CN1839936A - 具抗血栓活性的丹参提取物和制备方法 - Google Patents

Abstract

一种具抗血栓活性的含丹参多糖的丹参提取物，以丹参的根或根茎为原料，通过粉碎，溶剂提取、精制、得到丹参含量大于10％的提取物。经进一步纯化最终可得到丹参多糖含量80％以上的丹参多糖提取物，工艺合理，操作简便。该提取物可用于制备治疗抗血栓药物。

Description

具抗血栓活性的丹参提取物和制备方法

技术领域：

本发明涉及一种中药提取物，更具体地说，本发明涉及一种从丹参中提取有效部位，以及该药物提取物的制备技术。

背景技术

以下定义适用于整个说明书与权利要求书：

丹参多糖：是指丹参有效部位提取的一种多糖化合物，该多糖化合物经水解后，在硅胶板上作薄层分析，得知丹参多糖是由甘露糖、半乳糖、葡萄糖、木糖及部分未知单糖组成。

血栓病是严重危害人类健康的疾病之一，也是世界各国医药学家研究的热点。从天然产物中寻找新的活性成分，并进而研制新的药物也是当今攻克临床顽疾的重要途径，本发明应用最新科技手段，结合现代分离鉴定方法，通过对甘参进行***的化学成分及其活性研究以期为寻找新的抗血栓病的药物提供科学依据。

丹参为唇形植物，丹参Salvia miltiorrhiza Bge的根及根茎，异名赤参、木羊乳、紫丹参、活血根、红参等，具有祛淤止痛，活血痛经、清心除烦之功效，用于治疗***、经闭痛经、症瑕积聚、胸腹刺痛、热痹疼痛、疮疡肿痛、肝脾肿大、心绞痛等症，为我国传统之中药。目前国内、外对中药多糖的抗血栓作用研究均未见报导，对丹参多糖的研究也未见报道。

发明内容：

本发明的目的是，提供一种含有抗血栓活性的丹参多糖提取物及其制备方法。

本发明的解决方案是从丹参根或茎中提取一种具有抗血栓活性的丹参多糖提取物，该提取物中含有丹参多糖，其含量在10％以上。该提取物显示如下物化特征：

(1)、土黄色粉末，易溶于水，不溶于乙醇、丙酮；

(2)、萘酚呈色反应，呈现蓝紫色环，判定为多糖；

(3)、蒽酮法检测，呈绿色反应，判定为多糖；

(4)、经酸性水解后，在硅胶板上作薄层分析表明丹参多糖由甘露糖、半乳糖、葡萄糖、木糖及部分未知单糖组成。

本发明所述的抗血栓活性的丹参提取物的制备方法，包括以下主要步骤：

1、丹参多糖粗提物的制取：

(1)、取丹参根或茎粉碎；

(2)、用溶剂提取；所说的溶剂它选自水或水醇混合溶剂，所说的醇类为甲醇、乙醇等短链醇。

(3)、提取液减压浓缩得提取物浸膏，即为丹参多糖粗提物，该粗提物中含有10％-30％的丹参多糖；

2、丹参多糖粗提物的精制：

(A)、将丹参多糖粗提物加水制成水浓溶液，加入乙醇至乙醇浓度为40～95％；静置，过滤干燥得到精制丹参多糖提取物，该提取物中含有50％-60％的丹参多糖；

(B)、用树脂柱分离提纯：

(1)、将丹参多糖粗提取物加水制成水浓溶液；

(2)、过大孔树脂柱，这里所用的树脂可以是DM-130，DM-2，860021等，用水洗脱，收集第一组分；收集水洗脱溶液，浓缩成相对密度1.04～1.34的稠浸膏；稠浸膏中加入乙醇至乙醇浓度为40～95％，静置，过滤干燥得到精制丹参多糖提取物，该提取物中含有80％以上的丹参多糖；

