CN1772070A - 一种治疗心脑血管疾病的二酮组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种对心脑血管疾病有显著疗效的山楂叶总黄酮和葛根总黄酮组成的复方制剂，该制剂在脑中风的治疗上疗效更为显著。

Description

一种治疗心脑血管疾病的二酮组合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种以山楂叶总黄酮和葛根总黄酮为主要成分，治疗心脑血管疾病有显著疗效的制剂及其制备方法。

背景技术

心脑血管疾病是中老年人的多发病，尤其是脑缺血，更是血管性脑病的最主要病种，具有高死亡率和高致残率的特点。对脑缺血的防治以往大多集中在扩张脑血管、增加脑血流从而缩小脑梗死范围或改善神经功能方面，但因未取得显著疗效或存在毒副作用大、服用不方便等缺点，限制其临床上广泛应用。因此，寻找新的能够有效防治脑缺血疾病的药物，是当前医药界研究的一个重要课题。脑缺血时，血液处于高凝、高粘、高聚状态，而且血栓的形成直接参与了脑缺血的发生发展；因此活血化瘀类药物对脑缺血的治疗作用日益受到重视。这也是本发明立项的基础。

山楂叶中含有丰富的黄酮类化合物，主要成分有牡荆素鼠李糖甙、牡荆素葡萄糖甙、金丝桃甙等，具有广泛的药理活性，主要为：增加冠脉流量，抗心肌缺氧、心率失常，舒张血管，解除局部淤血状态。临床上主要用于气结血淤、胸闷憋气、心脑血管疾病、冠状动脉供血不足等症。

葛根含有黄酮等多种活性成分，具有降低脑血管阻力、增加脑血流量、松弛神经、消除疲劳等功效。其中葛根黄酮对凝血因子如凝血酶和部分凝血酶原具有较强的抑制作用，还具有抑制体内血栓形成的作用。其主要功效成分葛根素可促进正常脑循环和改善局部微循环障碍，增加微血管运动的振幅，提高局部血流量。

经过检索发现，几乎所有的文献和专利都报道了山楂叶治疗气结血淤、胸闷憋气、心脑血管疾病、冠状动脉供血不足等症。而治疗脑中风方面的报道却很少，尤其是公开的专利文献。

本发明经过研究发现，由山楂叶总黄酮和葛根总黄酮制成的复方制剂在治疗脑中风方面的疗效显著，值得开发和利用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗心脑血管疾病有显著疗效的制剂及其制备方法，该制剂在脑中风的治疗上比单方制剂都具有明显的优势。

本发明是由从葛根总黄酮和山楂叶总黄酮组成。两种原料的重量配比为：葛根总黄酮1份，山楂叶总黄酮0.1-5份；优选重量配比为：葛根总黄酮1份，山楂叶总黄酮0.5-3份；更优选葛根总黄酮1份，山楂叶总黄酮1-2份。

葛根总黄酮和山楂叶总黄酮存在状态是固体状或液体状，制成的制剂可以是固体制剂也可以是液体制剂；给药方式是口服、静脉内或肌肉注射；其中固体制剂包括片剂、缓释片剂、胶囊剂、缓释胶囊剂、软胶囊剂和滴丸剂等；液体制剂包括水针剂、粉针剂、输液剂和脂肪乳注射剂；各种剂型是用常规方法制成；其中总黄酮含量范围在50％-100％；葛根总黄酮含量范围在50％-100％。

本发明二酮组合物制成的制剂，可以根据剂型的需要加入助溶剂羟丙基-β-环糊精、丙二醇、无机碱或碱性氨基酸或一种碱性氨基酸的混合物，其中无机碱优选氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾；碱性氨基酸优选为：赖氨酸、精氨酸、组氨酸。还可以根据制剂的需要加入需要量的赋形剂，比如：乳糖、甘露糖等。

制备山楂叶葛根黄酮水针剂，将山楂叶葛根黄酮，用少量碱或助溶剂助溶于适量注射用水中，加入计量的注射用水溶性辅料，加0.1-0.5％的活性炭除去热源，调节PH至6.0-7.5，经微孔滤膜超滤后，补充注射用水至规定量，灌装于安瓿瓶中或输液瓶中，熔封/轧盖，经检验合格后，包装即得。每安瓿山楂叶葛根黄酮含量为3.0-50.0mg/ml；输液剂中山楂叶葛根黄酮含量为0.5-10.0mg/ml，规格为50ml、100ml、150ml和200ml。

