CN116850221B - 一种牡丹雄蕊菟丝子复合物及其制备方法和应用 - Google Patents
一种牡丹雄蕊菟丝子复合物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116850221B CN116850221B CN202310896726.7A CN202310896726A CN116850221B CN 116850221 B CN116850221 B CN 116850221B CN 202310896726 A CN202310896726 A CN 202310896726A CN 116850221 B CN116850221 B CN 116850221B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- peony
- semen cuscutae
- stamen
- stamens
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 235000006484 Paeonia officinalis Nutrition 0.000 title claims abstract description 90
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 title claims abstract description 66
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 42
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 244000170916 Paeonia officinalis Species 0.000 title 1
- 241000736199 Paeonia Species 0.000 claims abstract description 91
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 28
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 11
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 11
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 10
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 claims description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 8
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 5
- 239000012267 brine Substances 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 241000847925 Paeonia ostii Species 0.000 claims description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 241000896531 Paeonia rockii Species 0.000 claims 1
- 206010018367 Glomerulonephritis chronic Diseases 0.000 abstract description 55
- 238000011552 rat model Methods 0.000 abstract description 36
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 abstract description 33
- 230000001434 glomerular Effects 0.000 abstract description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 17
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 abstract description 15
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 11
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 11
- 230000008021 deposition Effects 0.000 abstract description 11
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 abstract description 11
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 abstract description 8
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 abstract description 7
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 abstract description 5
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 abstract description 5
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 abstract description 5
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 abstract description 5
