CN1302638A - 一种清热解毒抗感染中药及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种清热解毒抗感染中药及其制备方法,以金银花、大青叶、蒲公英、鱼腥草为原料,按1:1:1:1的重量配比制成药剂,具有清热解毒、清肺凉血、消肿排脓、利尿通淋作用,药效学研究证明其能抗菌、抗病毒、抗内毒素、解热、抗炎,并能调节免疫功能,有利于临床治疗温热病(包括一些急性感染性疾病),特别是风温肺热证(包括感冒、流行性感冒、呼吸道感染等)。本制剂临床有效,价格低廉,无毒副作用和不良反应。
Description
本发明涉及中药和中药的制备方法，特别是涉及清热解毒抗感染中药和其制备方法。
临床上用于治疗一些急性感染性疾病的中药为数不多，开发新的抗感染性疾病的中药成为当前药物研究的重要课题。
本发明的目的是提供一种清热解毒抗感染中药，使该其具有清热作用专，解毒作用强，主治病症更广，且特别适用于治疗风温肺热证(包括感冒、流行性感冒和急性呼吸道感染等)，具有抗菌、抗病毒、抗内毒素、解热、抗炎、调节免疫功能等特点，可作为临床上治疗一些感染性疾病，特别是急性感染性疾病的中药。
本发明的另一个目的是提供本发明清热解毒抗感染中药的制备方法，使依该方法制备的中药疗效和作用明显优于各原料药材之单独作用，也显著优于本发明所使用的原料药材按现有常规方法制备之制剂的作用和疗效。
本发明提供的清热解毒中药，是以金银花、大青叶、蒲公英、鱼腥草为原料，按1∶1∶1∶1的重量配比制成的药剂。该药剂可以是任何一种药剂学上所说的剂型，特别是颗粒剂，它是按以下方法制备的：(1)提取挥发油：取鱼腥草，加10～15倍量水，浸泡2小时，蒸馏5小时得挥发油，溶解于5～10倍乙醇中，密封，避光保存备用；(2)取金银花、大青叶、蒲公英加15倍量水浸泡45分钟后，煎煮1.5小时，取汁，药渣再加12倍量水煎煮1.5小时，取汁，合并煎液，静置，过滤；滤液减压浓缩至相对密度为1.10(60～65℃)，缓缓加入约2倍量乙醇，边加边搅拌，使含醇量为65％(ml/ml)，静置沉淀；取上清液，沉淀用少量65％乙醇洗涤，过滤，洗液与滤液合并，减压回收乙醇至无醇味，得相对密度为1.05(60～65℃)清膏；(3)水沉：向清膏加水1倍量，混匀后静置沉淀，过滤，弃渣留滤液调节pH值为酸性，可以20％氢氧化钠溶液对水沉滤液调节pH值为5.0～5.5，减压浓缩至相对密度为1.35～1.38(80～90℃)的清膏；(4)制软材制颗粒：取上述清膏1份，加入75～85％的乙醇，使含醇量约为15～20％，充分混匀，加糊精2.5份，天冬糖0.02份，制软材，制颗粒，干燥，其颗粒干燥条件是：湿颗粒烘烤温度为60～70℃；干颗粒烘烤温度为60～70℃，烘烤时间为4小时；(5)将鱼腥草挥发油乙醇液均匀喷入颗粒中，密闭。
本发明中药经药效学研究证明有下列作用：
1．抗菌作用：
用液体稀释法试管内孵育试验，观察本发明中药对一些革兰氏阳/阴性菌的抑制作用，结果发现本发明中药对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、D群非肠球菌、肺炎克雷伯氏菌、伤寒杆菌、大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌、产气肠杆菌等有一定的抑制作用(见表1)。表1 本发明中药对常见细菌的抑制作用菌株 菌名 试管号 1 2 3 4 5 6 7来源 药物浓度(g/ml) 3.3 1.65 0.825 0.4 0.2 0.1 (对照)标 金黄色葡萄球菌 - - - + + + +准 ATCC 25923株 绿脓假单胞菌 - - + + + + +
ATCC 27853
金黄色葡萄球菌 - - - + + + +
表皮葡萄球菌 - - - - - + +临 D群非肠球菌 - - - - - + +床 绿脓假单胞菌 - - + + + + +分 奇异变形杆菌 - - - + + + +离 肺炎克雷伯氏菌 - + + + + + +株 产气肠杆菌 - + + + + + +
大肠艾希氏菌 - - + + + + +
伤寒杆菌 - - + + + + +
硝酸盐阴性杆菌 - - + + + + +
注：+为细菌生长 -为细菌不生长
2．抗病毒作用：
以病毒唑作为对照，从小鼠体内和组织培养可见本发明中药能抗流感病毒(FM1)、呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒(HSV)；体外试验可见本品能抗巨细胞病毒(CMV)，但无抗柯萨奇病毒(COXB3)作用。结果见表2～9。表2 药物在鸡胚细胞上对FM1的抑制作用
RDQ组(mg/ml) 病毒唑组(mg/ml)FM1组 正常细胞组
1.25 2.5 5 0.05mg/ml血凝效价 1∶128 1∶32 1∶8 0 0 0表3 药物在昆明小鼠体内对FM1的抑制作用(各组n=10)
RDQ组 病毒唑组FM1组 正常对照组
1g/kg/d 2g/kg/d 4g/kg/d 10mg/kg/d保护率 0 30％ 70％ 90％ 100％ 100％P值 / ＞0.05 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01表4 药物在组织培养上对RSV的抑制作用分组 n 空斑单位(PFu/ml×104) 抑制率
(x±S) (％)RSV+RDQ1.25mg/ml 10 103.5±1.04* 49.7RSV+RDQ2.5mg/ml 10 45.8±1.17* 77.8RSV+RDQ5mmg/ml 10 0* 100RSV+病毒唑0.05mg/ml 10 0* 100RSV对照组 10 205.6±1.36 0正常细胞对照组 10 0 /*与RSV组比较P＜0.01.表5 药物在Balb/c小鼠体内对RSV的抑制作用分组 n 空斑单位(PFu/g×102) 抑制率
(x±S) (％)RSV+1g/kg/d RDQ 10 29.5±1.49* 35.8RSV+2g/kg/d RDQ 10 14.5±0.97* 68.4RSV+4g/kg/d RDQ 10 0* 100RSV+10mg/kg/d病毒唑10 0* 100RSV对照组 10 45.9±1.34 0正常小鼠对照组 10 0 /*与RSV组比较P＜0.01.表6 药物在Vero细胞上对HSV-I的抑制作用(各组n=4)热毒清组 无环鸟苷组(mg/ml) (mg/ml)病毒组正常对照组
5 2.5 1.25 0.625 0.3125 1 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.03125CPE 0 0 2 4 4 0 0 0 0 2 4 4 0注：CPE(细胞病变)
表7 药物在昆明小鼠体内对HSV-I的抑制作用(各组n=10)
热毒清 无环鸟苷
(g/kg/d) (mg/kg/d) 病毒组 正常小鼠
2 4 15 30保护率(％)0 60* 60* 80* 0 100
*与病毒组比较P＜0.01表8 药物在HEL细胞上对CMV AD169的抑制作用(各组n=4)本发明中药组(mg/ml) 丙氧鸟苷组(mg/ml) 病毒组 正常细胞对照
20 10 5 2.5 1.25 100 50 25 12.5 6.25CPE 0 0 2 4 4 0 0 0 2 4 4 0表9 药物在Vero细胞上对COXB3的抑制作用(各组n=4)本发明中药组(mg/ml) 病毒唑组(mg/ml) 病毒组 正常细胞组
5 2.5 1.25 0.625 0.1 0.05 0.025 0.0125 0.0625CPE 3 4 4 4 0 0 0 2 4 4 0
3.抗内毒素作用：
体外试验在电镜下观察到本发明中药能使大肠杆菌O111B4内毒素的网状结构解聚，呈杆状、短片状。体内实验塑制内毒素性弥散性血管内凝血(DIC)家兔模型，可见本发明中药能明显减少肾小球微血栓的形成数，和降低肾小球微血栓的密度。从体内、外实验表明本发明中药具有抗内毒素作用(见表10～11)。表10 本发明中药体外对内毒素作用的电镜观察结果处理 每次观察 各次发现被裂解内毒素的网眼数 平均发现被裂解 结果
网眼数 第一次 第二次 第三次 内毒素的网眼数 判定Tris buffer 5×2 1 1 2 1.33 (-)本发明中药 5×2 7 7 8 7.33 (+)Polymyxin B 5×2 10 10 10 10 (+)注：(-)无裂解作用 (+)有裂解作用； Polymyxin B(多粘菌素B)表11本发明中药对内毒素性DIC家兔肾小球微血栓形成的影响
肾小球 DIC发生率 含微血栓肾小球 肾小球含微血栓密度
观察数 ％ ％(x±SE) ％(x±SE)蒸馏水组 10×50 90.0 74.2±3.8 56.5±1.2本发明中药小剂量组9×50 77.8 66.7±4.9* 54.6±1.4本发明中药中剂量组10×50 70.0 56.0±4.9** 49.5±1.2**本发明中药大剂量组9×50 66.7 60.4±5.3** 51.1±1.4**
Dex组 10×50 40.0 30.2±4.2** 23.1±0.9**
正常对照组 8×50 0 0 0
注：与蒸馏水组比*P＜0.05**P＜0.01；Dex(***)
4．解热作用：
给日本大耳白兔注射大肠杆菌O111B4内毒素，和给大鼠注射啤酒酵母菌致热，实验表明本发明中药有明显的解热作用(见表12～13)。
表12本发明中药对LPS所致家兔发热的解热作用(△T,X±S,℃)(每组n=6)给药后△T组别 剂量 给药前△T(g/kg) 1h 2h 3h 4h 5h蒸馏水 1.41±0.18 1.87±0.25 1.82±0.29 1.08±0.38 0.60±0.33 0.40±0.27
丨5 1.34±0.24 1.40±0.53 1.40±0.28 0.84±0.44 0.58±0.30 0.50±0.31本发明中药10 1.37±0.27 1.02±0.26* 1.02±0.39* 0.67±0.34 0.48±0.26 0.34±0.21
20 1.40±0.20 1.54±0.53 1.54±0.44 0.74±0.33 0.36±0.21 0.21±0.30阿斯匹林0.2 1.42±0.25 0.55±0.24**0.50±0.42**0.25±0.23**0.28±0.21 0.28±0.21与蒸馏水比较 *P＜0.05 **P＜0.01表13 本发明中药对啤酒酵母致大鼠体温升高的降温作用(△T，攽X敀±S,℃)(n=8)剂量 发热后 给药后△T组别 (g/kg) △T1h 2h 3h 4h 5h蒸馏水 1.34±0.28 1.44±0.31 1.33±0.35 1.34±0.42 1.27±0.33 1.02±0.22丨34.5 1.28±0.25 1.29±0.35 1.03±0.23 0.80±0.29* 0.77±0.25**0.62±0.34*本发明中药23.0 1.29±0.16 1.28±0.32 1.09±0.30 1.01±0.22 0.98±0.25 0.91±0.2515.3 1.34±0.12 1.38±0.22 1.29±0.37 1.20±0.44 1.08±0.42 1.03±0.32阿斯匹林0.2 1.34±0.24 1.03±0.32*0.63±0.32**0.66±0.33** 0.44±0.32***0.31±0.22***与蒸馏水组比较 *P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001
5．抗炎作用：
给大鼠足跖皮下注射角叉菜致炎性水肿，可见本发明中药能抑制该模型的急性炎症反应；给大鼠背部皮内注射组织胺，可见本发明中药能抑制组织胺所致毛细血管通透性增加。表明本发明中药有明显的抗炎作用(见表14～15)。
表14本发明中药对角叉莱胶致大鼠足趾肿账的影响(n=8)
剂量 肿胀度 (ml,x±s)组别 (g/kg)
1h 2h 4h 6h蒸馏水 0.17±0.07 0.34±0.08 0.67±0.16 0.79±0.19
丨48.0 0.09±0.05 0.20±0.13* 0.49±0.10 0.63±0.15本发明中药30.0 0.16±0.04 0.25±0.12 0.63±0.13 0.69±0.20
18.8 0.16±0.09 0.27±0.13 0.66±0.18 0.80±0.17强的松 0.02 0.08±0.04** 0.07±0.04**** 0.30±0.22** 0.48±0.23*注：与蒸馏水组比较 *P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001表15本发明中药对组织胺所致大鼠皮肤毛细血管
通透性增加的抑制作用(n=9)组别 剂量(g/kg) 吸收度(A)X±S蒸馏水 0.31±0.15
48 0.19±0.07*本发明中药 丨 30 0.18±0.08*
18.8 0.21±0.06强的松 0.02 0.17±0.07*与蒸馏水组比较 *P＜0.05
6．对免疫功能的影响：
给小鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX)作为免疫抑制的模型，观察本发明中药对
下述指标的影响，可见其有良好的免疫调节作用：
(1)腹腔巨噬细胞吞噬试验：本发明中药组巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数明显高于CTX组，表明本发明中药有逆转巨噬细胞吞噬功能低下的作用(见表16)。
表16.本发明中药(JY)对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响：(X±S)组 别 例数 吞噬率(％) 吞噬指数正常对照 12 62.70±20.39 3.57±0.93CTX 11 37.19±9.22*** 3.57±0.73CTX+LMS 11 58.00±15.37△△ 4.51±1.00△CTX+JY小剂量 11 42.72±12.92 4.83±0.89△△CTX+JY中剂量 11 67.56±10.98△△△5.37±1.17△△△CTX+JY大剂量 11 68.05±10.15△△△6.27±1.53△△△
***P＜0.001，与正常对照组比较
△P＜0.05 △△P＜0.01 △△△P＜0.001，与CTX组比较(1)小鼠血清溶菌酶含量测定：JY组血清溶菌酶含量明显高于CTX组，表明JY有逆转血清溶菌酶含量低下的作用(见表17)。表17.本发明中药(JY)对小鼠血清溶菌酶含量的影响：(X±S)组 别 例数 溶菌酶含量(u/ml)正常对照 12 2140.60±330.93CTX 11 1582.81±305.10**CTX+LMS 11 2066.63±283.60△△CTX+JY小剂量 11 1687.44±624.53CTX+JY中剂量 11 1721.15±312.64CTX+JY大剂量 11 2007.80±419.00△△与正常组比较 **P＜0.01，与CTX组比较 △△P＜0.01
(3)对抗体形成细胞的影响：本发明中药组抗体形成细胞明显高于CTX组，表明本发明中药有逆转抗体形成细胞功能低下的作用(见表18)。
表18.本发明中药(JY)对小鼠抗体形成细胞的影响(X±S)组别 例数 OD值正常对照 14 1.428±0.229CTX 14 0.885±0.050***CTX+LMS 14 0.930±0.050△CTX+JY小剂量 14 0.920±0.030△CTX+JY中剂量 14 0.928±0.038△CTX+JY大剂量 14 0.900±0.030
与正常对照组比较 ***P＜0.001，与CTX组比较 △P＜0.05
(4)迟发型超敏反应-小鼠足垫肿胀试验：本发明中药(JY)组足垫肿胀厚度明显高于CT组，表明本发明中药(JY)有逆转迟发型超敏反应低下的作用(见表19)。
表19.本发明中药(JY)对小鼠迟发型超敏反应的影响(X±S)组别 例数 足垫肿胀厚度(mm)正常对照 15 0.757±0.230CTX 14 0.434±0.260*CTX+LMS 15 0.987±0.226△△△CTX+JY小剂量 15 0.941±0.245△△△CTX+JY中剂量 15 0.917±0.234△△△CTX+JY大剂量 15 0.814±0.260△△△
与正常对照组比较*P＜0.001，与CTX组比较△△△P＜0.001
经急性毒性试验和长期毒性试验还证明，本发明之中药制剂无毒性和明显的副作用，使用安全。本发明中药四种原料均系无毒药物，亦无十八反及十九畏的配伍禁忌，且非妊娠禁忌用药，对于老人、幼儿、孕妇用之均无顾虑，使用是安全的。
本发明中药的临床疗效：治疗炎性急腹症200例有效率为82.5％，治疗多种急性细菌/病毒感染，有效率为85.8％，显效率均在70％左右。
综合以上多方面实验表明，本发明之中药临床上其所以治疗一些感染性疾病有良好效果，正由于其具有抗菌、抗病毒、抗内毒素、解热、抗炎，特别是与其能调节免疫功能等作用的结果，而本发明中药所用各单味原料药，以及现有制备方法之药剂则无如此显著作用和疗效。
图1为本发明药物制备方法工艺流程图。
实施例
(1)取处方中的鱼腥草，加水10～15倍浸泡2小时，蒸馏5小时，收集挥发油0.5ml/kg以上，溶解于5～10倍乙醇中，密封，避光保存备用。
(2)取处方中的金银花、大青叶、蒲公英加15倍量水浸泡45分钟后，煎煮1.5小时，取汁，药渣再加12倍量水煎煮1.5小时，取汁，合并煎液，静置，过滤；滤液减压浓缩至相对密度为1.10(60～65℃)，缓缓加入约2倍量乙醇，边加边搅拌，使含醇量为65％(ml/ml)，静置沉淀；取上清液，沉淀用少量65％乙醇洗涤，过滤，洗液与滤液合并，减压回收乙醇至无醇味、相对密度为1.05(60～65℃)；加水1倍量充分搅拌，混匀，静置沉淀完全，过滤，滤液用20％氢氧化钠溶液调查pH值为5.0～5.5，减压浓缩至相对密度为1.35～1.38(80～90℃)的清膏。取清膏1份，加入75～85％的乙醇，使含醇量约为15～20％，充分混匀，加糊精2.5份，天冬糖0.02份，制软材，制颗粒，60～70℃干燥，整粒，置远红外烘烤箱中于60～70℃干燥4小时。
(3)将鱼腥草挥发油乙醇液均匀喷入颗粒中，密闭24小时。
(4)检验，合格后分装于铅塑复合膜袋中，每袋10g。
Claims (6)
1．一种清热解毒抗感染中药，其特征在于它是以金银花、大青叶、蒲公英、鱼腥草为原料，按1∶1∶1∶1的重量配比制成的药剂。
2．根据权利要求1所述的清热解毒抗感染中药，其特征在于所说的药剂是任何一种药剂学上所说的剂型。
3．根据权利要求2所述的清热解毒抗感染中药，其特征在于所说的药剂是颗粒剂。
4．根据权利要求3所述清热解毒抗感染中药的制备方法，其特征在于：
(1)提取挥发油：取鱼腥草，加10～15倍量水，浸泡2小时，蒸馏5小时得挥发油，溶解于5～10倍乙醇中，密封，避光保存备用；
(2)取金银花、大青叶、蒲公英加15倍量水浸泡45分钟后，煎煮1.5小时，取汁，药渣再加12倍量水煎煮1.5小时，取汁，合并煎液，静置，过滤；滤液减压浓缩至相对密度为1.10(60～65℃)，缓缓加入约2倍量乙醇，边加边搅拌，使含醇量为65％(ml/ml)，静置沉淀；取上清液，沉淀用少量65％乙醇洗涤，过滤，洗液与滤液合并，减压回收乙醇至无醇味，得相对密度为1.05(60～65℃)清膏；
(4)水沉：向清膏加水1倍量，混匀后静置沉淀，过滤，弃渣留滤液调节pH值为酸性，减压浓缩至相对密度为1.35～1.38(80～90℃)的清膏；
(3)制软材制颗粒：取上述清膏1份，加入75～85％的乙醇，使含醇量约为15～20％，充分混匀，加糊精2.5份，天冬糖0.02份，制软材，制颗粒，干燥；
(4)将鱼腥草挥发油乙醇液均匀喷入颗粒中，密闭。
5.根据权利要求4所述的清热解毒抗感染中药的制备方法，其特征在于所说的颗粒的干燥条件是：湿颗粒烘烤温度为60～70℃；干颗粒烘烤温度为60～70℃，烘烤时间为4小时。
6．根据权利要求4所述的清热解毒抗感染中药的制备方法，其特征在于是以20％氢氧化钠溶液对水沉滤液调节pH值为5.0～5.5。
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