CN1703232A - 用粉红银豆植物提取物治疗糖尿病 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及包含类黄酮甙化合物的粉红银豆(Argyrolobium roseum)植物提取物的提取方法，其中所述提取物具有降低血糖活性。本发明还包括一种含有所述提取物的组合物以及通过施用所述提取物来治疗诸如非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)等多种高血糖病症的方法。
Description
技术领域
本发明涉及由粉红银豆(Argyrolobium roseum)植物中得到的抗糖尿病提取物、该提取物的分离方法、以及该提取物在治疗与高血糖相关的疾病或病症中的应用。
背景技术
粉红银豆(Argyrolobium roseum)是一种在印度西北部的热带和亚温带区域发现的一种草药或者灌木。该植物生长在例如查谟、克什米尔及印度的Udhampur地区，其通常在4至6月开花结果(参见Chowdhary and Wadhwa，flora of himachal pradesh pp 181-1821；Chapman and Hail，dictionary of naturalproducts，Vol.7，414，1994.Vol.1，457，1994；Index Kewensis，Vol.1，184.1895；Om，wild and cultivated plants of J & K andladakh，Page 23，1997)。
可以在下述文献中找到关于粉红银豆(Argyrolobium roseum)的描述：FLORA OF WEST PAKISTAN，385页，100卷，E.Nasirl著；FLORA OF THEHIMALAYA，94页，Plate No.323，d 460，Oleg Polunin，Adam Staintonj著；FLORA OF JAMMU AND PLANTS OF NEIGHBOURHOOD II卷，1983，Plate64，180-1821页：FLORA OF LHMACHAL PRADESH，181-182页，H.J.Chowdhary和B.M.Wadhwal著；FLORA OF BASHAHR ITMALAYAS，69页，1997，N.C.Nairl著；以及FLORA OF BRITISH INDIA，Vol.II，63页，Hooker著。银豆属的其它物种包括Argyrolobium megharizum和Argyrolobiumflaccidum(DICTIONARY OF NATURAL PRODUCTS，Vol.1，457，1994，Chapman & Hall著)。但是，没有关于粉红银豆(Argyrolobium roseum)对动物或者诸如人等哺乳动物具有任何药用或者生物学作用的报道。特别地，未发现使用该种天然产物来制备高血糖状态的描述。
发明概述
本发明涉及分离粉红银豆(Argyrolobium roseum)提取物的方法，该提取物具有降低血糖活性，并包含类黄酮甙化合物。本发明还包括一种组合物，该组合物包括适用于动物的提取物；并包括通过施用所述组合物来治疗诸如非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)等多种高血糖病症的方法。
本发明的一个目的在于提供一种对粉红银豆(Argyrolobium roseum)植物进行提取的方法，所得提取物具有降低血糖活性，并包含类黄酮甙化合物。所述提取物可以被制备成诸如片剂形式，或者制备为组合物的形式，用于对包括人类的动物的高血糖症以及NIDDM等进行治疗。更进一步，本发明试图在包含本发明提取物组合物的剂型中加入其它降血糖剂以及添加剂。
本发明的另一目的在于开发出一种对诸如哺乳动物等动物的高血糖症以及NIDDM进行治疗的方法，所述方法是通过施用从粉红银豆(Argyrolobiumroseum)中分离得到的包含类黄酮甙化合物的提取物来实现的。例如，可对人施用所述提取物，只要所述提取物或者制剂组合物没有在动物、哺乳动物或者人体内造成任何有害副作用即可。
本发明的粉红银豆提取物的组合物可以与其它降血糖剂以及添加剂共同施用。本发明的又一目的在于开发一种对诸如糖尿病等高血糖类疾病、病症进行治疗的剂量体系。
发明详述