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 abstract description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000011206 morphological examination Methods 0.000 abstract description 3
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 abstract description 2
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 abstract description 2
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 abstract description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 18
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 18
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 11
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 10
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 5
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 4
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 4
- 239000005541 ACE inhibitor Substances 0.000 description 3
- 101710129690 Angiotensin-converting enzyme inhibitor Proteins 0.000 description 3
- 101710086378 Bradykinin-potentiating and C-type natriuretic peptides Proteins 0.000 description 3
- 241000110637 Cuscuta chinensis Species 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N Paeoniflorin Chemical compound C([C@]12[C@H]3O[C@]4(O)C[C@](O3)([C@]1(C[C@@H]42)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C)OC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N 0.000 description 3
- 229940044094 angiotensin-converting-enzyme inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N paeoniflorin Natural products O1C(C)(C2(CC34)OC5C(C(O)C(O)C(CO)O5)O)CC3(O)OC1C24COC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 3
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 2
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 2
- 244000148178 Paeonia officinalis subsp humilis Species 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 2
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 2
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 2
- -1 flavonoid compounds Chemical class 0.000 description 2
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 2
- 208000006750 hematuria Diseases 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 206010029446 nocturia Diseases 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 description 2
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 description 2
- 239000001648 tannin Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 2
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 2
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 2
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000022461 Glomerular disease Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013901 Nephropathies and tubular disease Diseases 0.000 description 1
- 208000007443 Neurasthenia Diseases 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000005001 Paeonia suffruticosa Species 0.000 description 1
- 235000003889 Paeonia suffruticosa Nutrition 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 1
- 229940121792 Thiazide diuretic Drugs 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003537 Vitamin B3 Natural products 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N [N].NC(N)=O Chemical compound [N].NC(N)=O PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002333 angiotensin II receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940126317 angiotensin II receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 206010003549 asthenia Diseases 0.000 description 1
- 210000001099 axilla Anatomy 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000022831 chronic renal failure syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 208000017574 dry cough Diseases 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 1
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 210000000585 glomerular basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 1
- 206010061989 glomerulosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 210000004013 groin Anatomy 0.000 description 1
- 208000035474 group of disease Diseases 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002366 mineral element Substances 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N nicotinic acid amide Natural products NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000857 poor renal function Toxicity 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 235000008113 selfheal Nutrition 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 1
- 208000010731 swelling symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003451 thiazide diuretic agent Substances 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000002936 tranquilizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000019160 vitamin B3 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011708 vitamin B3 Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/71—Ranunculaceae (Buttercup family), e.g. larkspur, hepatica, hydrastis, columbine or goldenseal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/39—Convolvulaceae (Morning-glory family), e.g. bindweed
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/43—Cuscutaceae (Dodder family), e.g. Cuscuta epithymum or greater dodder
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/65—Paeoniaceae (Peony family), e.g. Chinese peony
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种牡丹雄蕊菟丝子复合物及其制备方法和应用。本发明提供的牡丹雄蕊菟丝子复合物由以下原料组成：牡丹雄蕊10‑18重量份，菟丝子5‑12重量份。本发明采用牡丹雄蕊菟丝子复合物低、中、高剂量组干预慢性肾炎大鼠模型，检测尿蛋白、尿酸、BUN及Cr水平，测定肾重及肾体比，并进行病理形态检查，免疫荧光法检测肾小球IgG、C3沉积情况，免疫组化染色观察大鼠左肾组织肿瘤坏死因子‑α(TNF‑α)、白细胞介素‑1β(IL‑1β)蛋白表达情况。结果表明牡丹雄蕊菟丝子复合物对慢性肾炎大鼠模型具有显著治疗作用，且具有一定的剂量依赖性。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种牡丹雄蕊菟丝子复合物及其制备方法和应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
