CN117783408B - 一种无花果配方颗粒质量控制方法 - Google Patents
一种无花果配方颗粒质量控制方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种无花果配方颗粒质量控制方法，包括性状、鉴别、特征图谱、检查、浸出物和芦丁含量测定方法；其中鉴别采用薄层色谱法，包括步骤：(1)供试品溶液的制备：取无花果配方颗粒样品5g，研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液中加入氢氧化钾‑乙醇溶液，常温下皂化；皂化液加水稀释，用***萃取多次，收集每次萃取的下层皂化水溶液，调节pH值至5.0，再用***萃取多次，收集每次萃取的***液，蒸干，残渣用1ml***溶解，作为供试品溶液；(2)无花果对照药材溶液的制备；(3)补骨脂素对照品溶液的制备；(4)测定。本发明方法具有较好的专属性、准确度和精密度，能够实现复方颗粒质量的有效控制，确保用药安全。
Description
技术领域
本发明涉及中药材质量控制技术领域，特别是涉及一种无花果配方颗粒质量控制方法。
背景技术
关于无花果配方颗粒，目前还未形成一个***的质量检测方法，仅采用现有的检测手段来检测无花果配方颗粒是不够全面的，不能反映出无花果配方颗粒的整体内在质量，无法达到中药配方颗粒质量控制要求，尤其是以现有的检测手段对无花果配方颗粒进行薄层鉴别时专属性、耐用性稍差，并不能准确鉴别无花果配方颗粒。因此，建立无花果配方颗粒质量控制方法就显得十分必要。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种无花果配方颗粒质量控制方法，专属性、准确度、精密度好，能够实现复方颗粒质量的有效控制，确保用药安全。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种无花果配方颗粒质量控制方法，包括性状、鉴别、特征图谱、检查、浸出物和芦丁含量测定方法；浸出物采用热浸法测定，特征图谱及芦丁含量均采用高效液相色谱法测定；
鉴别采用薄层色谱法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备：取无花果配方颗粒样品5g，研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液中加入氢氧化钾-乙醇溶液，常温下皂化；皂化液加水稀释，用***萃取多次，收集每次萃取的下层皂化水溶液，调节pH值至5.0，再用***萃取多次，收集每次萃取的***液，蒸干，残渣用1ml***溶解，作为供试品溶液；
(2)对照药材溶液的制备：取无花果对照药材1g，按供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液；
(3)对照品溶液的制备：取补骨脂素对照品，加乙酸乙酯配成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(4)测定：吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为9：1为的甲苯-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，置于365nm紫外光灯下检视。
薄层色谱法鉴别中，氢氧化钾-乙醇溶液的质量浓度为10％；氢氧化钾-乙醇溶液用量为25ml。
特征图谱测定包括以下步骤：
(1)对照药材参照物溶液的制备：取无花果对照药材0.5g，置具塞锥形瓶中，加50v/v％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，水浴回流60分钟，取出，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液；
(2)对照品参照物溶液的制备：取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含40μg的溶液，作为绿原酸对照品参照物溶液；取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml含25μg的溶液，作为芦丁对照品参照物溶液；
(3)供试品溶液的制备：取无花果配方颗粒1g，研细，置具塞锥形瓶中，加入50v/v％甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(4)测定：分别取对照药材参照物溶液、绿原酸对照品参照物溶液、芦丁对照品参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪进行测定。
特征图谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1v/v％磷酸为流动相B；梯度洗脱，梯度条件为：
流速为0.8mL/min；柱温为30℃；检测波长为354nm。
芦丁含量检测具体包括以下步骤：
(1)对照品溶液的制备：取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml含25μg的溶液；
(2)供试品溶液的制备：取无花果配方颗粒1g，研细，加入50v/v％甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(3)测定：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪进行测定，测定峰面积，计算芦丁含量。
