CN1444977A - 含如意金黄散有效部位的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种含中药复方如意金黄散有效部位的药物组合物及其制备方法，将姜黄、白芷、陈皮、厚朴、苍术用乙醇渗漉，将大黄、黄柏、甘草、生天南星、天花粉用乙醇回流提取，浓缩醇液中加入选择的辅料包括一定量的月桂氮卓酮，本发明的外用制剂与传统如意金黄散相比，不但使用方便、作用迅速、有效成份稳定、制剂理化性状稳定涂布性能好，而且有效成份含量高、透皮吸收率高。

Description

含如意金黄散有效部位的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及含中药复方如意金黄散有效部位的药物组合物及其制备方法，具体地说是提取如意金黄散的有效部位，与适当辅料混合制成各类外用制剂。

背景技术

如意金黄散为历版中华人民共和国药典所收载的品种，具有消肿止痛之功效，用于疮疡肿痛，丹毒流泛，跌扑损伤。方中之大黄，清火解毒，活血消肿，黄柏清热燥湿，解毒消肿，共为君药；辅以姜黄，白芷破瘀行气通络，疏导壅滞之气血，为辅药；生天南星、苍术、厚朴、陈皮化痰理气，散结消肿，具有箍集围聚作用；花粉清热消肿，共为佐药；甘草具清热解毒，且能调和诸药为使药。诸药合用，有清火、散瘀、消肿、止痛、围聚之功效。然而，散剂使用极为不便，既影响疗效，亦影响使用范围与推广。

发明内容

本发明要解决的技术问题是通过分析如意金黄散中有效部位的理化性质，设计高效提取工艺，以及将如意金黄散的有效部位与适当辅料结合，制备各类具有抗菌、消炎、止痛疗效的外用制剂，具体为既可用于疮疡肿痛，丹毒流注，跌扑损伤，又可用于褥疮和静脉炎的药物新剂型。

本发明的外用制剂与传统如意金黄散相比，不但要使用方便、作用迅速、有效成份含量高，而且透皮吸收率高、有效成份稳定、制剂理化性状稳定，作为外用制剂，还需要涂布性能好。

为解决上述问题，本发明提供如下技术解决方案。

一种外用药物组合物，可用下述方法制备：

取姜黄2～3份、白芷2～3份、陈皮0.5～2份、厚朴0.5～2份、苍术0.5～2份，用85～95％乙醇渗漉，减压浓缩渗漉液至5g生药/ml，得浓缩液A；

取大黄2～3份、黄柏2～3份、甘草1份、生天南星1份、天花粉4～6份，用55～65％乙醇回流提取；浓缩乙醇液至2g或4g生药/ml，得浓缩液B；

按体积比取A浓缩液1份：B浓缩液0.5-1份，与药学上可接受载体混合。

所述药物组合物，其特征在于：

取姜黄2.5份、白芷2.5份、陈皮1份、厚朴1份、苍术1份，用90％乙醇渗漉，减压浓缩渗漉液至5g生药/ml，得浓缩液A；

取大黄2.5份、黄柏2.5份、甘草1份、生天南星1份、天花粉5份，用8～10倍量60％乙醇回流提取；浓缩乙醇液至2g或4g生药/ml，得浓缩液B。

前述药物组合物，可制成搽剂、乳膏剂、酊剂、膏剂或凝胶剂、橡胶膏剂、贴膏剂或巴布剂。

搽剂主要由按体积比5g生药/ml的A浓缩液1份、2g生药/ml的B浓缩液1份与适量50-75％乙醇组成。搽剂中还包括按体积比3～4.5％月桂氮卓酮和/或二甲基亚砜、3～4.5％聚山梨酯-80、聚山梨酯60和/或聚山梨酯40、5～7％丙二醇和/或PEG400，以及适量甘油。

搽剂的制备方法包括如下步骤：

取A浓缩液1份与3～4.5％月桂氮卓酮和/或二甲基亚砜混匀；取B浓缩液1份与3～4.5％的聚山梨酯80、聚山梨酯60和/或聚山梨酯40、5～7％丙二醇和/或PEG400以及适量甘油混匀；将上述两液混合，加适量乙醇。

乳膏剂主要由5g生药/ml的A浓缩液100份、4g生药/ml的B浓缩液50份，与按重量计聚维酮K30、β-环糊精和/或聚维酮K15 20～40份、十二烷基硫酸钠10～30份、甘油和/或PEG400 150～300份、羊毛脂、凡士林和/或液体石蜡18～38份、硬脂酸20～40份组成。乳膏剂中还可包括按重量计十六醇18～38份、单硬脂酸甘油酯6～18份、1∶1的甘油与水混合物适量，以及总重量2～4％的月桂氮卓酮。