慢性肾炎(CKD)，主要表现为肾小球病，其病理特征是肾小球滤过膜的损伤和炎症反应。常见症状包括蛋白尿、血尿、高血压、水肿等。由于发病机制不同，CKD的病程通常较长且进展缓慢。长期的肾小球损伤和炎症反应会导致肾小球硬化和纤维化，最终可能导致不同程度的肾功能减退，并发展为慢性肾衰竭。CKD的治疗包括控制病因、控制高血压和糖尿病等基础疾病、控制蛋白尿和血压、使用肾保护剂等。因此，慢性肾炎需要及时诊断和治疗，以避免病情进一步恶化。患者通常可能长期没有症状，直到肾功能受损严重时才出现明显的症状，需要特别强调的是，慢性肾炎不是单一的疾病，而是指一组疾病。从不同的角度，慢性肾炎可被分成多种类型，而且不同的分类间还存在交叉和重叠。
牡丹雄蕊是牡丹花的重要组成部分，它呈现出圆锥形或圆柱形，长约2-4厘米，直径约1-2厘米。牡丹雄蕊的主要成分包括芍药苷、黄酮类化合物、鞣质、挥发油等。其中，芍药苷是一种具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性的化合物。黄酮类化合物多具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。鞣质具有收敛、止血、抗菌等作用，常用于治疗痢疾、腹泻等症状。挥发油则具有镇痛、镇静、抗菌等作用，常用于治疗头痛、神经衰弱、呼吸道感染等症状。牡丹雄蕊因其风味与口感被制作成牡丹花蕊茶广泛食用，但是对其功能作用方面的评价研究较少。发明人初步对经常饮用牡丹花蕊茶的人群(约30例)调查发现，经常饮用牡丹花蕊，特别是中老年女性尿频、夜尿次数多的现象明显改善。
目前，慢性肾炎的治疗主要依靠药物治疗、营养支持、透析治疗等手段。然而，这些治疗手段存在一定的局限性，不能完全满足患者的需求。药物治疗主要有噻嗪类利尿剂，血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)/血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)，糖皮质激素及细胞毒药物，抗血小板药物等，主要是改善水肿、血尿、尿蛋白等症状，但是副作用较大，且对部分肾功能较差的患者疗效不明显甚至无效。当血肌酐＞264μmol/L时务必在严密观察下谨慎使用，少数病人应用ACEI有持续性干咳的副作用，糖皮质激素及细胞毒药物一般不主张积极应用，无禁忌证者可试用，无效者则应及时逐步撤去，使用的抗感染药物只能治疗表面症状，并可能伴随副作用，如腹胀、咳嗽、扁桃体红肿疼痛、咽部干燥疼痛等副作用。具有改善肾炎症状，强肾作用的植物制剂是治疗慢性肾炎的理想药物，但是理想的可用于慢性肾炎的植物制剂较少，缺少疗效显著的植物制剂。
发明内容
为了解决现有技术的不足，本发明的目的是提供一种牡丹雄蕊菟丝子复合物及其制备方法和应用。菟丝子甘、温，归肾、肝、脾经，药食同源，具有滋补肝肾、固精缩尿、安胎、明目、止泻之功效，始载《神农本草经》，被列为上品。甘味一般具有滋补作用，甘辛微温，禀气中和，既可补阳，又可益阴，具有温而不燥，补而不滞的特点。固精安胎与性激素样作用。中医认为肾为先天之本，内寓元阴与元阳，是人体生殖发育的根源，脏腑机能活动的原动力。牡丹雄蕊是牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)的精华部分，其营养极为丰富，含有多种矿物质元素，如钾、镁、钙、磷等，其中所含铁和锌等人体所需的微量元素，其含量是牡丹花瓣的数倍，天然富含角鲨烯、维生素A、维生素C、维生素E和B族维生素，含有18种氨基酸，其中含量最高的是谷氨酸和天冬氨酸分别达到3.63％和2.83％。花蕊中还富含活性多糖、蛋白质、芍药苷、α-亚麻酸、儿茶素等多种活性成分，是一种极佳的天然保健食品原料。但是目前关于牡丹雄蕊的功能性评价的研究较少，几乎没有关于牡丹雄蕊治疗慢性肾炎方面的详细研究，只是将未开放凤丹牡丹雄蕊经初加工制作成普通的茶食用。经初步调查经常食用牡丹花蕊茶的，特别是中老年人有明显的缓解尿频，夜尿次数减少的状况。并经初步动物实验结果表明，牡丹雄蕊复合物针对慢性肾炎大鼠模型具有较好的疗效，是一种较理想的治疗慢性肾炎的天然植物来源，具有较好的开发和应用前景，本发明为探究牡丹雄蕊对慢性肾炎的治疗作用，将牡丹雄蕊和菟丝子经过复配，辅以淡盐水浸渍，引药归肾经，并经药理实验评价，人体试食等确定了牡丹雄蕊菟丝子复合物对慢性肾炎具有较好的治疗作用，并确定了该复合物的制备方法。通过大鼠慢性肾炎模型验证了其对慢性肾炎具有治疗作用，并经人体试食牡丹雄蕊菟丝子复合物煎剂，发现明显改善尿频等肾炎症状，这为慢性肾炎的治疗提供了新的手段。
为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：
第一方面，本发明提供了一种牡丹雄蕊菟丝子复合物，由以下原料组成：牡丹雄蕊10-18重量份，菟丝子5-12重量份。
优选地，由以下原料组成：牡丹雄蕊15重量份、菟丝子8重量份。
优选地，所述牡丹雄蕊包括凤丹雄蕊或紫斑牡丹雄蕊中的一种或多种。
第二方面，本发明提供了一种如第一方面所述的牡丹雄蕊菟丝子复合物的制备方法，包括以下步骤：
S1、牡丹雄蕊经脱敏处理，然后经淡盐水少许浸渍约10分钟，低温烘干后备用，菟丝子经经淡盐水少许浸渍约20分钟，烘焙后备用；
S2、将经步骤S1处理的牡丹雄蕊和菟丝子破皮打碎后浸渍于温水中，然后第一次超声处理，第一次过滤，滤渣加水后进行第二次超声处理，第二次过滤，合并两次滤液，滤液减压真空浓缩，获得所述牡丹雄蕊菟丝子复合物。
优选地，步骤S1中，所述牡丹雄蕊需经过脱敏，脱敏温度为120℃，1-3min或自制微波脱敏，牡丹雄蕊厚度3-6mm，功率3000-5000W，时间为1-3min，温度65-80℃。
优选地，步骤S1中，所述低温烘干的温度为55-65℃，时间为4.5-5.5h；所述烘焙的温度为75-85℃，时间为7.5-8.5h。
优选地，步骤S1中，所述盐水为淡盐水，浓度为1.2-1.8％，牡丹雄蕊和菟丝子所需盐水量为牡丹雄蕊质量的1-2倍和1/4-2/1倍，浸渍时间为8-15分钟和15-25分钟。
优选地，步骤S2中，所述温水的重量为牡丹雄蕊和菟丝子总质量的19-21倍，温度为65-75℃，浸渍时间为1.5-2.5h。
优选地，步骤S2中，第一次超声处理25-35min，第二次超声处理55-65min；滤渣加入质量为牡丹雄蕊和菟丝子总质量14-16倍的水。
优选地，步骤S2中，减压真空浓缩的温度不超过70℃，减压真空浓缩至质量为牡丹雄蕊和菟丝子总质量的7.9-8.1倍。
第三方面，本发明提供了如第一方面所述的牡丹雄蕊菟丝子复合物在制备治疗肾炎药物和/或食品和/或保健品中的应用。
第四方面，本发明提供了一种用于治疗肾炎的药物，其特征在于，包括如第一方面所述的牡丹雄蕊菟丝子复合物以及药学上可接受的辅料。
上述本发明的一种或多种技术方案取得的有益效果如下：
本发明将牡丹雄蕊与菟丝子制备为复合物，通过在大鼠慢性肾炎模型中施用不同剂量的牡丹雄蕊菟丝子复合物，验证了其对慢性肾炎的治疗作用。治疗1周后，与模型组比较，阳性组和高剂量组的尿蛋白量明显下降(P<0.05)。在治疗两周后，与模型组比较，阳性组和高剂量组的尿蛋白量显著下降(P<0.05)。与模型组相比，阳性组及高、中、低牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉剂量组的尿酸、BUN、Cr均显著下降(P<0.01，P<0.05)。尤其是高剂量组的尿酸、BUN、Cr的水平显著下降(P<0.01)接近于阳性组。各剂量牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉均能降低肾脏重和肾体比，尤其高剂量牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉组特别对右肾重量的降低具有显著性差异，且与剂量有着重要关系，当牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉的剂量高于高剂量组时效果会更加明显。大鼠肾脏病理变化在低、中、高剂量组中均明显减轻。从肾小球免疫荧光C3、IgG沉积表达结果可以看出，高剂量肾小球组均能够显著降低肾小球C3和IgG沉积的表达水平(P<0.01)，从肾脏IL-1β的表达结果可以看出。阳性对照组和治疗高剂量组能够降低肾脏IL-1β的表达水平，但治疗中剂量组和低剂量组与模型组无显著差异。从肾脏TNF-α的表达结果可以看出，阳性对照组和各牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉组均表现为表达水平降低。结合24h尿蛋白量水平、尿酸、BUN、Cr水平以及病理形态检查、蛋白表达情况等综合判断牡丹雄蕊对慢性肾炎大鼠模型具有显著治疗作用。
本发明提供的牡丹雄蕊菟丝子复合物对慢性肾炎大鼠模型具有显著治疗作用，且具有一定的剂量依赖性。
本发明提供的牡丹雄蕊菟丝子复合物制备方法简单，可进一步加工为药物、食品或保健品，应用前景广阔。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为实施例2中不同组别慢性肾炎大鼠模型的病理切片图；
图2为实施例2中不同组别慢性肾炎大鼠模型的肾小球免疫荧光C3沉积表达情况；
图3为实施例2中不同组别慢性肾炎大鼠模型的肾小球免疫荧光IgG沉积表达情况；
图4为实施例2中空白组慢性肾炎大鼠模型的3号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图5为实施例2中模型组慢性肾炎大鼠模型的9号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图6为实施例2中模型组慢性肾炎大鼠模型的12号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图7为实施例2中阳性对照组慢性肾炎大鼠模型的15号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图8为实施例2中阳性对照组慢性肾炎大鼠模型的18号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图9为实施例2中高剂量组慢性肾炎大鼠模型的21号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图10为实施例2中高剂量组慢性肾炎大鼠模型的29号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图11为实施例2中中剂量组慢性肾炎大鼠模型的35号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图12为实施例2中中剂量组慢性肾炎大鼠模型的37号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图13为实施例2中低剂量组慢性肾炎大鼠模型的40号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图14为实施例2中低剂量组慢性肾炎大鼠模型的45号动物的免疫组化图像，放大倍数为400X；
图15为实施例2中不同组别慢性肾炎大鼠模型的肾脏IL-1β表达结果；
图16为实施例2中不同组别慢性肾炎大鼠模型的肾脏TNF-α表达结果。
具体实施方式
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例与对比例详细说明本发明的技术方案。
实施例1
凤丹或紫斑牡丹的牡丹雄蕊于3月底至4月中旬采摘，鲜花蕊顶端全部露粉、萼片全部裂开，花蕊肉眼可见为准，采摘应在每日上午10时以前结束。如气温较低，可适当延迟采摘时间。鲜牡丹雄蕊经脱敏处理和淡盐水处理60℃，5h低温烘干，使雄蕊内的多种营养成分包括氨基酸、蛋白质、多糖、黄酮、维生素E、维生素B3等慢慢聚集成干性物质，备用。菟丝子淡盐水处理经80℃，烘焙8小时备用。
取预处理好的牡丹雄蕊15份和菟丝子8份破皮打碎，加70℃牡丹雄蕊和菟丝子总重量20倍的水温水浸渍2小时，然后超声处理30min,过滤，滤渣加牡丹雄蕊和菟丝子总重量15倍的水，超声处理1小时，过滤，合并两次滤液，减压真空浓缩(温度不超过70℃)至为牡丹雄蕊和菟丝子总重量的8倍重量的浸膏。将浸膏冷冻干燥获得牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉。
实施例2
取SD雄性大鼠48只，体重为(220±10)g，年龄为(6±1)周。于温度为(22±2)℃、湿度为55％±5％、12小时光照和12小时黑暗交替的环境下培养。
按照Border的方法对慢性肾炎大鼠模型进行了改良。首先，取适量C-BSA干粉，将其溶于PBS(pH 7.2～7.4)中，与不完全弗氏佐剂1:1混合成乳白色悬液，浓度为2mg/ml。接着，使大鼠禁食不禁水12小时，并在第1和第8天分别注射2ml 2mg/ml的C-BSA溶液于其背部、腋下和腹股沟，每只大鼠注射一次。自第10天起，每周进行3次尾静脉注射C-BSA(16mg·kg-1)。经过连续免疫3周后，进行了相应的实验观察和分析。在注射结束后的第三周，收集大鼠24小时的尿液。与空白对照组相比，检测结果表明有明显的蛋白尿出现。以上观察提示，C-BSA成功诱导了慢性肾炎大鼠模型。
在成功制备慢性肾炎大鼠模型后，随机将大鼠分为六组：空白组、模型组、阳性对照组、高剂量组(20mg/(kg·d)实施例1的牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉)、中剂量组(10mg/(kg·d)实施例1的牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉)、低剂量组(5mg/(kg·d)实施例1的牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉)，每组8只。给药量计算使用的是体表面积计算法。阳性对照组给予肾炎四味胶囊，剂量为3g/(kg·d)；模型组与空白组给予等量生理盐水灌胃，每日1次，持续4周。
测定尿蛋白水平的时间点包括造模后、给药治疗第1周、第2周和第4周。每次测定前，将大鼠置于代谢笼中24小时，收集其尿液，检测尿量后使用半自动生化分析仪检测尿蛋白水平。
给药治疗第4周后，从大鼠眼内眦取1～3ml血液进行处理，并使用试剂盒检测大鼠的尿酸、BUN和Cr水平。
在进行最后一次取血后，通过颈椎脱臼的方式将大鼠处死，并取出左右肾进行称重。计算双肾重量与体重之比(肾体比)。
进行肾脏组织的病理检测时，应首先用PBS洗净，去除表面包膜，然后放入10％***溶液中进行固定。接下来，进行乙醇逐级脱水，石蜡包埋处理，制成3-4μm厚的切片，并使用HE染色进行观察。最后，在显微镜下观察病理变化。
对于肾小球和肾小管的病理检测，应先使用生理盐水清洗，然后浸泡在10％中性甲醛溶液中固定。随后进行常规脱水和石蜡包埋，制成3μm厚的切片，并进行PAS染色以观察肾小球的病理变化。此外，在HE染色下，随机选择10个只有肾小管而无肾小球的视野，对肾小管间质损伤和肾脏炎性细胞浸润进行半定量测定。
取大鼠肾脏组织用OTC进行包埋，用冰冻切片机切成4μm切片，用预冷丙酮固定10min，清洗后备用。取备用切片，滴加FITC标记的IgG抗体(1∶50)，避光37℃下孵育30min，清洗抗体后滴加50％甘油封片，在荧光显微镜下观察肾小球IgG沉积情况。取备用切片，用5％ BSA室温下孵育封闭30min；清洗后滴加C3抗体(1∶100)，4℃下孵育过夜；清洗抗体后，滴加FITC标记二抗，湿盒中37℃下避光孵育1h；清洗抗体后滴加50％甘油封片，在荧光显微镜下观察肾小球C3沉积情况。
用免疫组化染色观察大鼠左肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达情况。
采用SPSS数据软件进行分析，以(x±s)表示，组间比较采用T检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。
如表1所示，在慢性肾炎大鼠模型治疗期间，治疗1周后，与模型组比较，阳性组和高剂量组的尿蛋白量明显下降(P<0.05)。在治疗两周后，与模型组比较，阳性组和高剂量组的尿蛋白量显著下降(P<0.05)。低剂量组和中剂量组在治疗一周、两周和四周后，也能够降低慢性肾炎大鼠模型的尿蛋白量水平，但是没有达到统计学意义(P>0.05)。综上所述，低、中、高剂量牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉剂量组在治疗慢性肾炎大鼠模型时，均能够降低尿蛋白量水平，但是存在一定的量效关系，剂量不足，效果不理想，与阳性组比较，合适的剂量情况下，治疗效果明显。
表1不同组别慢性肾炎大鼠模型的蛋白尿量水平变化(n＝8)
**与空白组对比，P<0.01；*与空白组对比，P<0.05；##与模型组对比，P<0.01；#与模型组对比，P<0.05。
血中尿素氮(BUN)、Cr、尿酸水平可以反映肾小球的滤过功能，可通过其水平的检测反映患者的肾功能情况。如表2所示，与空白组相比，模型组在慢性肾炎大鼠模型给药治疗第四周后的尿酸、BUN、Cr显著增高(P<0.01)。与模型组相比，阳性组及高、中、低牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉剂量组的尿酸、BUN、Cr均显著下降(P<0.01，P<0.05)。尤其是高剂量组的尿酸、BUN、Cr的水平显著下降(P<0.01)接近于阳性组。
表2不同组别慢性肾炎大鼠模型的尿酸、BUN、Cr水平(n＝8)
**与空白组对比，P<0.01；*与空白组对比，P<0.05；##与模型组对比，P<0.01；#与模型组对比，P<0.05。
如表3所示，与空白对照组相比，慢性肾炎大鼠模型中的模型组在最后一次取血后左肾重量、右肾重量、肾体比(左)、肾体比(左)和肾体比(总)方面均显著提高(P<0.05或P<0.01)。说明慢性肾炎大鼠的肾脏肿胀不治疗情况下不能自愈。
与模型组相比，阳性组以及低、中、高剂量牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉组在左肾重量、右肾重量、肾体比(左)、肾体比(右)和肾体比(总)方面均表现下降趋势。特别是在高剂量牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉组中，慢性肾炎大鼠模型肾体比(总)、肾体比(右)明显降低(P<0.05)，而在中剂量牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉组中，慢性肾炎大鼠模型的右肾重量虽然降低，但并没有达到统计学意义(P>0.05)。
