CN118271628A - 一种功能性动物源性生物材料及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种动物源性生物材料的改性处理方法及其改性后的制品。本发明的改性处理方法包括：1)用戊二醛或其他含醛试剂至少部分交联所述动物源性生物材料；2)采用亲水聚合物对交联后的动物源性生物材料进行修饰处理；其中，所述亲水性聚合物链段具有至少两个末端，其中至少一个末端为氨基基团；至少另一个末端为马来酰亚胺基团，并且所述氨基基团与动物源性生物材料上的醛基反应；3)随后将其与含有巯基的生物活性分子反应，其中所述巯基与所述动物源性生物材料的马来酰亚胺基团反应，即得功能化动物源性生物材料。通过上述方式，本发明能够同时提高动物源性生物材料的抗钙化性能和生物功能性。

Description

一种功能性动物源性生物材料及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物医疗技术领域，特别是涉及一种改性动物源性生物材料的制备方法和改性动物源性生物材料。

背景技术

动物源性生物材料是指用于制备各类生物制品所涉及的直接来源于动物的组织、器官、细胞、血液、体液或经分离提取的衍生物，而生物瓣膜材料也来源于此，例如可以为猪心包膜、马心包膜、牛心包膜、主动脉瓣膜、小肠粘膜下层等，并通常通过去细胞和去脂处理。

人工瓣膜是血管植入物，因此需要具有良好的血液相容性。尽管传统上生物瓣膜被认为是抗凝的一个很好选择，但近年来的数据分析显示，与人工生物瓣膜相关的血栓形成发生率较高，尤其是随着经导管主动脉瓣置换术的出现，生物瓣膜血栓形成是导致急性或慢性生物瓣膜变性的主要原因。生物瓣膜的血栓原性同其钙化反应一样，仍然是需要进一步解决的问题。

生物活性分子例如肝素、类肝素、水蛭素、赖氨酸等，有利于增强生物瓣膜材料的抗凝血性能，包括预防血栓形成以及对初生血栓进行及时溶解，降低瓣膜材料的血栓发生率。但是在生物活性分子的化学修饰过程中，极易对其生物活性造成损害，例如CN115252901A公开了一种改性动物源性生物材料的制备方法和改性动物源性生物材料，通过末端醛基化的肝素对材料进行修饰，但是该方案中，末端醛基化的肝素会对肝素本身的活性造成至少50％的损伤。因此目前尚没有一种能够很好地赋予生物瓣膜抗血栓功能性同时具有良好的抗钙化效果的修饰方法。

发明内容

发明要解决的问题

本发明提供一种提高植介入型动物源性生物材料抗钙化抗血栓形成的处理方法及其生物材料。所述处理方法可以使动物源性生物材料在具有抗钙化功能的同时，兼有良好的抗血栓形成性能，赋予动物源性生物材料更多功能性。

用于解决问题的方案

本发明提供了如下技术方案：

【1】一种动物源性生物材料的改性处理方法。包括以下步骤：

1)用戊二醛或其他含醛试剂至少部分交联所述动物源性生物材料；

2)采用亲水聚合物对交联后的动物源性生物材料进行修饰处理；其中，所述亲水性聚合物链段具有至少两个末端，其中至少一个末端为氨基基团；至少另一个末端为马来酰亚胺基团，并且所述氨基基团与动物源性生物材料上的醛基反应；

3)将步骤2)中处理后的动物源性生物材料与含有巯基的生物活性分子反应，其中所述巯基与所述动物源性生物材料的马来酰亚胺基团反应，即得功能化动物源性生物材料。

【2】根据【1】所述的改性处理方法，亲水性聚合物包括聚内酰胺、聚氨酯、(甲基)丙烯酸或(甲基)丙烯酸盐的均聚物或与其他单体的共聚物、聚乙烯醇、聚乙烯基醚或与其他单体的共聚物、马来酸共聚物、马来酸酐共聚物、聚酯、(甲基)丙烯酰胺的均聚物或与其他单体的共聚物、聚氧化乙烯、聚酰胺、多糖、多肽中的一种或多种。

【3】根据【2】所述的改性处理方法，亲水聚合物选自PEG、PEO-PPO-PEO、聚乙烯基吡咯烷酮、聚丙烯酰胺、透明质酸、壳聚糖中的至少一种。

【4】根据【1】-【3】任一所述的改性处理方法，亲水聚合物分子量为200-20000。

【5】根据【1】所述的改性处理方法，含有巯基的生物活性分子选自肝素、水蛭素、赖氨酸、赖氨酸衍生物、类肝素、抗血小板剂、纤溶酶原激活剂、纤溶酶原、生物素和亲和素中的至少一种。

【6】根据【5】所述的改性处理方法，含有巯基的生物活性分子为ε-赖氨酸，并具有通式(I)的结构：

【7】根据【1】-【6】任一所述的改性处理方法，步骤(2)中还包括加入还原剂；所述还原剂选自硼氢化钠、氰基硼氢化钠、甲醛与甲酸的混合溶液中的至少一种。

【8】根据【7】所述的改性处理方法，步骤(2)和步骤(3)中所述反应以纯水溶液、缓冲溶液和有机溶剂中的一种或其组合提供；所述溶液优选磷酸盐、碳酸盐、磺酸盐、醋酸盐或硼酸盐缓冲液中的至少一种。

【9】根据【8】所述的改性处理方法，步骤(2)中亲水聚合物在溶液中的浓度为0.5mg/ml-20mg/ml，优选为1mg/ml-10mg/ml；步骤(3)中生物活性分子在溶液中的浓度为0.5mg/ml-20mg/ml，优选为1mg/ml-10mg/ml。

【10】根据【1】所述的改性处理方法，步骤(2)中反应pH值为3-7；步骤(3)中反应pH值为6-8。

【11】根据【1】所述的改性处理方法，进一步包括对所述改性后的动物源性生物材料进行清洗、脱水、灭菌处理的至少一种。

【12】一种根据【1】-【11】中任一项所述的改性处理方法所制备的功能化动物源性生物材料，其中，所述功能化动物源性生物材料包括动物源性生物材料及与动物源性生物材料连接的功能化修饰结构；所述功能化修饰结构包括亲水性聚合物链段和与亲水性聚合物链段共价连接的生物活性分子。

【13】根据【12】所述的改性动物源性生物材料在制备心脑血管疾病治疗装置中的应用。

发明的效果

本发明提供了一种能够实现动物源性生物材料功能化改性的方法。本发明采用亲水聚合物对至少部分交联的动物源性生物材料进行修饰处理，通过亲水聚合物至少一个末端上携带的氨基基团，可以通过化学反应尽量屏蔽掉生物材料表面醛基，减少钙结晶位点，降低钙化发生率。并且亲水性聚合物能够减少蛋白质的吸附，进一步提高材料的生物相容性，减少感染、凝血的发生。同时，亲水性聚合物至少一个末端上携带的马来酰亚胺基团可以作为生物活性分子的反应锚点，利用反应条件特别温和的马来酰亚胺与巯基的反应，获得新的功能，如更佳的抗凝血功能、抗血小板黏附功能或者纤溶功能等，实现功能性改性。

附图说明

图1为实施例1和对比例2的纤溶测试图。

具体实施方式

为了更好地说明本发明，在下文的具体实施方式中给出了众多的具体细节。本领域技术人员应当理解，没有某些具体细节，本发明同样可以实施。在另外一些实例中，对于本领域技术人员熟知的方法、手段、器材和步骤未作详细描述，以便于凸显本发明的主旨。

除非另有定义，本发明所用的技术和科学术语具有与本发明所属技术领域中的普通技术人员所通常理解的相同含义。

本说明书中，使用“数值A～数值B”表示的数值范围是指包含端点数值A、B的范围。

本说明书中，使用“可以”表示的含义包括了进行某种处理以及不进行某种处理两方面的含义。

应当理解，在本申请说明书和附加的权利要求书中用到的单数形式的冠词“一”(对应于英文“a”、“an”和“the”)包括复数的对象，除非文中另外明确地规定。

本说明书中，所提及的“一个或一些具体/优选实施方式/方案”、“另一个或另一些具体/优选实施方式/方案”、“一个或另一个实施方式/方案”、“一个或另一个技术方案”等是指所描述的与该实施方式有关的特定要素(例如，特征、结构、性质和/或特性)包括在此处所述的至少一种实施方式中，并且可存在于其它实施方式中或者可不存在于其它实施方式中。另外，应理解，所述要素可以任何合适的方式组合在各种实施方式中。

本发明的说明书和权利要求书的术语“包括”以及它们任何变形，意图在于覆盖不排他的包含。例如包含一系列步骤或单元的过程、方法或***、产品或设备没有限定于已列出的步骤或单元，而是可选地还包括没有列出的步骤或单元，或可选地还包括对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。

在本发明中术语“功能化”和相关术语包括：处理材料以改变其表面性能以满足用于特定应用的特定要求的过程，或者，通过向聚合物添加基团来提供其通常没有的功能的过程。

一种动物源性生物材料的改性处理方法。其特征在于，包括以下步骤：

S1：用戊二醛或其他含醛试剂至少部分交联所述动物源性生物材料；

生物瓣膜一般是由动物源性的生物材料而来，例如可以为猪心包膜、马心包膜、牛心包膜、主动脉瓣膜、小肠粘膜下层、鱼鳔等，在此不做具体限定。因此，本申请中的“动物源性生物材料”可以是本领域技术人员所了解的动物源性生物原材料例如牛心包、猪心包、猪主动脉瓣膜、小肠粘膜下层以及血管、皮肤、脑组织、韧带和腱等，也可以是由上述动物源性生物材料制成的人工心脏瓣膜例如主动脉瓣、二尖瓣、肺动脉瓣和三尖瓣等，或是组织移植物、血管假体和移植物、眼眶植入物覆盖物以及其它。

动物源性生物材料需要具有一定的机械强度，原始材料例如牛心包力学性能不佳，植入体内后耐久性不好，因此需要交联处理。目前为止，戊二醛的交联处理依然是对动物源性生物材料例如心脏瓣膜改性的黄金法则。通过戊二醛处理生物材料，具有快速、柔性、降低免疫原性和能与常见氨基酸残基固定的优势，所以目前大部分生物心瓣膜多使用戊二醛进行固定来降低免疫原性。

S2：采用亲水聚合物对交联后的动物源性生物材料进行修饰处理；其中，所述亲水性聚合物链段具有至少两个末端，其中至少一个末端为氨基基团；至少另一个末端为马来酰亚胺基团，并且所述氨基基团与动物源性生物材料上的醛基反应；

大量的研究表明，经过戊二醛或其它含醛物质处理的动物源性生物材料容易钙化。这是由于处理过后动物源性生物材料上携带有许多游离醛基团的组织，所述游离醛基团引起毒性增加、钙化更高和参与免疫原性应答。这些醛基团通过空气氧化、体内血液氧化、巨噬细胞氧化和其它类似氧化路径可以容易地氧化成为羧酸基团。这会导致组织弹性韧性以及机械强度都发生很大改变，进而失去组织植入后应有的功能。本发明的团队人员基于之前的研究，发现可以利用带有末端氨基的亲水聚合物链段对其进行处理，亲水聚合物的端氨基可以与醛基进行反应，从而将动物源性生物材料表面暴露的醛基位点屏蔽。

在本发明的一个优选实施方式中，所述亲水性聚合物包括聚内酰胺、聚氨酯、(甲基)丙烯酸或(甲基)丙烯酸盐的均聚物或与其他单体的共聚物、聚乙烯醇、聚乙烯基醚或与其他单体的共聚物、马来酸共聚物、马来酸酐共聚物、聚酯、(甲基)丙烯酰胺的均聚物或与其他单体的共聚物、聚氧化乙烯、聚酰胺、多糖、多肽中的一种或多种。优选自PEG、PEO-PPO-PEO、聚乙烯基吡咯烷酮、聚丙烯酰胺、透明质酸、壳聚糖中的至少一种。只要聚合物的至少一个末端存在氨基基团，即可与动物源性生物材料表面的醛基实现化学链接。

在本发明的一个优选实施方式中，亲水性聚合物的分子量为200-20000，进一步优选的，分子量为500-2000，例如500、1000、1500、2000。以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷举所述范围包括的具体点值。

本发明的发明人发现，亲水性链段一方面可以通过端氨基屏蔽醛基位点；另一方面，亲水性聚合物链段具有良好的亲水性和生物相容性，将其共价连接至动物源性生物材料中，能够减少蛋白质的吸附，进一步提高材料的生物相容性，减少感染、凝血的发生；此外，本发明的发明人还发现，亲水性聚合物链段的引入，可以在动物源性生物材料与生物活性分子之间形成间隔臂，提供柔性链段，在生理环境中为后续生物活性分子的活性位点暴露提供更大的保障。

S3：将步骤2)中处理后的动物源性生物材料与含有巯基的生物活性分子反应，其中所述巯基与所述动物源性生物材料的马来酰亚胺基团反应，即得功能化动物源性生物材料。

在本发明的一个优选实施方式中，所述含有巯基的生物活性分子选自肝素、水蛭素、赖氨酸、赖氨酸衍生物、类肝素、抗血小板剂、纤溶酶原激活剂、纤溶酶原、生物素和亲和素中的至少一种。

其中，所述含有巯基的生物活性分子可以是天然的结构中即带有巯基基团，也可以通过化学后修饰的方式对其预先进行改性，使其带有巯基。改性修饰方法主要通过酯化反应、酯交换反应、酰胺化反应、点击反应、质子化反应、离子化反应、开环反应、加成反应、消除反应、羟醛反应、引发聚合反应等。

生物活性分子因其在各种生化过程中起着关键的作用，具有神奇的生理调节功能。示例性的，肝素是目前最常用的抗凝血药物之一，它能够通过激活血液中的抗凝血酶III(ATIII)来间接抑制如XIa，IXa，Xa以及凝血酶等凝血因子(其中Xa与凝血酶是凝血反应中最重要的因子)，从而阻断凝血进程。除了抗凝血活性以外，肝素还具有抗病毒、抗癌活性、调控血管生长以及抑制补体激活的功能。水蛭素类抑制剂(水蛭素、比伐卢定等)能够直接与凝血酶形成不可逆的复合物从而抑制凝血酶的活性从而实现抗凝血的功能。ε-赖氨酸结构中ε-氨基和羧基均以自由的形式存在，因此能够特异性结合组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)，原位激活血栓环境中的纤溶酶原(Plg)，将其转化成激活形式纤溶酶，来实现纤维蛋白网络(初生血栓)的降解，将其称之为纤溶功能分子。

因此，将具有特定功能生物活性物质修饰到动物源性生物材料的表面，以制备一种功能性“活性表面”是比较理想的策略。但是上述的生物活性分子在修饰过程中极易被严苛的化学反应条件、有机溶剂等破坏生物活性，因此需要一种更加温和、简便的修饰方法。

示例性的，在本发明的一个优选实施方式中，所述含有巯基的生物活性分子为ε-赖氨酸，并具有通式(I)的结构：

该结构中，ε-氨基和羧基均以自由的形式存在，保持了其纤溶功能。末端修饰的巯基可以作为反应性位点，实现与亲水聚合物末端马来酰亚胺的稳定接枝。

在本发明的一个优选实施方式中，在步骤(2)中可加入还原剂加速反应的进程；所述还原剂选自硼氢化钠、氰基硼氢化钠、甲醛与甲酸的混合溶液中的至少一种。

在本发明的一个优选实施方式中，步骤(2)和步骤(3)中所述反应以纯水溶液、缓冲溶液和有机溶剂中的一种或其组合提供；所述溶液优选磷酸盐、碳酸盐、磺酸盐、醋酸盐或硼酸盐缓冲液中的至少一种。步骤(2)中反应pH值为3-7；步骤(3)中反应pH值为6-8。在盐类缓冲溶液下，控制pH值在一定程度，可使动物源性生物材料处于更稳定的反应体系，尽量不破坏其生物学结构，同时促进化学修饰的进程。

在本发明的一个优选实施方式中，步骤(2)中亲水聚合物在溶液中的浓度为0.5mg/ml-20mg/ml，优选为1mg/ml-10mg/ml；步骤(3)中生物活性分子在溶液中的浓度为0.5mg/ml-20mg/ml，优选为1mg/ml-10mg/ml。

在本发明的一个优选实施方式中，进一步包括对所述改性后的动物源性生物材料进行清洗、脱水、灭菌处理的至少一种。

在本发明的一个优选实施方式中，可选的在每个步骤操作之前，还包括对动物源性生物材料进行清洗处理。所述清洗过程可以包括本领域常规的浸泡、振荡、化学/生物试剂处理等造成去细胞化，从而减少免疫或抗原结合位点和潜在的结合位点。

本发明提供了一种能够实现动物源性生物材料功能化改性的方法。本发明采用亲水聚合物对至少部分交联的动物源性生物材料进行修饰处理，通过亲水聚合物至少一个末端上携带的氨基基团，可以通过化学反应尽量屏蔽掉生物材料表面醛基，减少钙结晶位点，降低钙化发生率。并且亲水性聚合物能够减少蛋白质的吸附，进一步提高材料的生物相容性，减少感染、凝血的发生。同时，亲水性聚合物至少一个末端上携带的马来酰亚胺基团可以作为生物活性分子的反应锚点，利用反应条件特别温和的马来酰亚胺与巯基的反应，获得新的功能，如更佳的抗凝血功能、抗血小板黏附功能或者纤溶功能等，实现功能性改性。

本发明还提供了一种功能化动物源性生物材料，采用上述任一所述的改性处理方法制备得到。本申请中的“动物源性生物材料”可以是本领域技术人员所了解的动物源性生物原材料例如牛心包、猪心包、猪主动脉瓣膜、小肠粘膜下层以及血管、皮肤、脑组织、韧带和腱等，也可以是由上述动物源性生物材料制成的人工心脏瓣膜例如主动脉瓣、二尖瓣、肺动脉瓣和三尖瓣等，或是组织移植物、血管假体和移植物、眼眶植入物覆盖物以及其它。其中，所述功能化动物源性生物材料包括动物源性生物材料及与动物源性生物材料连接的功能化修饰结构；所述功能化修饰结构包括亲水性聚合物链段和与亲水性聚合物链段共价连接的生物活性分子。

上述改性动物源性生物材料兼具抗钙化性能、抗凝血性能、纤溶性能等。

本发明还提供了一种如上所述的功能化动物源性生物材料在制备心脑血管疾病治疗装置中的应用。减少动物源性生物材料植入人体后的钙化和凝血反应。同时，还能够引入新的功能例如纤溶功能。

参照上述实施内容，为了使本申请的技术方案更加具体清楚、易于理解，现对本申请技术方案进行举例，但是需要说明的是，本申请所要保护的内容不限于以下实施例。

实施例1

一种动物源性生物材料的改性处理方法，其包含以下步骤：

1.初步交联：将牛心包膜清洗干净之后，在0.3wt％的戊二醛溶液中浸泡交联3d。

2.亲水聚合物修饰：配制2mg/mL的NH2-PEG-MAL(马来酰亚胺基团)(分子量为2000)+0.1mg/mL氰基硼氢化钠的PBS溶液，PH调节到5.5。将上述修饰后的牛心包膜放入溶液中，摇床37℃，60rpm条件下，反应4h。

3.生物活性分子巯基化赖氨酸修饰：配制2mg/mL巯基化赖氨酸的PBS溶液，PH调节到7。将上述修饰后的牛心包膜放入溶液中，摇床37℃，60rpm条件下反应4h。

4.清洗及干燥处理：配制FET溶液：4％甲醛+22％乙醇+12％吐温80+62％PBS，将上述修饰后的牛心包膜浸泡反应3min，用于去除多余磷脂。然后将牛心包膜放入甘油/乙醇(75％/25％)溶液中，震荡1h，去除过量甘油，干燥。

实施例2

步骤同实施例1，区别仅在于将实施例1中第2步的NH2-PEG-MAL(马来酰亚胺基团)替换为NH2-【PEO-PPO-PEO】--MAL(马来酰亚胺基团)。

对比例1

步骤同实施例1，区别在于缺少步骤2的亲水聚合物修饰过程。

对比例2

步骤同实施例1，区别仅在于缺少步骤3中生物活性分子巯基化赖氨酸修饰过程。

性能测试

1)抗钙化测试：

选取雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，每只45-50g，通过腹腔注射剂量为1mL/1kg的3％戊巴比妥钠溶液麻醉。在大鼠背部做两个外科切口，在两侧创建两个真皮下袋。将实施例1和对比例1的待测试的样品(剪成0.5cm x 0.5cm的片状)，并将其放置在真皮下袋。随后用外科钉封闭切口。3星期后，将样本连同纤维囊一起取出，冷冻以进行钙含量分析。测试结果如表1所示。

2)纤溶测试：

将实施例1和对比例2的待测试的样品(剪成0.5cm x 0.5cm的片状)浸泡于三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH＝7.4)1h，取出后再浸泡于普通人体血浆中3h，取出测试样，用三羟甲基氨基甲烷缓冲液淋洗三次。将样品浸泡于t-PA溶液中10min。用三羟甲基氨基甲烷缓冲液淋洗测试样3次，取出测试样，用滤纸吸干，加入100μL血浆后，再加入100μL 0.025M的氯化钙溶液。上述所有浸泡都在37℃恒温培养箱中进行，加入的血浆和t-PA需先在37℃培养箱中预热。用酶标仪测量405nm处吸收，时间间隔定为30s。

当血液中产生初级血栓(即纤维蛋白凝块)时，其表面暴露出的羧基端赖氨酸残基会从血浆中选择性地结合Plg及其生理激活剂t-PA，形成三元复合物。该复合物会加速t-PA对Plg的激活，从而产生大量纤维蛋白溶酶，降解所形成的纤维蛋白。通过模拟这一过程设计了一种血浆复钙化的实验来评价材料表面的溶栓能力。该实验方法以405nm处的吸光值来表示血浆的浑浊度，进而判断血栓的形成和溶解。各样品对应的吸光值随时间的变化曲线如图1所示。

	实施例1	实施例2	对比例1
				钙离子含量(ug/mg)	3.8	4.2	32.3

表1

从表1可知，对比例1相对于实施例1和2来说，具有较高的钙离子含量，表明其未经亲水链段改性的情况下，其抗钙化的效果远远不足。

从图1可以看出，对比例2表面由于不含自由的ε-赖氨酸，从而表现出典型的血栓形成曲线：随着时间延长，吸光值逐渐上升，达到最高值之后形成平台，表明稳定纤维蛋白凝块的形成。相比之下，本发明中带有纤溶功能性物质的动物源性生物材料所对应的吸光值在上升至一定程度后，迅速下降至基线，表明纤维蛋白生成后又被全部溶解。表明ε-赖氨酸成功修饰到表面，促进结合Plg并在t-PA激活下转变为纤维蛋白溶酶，从而将纤维蛋白溶解。

惟以上所述者，仅为本发明的较佳实施例而已，举凡熟悉此项技艺的专业人士在了解本发明的技术手段之后，自然能依据实际的需要，在本发明的教导下加以变化。因此凡依本发明申请专利范围所作的同等变化与修饰，曾应仍属本发明专利涵盖的范围内。

Claims (13)

1.一种动物源性生物材料的改性处理方法。其特征在于，包括以下步骤：

1)用戊二醛或其他含醛试剂至少部分交联所述动物源性生物材料；

2)采用亲水聚合物对交联后的动物源性生物材料进行修饰处理；其中，所述亲水性聚合物链段具有至少两个末端，其中至少一个末端为氨基基团；至少另一个末端为马来酰亚胺基团，并且所述氨基基团与动物源性生物材料上的醛基反应；

3)将步骤2)中处理后的动物源性生物材料与含有巯基的生物活性分子反应，其中所述巯基与所述动物源性生物材料的马来酰亚胺基团反应，即得功能化动物源性生物材料。

2.根据权利要求1所述的改性处理方法，其特征在于，所述亲水性聚合物包括聚内酰胺、聚氨酯、(甲基)丙烯酸或(甲基)丙烯酸盐的均聚物或与其他单体的共聚物、聚乙烯醇、聚乙烯基醚或与其他单体的共聚物、马来酸共聚物、马来酸酐共聚物、聚酯、(甲基)丙烯酰胺的均聚物或与其他单体的共聚物、聚氧化乙烯、聚酰胺、多糖、多肽中的一种或多种。

3.根据权利要求2所述的改性处理方法，其特征在于，所述亲水聚合物选自PEG、PEO-PPO-PEO、聚乙烯基吡咯烷酮、聚丙烯酰胺、透明质酸、壳聚糖中的至少一种。

4.根据权利要求1-3任一所述的改性处理方法，其特征在于，所述亲水聚合物分子量为200-20000。

5.根据权利要求1所述的改性处理方法，其特征在于，所述含有巯基的生物活性分子选自肝素、水蛭素、赖氨酸、赖氨酸衍生物、类肝素、抗血小板剂、纤溶酶原激活剂、纤溶酶原、生物素和亲和素中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的改性处理方法，其特征在于，所述含有巯基的生物活性分子为ε-赖氨酸，并具有通式(I)的结构：

7.根据权利要求1-6任一所述的改性处理方法，其特征在于，在步骤(2)中加入还原剂；所述还原剂选自硼氢化钠、氰基硼氢化钠、甲醛与甲酸的混合溶液中的至少一种。

8.根据权利要求7所述的改性处理方法，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)中所述反应以纯水溶液、缓冲溶液和有机溶剂中的一种或其组合提供；所述溶液优选磷酸盐、碳酸盐、磺酸盐、醋酸盐或硼酸盐缓冲液中的至少一种。

9.根据权利要求8所述的改性处理方法，其特征在于，步骤(2)中亲水聚合物在溶液中的浓度为0.5mg/ml-20mg/ml，优选为1mg/ml-10mg/ml；步骤(3)中生物活性分子在溶液中的浓度为0.5mg/ml-20mg/ml，优选为1mg/ml-10mg/ml。

10.根据权利要求1所述的改性处理方法，其特征在于，步骤(2)中反应pH值为3-7；步骤(3)中反应pH值为6-8。

11.权利要求1所述的改性处理方法，其特征在于，进一步包括对所述改性后的动物源性生物材料进行清洗、脱水、灭菌处理的至少一种。

12.一种根据权利要求1-11中任一项所述的改性处理方法所制备的功能化动物源性生物材料，其特征在于，所述功能化动物源性生物材料包括动物源性生物材料及与动物源性生物材料连接的功能化修饰结构；所述功能化修饰结构包括亲水性聚合物链段和与亲水性聚合物链段共价连接的生物活性分子。

13.如权利要求12所述的功能化动物源性生物材料在制备血管疾病治疗装置中的应用。