制备山楂叶葛根黄酮粉针剂，将山楂叶葛根黄酮用少量碱或助溶剂助溶于适量注射用水中，加入计量的药用辅料，加0.1-0.5％的活性炭除去热源，调节PH为6.0-7.5经微孔滤膜超滤后，真空或喷雾干燥，无菌分装于西林瓶中，每瓶含山楂叶葛根黄酮10-200mg，轧盖，经检验合格后，包装即得。

制备山楂叶葛根黄酮冻干粉针剂，将山楂叶葛根黄酮用少量碱或助溶剂助溶于适量注射用水中，加入计量的药用辅料，加0.1-0.5％的活性炭除去热源，调节PH为6.0-7.5，经微孔滤膜超滤后，分装于安瓿中，每安瓿含山楂叶葛根黄酮10-200mg，经冷冻干燥后熔封，检验合格后，包装即得。

制备山楂叶葛根黄酮输液剂，将上述山楂叶葛根黄酮用少量碱或助溶剂助溶于适量的注射用水中，加入计量的药用辅料，调节PH至6.0-7.5，经微孔滤膜过滤后，补充注射用水至规定量，灌装于100ml输液瓶中，每安瓿含山楂叶葛根黄酮10-100mg熔封/轧盖，经检验合格后，包装即得。

山楂叶总黄酮的制备方法如下：

取山楂叶，加水温浸提取三次，每次1-3小时，滤过，合并滤液，减压浓缩水，浓缩至相对密度为1.10～1.20(60℃)，加乙醇至含醇量达60-85％，冷藏12-24小时，吸取上清液，下层滤过，滤液与上清液合并，减压回收乙醇，加水稀释后上聚酰胺树脂柱，用蒸馏水洗脱，至有酸-镁粉反应时开始接收，并同时改用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，至盐酸-镁粉反应阴性，回收乙醇。减压浓缩至无醇味，加水稀释至相对密度为1.05～1.08(60℃)时，通过大孔吸附树脂柱，先用蒸馏水洗至无α-萘酚浓硫酸反应为阴性，改用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液减压浓缩至干既得山楂叶总黄酮。

葛根总黄酮的制备方法如下：

将葛根原料装入容器内，加入4-10倍量的正丁醇溶剂加热浸提2-4遍，浸提时间为2-4小时，浸提完后合并浸提液，浓缩提取液回收正丁醇得膏状物，膏状物重结晶得葛根素。

具体实施方式

处方比例：

(1)葛根总黄酮1份    山楂叶总黄酮1份

(2)葛根总黄酮1份    山楂叶总黄酮2份

1.制备山楂叶葛根黄酮水针剂。

按照处方1或2的比例，葛根黄酮加适量氢氧化钠溶解，调PH值至6.0-7.5，将上述山楂叶黄酮，溶于适量注射用水中，配成20mg/ml，调节PH至6.0-7.5，加入抗氧化剂适量。经微孔滤膜过滤后，补充注射用水至规定量，灌装于5ml安瓿瓶中，熔封/轧盖，经检验合格后，包装即得。

2.制备山楂叶葛根黄酮冻干粉针剂

按照处方1或2的比例，葛根黄酮加适量氢氧化钠溶解，调PH值至6.0-7.5，将上述山楂叶黄酮，溶于适量注射用水中，配成20mg/ml，调节PH至6.0-7.5，加入抗氧化剂适量。经微孔滤膜过滤后，补充注射用水至规定量，灌装于5ml安瓿瓶中，熔封/轧盖，经检验合格后，包装即得。

3.制备山楂叶葛根黄酮软胶囊

将峰腊置于大豆油中，加热溶融，放冷至室温，按照处方1或2的比例的葛根总黄酮和山楂叶总黄酮，用胶体磨反复研匀，得内容物，另取明胶、水、甘油至适量容器中，加热后于80℃溶解，加入防腐剂，于60℃保温，制成胶皮，将两者通过软胶囊设备压制成型，干燥后的本发明的软胶囊制剂。