本发明一种优选的丹参提取物的制备方法是包括以下主要步骤：

(1)、用水提取粉碎的丹参根或茎；

(2)、把水提取液浓缩成相对密度1.04-1.34的稠浸膏；

(3)、稠浸膏中加入乙醇至乙醇浓度为40-95％；

(4)、静置，过滤、干燥得到含丹参多糖提取物。

总之，用本发明提供的制备方法，根据需要可以制备得到丹参多糖含量在10％以上或20％以上或30％以上或50％以上或80％以上，具抗血栓活性的丹参多糖提取物。

本发明的优点是很明显的，本发明从丹参根或茎中提取的含丹参多糖提取物，工艺合理，经提取、精制而得到的含丹参多糖提取物，其中丹参多糖含量至少在10％以上，经进一步纯化最终可以得到丹参多糖含量80％以上的丹参提取物。其他杂质越少、可减少服用量，在一定程度上可以减少副作用，有利于保证药物的安全性和有效性。

对于丹参多糖的鉴别与含量测定我们采用以下方法：

试验一、丹参多糖的鉴别及组分鉴别

丹参多糖为土黄色粉末，易溶于水，不溶于乙醇、丙酮等。

1、鉴别

1.1α-萘酚呈色反应：称取多糖样品0.05克，加水2ml溶解，加入15％α-萘酚乙醇溶液2ml，混匀，沿试管壁缓缓加入浓硫酸0.5ml，呈蓝紫色环，判定有丹参多糖。

1.2蒽酮法：多糖样品配成1mg/ml溶液，取1ml，加入蒽酮试剂几滴，呈绿色反应，则判断为有丹参多糖。(以水为对照)。

2组分鉴别

将丹参多糖溶于5％稀硫酸中，沸水浴回流三小时，将之水解。用碱调PH至中性。用葡萄糖、半乳糖、***糖、鼠李糖、甘露糖、木糖为对照品，在硅胶板上点样，以BAW展开***为展开剂，α-萘酚为显色剂，用电吹风加热显色。得知丹参多糖是由甘露糖、半乳糖、葡萄糖、木糖及部分未知单糖组成。

试验二、丹参多糖含量测定

硫酸-苯酚法

1、实验条件

最大吸收波长的选择：490nm

加热时间的选择：15min

2、样品含量测定

精密吸取供试液5.0ml按标准曲线项下操作，测其吸收度按下式计算，结果见下表：

                         样品多糖含量测定实验结果

样品	麦特好多糖含量(％)
		1	44.80
2	44.98
		3	45.17
4	46.88
		5	47.15
6	45.62
		RSD＝2.20％	以粗多糖计含量为45.77％

近期文献中测多糖含量时也多用硫酸-苯酚法。硫酸-苯酚法的操作简便，而且稳定性、回收率好，因此测麦特好多糖含量时优选此法。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明。

实施例一：

取丹参根茎0.9kg，加水9kg，煮沸提取1.5小时，滤过，滤液备用，药渣再加水9kg煮沸提取1小时，滤过，合并两次滤液，将合并后的滤液浓缩喷雾干燥即得含有丹参多糖10％的丹参提取物。将本提取物加4倍重量的水溶解，加乙醇至乙醇含量为80％静置，过滤干燥，即得含丹参多糖为30％的具有抗血栓活性的丹参提取物。

实施例二：

取丹参根、茎1kg，加水8kg，煮沸提取1.5小时，滤过，滤液备用，药渣再加水9kg煮沸提取1.5小时，滤过，合并两次滤液浓缩成相对密度为1.05的浸膏，将此稀浸膏过大孔吸附树脂，用水洗脱收集第一组分，将洗脱液浓缩成相对密度1.20的稠浸膏，加乙醇至乙醇含量为80％静置，过滤干燥即得丹参多糖含量为50％的具有抗血栓活性的丹参提取物。

实施例三：

取丹参根或根、茎1kg，加水9kg，煮沸提取1小时，滤过，滤液备用，药渣再加水9kg煮沸提取2小时，滤过，合并两次滤液浓缩成相对密度为1.1的浸膏，将此稀浸膏过大孔吸附树脂，用水洗脱收集第一组分，将洗脱液浓缩成相对密度1.20的稠浸膏，加乙醇至乙醇含量为85％静置，过滤，干燥，得粗粉，再加4倍重量的水溶解，过大孔吸附树脂，用水洗脱收集第一组分，将洗脱液浓缩成相对密度1.3的稠浸膏，加乙醇至乙醇含量为80％静置、过滤，干燥，得丹参多糖含量为80％的具有抗血栓活性的丹参提取物。

实施例四：

取丹参根茎1kg，加水8kg，煮沸提取2小时，滤过，滤液备用，药渣再加水9kg煮沸提取1小时，滤过，合并两次滤液，将合并后的滤液浓缩成相对密度为1.2，的浸膏加乙醇至乙醇含量为80％静置，过滤干燥，得粗粉，加5倍重量的水溶解，过大孔吸附树脂，用水洗脱收集第一组分，将洗脱液浓缩成相对密度1.20的稠浸膏，加乙醇至乙醇含量为80％静置、过滤，干燥，得丹参多糖含量为70％的具有抗血栓活性的丹参提取物。

实施例五：

取丹参根茎1kg，加水8kg，煮沸提取2小时，滤过，滤液备用，药渣再加水9kg煮沸提取1小时，滤过，合并两次滤液，将合并后的滤液浓缩成相对密度为1.2，的浸膏加乙醇至乙醇含量为80％静置，过滤干燥，得粗粉，加5倍重量的水溶解，加乙醇至乙醇含量为75％静置、过滤，干燥，得丹参多糖含量为50％的具有抗血栓活性的丹参提取物。

Claims (8)

1、一种具抗血栓活性的丹参提取物，其特征在于其中含有10％以上的丹参多糖，该提取物显示如下物化特征：

(1)、土黄色粉末，易溶于水，不溶于乙醇、丙酮；

(2)、萘酚呈色反应，呈现蓝紫色环，判定为多糖；

(3)、蒽酮法检测，呈绿色反应，判定为多糖；

(4)、经酸性水解后，在硅胶板上作薄层分析表明丹参多糖由甘露糖、半乳糖、葡萄糖、木糖及部分未知单糖组成。

2、根据权利要求1所述的具抗血栓活性的丹参提取物，其特征在于所述的含丹参多糖的提取物中，丹参多糖的含量在20％以上。

3、根据权利要求2所述的具抗血栓活性的丹参提取物，其特征在于所述的含丹参多糖的提取物中，丹参多糖的含量在30％以上。

4、根据权利要求3所述的具抗血栓活性的丹参提取物，其特征在于所述的含丹参多糖的提取物中，丹参多糖的含量在50％以上。

5、根据权利要求4所述的具抗血栓活性的丹参提取物，其特征在于所述的含丹参多糖的提取物中，丹参多糖的含量在80％以上。

6、权利要求1所述的具抗血栓活性的丹参提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

6-1、丹参多糖粗提物的制取：

6-1-1、取干燥丹参根或茎粉碎；

6-1-2、用溶剂提取；

6-1-3、提取液减压浓缩得提取物浸膏，即得丹参多糖的粗提物；

6-2、丹参多糖粗提物的精制：

(A)、将丹参多糖的粗提物加水制成水浓溶液；加入乙醇，放置、沉淀过滤干燥得到含丹参多糖50％以上的提取物；

或者

(B)、树脂柱分离提纯：

(B)-1丹参多糖粗提物加水制成水浓溶液，过大孔树脂柱，用水洗脱，收集水洗脱溶液，浓缩成相对密度1.04～1.34的浸膏；

(B)-2、稠浸膏中加入乙醇至乙醇浓度为40～95％；

(B)-3、过滤、干燥得到含丹参多糖80％以上的提取物。

7、根据权利要求6所述的丹参多糖提取物的制备方法，其特征在于在6-1-2步骤中所说的溶剂它选自水、水和醇混合溶剂；所说的醇类为甲醇、乙醇等短链醇。

8、根据权利要求6所述的丹参多糖提取物的制备方法，其特征在于所说的丹参多糖粗提物的制备方法包括以下步骤：

8-1、用水提取粉碎的丹参根或茎；

8-2、提取液浓缩成相对密度1.04～1.34的稠浸膏；

8-3、稠浸膏中加入乙醇至乙醇浓度为40～95％；

8-4、静置，过滤干燥得到含丹参多糖的丹参提取物。