所述乳膏剂基本上由5g生药/ml的A浓缩液100份、4g生药/ml的B浓缩液50份，与按重量计聚维酮K30 25～35份、十二烷基硫酸钠15～25份、甘油190～240份、羊毛脂22～30份、硬脂酸25～35份、十六醇20～30份、单硬脂酸甘油酯8～14份、1∶1的甘油与水混合物适量，以及总重量2.5～3.5％的月桂氮卓酮组成。

乳膏剂的制备方法包括如下步骤：

取5g生药/ml的A浓缩液100份与聚维酮K30、β-环糊精和/或聚维酮K25～35份混合使溶解，得1；取4g生药/ml的B浓缩液50份与十二烷基硫酸钠15～25份及甘油和/或PEG400190～240份混合，水浴加热，得2；取羊毛脂、凡士林和/或液体石蜡22～30份、硬脂酸25～35份、十六醇20～30份与单硬脂酸甘油酯8～14份混合，加热熔化后，加入按总重量计2.5～3.5％的月桂氮卓酮，混匀，水浴上加热，得3；将3与2混合，保温75度，降温至42～45度，作为4；将1保温至35～40度后，加入4中，补充35～40度的1∶1的甘油与水混合物适量，自然冷凝。

大黄、黄柏、生天南星、天花粉和甘草的提取进行了正交试验优选，采用乙醇提取，并对乙醇提取的主要因素乙醇浓度，乙醇用量和提取时间按三因素三水平进行L₉(3)⁴正交试验。试验结果表明，影响提取率的主要因素为乙醇浓度和乙醇用量，以采用55～65％乙醇提取较好，尤其以60％乙醇提取为佳；加8～12倍量提取2～3次，每次1～2小时即可，以10倍醇量提取2次，每次1.5小时为佳。

大黄主要含蒽醌类成分，具有抗菌和抗炎作用。黄柏主要含生物碱类成分，具有抗菌、抗病毒、抗真菌及抗炎等作用。甘草主要含皂苷类成分，具有抗炎免疫、抗菌、抗病毒等作用。天南星主要含皂苷类等成分，具有镇痛作用。天花粉主要含天花粉蛋白及多糖类成分，具有抗菌作用。以上五味中药采用乙醇回流提取，以君药大黄中的有效成分大黄素及黄柏中的有效成分盐酸小檗碱为考察指标，其提取率分别达到92.7％和84.1％，可较完全地提出有效成分。

姜黄、白芷、陈皮、厚朴、苍术的提取工艺进行了对比优选，试验结果表明：姜黄、白芷、陈皮、厚朴、苍术的提取采用80～95％乙醇渗漉，优选90％乙醇渗漉，不仅有效成分姜黄素、欧前胡素及挥发油的提取效率高，且干膏得率低，即有效成份含量高，尤其是具有抗菌和抗炎及抗病毒活性的姜黄挥发油与姜黄素含量较高，且减少了具有不耐热、不耐光照，不溶于水特性的姜黄素的分解；对病毒、支原体、乙型链球菌、金黄色葡萄球菌、黄曲霉素等均有显著的杀灭作用的苍术挥发油提取较完全；对肺炎双球菌，甲型链球菌、卡他双球菌，金黄色葡萄球菌均有很强抑制作用的陈皮挥发油中的柠檬烯，以及具有抗炎、抗病毒活性的黄酮类成分橙皮苷也提取较完全；还包括厚朴的挥发油和木脂素等成分，木脂素主要为厚朴酚及和厚朴酚，厚朴酚具有显著的抗菌作用；白芷挥发油和香豆素类成分也提取较完全，其挥发油具有抗炎作用，香豆素类成分欧前胡素具有抗菌、抗炎作用。以上五味中药均含挥发油，挥发油不仅为主要有效成分，还具透皮促进作用。抗菌、抗炎、抗病成分均为脂溶性成分，因此采用乙醇渗漉提取，低温浓缩成稠膏，提出并保留挥发油及易受热分解的活性成分。

搽剂制剂工艺中研究采用正交试验，通过体外透皮吸收试验，以大黄中的有效成分大黄酚的透皮吸收速率常数为指标，对影响透皮吸收的主要影响因素制剂辅料月挂氮卓酮、聚山梨酯80及丙二醇的量按三因素三水平L₉(3)⁴正交试验。试验结果表明，影响透皮吸收的主要因素为月桂氮卓酮的量，制剂中可加入按体积比计3～4.5％月桂氮卓酮，3～4.5％聚山梨酯-80，5～7％丙二醇；制剂中加入4％月桂氮卓酮，4％聚山梨酯80，6％丙二醇为佳。