实验1：本发明冻干粉针注射液对兔脑循环及脑代谢的影响

1.1动物：新西兰兔32只，体重2.0～3.0kg，雌雄兼用。

药品：本发明冻于粉针注射液(自制)，配成10mg/ml。

仪器：MF-1200型电磁流量计，STAT-PROFILE-5型电解质分析仪。

实验方法：

2.1动物制备：动物经乌拉坦(1.0g/kg)耳缘静脉注射麻醉，行气管插管，分离二侧股动脉，一侧记录血压，另一侧抽取动脉血。同时分离一侧颈总动脉及颈内动脉和颈外动脉，结扎颈外动脉及其分支以备在颈总动脉处安放电磁流量计探头。将兔头固定于立体定位仪上，切开颅顶皮肤，暴露后囟人字缝处，在窦汇上方钻孔以备抽取脑静脉血。

动物分组：将动物随机分为4组，即本发明冻干粉针大剂量组(44mg/kg)、本发明冻干粉针(处方一、处方二)小剂量组(3mg/kg)、山揸叶总黄酮组(3mg/kg)和生理盐水对照组。每组动物8只。耳缘静脉注射给药。

血流动力学测定：左侧股动脉插管经压力换能器连于AP-621G载波放大器记录血压，用AT-611G心率计数器对心率进行积分记录。

颈内动脉血流量测定：应用测定颈内动脉血流量的方法来判断脑血流量(CBF)。将口径适宜的探头置于一侧颈总动脉上，并连接于MF-1200型电磁流量计，由颈内动脉血流量来判断CBF。

实验结果证明，本发明冻干粉针注射液可以增加脑血流量，提高脑耗氧量及葡萄糖摄取量，说明其具有改善脑循环及脑代谢的双重作用。

实验2：本发明注射液对大鼠大脑中动脉阻塞中风模型的作用

2.1动物模型制备

实验分组及样品采集：取体重(400±50)g的SD大鼠，雌雄各半。用氯氨酮75mg/kg腹腔注射麻醉，于一侧眼外眦至耳缘切开皮肤，切除部分颞肌，于颧弓眼侧上方钻一直径为0.5cm的小孔。暴露软脑膜，可见大脑中动脉主干及两个分枝呈“Y”状，用电凝器灼断大脑中动脉主干，如主干位置偏大脑腹侧不易操作，则同时灼断其两分枝。缝合切口，肌注青霉素G105u/次，bid，共3d。术后1d，检查动物有无神经***症状，凡Horner’s征(提尾时大脑中动脉阻断对侧前肢屈曲、抓力明显下降)阳性者用于实验。将筛选出的动物随机分成4组：模型组(生理盐水0.5ml/只i.p，)、阳性药物组(山揸叶总黄酮组，12mg/kg)，处方一小剂量(1.8ml/kgi.p)组，处方一大剂量(3.6ml/kgi.p)组，处方二小剂量(1.8ml/kgi.p)组，处方二大剂量(3.6ml/kgi.p)组，每日给药1次，共5d。其中山揸叶总黄酮组和本发明冻干粉针小剂量组分别等效于人常用剂量，另取同批正常大鼠设正常对照组(不作任何处理，于第5d给药1h后，参照并结合Bederson和Persson法检查动物神经***症状，按受损程度拟出神经症状分级指标；然后用氯氨酮50mg/kg腹腔注射麻醉动物，颈动脉放血，2％EDTA-Na2抗凝，离心血浆备用，用于测定6-酮-PGF1α和TXB2；取出大脑，用于梗塞体积和含水量测定。

2.2神经***症状检查

一般症状检查：动物造模后的一般情况，有无偏瘫，行动有无困难等。

神经***症状受损分级指标：参照并结合Bederson和Persson法检查，按受损程度拟出神经症状分级指标；大鼠被提尾悬空时两前肢向地伸直，前爪伸直分开。轻握鼠尾，在鼠背后施加侧向推力，使鼠滑动约10cm，手感应左右的阻力相等，为正常(0级)；大鼠提尾悬空时，梗塞(手术)对侧前肢屈曲拉高，爪握拳，肩内收，抓力明显下降，但推动试验手感基本同0级，为I级神经***受损；提尾试验同I级，推动试验梗塞对侧阻力手感明显降低，自主运动向梗塞对侧偏转，为II级神经***受损；动物死亡，又排除非造模原因，为III级神经***受损。