相应地，本发明涉及一种对诸如哺乳动物等动物的高血糖症以及NiDDM进行治疗的方法，所述方法是通过施用有效剂量的从粉红银豆(Argyrolobium roseum)植物中分离得到的包含类黄酮甙化合物的提取物、或通过施用本身为类黄酮甙的化合物来实现。本发明显示，采用本发明提取物组合物进行治疗的模型动物克服了与高血糖疾病相关的症状。实际上，本发明首次采用粉红银豆提取物来对诸如糖尿病等危害各国的该类高血糖性疾病进行治疗。为了该目的，本发明提供了一种天然的、来自于植物的无毒草药制剂，该制剂能够用于治疗糖尿病。所述提取物可通过使用溶剂对特定植物粉末进行分离然后进行真空干燥而很容易获得，并且这种制备方法不会使其抗糖尿病活性丧失。而且，当对动物的施用提取物剂量高达口服2000mg/kg时，它也不会产生不适的副作用。因此，所述提取物的抗糖尿病活性可用于控制高血糖症，特别是NIDDM。
药学可接受的添加剂能够与所述提取物共同施用。适宜的添加剂包括，但不限于：蛋白质等营养物质、碳水化合物、糖、滑石粉、硬脂酸镁、纤维素、碳酸钙、淀粉-凝胶糊、和/或药学可接受的载体、赋形剂、稀释剂、溶剂、以及其它降血糖制剂。
在本发明的其它实施方案中，本发明提取物的有效剂量可为口服约1～3000mg/kg/天的范围；其中所述剂量体系可以持续使用约2～4周。有效剂量优选为口服约200～1000mg/kg/天的范围，持续约2～4周进行治疗。
一旦施用至动物或者哺乳动物后，所施用提取物的有益效果应能持续8小时。实际上，与全提取物相比，本发明的提取物组合物的有效性要提高约20倍，并且未在动物或哺乳动物中产生不适的副作用。
因此，本发明提供了一种用于对包括人在内的动物的高血糖症以及NIDDM进行治疗的组合物，所述组合物包括有效量的从粉红银豆(Argyrolobium roseum)植物中分离的提取物，所述提取物包含类黄酮甙化合物或者本身为类黄酮甙化合物，并且任选包括添加剂。
在本发明的另一实施方案中，所述添加剂选自包括蛋白质的营养物质、碳水化合物、糖、滑石粉、硬脂酸镁、纤维素、碳酸钙、淀粉-凝胶糊、和/或药学可接受的载体、赋形剂、稀释剂、溶剂、以及其它降血糖制剂。所述添加剂通常不会对提取物的有益作用产生不良影响。在本发明的又一实施方案中，所述组合物以胶囊、片剂、糖浆、浓缩剂、粉末、颗粒、气雾剂、或球剂(bead)的剂型通过口服进行施用。
本发明还涉及从粉红银豆植物中分离提取物的方法，其中所述提取物包含类黄酮甙化合物并且具有降低血糖的活性。所述方法可以包括：
(a)将整株植物干燥为粉末形式；
(b)用极性或者非极性溶剂将所述粉末浸透3-5次；
(c)将提取物浸软；
(d)得到浸软后的提取物，收率为7～10％；
(e)将提取物真空干燥；
(f)利用色谱法分离出纯的类黄酮甙化合物；以及
(g)得到类黄酮甙化合物，得率范围为0.015-0019％。
在本发明的其它实施方案中，其中所述化合物通过在60～120微米目径的硅胶上利用柱色谱法进行分离。
在本发明的再一实施方案中，其中用于浸软所述提取物的化合物选自己烷、乙酸乙酯、丙酮、氯仿。
在本发明的又一实施方案中，用于浸透的优选溶剂为醇类和丙酮。
在本发明的另一实施方案中，将类黄酮甙化合物从提取物中进行纯化，用于制备哺乳动物和人的非胰岛素依赖性糖尿病的药物组合物。
在本发明的又一实施方案中，所述类黄酮甙化合物具有显著的降血糖活性。
在本发明的又一实施方案中，所述醇化合物提取物具有使链脲霉素处理过的大鼠的胰腺p细胞再生的活性。
在本发明的又一实施方案中，与所述植物的醇或丙酮提取部分的200mg/kg的口服剂量相比，从粉红银豆中分离得到的类黄酮甙化合物可以使用低至20倍的剂量，即10mg/kg的剂量，就能产生显著的降低血糖的活性。
在本发明的又一实施方案中，所述水性提取物、碱性及非碱性提取部分都不具有任何明显的降低血糖的活性。
下述实施例用于对本发明进行描述，所述实施例仅对本发明进行解释，而不应理解为对本发明的范围作出限制。
实施例
实施例1
链脲霉素的使用剂量用来诱导类似NIDDM的糖尿病，临床患者中大部分都为MDDM糖尿病。当对NIDDM糖尿病大鼠以粉红银豆植物的醇类提取物治疗2～3周时，大鼠恢复至正常状态，而NIDDM对照组的大鼠的糖尿病症状仍继续存在，并且一段时间后死亡。
实施例2
将1kg的粉红银豆阴干制成粉末。利用乙醇(5升)对所述粉末状植物提取20小时。将醇提取物真空干燥。收率为91gms。将干燥的醇提取物相继用己烷和氯仿浸软，分别得到8.2gms和39.3gms的提取物。利用60-120微米目径的硅胶重复进行柱层析，从氯仿提取物中分离到类黄酮甙化合物230mgsl。利用正常，禁食18h，糖负载(glucose loaded)和链脲霉素诱导的高血糖症大鼠进行检测可以看出，提取物(200mg/kg口服)具有明显的降低血糖的活性。起效在1/2h内，效果持续5小时以上。在禁食18h的大鼠中，对上述剂量的血糖下降进行记录为26mg/dl(n＝24)，与之相比，甲苯磺丁脲(50mg/kg，口服，n＝9)和格列吡嗪(0.5mg/kg，口服，n＝8)的血糖下降分别为17 & 23mg/dl。