这些结果表明，牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉剂量能缓解慢性肾炎大鼠模型的肾脏肿胀症状。具体而言，高剂量牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉组对右肾重量的降低具有显著性差异，牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉的剂量有着重要意义，当牡丹雄蕊菟丝子复合物冻干粉的剂量高于高剂量组时效果会更加明显。
表3不同组别慢性肾炎大鼠模型的肾体比(n＝6)
**与空白组对比，P<0.01；*与空白组对比，P<0.05；##与模型组对比，P<0.01；#与模型组对比，P<0.05。
如图1所示，与空白组比较，模型组慢性肾炎大鼠肾脏组织中基底膜可见明显的***并伴有厚薄欠均匀情况。与模型组相比，阳性组和不同剂量，特别是高剂量组牡丹雄蕊菟丝子复合物组的大鼠肾脏组织中肾小球基底膜的厚度分布均匀。这表明，牡丹雄蕊菟丝子复合物可以改善慢性肾炎大鼠模型中肾脏的病理形态。
如图2所示，从肾小球免疫荧光C3沉积表达结果可以看出，正常肾小球组微水平表达，模型肾小球组表达升高。阳性对照肾小球组和高剂量肾小球组能够降低肾小球C3沉积的表达水平，中剂量肾小球组表达水平要比低剂量肾小球组低。
如图3从肾小球免疫荧光IgG沉积表达结果可以看出，正常肾小球组微水平表达，模型肾小球组高表达水平。阳性对照肾小球组接近于正常肾小球组，而高剂量肾小球组肾小球C3沉积的表达为低表达水平，中剂量肾小球组表达水平和低剂量肾小球组基本接近。结合24h尿蛋白量水平、尿酸、BUN、Cr水平以及病理形态检查等综合判断牡丹雄蕊对慢性肾炎大鼠模型具有治疗作用。
如图4-16所示，从肾脏IL-1β的表达结果可以看出，正常肾脏低水平表达，慢性肾炎模型组表达升高。阳性对照组和治疗高剂量组能够降低肾脏IL-1β的表达水平，但治疗中剂量组和低剂量组与模型组无显著差异，肾脏低剂量组比模型组稍高。可能与剂量有关系。如图4-16所示，从肾脏TNF-α的表达结果可以看出，正常肾脏低水平表达，慢性肾炎模型组表达显著升高。阳性对照组和治疗各组均表现为表达水平降低。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种用于治疗肾炎的牡丹雄蕊菟丝子复合物，其特征在于，由牡丹雄蕊10-18重量份和菟丝子5-12重量份组成并通过以下制备方法获得：
S1、牡丹雄蕊经脱敏处理、盐水浸渍和低温烘干后备用，菟丝子经盐水浸渍和烘焙后备用；
S2、将经步骤S1处理的牡丹雄蕊和菟丝子破皮打碎后浸渍于温水中，然后第一次超声处理，第一次过滤，滤渣加水后进行第二次超声处理，第二次过滤，合并两次滤液，滤液减压真空浓缩，获得所述牡丹雄蕊菟丝子复合物；
步骤S1中，所述牡丹雄蕊需经过脱敏，脱敏温度为120℃，1-3min或自制微波脱敏，牡丹雄蕊厚度3-6mm，功率3000-5000W，时间为1-3min，温度65-80℃；所述低温烘干的温度为55-65 ℃，时间为4.5-5.5 h；所述烘焙的温度为75-85 ℃，时间为7.5-8.5 h；所述盐水为淡盐水，浓度为1.2-1.8%，牡丹雄蕊和菟丝子所需盐水量为牡丹雄蕊质量的1-2倍和1/4-2/1倍，浸渍时间为8-15分钟和15-25分钟；
步骤S2中，所述温水的重量为牡丹雄蕊和菟丝子总质量的19-21倍，温度为65-75 ℃，浸渍时间为1.5-2.5 h；
步骤S2中，第一次超声处理25-35 min，第二次超声处理55-65 min；滤渣加入质量为牡丹雄蕊和菟丝子总质量14-16倍的水；
步骤S2中，减压真空浓缩的温度不超过70 ℃，减压真空浓缩至质量为牡丹雄蕊和菟丝子总质量的7.9-8.1倍。
2.如权利要求1所述的牡丹雄蕊菟丝子复合物，其特征在于，由以下原料组成：牡丹雄蕊15重量份、菟丝子8重量份。
3.如权利要求1或2所述的牡丹雄蕊菟丝子复合物，其特征在于，所述牡丹雄蕊为凤丹雄蕊或紫斑牡丹雄蕊中的一种或多种。
4.如权利要求1-3任一项所述的牡丹雄蕊菟丝子复合物在制备治疗肾炎药物中的应用。
5.一种用于治疗肾炎的药物，其特征在于，由如权利要求1-3任一项所述的牡丹雄蕊菟丝子复合物以及药学上可接受的辅料组成。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310896726.7A CN116850221B (zh) | 2023-07-20 | 2023-07-20 | 一种牡丹雄蕊菟丝子复合物及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310896726.7A CN116850221B (zh) | 2023-07-20 | 2023-07-20 | 一种牡丹雄蕊菟丝子复合物及其制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116850221A CN116850221A (zh) | 2023-10-10 |
| CN116850221B true CN116850221B (zh) | 2024-06-11 |
Family
ID=88232073
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310896726.7A Active CN116850221B (zh) | 2023-07-20 | 2023-07-20 | 一种牡丹雄蕊菟丝子复合物及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116850221B (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2002254842A1 (en) * | 2002-04-09 | 2003-10-27 | Guangzhou Chen Li Ji Pharmaceutical Factory | An anti-rheumatism medicament and method to prepare thereof |
| CN102379969A (zh) * | 2011-10-18 | 2012-03-21 | 孙克勤 | 一种治疗***的中药组合物 |
| CN102599519A (zh) * | 2012-03-31 | 2012-07-25 | 山东农业大学 | 一种制备牡丹花雄蕊浸膏的方法 |
| CN105031135A (zh) * | 2014-11-27 | 2015-11-11 | 青岛申达高新技术开发有限公司 | 一种治疗肝肾虚损型痛经的中药组合物及其制备方法 |