乳膏制剂工艺研究，首先采用正交试验，对乳膏基质处方进行了优选。以乳膏成型后的乳滴大小、外观性状及涂布性能为考察指标，对主要因素：羊毛脂的量、硬脂酸的量、十二烷基硫酸钠的量、单硬脂酸甘油酯的量、十六醇的量、甘油的量及聚维酮K30按7因素二水平进行L₈(2)⁷正交试验。在上述优选的乳膏处方的基础上，对透皮吸收促进剂月桂氮卓酮的用量(0％-4％)进行了优选，通过体外透皮吸收试验，以大黄中的有效成分大黄酚的吸收速率常数为指标，试验结果表明：加2～4％的月桂氮卓酮效果较好，3％的月桂氮卓酮的效果最佳。

如意金黄搽剂和软膏剂药效学试验。

如意金黄搽剂和如意金黄乳膏经大、小鼠和豚鼠试验结果表明：1、有明显的镇痛作用，能提高小鼠的致痛阈值，减少醋酸引起的扭体次数；2、具有一定的抗炎作用，抑制二甲苯引起小鼠的耳肿胀，对鸡蛋清引起大鼠的足肿胀和棉球引起的肉芽增生也有明显的抑制作用，与赋型剂组比有显著差异。3、消瘀散结作用良好。如意金黄搽剂和如意金黄乳膏能对抗自由落体使大鼠产生的瘀血现象，使瘀血组织有明显好转。4、体外抑菌作用表明，如意金黄搽剂和如意金黄乳膏对6种细菌有一定程度的抑制作用，如意金黄搽剂对白色念珠菌作用最强MIC₅₀为3.12mg/ml，而如意金黄乳膏对白色念珠菌作用最强MIC₅₀为6.25mg/ml，局部皮肤感染试验表明，如意金黄搽剂和如意金黄乳膏明显对抗金黄色葡萄球菌导致的皮肤感染，使脓性物很快消失，渗出减少，溃疡面修复。5、止痒作用表明：该药明显抑制组胺产生的搔痒作用。6、对皮肤炎症试验显示，如意金黄搽剂和如意金黄乳膏能对抗2，4二硝基氟苯产生的小鼠皮炎。说明如意金黄搽剂和如意金黄乳膏有良好的消炎止痛作用。

1、实验材料

试验药物本发明如意金黄乳膏(以下简称如意乳膏)，人用量每天8g，每g乳膏含生药量0.5g，由本发明方法制得。

本发明如意金黄搽剂(以下简称如意搽剂)，人用量每天4g生药，每ml搽剂含生药量1g，由本发明方法制得。

如意金黄散(以下简称如意散)由天津第五中药厂生产，批号：010902-1。

试验动物  昆明种小鼠Wistar大鼠、豚鼠均由安徽省医科大学动物中心提供其中小、大鼠合格证号，皖医实动准第01、03号。

2、实验方法

2.1镇痛试验(常规)

2.2抗炎试验

2.2.1  对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用

取体重18-22g雄性小鼠50只，腹部脱行3×3cm²后随机均分成5组(同上)。结果见表1、2。2.2.2对蛋清致大鼠足肿胀的抑制作用

取体重180-220g雄性大鼠50只，腹部脱毛40cm²后随机均分成5组，各组用药浓度同2.1.1，外用给药按0.5ml/100g体重，适当固定，连续用药7天。结果见表3-6。2.2.3对棉球法致大鼠肉芽增生的抑制作用

取体重180-220g雄性大鼠50只，腹部脱毛约40cm²后，随机均分成5组，在***麻醉无菌条件下，将已称重的棉球经高压灭菌，每个棉球加氨苄青霉素1mg/0，1ml，50℃烘干后，植入大鼠右侧腹股沟皮下。结果见表7、8。

2.3对外伤致瘀模型的作用

取体重200-250g大鼠60只，右后肢脱毛，24h后，随机均分成6组，除正常组外其他各级大鼠右后肢分别固定在自制的自由落体装置的底部平台上，用50克砝码从15cm高处自由落下，连续5次，致后肢瘀血造成外伤模型大鼠，然后在瘀血部位按表13剂量外用给药(搽剂浓度分别为50、25、12.5％)0.5ml/100g体重，连续4d。结果如下。2.3.1肉眼观察  造模后各鼠局部均有明显肿胀，局部皮肤发紫、渗血，治疗后除模型组局部仍有轻度肿胀外，其余各组未见有明显病变。2.3.2镜下观察  发现如意金黄散组和如意金黄搽剂组大、中、小剂量组病变均比模型组有减轻，说明如意金黄搽剂对皮肤、肌肉创伤有一定治疗效果。2.4抗菌试验2.4.1体外抗菌试验2.4.1.1菌种及培养基：菌种：金黄色葡萄球菌10株(含标准株ATCC25923)，甲型链球菌8株，乙型链球菌5株，大肠杆菌9株(含标准菌株ATCC25922)，绿脓杆菌10株，白色念珠菌7株，以上6种49株菌株，其中标准菌株来自北京生物制品检验所菌种保存中心，其余菌株均由安徽中医学院第一、二附院临床培养提供。菌种根据***医政司1997年编著《全国临床检验操作规程》鉴定。

培养基选用MH培养基；白色念珠菌选用沙保氏保养基；厌O₂菌用厌O₂培养基。2.4.1.2MIC试验

含药培养基的制备：在供试培养中分别加入事先制备好的如意金黄搽剂药液和如意金黄散对照药，用对倍稀释法使培养基的药物浓度分别为200mg/ml、100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml、3.125mg/ml、1.56mg/ml。

供试菌种接种：用接种环分别取供试菌液一下(含菌量约为10⁴CFU/ml)接种于不同药物浓度的培养基上，37℃孵育培养24h，白色念珠菌培养48h后，观察结果，结果见表9、10。2.4.2对抗皮肤细菌感染性试验2.4.2.1试验方法取体重为18-22g的昆明种小鼠60只，雌雄各半，每鼠背部脱毛3×3cm²，在脱毛处用砂纸将皮肤擦破至渗血，除留10只小鼠做正常组外，其作小鼠在破损皮肤皮下注射经预试细菌浓度为3×10⁸CFU/ml的金黄色葡萄球菌0.5ml，每天1次，连续3次，皮肤出现红肿、脓性物渗出、溃疡等感染现象5天后。将感染小鼠随机均分成模型组、如意金黄散组(50％)、如意金黄搽剂小、中、大剂量组(12.5％、25％、50)，按剂量连续给药5天(涂药量0.1ml/10g体重)，其中正常组和模型组给等剂量的赋型剂。2.4.2.2试验结果

1、肉眼观察：

(1)注射金葡菌后，局部皮肤肿胀，有溃疡形成，有脓性、炎性物渗出，而正常组皮肤没有任何反应，擦破的皮肤恢复正常。

(2)用药后，治疗各组第1次用药后，炎性渗出停止，脓性物消失、溃疡面缩小，第2天开始，明显可见皮肤开始修复，发红、结痂，剪开皮肤发现，除个别小鼠皮下有淤血坏死外，绝大多数皮下与正常组无明显区别；第3天开始，痂脱落，皮肤基本修复。而模型组溃疡加重，脓性、炎性物渗出增多，溃疡面加大，剪开皮肤发现，小鼠皮下有明显淤血、坏死外，与正常组比，有显著性差异。

2、镜下观察：

正常对照组表皮及皮下组织均未见病变；模型组表皮均有溃疡形成，溃疡面有大量中性白细胞及纤维渗出，皮下组织有片状坏死及小脓肿形成，病变周围有充血，水肿、炎细胞浸润及出血；用药组大部分溃疡不明显，但有炎性渗出，皮下组织中坏死脓肿仅出现在少数动物，充血水肿、炎细胞浸润也有减轻。其中小量组病量轻。阳性组病变也有减轻。

2.5止痒试验

取体重250-300豚鼠50只，将药物涂抹在左前肢剪毛区域，每只局部涂药0.1ml/100g体重，浓度同上，40min后，在前肢皮内注射0.2％的磷酸组胺0.05ml/100g体重，结果见表11、12。

2.6如意金黄搽剂对2，4-二硝基氟苯产生的皮炎的抑制作用

取体重为25-30g小鼠50只，随机分组同上。涂0.5％的2、4-二硝基氟苯(DNFB)25μl致敏，同时以含生药量50％、25％、12.5％搽剂和50％金黄散按0.1ml/只剂量连续在左耳给药6天，于第6天药后6小时在小鼠左耳背面涂0.25％DNFB20μl诱发皮炎，右耳涂等量的溶剂。结果见表13、14。

    表1、如意金黄搽剂对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用(n＝10，x±s)

   组别     动物数(n)  剂量(g/kg)    肿胀度(mg)    抑制率(％)

赋型剂组        10         等量     0.0122±0.0017     /

如意散组        10         5.00     0.0084±0.0014^**  15.00

如意搽剂组(小)  10         1.25     0.0107±0.0013     12.00

如意搽剂组(中)  10         2.50     0.0094±0.0012^**  22.80

如意搽剂组(大)  10         5.00     0.0087±0.0010^**  28.79

与赋型剂组比    *P＜0.05

   表2、如意金黄乳膏对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用(n＝10，x±s)

  组别     动物数(n)   剂量(g/kg)    肿胀度(mg)    抑制率(％)

赋型剂组        10         等量     0.0114±0.0018      /

如意散组        10     5.00         0.0090±0.0019^**   21.40

如意乳膏组(小)  10     1.25         0.0091±0.0021^*    20.79

如意乳膏组(中)  10     2.50         0.0032±0.0011^**   28.73

如意乳膏组(大)  10     5.00         0.0082±0.0020^**   28.65

与赋型剂组比   *P＜0.05  **P＜0.01

   表3、如意金黄搽剂对蛋清致大鼠足肿胀的抑制作用(n＝10，x±s)

                   剂量              肿胀度(ml)

组别

                  (g/kg)

                                   正常值       0.5            1            1.5            2             3(h)

赋型剂组          等量          1.67±0.16   1.19±0.25    1.45±0.18    1.55±0.16    1.37±0.13   1.18±0.13

如意散组          2.500         1.69±0.11   1.18±0.15    1.24±0.16    1.15±0.20^** 1.00±0.15^**0.80±0.13^**

如意搽剂组(小)    0.625         1.64±0.14   1.12±0.20    1.30±0.22    1.37±0.24    1.13±0.24^**0.89±0.24^**

如意搽剂组(中)    1.250         1.68±0.19   0.94±0.28^*  1.20±0.30^* 1.14±0.42^*  1.01±0.35^**0.84±0.30^**

如意搽剂组(大)    2.500         1.66±0.17   0.65±0.29^** 0.84±0.27^** 1.07±0.41^** 1.03±0.32^**0.77±0.27^**

与赋型剂组比*P＜0.05  **P＜0.01

              表4、如意金黄乳膏对蛋清致大鼠足肿胀的抑制作用(n＝10，x±s)    -

                    剂量                        肿胀度(ml)

 组别

                  (g/kg)

                              正常值         0.5          1           1.5            2            3(h)

赋型剂组           等量    1.67±0.18    1.09±0.20   1.41±0.24   1.51±0.17    .44±0.26    1.44±0.30

如意散组           2.500   1.62±0.18    0.98±0.24   1.34±0.15   1.38±0.19    1.13±0.28^* 0.98±0.31^**

如意乳膏组(小)     0.625   1.68±0.18    1.02±0.34   1.37±0.32   1.38±0.24    1.09±0.26^**0.91±0.25^**

如意乳膏组(中)     1.250   1.67±0.23    1.04±0.36   1.41±0.27   1.26±0.31^*  1.05±0.28^**0.81±0.23^**

如意乳膏组(大)     2.500   1.64±0.21    1.05±0.46   1.31±0.31   1.24±0.24^** 1.04±0.25^**0.88±0.23^**

     与赋型剂组比*P＜0.05  **P＜0.01

               表5、如意金黄搽剂对蛋清致大鼠足肿胀的抑制率(n＝10，x±s)

                   剂量                         抑制率(％)

  组别

                  (g/kg)       0.5            1           1.5           2             3(h)

赋型剂组           等量         /             /            /            /              /

如意散组          2.500       0.84          14.48        25.80          27.00        32.20

如意搽剂组(小)    0.625       5.88          10.34        11.60          17.50        24.60

如意搽剂组(中)    1.250       21.00         17.24        26.45          26.30        28.89

如意搽剂组(大)    2.500       45.40         42.10        30.96          24.80        34.70

               表6、如意金黄乳膏对蛋清致大鼠足肿胀的抑制率(n＝10，x±s)

组                 剂量                        抑制率(％)

别                 (g/kg)      0.5            1           1.5             2            3(h)

赋型剂组           等量         /              /           /              /              /

如意散组          2.500       11.92          4.96         8.61           21.53       31.94

如意乳膏组(小)    0.625       6.42           2.84         8.61           24.31       36.81

如意乳膏组(中)    1.250       4.59           0.00         16.56          27.08       43.75

如意乳膏组(大)    2.500       3.67           7.09         17.88          27.78       38.89

               表7、如意金黄搽剂对棉球法致大鼠肉芽增生的抑制作用(n＝10，x±s)

  组                剂量                              肉芽重(g)

  别               (g/kg)        湿重            抑制率(g)      干重       抑制率(％)

赋型剂组            等量     0.6550±0.0780          /       0.1427±0.0089        /

如意散组           2.500     0.5588±0.0927^*      14.69     0.1070±0.0200^**   25.02

如意搽剂组(小)     0.625     0.6048±0.1056        7.66      0.1184±0.0140^**   17.03

如意搽剂组(中)     1.250     0.5414±0.0943        17.34     0.1072±0.0109^**   24.88

如意搽剂组(大)     2.500     0.5445±0.1945^**     16.87     0.0846±0.0303^**   40.71

           表8、如意金黄乳膏对棉球法致大鼠肉芽增生的抑制作用(n＝10，x±s)

  组                剂量                               肉芽重(g)

  别               (g/kg)         湿重           抑制率(％)      干重       抑制率(％)

赋型剂组            等量     0.5924±0.1585           /       0.1309±0.0167        /

如意散组           2.500     0.4756±0.622^**      19.70      0.1006±0.0149^**  23.50

如意乳膏组(小)     0.625     0.5531±0.0530        6.63       0.1000±0.0129^**  23.61

如意乳膏组(中)     1.250     0.5154±0.6556        13.00      0.0973±0.0115^**  25.67

如意乳膏组(大)     2.500     0.4748±0.0468^*      19.84      0.0980±0.0083^**  25.15

         表9、如意金黄搽剂剂对6种49株细菌MIC测定结果

菌种(株数)                   如意金黄散(mg/ml)    如意金黄搽剂剂(mg/ml)   空白  溶剂对照

                          MIC_R   MIC₅₀  MIC₉₀  MIC_R   MIC₅₀  MIC₉₀

金黄色葡萄球菌(10)       6.25-50   25      25   3.12-12.5  12.5   6.25     0      0

甲型链球菌(8)            25-50     100     50   12.5-25    25     25       0      0

乙型链球菌(5)           100-100    100     100  50-100     100    50       0      0

大肠杆菌(9)             100-200    200     100  6.25-100   25     12.5     0      0

绿脓杆菌(10)            100-200    200     200  50-100     100    100      0      0

白色念株菌(7)           12.5-50    50      50   1.56-6.25  3.12   3.12     0      0

             表10、如意金黄乳膏对6种49株细菌MIC测定结果

 菌种(株数)    如意金黄乳膏(mg/ml)    如意金黄散(mg/ml)

                      MIC_R    MIC₉₀   MIC₅₀   MIC_R     MIC₉₀   MIC₅₀

金黄色葡萄球菌(10)  6.25-12.5  12.5      6.25    6.25-50     25    25

甲型链球菌(8)       25-100     100       50      25-100     100    50

乙型链球菌(5)       50-100     100       100     100-100    100    100

绿脓杆菌(10)        100-200    200       100     100-200    200    200

大肠杆菌(9)         50-200     200       100     100-200    200    200

白色念株菌(6)       12.5-50    50        50      12.5-200   200    200

              表11、如意(次)金黄搽剂对抗组胺致痒作用(n＝10，10，x±s)

  组别            动物数(n)     剂量(g/kg)       搔痒次数(次)    抑制率(％)

赋型剂组            10            等量           22.80±2.90        /

如意散组            10            0.500          13.00±3.50      42.98

如意搽剂组(小)      10            0.125          14.60±3.37      35.96

如意搽剂组(中)      10            0.250          10.60±2.50      53.51

如意搽剂组(大)      10            0.500          9.40±2.37       58.77

由表17结果表明：如意金黄搽剂剂对磷酸组胺致痒有明显抑制作用，与赋型剂组比，有明显差异。

             表12、如意金黄乳膏对抗组胺致痒作用(n＝10，x±s)

组别             动物数(n)      剂量(g/kg)       搔痒次数(次)     抑制率(％)

赋型剂组             10            等量           22.20±2.35        /

如意散组             10           0.500           11.70±3.77^**   42.08

如意乳膏组(小)       10           0.125           17.50±3.34      13.37

如意乳膏组(中)       10           0.250           11.00±3.40^**   45.54

如意乳膏组(大)       10           0.500           9.40±3.17^**    53.47

与赋形剂组比^*P＜0.05  ^**P＜0.01

表13、如意金黄搽剂剂对2，4-二硝基氟苯产生的皮炎的抑制作用(n＝10，x±s)

组别              剂量           耳厚度差值(mm)                  耳重量差值

                  (g/只)          左耳差值         左右耳差值         (g)

赋型剂组           等量          0.077±0.014     0.061±0.015    0.0044±0.0010

如意散组          0.0500         0.065±0.026     0.055±0.011    0.0036±0.0030^*

如意凝胶组(小)    0.0125         0.068±0.027     0.057±0.012    0.0044±0.0006

如意凝胶组(中)    0.0250         0.059±0.014     0.046±0.011^*  0.0033±0.0010^*

如意凝胶组(大)    0.0500         0.060±0.018     0.041±0.0120^**0.0031±0.0008^**

与赋型剂组比  *P＜0.05  **P＜0.01

表14、如意金黄乳膏对2，4-二硝基氟苯产生的皮炎的抑制作用(n＝10，x±s)

组别              剂量           耳厚度差值(mm)           耳重量差值

                 (g/只)       左耳差值       左右耳差值          (g)

赋型剂组         等量      0.067±0.067     0.066±0.028    0.0445±0.0009

如意散组         0.0500    0.055±0.024     0.044±0.018    0.0026±0.0010^**

如意乳膏组(小)   0.0125    0.055±0.020     0.061±0.017    0.0029±0.0012^**

如意乳膏组(中)   0.0250    0.053±0.025     0.052±0.016    0.0031±0.0007^**

如意乳膏组(大)   0.0500    0.056±0.029     0.044±0.012^*  0.0023±0.0007^**

与赋型剂组比  *P＜0.05  **P＜0.01

从试验结果可见：如意金黄搽剂和如意金黄乳膏具有良好的消瘀止痛作用，具体表现在：1、有明显的镇痛作用，能提高小鼠的痛阈值，减少醋酸引起的扭体次数；2、具有一定的抗炎能力，能抑制二甲苯引起小鼠耳肿胀，对鸡蛋清引起的大鼠足肿胀和棉球引起大鼠的肉芽增生也有明显的抑制作用，与赋型剂组比有显著差异。3、消瘀散结试验显示：如意金黄搽剂和如意金黄乳膏能对抗自由落体产生的瘀血现象。4、体外抑菌作用表明，如意金黄搽剂和如意金黄乳膏对6种细菌有一定的抑制作用，其中如意金黄搽剂对白色念珠菌作用最强MIC₅₀3.12mg/ml；而如意金黄乳膏对白色念株菌最强MIC₅₀6.25mg/ml，局部皮肤感染试验表明，如意金黄搽剂和如意金黄乳膏明显对抗金黄色葡萄球菌导致的皮肤感染，使脓性物很快消失，渗出减少，溃疡面修复。5、止痒作用表明：该药有明显对抗组胺产生的搔止痒。6、对皮肤炎症试验显示，如意金黄搽剂和如意金黄乳膏能对抗2，4-二硝基氟苯产生的皮炎。说明如意金黄搽剂和如意金黄乳膏外用有明显的镇痛、抗炎、消瘀和止痒的作用。

具体实施方式

实施例1

取姜黄2.5kg、白芷2.5kg、苍术1kg、陈皮1kg、厚朴1kg，加90％乙醇渗漉，收集初漉液8L作为A液，按常规进行了挥发油测定。继续收集续漉液80L，减压回收乙醇，浓缩至每1ml相当于含5g生药；另取大黄2.5kg、黄柏2.5kg、天花粉5kg、甘草1.25kg、生天南星1.25kg。加10倍量60％乙醇回流提取2次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至每1ml相当于含2g生药；合并浓缩液，作为B液。按常规进行大黄酚HPLC测定。

实施例2

如意金黄搽剂：取A液4L加月桂氮卓酮400ml，混匀；另取B液4L加聚山梨酯80约400ml和丙二醇600ml及甘油1000ml，混匀；将上述两液混合，加65％乙醇至全量为10L。置0-10℃冷藏24小时，过滤，灌封，检验，即得。

实施例3

如意金黄搽剂：取A液4L与B液4L，两液混合，加70％乙醇至全量为10L。置0-10℃冷藏24小时，过滤，灌封，检验，即得。

实施例4

如意金黄搽剂：取A液4L加二甲基亚砜400ml，混匀；另取B液4L加聚山梨酯40约400ml和PEG 400ml及60％乙醇1000ml，混匀；将上述两液混合，加60％乙醇至全量为10L。置0-10℃冷藏24小时，过滤，灌封，检验，即得。

实施例5

如意金黄乳膏：取A液4L，加PVPK30 1.2kg，搅拌使溶解，作为①；将B液浓缩至每1ml含相当于4g生药的溶液，取2L，加甘油4kg和十二烷基硫酸钠水溶液(400g溶于3.2L水中)，混合，于沸水浴加热30分钟后，移至75℃水浴，作为②；将羊毛脂1.12kg、硬脂酸1.26kg、十六醇1.12kg、单硬脂酸甘油酯0.5kg，加热溶化后，加入月桂氮卓酮0.66L，混匀，置沸水浴加热30分钟，降温至75℃，作为③；边加边搅拌③缓缓加入②中，保温搅拌10分钟，继续搅拌至温度降至42-45℃，保温作为④；将①保温至35-40℃后边加边搅拌缓缓加入④中，称重，补充35-40℃的甘油-水(1∶1)的混合液至总量为20kg，保温搅拌均匀后，不断搅拌至自然冷凝。脱气，分装，即得。

实施例6

    A液                              195ml

    B液(4g生药/ml)                   195ml

    聚维酮K30                        60g

    十二烷基硫酸钠                   20g

    甘油                             200g

    羊毛脂                           56g

    硬脂酸                           63g

    十六醇                           56g

    单硬脂酸甘油酯                   25g

    甘油-水(1∶1)                   适量

                制成1000g

加入按总重量1000g计，加入重量比3％的月桂氮卓酮。制备方法同实施例5。

本实施例中，十六醇、单硬脂酸甘油酯、月桂氮卓酮、甘油-水(1∶1)均可省略。聚维酮K30可用β-环糊精或聚维酮K15替代。甘油可用PEG400替代。羊毛脂可用凡士林或液体石蜡替代。

实施例7

如意金黄凝胶：取卡波姆0.28kg，加水7L，搅拌溶解，静置24小时得4％的卡波姆凝胶；取B液4L，加入丙二醇1.6kg，搅拌混匀，边加边搅拌加入至卡波姆水凝胶中，搅拌均匀，在搅拌下加入三乙醇胺调PH5～8，搅拌均匀，备用；取A液4L，加入0.6kg月桂氮卓酮，混匀，边加边搅拌加入至上述初始凝胶中，搅拌均匀，加水至20kg，充分混匀，分装，即得。

实施例8

A液                  195ml

B液                  195ml

卡波姆               14g

丙二醇               80g

月桂氮卓酮           30g

三乙醇胺             适量

水                   适量

制成                 1000g

方法同实施例7。

Claims (10)

1、一种外用药物组合物，可用下述方法制备：

取姜黄2～3份、白芷2～3份、陈皮0.5～2份、厚朴0.5～2份、苍术0.5～2份，用85～95％乙醇渗漉，减压浓缩渗漉液至5g生药/ml，得浓缩液A；

取大黄2～3份、黄柏2～3份、甘草1份、生天南星1份、天花粉4～6份，用55～65％乙醇回流提取；浓缩乙醇液至2g或4g生药/ml，得浓缩液B；

按体积比取A浓缩液1份∶B浓缩液0.5-1份，与药学上可接受载体混合。

2、根据权利要求1所述药物组合物，其特征在于：

取姜黄2.5份、白芷2.5份、陈皮1份、厚朴1份、苍术1份，用90％乙醇渗漉，减压浓缩渗漉液至5g生药/ml，得浓缩液A；

取大黄2.5份、黄柏2.5份、甘草1份、生天南星1份、天花粉5份，用8～10倍量60％乙醇回流提取；浓缩乙醇液至2g或4g生药/ml，得浓缩液B。

3、根据权利要求1或2所述药物组合物，其特征在于：制成搽剂、乳膏剂、酊剂、膏剂、橡胶膏剂、贴膏剂、凝胶剂或巴布剂。

4、根据权利要求3所述药物组合物，其特征在于：搽剂主要由按体积比5g生药/ml的A浓缩液1份、2g生药/ml的B浓缩液1份与适量50-75％乙醇组成。

5、根据权利要求4所述药物组合物，其特征在于：搽剂中还包括按体积比3～4.5％月桂氮卓酮和/或二甲基亚砜、3～4.5％聚山梨酯-80、聚山梨酯60和/或聚山梨酯40、5～7％丙二醇和/或PEG400，以及适量甘油。

6、权利要求4或5所述药物组合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

取A浓缩液1份与3～4.5％月桂氮卓酮和/或二甲基亚砜混匀；取B浓缩液1份与3～4.5％的聚山梨酯80、聚山梨酯60和/或聚山梨酯40、5～7％丙二醇和/或PEG400以及适量甘油混匀；将上述两液混合，加适量乙醇。

7、根据权利要求3所述药物组合物，其特征在于：乳膏剂主要由5g生药/ml的A浓缩液100份、4g生药/ml的B浓缩液50份，与按重量计聚维酮K30、β-环糊精和/或聚维酮K1520～40份、十二烷基硫酸钠10～30份、甘油和/或PEG400150～300份、羊毛脂、凡士林和/或液体石蜡18～38份、硬脂酸20～40份组成。

8、根据权利要求7所述药物组合物，其特征在于：乳膏剂中还包括按重量计十六醇18～38份、单硬脂酸甘油酯6～18份、1∶1的甘油与水混合物适量，以及总重量2～4％的月桂氮卓酮。

9、根据权利要求8所述药物组合物，其特征在于：乳膏剂基本上由5g生药/ml的A浓缩液100份、4g生药/ml的B浓缩液50份，与按重量计聚维酮K30 25～35份、十二烷基硫酸钠15～25份、甘油190～240份、羊毛脂22～30份、硬脂酸25～35份、十六醇20～30份、单硬脂酸甘油酯8～14份、1∶1的甘油与水混合物适量，以及总重量2.5～3.5％的月桂氮卓酮组成。

10、权利要求7～9之一所述药物组合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

取5g生药/ml的A浓缩液100份与聚维酮K30、β-环糊精和/或聚维酮K 25～35份混合使溶解，得1；

取4g生药/ml的B浓缩液50份与十二烷基硫酸钠15～25份及甘油和/或PEG400190～240份混合，水浴加热，得2；

取羊毛脂、凡士林和/或液体石蜡22～30份、硬脂酸25～35份、十六醇20～30份与单硬脂酸甘油酯8～14份混合，加热熔化后，加入按总重量计2.5～3.5％的月桂氮卓酮，混匀，水浴上加热，得3；

将3与2混合，保温75度，降温至42～45度，作为4；

将1保温至35～40度后，加入4中，补充35～40度的1∶1的甘油与水混合物适量，自然冷凝。