2.3梗塞体积测定

取鼠脑，切除小脑和嗅球及健侧大脑半球，置天平上称取梗塞侧的脑湿重，然后切成0.3～0.5mm厚的脑片，投入0.5％硝基四氮唑蓝磷酸缓冲液(pH7.4)中，置37℃恒温水浴中孵育15min，取出用滤纸吸干，凡未蓝染部分为缺血区，将其用小刀剔出，称重，按以下公式计算梗塞指数。梗塞指数＝梗塞灶湿重(g)/梗塞侧脑湿重(g)

2.4含水量测定

将梗塞侧大脑半球(包括缺血和未缺血区)置60℃烘箱内干燥至恒重(＞8h)，按以下公式计算含水量。

含水量(％)＝(梗塞侧脑湿重-梗塞侧脑干重)/梗塞侧脑湿重×100％

2.5实验结果

本发明冻干粉针对大鼠大脑中动脉阻塞中风模型一般症状及神经***损伤程度的影响结果表明，用本发明冻干粉针或尼本发明注射液莫地平治疗后，动物症状有所改善，与未治疗的模型组比较，有显著的统计学意义。对大鼠大脑中动脉阻塞中风模型神经***损伤程度的评定结果见表1：

表1  本发明冻干粉针对模型组大鼠神经***损伤程度的Ridit分析结果

组别	剂量	神经***损伤程度					R
								n	0	I	II	III
		模型组山揸叶总黄酮组处方一冻干粉针小剂量组处方一冻干粉针大剂量组处方二冻干粉针小剂量组处方二冻干粉针大剂量组	12mg/kg2.8ml/kg5.6ml/kg2.8ml/kg5.6ml/kg	1088888	021414	345342							322121	410000	0.51100.83170.73330.90450.71100.8715

注：经Ridit分析，造模后用药各组与模型组相比，有统计学意义

本发明冻干粉针对大鼠大脑中动脉阻塞中风模型梗塞区体积及梗塞侧大脑含水量的影响

结果表明，与模型组相比，本发明冻干粉针及山揸叶总黄酮组均能显著减小模型鼠梗塞区的面积，与模型组相比有显著性意义(本发明冻干粉针小剂量组P＜0.01，本发明冻干粉针大剂量组P＜0.01和山揸叶总黄酮组P＜0.05)；本发明冻干粉针大剂量组能显著减轻脑梗塞引起的脑水肿(P＜0.05)，其它组有减轻脑梗塞引起的脑水肿的趋势，优于山揸叶总黄酮组，结果见表2。

表2  本发明冻干粉针对模型组大鼠梗塞区体积及梗塞侧大脑含水量的影响(x±s)

组别	剂量	n	梗塞指数	含水量(％)
					正常组模型组山揸叶总黄酮组处方一冻干粉针小剂量组处方一冻干粉针大剂量组处方二冻干粉针小剂量组处方二冻干粉针大剂量组	12mg/kg1.8ml/kg3.6ml/kg1.8ml/kg3.6ml/kg	8556666	-0.170±0.0500.079±0.0370.057±0.0540.045±0.0560.055±0.0480.042±0.056	70.4±6.8*82.4±5.4△70.8±7.171.4±6.566.4±5.5*70.1±5.866.4±5.5*

注：与模型组相比，^*P＜0.05  ^**P＜0.01，与正常组相比，△P＜0.05

Claims (7)

1、一种治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于它是由从葛根总黄酮和山楂叶总黄酮组成。

2、根据权利要求1所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于：所述的两种原料的重量配比为：葛根总黄酮1份，山楂叶总黄酮0.1-5份。

3、根据权利要求2所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于：所述的两种原料的重量配比为：葛根总黄酮1份，山楂叶总黄酮0.5-3份。

4、根据权利要求3所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于：所述的两种原料的重量配比为：葛根总黄酮1份，山楂叶总黄酮1-2份。

5、根据权利要求1或2或3或4所述的治疗心脑血管病的药物组合物，葛根总黄酮和山楂叶总黄酮存在状态是固体状或液体状，制成的制剂可以是固体制剂也可以是液体制剂；给药方式是口服、静脉内或肌肉注射。

6、根据权利要求5中的中的固体制剂和液体制剂，其中固体制剂包括片剂、缓释片剂、胶囊剂、缓释胶囊剂、软胶囊剂和滴丸剂等；液体制剂包括水针剂、粉针剂、输液剂和脂肪乳注射剂；各种剂型是用常规方法制成。

7、根据权利要求1所述的总黄酮，其中山楂叶总黄酮含量大于50％；葛根总黄酮含量大于50％。