| CN107875233A (zh) * | 2017-12-08 | 2018-04-06 | 代哲尘 | 一种治疗慢性肾小球肾炎的中药组合物及其制备方法 |
| CN113499369A (zh) * | 2021-08-10 | 2021-10-15 | 菏泽瑞璞牡丹产业科技发展有限公司 | 一种牡丹花蕊治疗***疾病的组合物及其制备方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1119164C (zh) * | 2001-08-06 | 2003-08-27 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 治疗慢性肾功能不全病的药物及其制备方法 |
-
2023
- 2023-07-20 CN CN202310896726.7A patent/CN116850221B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2002254842A1 (en) * | 2002-04-09 | 2003-10-27 | Guangzhou Chen Li Ji Pharmaceutical Factory | An anti-rheumatism medicament and method to prepare thereof |
| CN102379969A (zh) * | 2011-10-18 | 2012-03-21 | 孙克勤 | 一种治疗***的中药组合物 |
| CN102599519A (zh) * | 2012-03-31 | 2012-07-25 | 山东农业大学 | 一种制备牡丹花雄蕊浸膏的方法 |
| CN105031135A (zh) * | 2014-11-27 | 2015-11-11 | 青岛申达高新技术开发有限公司 | 一种治疗肝肾虚损型痛经的中药组合物及其制备方法 |
| CN107875233A (zh) * | 2017-12-08 | 2018-04-06 | 代哲尘 | 一种治疗慢性肾小球肾炎的中药组合物及其制备方法 |
| CN113499369A (zh) * | 2021-08-10 | 2021-10-15 | 菏泽瑞璞牡丹产业科技发展有限公司 | 一种牡丹花蕊治疗***疾病的组合物及其制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 牡丹花蕊全营养提取物泡腾片的研制;袁文鹏，等;粮食与油脂;20221231;第35卷(第01期);第106-110页 * |
| 菟丝子的价值及栽培技术;孙玉娟, 等;特种经济动植物;20030630(06);第25页 * |
| 郑治敬，等.《微观中药西用临床手册》.天津科技翻译出版有限公司,2015,第363页倒数第1-2段. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116850221A (zh) | 2023-10-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105753935B (zh) | 一种葵花盘小分子肽及制备方法和医用用途 | |
| CN101991832B (zh) | 一种治疗特发性肺纤维化的药物及其制备方法 | |
| KR101339706B1 (ko) | 홍삼 포접화합물, 면역 농축물 및 유산균을 유효성분으로 함유하는 면역증강 복합 조성물 | |
| CN107961366A (zh) | 葵花小分子肽在降尿酸溶解痛风石修复肾功能中的应用 | |
| KR100611796B1 (ko) | 십전대보단 성분을 함유한 화장료 조성물 및 이의 제조 방법 | |
| WO2008037222A1 (en) | A hypolipidemic composition and its use | |
| CN106974952A (zh) | 鲜人参活性提取物在制备治疗口腔及消化道溃疡药物中的应用 | |
| CN116850221B (zh) | 一种牡丹雄蕊菟丝子复合物及其制备方法和应用 | |
| CN111840425A (zh) | 一种治疗糖尿病肾病的中药组合物及其应用 | |
| WO2015190872A1 (ko) | 스피루리나 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 및 치료용 약학적 조성물 | |
| CN106070783A (zh) | 一种薏米祛湿茶的生产工艺 | |
| CN106963803B (zh) | 绞股蓝总黄酮在制备防治心肌肥厚的药物中的应用 | |
| CN109645464A (zh) | 具有活血降脂溶栓和中风康复效果复合营养素及制备方法 | |
| CN113056279B (zh) | 美洲大蠊提取物、其制剂以及它们的制备方法和应用 | |
| CN108041558A (zh) | 一种养生酱油及其制备方法 | |
| CN111407783B (zh) | 赶黄草在制备治疗高蛋白尿药物中的应用 | |
| CN111150056A (zh) | 一种诺丽肽酵素及其制备方法和应用 | |
| CN112933201A (zh) | 一种用于治疗糖尿病肾病的中药组合物、中药制剂及其制备方法 | |
| CN115634276B (zh) | 一种利水渗湿的药物制剂在膜性肾病治疗领域的应用 | |
| CN116585432B (zh) | 一种药物组合物及其制备方法与在制备解毒益肾药物中的应用 | |
| CN111298061B (zh) | 一种清热解毒、祛瘀散结的中药组合物及其制备方法 | |
| CN109694895A (zh) | 松花活性肽、包含其的组合物、木耳片及其制备工艺 | |
| KR101966879B1 (ko) | 백합 추출물 및 계혈등 추출물을 유효성분으로 포함하는 여성 폐경기 증후군 치료 또는 예방용 조성물 | |
| JPH10236967A (ja) | 甘草発酵物からなる薬剤 | |
| CN115414442A (zh) | 一种用于治疗脂溢性脱发的中药制剂及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |