CN116731015A - 咪唑并喹啉化合物及其制备方法、应用和组合物 - Google Patents

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Abstract

本申请实施例提供一种咪唑并喹啉化合物及其制备方法、应用和组合物。该咪唑并喹啉化合物是式I的化合物或其可药用盐，X包括正丙基、正丁基、正丁胺、正戊基、2‑甲氧基乙基中的任一种；R1包括C1‑C36烷基、C1‑C36烷氧基中的任一种；R2包括氢、取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团、‑S‑R3中的任一种，其中，R3包括取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团中的任一种。该咪唑并喹啉化合物选择性的在肿瘤内释放具有激动TLR7/8受体活性的分子，并作用于肿瘤内的免疫细胞，同时降低对于肿瘤外的免疫细胞活性，使该咪唑并喹啉化合物在具有抗肿瘤活性的同时具有全身免疫毒性低的特点。

Description

咪唑并喹啉化合物及其制备方法、应用和组合物
技术领域
本申请属于医药技术领域，具体涉及一种咪唑并喹啉化合物及其制备方法、应用和组合物。
背景技术
Toll样受体(Toll-like receptors，TLR)在免疫细胞谱中广泛表达，参与非特异性免疫和介导特异免疫。TLR是天然免疫***监视与识别各种不同的疾病相关分子模式(pathogen-associated molecμLar patterns，PAMP)，是机体抵抗感染性疾病的第一道屏障。目前在哺乳动物中已经鉴定出13个TLR(TLR1-TLR13)，包括人类的TLR1-TLR11，小鼠的TLR1-TLR9和TLR11-TLR13。激活TLR可以诱导MyD88或TRIF依赖的信号通路，进而激活NF-κB，诱导细胞因子和趋化因子分泌，激活先天免疫反应，介导获得性免疫反应。因此TLR激动剂作为免疫佐剂可用于抗肿瘤和用于感染性疾病的治疗。
TLR7/8激动剂是TLR激动剂中重要的组成，TLR7/8激动剂包括咪唑喹啉家族IMQ，如咪唑莫特(R837)和雷西莫特(R848)等。该些TLR7/8激动剂如R848作为佐剂时，由于其为小分子化合物，不具有特异的靶向性，半衰期短，静脉注射可导致全身免疫***亢进，进而导致细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome，CRS)，难以在体内耐受。因此，TLR7/8激动剂被广泛认为是局部抗肿瘤治疗的有效佐剂。
虽然TLR7/8激动剂是局部抗肿瘤治疗的有效佐剂，但是TLR7/8激动剂的严重毒副作用是当前临床应用面临的重要问题。TLR7/8激动剂产生毒副作用的原因是实体肿瘤微环境的细胞构成上，除了有大量肿瘤细胞外，还存在大量的非肿瘤细胞，包括各种免疫细胞、成纤维细胞和基质细胞等。区别于通常抗体药物偶联物(antibody-drμg conjμgate，ADC)和多肽偶联药物(peptide-drμg conjμgate，PDC)等细胞毒素药物靶向释放至肿瘤细胞后作用于肿瘤细胞，TLR7/8激动剂的目标细胞是肿瘤内的免疫细胞，其中，肿瘤内的免疫细胞包括瘤内原有免疫细胞和TLR7/8激动剂诱导浸润的免疫细胞。当TLR7/8激动剂递送到瘤内后被免疫细胞所吞噬，特别是被抗原呈递细胞(antigenpresentingcell，APC)如树突状细胞(Dendritic cells，DC)所吞噬，激活细胞质内体上的TLR7和TLR8受体，通过MYD88介导的NF-KB信号通路，激活炎症细胞因子表达，诱导了细胞因子IFN-α、IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-12p40和IP-10分泌，活化的APC细胞将抗原呈递到T细胞，介导抗原特异的T细胞抗肿瘤免疫。因此，小分子类药物的TLR7/8激动剂激活TLR7/8受体后，可促进肿瘤抗原释放和介导肿瘤抗原特异的T细胞免疫，活化T细胞循环到全身杀伤远处转移肿瘤，实现原位免疫激活，诱发全身抗肿瘤免疫效应。但是由于小分子TLR7/8激动剂不具有特异的靶向性，即使这类小分子TLR7/8激动剂采用瘤内注射的给药方式仍难克服快速吸收所致的全身免疫毒性。
发明内容
本申请的目的在于提供一种咪唑并喹啉化合物及其制备方法、应用和组合物，以解决现有技术中小分子TLR7/8激动剂由于不具有特异的靶向性，同时作用于肿瘤内和肿瘤外的免疫细胞引起的全身免疫毒性。
第一方面，本申请实施例提供了一种咪唑并喹啉化合物，其是式I的化合物或其可药用盐：
X包括正丙基、正丁基、正丁胺、正戊基、2-甲氧基乙基中的任一种；
R1包括C1-C36烷基、C1-C36烷氧基中的任一种；
R2包括氢、取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团、-S-R3中的任一种，其中，R3包括取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团中的任一种。
本申请实施例咪唑并喹啉化合物为TLR7/8激动剂或其衍生物。该咪唑并喹啉化合物在给药后选择性的在肿瘤内分解定向释放具有激动TLR7/8受体活性分子，而在肿瘤外的环境如血浆中不能或几乎不能释放具有激动TLR7/8受体活性分子。因此，本申请实施例咪唑并喹啉化合物选择性的释放于肿瘤内的TLR7/8激动剂，主要作用于肿瘤内的免疫细胞，激活细胞质内体上的TLR7和TLR8受体。
本申请实施例咪唑并喹啉化合物在肿瘤内选择性释放的具有激动TLR7/8受体活性的分子，使得该分子选择性的作用于肿瘤内免疫细胞，激活细胞质内体上的TLR7和TLR8受体，通过MYD88介导的NF-KB信号通路，激活炎症细胞因子表达，诱导炎症细胞因子如TNF-α分泌，介导抗原特异的T细胞抗肿瘤免疫。在此基础上，该咪唑并喹啉化合物有效的减少肿瘤外的TLR7/8激动剂含量，降低或避免了对于肿瘤外免疫细胞的作用，在实现抗肿瘤效果的同时尽可能降低TNF-α等细胞因子风暴带来的非特异免疫毒性。
第二方面，本申请提供一种咪唑并喹啉化合物的制备方法。该制备方法包括：
提供化合物A和化合物B：
将化合物A和化合物B于第一反应体系中进行第一缩合反应，得到式I所示咪唑并喹啉化合物；
其中，Y包括-COOH、中的任一种；
Z包括氢、取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团、中的任一种，其中，R4包括C1-C36烷基、C1-C36烷氧基中的任一种，X2包括氢、/>中的任一种。
本申请实施例制备方法通过化合物A和化合物B进行缩合反应，使得化合物A苯环对位的氨基和化合物B发生缩合反应，并使化合物A苯环对位上的氨基酰化，形成酰胺键，制得咪唑并喹啉化合物。该制备方法收率高，副产物少。该咪唑并喹啉化合物可为一种前驱药物，在体内能够选择性的在肿瘤内释放具有激动TLR7/8受体的活性分子，实现肿瘤原位激活免疫后，诱发全身抗肿瘤免疫，同时对减少对肿瘤外免疫细胞的作用，降低全身免疫毒性。
本申请实施例第三方面提供了上述本申请实施例咪唑并喹啉化合物在制备抗肿瘤药物和/或制备抗病毒药物中的应用。
基于本申请实施例咪唑并喹啉化合物选择性的在肿瘤内释放TLR7/8激动剂，使得TLR7/8激动剂分子主要作用于肿瘤内的免疫细胞，介导抗原特异的T细胞抗肿瘤免疫，实现原位免疫激活，同时有效的减少对于肿瘤外免疫细胞TLR7/8受体的激动活性，进而降低全身免疫毒性，使得该咪唑并喹啉化合物应用于抗肿瘤药物中，在具有抗肿瘤活性的同时还具备全身免疫毒性低的有益效果。此外，本申请实施例咪唑并喹啉化合物还具有良好的抗病毒效果，能够用于制备抗病毒药物。
第四方面，本申请实施例提供了一种组合物。该组合物包括上述本申请实施例咪唑并喹啉化合物。
本申请实施例组合物，基于包含定向作用于肿瘤内免疫细胞的咪唑并喹啉化合物，从而使该组合物在具有抗肿瘤活性的基础上，减小或避免了对肿瘤外免疫细胞的作用，降低了血浆中炎症细胞因子的表达，有效降低全身免疫毒性。
附图说明
为了更清楚地说明本申请具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本申请的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本申请实施例提供的咪唑并喹啉化合物制备方法工艺流程图；
图2为本申请实施例提供的咪唑并喹啉化合物制备方法含第二缩合反应步骤的工艺流程图；
图3为78A1-SH的核磁氢谱图；
图4为78A1-S-Trityl的核磁氢谱图；
图5为78A1-SS-78A1的核磁氢谱图；
图6为78A1-SS-78A1的质谱图；
图7为R848、78A1、78A1-SH、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1对淋巴细胞TNF-α的诱导表达活性的检测结果示意图；
图8为皮下注射78A1和78A1-SS-78A1后血清TNF-α含量检测结果示意图，其中，图8中的A为折线图，图8中的B为柱状图；
图9为皮下注射R848、78A1、78A1-SH、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1的1h后血清TNF-α含量检测结果示意图；
图10为瘤内注射78A1和78A1-SS-78A1不同时间点血清和肿瘤内TNF-α含量检测结果示意图，其中，图10中的A为血清中TNF-α含量，图10中的B为肿瘤内TNF-α含量；
图11为瘤内注射R848、78A1、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1的1h后血清和肿瘤中TNF-α含量检测结果示意图，其中，图11中的A为血清中TNF-α含量，图11中的B为肿瘤内TNF-α含量；
图12为小鼠体重变化示意图；
图13为瘤内快注PBS、78A1 10μg、78A1-S-Trityl 10μg、78A1-SH 10μg、78A1-SS-78A110μg、78A1-SS-78A1 20μg和微量注射泵注射78A1-SS-78A1 20μg的肿瘤生长曲线示意图；
图14为肿瘤生长曲线汇总示意图；
图15为肿瘤重量结果示意图；
图16为实验终点肿瘤大小示意图。
具体实施方式
为了使本申请要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请，并不用于限定本申请。
第一方面，本申请实施例提供了一种咪唑并喹啉化合物(imidazoquinoline，IMQ)，其是式I的化合物或其可药用盐：
X包括正丙基、正丁基、正丁胺、正戊基、2-甲氧基乙基中的任一种；
R1包括C1-C36烷基、C1-C36烷氧基中的任一种；
R2包括氢、取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团、-S-R3中的任一种，其中，R3包括取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团中的任一种。
小分子TLR7/8激动剂被免疫细胞吞噬后能够激活细胞质内体上的TLR7和TLR8受体，介导抗原特异的T细胞抗肿瘤免疫。由于小分子TLR7/8激动剂不具有靶向性，给药后不仅分布于肿瘤内，同时也分布于肿瘤外。分布于肿瘤内的TLR7/8激动剂分子能够促进肿瘤抗原释放和介导肿瘤抗原特异的T细胞免疫，但是分布于肿瘤外的TLR7/8激动剂分子作用于肿瘤外的免疫细胞会引起机体肿瘤外的免疫反应，导致如TNF-α等细胞因子增加，甚至导致出现细胞因子风暴和全身免疫***亢进，引起全身免疫毒性。
本申请实施例咪唑并喹啉化合物是TLR7/8激动剂苯环对位上的氨基酰化后的得到化合物，含有酰胺键，同时也包括巯基、硫醚键、二硫键中至少一种。该咪唑并喹啉化合物给药后能够选择性的在肿瘤内释放具有激动TLR7/8受体活性的分子，激活肿瘤内免疫细胞的TLR7和TLR8受体，激活炎症细胞因子表达，促进肿瘤抗原释放和介导肿瘤抗原特异的T细胞免疫，实现原位免疫激活，诱发抗肿瘤免疫效应。同时，本申请实施例咪唑并喹啉化合物能够减少或避免在肿瘤外释放具有激动TLR7/8受体活性的分子，降低或避免了对于肿瘤外免疫细胞的激活，大大的降低全身免疫***亢进以及细胞因子释放综合征(cytokinerelease syndrome，CRS)发生的可能性。本申请实施例咪唑并喹啉化合物因其选择性的在肿瘤内释放具有激动TLR7/8受体活性的分子，使该咪唑并喹啉化合物在具备抗肿瘤活性的同时，极大的减小了对机体的全身免疫毒性等毒副作用。
在一些实施例中，X为2-甲氧基乙基(-CH2OCH2CH3)。
在一些实施例中，X为正丁基(-CH2CH2CH2CH3)，此时，本申请实施例咪唑并喹啉化合物结构式如式I1所示，
X为正丁基时，如上述式I1所示咪唑并喹啉化合物给药后，I1所示的分子酰胺键水解，释放78A1分子，78A1分子的结构如下所示：
78A1的CAS号为1258457-59-8，是一种小分子LTR7/8激动剂，具有良好的抗肿瘤活性，但由于78A1给药后，不仅激活了肿瘤内的免疫反应，增加了肿瘤内的如TNF-α等细胞因子，介导抗原特异的T细胞抗肿瘤免疫，由于78A1受体同时也分布于肿瘤外如血浆中，导致机体中肿瘤外的细胞因子含量上升，进而导致机体的免疫毒性。式I1所示化合物给药后选择性的在肿瘤内部水解释放出78A1分子，特异性的增加肿瘤内的细胞因子和趋化因子分泌，介导抗原特异的T细胞抗肿瘤免疫，具有良好的抗肿瘤效果，同时降低或避免了肿瘤外免疫细胞的TLR7和TLR8受体激活，避免机体肿瘤外的如TNF-α等细胞因子和趋化因子分泌增加，降低了TNF-α等细胞因子风暴带来的非特异免疫毒性。
在一些实施例中，R1可以为-(CH2CH2O)n-，其中，n＝1-36，进一步的，n＝1-20，更进一步的，n＝1-10，再进一步的，n＝1-5，具体的，n可以为2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、25、26、30、35等典型但非限制数值。
具体示范例中，R1可以包括-CH2CH2O-、-CH2OCH2-、-CH2OCH2CH2-、-CH2CH2OCH2-、-CH2CH2OCH2CH2-的任一种。
在一些实施例中，R1可以为-(CH2)m-，其中，m＝1-36，进一步的，m＝1-20，更进一步的，m＝1-10，再进一步的，m＝1-5，具体的，m可以为2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、25、26、30、35等典型但非限制数值。
具体示范例中，R1可以包括-CH2CH2-、-CH2-、-(H2CH2)2-、-(CH2CH2)3-、-(CH2CH2)4-中的任一种。
在一些实施例中，R2为可以氢，此时，本申请实施例咪唑并喹啉化合物结构式如式I2所示，
式I2所示的分子TLR7/8激动剂的巯基化衍生物，分子中含有巯基-SH，使得该分子易被氧化，但其在氧化后又可在还原性环境下恢复-SH基团的结构，使其可以具有一定的激动TLR7/8受体的活性。同时，由于血液中的谷胱甘肽(glutathione，r-glutamyl cysteingl+glycine，GSH)浓度较低，肿瘤内的GSH含量较高，肿瘤内式I2所示的分子倾向以-SH被还原的形态存在。因此，即使是采用腹腔注射给药方式给药后，在使肿瘤中促炎症细胞因子含量上升的同时，亦未使血液中如TNF-α等促炎症细胞因子的水平太高。
此外，当R1为C1-C36烷基或C1-C36烷氧基，例如R1为-(CH2CH2O)n-或-(CH2)m-时，R1的碳链的长度不同，I2所示的分子的活性不同，当碳链的长度为36时，I2所示的分子的药效减弱。
在一些实施例中，当R2为C1-C36烷基时，R2可以包括-CH2CH2、-CH2、-(CH2CH2)2、-(CH2CH2)3、-(CH2CH2)4叔丁基中的任一种。
在一些实施例中，当R2为C1-C36烷氧基时，R2可以包括-OCH2CH2、-CH2OCH2、-CH2OCH2CH2、-CH2CH2OCH2、-CH2CH2OCH2CH2中的任一种。
在一些实施例中，当R2为取代或未取代芳基时，该取代或未取代芳基可以包括三苯基甲基、甲氧基三苯甲基中的至少一种。三苯基甲基的结构如下所示：
在一些实施例中，R2还可以包括乙酰氨基甲基、三甲基乙酰氨基甲基的任一种。
当R2为三苯基甲基、甲氧基三苯甲基、叔丁基、乙酰氨基甲基、三甲基乙酰氨基甲基等这些空间位阻较大的基团时，本申请实施例的咪唑并喹啉化合物自身没有激动TLR7/8受体的活性，却能够选择性的在肿瘤内释放出具有激动TLR7/8受体活性的分子，在实现对肿瘤内免疫细胞TLR7/8受体的特异性激活的同时，降低对肿瘤外免疫细胞的作用。
在一些实施例中，R2为-S-R3时，咪唑并喹啉化合物的分子结构中含有二硫键。
其中，实施例中，R3可以包括取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团中的任一种。
R3为取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团时，该些R3所示的取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团可以分别与上述R2所示的取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团相同。
在一些实施例中，R3可以为式II所示的基团：
其中，X1包括正丙基、正丁基、正丁胺、正戊基、2-甲氧基乙基中的任一种，
R4包括C1-C36烷基、C1-C36烷氧基中的任一种。
在一些实施例中，X1与X为相同或不相同的基团。具体示范例中，X1为正丁基，此时，R3为式II1所示的基团：
具体示范例中，当X和X1均为正丁基时，咪唑并喹啉化合物如式I3所示：
在一些实施例中，该些R4所示的C1-C36烷基、C1-C36烷氧基可以分别与上述R1所示的C1-C36烷基、C1-C36烷氧基相同。
实施例中，R4可以为-(CH2CH2O)n-，其中，n＝1-36，进一步的，n＝1-20，更进一步的，n＝1-10，再进一步的，n＝1-5，具体的，n可以为2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、25、26、30、35等典型但非限制数值。具体示范例中，R4可以包括-CH2CH2O-、-CH2OCH2-、-CH2OCH2CH2-、-CH2CH2OCH2-、-CH2CH2OCH2CH2-的任一种。
实施例中，R4可以为-(CH2)m-，其中，m＝1-36，进一步的，m＝1-20，更进一步的，m＝1-10，再进一步的，m＝1-5，具体的，m可以为2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、25、26、30、35等典型但非限制数值。
具体示范例中，R4可以包括-CH2CH2-、-CH2-、-(H2CH2)2-、-(CH2CH2)3-、-(CH2CH2)4-中的任一种。
如式I3所示的咪唑并喹啉化合物中含有二硫键，二硫键属于GSH断裂位点敏感连接子，因此，式I3所示的咪唑并喹啉化合物可在肿瘤组织中和肿瘤细胞的细胞质中高浓度的GSH作用下断裂为式I2和式I31所示的分子而发挥作用。
由于淋巴细胞和血浆中GSH的水平较低，使得淋巴细胞和血浆中式I3所示的咪唑并喹啉化合物无法有效的释放出式I2和式I31所示的分子，不能充分结合TLR7/8受体引起强烈的免疫激活效应，从而使得血浆中TNF-α等细胞因子的水平无明显变化。
在一些施例中，基于上述X1、R1、R2、R3、R4和X2的各个基团的实施例，本申请实施例式I所示的咪唑并喹啉化合物可以包括式(1)-(4)中的至少一种：
对于上述式(1)所示的咪唑并喹啉化合物，其为78A1的巯基化衍生物。一方面，式(1)所示的咪唑并喹啉化合物中含有酰胺键，而肿瘤内的溶酶体含量较高，溶酶体内部环境呈酸性，这种酸性环境可以使得酰胺键的水解，释放78A1，激活TLR7/8受体。另一方面，式(1)所示的分子仍然能够与TLR7/8受体结合，激活TLR7/8受体，但是式(1)所示分子结构中含有巯基-SH，使得该分子易被氧化，且氧化后失去与TLR7/8受体结合的能力。但其在氧化后又可在还原性环境下恢复-SH基团的结构，因此式(1)所示分子结构的激动TLR7/8受体活性因为-SH基团而受到环境的影响。由于血液中的谷胱甘肽(glutathione，r-glutamylcysteingl glycine，GSH)浓度较低，肿瘤内的GSH含量较高，肿瘤内式(1)所示的分子倾向以-SH被还原的形态存在，使得式(1)所示的咪唑并喹啉化合物具有激动TLR7/8受体的活性。基于上述两个方面的影响，式(1)所示的化合物能够选择性的在肿瘤内释放具有激活TLR7/8受体活性的化合物。
对于上述式(2)所示的咪唑并喹啉化合物，其为78A1的硫醚化合物，其所含的三苯基甲基与硫原子形成的Trityl thiol(Tr-SH)的结构为-SH的保护性结构，可在弱酸性环境下(例如三氟乙酸、肿瘤微环境)脱保护，形成式(1)所示的咪唑并喹啉化合物。同时，Tritylthiol结构可能提供一种空间位阻效应，使式(2)所示的咪唑并喹啉化合物在血液中无法高效激活TLR7/8受体。
对于上述式(3)所示的咪唑并喹啉化合物，其为78A1的二硫化合物，其具有二硫键。二硫键属于GSH断裂位点敏感连接子，因此，式(3)所示的咪唑并喹啉化合物可在肿瘤组织中和肿瘤细胞的细胞质中高浓度的GSH作用下断裂为上述式(1)所示的化合物而发挥作用。由于淋巴细胞和血浆中GSH的水平较低，使得淋巴细胞和血浆咪唑并喹啉化合物无法高效释放出具有激活TLR7/8受体活性的分子，不能充分结合TLR7/8受体引起强烈的免疫激活效应，从而使得血浆中TNF-α等细胞因子的水平无明显变化。
对于上述式(4)所示的咪唑并喹啉化合物，其同样为78A1的二硫化合物，具有二硫键。肿瘤中环境容易引起该分子中二硫键、碳氧键和酰胺键均断裂，从而释放出78A1药物原型结构，以使得式(4)所示分子结构在肿瘤中选择性的释放78A1，并特异性的激活肿瘤中免疫细胞的TLR7/8受体。
上述咪唑并喹啉化合物给药后选择性的在肿瘤内释放具有TLR7/8受体激动活性的化合物，进而使得该些咪唑并喹啉化合物良好的抗肿瘤活性，同时基于该些咪唑并喹啉化合物在肿瘤外释放的具有TLR7/8受体激动活性的化合物含量低，使得该些咪唑并喹啉化合物的免疫毒性低。
第二方面，本申请实施例提供上述咪唑并喹啉化合物的制备方法。本申请实施例咪唑并喹啉化合物的制备方法合成流程如图1所示，该制备方法包括如下步骤：
步骤S01：提供化合物A和化合物B：
步骤S02：
将化合物A和化合物B于第一反应体系中进行第一缩合反应，得到式I所示咪唑并喹啉化合物；
其中，Y包括-COOH、中的任一种；
Z包括氢、取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团、中的任一种，其中，R4包括C1-C36烷基、C1-C36烷氧基中的任一种，X2包括氢、/>中的任一种。
本申请实施例制备方法通过将化合物A和化合物B进行第一缩合反应，使得化合物A苯环对位的氨基酰化形成酰胺键，制得式I所示咪唑并喹啉化合物。该制备方法的制备过程的工艺步骤少，反应收率高。同时，所制得的咪唑并喹啉化合物为一种前驱药物，给药后能够在肿瘤内选择性的释放化合物A或化合物A的衍生物，从而激动肿瘤内的TLR7/8受体。且该咪唑并喹啉化合物体释放具有激动TLR7/8受体激动活性分子的释放过程选择性好，在具备抗肿瘤活性的同时有效避免肿瘤外细胞因子和趋化因子的含量增加，有效降低肿瘤外的免疫反应。
步骤S01：
通过步骤S01根据式I所示的咪唑并喹啉化合物反应的底物提供化合物A和化合物B，其中，化合物A为TLR7/8激动剂，化合物A分子中含有苄胺，该苄胺与化合物B缩合反应，酰化形成式I所示的化合物。
其中，化合物A中的X同上述式I所示咪唑并喹啉化合物中的X，化合物B中的R1和R2同上述式I所示咪唑并喹啉化合物中的R1和R2，在此不再赘述。化合物A和化合物B可以通过市场购买获得。
步骤S02：
通过步骤S02将化合物A和化合物B在第一反应体系中进行第一缩合反应，使得化合物A的苄位上氨基的发生酰胺化反应，例如使得化合物A的苄胺与化合物B的羧基发生脱水缩合反应，形成式I所示咪唑并喹啉化合物，反应如下：
在一些实施例中，当Z包括氢、取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团中任一种时，Z可以为与上述R2相同或不相同的基团。
在一些实施例中，当Y为Z为/>时，化合物B如B1所示，本申请实施例制备方法制得的化合物如下所示：
此时I4所示的结构式与式I3所示的结构区别在于，I3中的X1与X为相同的基团，即为I4所示的结构。
在一些实施例中，可以控制第一缩合反应的反应溶剂包括四氢呋喃、三乙胺、二异丙基乙基胺、4-二甲氨基吡啶、N,N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷中至少一种，化合物A和化合物B在该些溶剂中具有较好的溶解性。
在一些实施例中，可以控制化合物A和化合物B的摩尔比为1：1～1：10，进一步可以为1：1～1：5，具体可以为1：2、1：3、1：4、1：5等典型但非限制性的摩尔比。
在一些实施例中，可以控制化合物A在第一缩合反应的反应溶液体系中的浓度为5～20mg/ml。具体示范例中，化合物A的浓度可以为6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、11mg/ml、12mg/ml、13mg/ml、14mg/ml、15mg/ml、16mg/ml、17mg/ml、18mg/ml、19mg/ml等典型但非限制浓度。
在一些实施例中，可以控制第一缩合反应的反应体系中含有缩合试剂。具体示范例中，可以控制缩合试剂包括2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、N,N-二异丙基乙胺(DIEA)、N,N'-二异丙基碳二亚胺(DIC)、1-羟基苯并三氮唑、1-丙基磷酸酐、二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺中至少一种。进一步实施例中，还可以将缩合试剂采用如50％乙酸乙酯溶液等溶剂溶解后再加入第一反应体系中。
控制化合物A和化合物B的摩尔比，反应液浓度中化合物A的浓度，以及控制缩合试剂，有效的降低副反应的发生，提高式I所示咪唑并喹啉化合物的产率和纯度。
在一些实施例中，还可以控制化合物A和缩合试剂的摩尔比，进一步可以控制化合物A和缩合试剂的摩尔比为1：3～1：15，进一步可以为1：3～1：10。例如具体示范例中可以为1：4、1：5、1：6、1：7、1：8、1：9、1：10等典型但非限制性摩尔比。控制化合物A和缩合试剂的摩尔比在该范围内以进一步减少副反应。具体示范例中，可以控制化合物A和化合物B的摩尔比为1：5，化合物A和T3P的摩尔比为1：10，此时，反应的产物中未见明显副产物，将底物萃取后即可得到较为干净的目标产物。
在一些实施例中，可以控制第一缩合反应的反应温度为20～25℃。具体可以为20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃等典型但非限制性温度。
在一些实施例中，可以控制第一缩合反应的反应时间为2～18h。具体可以为2h、5h、10h、15h、18h等典型但非限制性反应时间。
控制第一缩合反应的反应温度和反应时间在该范围内，有效的降低副反应的发生，提高目标产物的收率，同时降低能耗以及提高制备效率。
在一些实施例中，当化合物B中的Z为氢时，第一缩合反应的产物分子结构式如上述的式I2所示，
式I2所示分子结构中含有巯基，还可以控制两个式I2所示分子通过巯基之间脱氢氧化进行缩合，如图2所示，在第一缩合反应之后，还可以控制本申请实施例制备方法包括：
步骤S021：将第一缩合反应的产物自身进行第二缩合反应。
通过步骤S021，使得式I2所示的第一缩合反应产物分子间的巯基发生脱氢氧化，形成二硫键，两个式I2所示的分子形成如式I5所示的二聚体。
式I5所示结构式与上述式I3所示结构式的区别在于：当式I3中的X1和X为相同的基团，R1和R4为相同的基团时，即为式I5所示的结构式。
在一些实施例中，在第一缩合反应和/或第二缩合反应之后，还可以除去反应液中的溶剂，再用油水混合液对浓缩处理后的反应液中的目标产物进行萃取，分离，取油相干燥后，去除油相溶剂后得到式I所示的咪唑并喹啉化合物。进一步实施例中，油水混合液为乙酸乙酯和水的混合液，咪唑并喹啉化合物在乙酸乙酯中溶解性较好，有利于提高萃取率，同时，乙酸乙酯易挥发，有利于后续油相溶剂的去除。
本申请实施例第三方面提供上述咪唑并喹啉化合物在制备抗肿瘤药物和/或制备抗病毒药物中的应用。
基于本申请实施例咪唑并喹啉化合物选择性的在肿瘤内释放具有激动TLR7/8受体活性的分子，提高肿瘤内炎症介质的含量，且有效的避免血浆中TNF-α等促炎症细胞因子的升高，使得咪唑并喹啉化合物在制备抗肿瘤药物中具有巨大的应用潜力。此外，由于该咪唑并喹啉化合物对人体免疫***的激活，使得该咪唑并喹啉化合物具有良好的抗病毒效果，使得该咪唑并喹啉化合物可以应用于抗病毒药物的制备。
在一些实施例中，在制备抗肿瘤药物时，肿瘤可以包括实体瘤。进一步实施例中，实体瘤可以包括T细胞淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、直肠癌，肺癌，胰腺癌、***癌、卵巢癌、骨癌、脑部肿瘤中至少一种。实体瘤更容易通过瘤内注射给药，进一步提高具有激动TLR7/8受体活性的分子在肿瘤的富集程度，有利于进一步提高本申请实施例咪唑并喹啉化合物的抗肿瘤效果。
在一些实施例中，在制备抗病毒药物时，病毒可以包括乙型肝炎病毒(HepatitisB virus，HBV)。
第四方面，本申请实施例提供一种组合物，该组合物包括上述咪唑并喹啉化合物。
在本申请实施例组合物给药后，该组合物中所含的咪唑并喹啉化合物能够作为前驱药物，在肿瘤内选择性的释放具有激动TLR7/8受体活性的分子，激活肿瘤内的免疫细胞，促使TNF-α等促炎症细胞因子升高，具有良好的选择性。
在一些实施例中，本申请实施例组合物可以为药物组合物，进一步的，该药物组合物还可以包括药学上可以接受的辅料。
在一些施例中，可以控制该组合物的给药方式为注射给药，进一步的，可以为皮下注射和/或瘤内注射，进一步的，可以包括瘤内快注、瘤内控注、皮下快注、皮下控注中至少一种。其中，瘤内快注为常规注射器一次性将药物短时间内注射入瘤体组织，瘤内控注为利用微量注射泵经留置针控制流量，使药物在瘤体组织中的浓度在持续注射的时间内维持在有效浓度范围。
以下通过多个具体实施例来举例说明本申请实施例咪唑并喹啉化合物及其制备方法、应用和组合物等。
1.咪唑并喹啉化合物及其制备方法实施例
实施例11
本实施例提供式(1)所示的咪唑并喹啉化合物，该咪唑并喹啉化合物为78A1-SH，78A1-SH的制备过程如下：
取100mL单口瓶，加入78A1(200mg，0.557mmol)、巯基丙酸(295mg，2.78mmol)和THF(10mL)，磁力搅拌使溶解，加入50％的T3P乙酸乙酯溶液(1.77g，5.57mmol)，混合，然后缓慢滴加三乙胺(169mg，1.67mmol)，混合后将反应液在室温下搅拌2h，进行第一缩合反应。反应结束后，反应液浓缩除去THF，加入乙酸乙酯和水搅拌分液，水相用乙酸乙酯萃取两次后，合并有机相，用无水硫酸钠干燥后浓缩，制得粗品，纯化得到40mg目标产物，目标产物中78A1-SH的纯度为91.5％。78A1-SH的核磁氢谱如图3所示。
实施例12
本实施例提供的式(2)所示的咪唑并喹啉化合物，该咪唑并喹啉化合物为78A1-S-Trity，制备过程如下：
取100mL单口瓶，加入78A1(200mg，0.557mmol)、3-(三苯甲硫基)丙酸(967mg，2.78mmol)和THF(10mL)，磁力搅拌使溶解，加入50％的T3P乙酸乙酯溶液(1.77g，5.57mmol)，搅拌混合，然后缓慢滴加三乙胺(169mg，1.67mmol)，搅拌混合，反应液在室温下搅拌2h，进行第一缩合反应。反应结束后，反应液浓缩除去THF，加入乙酸乙酯和水搅拌分液，水相用乙酸乙酯萃取两次后，合并有机相，用无水硫酸钠干燥后浓缩，制得粗品，纯化得到50mg目标产物。78A1-S-Trity的核磁氢谱如图4所示。
实施例13
本实施例提供式(3)所示的咪唑并喹啉化合物，该咪唑并喹啉化合物为78A1-SS-78A1，制备78A1-SS-78A1过程如下：
在装有磁子的10ml封管中加入化合物78A1(200mg,0.556mmol)，二硫代双琥珀酰亚胺丙酸酯(103.60mg，0.278mmol)，然后再加入3mL的N,N-二甲基甲酰胺搅拌溶解，缓慢滴加三乙胺(84.45mg，0.835mmol)，加完后室温搅拌反应过夜。LCMS确认反应结束后，反应液经HPLC纯化制备得110mg。78A1-SS-78A1的核磁氢谱如图5所示，质谱如图6所示。
2.咪唑并喹啉化合物活性实验
实施例21：对淋巴细胞TNF-α的诱导表达活性检测
取SPF级BALB/C，5-6周龄，18-20克的雌性小鼠，眼球摘除法提取小鼠的全血，用于从外周血中提取淋巴细胞。将相同体积的全血稀释液加入全血中并充分混合，并加入到相同体积的小鼠外周血淋巴细胞分离液中，设置离心机的运行参数为1000g，离心20min，小心取淋巴细胞层，用10mL磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤，250g离心10min。弃去上清液，淋巴细胞用完全RPMI-1640细胞培养基重悬。实验所用的小鼠全血稀释液和淋巴细胞分离液购自北京索莱宝科技有限公司，其中，小鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒货号为P8620。
分别取R848(对照物)、78A1(对照物)、78A1-SH、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1，每种化合物分别配制低、中、高三种浓度的RPMI-1640细胞培养液。其中，78A1-SH易聚合成二聚体，因此78A1-SH在储存状态下，或溶液状态下，部分78A1-SH以二聚体的形式存在。以R848和78A1为对照组，78A1-SH、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1为实验组，以RPMI-1640细胞培养液为空白对照组。
其中，R848的结构式如下所示：
分别将100μL上述各组的RPMI-1640细胞培养液加至100μL 1.5*105个正常淋巴细胞孔中，配制各组外周淋巴细胞培养溶液，且使得各个外周淋巴细胞培养溶液中不同化合物的浓度如表1所示。由于78A1-SS-78A1为二聚体，因此，78A1-SS-78A1摩尔浓度为78A1的一半。
表1
将各组外周淋巴细胞培养溶液置于37℃、5％ CO2细胞培养箱孵育24h后，1000rpm离心5min，收集细胞上清液，按照ELISA说明书操作检测外周血单核细胞培养溶液上清液中的TNF-α浓度，其中，检测用的小鼠TNF-alpha双抗夹心ELISA检测试剂盒的厂家为武汉三鹰，产品货号为KE10002。
实验结果如图7所示，在测试的剂量范围内，相对于空白对照组，78A1组的TNF-α含量明显增加，78A1-SH组、78A1-S-Trityl组和78A1-SS-78A1组的TNF-α含量与空白对照组无明显差异，同时，在R848的中浓度和高浓度剂量组中，TNF-α含量明显增加。这表明化合物78A1-SH、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1对诱导淋巴细胞TNF-α表达无明显的活性。其中，由于78A1-SH在冷冻保存过程中不稳定，存放一周时间使用LC-MS检测，观察到大部分是二聚体结构，较少量是以单体形式存在。比较对淋巴细胞TNF-α的诱导表达活性检测的结果，78A1-SH组与78A1-SS-78A1组的活性无明显差异，对诱导淋巴细胞TNF-α表达均无明显的活性。
实施例22：皮下注射对小鼠血清中TNF-α的诱导表达活性检测
取78A1和78A1-SS-78A1，以磷酸盐缓冲液(PBS)为溶剂，分别配制适宜浓度的78A1和78A1-SS-78A1的PBS溶液。
取SPF级BALB/C，5-6周龄，18-20克的雌性小鼠，该些小鼠购自河南省实验动物中心。将该些小鼠分为3组，分别为A1组，A2组和A3组，其中，A1组和A2组各12只，A3组3只。
A1组小鼠分别皮下注射上述78A1溶液100μL，A2组小鼠分别皮下注射上述78A1-SS-78A1溶液100μL，A3组小鼠分别皮下注射PBS溶液100μL。且使得，各组小鼠的注射给药量如表2所示。
表2
分组 注射的化合物 给药量
A1组 78A1 摩尔量与10μg R848的摩尔量一致
A2组 78A1-SS-78A1 摩尔量为10μg R848摩尔量的一半
A3组 PBS ——
A1组和A2组在皮下注射后的5min、30min、60min和240min分别取3只小鼠取眼眶血，A3组的3只小鼠在皮下注射后1h进行眼眶取血。眼眶取血后，将取得的小鼠血3800rpm离心10min分离血清，采用与实施例21相同的方法检测血清中TNF-α的浓度。
实验结果如图8所示，其中，本申请说明书中差异的显著性分析使用单/双向ANOVA(ns:p>0.05,*:p<0.05,**:p<0.01,***:p<0.001,****:p<0.0001)。
结果表明皮下快注78A1的A1组小鼠，血清中的TNF-α含量明显增加，且注射1h，小鼠血清中TNF-α含量达到峰值。相对于注射PBS的小鼠，注射78A1小鼠血清中TNF-α含量增幅达到10-30倍。相较于注射PBS的小鼠而言，皮下快注78A1-SS-78A1的A2组小鼠在注射4h内，血清中TNF-α水平仅有1-3倍小幅升高，与注射78A1的A1组的增幅相比，注射78A1-SS-78A1的A2组增幅大大减弱。
实施例23：皮下注射1h后对小鼠血清中TNF-α的诱导表达活性检测
取R848、78A1、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1、78A1-SH化合物，分别以PBS为溶剂配制适宜浓度的化合物溶液。
取与上述实施例22相同的小鼠，分为五组，分别为B1组至B5组，每组3只。B1组至B5组小鼠分别皮下注射100μL上述具有适宜溶液各个化合物的溶液和PBS，各组小鼠的给药量如表3所示。
表3
小鼠 皮下注射溶液 给药量
B1组 R848溶液 10μg
B2组 78A1溶液 摩尔量与10μg的R848摩尔量一致
B3组 78A1-SH溶液 摩尔量与10μg的R848摩尔量一致
B4组 78A1-S-Trityl溶液 摩尔量与10μg的R848摩尔量一致
B5组 78A1-SS-78A1溶液 摩尔量为10μg R848摩尔量的一半
B6组 PBS ——
B1组至B6组小鼠皮下注射后的60min，取眼眶血，3800rpm离心10min，分离血清，检测血清中TNF-α的浓度，TNF-α浓度检测方法同实施例22。
实验结果如图9所示，结果表明皮下R848和78A1后的1h，小鼠血清中TNF-α含量明显上升，明显高于皮下注射PBS后小鼠血清中的TNF-α含量。但皮下注射78A1-SH、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1后的1h，血清中的TNF-α含量与PBS组相比差异均不显著，表明测试剂量下78A1-SH、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1的安全性大幅提升。
实施例24：瘤内注射的肿瘤和血清中TNF-α的诱导表达活性检测
取同实施例22相同的小鼠，分为三组，分别为C1组、C2组和C3组，其中，C1组和C2组每组8只，C3组2只为空白对照组。
将购自ATCC的CT-26结肠癌细胞在37℃、5％CO2培养箱中，以含10％胎牛血清的DMEM培养基传代培养。具体方法为弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加3-5ml消化液(0.25％ Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回洁净工作台后加5ml含10％血清的完全培养基终止消化。轻轻吹打细胞至完全脱落后吸出，在250g条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：4的比例分到新的含5-6ml培养液的T75 cm2细胞培养瓶中。选择在对数生长阶段生长条件良好的细胞于C1组至C3组小鼠左腋下为小鼠嫁接肿瘤，进行小鼠肿瘤模型构建。接种当天，将上述肿瘤细胞溶液以1000rpm离心5min，弃上清液后，将最终细胞浓度调节至5×105个细胞/100μL，于左腋下皮下注射为小鼠嫁接肿瘤。
接种后约一周，肿瘤长至100mm3。取78A1和78A1-SS-78A1，分别以PBS为溶剂配制适宜浓度的78A1溶液和78A1-SS-78A1溶液。采用1mL的注射器在分别小鼠肿瘤内注射上述PBS、78A1溶液和78A1-SS-78A1溶液50μL。其中，各组小鼠的给药剂量如表4所示。
表4
小鼠 注射液 给药剂量
C1组 78A1溶液 摩尔量与10μg的R848摩尔量一致
C2组 78A1-SS-78A1溶液 摩尔量为10μg的R848摩尔量的一半
C3组 PBS ——
C1组和C2组分别于瘤内注射5min、30min、60min、240min后，取2只小鼠取眼眶血，C3组在瘤内注射1h后取2只小鼠取眼眶血。各组小鼠取眼眶血后，3800rpm离心10min，分离血清，同时解剖取肿瘤组织，肿瘤组织称重后，按0.1g肿瘤组织加入1.0mL PBS进行匀浆，检测血清和肿瘤匀浆液中TNF-α的浓度，检测方法与实施例22相同。
实验结果如图10(A和B)所示，结果表明瘤内快注78A1后，小鼠血清中和肿瘤内的TNF-α含量显著增加，注射后的1h，小鼠血清和肿瘤内中TNF-α含量均达到峰值，且增幅达到10-30倍。此外瘤内快注78A1的血清中和肿瘤内的TNF-α含量变化趋势基本相同。
瘤内快注78A1-SS-78A1的4h内，血清中TNF-α水平仅有1-2倍小幅升高，与注射78A1的小鼠血清中TNF-a含量的10-30倍增幅相比大大减弱，表明78A1-SS-78A1的安全性大大提高。同时，注射78A1和78A1-SS-78A1的两组小鼠肿瘤内的TNF-a水平变化趋势基本一致，相较于注射PBS的C3组有明显的增加，均在注射后1h，肿瘤内的TNF-α达到峰值。
实施例25：瘤内注射的肿瘤和血清中TNF-α的诱导表达活性检测
取同实施例24相同的小鼠，分为五组，分别为D1组至D5组，每组3只。
采用实施例24相同的造模方法进行小鼠肿瘤造模。
接种后约一周，肿瘤长至100mm3。取R848、78A1、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1，分别以PBS为溶剂配制适宜浓度的R848、78A1、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1溶液。采用1mL的注射器在分别小鼠肿瘤内注射上述PBS、R848、78A1、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1溶液50μL。其中，各组小鼠的给药剂量如表5所示。
表5
各组于注射60min后，各取3只小鼠取眼眶血，3800rpm离心10min，分离血清，同时解剖取肿瘤组织，肿瘤组织称重后，按0.1g肿瘤组织加入1.0mL PBS进行匀浆，检测血清和肿瘤匀浆液中TNF-α的浓度，检测方法与实施例22相同。
实验结果如图11(A和B)所示，结果表明瘤内快注R848和78A1后，小鼠血清中的TNF-α含量显著增加，注射后的1h，小鼠血清中TNF-α与PBS对照组相比较增幅达到10-30倍。瘤内快注78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1血清中TNF-α水平仅有1-2倍小幅升高，与注射78A1的小鼠血清中TNF-a含量的10-30倍增幅相比大大减弱，与78A1组相比较差异具有显著性。同时，注射78A1和78A1-SS-78A1的两组小鼠肿瘤内的TNF-a含量无显著性差异，相较于注射PBS的D5组有明显的增加。
实施例26：抗肿瘤活性检测
取实施例24相同的小鼠，分为7组，分别为E1组至E7组，每组6只，采用实施例24相同的造模方法进行小鼠肿瘤造模。
接种后约一周，肿瘤长至100mm3，以PBS为溶剂，取R848、78A1、78A1-S-Trityl、78A1-SS-78A1配制适宜浓度的溶液，对小鼠进行瘤内注射给药。其中，E1组至E6组采用1mL注射器瘤内快注，注射的溶液体积为50μL；E7组采用微量注射泵25小时持续给药，给药体积为500μL。E1组至E7组小鼠注射的药物和化合物的给药剂量如表6所示。
表6
本实施例的E1组至E7组小鼠，每3天给药一次，共给药2次。在给药的过程中，每2天测量一次小鼠体重和肿瘤体积的变化，直至给药后22天，其中，肿瘤体积的量方式为：用游标卡尺测量肿瘤的长径(l)和短径(w)大小，根据体积公式：v＝0.5×l×w 2，计算肿瘤体积。22天后，治疗结束，将小鼠安乐死，解剖剥下肿瘤拍照并分析结果。实验结果如图12至图16所示。
如图12所示，相较于注射PBS组，瘤内快注78A1组的小鼠体重在治疗的前期呈现明显下降的趋势。而瘤内快注78A1-SS-78A1 10μg组、78A1-SS-78A1 20μg组和78A1-SH小鼠的体重相较于注射PBS组无明显变化。
如图13至图16所示，瘤内快注剂量为10μg的78A1-SH、78A1-S-Trityl和78A1-SS-78A1，以及剂量为20μg的78A1-SS-78A1，均能有效的抑制肿瘤生长，与注射78A1的实验结果相比无显著差异。此外，78A1-SS-78A1搭配微量注射泵控注的条件下(78A1-SS-78A1 10μgCI)，尽管有2只小鼠肿瘤长大，但有4只小鼠肿瘤最早在第10天即可观察到肿瘤清零，最终结果与其他组相比无显著差异，表明78A1-SS-78A1搭配微量注射泵具有现实的临床研究价值。
以上实施例仅表达了本申请的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本申请专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本申请的保护范围。因此，本申请专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种咪唑并喹啉化合物，其是式I的化合物或其可药用盐：
所述X包括正丙基、正丁基、正丁胺、正戊基、2-甲氧基乙基中的任一种；
所述R1包括C1-C36烷基、C1-C36烷氧基中的任一种；
所述R2包括氢、取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团、-S-R3中的任一种，其中，所述R3包括取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团中的任一种。
2.如权利要求1所述的咪唑并喹啉化合物，其特征在于：
所述X为正丁基；和/或
所述R3为式II所示：
其中，所述X1包括正丙基、正丁基、正丁胺、正戊基、2-甲氧基乙基、中的任一种，所述R4包括C1-C36烷基、C1-C36烷氧基中的任一种；和/或
所述R4包括C1-C36烷基、C1-C36烷氧基中的任一种。
3.如权利要求1-2任一项所述的咪唑并喹啉化合物，其特征在于，所述咪唑并喹啉化合物的结构式包括如下式(1)-式(4)中的至少一种：
4.如权利要求1-3任一项所述的咪唑并喹啉化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
提供化合物A和化合物B：
将所述化合物A和所述化合物B进行第一缩合反应，得到所述式I所示咪唑并喹啉化合物；
其中，所述Y包括-COOH、中的任一种；
所述Z包括氢、取代或未取代芳基、稠环芳基、杂多环基团、中的任一种，其中，所述R4包括C1-C36烷基、C1-C36烷氧基中的任一种，所述X2包括氢、/>中的任一种。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述第一缩合反应的条件包括如下(1)至(6)中的至少一个条件：
(1)反应溶剂包括四氢呋喃、三乙胺、二异丙基乙基胺、4-二甲氨基吡啶、N,N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷中至少一种；
(2)所述化合物A和所述化合物B的摩尔比为1：1～1：10；
(3)所述化合物A在所述第一缩合反应的反应溶液体系中的浓度为5～20mg/ml；
(4)所述第一缩合反应的反应溶液体系含有缩合试剂，所述化合物A和所述缩合试剂的摩尔比为1：3～1：15；
(5)反应温度为20～25℃；
(6)反应时间为2～18h。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述缩合试剂包括2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、N,N-二异丙基乙胺、N,N'-二异丙基碳二亚胺、1-羟基苯并三氮唑、1-丙基磷酸酐、二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺中至少一种。
7.如权利要求4-6任一项所述的制备方法，其特征在于，当所述Z为氢时，在所述第一缩合反应之后，所述制备方法还包括将第一缩合反应的产物分子之间进行第二缩合反应，所述第二缩合反应为巯基脱氢氧化反应；其中，所述巯基为所述式I所示咪唑并喹啉化合物所含的巯基。
8.权利要求1-3任一项所述的咪唑并喹啉化合物在制备抗肿瘤药物和/或制备抗病毒药物中的应用。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于：
所述肿瘤包括实体瘤，所述实体瘤包括皮肤T细胞淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、直肠癌，肺癌，胰腺癌、***癌、卵巢癌、骨癌、脑部肿瘤中至少一种；和/或
所述病毒包括乙型肝炎病毒。
10.一种组合物，其特征在于，包括如权利要求1-3任一项所述的咪唑并喹啉化合物或如权利要求4-6任一项所述的制备方法制得的咪唑并喹啉化合物。
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