CN1239669A - 苦参绿茶组合物及其在治疗湿疣中的应用 - Google Patents
苦参绿茶组合物及其在治疗湿疣中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种治疗因人***病毒引起的***的组合物，它是先将苦参粗提物用适当浓度盐酸预处理至完全中和，再与调配好的绿茶粗提物混合搅匀，得棕褐色软膏，经特定的展开剂和显色剂在硅胶G薄层板上分别检测两种粗提物的色斑反应确证后，通过皮肤给药途径，经30天左右疗程观察，组合物的治愈率达76%，显效率14%，总有效率90%。且无不良反应，为临床增添了一种新的治疗***有效药物。
Description
本发明涉及一种治疗因人***病毒(HPV)引起的***的组合药物。
***是在人体皮肤或男女生殖器粘膜上可检测到的一种疣，是由人***病毒(HPV)引起的。这种疣表现为与众不同的***状或鸡冠样肿瘤，而且有积累和多发的倾向。***的发病率高，患者人数在不断增加。目前治疗因人***瘤病毒引起的***的主要方法有手术切除、电烙、冷冻、激光治疗等。药物治疗有普达菲伦脂、五-氟尿嘧啶、鬼臼毒素等。然而，上述方法目前都存在一定局限性及毒付作用，因此，治疗效果还不令人满意。
本发明之目的是寻找一种新的药物，与目前临床用药相比，不仅疗效更好，而且毒副作用很低，长期使用，不会给患者造成不良影响。
本发明的内容与要点是：基于中药苦参具有清热解毒、祛风杀虫之功效，多用于疮、疥、癣疾，是妇科病的常用药，绿茶是人们常用的饮料，也具有清热解毒，收敛除湿等功效，并经研究证明，绿茶具有抗病毒、抗菌、抗氧化、抗增生作用，故对上述两种提取物的组合物治疗***的功效进行了深入研究。
具体步骤如下：
1、苦参粗提物的制备：
将中药材苦参粉碎成粗粉，称重，加0.2％HCl湿润30分钟，装入渗漉桶，压紧，缓缓倾入上述液体至没过药粉界面，浸渍1小时，开始渗漉，流速为800-1000ml/cm2/小时，当渗漉液无明显桔红色沉淀时(少许渗漉液加碘化铋钾试剂一滴)，渗漉结束。渗漉液静止24小时，虹吸上清液，通过强酸型阳离子树脂柱，流速为500-800ml/cm2/小时，当交换液出现桔红色沉淀时即停止交换。倾出树脂，用水漂洗干净，离心甩干，40℃以下烘干树脂，加适量浓氨水碱化，装入索氏提取器中，加氯仿回流提取，至氯仿液无色。倾出氯仿液，过滤，减压回收溶剂，浓缩液加少量乙醇溶解，减压回收至无醇味，得苦参粗提物。
强酸型阳离子树脂的预处理及再生步骤如下：将树脂用温水浸泡2小时，装柱，用5-7％HCl浸渍10小时，再用3-5倍量的上述盐酸转型，流速为500-800ml/cm2/小时，然后用蒸馏水洗至PH6-7即可。(见图1)
2、绿茶粗提物的制备：
取绿茶末称重，加10倍量80℃的水浸泡2小时，压滤，残渣再加5倍量80℃的水浸泡1小时，压滤，弃去残渣，合并滤液。滤液中加入一倍量氯仿萃取30分钟，静置，弃去氯仿层，分出水液，水液中加入一倍量乙酸乙酯萃取30分钟，静置，收集乙酸乙酯液，水液同上再萃取一次，弃去水液，合并乙酸乙酯液，减压回收溶剂，浓缩物加少许水溶解，50℃以下真空干燥，得绿茶粗提物。(见图2)
3、苦参粗提物和绿茶粗提物组合物制备：
取苦参粗提物14克，加8N盐酸5-8ml，充分搅拌，使中和完全，以避免与绿茶粗提物的化学作用(这种作用可导致组合物形成新的化合物而失去治疗作用)。取黄凡士林40克，无水羊毛脂20克，液体石腊5克，70℃水浴熔化，加入10克绿茶粗提物(过100目筛)，搅拌均匀，缓缓加入上述苦参粗提物，边加边搅拌，待完全均匀后，停止加热，继续搅拌至室温，分装(见图3)。
本发明所说的苦参、绿茶组合物，亦可制成栓剂或其它剂型，以满足临床不同需要。
4、组合物的检测与鉴别：
取组合物软膏1克，加无水乙醇5ml，加浓氨3滴，水浴加热至熔化，放至室温，过滤，吸取滤液20μl点于用2％NaOH溶液制备的硅胶G薄层板上；另取苦参碱对照品，配成每1ml含0.1mg的无水乙醇溶液，吸取10μl点于同一硅胶G薄层板上。
展开剂：甲苯∶丙酮∶乙醇∶浓氨水
(20∶20∶3∶1)
显色剂：改良碘化铋钾试剂液
结论：在供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同的橙红色斑点(附图5)
取组合物软膏1克，加无水乙醇5ml，水浴加热至熔化，放至室温，过滤，吸取滤液20-40μl，点于硅胶G薄层板上；另取绿茶对照品2克，加10ml无水乙醇浸泡2小时，过滤，吸取滤液20-40μl，点于同一硅胶G薄层板上。
展开剂：氯仿∶甲醇∶甲酸(8∶20∶0.1)
显色剂：置紫外灯下观察或室温放置待显出斑点。
结论：在供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同的***斑点(图4)。
5、组合物的动物刺激性试验及临床疗效判定：
鉴于本发明所涉及的组合物是由常用的中药材苦参和饮料绿茶的两种提取物构成，故除刺激性试验采用动物模型外，可直接通过临床试验，观察其治疗***的功效。
1)动物粘膜刺激性试验；
药品：湿疣灵；对照品：空白基质。
动物：家兔4只，体重为1800-2000g，购于中国药品生物制品检定所动物中心。
给药方法及剂量：
用消毒棉签涂适量药膏于家兔眼睑内。第1、2、3、4只家兔的右眼均涂湿疣灵，其左眼均涂空白基质作对照。
给药前观察：
每只家兔双眼均正常，眼球结膜无充血，角膜光反射正常，眼睑开闭正常，饮食及活动均正常。
给药后观察：(第一次给药)
1个小时后观察：
第1、2、3、4只家兔右眼多闭；左眼均正常。无全身反应。
3个小时后观察
第1、2、3、4只家兔右眼仍多闭，第2、4只家兔右眼球结膜稍发红；左眼正常，无全身反应。
6个小时后观察：
4只家兔右眼较前有好转。左眼正常，无全身反应。
20个小时后观察
4只家兔的右眼均恢复正常，全身活动正常(表1)
表1第一次给药后观察
*指眼球结膜
| 兔子序数时间 | 第1只 | 第2只 | 第3只 | 第4只 | 备注 | ||||
| 左眼 | 右眼 | 左眼 | 右眼 | 左眼 | 右眼 | 左眼 | 右眼 | ||
| 1小时后 | 正常 | 多闭 | 正常 | 多闭 | 正常 | 多闭 | 正常 | 多闭 | 无全身反应 |
| 3小时后 | 正常 | 多闭 | 正常 | 多闭*稍发红 | 正常 | 多闭 | 正常 | 多闭*稍发红 | 无全身反应 |
| 6小时后 | 正常 | 有好转 | 正常 | 有好转 | 正常 | 有好转 | 正常 | 有好转 | 无全身反应 |
| 20小时后 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 |
给药后观察(7天后第二次给药)
1小时后观察：
第1、2只家兔右眼球结膜稍发红，眼多闭；第3、4只家兔右眼较正常。左眼均正常，无全身反应。
3小时后观察
第1只家兔右眼球结膜稍发红，眼多闭，第2只家兔右眼有好转仍多闭，第3、4只家兔右眼正常。左眼均正常，无全身反应。
6小时后观察
第1只家兔右眼有好转，第2只家兔右眼基本正常，第3、4只家兔右眼正常。左眼均正常，无全身反应。
20小时后观察：
第1、2、3、4只家兔右眼均恢复正常，左眼均正常，全身活动正常(表2)。
表2第二次给药后观察(第一次给药7天后)
*指眼球结膜结论：湿疣灵无刺激性。2)临床疗效观察；治疗对象为确诊的***患者49例；给药途径为外用，涂敷于病患部位；用药剂量，根据患处面积及程度调整掌握。治疗标准分为治愈(湿疣全部消失)；显效(湿疣消失率＞50％)；无效(湿疣消失率＜50％)，疗程平均为一个月左右。
| 兔子序数时间 | 第1只 | 第2只 | 第3只 | 第4只 | 备注 | ||||
| 左眼 | 右眼 | 左眼 | 右眼 | 左眼 | 右眼 | 左眼 | 右眼 | ||
| 1小时后 | 正常 | 多闭*稍发红 | 多闭*稍发红 | 正常 | 较正常 | 正常 | 较正常 | 无全身反应 | |
| 3小时后 | 正常 | 多闭*稍发红 | 正常 | 多闭 | 正常 | 较正常 | 正常 | 较正常 | 无全身反应 |
| 6小时后 | 正常 | 有好转 | 正常 | 基本正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 无全身反应 |
| 20小时后 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 | 正常 |
经临床试用结果，总有效率达90％(表3)：
| 例数 | 标准 | 疗程 | 比率 | 副作用 | |
| 治愈 | 37 | 全部消失 | 35天± | 76％ | 个别病例偶有痒感 |
| 显效 | 7 | ＞50％ | 30天± | 14％ | 、、 |
| 无效 | 5 | ＜50％ | 20天± | 10％ | 、、 |
根据资料报道，单独使用绿茶提取物(茶多酚)治疗***，其治愈率为54％，显效率为32％，总有效率为86％，表明，苦参和绿茶提取物经特殊处理配制的组合物，治疗效果明显优于单独使用绿茶提取物茶多酚。
本发明的优点和效果在于，与目前临床使用治疗***的药物相比，本组合物(湿疣灵)疗效好，无刺激，无过敏，无毒副作用，可长期使用，且操作简便，患者可自行将药物涂于患处，故不失为一种安全可靠的有效药物。
附图说明：
图1：苦参粗提物制备流程图。
图2：绿茶粗提物制备流程图。
图3：苦参、绿茶粗提物组合物制备流程图。
图4：绿茶提取物的薄层鉴别图谱
其中：1——湿疣灵
2——绿茶提取物对照品
图5：苦参提取物的薄层鉴别图谱
其中：1——苦参粗提物
2、3——湿疣灵
4——苦参碱对照品
Claims (4)
1、一种湿疣灵及其制造方法，其特征是该组合物系由苦参粗提物和绿茶粗提物经特殊处理配制而成并具有较好的治疗***的功效。
2、按照权利要求1所述的湿疣灵及其制造方法，其特征是基本工艺步骤为：
A)将苦参粗提物先用8N盐酸搅匀至完全中和，放置备用；
B)将黄凡士林、无水羊毛脂及液体石腊(70℃水浴熔化)加入绿茶粗提物；
C)将预处理好的苦参粗提物在适当温度下与B混合搅匀，得棕褐色软膏。
3、按照权利要求1或2所述的湿疣灵及其制造方法，其特征是所得组合物的检测鉴别标准是：苦参粗提物和苦参碱对照品在同一硅胶G薄层板上，经特定展开剂和显色剂处理后，其色谱相应位置应显示相同的橙红色斑点；绿茶粗提物和绿茶对照品在同一硅胶G薄层板上，经特定展开剂和显色剂处理后，其色谱相应位置应显示相同的***斑点。
4、按照权利要求1所述的湿疣灵及其制造方法，其特征是临床治疗***，经皮肤外用给药途径，根据病变面积与程度掌握剂量，平均疗程为30天±，按照治愈、显效、无效和副作用标准判定疗效及安全性。
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