芦丁含量测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1v/v％磷酸为流动相B；梯度洗脱，梯度条件为：
流速为0.8mL/min；柱温为30℃；检测波长为354nm。
检查方法为：按照中国药典2020年版通则0104颗粒剂项下规定，对无花果配方颗粒样品的水分、粒度、装量差异、微生物限度进行检验。
于室内光线明亮处，目视观察样品颜色与形状，嗅其味，口尝。
无花果配方颗粒通过以下方法制备：取无花果饮片，加水煎煮2次，其中第一次加12倍水，浸泡30分钟，煎煮30分钟，第二次加10倍水，煎煮20分钟；滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.05～1.15，加辅料，混匀，喷雾干燥，再加辅料，混匀，制粒。
本发明的有益效果是：
(1)通过氢氧化钠乙醇溶液常温下皂化无花果配方颗粒，进而制备所需的供试品溶液，进行薄层色谱鉴别，克服了现有鉴别方法专属性、温湿度耐用性不强的缺陷，能够准确鉴别无花果配方颗粒。
(2)构建了结合性状、鉴别、特征图谱、检查、浸出物和芦丁含量测定为整体的质量控制方法，具有较强的专属性和精密度，实现了复方颗粒质量的有效控制，能够确保用药安全有效。
附图说明
图1为三批无花果配方颗粒样品的外观图；
图2为验证无花果配方颗粒薄层鉴别方法专属性所获得的色谱图；
图3为验证无花果配方颗粒薄层鉴别方法4℃下耐用性所获得的色谱图；
图4为验证无花果配方颗粒薄层鉴别方法30℃下耐用性所获得的色谱图；
图5为验证无花果配方颗粒薄层鉴别方法35％湿度下耐用性所获得的色谱图；
图6为验证无花果配方颗粒薄层鉴别方法75％湿度下耐用性所获得的色谱图；
图7为以购自青岛海洋化工有限公司的薄层板进行无花果配方颗粒薄层鉴别试验所获得的色谱图；
图8为以购自青岛硕远硅胶科技有限公司的薄层板进行无花果配方颗粒薄层鉴别试验所获得的色谱图；
图9为以购自青岛鑫昶来硅胶有限公司薄层板进行无花果配方颗粒薄层鉴别试验所获得的色谱图；
图10为无花果配方颗粒样品的薄层鉴别测试色谱图；
图11为验证无花果配方颗粒芦丁含量测定方法的定位与***适用性所获得的芦丁对照品液相色谱图；
图12为验证无花果配方颗粒芦丁含量测定方法的定位与***适用性所获得的供试品液相色谱图；
图13为验证辅料对无花果配方颗粒芦丁含量测定影响性所获得的空白辅料液相色谱图；
图14为由人员a进行无花果配方颗粒芦丁含量测定方法的中间精密度试验所获得的液相色谱图；
图15为由人员b进行无花果配方颗粒芦丁含量测定方法的中间精密度试验所获得的液相色谱图；
图16为由人员c进行无花果配方颗粒芦丁含量测定方法的中间精密度试验所获得的液相色谱图；
图17为柱温30℃下进行无花果配方颗粒芦丁含量测定下的色谱柱耐用性试验所获得的供试品液相色谱图；
图18为柱温25℃下进行无花果配方颗粒芦丁含量测定下的色谱柱耐用性试验所获得的供试品液相色谱图；
图19为柱温35℃下进行无花果配方颗粒芦丁含量测定下的色谱柱耐用性试验所获得的供试品液相色谱图；
图20为流速0.7ml/min条件下进行无花果配方颗粒芦丁含量测定下的色谱柱耐用性试验所获得的供试品液相色谱图；
图21为流速0.9ml/min条件下进行无花果配方颗粒芦丁含量测定下的色谱柱耐用性试验所获得的供试品液相色谱图；
图22为波长349nm条件下进行无花果配方颗粒芦丁含量测定下的色谱柱耐用性试验所获得的供试品液相色谱图；
图23为波长359nm条件下进行无花果配方颗粒芦丁含量测定下的色谱柱耐用性试验所获得的供试品液相色谱图；
图24为采用IntertSustain C18色谱柱条件下进行无花果配方颗粒芦丁含量测定下的色谱柱耐用性试验所获得的供试品液相色谱图；
图25为采用UltimateAQ C18色谱柱条件下进行无花果配方颗粒芦丁含量测定下的色谱柱耐用性试验所获得的供试品液相色谱图；
图26为采用Shim-packVP-ODS色谱柱条件下进行无花果配方颗粒芦丁含量测定下的色谱柱耐用性试验所获得的供试品液相色谱图；
图27为验证无花果配方颗粒特征谱图测定方法定位与***适用性所获得的无花果对照药材液相色谱图；
图28为验证无花果配方颗粒特征谱图测定方法定位与***适用性所获得的绿原酸对照品液相色谱图；
图29为验证无花果配方颗粒特征谱图测定方法定位与***适用性所获得的芦丁对照品液相色谱图；
图30为验证无花果配方颗粒特征谱图测定方法定位与***适用性所获得的供试品液相色谱图；
图31为验证无花果配方颗粒特征谱图测定方法专属性所获得的空白辅料液相色谱图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步描述：
无花果配方颗粒的制备方法为取无花果饮片，加水煎煮2次(第一次加12倍水，浸泡30分钟，煎煮30分钟，第二次加10倍水，煎煮20分钟)，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.05～1.15，加辅料，混匀，喷雾干燥，再加辅料，混匀，制粒。
具体制备方法为：(1)提取、浓缩：取无花果饮片投入到提取罐中，加12倍水，浸泡，开启热蒸汽加热，第一次煎煮30分钟，第二次加10倍水煎煮20分钟，煎煮液经300目滤网过滤，合并两次过滤液得提取液，提取液经减压浓缩至相对密度1.05～1.15(55℃测)，得到浸膏。(2)喷雾干燥：称取二氧化硅、麦芽糊精适量，加水溶解，将溶液与浸膏混合。设定进风温度为180℃，控制进风温度170-190℃，出风温度70-95℃，进行喷雾干燥，得浸膏粉。(3)总混：称取麦芽糊精适量，与浸膏粉混合，得总混粉。(4)制粒：取总混粉，干法制粒，得到无花果配方颗粒。将制得颗粒装入药用低密度聚乙烯袋密封，待用。
按上述方法分别制备三批无花果配方颗粒，批号分别为YK20231001、YK20231002、YK20231003。第一批无花果配方颗配方为：无花果饮片30.0kg，喷雾干燥时二氧化硅64.4g、麦芽糊精1288.2g，总混时麦芽糊精2206.4g。第二批无花果配方颗配方为：无花果饮片30.0kg，喷雾干燥时二氧化硅60.5g、麦芽糊精1210g，总混时麦芽糊精2679.5g。第三批无花果配方颗配方为：无花果饮片30.0kg，喷雾干燥时二氧化硅56.1g、麦芽糊精1122.7g，总混时麦芽糊精3207.7g。
1、性状测定
分别取上述三批无花果配方颗粒各一份，于室内光线明亮处，目视观察样品颜色与形状，嗅其味，取少许口尝。三批样品性状检测结果见表1，颗粒外观见图1。无花果标准汤剂的性状为棕黄色至黄棕色的粉末，气微，味微苦，根据三批样品的性状观察，结合二者研究和检测结果，制定无花果配方颗粒的性状为棕黄色至黄棕色的颗粒；气微，味甜。
表1无花果配方颗粒性状
2、薄层鉴别
无花果配方颗粒的薄层色谱鉴别方法为：
2.1供试品溶液的制备：取无花果配方颗粒5g，研细，加乙醇25ml，超声30min，滤过，滤液中加入质量浓度为10％的氢氧化钾-乙醇溶液25ml，常温下皂化。皂化液加30ml水稀释，用***萃取三次，每次20ml，收集每次萃取的下层皂化水溶液，用稀盐酸调节ph值至5.0，再用***萃取两次，每次30ml，收集每次萃取的***液，蒸干，残渣用1ml***溶解，作为供试品溶液。
2.2对照药材溶液的制备：取无花果对照药材(诗丹德标准技术服务有限公司，批号：TCMR009401)1g，按供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。
2.3对照品溶液的制备：取补骨脂素对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110739-201918，含量99.6％)，加乙酸乙酯配成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
2.4测定：照薄层色谱法(中国药典2020年版通则0502)试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(体积比9：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点。
本发明对无花果配方颗粒的薄层色谱鉴别方法进行了方法学验证，证明该方法具有专属性，耐用性良好。具体试验如下：
(a)专属性试验
取无花果配方颗粒样品(批号：YK20231001)并按“2.1”项下方法制成供试品溶液。取无花果对照药材并按“2.2”项下方法对照品溶液。取补骨脂素对照品并按“2.3”项下方法对照品溶液。取二氧化硅和麦芽糊精按“2.1”项下方法制成空白辅料溶液。吸取空白辅料溶液和供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果显示，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，供试品色谱中显相同颜色的荧光斑点；在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，空白辅料色谱中无荧光斑点，说明此方法具有专属性。相关薄层图见图2(图中从左到右依次为：供试品YK20231001、空白辅料、无花果对照药材、补骨脂素对照品)。
(b)耐用性试验
b1、温度耐用性
取无花果配方颗粒样品(批号：YK20231001)并按“2.1”项下方法制成供试品溶液，取无花果对照药材并按“2.2”项下方法制备对照药材溶液，取补骨脂素对照品材并按“2.3”项下方法制备对照品溶液。分别吸取上述三种溶液10μl、5μl、5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9：1)为展开剂，在4℃和30℃环境下展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果显示，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，供试品色谱中显相同颜色的荧光斑点。相关色谱图见图3(图中从左到右依次为：YK20231001、无花果对照药材、补骨脂素对照品)、图4(图中从左到右依次为：YK20231001、无花果对照药材、补骨脂素对照品)。
b2、湿度耐用性
取b1项下的供试品溶液、无花果对照药材溶液与补骨脂素对照品溶液，分别在湿度35％和75％的环境下，分别吸取上述三种溶液10μl、5μl、5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果显示，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，供试品色谱中显相同颜色的荧光斑点。相关色谱图见图5(图中从左到右依次为：YK20231001、无花果对照药材、补骨脂素对照品)、图6(图中从左到右依次为：YK20231001、无花果对照药材、补骨脂素对照品)。
b3、不同厂家薄层板
取b1项下的供试品溶液、无花果对照药材溶液与补骨脂素对照品溶液，分别吸取上述三种溶液10μl、5μl、5μl，分别点于三个不同厂家的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果显示，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。色谱图见图7(图中从左到右依次为：YK20231001、无花果对照药材、补骨脂素对照品，硅胶G薄层板采购自青岛海洋化工有限公司)、图8(图中从左到右依次为：YK20231001、无花果对照药材、补骨脂素对照品，硅胶G薄层板采购自青岛硕远硅胶科技有限公司)、图9(图中从左到右依次为：YK20231001、无花果对照药材、补骨脂素对照品，硅胶G薄层板采购自青岛鑫昶来硅胶有限公司)。
样品检测：按上述薄层色谱鉴别方法，取三批无花果配方颗粒样品进行鉴别，结果见表2，相关色谱图见图10(图中从左到右依次为：YK20231001、YK20231002、YK20231003、无花果对照药材、芦丁对照品)。
表2无花果配方颗粒鉴别
3、检查
按照中国药典2020年版通则0104颗粒剂项下规定，对3批无花果配方颗粒样品的水分、粒度、装量差异、微生物限度进行检验。检验结果见表3。
表3无花果配方颗粒检查结果表
4、浸出物测定
取三批无花果配方颗粒(批号：YK20231001、YK20231002、YK20231003)依照醇溶性浸出物测定法(中国药典2020年版通则2201)项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，结果见表4。
表4无花果配方颗粒浸出物结果表
无花果配方颗粒浸出物限度制定依据：无花果标准汤剂浸出物限度为“按饮片计算，不得少于6.9％”。为保证配方颗粒质量与标准汤剂质量的一致性，本品规格为每1克无花果配方颗粒相当于3.0克饮片，制定本品的浸出物限度为“不得少于20.7％”。三批样品浸出物检测结果均符合规定。
5、含量测定
无花果配方颗粒中芦丁含量检测方法为：
5.1对照品溶液的制备：取芦丁对照品(中国食品药品检定研究院提供，批号：100080-202012，含量91.6％)，加甲醇制成每1ml含25μg的溶液；
5.2供试品溶液的制备：取无花果配方颗粒1g，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入50v/v％甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
5.3测定：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪进行测定，测定峰面积，计算芦丁含量。
色谱条件如下：色谱柱：InertSustain C18，4.6mm×250mm，5μm；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸为流动相B，按表5规定梯度进行洗脱；检测波长：354nm；流速：0.8ml/min；柱温：30℃；进样量：10μl。
表5
本发明考察了不同提取溶剂、不同料液比、不同提取方式条件下制备的供试品溶液，对无花果配方颗粒中芦丁含量检测结果的影响，结果如表7所示，最终确定如上“5.2”项所述的最佳供试品溶液制备方法。
不同提取溶剂条件下制备供试品溶液的方法为：取无花果配方颗粒研细后粉末3份(批号：YK20231001)0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入水、50v/v％甲醇、甲醇各25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用相应溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
不同料液比条件下制备供试品溶液的方法为：分别取本品研细后粉末(批号：YK20231001)0.25g、0.5g和1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50v/v％甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
不同提取方式条件下制备供试品溶液的方法为：取本品研细后粉末3份(批号：YK20231001)1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50v/v％甲醇各25ml，称定重量，分别加热回流30分钟、超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟、超声处理(功率250W，频率50kHz)45分钟，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
表6样品提取条件考察结果表
本发明还对上述无花果配方颗粒中芦丁含量的检测方法进行了方法学验证。具体试验如下：
(A)定位与***适用性试验
A1、取芦丁对照品，精密称取13.94mg，置于50ml容量瓶中，加甲醇适量超声溶解，定容至刻度，摇匀，配置成芦丁对照品母液(255.4μg/ml)。精密移取1ml至10ml容量瓶，用甲醇定容至刻度，摇匀，配成对照品溶液(25.54μg/ml)。
A2、精密称取无花果配方颗粒样品(批号：YK20231001)1g，照“5.2”项所述方法制成供试品溶液。
A3、精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定峰面积。
结果显示，对照品溶液色谱图(图11)中芦丁保留时间为43.762min，峰面积为586849，理论塔板数为103853，拖尾因子为1.138；供试品溶液色谱图(图12)中芦丁保留时间为43.731min，峰面积为311318，理论塔板数为98179，拖尾因子为1.094；说明***适用性良好。
(B)空白辅料
精密称取二氧化硅0.01g、麦芽糊精0.5g，照“5.2”项所述方法制成供试品溶液制成空白辅料溶液。精密吸取10μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，考察辅料有无影响。结果表明辅料对含量测定无影响，相关色谱图见图13。
(C)进样精密度
精密移取“A1”项下对照品溶液10μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，测定峰面积。重复6次，计算RSD％。结果见表7。结果表明，该方法精密度良好。
表7进样精密度试验结果
(D)稳定性试验
取无花果配方颗粒(批号：YK20231001)1g，精密称取，照“5.2”项所述方法制成供试品溶液。精密吸取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，分别于0、3、6、9、12、18、24h依次进样，记录色谱图，计算芦丁峰面积的平均值与RSD值。结果见表8。结果表明，供试品溶液在24h内稳定性良好。
表8含量测定供试品溶液稳定性试验结果
(E)重复性试验
取同一批无花果配方颗粒样品(批号：YK20231003)6份，精密称取1g，照“5.2”项所述方法制成供试品溶液。精密吸取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，计算芦丁的含量。结果见表9。结果表明，该方法重复性好。
表9含量测定方法重复性试验结果
(F)加样回收试验
取具塞锥形瓶6个，分别精密移取“A1”项下对照品母液(255.4μg/ml)0.6ml加入锥形瓶中，挥干，再精密称取无花果配方颗粒样品(批号：YK20231001，含量为0.34mg/g)六份，每份0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入50v/v％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，称重，用50v/v％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
精密吸取上述供试品溶液各10μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，测定峰面积，按下式计算回收率，结果见表10。结果显示，六次试验的加样回收率测定结果均在90～108％之间，其平均值为101.5％，RSD为1.43％，表明回收率试验结果良好。
表10芦丁回收率试验结果
(G)中间精密度试验
由不同人员、不同日期、不同仪器检测同一批无花果颗粒样品(批号：YK20231001)，依法处理，测定其含量，结果见表11。结果表明，该方法中间精密度结果良好。相关色谱图见图14～16。
表11中间精密度试验结果
(H)耐用性试验
H1柱温耐用性
依照规定的色谱条件，改变柱温±5℃，取无花果颗粒样品(批号：YK20231001)，照“5.2”项所述方法制成供试品溶液，测定芦丁的含量。结果如下表12。
表12含量测定方法柱温耐用性试验结果
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H2流速耐用性
依照规定的色谱条件，改变流速±0.1ml/min，取样品(批号：YK20231001)，照“5.2”项下方法制成供试品溶液，测定芦丁的含量。结果如下表13。
表13含量测定方法流速耐用性试验结果
H3波长耐用性
依照规定的色谱条件，改变波长±5nm，取样品(批号：YK20231001)，照“5.2”项下方法制成供试品溶液，测定芦丁的含量。结果如下表14。
表14含量测定方法波长耐用性试验结果
H4色谱柱耐用性
依照规定的色谱条件，选取不同色谱柱，取样品(批号：YK20231001)，照“5.2”项下方法制成供试品溶液，测定芦丁的含量。结果如下表15。
表15色谱柱试验结果
以上耐用性试验的结果表明，该方法的柱温、流速、波长、色谱柱的耐用性均符合含量测定的要求。相关色谱图见图17～26。
样品检测：按上述高效液相色谱检测芦丁含量的方法，取3批无花果配方颗粒(YK20231001、YK20231002、YK20231003)测定芦丁的含量，结果见表16。无花果标准汤剂中的芦丁含量限度为“每相当于1g饮片的标准汤剂含芦丁应为0.07mg～0.25mg”。为保证配方颗粒质量与标准汤剂质量的一致性，本品规格为每1克无花果配方颗粒相当于3.0克饮片，制定本品的含量限度为“本品每1g含芦丁应为0.21mg～0.75mg”。
表16无花果配方颗粒的芦丁含量测定结果
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6、特征图谱
无花果配方颗粒的特征图谱测定方法为：
6.1对照药材参照物溶液的制备：取无花果对照药材(诗丹德标准技术服务有限公司，TCMR009401)0.5g，置具塞锥形瓶中，加50v/v％甲醇25ml，密塞，称定重量，水浴回流60分钟，取出，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液。
6.2对照品参照物溶液的制备：取绿原酸对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110753-202119，含量96.3％)，精密称定，加甲醇制成每1ml含40μg的溶液，作为绿原酸对照品参照物溶液；按“5、芦丁含量”项下的对照品溶液制备方法制备芦丁对照品参照物溶液。
6.3供试品溶液的制备：取无花果配方颗粒研细后粉末1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50v/v％甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
6.4测定：精密吸取对照药材参照物溶液、绿原酸对照品参照物溶液、芦丁对照品参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪进行测定。色谱条件如下：
色谱柱：InertSustain C18，4.6mm×250mm，5μm；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：354nm；流速：0.8ml/min；柱温：30℃；进样量：10μl；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1v/v％磷酸为流动相B，按表17规定梯度进行洗脱。
表17
本发明对上述无花果配方颗粒的特征图谱测定方法进了方法验证，具体试验如下：
S1、定位与***适用性
1)取无花果对照药材0.5g，置具塞锥形瓶中，加50v/v％甲醇25ml，密塞，称定重量，水浴回流60分钟，取出，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液。
2)取绿原酸对照品，精密称取23.04mg，置于50ml容量瓶中，加甲醇适量超声溶解，定容至刻度，摇匀，配置成绿原酸对照品母液(443.8μg/ml)，精密移取绿原酸母液1ml至10ml容量瓶，用甲醇定容至刻度，摇匀，配成绿原酸对照品溶液(44.38ug/ml)，另按“芦丁含量测定下的A1”项的方法制备芦丁对照品溶液(25.54μg/ml)，作为芦丁对照品溶液。
3)精密称取无花果配方颗粒样品(批号：YK20231001)1g，置具塞锥形瓶中，精密加入50v/v％甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
4)分别精密吸取对照药材参照物溶液、绿原酸对照品溶液、芦丁对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪进行测定，记录色谱图。
结果表明，对照药材参照物溶液色谱图中绿原酸保留时间为19.332min，理论塔板数为26128，拖尾因子为1.230；芦丁保留时间为43.667min，理论塔板数为108564，拖尾因子为1.011。对照品参照物溶液色谱图中绿原酸保留时间为19.286min，理论塔板数为26476，拖尾因子为1.163；芦丁保留时间为43.684min，理论塔板数为112909，拖尾因子为1.045。供试品溶液色谱图中绿原酸保留时间为19.324min，理论塔板数为22345，拖尾因子为1.253；芦丁保留时间为43.660min，理论塔板数为106528，拖尾因子为1.020。说明***适用性良好，相关色谱图见图27～30。
S2、专属性
精密称取二氧化硅0.01g、麦芽糊精0.5g，照“6.3供试品溶液的制备”方法制成空白辅料溶液。精密吸取10μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，考察辅料有无影响。结果表明辅料对特征图谱测定无影响。相关色谱图见图31。
S3、精密度试验
精密称取样品(批号：YK20231001)1g，照“6.3供试品溶液的制备”方法制备供试品溶液。精密吸取供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，重复6次，以芦丁参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、峰2、峰3、峰5、峰6与S峰的相对保留时间及RSD值，结果见表18。
表18精密度相对保留时间结果表
结果表明，该方法精密度良好。
S4、稳定性试验
精密称取样品(批号：YK20231001)1g，照“6.3供试品溶液的制备”方法制备供试品溶液。分别于0、3、6、9、12、18、24h精密吸取供试品溶液10μl，分别注入高效液相色谱仪，以芦丁参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、峰2、峰3、峰5、峰6与S峰的相对保留时间及RSD值，结果见表19。
表19稳定性相对保留时间结果表
结果表明，供试品溶液在24h内稳定性良好。
S5、重复性试验
精密称取同一样品(批号：YK20231001)6份，照“6.3供试品溶液的制备”方法制备供试品溶液。精密吸取供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，记录共有峰保留时间，以芦丁参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、峰2、峰3、峰5、峰6与S峰的相对保留时间及RSD值，结果见表20。
表20重复性相对保留时间结果表
结果表明，该方法重复性良好。
S6、中间精密度试验
由不同人员、不同日期、不同仪器检测同一批样品(批号：YK20231001)，具体实验参数见表21。检测样品的特征图谱，计算各峰的相对保留时间，结果见表22。
表21中间精密度实验参数
/>
表22中间精密度试验特征图谱的相对保留时间
结果表明，该方法中间精密度结果良好。相关色谱图见图14～16。
S7、耐用性试验
a)柱温耐用性
依照规定的色谱条件，改变柱温±5℃，取样品(批号：YK20231001)，照“6.3供试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，记录共有峰保留时间，以芦丁参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、峰2、峰3、峰5、峰6与S峰的相对保留时间及RSD值，结果见表23。
表23特征图谱方法柱温耐用性试验结果
b)流速耐用性
依照规定的色谱条件，改变流速±0.1ml/min，取样品(批号：YK20231001)，照“6.3供试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，记录共有峰保留时间，以芦丁参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、峰2、峰3、峰5、峰6与S峰的相对保留时间及RSD值，结果见表24。
表24特征图谱方法流速耐用性试验结果
/>
c)波长耐用性
依照规定的色谱条件，改变波长±5nm，取样品(批号：YK20231001)，照“6.3供试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，记录共有峰保留时间，以芦丁参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、峰2、峰3、峰5、峰6与S峰的相对保留时间及RSD值，结果见表25。
表25特征图谱方法波长耐用性试验结果
d)色谱柱耐用性
依照规定的色谱条件，选用不同型号色谱柱，取样品(批号：YK20231001)，照“6.3供试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，记录共有峰保留时间，以芦丁参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、峰2、峰3、峰5、峰6与S峰的相对保留时间及RSD值，结果见表26。
表26特征图谱方法色谱柱耐用性试验结果
以上耐用性试验的结果表明，该方法的流速、波长、色谱柱的耐用性均符合特征图谱研究的要求；柱温耐用性中，25℃时色谱图中峰2与峰3合并，因此建议规定柱温为30℃。相关色谱图见图17～26。
样品检测：
根据规定无花果配方颗粒特征图谱各特征峰相对保留时间应在规定值的±10％范围之内。以芦丁参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、峰2、峰3、峰5、峰6与S峰的相对保留时间，各特征峰的相对保留时间规定值分别为：0.45(峰1)、0.74(峰2)、0.76(峰3)、1.07(峰5)、1.20(峰6)。
取3批无花果配方颗粒(批号：YK20231001、YK20231002、YK20231003)，按上述方法进行特征图谱测定，结果见表27。
表27无花果配方颗粒特征图谱的相对保留时间
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种无花果配方颗粒质量控制方法，其特征在于，包括性状、鉴别、特征图谱、检查、浸出物和芦丁含量测定方法；浸出物采用热浸法测定，特征图谱及芦丁含量均采用高效液相色谱法测定；
鉴别采用薄层色谱法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备：取无花果配方颗粒样品5g，研细，加乙醇，超声处理，滤过，滤液中加入氢氧化钾-乙醇溶液，常温下皂化；皂化液加水稀释，用***萃取多次，收集每次萃取的下层皂化水溶液，调节pH值至5.0，再用***萃取多次，收集每次萃取的***液，蒸干，残渣用1ml***溶解，作为供试品溶液；
(2)对照药材溶液的制备：取无花果对照药材1g，按供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液；
(3)对照品溶液的制备：取补骨脂素对照品，加乙酸乙酯配成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(4)测定：吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为9：1的甲苯-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，置于365nm紫外光灯下检视；
特征图谱测定包括以下步骤：
(1)对照药材参照物溶液的制备：取无花果对照药材0.5g，置具塞锥形瓶中，加50v/v％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，水浴回流60分钟，取出，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液；
(2)对照品参照物溶液的制备：取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含40μg的溶液，作为绿原酸对照品参照物溶液；取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml含25μg的溶液，作为芦丁对照品参照物溶液；
(3)供试品溶液的制备：取无花果配方颗粒1g，研细，置具塞锥形瓶中，加入50v/v％甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(4)测定：分别取对照药材参照物溶液、绿原酸对照品参照物溶液、芦丁对照品参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪进行测定；
特征图谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1v/v％磷酸为流动相B；梯度洗脱；
梯度条件为：
流速为0.8mL/min；柱温为30℃；检测波长为354nm；
芦丁含量检测具体包括以下步骤：
(1)对照品溶液的制备：取芦丁对照品，加甲醇制成每1ml含25μg的溶液；
(2)供试品溶液的制备：取无花果配方颗粒1g，研细，加入50v/v％甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用50v/v％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(3)测定：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪进行测定，测定峰面积，计算芦丁含量；
芦丁含量测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1v/v％磷酸为流动相B；梯度洗脱，梯度条件为：
流速为0.8mL/min；柱温为30℃；检测波长为354nm。
2.如权利要求1所述一种无花果配方颗粒质量控制方法，其特征在于，薄层色谱法鉴别中，氢氧化钾-乙醇溶液的质量浓度为10％；氢氧化钾-乙醇溶液用量为25ml。
3.如权利要求1所述一种无花果配方颗粒质量控制方法，其特征在于，检查方法为：按照中国药典2020年版通则0104颗粒剂项下规定，对无花果配方颗粒样品的水分、粒度、装量差异、微生物限度进行检验。
4.如权利要求1所述一种无花果配方颗粒质量控制方法，其特征在于，性状检测步骤为：于室内光线明亮处，目视观察样品颜色与形状，嗅其味，口尝。
5.如权利要求1所述一种无花果配方颗粒质量控制方法，其特征在于，无花果配方颗粒通过以下方法制备：取无花果饮片，加水煎煮2次，其中第一次加12倍水，浸泡30分钟，煎煮30分钟，第二次加10倍水，煎煮20分钟；滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.05～1.15，加辅料，混匀，喷雾干燥，再加辅料，混匀，制粒。
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Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102830198A (zh) * | 2012-08-23 | 2012-12-19 | 涂瑶生 | 桑椹配方颗粒的检测方法 |
| CN105241997A (zh) * | 2015-11-10 | 2016-01-13 | 广东一方制药有限公司 | 一种炭类中药配方颗粒的薄层色谱鉴别方法 |
| CN108813465A (zh) * | 2018-07-03 | 2018-11-16 | 浙江省林业科学研究院 | 一种无花果功能咀嚼片及其制备方法 |
| WO2021073175A1 (zh) * | 2019-10-16 | 2021-04-22 | 石家庄以岭药业股份有限公司 | 一种中药组合物中多种成分鉴别及含量的测定方法 |
| CN115980249A (zh) * | 2022-12-27 | 2023-04-18 | 贵州百灵企业集团制药股份有限公司 | 一种虎耳草药材质量检测方法 |
| CN116008419A (zh) * | 2022-12-15 | 2023-04-25 | 长沙新林制药有限公司 | 一种五加皮配方颗粒质量检测方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8003398B2 (en) * | 2007-03-27 | 2011-08-23 | E.I. De Pont De Nemours And Company | Methods and compositions for detecting glyphosate and metabolites thereof |
-
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- 2023-12-28 CN CN202311843208.5A patent/CN117783408B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102830198A (zh) * | 2012-08-23 | 2012-12-19 | 涂瑶生 | 桑椹配方颗粒的检测方法 |
| CN105241997A (zh) * | 2015-11-10 | 2016-01-13 | 广东一方制药有限公司 | 一种炭类中药配方颗粒的薄层色谱鉴别方法 |
| CN108813465A (zh) * | 2018-07-03 | 2018-11-16 | 浙江省林业科学研究院 | 一种无花果功能咀嚼片及其制备方法 |
| WO2021073175A1 (zh) * | 2019-10-16 | 2021-04-22 | 石家庄以岭药业股份有限公司 | 一种中药组合物中多种成分鉴别及含量的测定方法 |
| CN116008419A (zh) * | 2022-12-15 | 2023-04-25 | 长沙新林制药有限公司 | 一种五加皮配方颗粒质量检测方法 |
| CN115980249A (zh) * | 2022-12-27 | 2023-04-18 | 贵州百灵企业集团制药股份有限公司 | 一种虎耳草药材质量检测方法 |
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