CN117946898A - 一种弯曲芽孢杆菌mb17-2及分离方法和应用 - Google Patents

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CN117946898A CN202311682169.5A CN202311682169A CN117946898A CN 117946898 A CN117946898 A CN 117946898A CN 202311682169 A CN202311682169 A CN 202311682169A CN 117946898 A CN117946898 A CN 117946898A
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苑莹
郭兴龙
王学虎
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Hebei Mengbang Biotechnology Co ltd
Hebei Monband Water Soluble Fertilizer Co ltd
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Hebei Mengbang Biotechnology Co ltd
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Abstract

本发明涉及微生物技术领域,提出了一种弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)MB17‑2及分离方法和应用。所述一种弯曲芽孢杆菌MB17‑2,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.28634;本发明通过对大量土壤样品进行高通量筛选得到菌株MB17‑2,具有解硅、解钾、产胞外多糖、促进植物生长以及改善土壤团粒结构的功能。

Description

一种弯曲芽孢杆菌MB17-2及分离方法和应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,具体的,涉及一种弯曲芽孢杆菌MB17-2及分离方法和应用。
背景技术
微生物胞外多糖是微生物在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的糖类高聚物,是一种次级代谢产物,由单一的或多种的单糖和糖类衍生物单元组成,被广泛应用于食品、医药、化工等多领域。
多糖不仅具有较好的环境友好特性,同时由于其本身结构的特殊性和分子内活性基团的多样性,多糖也具有改善土壤特性、提高作物抗逆性、吸附重金属离子等复合效应,是一种非常具有应用前景的农业生物材料。
此外,硅元素已被国际土壤学界确认为是继氮、磷、钾之后的第四种植物营养元素,是禾本科和根块类作物的必需养分。经研究表明,水稻施硅后,穗中的含氮量上升,淀粉和蛋白质合成被促进,籽粒饱满;硅对冬瓜吸收和积累氮素有显著促进作用,成熟期间氮素和矿质元素的含量均与施硅量呈正相关;施硅可提高土壤中磷的有效性及植物的含磷量,导致钾在植物体内中的绝对量多数增加或略有增加;同时硅肥的施用,对水稻、燕麦、小麦、甘蔗、高粱等作物的生长和产量以及品质有显著的提高作用。硅元素除了在植物生长方面起作用外,还可以提高植物抗病性、抗虫性、缓解金属离子毒害、缓解盐胁迫、增强抗旱性。
由于自然界中,硅的分布极广,仅次于氧,在地壳中含量占第二位,主要以二氧化硅和硅酸盐形式存在。土壤中硅含量占70%左右,但均呈非常稳定的结晶态和非晶态,溶解度很低,植物难以吸收。
综上,开发一种同时具有产胞外多糖和解硅的弯曲芽孢杆菌势在必行。
发明内容
本发明提出一种弯曲芽孢杆菌MB17-2及分离方法和应用,解决了相关技术中缺乏同时具有产胞外多糖和解硅功能的弯曲芽孢杆菌的问题。
本发明的技术方案如下:
一种弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)MB17-2,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.28634,保藏日期为2023年10月16日。
作为进一步的技术方案,所述弯曲芽孢杆菌MB17-2的16S rDNA基因序列如下所示:
atacatgcaa gtcgagcgaa ctgattagaa gcttgcttct atgacgttag cggcggacgg60
gtgagtaaca cgtgggcaac ctgcctgtaa gactgggata actccgggaa accggagcta120
ataccggata acattttctc ttgcataaga gaaaattgaa agatggtttc ggctatcact180
tacagatggg cccgcggtgc attagctagt tggtgaggta acggctcacc aaggcaacga240
tgcatagccg acctgagagg gtgatcggcc acactgggac tgagacacgg cccagactcc300
tacgggaggc agcagtaggg aatcttccgc aatggacgaa agtctgacgg agcaacgccg360
cgtgagtgat gaaggctttc gggtcgtaaa actctgttgt tagggaagaa caagtacaag420
agtaactgct tgtaccttga cggtacctaa ccagaaagcc acggctaact acgtgccagc480
agccgcggta atacgtaggt ggcaagcgtt atccggaatt attgggcgta aagcgcgcgc540
aggcggtttc ttaagtctga tgtgaaagcc cacggctcaa ccgtggaggg tcattggaaa600
ctggggaact tgagtgcaga agagaaaagc ggaattccac gtgtagcggt gaaatgcgta660
gagatgtgga ggaacaccag tggcgaaggc ggctttttgg tctgtaactg acgctgaggc720
gcgaaagcgt ggggagcaaa caggattaga taccctggta gtccacgccg taaacgatga780
gtgctaagtg ttagagggtt tccgcccttt agtgctgcag ctaacgcatt aagcactccg840
cctggggagt acggtcgcaa gactgaaact caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg900
gtggagcatg tggtttaatt cgaagcaacg cgaagaacct taccaggtct tgacatcctc960
tgacaactct agagatagag cgttcccctt cgggggacag agtgacaggt ggtgcatggt1020
tgtcgtcagc tcgtgtcgtg agatgttggg ttaagtcccg caacgagcgc aacccttgat1080
cttagttgcc agcatttagt tgggcactct aaggtgactg ccggtgacaa accggaggaa1140
ggtggggatg acgtcaaatc atcatgcccc ttatgacctg ggctacacac gtgctacaat1200
ggatggtaca aagggctgca agaccgcgag gtcaagccaa tcccataaaa ccattctcag1260
ttcggattgt aggctgcaac tcgcctacat gaagctggaa tcgctagtaa tcgcggatca1320
gcatgccgcg gtgaatacgt tcccgggcct tgtacacacc gcccgtcaca ccacgagagt1380
ttgtaacacc cgaagtcggt ggggtaacct ttatggagcc agccgcctaa aagt1434
作为进一步的技术方案,所述弯曲芽孢杆菌MB17-2的16S rDNA基因序列如SEQ IDNO:1所示。
作为进一步的技术方案,所述弯曲芽孢杆菌MB17-2的菌落呈圆形,米黄色。
作为进一步的技术方案,以质量浓度w/v计,所述菌株在KNO3含量≤10%或NaCl含量≤10%的培养体系下可以生长,同时具有解硅、解钾功能。
作为进一步的技术方案,所述菌株在pH=10或45℃的培养体系下可以生长;在pH=10的培养体系下具有解硅、解钾功能。
作为进一步的技术方案,所述菌株在含有蔗糖、酵母粉、磷酸氢二钾和碳酸钙的培养体系下可以正常生长,同时具有产胞外多糖功能。
本发明还提出了一种弯曲芽孢杆菌MB17-2的分离方法,包括以下步骤:
S1、将土样与水混合,得到的混合液;
S2、将所述混合液在富集培养基中进行培养,取菌液稀释后进行解硅菌株分离,得到具有解硅圈的菌株;
S3、将所述具有解硅圈的菌株接于产胞外多糖培养基中,进行培养,得到具有解硅圈和产胞外多糖的弯曲芽孢杆菌MB17-2。
作为进一步的技术方案,所述富集培养基包括酵母粉、胰蛋白胨、葡萄糖、磷酸氢二钾、丙酮酸钠、硅酸镁、水;
所述产胞外多糖培养基包括蔗糖、酵母粉、磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钠、碳酸钙、水。
作为进一步的技术方案,所述在富集培养基中进行培养,包括在缺素R2A液体培养基和1/2N缺素R2A液体培养基进行培养。
作为进一步的技术方案,所述在富集培养基中进行培养,具体为:依次在缺素R2A液体培养基、1/2N缺素R2A液体培养基、1/2N缺素R2A液体培养基中进行培养。
作为进一步的技术方案,所述缺素R2A液体培养基包括酵母粉0.5g、胰蛋白胨0.5g、葡萄糖0.5g、磷酸氢二钾0.3g、丙酮酸钠0.3g、硅酸镁5.0g、水1L;
所述1/2N缺素R2A液体培养基包括酵母粉0.25g、胰蛋白胨0.25g、葡萄糖0.5g、磷酸氢二钾0.3g、丙酮酸钠0.3g、硅酸镁5.0g、水1L。
作为进一步的技术方案,所述产胞外多糖培养基包括蔗糖15g、酵母粉1g、K2HPO40.5g、MgSO40.2g、NaCl 0.4g、CaCO32g、H2O 1000mL、pH=7.0。
本发明还提出了一种弯曲芽孢杆菌MB17-2或所述的分离方法得到的弯曲芽孢杆菌MB17-2在促进植物生长和/或改善土壤团粒结构中的应用。
作为进一步的技术方案,所述促进植物生长包括促进玉米生长、促进小麦生长、促进小白菜生长。
本发明还提出了一种弯曲芽孢杆菌MB17-2或所述的分离方法得到的弯曲芽孢杆菌MB17-2在产胞外多糖中的应用。
本发明还提出了一种弯曲芽孢杆菌MB17-2或所述的分离方法得到的弯曲芽孢杆菌MB17-2在解硅和/或解钾中的应用。
作为进一步的技术方案,所述解硅为降解硅酸盐。
本发明的工作原理及有益效果为:
本发明的弯曲芽孢杆菌MB17-2能够产胞外多糖,并能分解土壤中难溶性含硅矿物,供植物直接吸收利用,促进植物生长,同时还具有良好的盐碱耐受性,在改良土壤、作物种植等方面应用前景广阔。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
图1为本发明基于16S rDNA基因构建的菌株MB17-2的***发育树;
图2为本发明菌株MB17-2在R2A培养基中培养的菌株形态照片,a为培养24h,b为培养48h;
图3为本发明菌株MB17-2的抗逆性试验照片,a为15℃条件下培养,b为45℃条件下培养,c为pH=10,d为添加5%NaCl,e为添加10%NaCl,f为添加5%KNO3,g为添加10%KNO3
图4为菌株在含有0.5%硅酸镁的R2A培养基上的解硅能力照片;
图5为菌株在不同条件下的解硅情况照片,a为pH=10,b为添加5%NaCl,c为添加10%NaCl,d为添加5%KNO3,e为添加10%KNO3
图6为本发明菌株MB17-2和对照菌株3016的解钾能力试验照片。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都涉及本发明保护的范围。
以下实施例及对比例中,解硅/钾能力的测试方法为:测定解硅/钾圈的直径,单位mm。
解硅/钾能力=解硅/钾圈直径的毫米数+X
X为加权系数,根据菌株解硅/钾圈的透明程度,相应的为-2、-1、0、1、2。
产胞外多糖能力的测试方法为:①、将发酵液3000r/min 离心10min去除菌体;②、取2mL上清液于50mL离心管中,加入3倍体积的无水乙醇,4℃条件下静置1h,4000r/min离心5min,弃去上清;③、沉淀用10mL 80%(v/v)乙醇溶液洗涤,离心弃去上清液;④、沉淀用水溶解,并转移到100mL容量瓶中,定容;⑤、采取硫酸-苯酚法测定胞外多糖含量。
实施例1
(1)土样采集:选择具有代表性的土壤,比如沙土、粘土、黑土等。样品可以来源于农田、牧草地、森林土等不同的区域,尤其是水稻和小麦田以及多年使用硅肥的土壤进行采样,每个点采集15~20g样品,同时标明来源地(省,县)、采集年和月、土壤的来源(植物,沙土、或其他),放于80%(v/v)甘油管中保藏在-80℃ 冰箱。
(2)微生物的富集、培养和分离:
①取1g土样于10mL纯净水中摇匀,取100μL混合液于缺素R2A液体培养基中(酵母粉0.5g、胰蛋白胨0.5g、葡萄糖0.5g、磷酸氢二钾0.3g、丙酮酸钠0.3g、硅酸镁5.0g、水1L),30℃震荡培养3天,取菌液稀释10-6、10-7和10-8倍后涂布于R2A固体培养基(酵母粉0.5g、胰蛋白胨0.5g、蛋白胨0.75g、葡萄糖0.5g、可溶性淀粉0.5g、磷酸氢二钾0.3g、丙酮酸钠0.3g、硅酸镁2.5g、琼脂15g、水1L),挑取具有功能的菌株;
②取①中震荡培养3天后的菌液100μL于1/2N缺素R2A液体培养基中(酵母粉0.25g、胰蛋白胨0.25g、葡萄糖0.5g、磷酸氢二钾0.3g、丙酮酸钠0.3g、硅酸镁5.0g、水1L),30℃震荡培养3天,取菌液稀释10-6、10-7和10-8倍后涂皿,挑取具有解硅圈的功能菌株;
③取②中震荡培养3天后的菌液100μL于1/2N缺素R2A液体培养基中(酵母粉0.25g、胰蛋白胨0.25g、葡萄糖0.5g、磷酸氢二钾0.3g、丙酮酸钠0.3g、硅酸镁5.0g、水1L),30℃震荡培养3天,取菌液稀释10-6、10-7和10-8倍后涂皿,挑取具有解硅圈的功能菌株;
④将③得到的具有解硅圈功能的菌株,稀释后,按照终浓度为OD6000.05接种到产胞外多糖培养基(蔗糖15g、酵母粉1g、K2HPO40.5g、MgSO40.2g、NaCl 0.4g、CaCO32g、H2O1000mL、pH=7.0)中,在30℃、200r/min 培养72h,测定胞外多糖含量,挑选具有解硅功能和产胞外多糖功能的菌株。
(3)重复验证:为了确保菌株解硅能力的持续性,将从富集平皿上挑取的菌株,接种于含有0.5%(w/v)硅酸镁的R2A固体培养基,30℃培养,每天观察实验结果,验证所挑取的菌落是否具有功能,排除假阳性菌落。
(4)菌株鉴定:
①CTAB法提取细菌DNA:
S1、接种一单菌落于5mL R2A液体培养基(酵母粉0.5g、胰蛋白胨0.5g、蛋白胨0.5g、葡萄糖0.5g、可溶性淀粉0.5g、磷酸氢二钾0.3g、丙酮酸钠0.3g、无水硫酸镁0.025g、水1L)中,30℃培养过夜;
S2、取1mL种子培养液接入100mL R2A液体培养基中,37℃、220r/min培养16h后,5000r/min离心10min,弃去上清;
S3、加入10mL TE溶液离心洗涤后,用10mL TE溶液溶解菌体,混匀,-20℃保存备用;
S4、取3.5mL菌悬液,加入184μL 10%SDS,混匀,加入37μL 10mg/ml蛋白酶K,混匀,37℃温育1h;
S5、加入740μL 5mol/L NaCl水溶液,再加入512μL CTAB-NaCl的水溶液,混匀,65℃温育10min;
S6、加入等体积的氯仿/异戊醇,混匀,10000r/min离心5min,保留上清;
S7、上清中加入与其等体积的酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),混匀,10000r/min离心5min,保留上清;
S8、加入0.6倍的异丙醇,混匀,10000r/min离心5min,收集DNA沉淀,用70%(v/v)乙醇离心洗涤DNA沉淀;
S9、用1mL TE溶液溶解DNA,加入终浓度为20μg/mL RNaseA,4℃保存。
②扩增与测序:
采用16S rDNA通用引物27f(5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3')和1492r(5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3')进行16S rDNA 的PCR扩增。PCR 反应体系:Taq PCR Master Mix20uL,引物各0.8uL,DNA模板1uL,ddH2O 17.4uL;PCR 反应条件:94℃预变性30s,94℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸60s,35个循环。将PCR产物进行1.0%的琼脂糖凝胶电泳;PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后回收纯化测序(上海生工生物技术有限公司),根据获得的16S rDNA序列在GenBank中Blast搜索同源序列,通过MEGA7.0软件,建立***发育(如图1所示)。
结果:本发明共从10个省16个市县采集到的34个土样。通过富集实验共筛选得到206株具有解硅功能的菌株。通过16S rDNA测序,选取不同种属的40多株菌进行产胞外多糖能力的验证,最终我们从中国陕西省咸阳市泾阳县云阳镇山庄村小西红柿植株根部土壤中分离得到一株具有解硅能力强、产胞外多糖、抗盐碱且对植物生长有促进作用的菌株MB17-2,通过对这菌株16s DNA 序列分析,结果表明他与Bacillus flexus(弯曲芽孢杆菌)同源性高达100%;因此,将菌株命名为弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)MB17-2。
(5)菌株形态观察:将筛选的菌株接种到R2A固体平板上,30℃培养48h,结果如图2所示,观察菌落的大小、形状、颜色、光泽度、黏稠度、***形状、透明度、边缘特征等。
由图2可以看出,在R2A培养基上生长48h,菌落呈圆形,米黄色,外面为无色透明,表面光滑湿润,有光泽,粘稠,边缘规则,微微***,直径2~3mm。
实施例2
菌株MB17-2抗逆性试验:
将筛选得到的菌株,用10uL接种环挑取菌体,分别接种到不同温度(15℃、45℃)、pH=10、不同NaCl含量(5%NaCl、10%NaCl)、不同KNO3含量(5%KNO3、10%KNO3)的R2A培养基上,30℃培养48h,观察菌株是否生长,以及生长是否受抑制和生长速度的快慢,结果如图3所示。(注:上述含量按w/v计算)
由图3可以看出,本发明提供的菌株MB17-2在条件为pH=10、5%KNO3的R2A培养基上均可以正常生长,在条件为45℃、5%NaCl、10%NaCl、10%KNO3的R2A培养基上可以生长,但受到一定抑制,而在15℃培养时受到明显抑制。
实施例3
逆境下解硅能力试验:
①将筛选得到的菌株,用接种针挑取菌体,接种到含有0.5%(w/v)硅酸镁的R2A培养基中,设置硅酸盐细菌(3016)为阳性对照,接种48h后,冲洗掉菌落,测定解硅圈的直径,计算解硅能力,结果如图4和表1所示。
表1 含有0.5%硅酸镁的R2A培养基中菌株的解硅能力
②将筛选得到的菌株,用接种针挑取菌体,分别接种到pH=10、不同NaCl含量(5%NaCl、10%NaCl)、不同KNO3含量(5%KNO3、10%KNO3)的R2A(含有0.5%硅酸镁)培养基上,30℃培养48h,测试解硅能力,结果如图5和表2所示。(注:上述含量按w/v计算)
表2 不同逆境下解硅能力
由表2可以看出,本发明菌株MB17-2在高盐高碱条件下依然具有很强的解硅能力而对照3016仅在pH=10条件下有微弱的降解能力,而在高盐条件下无法生长。
实施例4
解钾能力试验:
将菌株MB17-2和对照菌株3016,用接种针挑取菌体,接种到解K培养基(葡萄糖10g,酵母提取物0.5g,硫酸铵1g,磷酸氢二钠2g,七水硫酸镁0.5g,碳酸钙1g,琼脂15g,钾长石1g,蒸馏水1000mL),倒置平板于30℃恒温培养箱培养4d,观察结果,如图6所示,并测定解钾能力,结果记录在表3。
表3 菌株的解钾能力
由表3可以看出,本发明菌株MB17-2高于对照3016的解钾能力。
实施例5
产胞外多糖培养基筛选:
通过对不同碳源(蔗糖、葡萄糖等)、不同氮源(酵母粉、豆粕、蛋白胨等)以及不同无机盐(K2HPO4、MgSO4、NaCl、CaCO3、FeSO4等)进行单因素筛选以及添加量的实验,初步得到了最适宜MB17-2产胞外多糖的培养基。
最适宜MB17-2产胞外多糖的培养基:蔗糖50g、酵母粉5g、K2HPO41.25g、CaCO32g、H2O 1000mL,测定多糖含量可以达到3.09mg/mL。
实施例6
菌株及胞外多糖对水稳性土壤团粒结构的影响:
土壤团聚体是土壤结构的基本单位,是衡量土壤侵烛程度的重要指标。通常将土壤团聚体分为两大类:>0.25mm的大团聚体和<0.25mm的微团聚体,一般将>0.25mm的水稳性团聚体称为土壤团粒结构,作为评价土壤团聚体的指标。
①实验处理
将供试菌株在R2A培养基上活化,再将活化好的菌种接种到产胞外多糖培养基中(实例5),30℃、200r/min振荡培养48h,取出发酵液,4000r/min离心5min后收集菌体。菌体用无菌去离子水清洗两遍,重悬于无菌去离子水中,使其OD600为0.005(约106/mL),为菌悬液,将其分成两份,一份为活菌悬液,一份于121℃灭菌30min,为灭活菌悬液,备用。并按实例5中培养基培养发酵,提取胞外多糖,制备不同含量的胞外多糖液体,备用。
试验分别设置接活菌、接灭活菌、接0.7mg/g胞外多糖、接1.4mg/g胞外多糖以及接等量无菌水的对照,共5组处理,每个处理设三个重复。称取过0.25mm筛的土装入平皿中,并在平皿上贴标签,分别标明组别,分别吸取无菌水、活菌悬液、灭活菌悬液、不同浓度的胞外多糖溶液5mL,加到各自对应的平皿中。将平皿置于光照培养架上20~30℃培养,培养期间,定期补充去离子水,保持土壤表面湿润。培养30天后,进行处理。
②测定方法
从平皿中称取原状土20g,注意尽量保持土壤原状,置于量筒中,沿量筒壁缓慢加入去离子水至饱和。将饱和土样转移至放置于水桶中的筛顶部,进行振荡,直至筛子上的土壤颗粒在水面清晰可见,且不再透过筛孔。分别收集筛上面和下面的土壤样品,烘干称重。位于筛上面的样品,即为>0.25mm水稳性团聚体,位于筛下面的样品,即为<0.25mm水稳性团聚体。
③测定结果记录在表4。
表4 不同处理对土壤水稳性团聚体(>0.25mm)比例的影响
注:*表示对照与处理存在显著性差异,**表示对照与处理存在极显著性差异。
实施例7
菌株的促生作用:蛭石为基质,每盆装土270g,选取大小均匀一致的爆花玉米(太谷县绿宝种业有限公司)种子,每盆栽种6粒,重复3盆,播种后浇灌200mL菌液(R2A液体培养基培养基菌液稀释50倍),后续按照其生长要求,于10d时浇灌100mL稀释菌,15d后分别称量根部和地上部的干重,统计单株的重量。设置无菌水为空白对照CK1,R2A培养基为对照CK2,结果记录在表5。
表5 菌株对爆花玉米地上部和根部湿重和干重的影响
由表5可以看出,本发明菌株明显提高了植株地上部和根部的干重,表明MB17-2对植物的生长有明显的促进作用。
综上,本发明的菌株MB17-2具有解硅、产胞外多糖、耐盐碱、促生的特性,且在盐碱环境下仍具有解硅的能力,同时菌株及其产生的胞外多糖能够明显促进土壤团粒结构的形成。
以上仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1. 一种弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)MB17-2,其特征在于,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.28634,保藏日期为2023年10月16日。
2.根据权利要求1所述的一种弯曲芽孢杆菌MB17-2,其特征在于,菌落呈圆形,米黄色。
3.根据权利要求2所述的一种弯曲芽孢杆菌MB17-2,其特征在于,以质量浓度w/v计,在KNO3含量≤10%或NaCl含量≤10%的培养体系下可以生长,同时具有解硅、解钾功能。
4.根据权利要求2所述的一种弯曲芽孢杆菌MB17-2,其特征在于,在pH=10或45℃的培养体系下可以生长;在pH=10的培养体系下具有解硅、解钾功能。
5.根据权利要求2所述的一种弯曲芽孢杆菌MB17-2,其特征在于,在含有蔗糖、酵母粉、磷酸氢二钾和碳酸钙的培养体系下可以正常生长,同时具有产胞外多糖功能。
6.根据权利要求1~5任意一项所述的一种弯曲芽孢杆菌MB17-2的分离方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、将土样与水混合,得到的混合液;
S2、将所述混合液在富集培养基中进行培养,取菌液稀释后进行解硅菌株分离,得到具有解硅圈的菌株;
S3、将所述具有解硅圈的菌株接于产胞外多糖培养基中,进行培养,得到具有解硅圈和产胞外多糖的弯曲芽孢杆菌MB17-2。
7.根据权利要求6所述的一种弯曲芽孢杆菌MB17-2的分离方法,其特征在于,所述富集培养基包括酵母粉、胰蛋白胨、葡萄糖、磷酸氢二钾、丙酮酸钠、硅酸镁、水;
所述产胞外多糖培养基包括蔗糖、酵母粉、磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钠、碳酸钙、水。
8.如权利要求1~5任意一项所述的一种弯曲芽孢杆菌MB17-2或权利要求6~7任意一项所述的分离方法得到的弯曲芽孢杆菌MB17-2在促进植物生长和/或改善土壤团粒结构中的应用。
9.如权利要求1~5任意一项所述的一种弯曲芽孢杆菌MB17-2或权利要求6~7任意一项所述的分离方法得到的弯曲芽孢杆菌MB17-2在产胞外多糖中的应用。
10.如权利要求1~5任意一项所述的一种弯曲芽孢杆菌MB17-2或权利要求6~7任意一项所述的分离方法得到的弯曲芽孢杆菌MB17-2在解硅和/或解钾中的应用。
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