CN116726112A - 一种预防、减缓或治疗衰弱综合征的中药组合物及制作工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种预防、减缓或治疗衰弱综合征的中药组合物，包括：黄芪、肉苁蓉、丹参、鬼箭羽、黄精、水蛭、石菖蒲、赤芍、制何首乌、炙甘草、远志、人参、右旋龙脑和黄酒。本发明提供的中药组合物对老年衰弱前期的衰弱水平、认知功能、抑郁状态有明显改善，可以延缓健康、衰弱前期老年人走向衰弱和失能状态。基于目前临床尚无老年衰弱综合征治疗的方法，本发明创新性建立了衰弱综合征的有效治疗方法，并能够明显改善疲劳、焦虑等并发症，提高老年患者应激能力，在临床实践中无明显不良反应，具有长期保健作用。
Description
技术领域
本发明涉及中药技术领域，尤其涉及一种预防、减缓或治疗衰弱综合征的中药组合物及制作工艺。
背景技术
老年衰弱综合征是一种和年龄增长密切相关的临床疾病，主要临床表现为：1．非特异性表现：疲劳、无法解释的体重下降和反复感染；2．跌倒：平衡功能及步态受损是衰弱的主要特征，也是跌倒的重要危险因素。衰弱状态下，即使轻微疾病也会导致肢体平衡功能受损，不足以维持步态完整性而跌倒；3．谵妄：衰弱老人多伴有脑功能下降，应激时可导致脑功能障碍加剧而出现谵妄；4．波动性失能：功能状态变化较大，常表现为功能独立和需要人照顾交替出现。在全球老龄化程度不断加深的背景之下，衰弱人数迅速增长，人体内多***生理功能和储备的进行性下降，不仅可使老人面对应激时的脆性增加、发生失能、功能下降、住院和死亡的风险增加，还可导致老年人对长期照护的需求和医疗费用增加，衰弱而致老年人失能、住院、死亡等事件越来越突出。
对衰弱前期的老年人进行积极干预，对于改善老年人生活质量有重要的意义。如能早期识别衰弱并给予相应的处理，可减少失能、降低照护机构的入住率、长期照护的需求和医疗/社会的花费，衰弱前期可被逆转至健康状态，一些衰弱状态也可被逆转至衰弱前期。
以往的证据表明，仅通过处理传统的慢性疾病并不能克服衰弱，必须用一种新的概念和方法来治疗和管理衰弱。目前中西医治疗该病都主要运用运动方法、营养支持干预，如瑜伽、平衡训练、太极拳及八段锦等。虽然这些干预措施均显示对老年衰弱有一定的积极效果，但面对非营养不良或有运动限制的衰弱患者时，以上治疗方式则存在局限，并不适用于所有老年人，且也不能从根本改善患者体质。中医药辨证论治干预衰弱也行之有效，例如中医理论指导下的食疗、服用中药汤剂等，具备整体调整和个体化治疗的优势，然而多为小样本个案研究，中医规范性治疗药物临床基本空白。可以说，目前针对老年衰弱前期患者的干预措施尚无特效疗法，有待深入研究。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种预防、减缓或治疗衰弱综合征的中药组合物及制作工艺，制备的中药组合物可以有效预防、减缓或治疗衰弱综合征。
本发明提供了一种预防、减缓或治疗衰弱综合征的中药组合物，包括：
黄芪、肉苁蓉、丹参、鬼箭羽、黄精、水蛭、石菖蒲、赤芍、制何首乌、炙甘草、远志、人参、右旋龙脑和黄酒。
可选的，所述中药组合物，按照重量份计，包括：
黄芪30-45份、肉苁蓉20-30份、丹参20-30份、鬼箭羽20-30份、黄精10-20份、水蛭10-15份、石菖蒲10-20份、赤芍10-20份、制何首乌10-20份、炙甘草10-20份、远志10-20份、人参8-12份、右旋龙脑0.05-0.1份、黄酒10-15份。
可选的，所述中药组合物，按照重量份计，包括：
黄芪35份、肉苁蓉30份、丹参25份、鬼箭羽20份、黄精15份、水蛭10份、石菖蒲15份、赤芍15份、制何首乌12份、炙甘草10份、远志10份、人参8份、右旋龙脑0.06份、黄酒10份。
本发明提供的中药组合物中含有黄芪，所述黄芪的含量优选为30-45重量份，更优选为35重量份，在一些具体实施例中，所述黄芪的含量包括但不限于30、35、40、45重量份。
本发明提供的中药组合物中含有人参，所述人参的含量优选为8~12重量份，更优选为8重量份，在一些具体实施例中，所述人参的含量包括但不限于8、9、10、11、12重量份。
其中，黄芪：味甘，性微温；归脾、肺经。健脾补中，升阳举陷，益卫固表，利尿。配人参：黄芪长于补气升阳，益卫固表，偏于温补固护；人参善于大补元气生津止渴，偏于滋补强壮。两药配伍，相须为用，为甘温补气的重要配伍。
本发明提供的中药组合物中含有肉苁蓉，所述肉苁蓉的含量优选为20~30重量份，更优选为30重量份，在一些具体实施例中，所述肉苁蓉的含量包括但不限于20、25、30重量份。
肉苁蓉：性温，味甘甜酸咸，入肾，入大肠经。入肾则补肾壮阳，益精补血；入大肠经则能润燥通便。它温而不烦燥，滋而不腻，既可补阴，又可补阳，是历代补肾、益寿佳品。
本发明提供的中药组合物中含有丹参，所述丹参的含量优选为20~30重量份，更优选为25或30重量份，在一些具体实施例中，所述丹参的含量包括但不限于20、25、30重量份。
丹参：性微寒，味苦。归心经、肝经。祛瘀止痛、活血通经、清心除烦。
本发明提供的中药组合物中含有鬼箭羽，所述鬼箭羽的含量优选为20~30重量份，更优选为20或25重量份，在一些具体实施例中，所述鬼箭羽的含量包括但不限于20、25、30重量份。
鬼箭羽：味苦、辛，性寒，归肝经，破血通经，除痹止痛。
本发明提供的中药组合物中含有黄精，所述黄精的含量优选为10~20重量份，更优选为15或20重量份，在一些具体实施例中，所述黄精的含量包括但不限于10、15、20重量份。
黄精：甘平质润，平而不偏，作用缓和，入脾、肺、肾经，为平补气阴之品。为我国常用的药食两用中药材。《日华子本草》记载：黄精“补五劳七伤”，助筋骨，止渴，耐寒暑，益脾胃，润心肺”。
本发明提供的中药组合物中含有水蛭，所述水蛭的含量优选为10~15重量份，更优选为10重量份，在一些具体实施例中，所述水蛭的含量包括但不限于10、11、12、13、14、15重量份。
水蛭：性平，味咸、苦；有小毒；归肝经。破血逐瘀。
本发明提供的中药组合物中含有石菖蒲，所述石菖蒲的含量优选为10~20重量份，更优选为15重量份，在一些具体实施例中，所述石菖蒲的含量包括但不限于10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20重量份。
石菖蒲：性微温，味辛、苦。归心经、胃经。开窍、豁痰、理气、活血、去湿。
本发明提供的中药组合物中含有赤芍，所述赤芍的含量优选为10~20重量份，更优选为15重量份，在一些具体实施例中，所述赤芍的含量包括但不限于10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20重量份。
赤芍：性微寒，味苦。归肝经、脾经。清热凉血、散瘀止痛。
本发明提供的中药组合物中含有制何首乌，所述制何首乌的含量优选为10~20重量份，更优选为12重量份，在一些具体实施例中，所述制何首乌的含量包括但不限于10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20重量份。
制何首乌：味苦、甘、涩，性微温；归肝、肾经。补益精血。
本发明提供的中药组合物中含有炙甘草，所述炙甘草的含量优选为10~20重量份，更优选为10重量份，在一些具体实施例中，所述炙甘草的含量包括但不限于10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20重量份。
炙甘草：甘，平。归心、肺、脾、胃经 。功效滋阴养血，益气通阳，复脉定悸。
本发明提供的中药组合物中含有远志，所述远志的含量优选为10~20重量份，更优选为10重量份，在一些具体实施例中，所述远志的含量包括但不限于10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20重量份。
远志：苦、辛、温。归心、肾、肺经。安神益智，祛痰。
本发明提供的中药组合物中含有右旋龙脑，所述右旋龙脑的含量优选为0.05~0.1重量份，更优选为0.06重量份，在一些具体实施例中，所述右旋龙脑的含量包括但不限于0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1重量份。
右旋龙脑（天然冰片）：气清香，味辛、凉；具挥发性。醒脑开窍、清热止痛。现代药理研究表明具易透过血脑屏障，能明显松弛血脑屏障的胞间闭锁小带，从而加速物质胞间转移，还可通过提高生物膜屏障通透性，发挥“引经药物”功效。本发明在中药组合物中添加右旋龙脑可以使其他药物更好的透入血脑屏障更好的发挥对中枢神经***的保护作用，改善脑老化情况。
本发明提供的中药组合物中含有黄酒，所述黄酒的含量优选为10~15重量份，更优选为10重量份，在一些具体实施例中，所述黄酒的含量包括但不限于10、11、12、13、14、15重量份。
黄酒：性热，味甘、苦、辛，热，气味芳香，入心经、肝经、肺经、胃经，能中能散，宣行药势，具有活血通络、散寒、祛风之功效。含有丰富的氨基酸，还含有易被人体消化的营养物质，如糊精、麦芽糖、葡萄糖、脂类、甘油、高级醇、维生素和有机酸等。一方面能够宣行药势，使药物引经入血分，提高生物生物利用度，另一方面阴黄酒对消化功效，使得上方最大程度减少脾胃刺激，药物发挥最好疗效。
本发明提供的上述组合物恰好契合衰弱综合征的病机，能够明确延缓衰老，改善免疫机能、预防衰弱综合征，逆转衰弱状态。以益气药与活血祛瘀通络药相伍为用，有“气行则血行”之功，有相得益彰的功效，即益气有助于活血化瘀，瘀去有益于气行。黄芪伍水蛭，补中有行，补而不壅，攻而不伤正。黄芪配人参，相须为用，加强甘温补气。同时方中肉苁蓉、黄精为佐补益肝肾使气血双补、阴阳兼顾诸脏虚损得平。总之方中共奏益气活血，滋阴补肾。
本发明提供了上述中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
S1）将黄芪、肉苁蓉、丹参、鬼箭羽、黄精、水蛭、赤芍、制何首乌、炙甘草、远志和人参加水浸泡，煎煮得煎煮液；
将石菖蒲粉碎得石菖蒲粉末；
S2）将上述煎煮液和黄酒合并，然后加入右旋龙脑，减压浓缩得到稠膏，减压干燥后得到干膏；
S3）将上述干膏与石菖蒲粉末、糊精混合，粉碎后得到上述中药组合物。
优选的，所述石菖蒲粉末的粒径为60-100目，更优选为80目。
优选的，所述中药组合物过60目筛后备用。
本发明可以根据剂型需求对上述中药组合物进行下一步加工，本发明对此并无特殊限定。
所述步骤S1）中的加水浸泡，加水量优选为600-1200mL，更优选为800mL，浸泡时间优选为0.5~2h。
所述步骤S1）中煎煮优选为煎煮2次，第一次煎煮加水量优选为药材的8~15倍，第二次煎煮加水量优选为药材的6~12倍，第一次煎煮和第二次煎煮的时间均优选为1.5~2h，合并两次煎煮液得最终的煎煮液。
优选的，所述步骤S2）中减压浓缩至相对密度为1.25~1.4g/L得到稠膏。
所述减压浓缩的温度优选为50~60℃。
所述减压干燥的温度优选为60~80℃。
由于石菖蒲为根茎类药材，含有大量的淀粉，加热后易于糊化、挥发，将其粉碎后与干膏直接混合，有益于减少石菖蒲有效成分的流失，可以充分发挥石菖蒲的通关、开窍、醒神等功效从而加强调节、平衡中枢神经***功能、保护脑细胞等作用。另一方面，石菖蒲干粉入药增加了颗粒剂的稳定性的同时，还减少了糊精的用量。
所述糊精的用量优选为干膏的2wt%~4wt%，更优选为干膏的3wt%-3.5wt%。
本发明提供了一种预防、减缓或治疗衰弱综合征的药物，包括上述中药组合物和药学上可接受的辅剂。
所述辅剂可以根据剂型进行相应调整，本发明对此并无特殊限定。
优选的，所述药物的剂型为颗粒剂、片剂、丸剂、汤剂、散剂、膏剂或胶囊等中药的常规剂型。所述丸剂包括但不限于微丸、滴丸、蜜丸、水丸等。
上述中药组合物或药物可以用于预防、治疗或减轻老年衰弱综合征，老年血管性痴呆、抑郁状态、中青年早衰群体、术后衰弱、肿瘤放化疗后衰弱综合征等。
与现有技术相比，本发明提供了一种预防、减缓或治疗衰弱综合征的中药组合物，包括：黄芪、肉苁蓉、丹参、鬼箭羽、黄精、水蛭、石菖蒲、赤芍、制何首乌、炙甘草、远志、人参、右旋龙脑和黄酒。本发明提供的中药组合物对老年衰弱前期的衰弱水平、认知功能、抑郁状态有明显改善，可以延缓健康、衰弱前期老年人走向衰弱和失能状态。基于目前临床尚无老年衰弱综合征治疗的方法，本发明创新性建立了衰弱综合征的有效治疗方法，并能够明显改善疲劳、焦虑等并发症，提高老年患者应激能力，在临床实践中无明显不良反应，具有长期保健作用。
附图说明
图1为药物与虚弱综合征的靶标韦恩图；
图2为药物活性成分治疗虚弱综合征的PPI网络；
图3为拓扑分析PPI网络中20个关键靶点；
图4为药物主要活性成分--虚弱综合征--相关通路网络分析图。
具体实施方式
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的预防、减缓或治疗衰弱综合征的中药组合物进行详细描述。
实施例1
组合物组分（重量份）：
黄芪35份、肉苁蓉30份、丹参25份、鬼箭羽20份、黄精15份、水蛭10份、石菖蒲15份、赤芍15份、制何首乌12份、炙甘草10份、远志10份、人参8份、右旋龙脑0.06份、黄酒10份。
组合物制备：
取石菖蒲粉碎至80目备用。取黄芪、肉苁蓉、丹参、鬼箭羽、黄精、水蛭、赤芍、制何首乌、炙甘草、远志、人参11味药加水浸泡0.5h，煎煮2次，每次2小时，第一次加水10倍量，第二次加水8倍量，滤过，合并两次煎煮液得水提液，将上述水提液与黄酒合并，将右旋龙脑溶入上述合并液体，减压浓缩至相对密度1.25～1.4的稠膏（50-60℃），减压干燥（60-80℃），得干膏，备用。将上述干膏、适量糊精与石菖蒲药粉混合，粉碎，过60目筛后备用。
糊精用量为干膏重量的3.5%。
对比例1
黄芪15份、肉苁蓉30份、丹参25份、鬼箭羽20份、黄精15份、水蛭10份、石菖蒲15份、赤芍15份、制何首乌12份、炙甘草10份、远志10份、人参8份。
组合物制备过程同实施例1。
门诊试验：
1. 研究对象：选取2020年1月至2020年6月的20例老年衰弱患者，根据随机数表分为实验组（给与实施例1中药组合物，记为QRYZ组）和对照组（给与对比例1中药组合物，记为QRYZL组），纳入标准：根据《衰弱筛查量表(FRAIL表)》，得分＞1分，即为老年衰弱或衰弱前期患者。
2.干预方法：两组患者均由同一名医师进行营养、运动等相关健康宣教，每2周宣教1次。两组中药均由中药房制剂室统一加工，口服，200mL/日，2次/日。观察期2个月。
3.观察指标:
①衰弱水平采用Fried衰弱量表（FP），量表一共包括5个方面:步速降低、握力减弱、自诉疲乏、躯体活动量下降及自然体质量减轻，5项指标中，符合1项指标计1分，共5分，分数越高即衰弱程度越高，0分为健康，1-2分为衰弱前期，3分为衰弱。
②认知功能
使用福州版MoCA量表评估CF患者的整体认知功能。MoCA量表是一种简便、独立的认知筛查工具，能够在10分钟内迅速评估完成，对轻度认知障碍检测的敏感性高达90%，而改良后的福州版MoCA量表内部一致信度与重测信度均超过0.9，足见其可靠性高。该评定量表涵盖了8个重要的认知领域：视空间执行能力(5分)、命名(3分)、记忆（不记分）、注意力(6分)，定向力(6分)，语言能力(2分)，流畅性(1分)，抽象思维(2分)，延迟回忆（5分），满分为30分。以26分为分界值，得分越高表示受试者整体认知功能越好;考虑到文化程度的不同可造成一定偏倚，若研究对象受教育总年限低于12年，则最终得分加1分。
③维生素D3的血清浓度：
4. 结果：
（1）两组患者衰弱表型(FP)评分比较
表1 两组患者干预前后(FP)得分比较[分，M(Q25，Q75)]
注:a与同组治疗前比较，P<0.001 ;b与对照组治疗后比较，P<0.001
由表1可知，干预前，QRYZ组FP得分与QRYZL组FP得分比较差异不具有统计学意义，两组具有可比性；干预后（8周），组内比较，QRYZ组的FP得分明显低于干预前，差异具有统计学意义(p<0.05);干预后，QRYZL组的FP得分明显高于干预组，差异具有统计学意义(p<0.05)。
（2）干预8周后，两组在整体认知功能和身体衰弱指数得分差值上(干预8周后、干预前)均有差异，干预后QRYZ组的MoCA得分提高2.51±0.32分，差值明显高于对QRYZL组。
表2 两组患者干预前后MoCA得分比较
（3）两组患者干预前后25 (OH) D3水平变化情况：
干预8周后，2组血清25 (OH) D3均较干预前升高（P＞0.05);QRYZ组较QRYZL组升高更明显，差异有统计学意义(P>0.05）。
表3 两组干预前后25(OH)D3的变化
5. 结论：
含有冰片、黄酒的实验组（QRYZ）能够明显改善衰弱综合征的FP评分、认知功能以及25 (OH) D3水平，较去除冰片、黄酒的对照组（QRYZL）具有明显差异。
临床试验：
1. 研究对象选取2021年1月至2023年2月的72例老年衰弱患者，根据随机数表分为实验组（给与实施例1中药组合物）和对照组[给与服用安慰剂颗粒(实施例1有效成分的1/20，制成气味、剂型等方面都与治疗药物相似。一次12g，开水冲服，每日2次）]，纳入标准:年龄大于65岁；根据《衰弱筛查量表(FRAIL表)》，得分＞1分，即为老年衰弱或衰弱前期患者。排除标准：严重心、肺功能不全者，如慢性阻塞性肺疾病急性加重期、心功能分级W级；恶性肿瘤者；急慢性感染性疾病者。
2.干预方法:两组患者均由同一名医师进行营养、运动等相关健康宣教，每2周宣教1次。实验组在健康宣教基础上加服实施例1制备的中药组合物，口服，1-2袋/日，3次/日。观察期3个月。
3.观察指标:①衰弱水平采用Fried衰弱量表，量表一共包括5个方面:步速降低、握力减弱、自诉疲乏、躯体活动量下降及自然体质量减轻，5项指标中，符合1项指标计1分，共5分，分数越高即衰弱程度越高，0分为健康，1-2分为衰弱前期，3分为衰弱。
②认知功能采用MMSE量表，该量表主要包括以下7个方面：时间定向力、地点定向力、即刻记忆、注意力及计算力、延迟记忆、语言和视空间，共30题，每次回答正确1项得1分，总计30分。根据患者的文化程度，分数正常划界值为。MMSE分值:文盲≤17分，小学18-20分，初中及以上21-24分为认知障碍：文盲≤20分，小学21-23分，初中及以上24-27分为轻度认知障碍，27-30分为正常。③抑郁状态运用GDS量表，该量表共有30个条目，每个条目都要求受试者回答“是”或“否”，条目后面括号中的答案表示抑郁，与其答案一致得1分，主要包括以下症状：情绪低落、活动减少、易怒、痛苦的想法、对过去、现在和未来的负面评价。本量表的临界值为：总分0-30分；0-10分属正常范围，无抑郁状态；11-20分为轻度抑郁；21-30分则为中重度抑郁。
4.结果
①两组患者干预前后Fried衰弱量表评分比较：治疗前两组组间比较，衰弱、体重下降、握力下降、行动缓慢、疲乏感及身体活动量低下6个条目的发生率，差异均无统计学意义，具有可比性(P＞0.05)。治疗3个月后两组组间比较，衰弱、体重下降、握力下降及疲乏感4个条目发生率，差异有统计学意义(P＜0.01)，行动缓慢、身体活动量低下2个条目发生率，差异无统计学意义(P＞0.05)。试验组治疗3个月后与治疗前比较，衰弱、体重下降、握力下降及疲乏感4个条目发生率，差异有统计学意义(P＜0.01)，行动缓慢、身体活动量低下2个条目发生率，差异无统计学意义(P＞0.05)。对照组治疗3个月后与治疗前比较，衰弱、体重下降、握力下降、行动缓慢、疲乏感及身体活动量低下6个条目发生率，差异均无统计学意义(P＞0. 05)。见表4
表4 实验组和对照组患者干预前后(FP)得分比较
②两组患者干预前后MMSE评分比较：干预后，实验组MMSE得分明显高于干预前，且高于同期对照组，差异均有统计学意义(P<0.05），如表5所示。
表5 实验组和对照组患者干预前后(MMSE)得分比较
③两组患者干预前后GDS评分比较：干预后，实验组GDS得分明显低于干预前，且低于同期对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)
表6 实验组和对照组患者干预前后(GDS)得分比较
④常见中医症状积分：参照2018年由福建中医药大学附属人民医院承担，衡先培负责编制的《中医内科临床诊疗指南•老年衰弱(制订)》将衰弱分为以下五个证型：肾精亏虚证、气血亏虚证、脾肾阳虚证、脾虚痰湿证、五脏衰弱证，将各证型表现进行归纳用于判断与中医症状吻合度，主症包括：①乏力；②精神疲惫；③消瘦；符合一项赋值20%，次症可归纳为以下5方面：①肢体躯干：腰膝酸软或形寒肢冷或肥胖肢肿；②五官清窍：头晕眼花或耳鸣耳聋；③神志：失眠健忘或痴呆；④二便：大便溏泻或小便清长；⑤饮食消化：食欲不振或纳呆腹胀，符合一项赋值8%，共计100%。结果：两组治疗前差异无统计学意义（P=0.83,>0.05）；实验组治疗后与治疗前相比，中医证侯积分降低，差异有统计学意义(P=0.0000,<0.01)；对照组治疗后与治疗前相比，中医证侯积分降低，差异有统计学意义（P=0.0178,<0.05)；治疗后，治疗组中医证侯积分比对照组低，(P=0.0000,<0.01)。如表7所示。
表7 实验组和对照组患者干预前后常见中医症状积分比较
⑤不良反应监测：完成研究的两组受试者在治疗前、治疗3个月及治疗6个月时的安全性指标均在临床正常范围内。如表8所示。
表8 实验组和对照组安全性指标比较(F±s)
以上结果表明，采用本发明提供的中药组合物干预后，实验组Fried衰弱量表评分明显低于干预前，且低于同期对照组，差异均有统计学意义(P<0.05);干预后，组内比较，实验组MMSE得分明显高于干预前，且高于同期对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)；干预后，实验组GDS得分明显低于干预前，且低于同期对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。这证明本发明提供的中药组合物可以有效改善老年衰弱前期患者的衰弱水平、认知功能及抑郁情况。多个评价指标也进一步说明了其治疗老年衰弱综合征的临床有效性，包括简易精神状态、抑郁情况、睡眠质量、日常生活能力以及中医证候评分等多方面。
网络药理学预测验证机制
Ⅰ.成分靶点信息查询
上述中药组合物的主要活性成分为：松果菊苷，芍药苷，毛蕊异黄酮葡萄糖苷，甘草苷，2，3，5，4’-四羟基-苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷，毛蕊花糖苷，β-细辛醚。通过pubchem数据库（https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）获得各化合物的SMILES ID，将SMILES ID导入Swisstargets数据库（http://www.swisstargetprediction.ch/）获得相应的化合物靶点，所有靶点经uniprot数据库（https://www.uniprot.org/）校正，去掉非人类靶点。
Ⅱ.疾病靶点查找
以 “frailty”和“Fried”为关键词，在GeneCards数据库（https://www.genecards.org/）, NCBI基因数据库（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/），DisGeNET数据库（https://www.disgenet.org/）进行人类基因检索。经检索，GeneCards数据库获得772个相关靶点；NCBI数据库获得65个相关靶点；DisGeNET数据库获得1个相关靶点。将这3个数据库的基因合并删重之后，得到773个疾病相关基因。
Ⅲ.韦恩图
将筛选出的药物靶点与疾病靶点输入韦恩图制作软件Venny 2.1，得到64个共有靶点，作为药物作用于疾病的预测靶点进行下面的通路富集分析，如图1所示。
Ⅳ.PPI网络构建
将药物疾病共有靶点输入String数据库（https://string-db.org/cgi/input.pl）进行PPI网络的构建，将生物种类设定为“Homo sapiens”，该网络中有64个节点，429条边，平均度值为13.4。（cytoscape软件绘制PPI网络图，其中节点颜色和大小根据度值调整，越大，颜色越红，度值越大，线的粗细，从粗到细表示edge betweenness从大到小）。如图2所示。
Ⅴ.拓扑分析
将PPI网络导入Cystoscape 3.8.0中，通过NetworkAnalyzer工具进行拓扑分析，通过degree排序，选取分值大于平均分的基因作为关键靶点，总共筛选出25个关键靶点，将这25个靶点使用R 4.0.3进行图片绘制，横坐标为每个靶点的度值。如图3所示。
Ⅵ.关键成分筛选
将成分-疾病-靶点网络图，导入cytoscape 3.8.0 中进行拓扑分析。将成分进行degree的排序，degree值越高成分越重要。（可以选取大于平均度值的成分作为关键成分进行后续的研究）
表9 关键成分信息表
Ⅶ.KEGG通路富集
将药物疾病共有靶点进行KEGG通路富集分析，引用String 数据库，将校正P值＜0.05的项目进行筛选，总共富集到123条信号通路。使用R 4.0.3 ，安装并引用clusterProfiler包后，进行柱状图和气泡图绘制，主要富集通络：糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、化学致癌作用：受体激活、胰岛素抵抗、化学致癌性、活性氧、松弛素信号通路、Th17细胞分化、糖尿病性心肌病、类固醇激素生物合成、脂质和动脉粥样硬化、Foxo信号通路、多巴胺能突触、色氨酸代谢、冠状病毒disease-COVID-19等信号通路。
Ⅷ、成分—疾病—通路—靶点网络构建
将成分—疾病—通路—靶点网络文件导入Cytoscape3.8.0进行通路网络图的绘制。更直观地展示中药活性成分在治疗疾病过程中的多成分-多靶点的作用特点。如图4所示。
结论：该中药组合物很可能通过STAT3、JUN、HSP90AA1、EGFR、ALB、TNF等多靶点调控松弛素信号通路、Th17细胞分化、糖尿病性心肌病、类固醇激素生物合成、Foxo信号通路、多巴胺能突触、色氨酸代谢等信号通路，发挥治疗虚弱综合征的治疗作用。
以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。
Claims (10)
1.一种预防、减缓或治疗衰弱综合征的中药组合物，其特征在于，包括：
黄芪、肉苁蓉、丹参、鬼箭羽、黄精、水蛭、石菖蒲、赤芍、制何首乌、炙甘草、远志、人参、右旋龙脑和黄酒。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，按照重量份计，包括：
黄芪30-45份、肉苁蓉20-30份、丹参20-30份、鬼箭羽20-30份、黄精10-20份、水蛭10-15份、石菖蒲10-20份、赤芍10-20份、制何首乌10-20份、炙甘草10-20份、远志10-20份、人参8-12份、右旋龙脑0.05-0.1份、黄酒10-15份。
3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，按照重量份计，包括：黄芪35份、肉苁蓉30份、丹参25份、鬼箭羽20份、黄精15份、水蛭10份、石菖蒲15份、赤芍15份、制何首乌12份、炙甘草10份、远志10份、人参8份、右旋龙脑0.06份、黄酒10份。
4.权利要求1~3任一项所述的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
S1）将黄芪、肉苁蓉、丹参、鬼箭羽、黄精、水蛭、赤芍、制何首乌、炙甘草、远志和人参加水浸泡，煎煮得煎煮液；
将石菖蒲粉碎得石菖蒲粉末；
S2）将上述煎煮液和黄酒合并，然后加入右旋龙脑，减压浓缩得到稠膏，减压干燥后得到干膏；
S3）将上述干膏与石菖蒲粉末、糊精混合，粉碎后得到所述中药组合物。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1）中的加水浸泡，加水量为600-1200mL，浸泡时间为0.5~2h；
所述石菖蒲粉末的粒径为60-100目。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1）中煎煮为煎煮2次，第一次煎煮加水量为药材的8~15倍，第二次煎煮加水量为药材的6~12倍，第一次煎煮和第二次煎煮的时间均为1.5~2h，合并两次煎煮液得最终的煎煮液。
7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2）中减压浓缩至相对密度为1.25~1.4g/L得到稠膏；
所述减压浓缩的温度为50~60℃；
所述减压干燥的温度为60~80℃。
8.一种预防、减缓或治疗衰弱综合征的药物，其特征在于，包括权利要求1~3任一项所述的治疗衰弱综合征的中药组合物和药学上可接受的辅剂。
9.根据权利要求8所述的药物，其特征在于，所述药物的剂型为颗粒剂、片剂、丸剂、汤剂、散剂、膏剂或胶囊。
10.根据权利要求8所述的药物，其特征在于，所述衰弱综合征包括老年衰弱综合征，老年血管性痴呆、抑郁、中青年早衰、术后衰弱、肿瘤放化疗后衰弱综合征中的一种或多种。
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