CN116769645A - 一株耐冷菌trm86011及其低温促进小麦苗期生长的应用 - Google Patents

一株耐冷菌trm86011及其低温促进小麦苗期生长的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN116769645A
CN116769645A CN202310532128.1A CN202310532128A CN116769645A CN 116769645 A CN116769645 A CN 116769645A CN 202310532128 A CN202310532128 A CN 202310532128A CN 116769645 A CN116769645 A CN 116769645A
Authority
CN
China
Prior art keywords
wheat
growth
trm86011
strain
promoting
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202310532128.1A
Other languages
English (en)
Inventor
任敏
陈喆
窦旭峰
刘兰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tarim University
Original Assignee
Tarim University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tarim University filed Critical Tarim University
Priority to CN202310532128.1A priority Critical patent/CN116769645A/zh
Publication of CN116769645A publication Critical patent/CN116769645A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G22/00—Cultivation of specific crops or plants not otherwise provided for
    • A01G22/20—Cereals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G7/00—Botany in general
    • A01G7/06—Treatment of growing trees or plants, e.g. for preventing decay of wood, for tingeing flowers or wood, for prolonging the life of plants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P21/00—Plant growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/13—Brevibacterium

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Forests & Forestry (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一株耐冷菌(Brevibacteriumfrigoritolerans)TRM86011及其低温促进小麦苗期生长的应用，属于植物营养和低温胁迫栽培技术领域。所述耐冷菌TRM86011已于2023年1月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO：M2023038，将其菌悬液接种到10℃低温组培瓶培养的冬小麦后能明显的促进小麦茎叶鲜重、根鲜重和须根数的增长，接种到10℃低温盆栽培养的冬小麦后能明显的促进分蘖数的增长。当菌体被释放到自然环境中时，对人、动物和植物无害，不会污染环境，反而增加了土壤间耐冷促生菌的群体，对低温环境下生长的小麦有促进作用。

Description

一株耐冷菌TRM86011及其低温促进小麦苗期生长的应用
技术领域
本发明涉及植物营养和低温胁迫栽培技术领域，特别是涉及一株耐冷菌TRM86011及其低温促进小麦苗期生长的应用。
背景技术
小麦是禾本科小麦属植物的统称，代表种普通小麦(学名：Triticum aestivumL.)是在世界各地广泛种植的谷类作物。小麦的颖果是人类的主食之一，磨成面粉后可制作面包、馒头、饼干、面条等食物，发酵后可制成啤酒、酒精、白酒(如伏特加)，或生物质燃料。小麦是三大谷物之一，几乎全作食用，仅约有六分之一作为饲料使用。
小麦在我国主要有冬小麦和春小麦两大类，冬小麦以其高产、优质及粗放管理的特性在我国北方是主要的粮食作物。近些年极端低温天气的频发，严重影响到小麦的产量。在冬小麦的生长过程中，越冬前保证冬小麦生长到三分蘖期利于冬小麦的越冬及增加小麦的有效分蘖个数，进而提高小麦的越冬率、产量及品质。因此有必要筛选一种能促进小麦在低温环境下生长，达到小麦高产的耐冷促生菌，同时利用耐冷促生菌的促生功能减少化肥的使用，以达到“减肥增效”的目标。
发明内容
本发明的目的是提供一株耐冷菌TRM86011及其低温促小麦根系生长的应用，以解决上述现有技术存在的问题。本发明提供的耐冷菌TRM86011在10℃下能够明显地促进小麦茎叶鲜重、根鲜重、须根数和分蘖数的增长，对低温环境下生长的小麦有促进作用。
为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
本发明提供一株耐冷菌(Brevibacteriumfrigoritolerans)TRM86011，已于2023年1月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2023038。
本发明还提供一种微生物菌剂，包括所述的耐冷菌TRM86011。
本发明还提供所述的耐冷菌TRM86011或所述的微生物菌剂在促进小麦生长中的应用。
进一步地，所述促进小麦生长为低温下促进小麦生长。
进一步地，所述促进小麦生长包括促进小麦苗期生长。
进一步地，所述促进小麦苗期生长包括增加小麦须根数、茎叶鲜重、根鲜重和分蘖数。
本发明还提供一种促进小麦生长的方法，包括将上述的耐冷菌TRM86011的菌悬液或上述的微生物菌剂接种到小麦根部，促进小麦生长的步骤。
进一步地，所述促进小麦生长为低温下促进小麦苗期的生长。
进一步地，所述促进小麦苗期生长包括增加小麦须根数、茎叶鲜重、根鲜重和分蘖数。
进一步地，在所述耐冷菌TRM86011的菌悬液或所述微生物菌剂中，所述耐冷菌TRM86011的浓度为1.5×108CFU/mL。
本发明公开了以下技术效果：
本发明提供了一株耐冷菌TRM86011，将其菌悬液接种到10℃低温组培瓶培养的冬小麦后能明显的促进小麦茎叶鲜重、根鲜重和须根数的增长，接种到10℃低温盆栽培养的冬小麦后能明显的促进分蘖数的增长。当菌体被释放到自然环境中时，对人、动物和植物无害，不会污染环境，反而增加了土壤间耐冷促生菌的群体，对低温环境下生长的小麦有促进作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为菌株TRM86011低温促小麦生长组培实验；
图2为菌株TRM86011低温促小麦生长盆栽实验，其中A和B分别为盆栽小麦的侧方和上方图，C为陪在小麦的根系生长状况，D为盆栽小麦的根部生长放大情况；
图3为4株菌10℃促生实验结果图，其中，A-D依次为10℃下接种不同菌株后小麦的须根数、根鲜重、茎叶鲜重和茎高情况，*代表P<0.05差异显著，**代表P<0.01差异极显著，***代表P<0.001，***代表P<0.0001(*号越多差异)；
图4为菌株TRM86011的菌落图；
图5为菌株TRM86011的革兰氏染色图片；
图6为低温组培瓶培养冬小麦6次重复试验促生差异显著分析图，其中a-d依次为10℃下接种菌株TRM86011悬浊液后组培小麦的根鲜重、须根数、茎叶鲜重和茎高情况，*代表P<0.05差异显著，**代表P<0.01差异极显著，***代表P<0.001，***代表P<0.0001(*号越多差异)；
图7为低温盆栽培养冬小麦促生差异显著分析图，其中a-d依次为10℃下接种菌株TRM86011悬浊液后盆栽小麦的茎高、须根数、茎叶鲜重和根鲜重情况，*代表P<0.05差异显著，**代表P<0.01差异极显著，***代表P<0.001，***代表P<0.0001(*号越多差异)；
图8为菌株TRM86011在NCBI比对构建的***发育树图；
图9为菌株TRM86011在EzBioCloud比对构建的***发育树图；
图10为菌株TRM86011的最适生长温度检测图；
图11为菌株TRM86011在10℃低温胁迫生长速率图；
图12为菌株TRM86011的16sDNA序列在NCBI数据库中的比对结果；
图13为菌株TRM86011的16sDNA序列在EzBioCloud数据库中的比对结果；
图14为菌株TRM86011的PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳图。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本发明说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
本发明实施例中用到的培养基及具体组分见表1。
表1各培养基及其组分
实施例1菌株的筛选和鉴定
1.菌株的初步筛选
于2022年9月从帕米尔高原采集回土壤样品，筛选出低温下可生长繁殖的耐冷菌株。
2.菌株的进一步筛选
(1)将筛选出的低温可生长繁殖的耐冷菌，通过解无机磷、有机磷(PVK)、解钾和产ACC脱氨酶平板(DF、ADF)的初筛，筛选出能力较强的菌株。
(2)将筛选出有较强能力的菌株检测产IAA的能力，通过筛选选择产IAA的能力较强的前4株菌(TRM86066、TRM341204、TRM86011和TRM86130)。
(3)菌液的制备：将筛选得到的4株菌的单菌落分别接入营养肉汤液体培养基中25℃，150r/min，培养3d，三天后检测OD600值大于1.5时，5000rmp离心5min，弃上清，加入30mL无菌水洗涤两次，去除培养基的成分，用无菌水洗涤后制成1.5×108CFU/mL的菌悬液，即可用于接种。
(4)无菌小麦的制备：将小麦种子(新冬55号，塔河种业赠予)在10％的次氯酸钠中侵泡10min，无菌水润洗3次，再用70％的乙醇侵泡15min，无菌水润洗5次，25℃清水萌发1d，再转接至含2％的琼脂培养基中25℃黑暗萌发3d，待苗长到4cm时移入装有MS固体培养基的组培瓶中待用。
(5)接菌：将步骤(3)制备的菌悬液接种至无菌组培的小麦根部，每瓶加5mL，以等量无菌水为对照，10℃下培养15d，观察小麦的生长状况，通过测量小麦的茎叶鲜重、根鲜重、须根数和茎高，分析4株耐冷菌是否在低温下对小麦有促生作用。选10℃的原因是正常情况下冬小麦在13-18℃下分蘖，本实验想通过在10℃下增加小麦的生长量，促进小麦在遇到合适分蘖温度时分蘖。
结果如图3所示，图3表明菌株TRM86011在10℃下对冬小麦的生长有显著促生作用。
3.菌株的鉴定
3.1对菌株TRM86011进行形态学鉴定。
菌落形态：TRM86011生长初期菌落水样的半透明或白色不透明点状物后期菌落为圆形、乳白色、半透明、边缘整齐、粘质或多或少(图4)。
菌体形态：TRM86011经革兰氏染色在显微镜下呈紫色形状为杆状体为革兰氏阳性菌，细胞外可形成大量沾粘物质(图5)。
3.2对菌株TRM86011进行分子生物学鉴定
为了确定菌株TRM86011的***发育地位，对所分离得到的菌株的16sDNA进行测序。首先利用CBTA法进行总DNA的提取，然后利用引物进行PCR特异性扩增。
上游引物27F：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’(SEQ ID NO.1)；
下游引物1492R：5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’(SEQ ID NO.2)。
PCR反应体系：2×EasyTaq SuperMix 12.5μL，27F 0.5μL，1492R 0.5μL，DNA50ng，足无菌水至25μL。
PCR反应条件：94℃5min，94℃30s，54℃30s，72℃1min 30s，30个循环；72℃10min，4℃保存。
扩增产物在1％的琼脂糖凝胶电泳上检验结果如图14所示，将扩增产物送往上海擎科生物技术公司进行测序，测序结果显示菌株TRM86011的16S DNA序列如SEQ ID NO.3所示。
SEQ ID NO.3：
ACTCTGTTCCCCTTAGGCGGCTGGCTCCATGAAGGTTACCTCACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGGCTTCATGCAGGCGAGTTGCAGCCTGCAATCCGAACTGAGAATGGCTTTATGGGATTCGCTTACCTTCGCAGGTTTGCAGCCCTTTGTACCATCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTGAATGCTGGCAACTAAGATCAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACTCTGTCCCCCGAAGGGGAAAGCCCTATCTCTAGGGTTGTCAGAGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTAAAGGGCGGAAACCCTCTAACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGCGCCTCAGTGTCAGTTACAGACCAGAAAGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTCCAAATCTCTACGCATTTCACCGCTACACTTGGAATTCCACTTTCCTCTTCTGCACTCAAGTTCCCCAGTTTCCAATGACCCTCCACGGTTGAGCCGTGGGCTTTCACATCAGACTTAAGGAACCACCTGCGCGCGCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAGGTACCGTCAAGGTACCAGCAGTTACTCTGGTACTTGTTCTTCCCTAACAACAGAACTTTACGACCCGAAGGCCTTCTTCGTTCACGCGGCGTTGCTCCGTCAGACTTTCGTCCATTGCGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTACGCATCGTCGCCTTGGTGAGCCATTACCTCACCAACTAGCTAATGCGCCGCGGGCCCATCTATAAGTGACAGCGTAAACCGTCTTTCCATCTTCTCTCATGCGAGAAAAGAACGTATCCGGTATTAGCTCCGGTTTCCCGAAGTTATCCCAGTCTTATAGGCAGGTTGCCCACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTAATCTCAGGGAGCAAGCTCCCATCGATTCGCTCGACTTGCATTATAGCACCCGCCC。
将所得的序列结果在美国国立生物信息中心(NCBI)进行比对，发现菌株TRM86011与已知菌株(Peribacillusfrigoritolerans WJB10)相似性达100％(图12)，构建***进化树如图8所示。
将所得的序列结果在EZBioCloud数据库种进行比对，发现菌株TRM86011与已知菌株(Brevibacteriumfrigoritolerans DSM 8801)相似性达99.31％(图13)，构建***进化树如图9所示。
4.菌株的保藏
菌株TRM86011已于2023年1月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，命名为Brevibacteriumfrigoritolerans TRM86011，保藏号为CCTCC NO：M 2023038，保藏地址为武汉，武汉大学。
实施例2菌株TRM86011的生长特性
1.最适生长温度的测定
将分离出的菌株TRM86011接种于营养肉汤培养基中，分别设置4℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃和40℃8个组别进行不同温度下的培养，每两个小时检测OD600数值，每组3个平行，两个对照(相同条件下处理，不添加种子液)，每组实验重复三次。实验结果如图10所示，实验结果显示TRM86011在10℃下培养48h后可达到稳定期，在10℃下可以正常生长繁殖。
2.最适生长温度与10℃低温胁迫生长速率对比
将分离出的菌株TRM86011接种于营养肉汤培养基中，分别设置10℃和35℃两个组别进行不同温度下的培养，每两个小时检测OD600数值，每组3个平行，两个对照(相同条件下处理，不添加种子液)，每组实验重复三次。实验结果如图11所示，在10℃下培养48h后TRM86011达到生长平衡，10℃下TRM86011可以正常生长繁殖。
实施例3菌株TRM86011的应用实验
1.菌剂的制备
将菌株TRM86011活化后涂布于琼脂肉汤培养基表面培养3d，待菌落布满平面，挑选单菌落于琼脂肉汤培养基表面平板划线，培养2d后挑取单菌落接入营养肉汤液体培养基中25℃，180r/min，培养3d，检测OD600值大于1.5时，5000rmp离心5min，用无菌水洗涤后制成1.5×108CFU/mL的菌悬液，即可用于接种。
2.菌株TRM86011低温促小麦生长组培实验
2.1无菌小麦的制备
将小麦种子(新冬55号，塔河种业赠予)在10％的次氯酸钠中侵泡10min，无菌水润洗2-3次，再用70％的乙醇侵泡15min，无菌水润洗5-6次，25℃清水萌发1d，再转接至含2％的琼脂培养基中25℃黑暗萌发3d，待苗长到4cm时移入装有MS固体培养基的组培瓶中，待用。
2.2菌株TRM86011对小麦的低温促生实验
将配制好的菌悬液接种至无菌组培的小麦根部，接种量为5mL/瓶，10℃下培养15d，观察小麦的生长状况。设置6个重复，分别记为A、B、C、D、E和F，以不接菌的等量无菌水为对照(CK)，进行小麦低温促生实验对比。
2.3结果
菌株TRM86011低温促小麦生长组培实验结果如图1和图6所示，由图1和图6可以看出接种TRM86011菌株在组培瓶培养小麦，可以明显增加小麦在低温下须根数、茎叶鲜重、根鲜重。
3.菌株TRM86011低温促小麦生长盆栽实验
3.1无菌小麦的制备
将小麦种子(新冬55号，塔河种业赠予)在10％的次氯酸钠中侵泡10min，无菌水润洗2-3次，再用70％的乙醇侵泡15min，无菌水润洗5-6次，25℃清水萌发1d，再转接至含2％的琼脂培养基中25℃黑暗萌发3d，待苗长到4cm时移入装有30％基质(荣升园林公司基质育苗土)和70％田间的花盆中，待用。
3.2菌株TRM86011对小麦的低温促生实验
将配制好的菌悬液接种至无菌盆栽的小麦根部，接种量为5mL/盆，10℃下培养15d，每7d浇一次水，观察小麦的生长状况，以不接菌的等量无菌水为对照(CK)，进行小麦低温促生实验对比。
3.3结果
菌株TRM86011低温促小麦生长盆栽实验结果如图2和图7所示，由图2和图7可以看出接种TRM86011菌株在盆栽中培养小麦，可以明显增加小麦在低温下须根数和分蘖数的生长。
小麦是我国的主要的粮食作物，在低温环境下促进小麦的生长，增加小麦苗生物量的积累可以促进小麦分蘖的生长，进而提高小麦的产量和品质。在生产中可以大力开发利用。
实施例4菌株TRM86011的药敏试验
选取利萘唑胺、头孢西丁、林可霉素、青霉素、卡那霉素、红霉素、氯霉素、羧苄西林、新生霉素、新霉素、氨苄西林、四环霉素、多粘菌素B、链霉素、庆大霉素和头孢噻吩等16种抗生素对TRM86011菌株用混菌法进行药敏试验，实验结果如表2所示，TRM86011菌株没有广泛的耐药性，便于后期的应用推广。
表2菌株TRM86011药敏试验
注：“-”表示对该抗生素不敏感，有耐药性。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (10)

1.一株耐冷菌(Brevibacteriumfrigoritolerans)TRM86011，其特征在于，已于2023年1月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO：M2023038。
2.一种微生物菌剂，其特征在于，包括权利要求1所述的耐冷菌TRM86011。
3.如权利要求1所述的耐冷菌TRM86011或如权利要求2所述的微生物菌剂在促进小麦生长中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述促进小麦生长为低温下促进小麦生长。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述促进小麦生长包括促进小麦苗期生长。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述促进小麦苗期生长包括增加小麦须根数、茎叶鲜重、根鲜重和分蘖数。
7.一种促进小麦生长的方法，其特征在于，包括将权利要求1所述的耐冷菌TRM86011的菌悬液或权利要求2所述的微生物菌剂接种到小麦根部，促进小麦生长的步骤。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述促进小麦生长为低温下促进小麦苗期的生长。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述促进小麦苗期的生长包括增加小麦须根数、茎叶鲜重、根鲜重和分蘖数。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在所述耐冷菌TRM86011的菌悬液或所述微生物菌剂中，所述耐冷菌TRM86011的浓度为1.5×108CFU/mL。
CN202310532128.1A 2023-05-12 2023-05-12 一株耐冷菌trm86011及其低温促进小麦苗期生长的应用 Pending CN116769645A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310532128.1A CN116769645A (zh) 2023-05-12 2023-05-12 一株耐冷菌trm86011及其低温促进小麦苗期生长的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310532128.1A CN116769645A (zh) 2023-05-12 2023-05-12 一株耐冷菌trm86011及其低温促进小麦苗期生长的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116769645A true CN116769645A (zh) 2023-09-19

Family

ID=88008949

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310532128.1A Pending CN116769645A (zh) 2023-05-12 2023-05-12 一株耐冷菌trm86011及其低温促进小麦苗期生长的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116769645A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113151062B (zh) 贝莱斯芽孢杆菌ljbv19及其应用
CN107136122B (zh) 一种防治马铃薯晚疫病的生防菌剂
CN110358710B (zh) 一株侧孢芽孢杆菌及在制备抗病耐盐碱功能微生物制剂中的应用
CN111117924B (zh) 复合菌剂及制备方法、肥料及防治根腐病的方法
CN114875016B (zh) 一种适合荧光假单胞菌的制剂化载体及其菌剂
CN114262673B (zh) 贝莱斯芽孢杆菌及其在防治作物疾病中的应用
CN114381379B (zh) 一株具有提高石斛幼苗萌蘖能力的胶膜菌菌株tp-8及其应用
CN110846262B (zh) 一株粘质沙雷氏菌sz201及其应用
CN114395485B (zh) 一种具有促进石斛茎粗的胶膜菌菌株tp-2和应用
CN114045247B (zh) 一株海水芽孢杆菌及其在盐渍化农田生产中的应用
CN115960766A (zh) 一种防治青枯病的微生物及其应用
CN106190887B (zh) 一种枯草芽孢杆菌t400及其菌剂制备方法
CN114934000A (zh) 耐盐性解淀粉芽孢杆菌及其筛选与应用
CN113832071A (zh) Brevibacillus halotolerans菌及其制备生防菌剂中的应用
CN116769645A (zh) 一株耐冷菌trm86011及其低温促进小麦苗期生长的应用
CN109207398B (zh) 一株施氏假单胞杆菌及其应用
CN116426445B (zh) 一株假黄单胞菌属细菌njau-t102及其应用
CN116606780B (zh) 一株假黄单胞菌属细菌njau-t129及其应用
CN117568198B (zh) 金黄杆菌、金黄杆菌与木霉的菊芋秸秆发酵产物及其促进植物生长的应用
CN113943684B (zh) 一种松嫩盐单胞菌及其在盐渍化农田生产中的应用
CN117229985B (zh) 一株生防菌株萎缩芽孢杆菌bgb-98r及其应用
CN114907992B (zh) 拮抗植物病原菌的菌株c11及其应用
CN115011521A (zh) 一种阴沟肠杆菌yes1及其应用
CN108085284B (zh) 甲基营养型芽孢杆菌及包含该微生物的菌剂制备方法与应用
CN112226392A (zh) 防治大姜根结线虫病害并促进大姜生长的菌株及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination