CN1373767A - 酮式大环内酯抗菌剂 - Google Patents

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
    • C07H17/08—Hetero rings containing eight or more ring members, e.g. erythromycins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents

Abstract

式(a)大环内酯家族中的一系列酮式大环内酯抗菌剂、其制造中使用的中间体和含有该抗菌剂的医药组合物。这些化合物是可用于治疗细菌感染和原生动物感染、也可用于治疗其它涉及胃能动性的病症的红霉素类似物。

Description

酮式大环内酯抗菌剂
根据35 USC§119规定，本申请要求下列申请的优先权：1999年4月28日提交的申请序号60/131,383、1999年12月17日提交的申请序号60/172,159、1999年4月16日提交的申请序号60/129,729、1999年12月17日提交的申请序号60/172,154和1999年6月18日提交的申请序号60/140,175。这些专利申请的内容列为本文参考文献。
                      发明领域
本发明涉及大环内酯家族中的一系列酮式大环内酯抗菌剂、其制造中使用的中间体和含有该抗菌剂的医药组合物。这些化合物是红霉素类似物，可用于治疗细菌感染和原生动物感染，也可用于治疗涉及胃能动性的其它病症。
                       发明背景
聚酮化合物(Polyketides)是一个天然产物家族，包括很多具有抗生素性能及其它药理学性能的化合物。红霉素原先是1952年在一株红色链霉菌(Streptomyces erythreus)的代谢产物中发现的一类大环内酯抗生素。这种抗生素以各种不同糖基化形式存在，指定为A、B、C和D。自从它们发现以来，很多人致力于制备该分子的衍生物以改善或改良其性能。其中大部分工作的焦点涉及天然产生红霉素分子的化学改性。此工作已经产生了一批衍生物，包括半合成抗生素克拉霉素，即6-O-甲基红霉素。美国专利5,635,485中描述了红霉素的12，11-氧羰基取代的亚氨基化学衍生物。然而，由于该大环内酯分子的复杂性，生产衍生物的医药化学努力一直限于对天然存在产物可以做的若干种改性。
最近，围绕改性聚酮化合物抗生素探索而开展的工作，随着调制聚酮化合物合成酶(PKS)的发现与分离而扩大，这些与脂肪酸合成酶有关的多功能酶催化了聚酮化合物通过酰基硫代酯之间的重复反应而产生聚酮化合物链的生物合成。Donadio等人在IndustrialMicroorganisms(工业微生物)：Basic and Applied MolecularGenetics(基础和应用分子遗传学)(1993)〔R.H.Baltz，G.D.Hegeman和P.L.Skatrud编，美国微生物学会出版〕中对红色链霉素的整个生物合成基因簇进行绘制和测序，而且整个PKS是三个独立基因编码的三种多功能蛋白的一种调制集合。美国专利5,762,491公开了用能对各种各样PKS基因簇编码的重组体载体转化的细胞的用途，它们可以用来生产各种各样的活性聚酮化合物。该载体可以包括PKS亚单元或其突变体的天然组合或杂种组合来生产各种各样的聚酮化合物。在WO97/02358中报告了采用调制聚酮化合物合成酶进行聚酮化合物生产的无细胞***。
例如，在WO 98/01571、WO 99/35157、WO 99/03986、和WO97/02358中已经报告了利用这些技术的、C-13带有除天然乙基团外的取代的红霉素类似物的生产。WO 98/0156描述了一种用来改变起始单元和增链单元的性质以合成新型聚酮化合物包括红霉素类似物的杂种调制PKS基因。美国专利No.5,824,513和No.6,004,787进一步描述了通过向红色链霉菌的EryA序列中的PKS编码基因中引进专性遗传改变来产生聚酮化合物结构的方法。
本发明涉及通过操作调制的PKS基因簇来制备的非天然红霉素类似物的新型化学衍生物。
                        发明概要
Figure A0080908700121
本发明涉及式I的新型化合物：式中X是H、F、Cl、Br、或I；R2选自H、-COCH3和-CO苯基；R6选自H和-ORa，式中Ra是有取代或无取代的烷基(C1-C10)、有取代或无取代的链烯基(C2-C10)或者有取代或无取代的炔基(C2-C10)；
R13选自H、(C1-C8)烷基、1-链烯基(C2-C8)、1-炔基(C2-C8)、有取代的(C1-C8)烷基、和-CH2-R″，式中R″选自H、(C1-C8)烷基、有取代的(C1-C8)烷基、环烷基、链烯基(C2-C8)、炔基(C2-C8)、芳基、有取代的芳基、(C1-C8)烷基芳基、杂环基、和有取代的杂环基；先决条件是R13不能是乙基；
R选自H、芳基、有取代的芳基、杂环基、有取代的杂环基、环烷基、C1-C8烷基和C1-C8链烯基，也可以有一个或多个选自下列一组的取代基取代：芳基、有取代的芳基、杂环基、有取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基；
及其医药上可接受的盐、酯和药物前体形式。
以下所列的是用来描述本发明的各个术语的定义。这些定义就如同在本说明书中通篇使用它们的那样适用于这些术语，除非在特定情况下要么单个地要么作为一个较大基团的组成部分另有限定。
“烷基”这一术语系指有所说明碳原子数的直链或支链无取代烃基。
“有取代烷基”这一术语系指诸如有1～4个如下取代基取代的烷基基团：卤素、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基、烷氧基、环烷氧基、杂环氧基、氧代、链烷酰基、芳氧基、链烷酰氧基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基、环烷基氨基、杂环基氨基、有两个氨基取代基选自烷基、芳基或芳烷基的二取代氨基、链烷酰基氨基、芳酰基氨基、芳链烷酰基氨基、有取代的链烷酰基氨基、有取代的芳基氨基、有取代的芳链烷酰基氨基、巯基、烷硫基、芳硫基、芳烷硫基、环烷硫基、杂环硫基、烷基硫羰、芳基硫羰、芳烷基硫羰、烷基磺酰、芳基磺酰、芳烷基磺酰、氨磺酰基(例如SO2NH2)、有取代的氨磺酰基、硝基、氰基、羧基、氨基甲酰基(例如CONH2)、有取代的氨基甲酰基(例如CONH烷基、CONH芳基、CONH芳烷基、或氮原子上有两个选自烷基、芳基或芳烷基的取代基的情况)、烷氧羰基、芳基、有取代的芳基、胍基和杂环基例如吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基等。如以上所说明的，在该取代基有进一步取代的情况下，它将用卤素、烷基、烷氧基、芳基或芳烷基取代。
“卤素”或“卤”这一术语系指氟、氯、溴和碘。
“芳基”这一术语系指环部分有6～12个碳原子的单环式或双环式芳香族烃基，例如苯基、萘基、和联苯基，其中每个环都可以有取代。
“烷基芳基”或“芳烷基”这一术语系指经由烷基直接连接的芳基，例如苄基。
“有取代的芳基”这一术语系指有诸如1～4个如下取代基取代的芳基基团：烷基、有取代的烷基、卤素、三氟甲氧基、三氟甲基、羟基、烷氧基、环烷氧基、杂环氧基、链烷酰基、链烷酰氧基、氨基、烷基氨基、芳烷基氨基、环烷基氨基、杂环基氨基、二烷基氨基、链烷酰基氨基、巯基、烷硫基、环烷硫基、杂环硫基、脲基、硝基、氰基、羧基、羧烷基、氨基甲酰基、烷氧羰基、烷基硫羰、芳基硫羰、烷基磺酰、氨基磺酰、芳氧基等。该取代基可以进一步有如下基团取代：卤素、羟基、烷基、烷氧基、芳基、有取代的芳基、有取代的烷基或芳烷基。
“环烷基”这一术语系指也可以有取代的饱和环烃环体系，该体系较好含有1～3个环、每个环含有3～7个碳、该环可以进一步稠合一个不饱和的C3-C7碳环式环。基团实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基、环十二烷基、和金刚烷基。取代基实例包括一个或多个如上所述烷基，或者一个或多个作为烷基取代基的如上所述基团。
“杂环”、“杂环的”和“杂环基”这些术语，系指一个也可以有取代的、全饱和或不饱和的、芳香族或非芳香族的基团，例如4～7元单环式、7～11元双环式、或者10～15元三环式的环体系，该体系在至少一个含有碳原子的环中有至少一个杂原子。含有杂原子的杂环基团的每个环都可以有1个、2个或3个从氮原子、氧原子和硫原子中选择的杂原子，其中，该氮和硫杂原子也可以任选地进行氧化，而且该氮杂原子也可以任选地进行季铵化。该杂环基团可以连接在任何一个杂原子或碳原子上。
单环式杂环基团的实例包括吡咯烷基、吡咯基、吲哚基、吡唑基、氧杂环丁基、吡唑啉基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、噁唑基、噁唑烷基、异噁唑啉基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、噻唑烷基、异噻唑基、异噻唑烷基、呋喃基、四氢呋喃基、噻吩基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂基、氮杂基、4-哌啶酮基、吡啶基、N-氧代吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、四氢噻喃砜基、吗啉基、噻吗啉基、噻吗啉亚砜基、噻吗啉砜基、1，3-二氧戊环和四氢-1，1-二氧代噻吩基、二噁烷基、异噻唑烷基、thietanyl、硫杂丙环基、三嗪基、和***基、等。较好的杂环基基团包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、噁二唑基、噻吩基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基等。
双环式杂环基实例包括苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、奎宁环基、喹啉基、N-氧化喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、中氮茚基、苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基(例如呋喃并[2，3-c]吡啶基、呋喃并[3，2-b]吡啶基、或呋喃并[2，3-b]吡啶基)、咪唑并吡啶基(例如咪唑并[4，5-b]吡啶基或咪唑并[4，5-c]吡啶基)、二氢异吲哚基、二氢喹唑啉基(例如3，4-二氢-4-氧代喹唑啉基)、苯并异噻唑基、苯并异噁唑基、苯并二嗪基、苯并呋咱基、苯并噻喃基、苯并***基、苯并吡唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噻喃基、二氢苯并噻喃砜基、二氢苯并吡喃基、二氢吲哚基、异色烷基、异二氢吲哚基、1，5-二氮杂萘基、2，3-二氮杂萘基、胡椒基、嘌呤基、吡啶并吡啶基、喹唑啉基、四氢喹啉基、噻吩并呋喃基、噻吩并吡啶基、噻吩并噻吩基等。
“有取代的杂环基”系指有1～4个取代基取代的杂环基。取代基实例包括一个或多个如上所述烷基基团，或者一个或多个作为烷基取代基的以上所述基团。有取代的杂环基可以有一个单氧代基取代，给出例如4-氧代-1H-喹啉基。有取代的杂环基还可以有一个有取代芳基或第二个有取代杂环基取代，给出例如4-苯基咪唑-1-基或4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基。
下列有取代的杂环基基团是特别好的：
本发明的化合物是如以上所列举的式I化合物，以及如所显示的这些化合物的任何立体异构形式。所述特定立体异构体是从以上所列举的和本文中作为实例说明的较好合成方法得到的那些异构体；然而，通过改良PKS的表达体系、或通过改变二酮化合物(diketide)的手性、或通过合成化学转化，也可以制备其它立体异构体。在像Ra和R13这样的取代基中，可以存在另外的手性中心。这些立体异构体可以作为混合物给药，也可以像技术上已知的那样分离和利用个体的立体异构体。
这些化合物由于其新型结构而可望具有对革兰阳性菌、革兰阴性菌、和厌氧菌的抗菌活性，而且预期可用来作为人类和动物中细菌感染治疗用广谱抗菌剂。这些化合物尤其可望对金黄色酿脓葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、酿脓链球菌、肠球菌、粘膜炎莫拉克斯菌和流感嗜血杆菌有抗菌活性。这些化合物尤其可望可用于治疗社区获得性肺炎、上下呼吸道感染、皮肤和软组织感染、脑膜炎、医院获得性肺部感染、以及骨骼和关节感染。
本发明中也包括的是可用来作为本发明化合物生产用中间体的化合物。这样的中间体化合物包括下式所示化合物：式中，X、R6和R13同以上所述，R2是氢或羟基保护基例如乙酰基、苯甲酰基、或三甲基甲硅烷基。本发明范围内包括的其它中间体是下式所示化合物：式中，X、R6和R13同以上所述，R2是氢或羟基保护基例如乙酰基、苯甲酰基、或三甲基甲硅烷基。
                      详细说明
较好的化合物是式I所示化合物，式中：
X是H或F；
R2同以上所述，
R6选自H和(C1-C8)烷氧基；
R13选自H、(C1-C8)烷基、1-链烯基(C2-C8)(尤其乙烯基)、1-炔基(C2-C8)、卤烷基、和-CH2-R″，式中R″选自H、(C1-C8)烷基、卤烷基、1-链烯基(C2-C8)、1-炔基(C2-C8)、苯基、和(C1-C8)烷基苯基(例如苄基和苯乙基)；先决条件是R13不能是乙基；
R选自H、芳基、有取代的芳基、杂环基、有取代的杂环基、环烷基、C1-C8烷基和C1-C8链烯基，也可以有一个或多个选自下列一组的取代基取代：芳基、有取代的芳基、杂环基、有取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基；
以及其医药上可接受的盐、酯和药物前体形式。
R的尤其好的基团包括H、苯基、C1-C8烷基或C1-C8链烯基，也可以有一个或多个选自下列一组的取代基取代：苯基、羟基、和下列有取代的杂环基：
Figure A0080908700181
另一组较好的化合物是式I所示化合物，式中：
X是H或F，
R2同以上所述，
R6是O-Ra，式中Ra是有取代或无取代的烷基(C1-C10)、有取代或无取代的链烯基(C2-C10)、或者有取代或无取代的炔基(C2-C10)；
R13选自H、(C1-C8)烷基、1-链烯基(C2-C8)(尤其乙烯基)、1-炔基(C2-C8)、卤烷基、和-CH2-R″，式中R″选自H、(C1-C8)烷基、卤烷基、1-链烯基(C2-C8)、1-炔基(C2-C8)、苯基、和(C1-C8)烷基苯基(例如苄基和苯乙基)；先决条件是R13不能是乙基；
R是H；
及其医药上可接受的盐、酯和药物前体形式。
Ra的尤其好的基团包括也可以有取代的3-(喹啉-3-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-(喹啉-3-基)丙-2-炔基、也可以有取代的3-(喹啉-6-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-(喹啉-6-基)丙-2-炔基、也可以有取代的3-(喹啉-7-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-苯基丙-2-烯基、也可以有取代的3-(萘-1-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-(萘-1-基)丙-2-炔基、也可以有取代的3-(萘-2-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-(萘-2-基)丙-2-炔基、也可以有取代的5-苯基戊-4-烯-2-炔基、也可以有取代的3-(呋喃-2-基)丙-2-炔基、也可以有取代的3-(噻吩-2-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-(咔唑-3-基)丙-2-烯基、和也可以有取代的3-(喹喔啉-6-基)丙-2-烯基。
本发明的较好化合物可以按照以下反应方案制备：方案1
Figure A0080908700191
方案1(续)
Figure A0080908700201
方案2：本发明较好化合物的合成，式中ORa＝(C1-C8)烷氧基
Figure A0080908700211
方案3：本发明较好化合物的合成，式中Ra＝有取代或无取代的烷基(C1-C10)
有取代或无取代的链烯基(C2-C10)、或者有取代或无取代的炔基(C2-C10)
Figure A0080908700221
式中R6为氢的本发明的较好化合物可以按照以下反应方案制备：方案4方案4(续)
Figure A0080908700241
起始大环内酯中间体4和5可以用美国专利5,672,491中所述的方法制备，该专利列为本申请的参考文献。在一种实施方案中，改性的红霉素中间体4和5可以用一种方法制备，其中，将一种适当硫代酯diketide基质提供给6-脱氧红酮酸内酯B合成酶(DEBS)，该酶不能作用于其天然基质(丙酰基CoA)，因为DEBS的组件1的酮合成酶畴发生了突变。这种重组体DEBS可以表达于能天然产生红霉素的微生物赤糖多孢菌(Saccharopolyspora erythraea)中，也可以用质粒把整个基因簇***一种适用宿主中，例如天蓝链霉菌(S.coelicolor)(Jacobsen等人，Science 277：367-369(1997))或青紫链霉菌(S.lividans)，较好的是已进行改性而删除了其内源放线菌紫素聚酮化合物合成机理的天蓝链霉菌或青紫链霉菌。适用的宿主应是天蓝链霉菌CH999/pJRJ2，它表达了一种有一个失活组件1酮合成酶的突变体6-DEB合成酶。
WO 97/02358中描述的一种无细胞***也可以通过以重组体方式产生相关PKS蛋白质并进行其分泌或溶解含有该蛋白质的细胞来运用。一个典型的无细胞***应包括适当PKS、NADPH和适当缓冲剂以及聚酮化合物催化合成所需要的基质。
进而，还可以向除赤糖多孢菌的6-DEB合成酶外的PKS酶提供适当硫代酯diketide基质。其它PKS酶包括USSN 60/158305中描述的巨大霉小单孢菌(Micromonospora megalomicea)的6-DEB合成酶及其KS1°衍生物，PCT申请No.US 99/24478中描述的竹桃内酯PKS及其KS1°衍生物，和PCT公开No.WO 99/61599中描述的narbonolidePKS及其KS1°衍生物，这些全部列为本文参考文献。
对于那些其中R13为甲基的大环内酯中间体4和5来说，无需diketide进料，因为所希望的糖苷配基可以由如本文中进一步描述的重组体宿主细胞天蓝链霉菌CH999/pCK7产生。
然后，这样制备、得到的糖苷配基添加到赤糖多孢菌的发酵液体培养基中，它们因所采用的菌株而异，用化学法在3位和5位上糖基化、在C-12上羟基化、也可以在6位上羟基化。
本发明的改性红霉素，除C-13的的改性外，还在6位上含有一个羟基，除非-OH被H或如以上所述的ORa所取代。为了最终构建式中6位为ORa的式I化合物，给式(4)化合物在两个葡糖残基的羟基上提供保护基(方案1)。这样的保护是在一种质子惰性溶剂中用适当保护试剂例如乙酸酐、苯甲酸酐、氯甲酸苄酯、六甲基二硅氮烷、或三烷基甲硅烷基氯进行的。质子惰性溶剂包括例如二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)等。也可以使用混合物。式(4)中两个糖羟基的保护可以同时进行，也可以先后进行。
除保护两个葡糖残基的2′和4″羟基基团外，该大环内酯环的9位酮基基团也必须予以保护。典型地说，这是通过把该酮基转化成衍生化的肟来进行的。式＝NOR中R的特别好实施方案包括无取代或有取代的烷基(1～12C)，有取代或无取代的芳基(6～10C)、烷基(1～12C)，有取代或无取代的杂芳基(6～10C)、烷基(1～12C)、和杂烷基(例如式CR′2OR的取代基，其中，每个R′除独立地像以上列举的R那样实施外还可以与另一个一起形成一个环烷基环(3～12C))。一种较好的衍生化的肟是式＝NOR，式中R是异丙氧基环己基。
有了受保护的9-酮基和2′与4″羟基，就有可能通过在碱的存在下与一种烷基化剂反应而使式(8)化合物中的6-羟基烷基化。烷基化剂包括烷基卤化物和磺酸酯。例如，该烷基化剂可以包括甲苯磺酸甲酯、2-氟乙基溴、肉桂基溴、巴豆基溴、烯丙基溴、炔丙基溴等。该烷基化是在碱例如氢氧化钾、氢化钠、异丙醇钾、叔丁醇钾、和一种质子惰性溶剂的存在下进行的。
烷基化剂的选择将取决于要纳入的取代基Ra的性质。如以上所列举的，Ra可以是有取代或无取代的烷基(1～10C)、有取代或无取代的链烯基(2～10C)、或者有取代或无取代的炔基(2～10C)。特别好的是无取代的烷基、链烯基、或炔基，或者这些的有取代形式，其中该取代基包括一个或多个卤素、羟基、烷氧基(1～6C)、氧代基、SO2R(1～6C)、N3、CN、和NR2，式中R是H、有取代或无取代的烷基(包括环烷基)(1～12C)、有取代或无取代的链烯基(包括环烯基)(2～12C)、炔基(包括环炔基)(2～12C)、有取代或无取代的芳基(6～10C)、包括上述的杂环形式。
特别好的是甲基、烯丙基和乙基。
一旦6-羟基的烷基化完成，就可以使糖残基和大环内酯环脱保护。糖苷片段的脱保护是像Green，T.W.等人在Protective Groups inOrganic Synthesis(有机合成中的保护基)中所述的那样(见下文)进行的。类似的条件导致衍生化的肟转化成＝NOH。如果未衍生化的肟的生成不与脱保护同时发生，则向肟的转化可单独进行。
然后，可以用技术上已知的标准方法将肟脱除并转化成酮基基团。脱肟化剂包括无机硫氧化合物，例如亚硫酸氢钠、焦硫酸钠、硫代硫酸钠等。在这种情况下，使用质子溶剂例如水、甲醇、乙醇、异丙醇、三甲基甲硅烷醇、和这些的混合物。一般地说，该脱肟反应是在一种有机酸的存在下进行的。
在该工艺中的这一点上或稍后，可以进一步操纵在该6-羟基上引进的基团。方便的是，该初始取代可以提供一个6-O-烯丙基，即O-CH2CH＝CH2，此基团可以通过还原进一步衍生化而给出6-O丙基化合物，或用四氧化锇处理而提供2，3-二羟基丙基化合物，后者还可以在每个氧原子上进一步酯化。该O-烯丙基衍生物也可以在一种质子惰性溶剂中用间氯过氧苯甲酸氧化而提供过氧化合物，后者可以用胺或含氮杂芳基化合物开环而提供有含氮侧链的化合物，也可以在Wacker条件下氧化而提供取代基O-CH2-C(O)-CH3，还可以臭氧化而提供醛。然后，这种醛可以转化成肟或者与一种适用胺反应并在一种硼氢化物还原剂的存在下还原而提供一种胺。该肟也可以通过在一种质子惰性溶剂中与一种脱水剂反应而转化成一种腈。该O-烯丙基衍生物也可以在Heck条件下(Pd(II)或Pd(O)，膦和胺或无机碱)与一种芳基卤反应而提供一种3-芳基丙-2-烯基衍生物(方案3)。然后，这种衍生物可以用氢和钯/炭还原而提供一种3-芳基丙基衍生物。如果初始取代基Ra是一种2-丙炔，则可以采用类似的反应来提供侧链上的改变，其中包括芳基化。
为了通过先脱除克拉定糖片段而把式(11)化合物转化成式(12)化合物，用中等酸水溶液或用脱糖基化酶处理式(11)化合物(方案1)。适用的酸包括盐酸、硫酸、氯乙酸、三氟乙酸等，在醇的存在下进行。反应时间在-10～35℃的温度典型地是0.5～24小时。如上所述剩余糖的2′-羟基保护之后，用一种改进的Swern氧化程序使该大环内酯环的3位上所得到的羟基氧化成酮。在这种程序中，使用一种氧化剂例如N-氯琥珀酰亚胺-二甲硫醚或一种碳化二亚胺-二甲基亚砜。典型地说，在-10～25℃，把式(13)化合物添加到一种预先形成的N-氯琥珀酰亚胺与二甲硫醚络合物的一种氯化溶剂例如二氯甲烷溶液中。搅拌0.5～4小时后，添加一种叔胺例如三乙胺，以产生对应的酮。
然后，可以用如方案1中所说明的一种两步法从中间体(14)制备中间体(16)。首先，通过在一种有机碱例如吡啶的存在下与一种烷基或芳基磺酰氯例如甲磺酰氯反应，使11-羟基优先转化成一种离去基团例如甲磺酸根。在下一步中，通过在一种适用溶剂例如丙酮中用二氮杂双环十一烷处理，使该离去基团消除而给出10-11双键。
为了使该大环内酯在2位上卤化(使X＝H转化成卤素)，用一种碱和一种亲电卤化试剂例如过溴化吡啶鎓或N-氟苯磺酸处理式(16)化合物。
按照方案2，中间体(18)与氢化钠和1，1′-羰基二咪唑反应，产生咪唑中间体(19)。然后，中间体(19)在二甲基甲酰胺中在约25～130℃与有适当取代的胺反应，然后通过用甲醇处理使羟基保护基脱除，得到最终化合物I。
以类似的方式(方案3)，中间体(20)可以通过类似咪唑中间体与氨水的反应转化成无取代的11，12-环状氨基甲酸酯中间体(21)。如早些时候提到的，6-位取代基可以在该合成序列的稍后阶段操作，而且这一点在方案3中有说明，其中，6-O-烯丙基衍生物与一种芳基卤在Heck条件下(Pd(II)或Pd(O)，膦和胺或无机碱)反应，提供一种3-芳基丙-2-烯基衍生物。2′-羟基基团的随后脱保护，给出最终化合物I。
也要说明的是，R6为氢的本发明化合物可以容易地从发酵衍生的6-脱氧-13-有取代的红霉素A、B、C、和D的混合物中得到。可以利用一系列如上所述的类似反应进行这种转化(方案4)。
本发明进一步提供温血动物中治疗细菌感染或增强其它抗菌剂活性的方法，该方法包含向该动物给药本发明化合物本身或其与一种稀释剂的掺合物或其按照本发明的药剂形式。
当这些化合物用于以上效用时，它们可以组合一种或多种医药上可接受载体例如溶剂、稀释剂等，而且可以以如下形式经口给药：例如片剂、胶囊剂、可分散粉剂、颗粒剂、或含有诸如约0.5％～5％悬浮剂的悬浮液剂、含有诸如约10～50％糖的糖浆剂、含有诸如约20％～50％乙醇的酏剂等，也可以以一种等渗介质中的无菌可注射溶液或含有诸如约0.5％～5％悬浮剂的悬浮液的形式非经肠给药。这些医药组合物可以含有诸如约0.5％～约90％有效成分并组合更通常的是5％～60％(重量)的载体。
局部施用组合物可以取液剂、霜剂或凝胶剂的形式，其中含有与皮肤病学上可接受载体掺合的、治疗有效浓度的本发明化合物。
在经口剂型组合物制备时，可以采用任何一种常用医药介质。固体载体包括淀粉、乳糖、磷酸氢二钙、微晶纤维素、蔗糖和高岭土，而液体载体包括无菌水、聚乙二醇、非离子型表面活性剂和食用油例如玉米油、花生油和芝麻油，只要适合于该有效成分的性质和所希望的特定给药形式即可。可以有利地包括医药组合物制备时惯常采用的辅药，例如矫味矫臭剂、着色剂、防腐剂、和抗氧剂例如维生素E、抗坏血酸、BHT和BHA。
从容易制备和给药的观点来看，较好的医药组合物是固体组合物，尤其片剂和硬灌装或软灌装胶囊剂。较好的是这些化合物的经口给药。
这些活性化合物也可以非经肠地或经腹膜内地给药。这些活性化合物作为游离碱或药理学上可接受盐的溶液或悬浮液可以用适当混合了一种表面活性剂例如羟丙基纤维素的水来制备。分散液剂也可以用甘油、液态聚乙二醇及其混合物或用油来制备。在通常的储存和使用条件下，这些制剂可以含有一种防腐剂以防止微生物生长。
适合于注射用途的医药形式包括无菌水基溶液剂或分散液剂，和用于当场制备无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末剂。在所有情况下，该剂型都必须是无菌的，而且必须在存在易注射性的程度上是流体的。它在制造和储存的条件下必须是稳定的，而且必须能抵御细菌和真菌等微生物的粘污作用。该载体可以是一种溶剂或分散介质，其中含有诸如水、乙醇、多醇(例如甘油、乙二醇和液态聚乙二醇)、其适用混合物、和植物油。
所采用的有效成分的有效剂量可能因所采用的特定化合物、给药方式和所治疗病症的严重性而异。然而，一般来说，当本发明化合物以约0.1mg/kg～约400mg/kg动物体重的日剂量、较好一天一次给药、或以一天2～4次的分剂量给药、或以缓释剂型给药时，得到令人满意的结果。对于大多数大型哺乳动物来说，总日剂量是约0.07g～7.0g、较好约100mg～1000mg。适合于内用的剂型包含与一种固体或液体医药上可接受载体充分混合的约100mg～500mg活性化合物。这种剂量治疗方案可以进行调整，以提供最佳治疗响应。例如，可以像治疗形势的严格要求所指出的那样，一天给药若干个分剂量，也可以将该剂量按比例减少。
以上所述医药组合物和药剂的生产是用技术上已知的任何方法进行的，例如，使有效成分与稀释剂混合而形成一种医药组合物(例如一种造粒物)，然后使该组合物成形为药剂(例如片剂)。
                       实施例
本发明的化合物可以利用通过涉及重组体宿主细胞和有机化学方法论的化学生物合成程序所产生的中间体来制备。这种化学生物合成程序的步骤一般性地描述如下，随后在所列举实施例中详细描述每个步骤。
在该方法的第一个一般步骤中，用一种重组体链霉菌宿主细胞的发酵，制备一种6-脱氧赤糖酸大环内酯B(6-dEB)衍生物化合物。
产生15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B和14，15-二脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的发酵需要给发酵细胞喂一种合成diketide中间体。这些合成diketide的制备在实施例1中描述。这些合成diketide是6-脱氧赤糖酸大环内酯B合成酶(DEBS)的底物，该酶由于DEBS的组件1中酮合成酶畴的突变而不能作用于其天然底物(丙酰CoA)。这种重组体DEBS是由天蓝链霉菌CH999中的质粒pJRJ2提供的。天蓝链霉菌CH999的描述见列为本文参考文献的美国专利No.5,672,491。天蓝链霉菌CH999的一种衍生物，即已进行基因改性以包括一个ptpA基因的天蓝链霉菌K39-02，在列为本文参考文献的美国专利申请序号09/181,833中有描述，而且也可以用于本目的。质粒pJRJ2对eryAI、eryAII、和eryAIII基因编码；该质粒中所含的eryAI基因含有KS1零突变。KS1零突变防止野生型基因产生的6-脱氧赤糖酸大环内酯B的生成，除非有外源底物提供。质粒pJRJ2和使用该质粒制备新型13-有取代的红霉素的工艺的描述见PCT公开No.99/03986和No.97/02358，以及美国专利申请序号：1996年7月5日提交的08/675,817；1997年7月17日提交的08/896,323；和1999年5月14日提交的09/311,756，这些专利每一份都列为本文参考文献。所提供的外源底物可以用下列专利中所述方法制备并包括其中所述化合物：PCT专利申请No.PCT/US00/02397和美国专利申请序号09/492,733，两者均由发明者G.Ashley等人在2000年1月27日提交，且两者均主张对1999年1月27日提交的美国专利申请序号60/117,384的优先权，其中每份专利都列为本文参考文献。除ery基因外的PKS基因也可以采用；适用的基因包括下列专利中所述的含KS1零突变的竹桃大环内酯和巨大霉素PKS基因：美国专利申请序号—1999年10月8日提交的60/158,305和1999年10月28日提交的09/428,517；以及1999年10月22日提交的PCT申请号US99/24478，其中每一份都列为本文参考文献。
产生14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的发酵不需要diketide进料，因为所希望的化合物是重组体宿主细胞天蓝链霉菌CH999/pCK7产生的。质粒pCK7的描述见美国专利No.5,672,491，而且包含DEBS基因。质粒pCK7的一种衍生物即pKOS011-26也可以使用。包含pKOS011-26和一个重组体ptpA基因的宿主细胞称为天蓝链霉菌27-26/pKOS011-26。这些宿主细胞同时产生6-脱氧赤糖酸大环内酯B和14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯，这是由于结合了丙酰基CoA和乙酰基CoA的缘故，两者都起到DEBS的底物的作用。
天蓝链霉菌CH999/pJRJ2和天蓝链霉菌CH999/pCK7的发酵在实施例2中描述。这种发酵产生的6-脱氧赤糖酸大环内酯产物的分离也在实施例2中描述。
然后，把分离的产物添加到赤糖多孢菌菌株的发酵液体培养基中，以制造本发明的其它有用中间体化合物。该赤糖多孢菌菌株催化生物合成并使糖残基附着到6-dEB衍生物化合物的3位和5位上。这些菌株也包含一种eryK基因产物，因此，能使该6-dEB衍生物化合物在12位上羟基化。这些菌株就是否产生功能性eryF基因产物而言有区别。若如此，则所产生的化合物也是在6位上羟基化的。若不然，则产生6-脱氧红霉素A衍生物。这些赤糖多孢菌发酵在实施例3中描述，一起描述的还有红霉素A衍生物化合物从发酵液体培养基中的分离。
然后，所分离的产物用来作为本发明其它中间体化合物化学合成中的中间体。对于包含6-羟基的本发明红霉素A衍生物化合物来说，实施例4～6、11和1 6描述了使这些化合物烷基化以制作本发明的6-O-烷基、6-O-烯丙基、和6-O-炔丙基中间体的工艺，如方案1〔中间体(8)→(11)〕中所述。
对于包含6-O-烷基基团的本发明红霉素A衍生物化合物来说，实施例7～9描述了本发明10，11-脱水化合物的制作工艺。这个反应序列在方案1中〔中间体(11)→(16)〕说明。实施例10描述了本发明2-卤代化合物的制作工艺。具体地说，如方案5中所述，式(26)化合物用一种碱和一种亲电卤化试剂例如过溴化吡啶鎓或N-氟苯磺酸处理。实施例12描述了从含有6-O-烯丙基基团的红霉素A衍生物脱除克拉定糖并使所得到的3-羟基基团氧化成酮的工艺〔方案1；中间体(11)→(14)〕。实施例13说明含有6-O-烯丙基基团的化合物向本发明化合物合成中若干种有用中间体的转化。实施例14描述了本发明化合物(I)的合成，式中R＝H、R2＝H、X＝H且R6＝O-烯丙基〔方案1中间体(14)→(17)和方案3中间体(20)→(I)〕。实施例15描述了含有6-O-烯丙基和11，12-环状氨基甲酸酯官能度的大环内酯经由Heck反应和随后德糖胺糖脱保护向本发明化合物(I)转化的工艺〔方案3中间体(21)→(I)〕。除了说明这些化合物烷基化成为6-O-炔丙基中间体外，实施例16进一步描述这些中间体向本发明化合物(I)转化的工艺。实施例17描述了6-O-炔丙基中间体经由Sonogashira反应向本发明化合物(I)的另一种基团转化的工艺。对于不包含6-羟基的本发明红霉素A衍生物化合物来说，实施例18～20描述了本发明10，11-脱水化合物的制作工艺。这些反应序列详见方案4和6。实施例21描述了1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-(4-氨基-2-丁烯)的合成工艺，该化合物是R＝
Figure A0080908700321
的本发明化合物合成时使用的一种胺。这个反应序列详见方案7。10，11-脱水化合物向本发明的氨基甲酸酯衍生物化合物转化的工艺在实施例22和23中有描述〔方案3中间体(18)→(I)〕。本发明氨基甲酸酯衍生物化合物(I)的合成中使用的胺要么是商业上可得的，要么可以像Denis等人在Bioorg.Med.Chem.Lett.9：3075-3080(1999)中所述的那样容易地制备。
                        实施例1
                Diketide硫代酯的制备
本实施例中描述用来喂养重组体链霉菌宿主细胞以制作15-甲基和14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B中间体化合物的N-乙酰基半胱胺硫代酯(NACS)制备时使用的工艺。以下所述合成方案在发明者G.Ashley、M.Burlingame和I.Chan-Kai的美国临时专利申请序号09/492,733中也有描述，该专利列为本文参考文献。
因此，用来制备15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B中间体的(2S，3R)-2-甲基-3-羟基己酸NACS(制备E)是从(4S)-N-〔(2S，3R)-2-甲基-3-羟基己酰基〕-4-苄基-2-噁唑烷酮(制备D)与N-乙酰基半胱胺(制备B)反应制备的。N-乙酰基半胱胺又是从N，S-二乙酰基半胱胺(制备A)制备的。(4S)-N-〔(2S，3R)-2-甲基-3-羟基己酰基〕-4-苄基-2-噁唑烷酮(制备D)是从(4S)-N-丙酰基-4-苄基-2-噁唑烷酮(丙酰基-Nox，制备C)制备的。
以类似方式，用来制备14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B中间体的(2S，3R)-2-甲基-3-羟基-4-戊烯酸NACS(制备G)是从(4S)-N-〔(2S，3R)-2-甲基-3-羟基-4-戊烯酰基〕-4-苄基-2-噁唑烷酮(制备F)与N-乙酰基半胱胺(制备B)反应制备的。(4S)-N-〔(2S，3R)-2-甲基-3-羟基-4-戊烯酰基〕-4-苄基-2-噁唑烷酮(制备F)是从(4S)-N-丙酰基-4-苄基-2-噁唑烷酮(丙酰基-Nox，制备C)制备的。
制备A：N，S-二乙酰基半胱胺的制备
把盐酸半胱胺(50.0g)添加到一个配备1个磁力搅拌棒，2个加料漏斗和1个pH电极的1升三口圆底烧瓶中。加水(300mL)，搅拌的溶液在冰上冷却。添加8N KOH把pH调整到8.0。把乙酸酐(125mL)置于一个加料漏斗中，而把8N KOH(350mL)置于另一个加料漏斗中。把乙酸酐滴加到该半胱胺溶液中，而8N KOH要添加得能使反应pH保持在8+/-1。乙酸酐添加完成后，用1N HCl把pH调整到7.0，并让该混合物在冰上搅拌75分钟。添加固体NaCl达到饱和，该溶液用每份400mL CH2Cl2萃取4次，有机萃取液合并，用MgSO4干燥。过滤、减压下浓缩。得到68.9g(97％产率)浅黄色油状物，于4℃静置时结晶。
制备B：N-乙酰基半胱胺的制备
N，S-二乙酰基半胱胺(42.64g)置于一个配备磁力搅拌器的2升圆底烧瓶中，并溶于1400mL水中、该烧瓶用N2吹扫，混合物用冰浴冷却。添加氢氧化钾(49.42g)，混合物在惰性气氛下在冰上搅拌2小时。用6N HCl把pH调整到7，添加固体NaCl达到饱和。混合物用每份500mL CH2Cl2萃取7次。有机萃取液合并，用MgSO4干燥、过滤、减压下浓缩，得到30.2g(96％产率)产品。此材料在临使用前蒸馏，沸点138～140℃/7mmHg。
制备C：(4S)-N-丙酰基-4-苄基-2-噁唑烷酮(丙酰基-Nox)的制备
配备一个500mL加料漏斗和一个搅拌棒的一个干燥、1升、三口圆底烧瓶加入20g(4S)-4-苄基-2-噁唑烷酮、盖上隔膜、用氮气冲刷。用套管添加无水THF(300mL)，得到的溶液用-78℃干冰/异丙醇浴冷却。加料漏斗用套管加入78mL正丁基锂(1.6M己烷溶液)，以一股慢流方式将其添加到反应中。经由注射器快速添加蒸馏过的丙酰氯(沸点77～79℃)8.0mL。反应液在干冰/异丙醇浴中搅拌30分钟。
让反应脱离冷浴，使之回升到＞0℃，并以50mL饱和NH4Cl水溶液终止反应。混合物用旋转蒸发器浓缩成一种浆状物。该浆状物用每份250mL***萃取三次。有机萃取液合并、用饱和NaHCO3水溶液和食盐水各50mL洗涤、用MgSO4干燥、过滤、浓缩，给出一种黄色油状物。该材料静置时结晶。该结晶用冷(-20℃)己烷研制一次，给出21.0g(80％产率)白色结晶材料，
m.p.41-43℃.APCI-MS：m/z＝234(MH+)，178，117.1H-NMR(360MHz，CDCl3)：7.2-7.4(5H，m)；4.67(1H，m，H4)；4.14-4.22(2H，m，H5)；3.30(1H，dd，J＝3,13Hz，苄基)；2.89-3.03(2H，m，H2’)；2.77(1H，dd，J＝9，13，苄基)；1.20(3H，t，J＝7Hz，H2’).
制备D：(4S)-N-[(2S，3R)-2-甲基-3-羟基己酰基]-4-苄基-2-噁唑烷酮的制备
配备一个500mL加料漏斗、一个低温温度计、和一个搅拌棒的一个干燥、2升、三口圆底烧瓶中加入19.84g N-丙酰基噁唑烷酮、盖上隔膜、用氮气冲刷。用套管添加无水二氯甲烷(100mL)，得到的溶液用干冰/异丙醇浴冷却到-65℃。用套管向加料漏斗中加入100mL三氟甲磺酸二丁基硼(1.0M二氯甲烷溶液)，以一股慢流方式添加到反应中。用注射器滴加三乙胺(15.6mL)，使反应温度保持在-10℃以下。然后把反应物转移到冰浴上，在0℃搅拌30分钟。在这段时间之后，再将反应物放回到干冰/异丙醇浴上使之冷却到-65℃。用注射器快速添加丁醛(8.6mL)，反应物搅拌30分钟。
将反应物转移到冰浴上，向加料漏斗中加入100mL 1M pH7.0磷酸盐水溶液(该磷酸盐溶液包含等摩尔量的磷酸二氢钾和磷酸氢二钾)。该磷酸盐溶液尽可能快地添加，同时使反应温度保持在10℃以下。然后，向加料漏斗中加入300mL甲醇，并在使反应温度保持在10℃以下的同时尽可能快地将其添加。最后，向加料漏斗中加入300mL的甲醇∶30％过氧化氢＝2∶1混合物。滴加此混合物以确保温度保持在10℃以下。添加完成后，反应物搅拌1小时。然后用旋转蒸发器脱除溶剂，直至剩下一种浆状物。该浆状物用每份500mL***萃取4次。合并有机萃取液，用饱和碳酸氢钠水溶液和食盐水各250mL洗涤。然后，该萃取液用MgSO4干燥、过滤、浓缩，给出一种淡黄色油状物。然后，该材料用SiO2色谱法精制、以己烷∶乙酸乙酯＝2∶1洗脱(产品Rf＝0.4)，给出22.0g(85％产率)无色油状标题化合物。
APCI-MS：m/z 306(MH+)；1H-NMR(360MHz，CDCl3)：7.2-7.4(5H，m，苯基)；4.71(1H，m，H4)；4.17-4.25(2H，m，H5)；3.96(1H，m，H3’)；3.77(1H，dq，J＝2.5，7Hz，H2’)；3.26(1H，dd，J＝4，13Hz，苄基)；2.79(1H，dd，J＝9，13Hz，苄基)；1.5-1.6(2H，m，H4’)；1.3-1.5(2H，m，H5’)；1.27(3H，d，J＝7Hz，2’-Me)；0.94(3H，tJ＝7Hz，H6’).
制备E：(2S，3R)-2-甲基-3-羟基己酸N-乙酰基半胱胺硫代酯的制备
N-乙酰半胱胺在130℃/7mmHg蒸馏，给出一种在室温下无色的液体。配备一个500mL加料漏斗和一个搅拌棒的一个干燥、1升、三口圆底烧瓶盖上隔膜、用氮气中刷。然后用注射器向烧瓶中加入10.7mLN-乙酰基半胱胺，用套管加入400mL无水THF。混合物用MeOH/冰浴冷却。用注射器滴加丁基锂(64mL 1.6M己烷溶液)，导致生成一种白色沉淀物。搅拌30分钟后，用注射器滴加三甲基铝(51mL 2.0M己烷溶液)。三甲基铝添加后反应物变得清澈，再搅拌30分钟。在此期间，把20.5g(0.068mol)(4S)-N-[(2S，3R)-2-甲基-3-羟基己酰基]-4-苄基-2-
Figure A0080908700361
唑烷酮置于氮气层之下并溶于100mL无水THF中；然后，此溶液用套管以一股慢流转移到该反应中。得到的反应混合物变成黄绿色，搅拌1小时。当用薄层色谱分析法再也看不到起始原料时(约1小时)，反应就结束了。
反应物用足以给出一种用pH试纸测定时中性的反应物的饱和草酸(约90mL)处理。然后用旋转蒸发器脱除溶剂，给出一种白色浆状物。该浆状物用每份250mL***萃取6次。有机萃取液合并、用食盐水洗涤、用MgSO4干燥、过滤、浓缩、给出一种淡黄色油状物。该硫代酯产物用SiO2闪急色谱法精制，以己烷∶EtOAc＝1∶1洗脱，直至4-苄基-2- 唑烷酮洗脱。此时，将溶剂体系切换成100％EtOAc，以给出diketide硫代酯纯级分。这些产品级分合并、浓缩，给出14.9g(89％产率)标题化合物。此化合物就是实施例2中的丙基diketide硫代酯。
APCI-MS：m/z 248(MH+)；1H-NMR(360MHz，CDCl3)：5.8(br s，1H)；3.94(dt，1H)，3.46(m，2H)，3.03(dt，2H)，2.71(dq，1H)，1.97(s，3H)，1.50(m，2H)，1.37(m，2H)，1.21(d，3H)，0.94(t，3H).
制备F：(4S)N-[(2S，3R)-2-甲基-3-羟基-4-戊烯酰基]-4-苄基-2-
Figure A0080908700363
唑烷酮的制备
一个配备一个500mL加料漏斗、一个低温温度计、和一个搅拌棒的干燥、2升、三口圆底烧瓶中加入20.0g丙酰基 唑烷酮A、盖上隔膜、用氮气冲刷。添加无水二氯甲烷(100mL)，得到的溶液用甲醇/冰浴冷却到-15℃。经由加料漏斗以一股慢流方式以能使反应温度保持在3℃以下的速度添加三氟甲磺酸二丁基硼(100mL 1.0M二氯甲烷溶液)。用注射器，再次以能使内部温度保持在3℃以下的速度，滴加二异丙基乙胺(17.9mL)。然后用干冰/异丙醇浴将反应物冷却到-65℃。用注射器以5分钟时间添加丙烯醛。添加完成后，将反应物搅拌30分钟。
然后，把反应物转移到冰浴上，加料漏斗中加入120mL(0.1mol)1M pH7.0磷酸盐水溶液(该磷酸盐溶液包含等摩尔量的一代和二代磷酸盐)。该磷酸盐溶液在使反应温度保持在10℃以下的同时尽可能快地添加。然后，该加料漏斗中加入400mL甲醇，并在使反应温度保持在10℃以下的同时尽可能快地添加。最后，向加料漏斗中加入400mL甲醇∶30％过氧化氢＝2∶1混合液，最初以滴加方式添加，以使温度保持在10℃以下。反应物搅拌1小时。用旋转蒸发器脱除溶剂，留下一种浆状物。该浆状物用每份500mL***萃取4次。有机萃取液合并，用饱和碳酸氢钠和食盐水各250mL洗涤，然后用MgSO4干燥、过滤、浓缩，给出一种微黄色油状物。用己烷研制时诱发结晶。添加己烷的***重结晶得到13.67g(55％产率)产品。
  1H-NMR(360MHz，CDCl3)：7.2-7.4(m，5H)；5.86(ddd，1H)，5.35(dt，1H)，5.22(dt，1H)，4.71(m，1H)，4.51(m，1H)，4.21(m，2H)，3.89(dq，1H)，3.26(dd，1H)，2.80(dd，1H)，1.25(d，3H).
制备G：(2S，3R)-2-甲基-3-羟基-4-戊烯酸N-乙酰基半胱胺硫代酯
N-乙酰基半胱胺于130℃/7mmHg蒸馏，给出一种在室温无色的液体。一个配备500mL加料漏斗和搅拌棒的干燥、1升、三口圆底烧瓶盖上隔膜、用氮气冲刷。然后，用注射器向该烧瓶中加7.5mL N-乙酰基半胱胺、用套管加入500mL无水THF。然后，该反应物用MeOH/冰浴冷却。用注射器滴加丁基锂(44mL 1.6M己烷溶液)。当添加n-BuLi时形成一种白色沉淀。在搅拌30分钟之后，用注射器滴加35.5mL(0.071mol)三甲基铝(2.0M己烷溶液)。该反应物在三甲基铝添加后变得清澈，进一步搅拌30分钟。来自制备F的(4S)N-[(2S，3R)-2-甲基-3-羟基-4-戊烯酰基]-4-苄基-2-噁唑烷酮(13.6g)置于氮气层之下、溶于50mL无水THF中。然后此溶液用套管以慢流方式转移到反应物中。所得到的反应混合物变成黄绿色，再搅拌1小时。当用薄层色谱法再也看不到起始原料时(约30分钟)，就判断反应完成。
添加足以给出一种用pH试纸检查时为中性反应物的饱和草酸(约60mL)。然后用旋转蒸发器脱除溶剂，给出一种白色浆状物。该浆状物用每份250mL***萃取6次。有机萃取液合并、用食盐水洗涤、用MgSO4干燥、过滤、浓缩，给出一种微黄色油状物。然后，用SiO2闪急色谱法精制该硫代酯。色谱柱以己烷∶乙酸乙酯＝1∶1运行，直至噁唑烷酮洗脱。此时，将洗脱剂切换成100％乙酸乙酯，给出产品的纯级分。这些级分合并、浓缩，给出7.7g(71％产率)标题化合物产品。此产品在实施例1中称为乙烯基diketide硫代酯。
  1H-NMR(360MHz，CDCl3)：5.82(ddd，1H)，5.78(br s，1H)，5.32(dt，1H)，5.21(dt，1H)，4.47(m，1H)，3.45(m，2H)，3.04(m，2H)，2.81(dq，1H)，1.96(s，3H)，1.22(d，3H).
                      实施例2
                赤糖酸大环内酯的制备
制备A：14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的制备
天蓝链霉菌CH999/pJRJ2的描述见美国专利申请序号：1997年7月17日提交的08/896,323和1996年7月5日提交的08/675,817，其中每一篇都列为本文参考文献。质粒pJRJ2对DEBS的突变形式进行编码。其中组件1的酮合成酶畴(KS1)已经通过致突变失活(KS1°)。喂养了按照实施例1制备的乙烯基diketide硫代酯的、包含这种质粒的天蓝链霉菌菌株产生14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B。
对天蓝链霉菌CH999/pJRJ2的20种分离物测试了它们使乙烯基diketide硫代酯转化成14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的能力。一种冷冻孢子储备液，分配在含有50mg/L硫链丝菌肽的R2YE琼脂平皿上，在30℃生长5天，得到一些单一菌落。每升R2YE培养基含有103g蔗糖，10g葡萄糖、10.12g MgCl2·6H2O、0.25g K2SO4、0.1g酪蛋白氨基酸、5g酵母提取物、5.73g TES(N-三[羟甲基]甲基-2-氨基乙磺酸，购自Sigma公司)缓冲剂、22g琼脂(当包括时)、和2mL痕量元素溶液。高压灭菌后，添加10mL 5g/L(0.5％)KH2PO4、8mL 2.5M CaCl2·2H2O、15mL 200g/L(20％)L-脯氨酸、和7mL 1NNaOH。每升痕量元素溶液含有1mg ZnSO4、1mg FeSO4、1mgMnCl2、和1mg CaCl2。当培养物在pH受控生物反应器中生长时，从R2YE培养基中去掉TES。
把这些菌落贴到放大用次级平皿上，然后在含有50mg/L硫链丝菌肽的新鲜R2YE琼脂平皿上展开，创造菌丝体菌苔。天蓝链霉菌CH999/pJRJ2向这些菌苔的Diketide供养像以上所述那样进行(见以上引用的专利申请)。这些培养物中产生的14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B是通过让培养物在其上生长的琼脂的匀化和乙酸乙酯萃取来分离的。这些萃取物的逆相HPLC/MS分析是用一台配备Beckman Ultrasphere ODS柱(4.6mm×150mm)的Beckman 127s溶剂组件和以水对乙腈的梯度作为移动相执行的。14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B是用质谱法(PESciex API100LC)鉴别、用一个蒸发性光散射检测器(Alltech 500ELSD)定量的。重新测试在平皿上繁衍的和作为冷冻孢子悬浮液的高产分离物，以确定它们在储存期间的稳定性。
在测试其使乙烯基diketide硫代酯转化成14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的能力的天蓝链霉菌CH999/pJRJ2的20种分离物中，5种分离物是非生产者，1种分离物产生＞6mg/L产品。该高产分离物在琼脂培养基上(每～10天增加一倍)和作为冷冻孢子储备液都能繁衍。该菌株的再分离，当该菌株作为一种冷冻孢子储备液储存时，导致可观的各分离物之间差异。当该菌株在室温下储存于R2YE琼脂上时，没有观察到这种可变性。以前已观察到一个菌株在作为冷冻孢子悬浮液储存期间的生产能力分异，尽管其发生的机理是未知的。
该菌株在琼脂培养基上和作为冷冻菌丝悬浮液的繁衍仍保留一种分离物的生产能力。因此，通过把大约10mm2菌丝斑接种到50mL含有50μg/mL硫链丝菌肽的R2YE中制备了一个细胞库，并在一个250mL有挡板烧瓶中以200～250rpm/28～30℃振荡48小时(25NewBrunswick系列蹄式振荡机)。细胞用显微镜检查，将25mL 90％甘油混合到该培养物中，每份1mL的等分样品用液氮冷冻、于-80℃储存。天蓝链霉菌和赤糖多孢菌这两种菌株的储存均采用这一程序。
14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B可以在振荡烧瓶中生产。天蓝链霉菌CH999/pJRJ2的种子培养物是通过将1mL冷冻储备液添加到50mL含有50μg/mL硫链丝菌肽的R2YE和～1mL/L消泡剂B(Baker公司)中制成的。天蓝链霉菌K39-02/pJRJ2的种子培养物也可以含有50μg/mL阿泊拉霉素。该培养物以200～250rpm在28～30℃振荡48小时(25New Brunswick系列蹄式振荡机)。通过把10mL种子培养物接种到500mL含有50μg/mL硫链丝菌肽的SO1培养基(任选地，人们也可以使用无缓冲剂的R6培养基)。制成一种生产培养物。每升SO1培养基含有51.5g蔗糖、0.25g K2SO4、0.1g酪蛋白氨基酸、5g酵母提取物、5.73g TES缓冲剂、0.96g丙酸钠、和2mL痕量元素溶液。高压灭菌后，添加10mL 0.5％(5g/L)KH2PO4、8mL 2.5MCaCl2·6H2O、7.5mL 20％(200g/L)L-脯氨酸、和7mL 1N NaOH。当培养物在pH受控的生物反应器中生长时SO1培养基省略了TES。
R6培养基也用于生产培养物。每升R6培养基含有103g蔗糖、0.25g K2SO4、10.12g MgCl2·6H2O、0.1g酪蛋白氨基酸、5g酵母提取物、5.73g TES缓冲剂、0.96g丙酸钠、和2mL痕量元素溶液。高压灭菌后，添加10mL 0.5％KH2PO4、8mL 2.5M CaCl2·2H2O、15mL 20％L-脯氨酸，和7mL 1N NaOH。当培养物在pH受控的生物反应器中生长时R6培养基省略了TES。
该培养物以200～250rpm/28～30℃生长36～48小时。然后，向该培养物中补加4-戊炔酸(Fluka公司，25mg/L)和1mM乙烯基diketide硫代酯(3mL 4.67mg/mL diketide在10％DMSO(Sigma公司)中的溶液)，再生长另外4天。对于R6培养基中的diketide进料来说，diketide典型地是在培养后24～48小时当葡萄糖水平下降到0.5g/L或更低的时候添加的；可以分析葡萄糖浓度，以更确切地确定进料时间。通过用XAD树脂进行固相提取、用乙醇洗脱，从培养物中回收14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B。
为了14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的大规模制备，通过把1mL冷冻菌丝体接种到一个含有500mL R2YE、也可以含有50μg/mL阿泊拉霉素、50μg/mL硫链丝菌肽、和1mL/L消泡剂的2.8L有挡板烧瓶中并以150～200rpm/28～30℃振荡约2天(Innova落地式振荡机)，制作天蓝链霉菌K39-02/pJRJ2的一种种子培养物。准备一个10L搅拌罐生物反应器，加入10L R6培养基，在121℃高压灭菌30分钟，使之冷却，然后接种500mL(2％)种子培养物。
温度保持在30℃，由3个拉什顿桨叶以500～750rpm提供搅拌，以0.5～2L/分钟曝气，并通过自动添加1N NaOH或1N H2SO4把pH控制在7.0。监测葡萄糖消耗、溶解氧、pH、和细胞质量。当葡萄糖浓度降低到0.1g/L以下时，向该培养物中补加4-戊炔酸(25～50μg/mL)和2.5g乙烯基diketide硫代酯在50mL DMSO中的溶液。受控的葡萄糖进料使葡萄糖浓度保持在0～2g/L(目标为0.5g/L)。用HPLC/MS监测14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的效价，当达到最大效价时用离心分离法收集培养物。用一台BioLafitte 150L生物反应器，把这一程序放大到100L规模。
14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B用固相提取法精制。把发酵液体培养基冷却到4～15℃，添加乙醇(0.1L/L液体培养基)。该液体培养基用离心分离法澄清，以2～4mL/cm2，分钟的流量率添加到XAD-16树脂(Rohm & Haas公司)柱(1kg XAD/1g 14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B)中。吸附的树脂用2柱体积的15％(体积)乙醇水溶液洗涤，树脂上的14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B用丙酮洗脱，收集1/2柱体积的级分。含有14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的级分用薄层色谱法(乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)和HPLC/MS鉴别。
含有14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的丙酮级分合并在一起，在减压下脱除挥发分。达到的含水混合物用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液用饱和NaHCO3和食盐水溶液洗涤、用硫酸钠或硫酸镁干燥、过滤、减压下浓缩至干。粗材料用硅胶色谱法精制、用己烷和乙酸乙酯梯度淋洗。含有该产品的级分合并、浓缩成一种黄色油状物，后者自发结晶。用***-己烷重结晶给出纯粹的14，15-脱氢-6-脱氧赤糖酸大环内酯B。质谱显示
       [M+H]＝385.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：213.67(C9)，177.51(C1)，134.80(C14)，116.58(C15)，79.40(C3)，76.47(C5)，74.11(C13)，70.84(C11)，43.80(C2)，43.16(C10)，41.48(C12)，39.58(C8)，37.61(C7)，37.42(C4)，35.56(C6)，16.60(6Me)，14.55(2Me)，13.34(8Me)，9.20(12Me)，6.91(4Me)，6.30(10Me).
制备B：15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的制备
使用天蓝链霉菌K39-02/pJRJ2的一个高产分离物用摇瓶生产15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B。天蓝链霉菌K39-02/pJRJ2的种子培养物是通过将1mL冷冻储备液添加到50mL含有50μg/mL硫链丝菌肽(也可以含有阿泊拉霉素)的R2YE中制作的。该培养物以200～250rpm在28～30℃振荡36～48小时。通过把1mL种子培养物接种到50mL含有50μg/mL硫链丝菌肽(也可以含有阿泊拉霉素)的SO1或R6培养基中，制作了生产培养物。消泡剂以1mL/L添加。该培养物以200～250rpm/28～30℃生长36～48小时。该培养物补加4-戊炔酸(Fiuka，25～50mg/L)和1mM丙基diketide硫代酯(3mL 4.67mg/mLdiketide在10％DMSO(Sigma)中的溶液，)，又生长4～7天。当达到最高效价时用乙酸乙酯萃取法从该培养物中回收15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B。
为了15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的大规模制备，通过把1mL冷冻菌丝体接种到一个含有500mL R2YE的2.8L有挡板烧瓶中并以150～200rpm/28～30℃振荡2天，制作天蓝链霉菌K39-02/pJRJ2的种子培养物。准备一个10L搅拌罐生物反应器，加入10L SO1或R6培养基，在121℃高压灭菌30分钟，使之冷却，然后接种400～500mL种子培养物。
温度保持在28～30℃，由3个拉什顿桨叶以500～750rpm提供搅拌，以～1L/分钟曝气，并通过自动添加1N NaOH或1N H2SO4把pH控制在7.00。监测葡萄糖消耗、溶解氧、pH、和细胞质量。当葡萄糖浓度下降到0.1g/L以下时，该培养物补加4-戊炔酸(25μg/mL)和2.5g丙基diketide硫代酯在50mL DMSO中的溶液。受控的葡萄糖进料使葡萄糖浓度保持在～0.5g/L。用HPLC/MS监测15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的效价，当达到最大效价时用离心分离法收集该培养物。用一台BioLafitte 150L生物反应器，把这一程序放大到100L规模。
15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B用固相提取法精制。把发酵液体培养基冷却到4～15℃，添加乙醇(0.1L/L液体培养基)。该液体培养基用离心分离法澄清，以2～4mL/cm2，分钟的流量率加到XAD-16树脂(Rohm & Haas公司)柱(1kg XAD/1g15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B)中。吸附的树脂用2柱体积的15％(体积)乙醇水溶液洗涤，15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B用丙酮从树脂上洗脱，收集1/2柱体积级分。含有15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的级分用薄层色谱法(乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)和HPLC/MS鉴别。
含有15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的丙酮级分合并，在减压下脱除挥发分。所得到的含水混合物用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液用饱和NaHCO3和食盐水溶液洗涤，用硫酸钠或硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩至干。粗材料通过使用己烷和乙酸乙酯梯度淋洗的硅胶色谱法精制。含有该产品的级分合并、浓缩成一种黄色油状物，后者自发结晶。用***-己烷重结晶给出纯粹的15-甲基-6-脱氧赤糖酸大环内酯B。质谱显示[M+H]＝401。
制备C：14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的制备
列为本文参考文献的美国专利No.5,712,146描述了一种重组体宿主细胞天蓝链霉菌CH999/pCK7的制备。该专利报道，当该重组体菌株在R2YE培养基上生长时，该菌株产生6-脱氧赤糖酸大环内酯B和14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B(也称为8，8a-脱氧竹桃酸大环内酯)的混合物。一个相关菌株天蓝链霉菌27-26/pKOS011-26含有一个改性pCK7质粒和一个重组体ptpA基因。
天蓝链霉菌27-26/pKOS011-26的一个高产分离物用来在摇瓶中生产14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B。通过把1mL冷冻储备液添加到50mL含有50μg/mL硫链丝菌肽(也可以含有阿泊拉霉素)的R2YE中，制作了天蓝链霉菌27-26/pKOS011-26的一种种子培养物。该培养物以200～250rpm在28～30℃振荡36～48小时。通过把1mL种子培养物接种到50mL含有50μg/mL硫链丝菌肽(也可以含有阿泊拉霉素)的SO1培养基中，制作一种生产培养物。该培养物以200～250rpm/28～30℃生长36～48小时。该培养物补加4-戊炔酸(Fluka公司，25～50mg/L)，再生长4天。用乙酸乙酯萃取法从该培养物中回收14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B。
为了14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的大规模制备，通过把1mL冷冻菌丝体接种到一个含有500mL R2YE的2.8L有挡板烧瓶中并以150～200rpm/28～30℃振荡36～48小时，制作了天蓝链霉菌27-26/pKOS011-26的一种种子培养物。准备一个10L搅拌罐生物反应器，加入10L无葡萄糖的R2YE培养基，在121℃高压灭菌30分钟，使之冷却，接种400～500mL种子培养物。以1mL/L添加消泡剂。
温度保持在28～30℃，由3个拉什顿桨叶以500～750rpm提供搅拌，以～1L/分钟曝气，并通过自动添加1N NaOH或1N H2SO4把pH控制在7.00。监测葡萄糖消耗、溶解氧、pH、和细胞质量。受控的葡萄糖进料使葡萄糖浓度保持～0.5g/L。用HPLC/MS监测14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的效价，当达到最大效价时用离心分离法收集培养物。使用一台BioLafitte 150L生物反应器，把这一程序放大到100L规模。
14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B用固相提取法精制。把发酵液体培养基冷却到4～15℃，添加乙醇(0.1L/L液体培养基)。该液体培养基用离心分离法澄清，并以2～4mL/cm2分钟的流量率加到XAD-16树脂(Rohm & Haas)柱上(1kg XAD/1g 14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B)。吸附的树脂用2倍柱体积的15％(体积)乙醇水溶液洗涤，14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B用丙酮从树脂上洗脱，收集1/2柱体积级分。含有14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的级分用薄层色谱法(乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)和HPLC/MS鉴别。
含有14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B的级分合并，在减压下脱除挥发分。得到的含水混合物用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液用饱和NaHCO3和食盐水溶液洗涤、用硫酸钠或硫酸镁干燥、过滤、减压下浓缩至干。该粗材料通过使用SiO2柱以乙酸乙酯/己烷洗脱的闪急色谱法精制。用***-己烷的重结晶给出纯粹的14-去甲-6-脱氧赤糖酸大环内酯B。质谱法显示[M+H]＝373。
                    实施例3
                  红霉素的制备
实施例2制备A～C中产生的6-dEB衍生物化合物用赤糖多孢菌的重组体菌株转化成红霉素衍生物。为了生产兼备6-羟基和12-羟基的红霉素，所使用的赤糖多孢菌菌株是K40-67。这个菌株是通过用一个包含一个给一个失活KS1畴编码的突变eryA1序列的pWHM3-衍生质粒使一种能产生高水平红霉素A的赤糖多孢菌菌株转变来创造的。通过同源重组，使所得到的转化体不能产生6-脱氧赤糖酸大环内酯B。为了生产只有12-羟基的红霉素衍生物，所使用的赤糖多孢菌菌株是K39-07。这个菌株是通过eryF羟基酶基因的破裂而从菌株K40-67构建的。这两个菌株都在如以下所述的实质上类似条件下发酵。
发酵用10L(和150L)生物反应器进行。用每份1mL的冷冻赤糖多孢菌K40-67菌丝体给500mL R2YE培养基接种一种种子培养物。此培养物在一个2.8升有挡板费氏烧瓶中以150～200rpm/28～30℃振荡约48小时。准备一个10L搅拌罐生物反应器，加入10L R2YE培养基(对于150L发酵而言加入70L)，在121℃高压灭菌45分钟，使之冷却，然后接种200mL(对150L发酵而言接种1.4L)种子培养物。温度保持在28～30℃，由2个拉什顿桨叶以500～700rpm提供搅拌，以～1L/分钟曝气，通过自动添加1N NaOH或1N H2SO4把pH控制在7.20。通过以1mL/L添加消泡剂来抑制泡沫。对pH加以控制，以避免潜在的产品降解成烯醇醚和螺环缩酮。监测蔗糖消耗、葡萄糖释放、溶解氧、pH、和600nm吸光度(细胞质量)。24～36小时后，给该培养物进料300mg(对于150L发酵而言进料1.62g)按照本实施例制备A-C制备的6-dEB衍生物化合物溶于3mL(对于150L发酵而言15mL)100％乙醇中的溶液。发酵再继续～68～85小时，用离心分离法收集发酵液体培养基。用电喷MS分析法确定该发酵期间红霉素A、B、C、和D类似物的效价。
所产生的化合物用固相提取法精制。添加NaOH把发酵液体培养基调整到pH 8.0，使之冷却到4～15℃，添加乙醇(0.1L/L液体培养基)。该液体培养基用离心分离法澄清、以2～4mL/cm2·分钟的流量率加到XAD-16(Rohm & Haas公司)柱(1kg XAD/1g红霉素衍生物)中。吸附的树脂用2柱体积的15％(体积)乙醇水溶液洗涤，该红霉素衍生物用丙酮从树脂上洗脱下来，收集1/2柱体积级分。含有该红霉素衍生物的级分用薄层色谱法和HPLC/MS鉴别。
含有该红霉素衍生物的丙酮级分合并、在减压下脱除挥发分。所得到的含水混合物用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液用饱和NaHCO3和食盐水溶液洗涤、用硫酸钠或硫酸镁干燥、过滤、减压下浓缩至干。该粗材料用闪急色谱法(二氯甲烷/甲醇/三乙胺)精制。此材料用来作为以下实施例中所述化学衍生化程序的起始原料。通过使用离心式逆流分配(例如使用一台Ito蛇管行星式离心分离装置，如列为本文参考文献的WO 91/16334中所述)，就可以得到纯产品。
用这种方法论生产的化合物是：(i)14-去甲红霉素A；(ii)14，15-脱氢红霉素A；(iii)15-甲基红霉素A；(iv)14-去甲-6-脱氧红霉素A；(v)14，15-脱氢-6-脱氧红霉素A；和(vi)15-甲基-6-脱氧红霉素A。当用来制作3-脱克拉定糖-3-氧代衍生物时，红霉素A衍生物不与红霉素C衍生物分离；相反，使用A化合物和C化合物的混合物作为化学衍生化的起始原料。
                     实施例4
制备A：14-去甲红霉素A9-肟
14-去甲红霉素A(0.621g，80％纯度)、羟胺(0.5ml 50％水溶液)和乙酸(0.2ml)在异丙醇(2ml)中的溶液在50℃保持22小时。该溶液用氯仿/乙醇(3/2)萃取、用碳酸氢钠和食盐水洗涤、用MgSO4干燥。过滤和真空蒸发，给出一种粗产品(0.65g)，呈白色固体，直接用于下一步转化。
制备B：14-去甲红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟
向以上粗14-去甲红霉素A9-肟(0.65g)和1，1-二异丙氧基环己酮(0.95ml)的二氯甲烷(2ml)溶液中添加对甲苯磺酸吡啶瘆(PPTS)(0.333g)的二氯甲烷(2ml)溶液。搅拌过夜之后，该混合物萃取(氯仿/乙醇＝3∶2)、洗涤(NaHCO3·H2O，食盐水)、干燥(MgSO4)。过滤和真空蒸发后，用甲苯和异丙醇反复驱赶该粗产品，得到0.74g产品，直接用于下一步反应。
制备C：2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-14-去甲红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟
向14-去甲红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(0.74g)的二氯甲烷(6ml)溶液中添加三甲基甲硅烷基咪唑(0.33ml)和三甲基甲硅烷基氯(0.18ml)的二氯甲烷(2ml)0℃溶液。搅拌5分钟后，添加乙酸乙酯、洗涤(NaHCO3·H2O，食盐水)、和干燥(MgSO4)。硅胶闪急色谱法(己烷∶丙酮＝10∶1，1％三乙胺)给出白色固体状纯产品(0.50g)。质谱法表明[M+H+]＝1020。
制备D：2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-6-O-甲基-14-去甲红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟
2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-14-去甲红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(0.3g，0.29mmol)在二甲基亚砜/四氢呋喃(DMSO/THF)＝1∶1混合液(1.4ml)中的溶液用0.3ml 2M甲基溴的***溶液处理，并冷却到10℃。1M叔丁醇钾的THF溶液(0.6ml)和DMSO(0.6ml)的混合物用一台注射器泵用6小时时间添加。然后，该反应物用乙酸乙酯稀释、用饱和NaHCO3、食盐水洗涤、用MgSO4干燥。过滤和真空蒸发给出白色固体状产品(0.29g)。质谱法揭示[M+H+]＝1034。
制备E：6-O-甲基-14-去甲红霉素A9-肟
2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-6-O-甲基-14-去甲红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(0.29g)、乙酸(3.6ml)、乙腈(6ml)和水(3ml)的混合物在常温下搅拌4.5小时。该混合物用甲苯驱赶至干，给出一种白色固体状粗产品(0.24g)，未经进一步精制就直接用于下一步。
制备F：6-O-甲基-14-去甲红霉素A
6-O-甲基-14-去甲红霉素A9-肟(0.24g)、亚硫酸氢钠(0.45g，85％纯度)、水(3ml)、乙醇(3ml)和甲酸(0.07ml)的混合物在85℃保持8小时。该反应物用1N NaOH调整到pH8，用乙酸乙酯萃取。有机萃取物用食盐水洗涤、用MgSO4干燥、过滤、浓缩，给出一种白色固体状粗产品(0.2g)。质谱法揭示[M+H+]＝735。
                    实施例15
制备A：14.15-脱氢红霉素A9-肟
14，15-脱氢红霉素A(1.984g，47％纯度，1.2mmol)在6mL 2-丙醇中的悬浮液用1.97mL 50％羟胺水溶液处理，搅拌直至溶解。添加乙酸(0.62mL)，混合物在50℃搅拌25小时。当冷却到常温时，添加饱和NaHCO3，混合在真空下浓缩以脱除异丙醇。所得到的含水混合物以每次250mL CHCl3萃取3次。有机萃取液合并，用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤，然后用MgSO4干燥、过滤、浓缩，给出0.92g产品。
制备B：14，15-脱氢红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟
来自(A)的肟(0.92g)溶解于6.2mL CH2Cl2中，用1，1-二异丙氧基环己烷(1.23g)和对甲苯磺酸吡啶鎓(0.464g)在常温下处理15小时。该混合物用160mL CH2Cl2稀释，然后依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、蒸发，给出一种褐色糖浆状物。硅胶色谱法(从甲苯到甲苯/丙酮＝1∶1+1％Et3N的梯度淋洗)，得到0.998g产品。
制备C：2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-14，15-脱氢红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟
14，15-脱氢红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(998mg，9.96mmol)在11.25mL CH2Cl2中的溶液在惰性气体下用冰冷却，用氯三甲基甲硅烷(0.24mL)和1-三甲基甲硅烷基咪唑(0.44mL)的溶液处理。30分钟后，反应物用250mL乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3、水、和食盐水依次洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、蒸发，给出1.002g产品。
制备D：2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-6-O-甲基-14，15-脱氢红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟
2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-14，15-脱氢红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(1.00g，20.7mmol)在9.69mL四氢呋喃/二甲基亚砜＝1∶1混合物中的溶液冷却到10℃，在惰性气氛下用0.97mL 2.0M甲基溴的***溶液处理。慢慢添加二甲基亚砜(1.94mL)和1.0M叔丁醇钾的四氢呋喃溶液(1.94mL)的混合物。反应用薄层色谱法(硅胶，甲苯/丙酮＝10∶1)监测，在添加1.6摩尔当量的碱之后判断反应完成。反应物用200mL乙酸乙酯和70mL饱和NaHCO3稀释。该混合物转移到一个分液漏斗中，用850mL乙酸乙酯和280mL饱和NaHCO3稀释，然后依次用水和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、用硅藻土层过滤、蒸发，给出21.2g粗2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-6-O-甲基-14，15-脱氢红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟。此物未进一步精制就转入下一步。
制备E：6-O-甲基-14，15-脱氢红霉素A9-肟
2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-6-O-甲基-14，15-脱氢红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(1.0g)在9.8mL乙腈/水＝2∶1混合物中的溶液用5.3mL乙酸处理，在常温下搅拌8小时。混合物真空浓缩，然后在添加甲苯后反复浓缩，给出0.797g粗6-O-甲基-14，15-脱氢红霉素A9-肟。
制备F：6-O-甲基-14，15-脱氢红霉素A
6-O-甲基-14，15-脱氢红霉素A9-肟(0.797g)和亚硫酸氢钠(85％，1.02g)在7.5mL乙醇/水＝1∶1混合物中的溶液置于惰性气氛之下。滴加甲酸(0.186mL)，混合物在80℃搅拌3小时。在冷却到常温之后，反应物用6N NaOH调整到pH 10，用每次150mL乙酸乙酯萃取3次。有机萃取液合并，依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和蒸发，给出0.68g适于进一步转化的6-O-甲基-14，15-脱氢红霉素A。
                     实施例6
制备A：15-甲基红霉素A9-肟
15-甲基红霉素A(20.0g，85％纯度，22.6mmol)在40ml 2-丙醇中的悬浮液用20.5mL 50％羟胺水溶液处理，并搅拌直至溶解。添加乙酸(6.41mL)，混合物在50℃搅拌15小时。冷却到常温时，添加饱和NaHCO3，混合物真空浓缩以脱除异丙醇。所得到的含水混合物用每次250mL  CHCl3萃取3次。有机萃取液合并，用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤，然后用MgSO4干燥、过滤、浓缩，给出20.5g粗产品。LC/MS分析揭示，该产品是E肟和Z肟的94∶6混合物，[M+H+]＝764。
制备B：15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟
以上粗肟(20.5g)溶解于55mL CH2Cl2中，在常温下用1，1-二异丙氧基环己烷(27.3mL)和对甲苯磺酸吡啶瘆(9.8g)处理15小时。该混合物用160mL CH2Cl2稀释，然后依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、蒸发，给出一种褐色糖浆状物。硅胶色谱法(己烷/丙酮＝2∶1→3∶2的梯度+1％Et3N淋洗)给出18.0g产品。
制备C：2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟
15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(9.00g，9.96mmol)在25mL CH2Cl2中的溶液在惰性气氛下用冰冷却，用氯三甲基甲硅烷(1.89mL)和1-三甲基甲硅烷基咪唑(3.65mL)在8mLCH2Cl2中的溶液处理。30分钟后，反应物用250mL乙酸乙酯稀释、依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和蒸发。粗产品用硅胶色谱法(从己烷→己烷/丙酮＝10∶1混合物的梯度+1％Et3N)，得到7.8g产品。
制备D：2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-6-O-甲基-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟
2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(21.7g，20.7mmol)在41.4mL四氢呋喃中的溶液冷却到10℃，在惰性气氛下用41.4mL二甲基亚砜和20.7mL2.0M甲基溴的***溶液处理。以约20mL/小时的速率添加二甲基亚砜(41.4mL)和1.0M叔丁醇钾的四氢呋喃溶液(41.4mL)的混合物。反应用薄层色谱法(硅胶，甲苯/丙酮＝10∶1)监测，在添加1.6摩尔当量的碱之后判断反应完成。反应物用200mL乙酸乙酯和70mL饱和NaHCO3稀释。混合物转移到一个分液漏斗中，用850mL乙酸乙酯和280mL饱和NaHCO3稀释，然后依次用水和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、用硅藻土层过滤、蒸发，得到21.2g粗2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-6-O-甲基-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟。此物无需进一步精制就转入下一步。
制备E：6-O-甲基-15-甲基红霉素A9-肟
2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-6-O-甲基-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(21.2g)在110mL乙腈中的溶液用55mL水和67mL乙酸处理，在常温下搅拌8小时。混合物真空浓缩，然后添加甲苯后反复浓缩，给出19.7g6-O-甲基-15-甲基红霉素A9-肟。
制备F：6-O-甲基-15-甲基红霉素A
6-O-甲基-15-甲基红霉素A9-肟(19.7g)和亚硫酸氢钠(85％，23.1g)在280mL 1∶1乙醇/水中的溶液置于惰性气氛之下。滴加甲酸(3.75mL)，混合物在80℃搅拌4.5小时。冷却到常温之后，反应物用饱和NaHCO3处理，用每次400mL乙酸乙酯萃取3次。有机萃取液合并、依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、蒸发，得到15.1g适合于进一步转化的6-O-甲基-15-甲基红霉素A。
                  实施例7
制备A：6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-14-去甲红霉素A
6-O-甲基-14-去甲红霉素A(77mg)、0.073mL 12N HCl和水(2mL)的混合物在常温下搅拌3小时。该混合物用8N KOH调整到pH 8，用乙酸乙酯萃取。有机萃取物用食盐水洗涤、用MgSO4干燥、过滤、蒸发。残渣用硅胶色谱法(己烷/丙酮＝3∶1，1％三乙胺)精制，给出白色固体状纯产品(42mg)。质谱法揭示[M+H+]＝576。
制备B：2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-14-去甲红霉素A
6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-14-去甲红霉素A(73mg)、碳酸钾(20mg)、乙酸酐(14μl)和丙酮(1mL)的混合物在常温下搅拌18小时。添加乙酸乙酯，用水和食盐水洗涤，用MgSO2干燥、过滤、蒸发。残渣用硅胶色谱法(己烷∶丙酮＝3∶1，1％三乙胺)精制，得到白色固体状纯产品(71mg)。质谱法揭示[M+H+]＝618。
制备C：2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-14-去甲红霉素A
2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-14-去甲红霉素A(99mg)和1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(EDC)盐酸盐(206mg)在二氯甲烷(2mL)中的溶液用DMSO(0.21mL)处理，冷却到5℃。用注射器泵，用4小时时间，添加三氟乙酸吡啶瘆(208mg)在二氯甲烷(2mL)中的溶液。然后，添加乙酸乙酯，用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤，用MgSO4干燥、过滤、和蒸发。残渣用硅胶色谱法(己烷/丙酮＝3∶1，1％三乙胺)精制，给出白色固体状纯产品(94mg)。质谱法揭示[M+H+]＝616。
制备D：2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-11-O-甲磺酰基-14-去甲红霉素A
向2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-14-去甲红霉素A(93mg)在干燥吡啶(1mL)中的溶液中，在5℃添加甲磺酰氯(0.057mL)。在5℃3小时后，让反应物回升到常温，再保持15小时。该混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3(2x)、水(3x)、食盐水洗涤，用MgSO4干燥、过滤、蒸发。残渣用硅胶色谱法(己烷/丙酮＝2∶1，1％三乙胺)精制，给出白色固体状纯产品(72mg)。质谱法揭示[M+H+]＝695。
制备E：2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-10，11-脱水-14-去甲红霉素A
2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-11-O-甲磺酰基-14-去甲红霉素A(73mg)在丙酮(1mL)中的溶液在常温下用二氮杂双环十一烯(32μl)处理18小时。该混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤，用MgSO4干燥、过滤、和蒸发。残留物用硅胶色谱法(己烷/丙酮＝2∶1，1％三乙胺)精制，得到白色固体状纯产品(50mg)。质谱法揭示
                                         [M+H+]＝598.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：δ207.02，204.50，169.63，168.72，142.52，139.40，101.87，80.61，80.02，77.14，72.66，71.48，69.09，63.56，51.35，50.56，47.12，40.61，39.73，37.36，30.36，21.32，21.06，20.96，20.67，18.45，14.34，13.89，13.55，13.45.
                     实施例8
制备A：2′-O-苯甲酰基-6-O-甲基-14.15-脱氢红霉素A
6-O-甲基-14，15-脱氢红霉素A(668mg)、苯甲酸酐(385mg)、和三乙胺(0.25mL)在3.6mL CH2Cl2中的溶液搅拌2天。添加饱和NaHCO3之后，该混合物用CH2Cl2萃取3次。有机萃取液合并、蒸发至干，产品用硅胶色谱法(甲苯/丙酮/Et3N＝90∶9∶1)精制，给出477mg产品；LC-MS显示[M+H+]＝850.6。
制备B：2′-O-苯甲酰基-6-O-甲基-4″，11-二(O-甲磺酰基)-14，15-脱氢红霉素A
2′-O-苯甲酰基-6-O-甲基-14，15-脱氢红霉素A(549mg)和甲磺酰氯(0.5mL)在2.39mL吡啶中的溶液搅拌24小时，然后用CH2Cl2和饱和NaHCO3稀释。混合物用CH2Cl2萃取3次。有机萃取液合并、蒸发至干，产品用硅胶色谱法(甲苯/丙酮/Et3N＝90∶9∶1)精制，给出530mg产品；LC/MS显示[M+H+]＝1006.5。
制备C：2′-O-苯甲酰基-6-O-甲基-4″-O-甲磺酰基-10，11-脱水-14，15-脱氢红霉素A
2′-O-苯甲酰基-6-O-甲基-4″，11-二(O-甲磺酰基)-14，15-脱氢红霉素A(59mg)和二氮杂双环十一烯(0.018mL)在0.195mL丙酮中的混合物搅拌24小时，然后真空干燥。该产品用硅胶色谱法(甲苯/丙酮/Et3N＝90∶9∶1)精制，给出50mg产品；LC-MS显示[M+H+]＝910.5。
制备D：2′-O-苯甲酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-10，11-脱水-14，15-脱氢红霉素A
2′-O-苯甲酰基-6-O-甲基-4″-O-甲磺酰基-10，11-脱水-14，15-脱氢红霉素A(337mg)、1.5mL乙腈、和6.9mL 3N HCl的混合物搅拌22小时。真空脱除乙腈，含水残渣的pH通过添加NaOH调整到12，该产物用4份CH2Cl2萃取。合并的萃取液干燥、蒸发。产物用硅胶色谱法(从CH2Cl2/MeOH＝96∶4→CH2Cl2/MeOH/Et3N＝95∶4∶1的梯度淋洗)精制，给出197mg，[M+H-]＝674.4。1
制备E：2′-O-苯甲酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-10，11-脱水-14，15-脱氢红霉素A
2′-O-苯甲酰基-6-O-甲基-3-O-脱克拉定糖基-10，11-脱水-14，15-脱氢红霉素A(226mg)和Dess-Martin periodinane(427mg)在14.6mL CH2Cl2中的悬浮液搅拌1小时。该混合物用CH2Cl2和饱和NaHCO3稀释。产物用3份CH2Cl2萃取，萃取液合并、干燥、蒸发。硅胶色谱法(甲苯/丙酮/Et3N＝90∶9∶1)精制给出产品168mg。[M+H]+＝672.4.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：δ206.78，203(br)，168.19，165.08，141.36，139.58，132.74，131.51，130.46，129.79，128.25，120.18，102.09，80.79，80.40，78.70，72.52，71.91，69.19，63.76，51.10，50.54，47.08，40.73，39.87，37.77，31.23，22.13，20.98，18.52，14.28，14.15，13.55.
                  实施例9
制备A：6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A
6-O-甲基-15-甲基红霉素A(15.1g)和280mL 0.5N HCl的混合物在常温下搅拌3小时。通过添加6N NaOH把pH调整到9，所生成的沉淀物通过真空过滤收集、用水洗涤、干燥。滤液萃取3次，每次用400mL乙酸乙酯。有机萃取液合并、依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤，然后用MgSO4干燥、过滤、蒸发，以提供进一步产品。合并的粗产品用硅胶色谱法精制，得到9.35g纯6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A。ES-LC/MS显示[M+H]＝＝605。
制备B：2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A
把乙酰酐(2.92mL)在35mL乙酸乙酯中的溶液滴加到6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A(9.35g)在40mL乙酸乙酯中的溶液中。添加完成后，混合物搅拌30分钟，然后浓缩。硅胶色谱法(己烷/丙酮＝2∶1)精制给出8.35g 2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A。ES-LC/MS显示[M+H]＝＝647。
制备C：2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-15-甲基红霉素A
2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A(8.3g)和1-乙基-3-(二甲胺基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(16.51g)在64mL二氯甲烷和15.47mL二甲基亚砜中的溶液置于惰性气氛之下并用冰冷却。三氟乙酸吡啶鎓(16.63g)在64mL二氯甲烷中的溶液以使得添加会在4小时后完成的速率添加，该反应用薄层色谱法监测。在该溶液的73％添加之后观察到完全反应，因此，随后通过添加600mL乙酸乙酯和200mL饱和NaHCO3使该反应终止。收集有机层，依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤，然后用MgSO4干燥、过滤、蒸发，得到8.4g粗产品。硅胶色谱法(己烷/丙酮＝3∶1)给出6.75g 2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-15-甲基红霉素A。ES-LC/MS显示[M+H]＝＝645。
制备D：2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-11-O-甲磺酰基-15-甲基红霉素A
甲磺酰氯(5.68mL)在0℃滴加到2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-15-甲基红霉素A(6.73g)在35mL吡啶中的溶液中。使该混合物回升到常温，并通过添加700mL乙酸乙酯和200mL饱和NaHCO3使反应中止。收集有机层，并依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤，然后用MgSO4干燥、过滤、和蒸发，得到8.2g粗产品。硅胶色谱法(己烷/丙酮＝5∶2)精制给出5.04g 2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-11-O-甲磺酰基-15-甲基红霉素A。ES-LC/MS显示[M+H]＝＝723。
制备E：2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-10，11-脱水-15-甲基红霉素A
将1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(5.22mL)滴加到2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-11-O-甲磺酰基-15-甲基红霉素A(0.503g)在23mL丙酮中的溶液中。4.5小时后将该溶液浓缩，残渣用硅胶色谱法(己烷/丙酮＝5∶2)精制，给出3.72g 2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-10，11-脱水-15-甲基红霉素A。ES-LC/MS显示[M+H]＝＝627。
                 实施例10
2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-10，11-脱水-2-氟-15-甲基红霉素A的合成
2′-O-乙酰基-6-O-甲基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-10，11-脱水-15-甲基红霉素A(198mg，0.316mmol)在2.1mL四氢呋喃中的溶液在惰性气氛下冷却到-78℃，用0.931mL 1.0M叔丁醇钾四氢呋喃溶液处理。混合物搅拌5分钟，N-氟苯磺酰亚胺(230mg)在0.5mL四氢呋喃中的溶液分三批用2小时时间添加。添加后，让反应物回升到常温，再保持5小时。添加K2CO3水溶液，该混合物萃取3次，每次用50mL CH2Cl2。有机萃取液合并、用MgSO4干燥、过滤、蒸发。硅胶色谱法(甲苯/丙酮/Et3N＝90∶9∶1)精制给出95mg白色固体状产品。
                     ES-LC/MS：[M+H]+＝645.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：δ206.95，203.02(br)，169.77，166.08(d，JCF＝23Hz)，141.71，138.43，101.63，98.02(d，JCF＝203Hz)，80.09(br)，79.71，78.27，73.26，71.52，69.08，63.33，49.18，40.61，40.32，41.79，40.61，40.32，31.56，31.47，30.50，24.37(d，JCF＝23Hz)，23.19，22.63，20.95，20.68，19.80，19.47，14.10，14.00，13.55.
                  实施例11
制备A：式(8)向式(11)的转化，式中X＝H、R13＝丙基、R2＝烯丙基
步骤1：2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(7.8g，7.44mmol)在30mL四氢呋喃中的溶液用冰冷却，并在惰性气氛下用30mL二甲基亚砜和2.58mL新蒸馏烯丙基溴处理。以每小时1.33摩尔当量的碱的速率添加二甲基亚砜(29.8mL)和1.0M叔丁醇钾的四氢呋喃溶液(29.8mL)的混合物。该反应用薄层色谱法(硅胶，甲苯/丙酮＝10∶1)监测，在添加3.6摩尔当量的碱之后判断反应完成。反应物用700mL乙酸乙酯稀释，依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和蒸发，得到8.08g 6-O-烯丙基-2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟。此物未进一步精制就转入下一步。
步骤2：6-O-烯丙基-2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(8.08g)在42mL乙腈中的溶液用21mL水和24mL乙酸处理，在常温下搅拌18小时。该混合物在添加2-丙醇之后浓缩，然后，在添加甲苯之后再浓缩，得到7.7g粗产品。硅胶色谱法(己烷/丙酮＝2∶1→1∶1的梯度+1％Et2N)精制给出3.75g 6-O-烯丙基-15-甲基红霉素A9-肟。
步骤3：6-O-烯丙基-15-甲基红霉素A9-肟(3.75g)和亚硫酸氢钠(85％，5.37g)在66mL乙醇/水＝1∶1中的溶液置于惰性气氛之下。滴加甲酸(0.845mL)，混合物在80℃搅拌3.5小时。冷却到常温之后，反应物用6N NaOH调整到pH 10，每次用150mL乙酸乙酯萃取3次。有机萃取液合并，依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和蒸发，得到3.42g适合于进一步转化的6-O-烯丙基-15-甲基红霉素A。
制备B：式(8)向式(11)的转化，式中X＝H、R13＝甲基、R2＝烯丙基
步骤1：2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-14-去甲红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(202mg)在四氢呋喃(0.4mL)、DMSO(0.4mL)和***(0.04mL)中的溶液冷却到10℃，在惰性气氛下用0.035mL新蒸馏烯丙基溴处理。以0.22mL/小时的速率添加二甲基亚砜(0.4mL)和1.0M叔丁醇钾的四氢呋喃溶液(0.4mL)的混合物。反应用薄层色谱法(硅胶，甲苯/丙酮＝5∶1)监测。反应物用乙酸乙酯稀释，依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和蒸发，得到222mg粗6-O-烯丙基-2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-14-去甲红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟、此物未进一步精制就转入下一步。
步骤2：6-O-烯丙基-2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-14-去甲红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(222mg)在4mL乙腈中的溶液用2mL水和2.4mL乙酸处理，在常温下搅拌18小时。该混合物在添加2-丙醇之后浓缩，然后在添加甲苯之后再浓缩，得到220mg粗6-O-烯丙基-14-去甲红霉素A9-肟。
步骤3：6-O-烯丙基-14-去甲红霉素A9-肟(220mg)和亚硫酸氢钠(85％，322mg)在4mL乙醇/水＝1∶1中的溶液置于惰性气氛下。滴加甲酸(0.050mL)，混合物在80℃搅拌15小时。冷却到常温之后，反应物用6N NaOH调整到pH 10，用每次150mL乙酸乙酯萃取3次。有机萃取液合并，依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、蒸发，得到156mg适合于进一步转化的6-O-烯丙基-14-去甲红霉素A。
其它实施方案：以类似方式，从R13为丁基、苄基、乙烯基、或3-羟基丁基的中间体制备Ra为烯丙基的式(11)化合物。方案5
Figure A0080908700581
                     实施例12
           式(11)向式(14)的转化(方案1)
步骤1  实施例11中制备的化合物(77mg，粗)、0.073mL 12NHCl和水(2mL)的混合物在常温下搅拌3小时。该混合物用8N KOH调整到pH 8，用乙酸乙酯萃取。有机萃取液用食盐水洗涤、用MgSO4干燥、过滤、蒸发。残渣用硅胶色谱法(己烷/丙酮＝3∶1，1％三乙胺)精制，给出白色固体状纯产品(42mg)。
步骤2  为了保护2位羟基，以上化合物(73mg)、碳酸钾(20mg)、乙酸酐(14μL)和丙酮(1mL)的混合物在常温下搅拌18小时。添加乙酸乙酯、用水和食盐水洗涤、用MgSO4干燥、过滤、和蒸发。残渣用硅胶色谱法(己烷/丙酮＝3∶1，1％三乙胺)精制，得到白色固体状纯产品(71mg)。
步骤3  步骤2得到的化合物(99mg)和1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(EDC)盐酸盐(206mg)在二氯甲烷(2mL)中的溶液用DMSO(0.21mL)处理，冷却到5℃。经由注射器泵，用4小时时间添加三氟乙酸吡啶瘆(208mg)在二氯甲烷(2mL)中的溶液。然后添加乙酸乙酯，用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤，用MgSO4干燥、过滤、和蒸发。残渣用硅胶色谱法(己烷/丙酮＝3∶1，1％三乙胺)精制，得到纯粹的式(14)化合物(94mg，Ra＝烯丙基、R2＝乙酸根、R13＝CH3)。
步骤4  为了使2位OH脱保护，步骤3得到的化合物(94mg)在5mL甲醇中的溶液在室温下搅拌24小时。真空脱除溶剂，给出所希望的式(14)化合物(Ra＝烯丙基、R2＝H、R13＝CH3)。
其它实施方案：以类似方式，制备了式(14)化合物，式中Ra＝烯丙基、R2＝H、R13＝丙基、丁基、苄基、乙烯基、或3-羟基丁基。
                  实施例13
                -ORa上的转化
A.烯丙基→丙基
实施例12步骤3或4得到的化合物中任意一种(0.2mmol)在乙醇中的溶液用氮气冲刷，添加10％Pd/C(20mg)。然后混合物用氢气冲刷，反应混合物在正氢压下搅拌过夜。反应混合物过滤、真空浓缩，给出一种玻璃状物。硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇/氨＝95∶5∶0.5)精制给出白色固体状丙基化合物。
B.烯丙基→-CH2CHO
向实施例12步骤3或4得到的化合物中任意一种(4.0mmol)的-78℃二氯甲烷溶液(100mL)中通臭氧45分钟。然后，反应混合物用氮气冲刷10分钟。在-78℃添加二甲基硫醚(1.46mL，20mmol)，反应混合物在0℃搅拌30分钟。反应混合物真空浓缩，给出一种白色泡沫，未进一步精制就使用。该化合物的THF溶液(40mL，4.0mmol)和三苯膦(2.62g，10.0mmol)在55℃加热2.5小时。反应混合物真空浓缩，给出一种白色泡沫体。硅胶色谱法(丙酮/己烷＝1∶1，然后丙酮/己烷/三乙胺＝75∶25∶0.5)精制，给出所希望的白色固体状化合物。
C.烯丙基→-CH2CH＝NOH
向B中制备的式中Ra为-CH2CHO的化合物(0.08mmol)的甲醇(5mL)溶液中添加三乙胺(31mL，0.225mmol)和羟胺盐酸盐(7.7mg，0.112mmol)，反应混合物在常温下搅拌6小时。反应混合物溶于乙酸乙酯中，用5％碳酸氢钠水溶液和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，真空浓缩，给出一种透明玻璃状物。硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇/氨＝95∶5∶0.5)精制，给出白色固体状化合物。
D.-CH2CH＝NOH→-CH2CN
在氮气下，向C中制备的化合物(0.267mmol)的THF(5ml)溶液中添加二异丙基碳化二亚胺(83μl，0.534mmol)和CuCl(2.7mg，0.027mmol)，反应混合物在常温下搅拌过夜。反应混合物溶于乙酸乙酯中，用5％碳酸氢钠水溶液和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥，真空浓缩，给出一种透明玻璃状物。硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇/氨＝95∶5∶0.5)精制，给出所希望的白色固体状化合物。
E.-CH2CHO→-CH2CH2NH2
向B中制备的化合物(0.276mmol)的甲醇(10mL)溶液中添加乙酸铵(212mg，2.76mmol)，将混合物冷却到0℃。添加氰基硼氢化钠(34mg，0.553mmol)，反应混合物在0℃搅拌30小时。反应混合物溶于乙酸乙酯中，用5％碳酸钠水溶液、2％三(羟甲基)氨基甲烷水溶液、和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥、过滤、真空浓缩。硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇/氨＝90∶10∶0.5)精制给出所希望的白色固体化合物。
F.-CH2CHO→-CH2CH2NHCH2-苯基
向B中制备的化合物(0.200mmol)的甲醇(10mL)0℃溶液中添加乙酸(114μL，2.00mmol)和苄胺(218μL，2.00mmol)，混合物搅拌10分钟。添加氰基硼氢化钠(24.8mg，0.400mmol)，反应混合物搅拌16小时。然后再添加氰基硼氢化钠(24.8mg，0.400mmol)，继续搅拌5小时。反应混合物溶于乙酸乙酯中，用5％碳酸钠水溶液、2％三(羟甲基)氨基甲烷水溶液、和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥、过滤、真空浓缩。硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇/氨＝95∶5∶0.5)精制接着第二色谱法(丙酮/己烷/三乙胺＝50∶50∶0.5)精制，给出所希望的白色泡沫状化合物。
G.-CH2CHO→-CH2CH2NHCH2CH2-苯基
向B中制备的化合物(0.200mmol)的甲醇(10mL)0℃溶液中添加乙酸(114μL，2.00mmol)和苯乙胺(218μL，2.00mmol)，混合物搅拌10分钟。添加氰基硼氢化钠(24.8mg，0.400mmol)，反应混合物搅拌16小时。反应混合物溶于乙酸乙酯中，用5％碳酸钠水溶液、2％三(羟甲基)氨基甲烷水溶液、和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥、过滤、真空浓缩。硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇/氨＝90∶10∶0.5)精制，给出所希望的化合物。
H.-CH2CHO→-CH2CH2NHCH(CO2CH3)CH2-苯基
向B中制备的化合物(0.200mmol)的甲醇(10mL)0℃溶液中添加L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐(129mg，0.600mmol)，混合物搅拌10分钟。添加氰基硼氢化钠(924.8mg，0.400mmol)，反应混合物搅拌22小时。反应混合物溶于乙酸乙酯中，用5％碳酸钠水溶液、2％三(羟甲基)氨基甲烷水溶液、和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥、过滤、真空浓缩。硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇/氨＝95∶5∶0.5)精制给出所希望的化合物。
I.-CH2CHO→-CH2CH2NHCH2-(4-吡啶基)
除用4-氨基甲基吡啶代替苯乙胺外，按照G中的方法制备所希望的化合物。
J.-CH2CH2NH2→-CH2CH2NHCH2-(4-喹啉基)
向E中制备的化合物(0.15mmol)的甲醇(2mL)溶液中添加4-喹啉甲醛(23mg，0.15mmol)、乙酸(8.6mL，0.15mmol)和氰基硼氢化钠(9.4mg，0.15mmol)，反应混合物搅拌15小时。反应混合物溶于乙酸乙酯中，用5％碳酸钠水溶液、2％三(羟甲基)氨基甲烷水溶液、和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥、过滤、真空浓缩。硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇/氨＝95∶10∶0.5)精制给出所希望的化合物。
K.烯丙基→-CH2CH＝CH-苯基
在氮气下，向实施例12中制备的有2位保护的化合物(1.00mmol)、乙酸钯(II)(22mg，0.100mmol)、和三苯膦(52mg，0.200mmol)在乙腈(5mL)中的溶液中添加碘代苯(220μL，2.00mmol)和三乙胺(280μL，2.00mmol)，混合物冷却到-78℃、脱气、密封。然后，使反应混合物回升到60℃0.5小时，在80℃搅拌12小时，用乙酸乙酯收集，用5％碳酸氢钠水溶液洗涤2次、用2％三(羟甲基)氨基甲烷水溶液洗涤1次、用食盐水洗涤1次，用硫酸钠干燥、过滤、真空浓缩。硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇/氨＝95∶5∶0.5)精制给出所希望的化合物。
脱保护是通过在甲醇中加热进行的。
其R2＝H且R13＝丙基、丁基、苄基、乙烯基、或3-羟基丁基的式(14)的其它实施方案是其Ra为如下者：
-CH2CH2CH2-苯基； -CH2CH＝CH-(4-甲氧基苯基)；
-CH2CH＝CH-(4-氯苯基)； -CH2CH＝CH-(3-喹啉基)；
-CH2CH2CH2OH； -CH2C(O)OH；
-CH2CH2NHCH3； -CH2CH2NHCH2OH；
-CH2CH2N(CH3)2； -CH2CH2(1-吗啉基)；
-CH2C(O)NH2； -CH2NHC(O)NH2；
-CH2NHC(O)CH3； -CH2F；
-CH2CH2OCH3； -CH2CH3；
-CH2CH＝CH(CH3)2； -CH2CH2CH(CH3)CH3；
-CH2CH2OCH2CH2OCH3； -CH2SCH3；
-环丙基； -CH2OCH3；
-CH2CH2F； -CH2-环丙基；
-CH2CH2CHO； -C(O)CH2CH2CH3；
-CH2-(4-硝基苯基)； -CH2-(4-氯苯基)；
-CH2-(4-甲氧基苯基)； -CH2-(4-氰基苯基)；
-CH2CH＝CHC(O)OCH3； -CH2CH＝CHC(O)OCH2CH3；
-CH2CH＝CHCH3； -CH2CH＝CHCH2CH3；
-CH2CH＝CHCH2CH2CH3； -CH2CH＝CHSO2-苯基；
-CH2CCSi(CH3)3 -CH2CCCH2CH2CH2CH2CH2CH3；
-CH2CCCH3； -CH2-(2-吡啶基)；
-CH2-(3-吡啶基)； -CH2-(4-吡啶基)；
-CH2-(4-喹啉基)； -CH2NO2；
-CH2C(O)OCH3； -CH2C(O)-苯基；
-CH2C(O)CH2CH3； -CH2Cl；
-CH2S(O)2-苯基； -CH2CH＝CHBr；
-CH2CH＝CH-(4-喹啉基)； -CH2CH2CH2-(4-喹啉基)；
-CH2CH＝CH-(5-喹啉基)； -CH2CH2CH2-(5-喹啉基)；
-CH2CH＝CH-(4-苯并噁唑基)；或 -CH2CH＝CH-(7-苯并咪唑基)。
                     实施例14
式(I)化合物的制备，式中R＝H、R2＝H、X＝H、R6＝-ORa、Ra＝-CH2CH＝CH2(方案3)
步骤1：形成中间体化合物(20)的10，11-脱水形式的制备，式中Ra＝-CH2CH＝CH2，R2＝苯甲酰基
A.6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A
6-O-烯丙基-15-甲基红霉素A(6.58g)和125mL 0.5N HCl的混合物在常温下搅拌20小时。通过添加6N NaOH把pH调整到10，混合物萃取3次，每次用225mL乙酸乙酯。有机萃取液合并，依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤，然后用MgSO4干燥、过滤、和蒸发。粗产品用硅胶色谱法(甲苯/丙酮＝3∶2+1％Et3N)精制，得到3.04g纯6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A。ES-LC/MS显示[M+H]＝＝617。
B.2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A
6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A(2.43g，3.86mmol，1.00当量)和苯甲酸酐(1.78g，7.72mmol，2.00当量)置于一个圆底烧瓶中，用N2冲刷。添加乙酸乙酯(17.5mL)。该溶液搅拌3.5小时，然后用400mL EtOAc稀释，用150mL饱和NaHCO3水溶液洗涤2次、用150mL水和食盐水各洗涤1次。有机相用MgSO4干燥、过滤、和浓缩。硅胶闪急色谱法(己烷/丙酮＝3∶1+1％Et3N)精制给出1.94g(68.1％)白色固体状所希望产品。
                                               ES-LC/MS显示[M+H]＝＝721.13CNMR(100.6MHz，CDCl3)δ219.4，174.3，165.4，135.3，132.6，130.8，129.7，128.2，117.2，99.7，80.7，79.0，77.9，77.7，75.1，74.3，72.3，69.0，64.7，63.3，45.6，43.9，40.7，37.9，37.7，35.7，32.1，30.8，21.1，20.2，19.3，18.1，16.3，15.1，14.0，12.4，7.7.
C.2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-15-甲基红霉素A
N-氯琥珀酰亚胺(0.510g，3.82mmol，1.50当量)溶解于13mL无水CH2Cl2中并在N2下冷却到-10℃。添加甲硫醚(0.328mL，4.46mmol，1.75当量)，然后反应物搅拌15分钟。滴加2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A(1.87g，2.55mmol，1.00当量)在13mL无水CH2Cl2中的溶液。30分钟后，添加新蒸馏的Et3N(0.355mL，2.55mmol，1.00当量)；让反应物用30分钟回升到0℃。反应混合物用400mL EtOAc稀释，相继用饱和NaHCO3、水、和食盐水各100mL洗涤。有机层用MgSO4干燥、过滤、浓缩、用闪急色谱法(己烷/丙酮＝9∶1+1％Et3N)精制，给出0.931g(49.9％)白色固体状所希望产品。
                                              ES-LC/MS显示[M+H]＝＝719.13CNMR(100.6MHz，CDCl3)δ219.1，206.1，169.5，165.3，135.3，132.7，129.0，129.7，128.3，117.4，100.7，78.5，76.6，75.3，74.2，72.1，69.2，69.0，64.5，63.7，50.6，45.3，44.8，40.7，38.3，37.8，31.7，31.0，21.1，20.2，19.5，18.1，16.5，14.5，14.0，12.6，12.2.
D.2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-11-O-甲磺酰基-15-甲基红霉素A
2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-15-甲基红霉素A(904mg，1.24mmol，1.00当量)溶解于新蒸馏吡啶(4mL)中，冷却到0℃。滴加甲磺酰氯(0.478mL，6.17mmol，5.00当量)。该反应物回到常温，并搅拌过夜。混合物用350mL EtOAc稀释，用100mL饱和NaHCO3水溶液终止反应。分层，有机相继用水和食盐水各100mL洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和浓缩。硅胶闪急色谱法(己烷/丙酮＝4∶1+1％Et3N)精制给出741mg(74.1％)白色固体状所希望化合物。
                         13C NMR(100.6MHz，CDCl3)δ203.0，168.9，165.0，137.6，133.1，130.3，129.8，128.5，114.4，108.8，102.2，91.1，84.4，81.6，78.8，72.2，69.2，64.3，63.9，52.1，46.6，45.8，40.7，38.8，38.2，35.9，31.8，30.9，29.7，24.8，21.0，19.6，18.2，15.5，15.4，13.8，13.5.
E.2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-10，11-脱水-15-甲基红霉素A
2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-11-O-甲磺酰基-15-甲基红霉素A(705mg，0.870mmol，1.00当量)溶解于丙酮(3mL)中，滴加1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(0.651mL，4.35mmol，5.00当量)。反应物在常温搅拌6小时，然后浓缩。硅胶闪急色谱法(己烷/丙酮＝4∶1+1％Et3N)精制给出486mg(78.0％)白色固体状所希望产物。13C NMR(100.6MHz，CDCl3)δ210.1，208.4，170.2，165.2，141.0，140.2，136.3，132.7，130.4，129.8，128.2，115.5，100.6，81.0，78.7，77.2，73.8，72.0，69.1，64.6，63.3，51.0，47.4，40.8，39.4，36.2，31.9，31.3，23.6，21.2，21.1，21.0，19.4，14.1，13.9，13.7，13.1.
步骤2：从说明性方案3进行化合物(18)第12位羟基的衍生：Ra＝-CH2CH＝CH2，R2＝苯甲酰基
2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-10，11-脱水-15-甲基红霉素A(227mg，0.317mmol，1.00当量)溶解于1.3mL新蒸馏THF中，并在N2下冷却到-15℃。添加氢化钠(25mg60％矿物油分散体，0.634mmol，2.00当量)，反应物搅拌15分钟。滴加1，1-羰基二咪唑(140mg，0.866mmol，3.00当量)在1.3mL新蒸馏THF中的溶液。搅拌30分钟之后，用1.5小时时间让反应物回升到常温。混合物用100mL EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液、水和食盐水各30mL相继洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、浓缩，给出275mg粗产品(100％)，将后者溶解于2mL ACN和0.2mL无水THF中。添加饱和氢氧化铵水溶液(2mL)。将反应物密封、搅拌2天。减压脱除挥发分，残渣再溶解于100mL EtOAc中。该溶液用饱和NaHCO3水溶液、水、和食盐水各30mL相继洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、浓缩。粗产品的闪急色谱法(己烷/丙酮＝4∶1+1％Et3N)精制，给出184mg(76.5％)所希望的产品。
                  实施例15
制备A：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2CH＝CH-(3-喹啉基)
步骤1：2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯(40mg，0.0528mmol，1.0当量)、三(二亚苄基丙酮)二钯(O)氯仿加合物(14mg，0.014mmol，0.5当量)、三邻甲苯基膦(17mg，0.055mmol，1.0当量)、和3-溴喹啉(72μL、0.53mmol，10当量)置于一个圆底烧瓶中，用N2冲刷。添加脱气的乙腈(1mL)和新蒸馏的Et3N(0.015mL 0.11mmol，2.0当量)。反应物回流63小时。让混合物回到常温，用40mL EtOAc稀释。该溶液用饱和NaHCO3水溶液、水、和食盐水各10mL相继洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和浓缩。粗产品的闪急蒸馏法(己烷/丙酮＝5∶1→2∶1+1％Et3N)精制，得到34mg所希望的产品。
步骤2：上述产品(34mg)溶解于1mL甲醇中、密封、在80℃回流16小时。减压下脱除挥发分。闪急色谱法(己烷/丙酮＝1∶1+1％Et3N)精制给出淡黄色固体状所希望产品(25mg，两步总产率61％)。
                                               ES-LC/MS：[M+H]＝＝780.5.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：δ217.44，205.37，169.48，157.69，149.71，147.61，132.51，129.96，129.56，129.15，129.05，128.49，128.05，126.70，102.90，83.42，78.71，76.42，75.91，70.22，69.53，65.83，64.31，58.12，50.81，46.29，46.12，45.05，40.18(2C)，39.05，37.31，31.64，28.19，21.15，20.18，19.43，18.05，14.38，14.11，13.76，13.63(2C).
制备B：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-(6-氟喹啉基)
这是按照制备A的方法用3-溴-6-氟喹啉代替3-溴喹啉制备的。
                                         ES-LC/MS：[M+H]-＝798.5.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：δ217.49，205.36，169.54，160.6(JCF＝248Hz)，157.68，149.05，144.69，131.84，131.64(JCF＝9Hz)，130.28，129.63，129.31，128.7(JCF＝10Hz)，119.20(JCF＝27Hz)，110.87(JCF＝22Hz)，102.94，83.42，78.77，76.44，75.91，70.22，69.55，65.84，64.24，58.09，50.83，46.36，46.06，45.05，40.18(2C)39.04，37.32，31.63，28.19，21.16，20.19，19.46，18.04，14.37，14.18，13.76，13.62(2C).
制备C：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-(6-氯喹啉基)
这是按照制备A的方法用3-溴-6-氯喹啉代替3-溴喹啉制备的。
                                             ES-LC/MS：[M+H]＝＝814.5.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：δ217.48，205.35，169.55，157.67，149.90，145.92，132.42，131，49，130.80，130.44，129.92，129.49，129.46，128.71，126.57，102.94，83.41，78.78，76.45，75.91，70.22，69.54，65.83，64.23，58.07，50.83，46.39，45.99，45.04，40.17(2C)，39.03，37.32，31.62，31.53，28.18，21.16，20.17，19.49，18.04，14.36，14.21，13.76，13.61(2C).
制备D：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CH＝CH-(4-异喹啉基)
这是按照制备A的方法用4-溴异喹啉代替3-溴喹啉制备的。
                                               ES-LC/MS：[M+H]＝＝781.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：δ217.19，205.43，169.75，157.39，152.07，140.74，133.61，130.65，130.44，128.07，127.72，127.05，126.89，122.77，102.85，83.28，78.74，75.72，70.22，69.51，65.88，64.45，58.10，50.91，46.07，45.09，40.18(2C)38.99，37.34，31.48，29.66，28.28，21.18，20.39，19.33，14.53，14.01，13.86，13.66，13.62.
制备E：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-吡啶基)
这是按照制备A的方法用3-溴吡啶代替3-溴喹啉制备的。
                                                    LC/MS：[M+H]＝＝731.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：δ217.39，205.27，169.50，157.61，148.81，148.68，132.63，132.16，129.65，128.18，123.46，102.91，83.36，78.63，76.35，75.79，70.20，69.52，65.83，64.17，58.06，50.78，46.28，45.03，40.16(2C)，38.96，37.29，31.64，31.52，28.19，22.58，21.14，20.21，19.42，18.04，1.35，14.12，14.05，13.79，13.61(2C).
制备F：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-(6-甲基喹啉基)
这是按照制备A的方法用3-溴-6-甲基喹啉代替3-溴喹啉制备的。
                                                ES-LC/MS：[M+H]＝＝795.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：δ217.37，205.35，169.47，157.65，148.82，14623，136.45，131.87，131.37，130.09，129.51，128.78，128.22，128.06，126.86，102.87，83.40，78.68，75.91，70.20，69.47，65.83，64.33，58.11，50.81，46.28，45.04，40.15(2C)，39.05，37.31，31.64，28.24，21.52，21.14，20.18，19.45，18.05，14.38，14.11，13.77，13.63(2C).
制备G：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-(6-氨基喹啉基)
这是按照制备A的方法用3-溴-6-氨基喹啉代替3-溴喹啉制备的。ES-LC/MS：[M+H]＝＝796。
制备H：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-(5-异噁唑-3-基)噻吩基)
这是按照制备A的方法用5-(异噁唑-3-基)-2-溴噻吩代替3-溴喹啉制备的。
制备I：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CH＝CH-(6-喹啉基)
这是按照制备A的方法用6-溴喹啉代替3-溴喹啉制备的。
制备J：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-喹喔啉-6-基)
这是按照制备A的方法用6-溴喹喔啉代替3-溴喹啉制备的。
制备K：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CH＝CH-(5-(N-(2-吡啶基)-2-糠酰胺基)
这是按照制备A的方法用N-(2-吡啶基)-5-溴-2-糠酰胺代替3-溴喹啉制备的。
制备AA：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2CH＝CH-(3-喹啉基)
这是按照制备A的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
    LC/MS：[M+H]＝＝798.6.19F-NMR(CDCl3，376MHz)：δ-163.93.13C-NMR(CDCl3，100MHz)：δ217.97，204.28(JCF＝27Hz)，165.62(JCF＝23Hz)，157.18，149.71，147.70，132.65，130.25，129.53，129.22，129.12，129.06，128.15，128.08，126.78，104.10，98.02(JCF＝206Hz)，83.40，79.59，79.37，77.57，70.41，69.74，65.85，64.36，58.11，44.23，40.83(JCF＝1.5Hz)，40.25(2C)，39.04，37.45，31.37，28.16，25.30(JCF＝22Hz)，21.19，20.86，19.54，17.67，15.46(JCF＝1.7Hz)，13.82，13.80，13.29.
制备BB：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-(6-氟喹啉基)
这是按照制备B的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备CC：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-(6-氯喹啉基)
这是按照制备C的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备DD：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CH＝CH-(4-异喹啉基)
这是按照制备D的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备EE：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-吡啶基)
这是按照制备E的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备FF：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-(6-甲基喹啉基)
这是按照制备F的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备GG：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-(6-氨基喹啉基)
这是按照制备G的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备HH：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-(5-异噁唑-3-基)噻吩基)
这是按照制备H的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备II：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CH＝CH-(6-喹啉基)
这是按照制备I的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备JJ：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CH＝CH-(3-喹喔啉-6-基)
这是按照制备J的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备KK：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CH＝CH-(5-(N-(2-吡啶基)-2-糠酰胺基)
这是按照制备K的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
                    实施例16
式(I)化合物的制备：X＝H、Ra＝-O-炔丙基(方案3)
步骤1：2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(100mg)在0.1mL四氢呋喃、0.1mL***、和0.1mL DMSO中的溶液冷却到10℃，在惰性气氛下用0.028mL3-溴-1-(三甲基甲硅烷基)-1-丙炔处理。以2.0摩尔碱当量/小时的速率添加二甲基亚砜(0.19mL)和1.0M叔丁醇钾四氢呋喃溶液(0.38mL)的混合物。在0.5小时和1小时后，各添加额外当量(0.014mL)的TMS-炔丙基溴。反应用薄层色谱法(硅胶，甲苯/丙酮＝10∶1)监测，在添加2.3摩尔当量的碱之后判断反应完成。反应物用100mL乙酸乙酯和30mL饱和NaHCO3稀释，依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和蒸发。粗产品用硅胶色谱法(己烷/丙酮＝40∶1+1％Et3N)精制，得到部分精制的6-O-(3-三甲基甲硅烷基)炔丙基-2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟。
步骤2：来自上一步骤的不纯6-O-(3-三甲基甲硅烷基)炔丙基-2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-15-甲基红霉素A9-〔O-(1-异丙氧基环己基)〕肟(0.88g)在4.4mL乙腈中的溶液用2.2mL水和2.5mL乙酸处理，在常温下搅拌24小时。该混合物在添加2-丙醇后浓缩，然后，在添加甲苯后重复操作。此材料与碳酸钾和甲醇(6mL)一起搅拌2.5小时。混合物用乙酸乙酯(200mL)稀释，依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和蒸发。得到产品。
步骤3：以上产品和亚硫酸氢钠(0.59g)在7mL乙醇/水＝1∶1中的溶液置于惰性气氛之下。滴加甲酸(0.096mL)，混合物在80℃搅拌5小时。冷却到常温之后，反应物用6N NaOH调整到pH 10，以每次150mL乙酸乙酯萃取3次。有机萃取物合并，依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和蒸发，得到适合于进一步转化的6-O-炔丙基-15-甲基红霉素A。纯品可通过硅胶色谱法制备。
步骤4：6-O-炔丙基-15-甲基红霉素A(0.40g)和6mL 0.6NHCl的混合物在常温下搅拌17小时。通过添加6N NaOH把pH调整到9，添加150mL乙酸乙酯。有机萃取液依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。然后用MgSO4干燥、过滤、和蒸发，提供进一步产品。粗产品用硅胶色谱法精制，给出纯粹6-O-炔丙基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A。
步骤5：6-O-炔丙基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A(0.16g)和苯甲酸酐(0.12g)在1.3mL乙酸乙酯中的溶液搅拌17小时，然后依次用饱和NaHCO3、水、和食盐水洗涤。该溶液用MgSO4干燥、过滤、和蒸发。粗产品用硅胶色谱法精制，得到2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A。
步骤6：N-氯琥珀酰亚胺(0.510g，3.82mmol，1.50当量)溶解于13mL CH2Cl2中，在N2下冷却到-10℃。添加二甲硫醚(0.328mL，4.46mmol，1.75当量)，反应物搅拌15分钟。滴加2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-3-脱克拉定糖基-15-甲基红霉素A(1.87g，2.55mmol，1.00当量)在13mL无水CH2Cl2中的溶液。30分钟后，添加新蒸馏Et3N(0.355mL，2.55mmol，1.00当量)，用30分钟时间让反应物回升到0℃。反应混合物用400mL EtOAc稀释，相继用饱和NaHCO3水溶液、水、和食盐水各100mL洗涤。有机层用MgSO4干燥、过滤、浓缩，用色谱法精制。
步骤7：2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-15-甲基红霉素A(904mg)溶解于新蒸馏吡啶(4mL)中，冷却到0℃。滴加甲磺酰氯(0.478mL，6.17mmol，5.00当量)。让反应物回升到常温，搅拌过夜。混合物用350mL EtOAc稀释、用100mL饱和NaHCO3水溶液终止反应。分层，有机相用水和食盐水各100mL相继洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、浓缩。硅胶闪急色谱法精制给出该产品。
步骤8：2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-11-甲磺酰基-15-甲基红霉素A(705mg)溶解于丙酮(3mL)中，滴加1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(0.651mL，4.35mmol，5.00当量)。反应物在常温下搅拌6小时，然后浓缩。硅胶闪急色谱法给出产品。
步骤9：2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-10，11-脱水-3-脱克拉定糖基-3-氧代-15-甲基红霉素A(227mg)溶解于1.3mL新蒸馏THF中，在N2下冷却到-15℃。添加氢化钠(25mg 60％矿物油分散体，0.634mmol，2.00当量)，反应物搅拌15分钟。滴加1，1-羰基二咪唑(140mg)在1.3mL新蒸馏THF中的溶液。搅拌30分钟之后，用1.5小时时间让反应物回升到常温。混合物用100mL EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液、水、和食盐水各30mL相继洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、浓缩，然后将残渣溶于2mL ACN和0.2mL无水THF中。添加饱和氢氧化铵水溶液(2mL)。将反应物密封、搅拌2天。减压下脱除挥发分，残渣再溶解于100mL EtOAc。溶液用饱和NaHCO3水溶液、水、和食盐水各30mL相继洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和浓缩。闪急色谱法精制给出环状氨基甲酸酯产品。
                    实施例17
式(I)化合物的制备：X＝H、R6＝O-3-(喹啉-3-基)丙-2-炔基(方案3)
制备A：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(3-喹啉基)
步骤1：2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯(40mg)、三(二亚苄基丙酮)二钯(O)-氯仿加合物(14mg)、三邻甲苯基膦(17mg)、碘化铜、和3-溴喹啉(72μL，0.53mmol，10当量)置于一个圆底烧瓶中，用N2冲刷。添加脱气的乙腈(1mL)和新蒸馏Et3N(0.015mL，0.11mmol，2.0当量)。反应物回流63小时。让混合物回到常温，用40mL EtOAc稀释。该溶液用饱和NaHCO3水溶液、水、和食盐水各10mL相继洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和浓缩。闪急色谱法精制给出所希望的产品。
步骤2：以上产品溶解于1mL甲醇中、密封、在80℃回流16小时。减压下脱除挥发分。闪急色谱法精制给出所希望的产品。
制备B：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(3-(6-氟喹啉基)
这是按照制备A的方法用3-溴-6-氟喹啉代替3-溴喹啉制备的。
制备C：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(3-(6-氯喹啉基)
这是按照制备A的方法用3-溴-6-氯喹啉代替3-溴喹啉制备的。
制备D：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(4-异喹啉基)
这是按照制备A的方法用4-溴异喹啉代替3-溴喹啉制备的。
制备E：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(3-吡啶基)
这是按照制备A的方法用3-溴吡啶代替3-溴喹啉制备的。
制备F：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(3-(6-甲基喹啉基)
这是按照制备A的方法用3-溴-6-甲基喹啉代替3-溴喹啉制备的。
制备G：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(3-(6-氨基喹啉基)
这是按照制备A的方法用3-溴-6-氨基喹啉代替3-溴喹啉制备的。
制备H：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(3-(5-异噁唑-3-基)噻吩基)
这是按照制备A的方法用5-(异噁唑-3-基)-2-溴噻吩代替3-溴喹啉制备的。
制备I：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(6-喹啉基)
这是按照制备A的方法用6-溴喹啉代替3-溴喹啉制备的。
制备J：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(3-喹喔啉-6-基)
这是按照制备A的方法用6-溴喹喔啉代替3-溴喹啉制备的。
制备K：式(I)，X＝H、Ra＝-CH2-CC-(5-(N-(2-吡啶基)-2-糠酰胺基)
这是按照制备A的方法用N-(2-吡啶基)-5-溴-2-糠酰胺代替3-溴喹啉制备的。
制备AA：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(3-喹啉基)
这是按照制备A的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备BB：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(3-(6-氟喹啉基)
这是按照制备B的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备CC：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(3-(6-氯喹啉基)
这是按照制备C的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备DD：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(4-异喹啉基)
这是按照制备D的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备EE：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(3-吡啶基)
这是按照制备E的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备FF：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(3-(6-甲基喹啉基)
这是按照制备F的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备GG：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(3-(6-氨基喹啉基)
这是按照制备G的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备HH：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(3-(5-异噁唑-3-基)噻吩基)
这是按照制备H的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备II：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(6-喹啉基)
这是按照制备I的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备JJ：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(3-喹喔啉-6-基)
这是按照制备J的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
制备KK：式(I)，X＝F、Ra＝-CH2-CC-(5-(N-(2-吡啶基)-2-糠酰胺基)
这是按照制备K的方法用2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯代替2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯制备的。
                   实施例18
5-O-(2′-乙酰基德糖胺基)-10，11-脱水-3，6-二脱氧-3-氧代-14-去甲赤糖酸大环内酯A的合成
制备A：5-O-德糖胺基-10，11-脱水-6-脱氧-14-去甲赤糖酸大环内酯A
从发酵衍生的6-脱氧-14-去甲红霉素A、B、C、和D的混合物(0.5g)溶解于二氯甲烷(6ml)中，用氯三甲基甲硅烷(0.144mL)和1-三甲基甲硅烷基咪唑(0.20mL)处理。10分钟后，反应物用1NNaOH处理、用二氯甲烷萃取3次。有机萃取液合并、用饱和NaCl洗涤、用MgSO4干燥、过滤、蒸发，得到一种泡沫状材料。这种材料溶解于四氢呋喃(5mL)中，用1，1′-羰基二咪唑(0.45g)和氢化钠(50mg60％油分散体，用己烷洗涤)处理。混合物在70℃加热1小时，然后冷却、用1N NaOH处理、用乙酸乙酯萃取3次。有机萃取液合并、用饱和NaCl洗涤、用MgSO4干燥、过滤、蒸发至干。所得到的产品混合物溶解于乙醇(0.5mL)中，用2％HCl水溶液(1mL)处理以使3-O-糖基基团断裂。产品用色谱法回收。质谱法揭示[M+H]+＝559。
制备B：5-O-(2′-乙酰基德糖胺基)-10，11-脱水-6-脱氧-14-去甲赤糖酸大环内酯A
5-O-德糖胺基-10，11-脱水-6-脱氧-14-去甲赤糖酸大环内酯A(0.5g)在丙酮(10mL)中的溶液在常温下用乙酸酐(0.10mL)和碳酸钾(0.15g)处理24小时、过滤、浓缩至干，得到产品。质谱法揭示[M+H]+＝601。
制备C：5-O-(2′-乙酰基德糖胺基)-10，11-脱水-3，6-二脱氧-3-氧代-14-去甲赤糖酸大环内酯A
5-O-(2′-乙酰基德糖胺基)-10，11-脱水-6-脱氧-14-去甲赤糖酸大环内酯A(0.5g)和1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.0g)在二氯甲烷(10mL)中的溶液用二甲基亚砜(1.0mL)处理、冷却到5℃。滴加三氟乙酸吡啶鎓(1.0g)在二氯甲烷(10mL)中的溶液，混合物在5℃搅拌2小时。混合物用乙酸乙酯稀释、用水和饱和NaCl洗涤、然后用MgSO4干燥、过滤、蒸发至干。产品用色谱法精制。质谱法揭示[M+H]+＝599。
                   实施例19
5-O-(2′-乙酰基德糖胺基)-10，11-脱水-3，6-二脱氧-3-氧代-14，15-脱氢赤糖酸大环内酯A的合成
制备A：5-O-德糖胺基-10，11-脱水-6-脱氧-14，15-脱氢赤糖酸大环内酯A
从发酵衍生的6-脱氧-14，15-脱氢红霉素A、B、C、和D的混合物(0.5g)溶解于二氯甲烷(6mL)中，用氯三甲基甲硅烷(0.144mL)和1-三甲基甲硅烷基咪唑(0.20mL)处理。10分钟后，反应物用1NNaOH处理，用二氯甲烷萃取3次。有机萃取液合并、用饱和NaCl洗涤，用MgSO4干燥、过滤、蒸发，得到一种泡沫状材料。这种材料溶解于四氢呋喃(5mL)中，用1，1′-羰基二咪唑(0.45g)和氢化钠(50mg60％油分散体，用己烷洗涤)处理。混合物在70℃加热1小时，然后冷却、用1N NaOH处理、用乙酸乙酯萃取3次。有机萃取液合并、用饱和NaCl洗涤、用MgSO4干燥、过滤、蒸发至干。所得到的产品混合物溶解于乙醇(0.5mL)中，用2％HCl水溶液(1mL)处理以使3-O-糖基基团断裂。用色谱法回收产品。
制备B：5-O-(2′-乙酰基德糖胺基)-10，11-脱水-6-脱氧-14，15-脱氢赤糖酸大环内酯A
5-O-德糖胺基-10，11-脱水-6-脱氧-14，15-脱氢赤糖酸大环内酯A(0.5g)在丙酮(10mL)中的溶液在常温下用乙酸酐(0.10mL)和碳酸钾(0.15g)处理24小时、过滤、浓缩至干，得到该产品。
制备C：5-O-(2′-乙酰基德糖胺基)-10，11-脱水-3，6-二脱氧-3-氧代-14，15-脱氢赤糖酸大环内酯A
5-O-(2′-乙酰基德糖胺基)-10，11-脱水-6-脱氧-14，15-脱氢赤糖酸大环内酯A(0.5g)和1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.0g)在二氯甲烷(10mL)中的溶液用二甲基亚砜(1.0mL)处理、冷却到5℃。滴加三氟乙酸吡啶鎓(1.0g)在二氯甲烷(10mL)中的溶液，混合物在5℃搅拌2小时。混合物用乙酸乙酯稀释、用水和饱和NaCl洗涤、然后用MgSO4干燥、过滤、蒸发至干。产品用色谱法精制。
                   实施例20
5-O-(2′-乙酰基德糖胺基)-10，11-脱水-3，6-二脱氧-3-氧代-15-甲基赤糖酸大环内酯A的合成
标题化合物是按照以下方案制备的：方案6
Figure A0080908700801
反应1
向化合物1(220mg，0.307mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中添加碳酸钾(50mg)和乙酸酐(100μL，0.9mmol)，反应物在室温下搅拌16小时。将溶液过滤、添加氢氧化钠(1N，25mL)和食盐水(25mL)，水层用乙酸乙酯萃取6次。合并的有机层用Na2SO4干燥、过滤、真空脱除溶剂。将粗产品2转入下一步。
反应2
将化合物2(反应1的粗产品)溶解于吡啶(5mL)中，添加甲磺酰氯(70μl，0.9mmol)。反应物在-20℃搅拌2天，倾入氢氧化钠(1N，25mL)和食盐水(25mL)中，水层用乙酸乙酯萃取6次。合并的有机层用硫酸钠干燥、过滤、真空脱除溶剂。残渣用硅胶色谱法(甲苯/丙酮＝3∶1，1％氢氧化铵)精制，得到化合物3(190mg，两步总产率68％)。
反应3
化合物3(190mg，0.21mmol)溶解在丙酮(7mL)中，添加DBU(63μL，0.42mmol)，反应物在室温下搅拌过夜。混合物倾入氢氧化钠(1N，25mL)和食盐水(25mL)中，水层用乙酸乙酯萃取6次。合并的有机层用硫酸钠干燥、过滤、真空脱除溶剂。粗产品4转入下一步。
反应4
向化合物4(上一步的粗产品)中添加盐酸(30mL，3N)和乙醇(2mL)，混合物剧烈搅拌6小时。添加氢氧化钠(5mL，10N)，水层用乙酸乙酯萃取6次。合并的有机层用硫酸钠干燥、过滤、真空蒸发溶剂。粗产品5转入下一步。
反应5
向化合物5(上一步的粗产品)的二氯甲烷(5mL)溶液中添加乙酸酐(50μl，0.45mmol)和碳酸钾(100mg)，混合物剧烈搅拌9小时。反应物过滤、添加氢氧化钠(20mL，1N)和食盐水(25mL)，水层用乙酸乙酯萃取6次。合并的有机层用硫酸钠干燥、过滤、真空脱除溶剂。残渣用硅胶色谱法(甲苯/丙酮＝3∶1，1％氢氧化铵)精制，得到化合物6(110mg，三步总产率89％)。
反应6
化合物6(110mg，0.184mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)中，添加Dess-Martin试剂(220mg，0.53mmol)。反应物在室温下搅拌45分钟。用氢氧化钠(20mL，1N)和食盐水(25mL)终止反应，水层用乙酸乙酯萃取6次。合并的有机层用硫酸钠干燥、过滤、真空脱除溶剂，残渣用硅胶色谱法(甲苯/丙酮＝6∶1→3∶1，1％氢氧化铵)精制，得到化合物7(94mg，86％)。
                 实施例21
1-(4-氨基-2-丁烯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶的合成
制备A：(E)-N-(4-溴-2-丁烯基)邻苯二甲酰亚胺
1，4-二溴-2-丁烯(23g，107.9mmol)的碳酸钾(16.39g，118.7mmol)的DMF(50mL)溶液在室温下用邻苯二甲酰亚胺钾(10g，53.9mmol)处理。10分钟后，让反应混合物搅拌24小时、过滤、真空浓缩。所得到的油状物用乙酸乙酯(200mL)稀释、用饱和磷酸二氢钠水溶液(2×100mL)洗涤、干燥(MgSO4)、真空浓缩，给出一种带红色的油状物。用闪急色谱法(0～20％乙酸乙酯/己烷)精制给出5.73g标题化合物；质量(CI)m/z＝303(M+H)。
制备B：1-〔(E)-4-邻苯二甲酰亚胺基-2-丁烯基〕-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶和3-〔(E)-4-邻苯二甲酰亚胺基-2-丁烯基〕-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶
NaH(1.02g，25.4mmol)的DMF(50mL)浆状物在室温下用4-氮杂苯并咪唑(2.90g，24.4mmol)处理。10分钟后，反应混合物用(E)-N-(4-溴-2-丁烯基)邻苯二甲酰亚胺(5.7g，20.3mmol)的DMF(5mL)溶液处理30分钟。反应混合物搅拌1小时，然后通过小心添加水(5mL)使反应终止，反应混合物真空浓缩。所得到的残渣用CH2Cl2(50mL)稀释、用食盐水(2×25mL)洗涤、干燥(MgSO4)、真空浓缩，给出一种纯白色固体。用闪急色谱法(含3％NH4OH的乙酸乙酯)精制给出2.08g 3-〔(E)-4-邻苯二甲酰亚胺基-2-丁烯基〕-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶。把色谱法溶剂改变成5％甲醇/含5％NH4OH的乙酸乙酯，给出1.66g 1-〔(E)-4-邻苯二甲酰亚胺基-2-丁烯基〕-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶；质量(CI)m/z＝319(M+H)。
制备C：1-(4-氨基-2-丁烯基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶
1-〔(E)-4-邻苯二甲酰亚胺基-2-丁烯基〕-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶(2.19g，6.87mmol)的乙醇(100mL)溶液在室温下用一水合肼(3.33mL，68.7mmol)处理。10分钟后，让反应混合物升温到60℃2小时，然后冷却到25℃，再用冰浴冷却到0℃。所得到的浆状物过滤、滤液真空浓缩。用闪急色谱法(6％NH4OH/乙醇)精制，给出0.92g标题化合物；质量(CI)m/z＝211(M+H)。
                     方案7
Figure A0080908700831
                    实施例22
化合物I，式中R6＝OCH3、R13＝正丙基、X＝H、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基(表1中的化合物K)
步骤1：化合物19(方案2)，式中Ra＝CH3、R13＝正丙基、X＝H、R2＝乙酰基
式18化合物(方案2)〔式中Ra＝CH3、R13＝正丙基、X＝H、R2＝乙酰基〕(625mg，1.00mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液在-10℃在氮气下用氢化钠(矿物油中60％(重量)，80mg，2.00mmol)处理。30分钟后，所得到的反应混合物用1，1′-羰基二咪唑(490mg，3.02mmol)处理，反应混合物在-10℃搅拌2小时。该反应混合物用水(30mL)终止反应，用***(3×30mL)萃取。合并的有机层用水(30mL)和食盐水(30mL)洗涤，用硫酸镁干燥、真空浓缩，得到一种纯白色泡沫体。
步骤2：化合物I，式中R6＝OCH3、R13＝正丙基、X＝H、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基
式19化合物〔式中Ra＝CH3、R13＝正丙基、X＝H、R2＝乙酰基〕(1.00mmol)和1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基胺(570mg，3.00mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液在60℃加热24小时。让反应混合物冷却到室温，用水(30mL)稀释，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机层用水(2×30mL)和食盐水(30mL)洗涤，用硫酸镁干燥、过滤、真空浓缩，给出一种油状残渣。(2′-乙酰基I的精制可以用硅胶柱闪急色谱法(0～5％甲醇/含1～2％浓氢氧化铵的二氯甲烷)实现)。残渣溶解于甲醇(20mL)中，所得到的混合物在室温下搅拌18小时。反应混合物真空浓缩，I的精制用硅胶闪急色谱法(二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵＝95∶5∶0.5)实现，提供标题化合物(487mg，61％)。
                       实施例23
化合物I，式中R6＝OCH3、R13＝正丙基、X＝F、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基(表1中化合物O)
标题化合物如实施例21中所述那样制备，所不同的是用式18化合物(方案2)〔式中Ra＝CH3、R13＝正丙基、X＝F、R2＝乙酰基〕代替式18化合物(方案2)〔式中Ra＝CH3、R13＝正丙基、X＝H、R2＝乙酰基〕，产率＝25％。
按照与实施例22中所述类似的程序和方法，也可以制备下列化合物。
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝喹啉-4-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝喹啉-4-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝喹啉-4-基丁基(A)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝喹啉-4-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基(B)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝吡啶-4-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝吡啶-4-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝吡啶-4-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝吡啶-4-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基(C)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基(D)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝正丙基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基(P)
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝正丙基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基(H)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-1-基丁基(M)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝嘌呤-7-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝嘌呤-7-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝嘌呤-9-基丁基(N)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝嘌呤-9-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁-2-烯基(L)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁-2-烯基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝正丙基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基(Q)
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基(E)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基(F)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基
式I化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基
式I化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基(G)
式I化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
                   实施例24
2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-11-脱氧-11-氨基-2-氟-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯
向2′-O-苯甲酰基-6-O-烯丙基-11-氨基-3-脱克拉定糖基-11-脱氧-3-氧代-15-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯(100mg，0.132mmol，1.0当量)的THF溶液(0.5mL)中，在-78℃添加叔丁醇钾(0.3mL，1M，2.3当量)的THF溶液。然后，反应混合物在-60℃～-40℃保持20分钟，随后在-78℃导入N-氟苯磺酰亚胺(46mg，0.146mmol，1.1当量)的THF(0.2mL)溶液。反应混合物在-70℃～-40℃保持1小时，然后用1.5小时让它从-70℃回升到0℃。然后，用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液、水和食盐水洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、和浓缩。粗产品的闪急色谱法(己烷/丙酮＝4∶1+1％Et2N)精制给出76mg(74％)所希望产品。
                13C-NMR(100.6MHz，CDCl3)δ217.5，203(d，J＝27.6Hz)，165.5(d，J＝23.8Hz)，165.2，157.5，135.4，132.9，130.4，129.8，128.3，118.0，101.7，98(d，J＝207Hz)，83.5，79.1，78.6，72.1，69.4，64.6，63.5，57.5，44.2，40.7，40.4，38.5，37.3，31.4，31.3，24.9(d，J＝24.3Hz)，21.0，20.7，19.4，17.7，15.0，13.9，13.7，13.3.
                  实施例25
2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-10，11-脱水-2-氟-15-甲基红霉素A的合成
2′-O-苯甲酰基-6-O-炔丙基-10，11-脱水-3-脱克拉定糖基-3-氧代-15-甲基红霉素A的四氢呋喃溶液在惰性气氛下冷却到-78℃，用1.0M叔丁醇钾的四氢呋喃溶液处理。混合物搅拌5分钟，用2小时时间分三批添加N-氟苯磺酰亚胺的四氢呋喃溶液。添加后，让反应物回升到常温，再保持5小时。添加K2CO3水溶液，混合物用CH2Cl2萃取。有机萃取液合并、用MgSO4干燥、过滤、蒸发。硅胶色谱法精制给出该产品。
                 实施例26
15-(2-(3-喹啉基)乙基)-3-脱克拉定糖基-3-氧代-6-O-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯
Figure A0080908700901
(A)15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A-9-肟
15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A(25.7g，28.9mmol，1.00当量)悬浮在42mL 2-丙醇中。添加羟胺(50％(重量)水溶液，22.2mL，375mmol，13.0当量)。混合物搅拌直至均匀。添加冰HOAc。该溶液在50℃搅拌11小时。添加饱和NaHCO3。混合物浓缩、用CHCl3(4×400mL)萃取、用NaHCO3和水洗涤。合并的水层用400mL CHCl3反萃。合并的有机相用食盐水洗涤、用Na2SO4干燥、过滤、浓缩，得到粗材料。此材料未进一步精制就转入下一步。
(B)15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A-9-(异丙氧基环己基)肟
上一步的粗15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A-9-肟溶解在72mL无水CH2Cl2中，滴加1，1-二异丙氧基环己烷(29.2mL，140mmol，4.86当量)。滴加对甲苯磺酸吡啶鎓(10.5g，41.9mmol，1.45当量)的CH2Cl2(36mL)溶液。15小时后添加二氯甲烷(200mL)。溶液用NaHCO3(2×100mL)和水(100mL)洗涤。合并的水相用100mLCH2Cl2反萃。合并的有机层用食盐水洗涤、用MgSO4干燥、过滤、浓缩。该材料用硅胶色谱法精制，给出所希望的产品。
(C)2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A-9-(异丙氧基环己基)肟
将15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A-9-(异丙氧基环己基)肟(22.2g，21.3mmol，1.0当量)溶解于54mL无水CH2Cl2中，用冰/水浴冷却。滴加氯三甲基甲硅烷(4.05mL，31.9mmol，1.5当量)、N-(三甲基甲硅烷基)咪唑(7.81mL，53.2mmol，2.5当量)、和CH2Cl2(18mL)的混合物。完全添加后反应物搅拌15分钟，用600mL EtOAc终止反应。混合物用饱和NaHCO3(2×200mL)、水(200mL)、和食盐水(200mL)洗涤。有机层用MgSO4干燥、过滤、浓缩，得到粗产品，未进一步精制就转入下一步。
(D)2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A-9-(异丙氧基环己基)肟
粗2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A-9-(异丙氧基环己基)肟溶解于无水四氢呋喃(41mL)中，冷却到10℃。添加无水二甲基亚砜(41.4mL)和甲基溴(2.0M***溶液，20.7mL，41.4mmol，2.0当量)。1.0M叔丁醇钾的THF溶液(41.4mL，41.4mmol，2.0当量)用无水二甲基亚砜(41.4mL)稀释。此溶液以0.5当量/小时的速率添加到该反应混合物中。反应用TLC(甲苯/丙酮＝5∶1)监测。通过添加乙酸乙酯(200mL)和饱和NaHCO3(70mL)使反应终止。该混合物转移到分液漏斗中，用850mL乙酸乙酯稀释。有机相用饱和NaHCO3、水、和食盐水(各300mL)洗涤。所得到的乳液用硅藻土过滤。然后，分离的有机相用MgSO4干燥、过滤、浓缩，给出粗产品，未进一步精制就转入下一步。
(E)6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A-9-肟
上一步的粗2′，4″-二(O-三甲基甲硅烷基)-6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A-9-(异丙氧基环己基)肟溶解于乙腈(110mL)中。缓缓添加用水(55mL)稀释的冰乙酸(67mL)。该溶液搅拌8小时。添加甲苯和2-丙醇，该溶液浓缩。然后将产品溶解于甲苯中、浓缩2次，给出粗产品，未进一步精制就转入下一步。
(F)6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A
上一步的粗6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A-9-肟和亚硫酸氢钠(23.1g，113mmol，5.63当量)置于一个配备冷凝管的圆底烧瓶中，用N2冲刷。添加乙醇(140mL)和水(140mL)。滴加甲酸(3.75mL，95.4mmol，4.77当量)。混合物在80℃搅拌4.5小时。溶液回到室温之后，添加饱和NaHCO3。用6N NaOH把pH调整到9～10。然后，混合物用乙酸乙酯(3×400mL)萃取。合并的有机相用饱和NaHCO3、然后用水(各250mL)洗涤。合并的水相用乙酸乙酯(400mL)反萃。合并的有机相用食盐水洗涤、用MgSO4干燥、过滤、浓缩，给出粗产品，不进一步精制就转入下一步。纯产品可以用硅胶色谱法得到。
(G)6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)-3-脱克拉定糖基红霉素A
粗6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A在280mL0.5M HCl中搅拌3小时。用6N NaOH把pH调整到9～10。沉淀物用真空过滤法收集、用水洗涤。母液用3×400mL乙酸乙酯萃取。合并的有机相用饱和NaHCO3和水洗涤。合并的水相用乙酸乙酯反萃。合并的有机相用食盐水洗涤、用MgSO4干燥、过滤、浓缩。合并的产品用硅胶色谱法精制，得到白色固体状所希望产品。
(H)2′-O-乙酰基-6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)-3-脱克拉定糖基红霉素A
6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)-3-脱克拉定糖基红霉素A(11.5g，15.5mmol，1.0当量)溶解于40mL乙酸乙酯中。滴加乙酸酐(2.92mL，31.0mmol，2.0当量)的乙酸乙酯(35mL)溶液。反应物搅拌30分钟，然后浓缩。该材料用硅胶色谱法精制，给出白色固体状所希望产品。
(I)2′-O-乙酰基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A
2′-O-乙酰基-6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)-3-脱克拉定糖基红霉素A(10g，12.8mmol，1.0当量)和1-〔3-(二甲胺基)丙基〕-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(16.51g，86.1mmol，6.7当量)合并于一个圆底烧瓶中，用N2冲刷。让这些固体溶解于无水CH2Cl2(64mL)中，用冰水浴冷却。添加无水DMSO(15.5mL，218mmol，17当量)。用3小时时间添加三氟乙酸吡啶鎓(12.14g，62.9mmol，4.9当量)CH2Cl2(47mL)溶液。该溶液用600mL乙酸乙酯稀释、用饱和NaHCO3、水、和食盐水(各200mL)洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、浓缩。硅胶色谱法精制给出所希望产品。
(J)2′-O-乙酰基-3-氧代-3-脱克拉定糖基-11-甲磺酰基-6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A
2′-O-乙酰基-3-脱克拉定糖基-3-氧代-6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A溶解于新蒸馏吡啶(35mL)中，用冰水浴冷却。滴加甲磺酰氯。让反应物回到常温，搅拌过夜。添加乙酸乙酯(700mL)，该溶液用饱和NaHCO3、水、和食盐水(各200mL)洗涤。有机相用MgSO4干燥、过滤、浓缩。硅胶色谱法精制给出所希望产品。
(K)2′-O-乙酰基-10，11-脱水-3-脱克拉定糖基-3-氧代-6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A
2′-O-乙酰基-3-氧代-3-脱克拉定糖基-11-甲磺酰基-6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A(6g，6.98mmol，1.0当量)溶解于丙酮(23mL)中。滴加1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(5.22mL，34.9mmol，5.0当量)。反应物在常温下搅拌4小时，然后浓缩。硅胶色谱法精制给出所希望化合物。
(L)15-(2-(3-喹啉基)乙基)-3-脱克定定糖基-3-氧代-6-O-甲基红霉素A11，12-环状氨基甲酸酯
2′-O-乙酰基-10，11-脱水-3-脱克拉定糖基-3-氧代-6-O-甲基-15-(2-(3-喹啉基)乙基)红霉素A在干燥四氢呋喃中的溶液添加到NaH(3当量)在THF中冷却到-10℃的搅拌悬浮液中。向此中添加羰基二咪唑(10当量)在THF/DMF(5∶3)中的溶液，混合物搅拌2小时。让反应物回升到常温，用浓氨水稀释、搅拌过夜。混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3水溶液和食盐水洗涤，用MgSO4干燥、蒸发。硅胶色谱法精制，给出该产品。
                        实施例27
                     离体易感性试验
用好气性生长菌易感性试验的NCCLS液体培养基微稀释程序测定最低抑制浓度(MIC)(全国临床实验室标准委员会，1997年。好气性生长菌稀释抗微生物易感性试验方法第4版。已批准的标准。NCCLS文件M7-A4。全国临床实验室标准委员会，宾夕法尼亚州维拉诺瓦)。在实验当天配制储备溶液，将适当份额添加到调节了阳离子的Mueller-Hinton液体培养基(CAMHB)或嗜血杆菌试验培养基中。准备2倍系列稀释液，添加到微滴平皿的孔中。最终试验浓度范围为16～0.015μg/mL。除肺炎链球菌和流感嗜血杆菌外，所有细菌从隔液平皿上生长接种的细菌液体培养基培养物都在35℃培养，然后调整到KirbyBauer标准，用CAMHB稀释以达到最终接种物浓度为大约5×105CFU/mL。肺炎链球菌和流感嗜血杆菌的接种物是通过直接悬浮来自隔夜平皿的菌落、调整浊度和像以上那样稀释来制备的。肺炎链球菌培养基补加了2.5％溶解马血。肺炎链球菌和流感嗜血杆菌的所有平皿都在周围空气中在35℃培养20～24小时，而所有其它细菌的平皿都在周围空气中在35℃培养16～20小时。
MIC终点是通过读取完全抑制了试验细菌生长的试验化合物最低浓度来确定的。表1.所选择的本发明化合物(I)的1H-NMR和质谱数据
Figure A0080908700951
Figure A0080908700952
Figure A0080908700961
Figure A0080908700971
                                    表2.离体易感性(MIC，μg/mL)
化合物                                     微  生  物
  E.coliOC2605  S.aureusATCC29213 E.faecalisATCC29212  S.pneumoniaeATCC49619 H.influenzaeOC4883
红霉素    ＞16     0.5     1     0.06     1
A    ＞16     0.25     0.12     0.03     8
B    ＞16     0.5     0.25     0.03     16
C    ＞16     2     0.5     0.12     ＞16
D    ＞16     1     0.12     0.03     8
E    ＞16     0.5     0.12     0.03     8
F    ＞16     0.5     0.12     0.06     8
H    ＞16     1     0.25     0.06     8
J    ＞16     0.5     0.25     0.06     8
K    4     0.25     0.06     ≤0.015     2
L    4     0.25     0.12     0.03     4
M    8     0.25     0.06     0.03     1
N    16     0.5     0.12     0.06     4
O    2     0.12     0.03     ≤0.015     ≤0.25
P    ＞16     ＞16     16     2     ＞16
Q    ＞16     8     1     0.25     ＞16
式I化合物，式中R6＝0-3-(喹啉-3-基)丙-2-烯基，R13＝正丙基，X＝H，R＝H    8     0.12     0.06     ≤0.015     1
式I化合物，式中R6＝0-3-(6-氟喹啉-3-基)丙-2-烯基，R13＝正丙基，X＝H，R＝H     16     0.12     0.06     ≤0.015     4
式I化合物，式中R6＝0-3-(6-氯喹啉-3-基)丙-2-烯基，R13＝正丙基，X＝H，R＝H     16     0.25     0.12     0.03     8

Claims (76)

1.式I化合物：
Figure A0080908700021
式中
X是H、F、Cl、Br、或I；
R2选自H、-COCH3和-CO苯基；
R6选自H和-ORa，式中Ra是有取代或无取代的烷基(C1-C10)、有取代或无取代的链烯基(C2-C10)或者有取代或无取代的炔基(C2-C10)；
R13选自H、(C1-C8)烷基、1-链烯基(C2-C8)、1-炔基(C2-C8)、有取代的(C1-C8)烷基、和-CH2-R″，式中R″选自H、(C1-C8)烷基、有取代的(C1-C8)烷基、环烷基、链烯基(C2-C8)、炔基(C2-C8)、芳基、有取代的芳基、(C1-C8)烷基芳基、杂环基、和有取代的杂环基；先决条件是R13不能是乙基；
R选自H、芳基、有取代的芳基、杂环基、有取代的杂环基、环烷基、C1-C8烷基和C1-C8链烯基，也可以有一个或多个选自下列一组的取代基取代：芳基、有取代的芳基、杂环基、有取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基；
及其医药上可接受的盐、酯和药物前体形式。
2.式I化合物，式中：
X是H或F；
R2同以上所述，
R6选自H和(C1-C8)烷氧基；
R13选自H、(C1-C8)烷基、1-链烯基(C2-C8)(尤其乙烯基)、1-炔基(C2-C8)、卤烷基、和-CH2-R″，式中R″选自H、(C1-C8)烷基、卤烷基、1-链烯基(C2-C8)、1-炔基(C2-C8)、苯基、和(C1-C8)烷基苯基(例如苄基和苯乙基)；先决条件是R13不能是乙基；
R选自H、芳基、有取代的芳基、杂环基、有取代的杂环基、环烷基、C1-C8烷基和C1-C8链烯基，也可以有一个或多个选自下列一组的取代基取代：芳基、有取代的芳基、杂环基、有取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基；
以及其医药上可接受的盐、酯和药物前体形式。
3.权利要求2的化合物，式中R选自H、苯基和C1-C8烷基，也可以有一个或多个选自下列一组的取代基取代：苯基、羟基、和C1-C6烷氧基以及下列有取代的杂环基基团
4.下式化合物：式中：
X是H、F、Cl、Br、或I；
R6选自H和(C1-C8)烷氧基；
R13选自H、(C1-C8)烷基、1-链烯基(C2-C8)、1-炔基(C2-C8)、有取代的(C1-C8)烷基、和-CH2-R″，式中R″选自H、(C1-C8)烷基、有取代的(C1-C8)烷基、环烷基、链烯基(C2-C8)、炔基(C2-C8)、芳基、有取代的芳基、(C1-C8)烷基芳基、杂环基、和有取代的杂环基；先决条件是R13不能是乙基。
5.下式化合物：式中：
X是H、F、Cl、Br、或I；
R6选自H和(C1-C8)烷氧基；
R13选自H、(C1-C8)烷基、1-链烯基(C2-C6)、1-炔基(C2-C8)、有取代的(C1-C8)烷基、和-CH2-R″，式中R″选自H、(C1-C8)烷基、有取代的(C1-C8)烷基、环烷基、链烯基(C2-C8)、炔基(C2-C8)、芳基、有取代的芳基、(C1-C8)烷基芳基、杂环基、和有取代的杂环基；先决条件是R13不能是乙基；和
R2是氢或一个羟基保护基。
6.权利要求1的化合物，其中，有取代的杂环基选自下式的残基：
7.权利要求1的化合物，式中：
X是H或F；
R2同权利要求1中所述，
R6是-ORa，式中Ra是有取代或无取代的烷基(C1-C10)、有取代或无取代的链烯基(C2-C10)、或者有取代或无取代的炔基(C2-C10)；
R13选自H、(C1-C8)烷基、1-链烯基(C2-C8)、1-炔基(C2-C8)、卤烷基、和-CH2-R″，式中R″选自H、(C1-C8)烷基、卤烷基、1-链烯基(C2-C8)、1-炔基(C2-C8)、苯基、和(C1-C8)烷基苯基；先决条件是R13不能是乙基；
R是H；
及其医药上可接受的盐、酯和药物前体形式。
8.权利要求1的化合物，式中：
X是H、F、Cl、Br、或I；
R2选自H、-COCH3和-CO苯基；
R6选自H和-O-Ra，式中Ra选自也可以有取代的3-(喹啉-3-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-(喹啉-3-基)丙-2-炔基、也可以有取代的3-(喹啉-6-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-(喹啉-6-基)丙-2-炔基、也可以有取代的3-(喹啉-7-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-苯基丙-2-烯基、也可以有取代的3-(萘-1-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-(萘-1-基)丙-2-炔基、也可以有取代的3-(萘-2-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-(萘-2-基)丙-2-炔基、也可以有取代的5-苯基戊-4-烯-2-炔基、也可以有取代的3-(呋喃-2-基)丙-2-炔基、也可以有取代的3-(噻吩-2-基)丙-2-烯基、也可以有取代的3-(咔唑-3-基)丙-2-烯基、和也可以有取代的3-(喹喔啉-6-基)丙-2-烯基；
R13选自H、(C1-C8)烷基、1-链烯基(C2-C8)、1-炔基(C2-C8)、有取代的(C1-C8)烷基、和-CH2-R″，式中R″选自H、(C1-C8)烷基、有取代的(C1-C8)烷基、环烷基、链烯基(C2-C8)、炔基(C2-C8)、芳基、有取代的芳基、(C1-C8)烷基芳基、杂环基、和有取代的杂环基；先决条件是R13不能是乙基；
R选自H、芳基、有取代的芳基、杂环基、有取代的杂环基、环烷基、C1-C8烷基、和C1-C8链烯基，也可以有一个或多个选自下列一组的取代基取代：芳基、有取代的芳基、杂环基、有取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基；
及其医药上可接受的盐、酯和药物前体形式。
9.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝喹啉-4-基丁基。
10.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝喹啉-4-基丁基。
11.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝喹啉-4-基丁基。
12.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝喹啉-4-基丁基。
13.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基。
14.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基。
15.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基。
16.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基。
17.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
18.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
19.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
20.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
21.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝吡啶-4-基丁基。
22.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝吡啶-4-基丁基。
23.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝吡啶-4-基丁基。
24.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝吡啶-4-基丁基。
25.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
26.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
27.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
28.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
29.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
30.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
31.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
32.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
33.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝正丙基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
34.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝正丙基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
35.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
36.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
37.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-1-基丁基。
38.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-1-基丁基。
39.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-3-基丁基。
40.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-3-基丁基。
41.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝嘌呤-7-基丁基。
42.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝嘌呤-7-基丁基。
43.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝嘌呤-9-基丁基。
44.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝嘌呤-9-基丁基。
45.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁-2-烯基。
46.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁-2-烯基。
47.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝正丙基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基。
48.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基。
49.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
50.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝正丙基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
51.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
52.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
53.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
54.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝正丙基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
55.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基。
56.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基。
57.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基。
58.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-苯基咪唑-1-基丁基。
59.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
60.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
61.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
62.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-(吡啶-3-基)咪唑-1-基丁基。
63.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基。
64.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基。
65.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基。
66.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝4-(嘧啶-5-基)咪唑-1-基丁基。
67.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
68.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝乙烯基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
69.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
70.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝乙烯基、R＝3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基丁基。
71.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝H、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
72.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝H、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
73.权利要求1的化合物，式中X＝H、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
74.权利要求1的化合物，式中X＝F、R6＝OCH3、R13＝甲基、R＝1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基丁基。
75.细胞感染治疗用医药组合物，包含与一种医药上可接受载体配合的、从权利要求1中选择的、某一有效量的化合物。
76.哺乳动物中细菌感染的治疗方法，包含向蒙受此类感染的此类哺乳动物给药某一治疗有效量的、从权利要求1中选择的化合物。
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