CN117159582A - 一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医药技术领域，提供一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，解决现有工艺中蒜头果油分离提取神经酸的纯度低的缺陷，包括以下重量份的组分：神经酸280－310份、复合神经酸580－610份、硒酵母0.10－0.12份，所述神经酸由蒜头果油分离提纯而得。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物。
背景技术
阿尔茨海默病(Alzhemier＇s disease，AD；又称老年痴呆症)是一种最常见的神经退行性疾病。实验研究表明，人脑中的蛋白被氧化、糖苷化或脂被氧化修饰后都会诱发AD，调查表明，至2030年全世界预计患者人数江大6570万人，到2050年将达1亿1540万人。
神经酸是大脑神经细胞和神经组织的核心天然成分之一，神经酸是迄今为止世界上发现的能促进受损神经组织修复、再生的特效物质，是神经细胞特别是大脑细胞、视神经细胞、周围神经生长再发育和维持的必需“高级营养素”。
在国外，科学家最早从鲨鱼脑中提取微量神经酸用于科学研究，由于国际社会禁止大量捕杀鲨鱼，神经酸的来源陷入绝境。随着科技的发展，科学家研究发现含有2％以上神经酸的植物有十多种，其中以中国特有单种植物——蒜头果中神经酸含量最高，其开发价值和经济价值巨大，被成为“植物中的黄金果”。
目前神经酸的获取方法主要有化学合成法与生物提纯法，在化学合成的过程中可能会引入其他物质的残留，而且已知的化学合成方法普遍存在产率低、副产物多、工艺路线长等缺点。故目前从天然植物中分离、提纯化神经酸的方法引起了国内外学者的广泛关注，其主要方法有以下几种：金属盐沉淀法、重结晶法、CO2超临界萃取法、尿素包合法、分子蒸馏法；通过以上几种神经酸的分离提纯工艺的比较，金属盐沉淀法虽然得到的神经酸的纯度高，但其提高率并不高，且存在溶剂残留重金属残留等问题。重结晶法所得的神经酸的纯度提高率也不高；CO2超临界萃取法制得的神经酸粗品纯度最高，但设备昂贵，且超临界萃取法用来精细分离神经酸也无法完全分离去除有害物质芥酸得到高纯度神经酸；神经酸粗提取物含有大量油酸，芥酸等杂质，要得到高纯度神经酸必须采用有效去除这类杂质的方法，传统方法采用硅胶柱层析法能得到纯度较高含量超过95％的神经酸，但硅胶柱层析用于分离神经酸存在硅胶死吸附，神经酸解析得率低，产品存在有机溶剂残留、工艺耗时，成本高等问题。
中国专利号201410551879.9公开了一种治疗神经衰弱和预防老年痴呆的药物组合物，由下列质量百分比的组分组成：蒜头果神经酸1～10％、豆腐果苷1～10％、薏苡仁内酯1～10％、余量为辅料，所述辅料包括药学领域常规的糊精、乳糖、羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、淀粉、羟丙基纤维素；其中，所述蒜头果神经酸按下列步骤进行提取、纯化：(1)将蒜头果种子去外壳和表皮，按固液比g/mL为1～10：5～50，用3～4℃的浓度为20mM、pH＝6.0～7.0的磷酸盐缓冲液进行捣碎后，再经超声波粉碎处理30～50min，于3～4℃下进行抽提过夜，然后过滤，再在3～4℃下以5000～8000r/min的转速进行离心分离30～40min，重复两次，去除上清液得剩余物；(2)将步骤(1)所得剩余物按固液比g/mL＝1～5：5～20加入石油醚进行搅拌，再静置分层，经过滤后收集滤液，再以滤液反复浸泡滤渣2～3次，每次浸泡30～60min后过滤，合并滤液，再在40～50℃下进行旋转蒸发以去除石油醚，得到蒜头果油；(3)按上样量：硅胶量＝1～10：10～100的质量比称取硅胶G，先按固液比g/mL＝1～5：2～10加入石油醚溶解硅胶G，再搅拌20～30min后，将其倒入层析柱中，待硅胶层析柱不含有气泡，沉降稳定后，将步骤(2)所得蒜头果油按固液比g/mL＝1～5：1～10加入石油醚溶解后，装入硅胶层析柱上层，采用石油醚－乙酸乙酯洗脱***进行梯度洗脱，按溶解有蒜头果油的石油醚：乙酸乙酯＝50：1～30：1(V/V)的馏分，于40～50℃以下对馏分进行减压浓缩，得到无色块状结晶，即为蒜头果神经酸；采用该方法获得的神经酸纯度可达95％，但是其采用的是硅胶层析柱进行分离，存在硅胶死吸附、有机溶剂残留的问题。
发明内容
因此，针对上述的问题，本发明提供一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，解决现有工艺中蒜头果油分离提取神经酸的纯度低的缺陷。
为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，包括以下重量份的组分：神经酸280－310份、复合神经酸580－610份、硒酵母0.10－0.12份，所述神经酸由蒜头果油分离提纯而得。
进一步的：还包括200－210重量份的DHA、18－20重量份的吡咯喹啉醌。
进一步的：还包括重量份的40－60重量份的SOD。
进一步的：还包括0.002－0.0023重量份的钴胺素。
进一步的：包括以下重量份的组分：神经酸300份、复合神经酸600份、DHA200份、吡咯喹啉醌19份、硒酵母0.1份。
进一步的，所述蒜头果油分离提纯神经酸的具体步骤为：(1)将蒜头果油皂化、酸化，获得混合脂肪酸；(2)称取50－60重量份的尿素，加入300－400mL的无水乙醇，加热搅拌直至尿素完全溶解后加入30－40重量份的所述混合脂肪酸，再恒温槽中加热搅拌30－40min，再冷却至20－25℃结晶2－3h；(3)过滤处理：将步骤(2)所得的结晶物送入过滤器中进行过滤，获得滤液和滤渣，取滤渣，在滤渣中加入150－200mL的蒸馏水，再加热搅拌反应1－1.2h，然后加入***萃取剂进行萃取，蒸馏水水洗至中性，静置分层，取上层有机相；(4)在所述有机相中加入无水乙醇，所述有机相与无水乙醇的的用量比为3－4：1，按有机相的重量比无水乙醇的体积进行配比，水浴加热使有机相充分溶解在无水乙醇中，接着冷却至室温，在放入0－5℃的环境下进行结晶5－6h，待结晶后将其抽滤至干，得到第一次结晶产品；(5)在第一次结晶产品中再加入无水乙醇，在0～5℃环境下进行第二次结晶4－5h，得到第二次结晶产品；(6)在第二次结晶产物中再加入无水乙醇，在0～5℃环境下进行第三次结晶4－5h，得到第三次结晶产品；(7)在第三次结晶产物中再加入无水乙醇，在0～5℃环境下进行第四次结晶4－5h，得到第四次结晶产品，即为神经酸。
进一步的：所述混合脂肪酸的纯度为93－99％。
进一步的：步骤(2)的加热温度控制在55－65℃。
进一步的：第二次结晶时，第一结晶产品与无水乙醇的料液比为3：1，第三次结晶时，第二结晶产品与无水乙醇的料液比为2：1，第四次结晶时，第三结晶产品与无水乙醇的料液比为1：1。
进一步的：蒜头果油分离提纯神经酸过程中所用的无水乙醇用油酸替代。
一种神经酸，采用蒜头果油分离提纯而得，所述分离提纯方法采用上述蒜头果油分离提纯神经酸的具体步骤。
通过采用前述技术方案，本发明的有益效果为：
1、本发明以神经酸、复合神经酸、硒酵母进行配伍，能够预防和治疗阿尔兹海默症，神经酸具是神经细胞特别是大脑细胞、视神经细胞和周围神经细胞生长、再发育及维持的必需营养素，可直接作用于受损的神经纤维，促使受损神经细胞接受刺激、传导冲动、整合信息和记忆信息的能力的回复，并促进修复后的神经再生，重新产生新的分支和侧芽，致使因神经纤维和神经细胞受损而造成的记忆功能障碍、肢体运动障碍以及瘫痪等症状得到有效缓解和恢复，明显改善记忆力；复合神经酸，即磷脂酰丝氨酸，是由大豆榨油剩余物提取而得的物质，能够改善神经细胞，调节神经脉冲的传导，增进大脑记忆功能，舒缓血管平滑肌细胞，增加脑部供血作用；硒酵母，能够清除体内的自由基，具有抗氧化作用以及提高机体免疫力的作用。本发明采用上述物质按定量进行配伍，能够起到预防和治疗阿尔兹海默症的作用。
2、本发明的神经酸从蒜头果油中分离提取，最后获得的神经酸纯度达99.5％，神经酸的回收率达10.5％以上，纯度高。
3、以蒜头果油为原料进行分离提纯神经酸时，用尿素和无水乙醇与混合脂肪酸混合，尿素溶解在无水乙醇中遇混合脂肪酸时，尿素分子间以氢键结合成六面体结构，混合脂肪酸中的直链饱和脂肪酸的直径小于形成的六面体孔道直径，在结晶的过程中饱和脂肪酸能够进入到晶胞内被包合在晶胞内，然后形成尿素包合物析出，从而将饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸分离开，将烷酸去除。
4、采用四次结晶的方式，利用无水乙醇对被提取物(神经酸)即杂质的溶解度的不同，使神经酸从过饱和溶液中析出，进而获得高纯度(纯度99％以上)的神经酸。
5、进一步的，本发明的组合物中还包含0.8－1.3重量份的吡咯喹啉醌，该物质具有神经保护作用以及抗氧化租用，与上述组分进行配伍，能够进一步提升组合物的药效。
6、进一步的，配方中还添加有DHA和钴胺素，DHA具有辅助脑细胞发育，抗衰老等作用；钴胺素，即维生素B12，是神经***发育健全不可缺少的维生素。
7、进一步的，配方中还添加有超氧化物歧化酶，能够清除人体内的自由基，对预防阿尔兹海默症的发生有一定的作用。
具体实施方式
实施例一
一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，包括以下重量份的组分：神经酸300份、复合神经酸600份、DHA200份、硒酵母0.1份，所述神经酸由蒜头果油分离提纯而得。
具体的，患者按每日300mg神经酸、600毫克复合神经酸、200mgDHA、100μg硒酵母的比例服用。
所述蒜头果油分离提纯神经酸的具体步骤为：(1)将蒜头果油皂化、酸化，获得混合脂肪酸，混合脂肪酸的纯度为85％；(2)称取50重量份的尿素，加入300mL的无水乙醇，加热至60℃搅拌直至尿素完全溶解后加入30重量份的所述混合脂肪酸，再恒温槽中加热搅拌30min，再冷却至20℃结晶2h；(3)过滤处理：将步骤(2)所得的结晶物送入过滤器中进行过滤，获得滤液和滤渣，取滤渣，在滤渣中加入150mL的蒸馏水，再加热搅拌反应1h，然后加入***萃取剂进行萃取，蒸馏水水洗至中性，静置分层，取上层有机相；(4)在所述有机相中加入无水乙醇，所述有机相与无水乙醇的的用量比为4：1，按有机相的重量比无水乙醇的体积进行配比，水浴加热使有机相充分溶解在无水乙醇中，接着冷却至室温，在放入－5℃的环境下进行结晶5h，待结晶后将其抽滤至干，得到第一次结晶产品；(5)在第一次结晶产品中再加入无水乙醇，第一结晶产品与无水乙醇的料液比为3：1，在5℃环境下进行第二次结晶4h，得到第二次结晶产品；(6)在第二次结晶产物中再加入无水乙醇，第二结晶产品与无水乙醇的料液比为2：1，在5℃环境下进行第三次结晶4h，得到第三次结晶产品；(7)在第三次结晶产物中再加入无水乙醇，第三结晶产品与无水乙醇的料液比为1：1，在5℃环境下进行第四次结晶4h，得到第四次结晶产品，即为神经酸。
实施例二
一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分：神经酸280份、复合神经酸580份、DHA200份、钴胺素0.002份、硒酵母0.11份、18份的吡咯喹啉醌，所述神经酸由蒜头果油分离提纯而得，所述神经酸的制备方法与实施例一的相同，区别点仅在于蒜头果油分离提纯神经酸过程中所用的无水乙醇用油酸替代。
实施例三
一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分：神经酸310份、复合神经酸610份、DHA210份、钴胺素0.0023份、硒酵母0.12份、20份的吡咯喹啉醌，所述神经酸由蒜头果油分离提纯而得。
所述蒜头果油分离提纯神经酸的具体步骤为：(1)将蒜头果油皂化、酸化，酸化时采用磷酸作为酸化剂，获得混合脂肪酸；(2)称取60重量份的尿素，加入400mL的无水乙醇，加热至65℃恒温搅拌直至尿素完全溶解后加入40重量份的所述混合脂肪酸，所述混合脂肪酸的纯度为90％，再恒温槽中加热搅拌0min，再冷却至25℃结晶3h；(3)过滤处理：将步骤(2)所得的结晶物送入过滤器中进行过滤，获得滤液和滤渣，取滤渣，在滤渣中加入200mL的蒸馏水，再加热搅拌反应1.2h，然后加入***萃取剂进行萃取，蒸馏水水洗至中性，静置分层，取上层有机相；(4)在所述有机相中加入无水乙醇，所述有机相与无水乙醇的的用量比为4：1，按有机相的重量比无水乙醇的体积进行配比，水浴加热使有机相充分溶解在无水乙醇中，接着冷却至室温，在放入－5℃的环境下进行结晶6h，待结晶后将其抽滤至干，得到第一次结晶产品；(5)在第一次结晶产品中再加入无水乙醇，第一结晶产品与无水乙醇的料液比为3：1在5℃环境下进行第二次结晶5h，得到第二次结晶产品；(6)在第二次结晶产物中再加入无水乙醇，第二结晶产品与无水乙醇的料液比为2：1，在4℃环境下进行第三次结晶5h，得到第三次结晶产品；(7)在第三次结晶产物中再加入无水乙醇，第三结晶产品与无水乙醇的料液比为1：1，在3℃环境下进行第四次结晶5h，得到第四次结晶产品，即为神经酸。
其中，本发明所用的蒜头果油来自云南珍稀树种蒜头果，其产品生产过程是每年秋季蒜头果树果实成熟季节采摘无病虫侵害的饱满鲜果后，剥去青果皮得到带种皮的种子，蒜头果种子经自然干燥后，用压寨法获得蒜头果种仁油。
具体的，蒜头果油的制备过程为：
将霉变坏果挑除，得到鲜好的蒜头果，带壳压碎，再粉碎至粒径为0.3cm左右，常压蒸汽蒸制30min，再趁热压榨、毛油过滤、毛油精练，即获得蒜头果油。以1000kg蒜头果(含油率46％，含水率8％)计，可以得到蒜头果油210kg，油粕残油率较高，可对油粕进一步回收利用。
实施例四
一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，包括以下重量份的组分：神经酸300份、复合神经酸600份、硒酵母0.1份、SOD40份，所述神经酸由蒜头果油分离提纯而得，具体的，所述神经酸的分离提纯方法与实施例一的相同。SOD，即超氧化物歧化酶，选用耐人体胃酸和温度的种类。
具体的，患者按每日300mg神经酸、600毫克复合神经酸、100μg硒酵母、40毫克SOD的比例服用。
对本发明上述实施例所制得的神经酸性能进行检测，结果如下：
采用本发明的组合物对患有阿尔兹海默症的患者进行治疗，
患者按每日300mg神经酸、600毫克复合神经酸、200mgDHA、2μg钴胺素、100μg硒酵母的比例服用。一日一次，连续服用30天后进行观察。
显著率达100％，有效率达75％。
尽管结合优选实施方案具体展示和介绍了本发明，但所属领域的技术人员应该明白，在不脱离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围内，在形式上和细节上可以对本发明做出各种变化，均为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分：神经酸280－310份、复合神经酸580－610份、硒酵母0.10－0.12份，所述神经酸由蒜头果油分离提纯而得。
2.根据权利要求1所述的一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于：还包括200－210重量份的DHA、18－20重量份的吡咯喹啉醌。
3.根据权利要求1所述的一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于：还包括40－60重量份的SOD。
4.根据权利要求1或2所述的一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于：还包括0.002－0.0023重量份的钴胺素。
5.根据权利要求2所述的一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分：神经酸300份、复合神经酸600份、DHA200份、吡咯喹啉醌19份、硒酵母0.1份。
6.根据权利要求1所述的一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于，所述蒜头果油分离提纯神经酸的具体步骤为：(1)将蒜头果油皂化、酸化，获得混合脂肪酸；(2)称取50－60重量份的尿素，加入300－400mL的无水乙醇，加热搅拌直至尿素完全溶解后加入30－40重量份的所述混合脂肪酸，再恒温槽中加热搅拌30－40min，再冷却至20－25℃结晶2－3h；(3)过滤处理：将步骤(2)所得的结晶物送入过滤器中进行过滤，获得滤液和滤渣，取滤渣，在滤渣中加入150－200mL的蒸馏水，再加热搅拌反应1－1.2h，然后加入***萃取剂进行萃取，蒸馏水水洗至中性，静置分层，取上层有机相；(4)在所述有机相中加入无水乙醇，所述有机相与无水乙醇的的用量比为3－4：1，按有机相的重量比无水乙醇的体积进行配比，水浴加热使有机相充分溶解在无水乙醇中，接着冷却至室温，在放入0～－5℃的环境下进行结晶5－6h，待结晶后将其抽滤至干，得到第一次结晶产品；(5)在第一次结晶产品中再加入无水乙醇，在0～5℃环境下进行第二次结晶4－5h，得到第二次结晶产品；(6)在第二次结晶产物中再加入无水乙醇，在0～5℃环境下进行第三次结晶4－5h，得到第三次结晶产品；(7)在第三次结晶产物中再加入无水乙醇，在0～5℃环境下进行第四次结晶4－5h，得到第四次结晶产品，即为神经酸。
7.根据权利要求6所述的一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于：所述混合脂肪酸的纯度为93－99％。
8.根据权利要求6所述的一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于：步骤(2)的加热温度控制在55－65℃。
9.根据权利要求6所述的一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于：第二次结晶时，第一结晶产品与无水乙醇的料液比为3：1，第三次结晶时，第二结晶产品与无水乙醇的料液比为2：1，第四次结晶时，第三结晶产品与无水乙醇的料液比为1：1。
10.根据权利要求6所述的一种预防和治疗阿尔兹海默症的组合物，其特征在于：蒜头果油分离提纯神经酸过程中所用的无水乙醇用油酸替代。
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