还对植物粉末(2.5g/kg，口服)和从植物中分离的类黄酮甙化合物的降低血糖活性进行了记录。
实施例3
将1kg的粉红银豆阴干制成粉末。利用95％甲醇(每次3升)将所述粉末状植物浸透4次。将醇提取物真空干燥得到85gms。将醇提取物相继用己烷和丙酮浸软，分别得到6.7gms和49.6gms的提取物。化合物通过60～120微米目径的硅胶柱色谱对丙酮提取物进行重复分离，得到类黄酮甙化合物(170mgs)。口服该提取物(200mg/kg/天)2～3周，对于非胰岛素依赖型糖尿病具有显著疗效，所述疗效以下述指标进行衡量：i)血糖水平，ii)对体重的影响，iii)动物存活率，iv)水摄入，尿排出&尿中葡萄糖的存在，v)动物的一般症状，以及vi)蚂蚁对大鼠排出尿液的光顾。
实施例4
将1kg的粉红银豆阴干制成粉末。利用95％丙酮(每次3升)将所述粉末状植物浸透4次。将丙酮提取物真空干燥得到87gms。将醇提取物相继用己烷和乙酸乙酯浸软，分别得到7.2gms和42.8gms的提取物。通过60～120微米目径的硅胶柱色谱对乙酸乙酯提取物进行重复分离，得到类黄酮甙化合物(210mgs)。口服KA(200mg/kg/天)2～3周，对于非胰岛素依赖型糖尿病具有显著疗效，所述疗效以下述指标进行衡量：i)血中葡萄糖水平，ii)对体重的影响，iii)动物存活率，iv)水摄入，尿排出&尿中葡萄糖的存在，v)动物的一般症状，以及vi)蚂蚁对大鼠排出尿液的光顾。
Claims (19)
1.治疗动物高血糖症和非胰岛素依赖型糖尿病的应用，包括给所述动物施用一段时间的有效量的粉红银豆提取物，其中所述提取物包含类黄酮甙化合物。
2.权利要求1的应用，其中所述方法进一步包括与至少一种药学可接受添加剂共同施用。
3.权利要求1的应用，其中所述动物为哺乳动物。
4.权利要求3的应用，其中所述动物为人类。
5.权利要求2的应用，其中所述添加剂选自蛋白质、碳水化合物、糖、滑石粉、硬脂酸镁、纤维素、碳酸钙、淀粉-凝胶糊。
6.权利要求2的应用，其中所述添加剂选自药学可接受的载体、赋形剂、稀释剂、溶剂、或其它降血糖制剂。
7.权利要求1的应用，其中所述有效量约为口服1～3000mg/kg/天。
8.权利要求1的应用，其中所述有效量约为口服200～1000mg/kg/天。
9.权利要求1的应用，其中所述时间约为2～4周。
10.权利要求1的应用，其中所述提取物对所述动物不产生有害副作用。
11.纯化了的组合物，其包括有效量的粉红银豆提取物，其中所述化合物包含类黄酮甙化合物。
12.权利要求11的组合物，其进一步包括至少一种添加剂。
13.权利要求12的组合物，其中所述添加剂选自蛋白质、碳水化合物、糖、滑石粉、硬脂酸镁、纤维素、碳酸钙、淀粉-凝胶糊。
14.权利要求12的组合物，其中所述添加剂选自药学可接受的载体、赋形剂、稀释剂、溶剂、或其它降血糖制剂。
15.权利要求11的组合物，其中所述组合物被制成胶囊、片剂、糖浆、浓缩剂、粉末、颗粒、气雾剂、或球剂的剂型。
16.分离包含类黄酮甙化合物的粉红银豆提取物的方法，其包括：
(a)将粉红银豆植物干燥为粉末形式；(b)用极性或者非极性溶剂将所述粉末浸透3-5次；(c)将提取物浸软；(d)将提取物真空干燥；以及(e)利用色谱法分离类黄酮甙化合物；其中所述类黄酮甙化合物具有降血糖的活性。
17.权利要求16的方法，其中所述类黄酮甙化合物通过60～120微米目径的硅胶色谱柱进行分离。
18.权利要求16的方法，其中在己烷、乙酸乙酯、丙酮、或氯仿的存在下浸软所述提取物。
19.权利要求16的方法，其中利用醇类或丙酮进行浸透。
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| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20080409 Termination date: 20191008 |
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| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |