
CA3022770A1 (en) 2016-05-11 2017-11-16 S.D. Sight Diagnostics Ltd Performing optical measurements on a sample
US11226278B2 (en) 2016-11-08 2022-01-18 Kennesaw State University Research And Service Foundation, Inc. Leukocyte quantitation microfluidic method and device
US11921272B2 (en) 2017-11-14 2024-03-05 S.D. Sight Diagnostics Ltd. Sample carrier for optical measurements
AU2019282246A1 (en) * 2018-06-05 2020-11-26 Chronus Health, Inc. Devices, cartridge, and sensors for controlling liquid movement and analyzing biological samples
EP4220123A1 (en) 2022-01-31 2023-08-02 Berner Fachhochschule Microfluidic device for cell count

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020149766A1 (en) * 2001-04-03 2002-10-17 Ronald Bardell Split focusing cytometer
CN1549925A (zh) * 2001-07-27 2004-11-24 有核红细胞的测量方法
US20050255600A1 (en) * 2004-05-14 2005-11-17 Honeywell International Inc. Portable sample analyzer cartridge
CN1975380A (zh) * 2005-11-28 2007-06-06 中国科学院电子学研究所 测定人体血红蛋白的光学检测用试剂配方

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2819645A1 (de) 1978-05-05 1979-11-08 Merck Patent Gmbh Mittel und verfahren zur durchfuehrung kolorimetrischer oder photometrischer bestimmungen
SE8305704D0 (sv) 1983-10-18 1983-10-18 Leo Ab Cuvette
US5155044A (en) * 1987-03-13 1992-10-13 Coulter Electronics, Inc. Lysing reagent system for isolation, identification and/or analysis of leukocytes from whole blood samples
US4853338A (en) * 1987-05-20 1989-08-01 Technicon Instruments Corporation Cyanide-free hemoglobin reagent
US5064282A (en) 1989-09-26 1991-11-12 Artel, Inc. Photometric apparatus and method for measuring hemoglobin
US5763280A (en) 1997-01-21 1998-06-09 Coulter International Corp. Cyanide-free lytic reagent composition and method for hemoglobin and cell analysis
US6830729B1 (en) * 1998-05-18 2004-12-14 University Of Washington Sample analysis instrument
AR022462A1 (es) * 1999-02-06 2002-09-04 Astrazeneca Uk Ltd Uso de un agente que disminuye el colesterol
US6858185B1 (en) * 1999-08-25 2005-02-22 Caliper Life Sciences, Inc. Dilutions in high throughput systems with a single vacuum source
US20020098589A1 (en) * 2001-01-19 2002-07-25 Crews Harold Richardson Multi-purpose reagent system and method for enumeration of red blood cells, white blood cells and thrombocytes and differential determination of white blood cells
US6514763B2 (en) * 2000-04-28 2003-02-04 Hematronix, Inc. Hematology blood control and method for preparation of same
GB0103441D0 (en) * 2001-02-13 2001-03-28 Secr Defence Microchannel device
US6573102B2 (en) 2001-07-27 2003-06-03 Coulter International Corp. Lytic reagent composition for determination of nucleated blood cells
US20030073089A1 (en) * 2001-10-16 2003-04-17 Mauze Ganapati R. Companion cartridge for disposable diagnostic sensing platforms
FR2883973B1 (fr) * 2005-03-31 2007-11-16 C2 Diagnostics Sa Cuve pour dispositif optique d'analyse sanguine, appareil d'analyse equipe d'une telle cuve
US7235404B2 (en) 2005-05-04 2007-06-26 Beckman Coulter, Inc. Cyanide-free lytic reagent composition and method of use for hemoglobin and white blood cell measurement
WO2007005907A1 (en) * 2005-07-01 2007-01-11 Honeywell International, Inc. A molded cartridge with 3-d hydrodynamic focusing
JP2009500612A (ja) 2005-07-01 2009-01-08 ハネウェル・インターナショナル・インコーポレーテッド 流量測定分析器
CA2580589C (en) * 2006-12-19 2016-08-09 Fio Corporation Microfluidic detection system

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020149766A1 (en) * 2001-04-03 2002-10-17 Ronald Bardell Split focusing cytometer
CN1549925A (zh) * 2001-07-27 2004-11-24 有核红细胞的测量方法
US20050255600A1 (en) * 2004-05-14 2005-11-17 Honeywell International Inc. Portable sample analyzer cartridge
CN1975380A (zh) * 2005-11-28 2007-06-06 中国科学院电子学研究所 测定人体血红蛋白的光学检测用试剂配方

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103084229B (zh) * 2012-01-16 2015-09-23 中国科学院深圳先进技术研究院 微流控芯片、血细胞分析***以及血细胞分析方法
CN103084229A (zh) * 2012-01-16 2013-05-08 中国科学院深圳先进技术研究院 微流控芯片、血细胞分析***以及血细胞分析方法
US11215609B2 (en) 2013-07-16 2022-01-04 Chengdu Shen Midray Medical Electronics Technology Research Institute Co., Ltd Blood analysis method, control device and blood cell analyzer
CN104297497A (zh) * 2013-07-16 2015-01-21 成都深迈瑞医疗电子技术研究院有限公司 血液分析方法、控制装置和血液细胞分析仪
WO2015007102A1 (zh) * 2013-07-16 2015-01-22 成都深迈瑞医疗电子技术研究院有限公司 血液分析方法、控制装置和血液细胞分析仪
CN104297497B (zh) * 2013-07-16 2016-02-24 成都深迈瑞医疗电子技术研究院有限公司 血液分析方法、控制装置和血液细胞分析仪
US11959911B2 (en) 2013-07-16 2024-04-16 Chengdu Shen Mindray Medical Electronics Technology Research Institute Co., Ltd. Blood analysis method, control device and blood cell analyzer
US10215750B2 (en) 2013-07-16 2019-02-26 Chengdu Shen Mindray Medical Electronics Blood analysis method, control device, and blood cell analyzer
US11327070B2 (en) 2013-07-16 2022-05-10 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. Blood analysis method, control device and blood cell analyzer
CN107923905A (zh) * 2015-06-20 2018-04-17 卡皮泰奈尔公司 血浆分离微流体设备
CN107923905B (zh) * 2015-06-20 2020-05-26 卡皮泰奈尔公司 血浆分离微流体设备
CN105728069B (zh) * 2016-01-30 2021-01-19 深圳市安测健康信息技术有限公司 用于快速自检血液的多通道微流控芯片
CN105728069A (zh) * 2016-01-30 2016-07-06 深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司 用于快速自检血液的多通道微流控芯片

Also Published As

Publication number Publication date
US20110275111A1 (en) 2011-11-10
EP2216095A1 (en) 2010-08-11
US20190120840A1 (en) 2019-04-25
EP2391450A1 (en) 2011-12-07
WO2010086786A1 (en) 2010-08-05
US10191054B2 (en) 2019-01-29
EP2391450B1 (en) 2020-05-20
CN102300641B (zh) 2015-07-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102300641B (zh) 用于全血计数的微流体设备
JP6046641B2 (ja) マイクロ流体抵抗ネットワークおよびマイクロ流体装置
CN103471982B (zh) 一种血细胞分析芯片、分析仪及分析方法
CN103354903B (zh) 测量芯片、微流体设备和方法
CA2489176C (en) Lysing reagent, cartridge and automatic electronic cell counter for simultaneous enumeration of different types of white blood cells
US9440233B2 (en) Microfluidic device for serial fluidic operations
US20120214224A1 (en) Flow based clinical analysis
CN101262950A (zh) 流量计量分析器
JP2012168192A (ja) 血液分析装置および血液分析方法
CN103472034A (zh) 一种血细胞分析芯片、分析仪及分析方法
CN106018773A (zh) 一次性血液细胞计数及分析集成试剂传感件及新型血液分析仪
CN102600918B (zh) 用于血液分析的微流体芯片及其使用方法
JP4704036B2 (ja) 液体中に懸濁された粒子を特徴付けるための使い捨てカートリッジ
CN202522565U (zh) 血液分析仪
CN107976397A (zh) 一种溶血剂的制备及其应用
CN211785162U (zh) 一种微流控多功能***分析装置
CN208270310U (zh) 一种定量式血浆采集光盘
CN209416919U (zh) 血细胞分析仪
CN110879226A (zh) 一种微流控多功能***分析装置
CN106018772A (zh) 一次性血液细胞计数及分析集成件以及新型血液分析仪

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant