CN116693526A - 咪唑并吡啶类化合物及其应用 - Google Patents
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Classifications
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Abstract
本发明公开了一系列的咪唑并吡啶类化合物及其应用,具体涉及式(P)所示化合物及其药学上可接受的盐。
Description
本发明主张如下优先权:
CN202210200324.4,申请日:2022年3月2日。
PCT/CN2022/087228,申请日:2022年4月15日。
技术领域
本发明涉及一系列的咪唑并吡啶类化合物及其应用,具体涉及式(P)所示化合物或其药学上可接受的盐。
背景技术
Bruton’s酪氨酸激酶(BTK)是酪氨酸激酶Tec家族(TEC family kinases,TFKs)成员之一,该家族共有 5个成员,除了BTK,还有ITK、TEC、BMX和TXK。BTK在B细胞、巨噬细胞和单核细胞中表达,而 在T细胞中不表达。BTK在通过B细胞和髓系细胞中的B细胞受体(BCR)和Fcγ受体的信号传导中起 着至关重要的作用。
BTK主要负责B淋巴细胞中的各种细胞内外信号的传导与放大,是B细胞成熟所必需的。在XLA患 者中BTK功能失活,会导致外周B细胞和免疫球蛋白的缺乏。BTK上游的信号受体包括生长因子和细胞 因子受体、G蛋白偶联受体如趋化因子受体、抗原受体(尤其是B细胞受体[BCR])和整联蛋白等。BTK 反过来激活许多主要的下游信号通路,包括磷酸肌醇-3激酶(PI3K)-AKT通路、磷脂酶-C(PLC)、蛋白 激酶C和核因子κB(NF-κB)等等。BTK在BCR信号传导和细胞迁移中的作用已得到很好的证实,而这 些功能似乎也是BTK抑制剂的主要靶点。在B细胞慢性淋巴细胞白血病(CLL)和套细胞淋巴瘤(MCL) 等血癌细胞中均检测到BTK活性的增加。BTK功能异常活跃经常会导致B细胞恶性肿瘤或自体免疫疾病, 使其成为一个热门的研发靶点。
目前FDA已批准上市的BTK抑制剂有伊布替尼、阿卡替尼和泽布替尼,主要适应症包括套细胞淋巴 瘤、的巨球蛋白血症、小淋巴细胞淋巴瘤以及边缘区淋巴瘤等,在如类风湿性关节炎、***性 红斑狼疮等免疫疾病领域也是热门靶点。
发明内容
本发明咪唑并吡啶类化合物是一类蛋白激酶抑制剂,具有多种治疗应用,可以用于治疗由蛋白激酶引 起的增殖、炎症及自身免疫等相关的紊乱。本发明提供了一系列咪唑并吡啶类不可逆BTK抑制剂。
本发明提供了式(P)所示化合物或其药学上可接受的盐,
其中,
L1选自O和-C1-3烷基-NH-C(=O)-;
环A选自四氢吡咯基和哌啶基;
各R1分别独立地选自卤素、C1-3烷基和C1-3烷氧基,所述C1-3烷基和C1-3烷氧基分别独立地任选被1、2 或3个卤素取代;
R2选自H、卤素和C1-3烷基,所述C1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代;
R3选自
R4选自卤素、CN、C1-3烷基和C1-3烷氧基,所述C1-3烷基和C1-3烷氧基分别独立地任选被1、2或3个卤 素取代;
R5选自H、卤素和C1-3烷基,所述C1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代;
各Rb分别独立地选自H和卤素;
各Rc分别独立地选自H和C1-3烷基,所述C1-3烷基被1、2或3个F取代;
m为0、1、2或3;
n为0、1或2;
条件是,当L1选自O时,Rc选自C1-3烷基,所述C1-3烷基被1、2或3个F取代。
在本发明的一些方案中,所述L1选自O和-CH2-NH-C(=O)-,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各R1分别独立地选自F、Cl、Br、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、OCH3、 OCH2CH3和OCH(CH3)2,所述CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、OCH3、OCH2CH3和OCH(CH3)2分别独立地任 选被1、2或3个卤素取代,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各R1分别独立选自F、Cl、Br、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、CF3、OCH3、 OCH2CH3、OCH(CH3)2和OCF3,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自 其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自 其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R2选自H、F、Cl和CH3,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自/>其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各Rc分别独立地选自H、CH3、CH2CH3和CH(CH3)2,所述CH3、CH2CH3和CH(CH3)2被1、2或3个F取代,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各Rc分别独立地选自H、CH2F、CHF2和CF3,其他变量如本发明所定 义。
在本发明的一些方案中,所述R3选自其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R4选自F、Cl、Br、CN、CH3、CF3、OCH3和OCF3,其他变量如本发 明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R4选自F和CH3,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述环A选自其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述n为0或1,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自 其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自 其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自 其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R5选自H,其他变量如本发明所定义。
本发明提供了式(II)所示化合物或其药学上可接受的盐,
其中,
L1选自O和-C1-3烷基-NH-C(=O)-;
环A选自四氢吡咯基或哌啶基;
各R1分别独立选自卤素、C1-3烷基和C1-3烷氧基,所述C1-3烷基和C1-3烷氧基分别独立地任选被1、2或 3个卤素取代;
R2选自H、卤素和C1-3烷基,所述C1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代;
R3选自
R4选自卤素、CN、C1-3烷基和C1-3烷氧基,所述C1-3烷基和C1-3烷氧基分别独立地任选被1、2或3个卤 素取代;
R5选自H、卤素和C1-3烷基,所述C1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代;
各Rb分别独立选自H和卤素;
各Rc分别独立选自H和C1-3烷基,所述C1-3烷基被1、2或3个F取代;
m为0、1、2或3;
n为0、1或2;
条件是,当L1选自O时,Rc选自C1-3烷基,所述C1-3烷基被1、2或3个F取代。
在本发明的一些方案中,所述L1选自O和-CH2-NH-C(=O)-,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各R1分别独立选自F、Cl、Br、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、OCH3、OCH2CH3和OCH(CH3)2,所述CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、OCH3、OCH2CH3和OCH(CH3)2分别独立地任选被1、2 或3个卤素取代,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各R1分别独立选自F、Cl、Br、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、CF3、OCH3、 OCH2CH3、OCH(CH3)2和OCF3,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自其他变量如 本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自其他变量如本 发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R2选自H、F、Cl、Br、CH3、CH2CH3和CH(CH3)2,所述CH3、CH2CH3和CH(CH3)2分别独立地任选被1、2或3个卤素取代,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R2选自H,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各Rc分别独立选自H、CH3、CH2CH3和CH(CH3)2,所述CH3、CH2CH3和CH(CH3)2被1、2或3个F取代,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各Rc分别独立选自H、CH2F、CHF2和CF3,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R3选自其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述环A选自其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自/>其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自/>其他 变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R4选自F、Cl、Br、CN、CH3、CF3、OCH3和OCF3,其他变量如本发 明所定义。
在本发明的一些方案中,所述n为0,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R5选自H,其他变量如本发明所定义。
本发明提供了式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐,
其中,
L1选自O和-C1-3烷基-NH-C(=O)-;
环A选自四氢吡咯基或哌啶基;
各R1分别独立选自F、Cl、Br、C1-3烷基和C1-3烷氧基,所述C1-3烷基和C1-3烷氧基任选被1、2或3个Ra取代;
R2选自H、F、Cl和Br;
R3选自
各Ra分别独立选自F、Cl和Br;
各Rb分别独立选自H、F、Cl和Br;
各Rc分别独立选自H和C1-3烷基,所述C1-3烷基被1、2或3个F取代;
m为0、1、2或3;
条件是,当L1选自O时,Rc选自C1-3烷基,所述C1-3烷基被1、2或3个F取代。
在本发明的一些方案中,所述L1选自O和-CH2-NH-C(=O)-,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各R1分别独立选自F、Cl、Br、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、OCH3、OCH2CH3和OCH(CH3)2,所述CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、OCH3、OCH2CH3和OCH(CH3)2任选被1、2或3个Ra取 代,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各R1分别独立选自F、Cl、Br、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、CF3、OCH3、 OCH2CH3、OCH(CH3)2和OCF3,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自其他变量如 本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自其他变量如 本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R2选自H,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各Rc分别独立选自H、CH3、CH2CH3和CH(CH3)2,所述CH3、CH2CH3和CH(CH3)2被1、2或3个F取代,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述各Rc分别独立选自H、CH2F、CHF2和CF3,其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述R3选自其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述环A选自其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元选自/>其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述结构单元 其他变 量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中,所述化合物或其药学上可接受的盐,其化合物选自,
其中,L1、R1、R2、R3、R4、m和n如本发明所定义;
p为0或1,q为0或1,且p和q不同时为0。
在本发明的一些方案中,所述化合物或其药学上可接受的盐,其化合物选自,
其中,L1、R1、R2、R3和m如本发明所定义;
p为0或1,q为0或1,且p和q不同时为0。
在本发明的一些方案中,所述化合物或其药学上可接受的盐,其化合物选自
其中,L1、R1、R2、R3和m如本发明所定义;
p为0或1,q为0或1,且p和q不同时为0。
本发明还有一些方案由上述变量任意组合而来。
本发明还提供了下式所示化合物或其药学上可接受的盐,
在本发明的一些方案中,所述化合物或其药学上可接受的盐,其化合物选自
/>
定义和说明
除非另有说明,本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定 义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的,而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时, 意在指代其对应的商品或其活性成分。
这里所采用的术语“药学上可接受的”,是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言,它们在可靠 的医学判断的范围之内,适用于与人类和动物的组织接触使用,而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应 或其它问题或并发症,与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐,由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无 毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时,可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂 中用足够量的碱与这类化合物接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、 有机胺或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时,可以通过在纯的溶液或合适的 惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无 机酸盐,所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸,碳酸氢根,磷酸、磷酸一氢根、磷酸二氢根、 硫酸、硫酸氢根、氢碘酸、亚磷酸等;以及有机酸盐,所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、 丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠 檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸;还包括氨基酸(如精氨酸等)的盐,以及如葡糖醛酸等有机酸的盐。 本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团,从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。
本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下, 这样的盐的制备方法是:在水或有机溶剂或两者的混合物中,经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计 量的适当的碱或酸反应来制备。
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物,包括顺式和 反式异构体、(-)-和(+)-对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体,及其外消 旋混合物和其他混合物,例如对映异构体或非对映体富集的混合物,所有这些混合物都属于本发明的范围 之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物,均包括在本发明 的范围之内。
除非另有说明,术语“对映异构体”或者“旋光异构体”是指互为镜像关系的立体异构体。
除非另有说明,术语“顺反异构体”或者“几何异构体”系由因双键或者成环碳原子单键不能自由旋转而 引起。
除非另有说明,术语“非对映异构体”是指分子具有两个或多个手性中心,并且分子间为非镜像的关系 的立体异构体。
除非另有说明,“(+)”表示右旋,“(-)”表示左旋,“(±)”表示外消旋。
除非另有说明,用楔形实线键和楔形虚线键/>表示一个立体中心的绝对构型,用直形实 线键/>和直形虚线键/>表示立体中心的相对构型,用波浪线/>表示楔形实线键/>或楔形虚线键/>或用波浪线/>表示直形实线键/>或直形虚线键/>
除非另有说明,术语“富含一种异构体”、“异构体富集”、“富含一种对映体”或者“对映体富集”指其中一 种异构体或对映体的含量小于100%,并且,该异构体或对映体的含量大于等于60%,或者大于等于70%, 或者大于等于80%,或者大于等于90%,或者大于等于95%,或者大于等于96%,或者大于等于97%,或 者大于等于98%,或者大于等于99%,或者大于等于99.5%,或者大于等于99.6%,或者大于等于99.7%, 或者大于等于99.8%,或者大于等于99.9%。
除非另有说明,术语“异构体过量”或“对映体过量”指两种异构体或两种对映体相对百分数之间的差值。 例如,其中一种异构体或对映体的含量为90%,另一种异构体或对映体的含量为10%,则异构体或对映体 过量(ee值)为80%。
可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构 体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体,可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备, 其中将所得非对映体混合物分离,并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者,当分子中含有碱 性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时,与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐,然 后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分,然后回收得到纯的对映体。此外,对映异构体和 非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的,所述色谱法采用手性固定相,并任选地与化学衍生法 相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。
本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如,可用 放射性同位素标记化合物,比如氚(3H),碘-125(125I)或C-14(14C)。又例如,可用重氢取代氢形成氘 代药物,氘与碳构成的键比普通氢与碳构成的键更坚固,相比于未氘化药物,氘代药物有降低毒副作用、 增加药物稳定性、增强疗效、延长药物生物半衰期等优势。本发明的化合物的所有同位素组成的变换,无 论放射性与否,都包括在本发明的范围之内。
“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的,并且该描述包括其中所述事 件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。
术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代,取代基可以包括重氢和氢的 变体,只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧(即=O)时,意味着两个 氢原子被取代。氧取代不会发生在芳香基上。术语“任选被取代的”是指可以被取代,也可以不被取代,除 非另有规定,取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。
当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时,其在每一种情况下的定义都是独立的。 因此,例如,如果一个基团被0-2个R所取代,则所述基团可以任选地至多被两个R所取代,并且每种情 况下的R都有独立的选项。此外,取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情 况下才是被允许的。
当一个连接基团的数量为0时,比如-(CRR)0-,表示该连接基团为单键。
当其中一个变量选自单键时,表示其连接的两个基团直接相连,比如A-L-Z中L代表单键时表示该结 构实际上是A-Z。
当一个取代基为空缺时,表示该取代基是不存在的,比如A-X中X为空缺时表示该结构实际上是A。 当所列举的取代基中没有指明其通过哪一个原子连接到被取代的基团上时,这种取代基可以通过其任何原 子相键合,例如,吡啶基作为取代基可以通过吡啶环上任意一个碳原子连接到被取代的基团上。当所列举 的连接基团没有指明其连接方向,其连接方向是任意的,例如,中连接基团L为-M- W-,此时-M-W-既可以按与从左往右的读取顺序相同的方向连接环A和环B构成 />也可以按照与从左往右的读取顺序相反的方向连接环A和环B构成 />所述连接基团、取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化 合物的情况下才是被允许的。
除非另有规定,术语“卤代素”或“卤素”本身或作为另一取代基的一部分表示氟(F)、氯(Cl)、溴 (Br)或碘(I)原子。
除非另有规定,Cn-n+m或Cn-Cn+m包括n至n+m个碳的任何一种具体情况,例如C1-12包括C1、C2、 C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、和C12,也包括n至n+m中的任何一个范围,例如C1-12包括C1-3、C1-6、C1-9、C3-6、C3-9、C3-12、C6-9、C6-12、和C9-12等;同理,n元至n+m元表示环上原子数为n至n+m 个,例如3-12元环包括3元环、4元环、5元环、6元环、7元环、8元环、9元环、10元环、11元环、和 12元环,也包括n至n+m中的任何一个范围,例如3-12元环包括3-6元环、3-9元环、5-6元环、5-7元 环、6-7元环、6-8元环、和6-10元环等。
除非另有规定,术语“C1-3烷基”用于表示直链或支链的由1至3个碳原子组成的饱和碳氢基团。所述 C1-3烷基包括C1-2和C2-3烷基等;其可以是一价(如甲基)、二价(如亚甲基)或者多价(如次甲基)。C1-3烷基的实例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(包括n-丙基和异丙基)等。
除非另有规定,术语“C1-3烷氧基”表示通过一个氧原子连接到分子的其余部分的那些包含1至3个碳 原子的烷基基团。所述C1-3烷氧基包括C1-2、C2-3、C3和C2烷氧基等。C1-3烷氧基的实例包括但不限于甲 氧基、乙氧基、丙氧基(包括正丙氧基和异丙氧基)等。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备,包括下面列举的具体实施方 式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式,优选 的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的常规方法来确认结构,如果本发明涉及化合物的 绝对构型,则该绝对构型可以通过本领域常规技术手段予以确证。例如单晶X射线衍射法(SXRD),把培 养出的单晶用Bruker D8 venture衍射仪收集衍射强度数据,光源为CuKα辐射,扫描方式:扫描,收 集相关数据后,进一步采用直接法(Shelxs97)解析晶体结构,便可以确证绝对构型。
本发明所使用的溶剂可经市售获得。
化合物依据本领域常规命名原则或者使用软件命名,市售化合物采用供应商目录名称。
附图说明
图1.C57BL/6小鼠EAE体内药效评分图。
图2.本发明化合物抑制足掌厚度增长药效图。
图3.本发明化合物在小鼠足趾肿胀模型总评分。
技术效果
本发明化合物具有显著的BTK酶抑制活性、HPBMC细胞活性;本发明化合物具有优异的肝细胞体稳 定性和药代动力学性质;在小鼠EAE模型中展现出良好的药效。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行详细描述,但并不意味着对本发明任何不利限制。本文已经详细地描述 了本发明,其中也公开了其具体实施例方式,对本领域的技术人员而言,在不脱离本发明精神和范围的情 况下针对本发明具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。
参考例1.中间体A
合成路线:
步骤1:化合物A2的合成
将4-溴卞胺(10g,55.75mmol,1.20eq)加到化合物A1(7.62g,44.79mmol,1.00eq)和二氯甲烷(100ml)中, 再加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(34g,89.6mmol,2eq)和N,N-二异丙基乙胺 (17.4g,134.4mmol,3eq),然后在25℃反应2小时。反应液用二氯甲烷萃取(70mL*2),合并有机相,无水 硫酸钠干燥,过滤浓缩,对粗品进行过柱(石油醚:乙酸乙酯)纯化得化合物A2。LCMS:(ESI)m/z:337.9 [M+1]+。
步骤2:化合物A3的合成
将化合物A2(14g,41.4mmol,1.00eq)溶于1,4-二氯六环(200mL)和水(40ml)中,再依次加入联硼酸频 那醇酯(31.5g,124mmol,3.00eq),乙酸钾(12.19g,124mol,3eq)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(3.03g, 4.14mmol,0.1eq),100℃下加热回流反应5小时。将反应液浓缩,然后加入水(100mL),乙酸乙酯萃取(50 mL*3),合并有机相,无水硫酸钠干燥,过滤浓缩。对粗品进行过柱(石油醚:乙酸乙酯)纯化得化合物 A3。LCMS:(ESI)m/z:386.0[M+1]+。
步骤3:化合物A的合成
将化合物A3(2g,5.19mmol,1eq)溶于丙酮(30mL),然后加入高碘酸钠(3.33g,15.57mmol,863.04 μL,3eq),乙酸铵(1M,10.38mL,2eq),氮气置换两次,20℃搅拌19小时。向反应液体系加入5mL 4N HCl,搅拌10min。然后加入30ml水稀释,乙酸乙酯萃取(50mL*2),合并有机相,无水硫酸钠干燥过滤 浓缩。对粗品进行过柱(二氯甲烷:甲醇)纯化得化合物A。LCMS:(ESI)m/z:304.1[M+1]+。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ=8.78–8.75(m,1H),7.85-7.71(m,2H),7.52-7.48(m,1H),7.36-7.28(m,3H),7.19–7.16(m, 1H),4.53-4.49(m,2H),3.88(s,3H)。
实施例1
合成路线:
步骤1:化合物001-2的合成
将化合物001-1A(15g,74.90mmol,1eq)和化合物001-1(14.45g,74.90mmol,1eq)溶于N,N-二甲基甲 酰胺(100mL),加入三乙胺(11.37g,112.34mmol,15.64mL,1.5eq),20℃反应16小时。反应结束后,用 200mL水稀释反应液,用乙酸乙酯(200mL*3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥, 得到粗产品。粗产品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=1:1)纯化得到化合物001-2。LCMS:(ESI)m/z:357.1[M+1]+。 步骤2:化合物001-3的合成
将双(4-甲氧基苄基)胺(19.26g,74.83mmol,1eq)和化合物001-2(26.7g,74.83mmol,1eq)溶于异丙醇 (300mL),加入三乙胺(9.84g,97.28mmol,13.54mL,1.3eq),95℃反应16小时。将反应液浓缩,得到化 合物001-3。化合物001-3未经纯化直接投下一步。LCMS:(ESI)m/z:578.4[M+1]+。
步骤3:化合物001-4的合成
将化合物001-3(43g,74.44mmol,1eq)溶于醋酸(200mL)和甲醇(200mL),加入还原铁粉(49.88g,893.24 mmol,12eq),20℃反应16小时。将反应液浓缩,用饱和碳酸氢钠溶液调节pH=8,然后用二氯甲烷(200 mL*3)萃取,有机相用饱和碳酸钠溶液洗涤,无水硫酸钠干燥,得到化合物001-4。化合物001-4未经纯化 直接投下一步。LCMS:(ESI)m/z:548.4[M+1]+。
步骤4:化合物001-5的合成
将化合物001-4(23.7g,43.27mmol,1eq)和1-环已基-2-吗啉乙基碳二亚胺对甲苯磺酸盐(10.52g,64.91 mmol,1.5eq)溶于乙腈(230mL),80℃反应5小时。将反应液浓缩,得到粗产品。粗产品经柱层析(石油 醚:乙酸乙酯=1:5)纯化得到化合物001-5。LCMS:(ESI)m/z:574.4[M+1]+。
步骤5:化合物001-6的合成
将化合物001-5(1.5g,2.61mmol,1eq)溶于二氯甲烷(30mL)和三氟乙酸(30mL),50℃反应3小时。 将反应液浓缩,得到化合物001-6的三氟乙酸盐。化合物001-6的三氟乙酸盐未经纯化直接投下一步。 LCMS:(ESI)m/z:233.9[M+1]+。
步骤6:化合物001-7的合成
将化合物001-6的三氟乙酸盐(600mg,2.57mmol,1eq),二碳酸二叔丁酯(617.51mg,2.83mmol,650.01 μL,1.1eq)溶于1,4-二氧六环(15mL),将碳酸钠(954.17mg,9.00mmol,3.5eq)溶于水(15mL)后再加入到反 应液中,20℃反应5小时,加水,用二氯甲烷萃取(50mL*2),合并有机相,无水硫酸钠干燥,旋干溶剂, 硅胶柱纯化(二氯甲烷:甲醇=50:1-30:1),得到化合物001-7。LCMS:(ESI)m/z:333.9[M+1]+。
步骤7:化合物001-8的合成
将化合物化合物001-7(380mg,1.14mmol,1eq)溶于N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(7mL),40℃反应 8小时。将反应液过滤,得到化合物001-8。LCMS:(ESI)m/z:389.0[M+1]+。
步骤8:化合物001-9的合成
将化合物001-8(270mg,695.05μmol,1eq),醋酸铜(63.12mg,347.52μmol,0.5eq),三乙胺(281.33 mg,2.78mmol,386.97μL,4eq),2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(131.16mg,834.06μmol,1.2eq)溶于二氯甲烷 (20mL),通入氧气(22.24mg,695.05μmol,1eq),搅拌0.25小时,再加入化合物A(421.33mg,1.39mmol, 2eq),25℃反应25小时。将反应液过滤,滤液浓缩得到粗产品。粗产品经柱层析(二氯甲烷:甲醇=20:1~10:1) 纯化得到化合物001-9。LCMS:(ESI)m/z:646.1[M+1]+。
步骤9:化合物001-10的合成
将化合物001-9(490mg,758.84μmol,1eq)溶于1,4-二氧六环(18mL),再加入盐酸溶液(9.18g,65.46 mmol,9mL,26%含量,86.27eq),50℃反应72小时。碳酸钠调pH=8,二氯甲烷萃取(100mL*3),合并有 机相,无水硫酸钠干燥,过滤,旋干溶剂。得到化合物001-10。LCMS:(ESI)m/z:491.0[M+1]+。
步骤10:化合物001的合成
将化合物001-10(530mg,1.08mmol,1eq)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL),再加入2-(7-氮杂苯并三氮 唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(616.24mg,1.62mmol,1.5eq),N,N二异丙基乙胺(418.92mg,3.24 mmol,564.58μL,3eq),丙烯酸(62.29mg,864.37μmol,59.32μL,0.8eq),20℃反应6小时。将反应液浓 缩旋干得到粗产品。粗产品经机分(色谱柱:Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3μm;流动相:[水(0.05%氨水)- 乙腈];乙腈%:27%-57%,8min)纯化得到001。LCMS:(ESI)m/z:545.0[M+1]+。1H NMR(400MHz,CD3Cl)δppm 1.68(br s,1H)1.80-2.21(m,4H)2.63(br s,1H)3.08-3.57(m,1H)3.82-4.35(m,7H)4.79(br s,3H)5.74 (br s,1H)6.36(br s,1H)6.66(br s,2H)6.98(br s,1H)7.19(s,1H)7.41-7.70(m,3H)7.80-8.09(m,2H) 8.37(br s,1H)。
实施例2
合成路线:
步骤1:化合物002-1的合成
将化合物001-5(7.46g,34.86mmol,2.5eq)和002-1A(7.46g,34.86mmol,2.5eq)溶于二氯甲烷(80mL), 加入三乙胺(5.64g,55.78mmol,7.76mL,4eq),2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(2.41g,15.34mmol,1.1eq),最 后加入醋酸铜(1.27g,6.97mmol,0.5eq),氧气保护下25℃反应48小时。将反应液浓缩,得到粗产品。粗产 品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=5:1)纯化得到化合物002-1。LCMS:(ESI)m/z:742.4[M+1]+。
步骤2:化合物002-2的合成
将化合物002-1(0.17g,229.15μmol,1eq)溶于二氯甲烷(3mL),加入三氟乙酸(4.62g,40.52mmol,3 mL,176.82eq),50℃反应4小时。将反应液浓缩,得到化合物002-2的三氟乙酸盐。化合物002-2的三氟乙酸 盐未经纯化直接投下一步。LCMS:(ESI)m/z:402.2[M+1]+。
步骤3:化合物002的合成
在15℃下,向化合物002-2的三氟乙酸盐(0.046g,114.58μmol,1eq),(E)-4-氟丁-2-烯酸(11.93mg, 114.58μmol,1eq),三乙胺(23.19mg,229.16μmol,31.90μL,2eq),N,N-二甲基甲酰胺(2mL)的混合物 中加入三正丙基环磷酸酐(72.92mg,114.58μmol,68.15μL,50%含量,1eq),加完后搅拌1小时。将反应 液浓缩,得到粗产品。粗产品经制备HPLC分离(色谱柱:Phenomenex Gemini-NX 80*40mm*3μm;流动相: [水(0.05%氨水)-乙腈];乙腈%:30%-60%,8min)得到化合物002。LCMS:(ESI)m/z:488.2[M+1]+。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δppm 1.31(m,1H)1.62-1.81(m,1H)1.95-2.16(m,2H)2.57(br d,J=11.29Hz,1H)3.21- 3.27(m,1H)3.52(br s,1H)4.29(br s,1H)4.60(br s,1H)5.15(m,2H)6.68-7.04(m,3H)7.08-7.27(m,5 H)7.39-7.55(m,4H)7.79(m,1H)。
实施例3
合成路线:
步骤1:化合物003-1的合成
将化合物001-1(10g,51.82mmol,1eq),003-1A(9.65g,51.82mmol,4.39mL,1eq)用N,N-二甲基甲酰 胺(60mL)溶解,随后加入三乙胺(10.49g,103.63mmol,14.42mL,2eq),加完于25℃反应10小时,反 应完后向反应液中加水,用乙酸乙酯萃取,饱和氯化钠洗涤,合并有机相,无水硫酸钠干燥,得到粗品003- 1。LCMS:(ESI)m/z:342.9[M+1]+。
步骤2:化合物003-2的合成
将双(4-甲氧基苄基)胺(12.01g,46.68mmol,1eq)和化合物003-1(16.00g,46.68mmol,1eq)溶于异丙 醇(150mL),加入三乙胺(6.14g,60.68mmol,8.45mL,1.3eq),95℃反应5小时,反应完后将反应液浓缩 旋干,硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯=10:1~1:2)得到化合物003-2,化合物003-2未经纯化直接投 下一步。LCMS:(ESI)m/z:564.3[M+1]+。
步骤3:化合物003-3的合成
将化合物003-2(20.00g,35.48mmol,1eq)溶于甲醇(100mL),随后加入乙酸(100mL),再加入还原 铁粉(19.72g,354.84mmol,10eq),20℃反应16小时,反应完后用硅藻土抽滤,将反应液浓缩,用饱 和碳酸氢钠溶液调节pH=8,然后用二氯甲烷(100mL*3)萃取,有机相用饱和碳酸钠溶液洗涤,无水硫 酸钠干燥,得到粗品化合物003-3。LCMS:(ESI)m/z:534.3[M+1]+。
步骤4:化合物003-4的合成
将化合物003-3(10.00g,18.74mmol,1eq),N,N'-羰基二咪唑(9.12g,56.22mmol,3eq)溶于乙腈(100 mL),随后90℃回流8小时。反应完后,减压蒸馏除去溶剂,硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯=5:1~1: 2)纯化得到化合物003-4,LCMS:(ESI)m/z:560.1[M+1]+。
步骤5:化合物003-5的合成
将化合物003-4(4.8g,8.58mmol,1eq)溶于二氯甲烷(5mL),随后加入三氟乙酸(28.16g,246.97 mmol,18.29mL,28.80eq),加完50℃反应8小时,反应完后直接旋干,得到粗品化合物003-5的三氟乙酸 盐,未经纯化直接投下一步。LCMS:(ESI)m/z:219.9[M+H]+。
步骤6:化合物003-6的合成
将化合物003-5(1.8g,8.21mmol,1eq)的三氟乙酸盐溶于水(20mL)中,向其中加入碳酸钠(2.61g,24.63 mmol,3eq),搅拌,再向其中加入1,4-二氧六环(20mL),加完最后加入二碳酸二叔丁酯(1.79g,8.21mmol, 1.89mL,1eq),20℃搅拌2小时,反应完后减压除去溶剂,粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇=0%~10%) 纯化得到化合物003-6,LCMS:(ESI)m/z:319.9[M+H]+。
步骤7:化合物003-7的合成
将化合物003-6(2.30g,7.20mmol,1eq)溶于N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(15mL)中,随后加热至50℃ 反应2小时,反应完后冷却至室温有固体析出,抽滤,得到化合物003-7。LCMS:(ESI)m/z:375.0[M+H]+。
步骤8:化合物003-8的合成
将化合物003-7(1g,2.67mmol,1eq),002-1A(857.39mg,4.01mmol,1.5eq),醋酸铜(242.54mg,1.34 mmol,0.5eq),2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(503.97mg,3.20mmol,1.2eq),用二氯甲烷(10mL)溶解,随后加 入三乙胺(1.35g,13.35mmol,1.86mL,5eq),20℃搅拌16小时,反应完后减压除去溶剂,硅胶柱纯化(石 油醚:乙酸乙酯=10:1~1:2)得到化合物003-8,LCMS:(ESI)m/z:543.1[M+H]+。
步骤9:化合物003-9的合成
将化合物003-8(0.5g,921.44μmol,1eq)用1,4-二氧六环(3mL)溶解,随后加入盐酸(12M,3.84mL, 50eq),加完75℃反应48小时,反应完后减压除去溶剂,得到粗品化合物003-9的盐酸盐,LCMS:(ESI) m/z:387.9[M+H]+。
步骤10:化合物003的合成
将化合物003-9(600.00mg,1.55mmol,1eq)的盐酸盐,(E)-4-氟丁-2-烯酸(161.18mg,1.55mmol,1eq)溶 于N,N-二甲基甲酰胺(10mL),再加入三乙胺(313.41mg,3.10mmol,431.10μL,2eq),最后加入三正丙基 环磷酸酐(1.48g,4.65mmol,1.38mL,3eq),加完20℃搅拌2小时,反应完后减压除去溶剂,粗产品经柱层 析(二氯甲烷:甲醇=100:1~10:1)得到化合物003,化合物003经SFC分离,色谱柱:(s,s)WHELK-O1 (250mm*30mm,5μm);流动相:[0.1%氨水-甲醇];甲醇%:50%-50%,min,分离得到2个化合物,003A和003B。 化合物003A的分析和表征如下:
SFC分析方法:
柱子:(S,S)Whelk-01 100×4.6mm I.D.,5.0μm;流动相:A(CO2)和B(甲醇,含0.05%二乙胺);梯度: B%=60%;流速:2.5mL/min;波长:220nm;压力:100bar,Rt=3.96min。
LCMS:(ESI)m/z:473.9[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 2.21-2.41(m,1H)2.52-2.74(m,1H)3.49 -3.72(m,1H)3.92-4.00(m,2H)4.08(br d,J=5.27Hz,2H)4.94-5.11(m,2H)6.27-6.44(m,1H)6.49(br dd,J=11.04,5.52Hz,1H)6.84-6.99(m,1H)7.04(brt,J=8.53Hz,4H)7.12(br t,J=7.28Hz,1H)7.27-7.40 (m,4H)7.79(br dd,J=9.03,5.52Hz,1H)。
化合物003B的分析和表征如下:
SFC分析方法:
柱子:(S,S)Whelk-01 100×4.6mm I.D.,5.0μm;流动相:A(CO2)和B(甲醇,含0.05%二乙胺);梯度: B%=60%;流速:2.5mL/min;波长:220nm;压力:100bar,Rt=4.88min。
LCMS:(ESI)m/z:473.9[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 2.21-2.41(m,1H)2.52-2.74(m,1H)3.49 -3.72(m,1H)3.92-4.00(m,2H)4.08(br d,J=5.27Hz,2H)4.94-5.11(m,2H)6.27-6.44(m,1H)6.49(br dd,J=11.04,5.52Hz,1H)6.84-6.99(m,1H)7.04(brt,J=8.53Hz,4H)7.12(br t,J=7.28Hz,1H)7.27-7.40 (m,4H)7.79(br dd,J=9.03,5.52Hz,1H)。
实施例4
合成路线:
步骤1:化合物004-2的合成
将化合物004-1(1g,7.04mmol,1eq),对氟硝基(1.19g,8.44mmol,895.73μL,1.2eq)用乙腈(30mL)溶 解,加入碳酸钾(2.92g,21.11mmol,3eq),90℃反应16小时,反应结束后抽滤,滤液旋干,粗品用硅胶 柱纯化(石油醚:乙酸乙酯=10:1~1:1)得到化合物004-2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 3.9-4.0(m, 3H)6.7-6.8(m,1H)6.9-7.0(m,1H)7.0-7.1(m,2H)7.1-7.2(m,1H)8.2-8.3(m,2H)。
步骤2:化合物004-3的合成
将化合物004-2(1.8g,6.84mmol,1eq)用乙醇(10mL)溶解,随后加入盐酸(2M,2mL,5.85e-1eq), 铁粉(1.91g,34.19mmol,5eq),90℃反应2小时,反应完后抽滤,滤液旋干,得到粗品化合物004-3,直接 投下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 3.8(s,3H)6.4-6.5(m,1H)6.5-6.7(m,3H)6.8(br d,J=8.8Hz, 2H)6.8-6.9(m,1H)。
步骤3:化合物004-4的合成
将004-3(1.09g,4.67mmol,1eq)溶于盐酸(2.30g,23.37mmol,2.26mL,37%含量,5eq)。在0-5℃搅 拌30分钟,向反应溶液中加入5mL的亚硝酸钠溶液(1M),继续搅拌30分钟,然后加入碘化钾(3.88g, 23.37mmol,5eq),在25℃下继续搅拌30分钟,反应完后,用乙酸乙酯萃取3次,每次50mL,合并有机 相,用10%的亚硫酸钠溶液(20mL)洗涤,无水硫酸钠干燥,旋干,粗品经
柱层析(石油醚)纯化得到化合物004-4。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 3.9(s,3H)6.7(ddd,J=8.3,7.0, 1.5Hz,1H)6.8-6.8(m,2H)6.8-6.8(m,1H)7.0-7.1(m,1H)7.6-7.6(m,2H)。
步骤4:化合物004-5的合成
将004-4(0.9g,2.62mmol,1eq),联硼酸频那醇酯(996.21mg,3.92mmol,1.5eq)溶于1,4-二氧六环(15 mL),随后加入碳酸钾(1.08g,7.85mmol,3eq),[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(382.74mg,523.07μmol, 0.2eq),氮气保护,100℃反应5小时,反应完后直接旋干,粗品经柱层析(石油醚100%)纯化得到004- 5。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 1.23-1.28(d,J=3.5Hz,12H)3.8(d,J=3.8Hz,3H)6.5-6.6(m,1H)6.6 -6.8(m,1H)6.8-7.0(m,3H)7.6-7.8(m,2H)。
步骤5:化合物004-6的合成
将004-5(0.33g,958.79μmol,1eq)溶于丙酮(8mL)和水(2mL)溶解,加入高碘酸钠(615.23mg,2.88 mmol,159.39μL,3eq)和醋酸铵(147.81mg,1.92mmol,2eq),反应完后抽滤,除去固体杂质,滤液减压浓 缩,得到粗品化合物004-6。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm4.0-4.4(m,3H)6.4-7.1(m,5H)7.6-8.1(m, 2H)。
步骤6:化合物004-7的合成
将醋酸铜(116.89mg,643.56μmol,0.5eq),2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(242.88mg,1.54mmol,1.2eq)溶 于二氯甲烷(4mL)中,加入三乙胺(520.98mg,5.15mmol,716.61μL,4eq),001-8(0.5g,1.29mmol,1eq)和 004-6(505.92mg,1.93mmol,1.5eq),氧气保护,25℃搅拌8小时,反应完后将反应液旋干,粗品经柱层 析纯化(乙酸乙酯:石油醚=10%~100%)得到化合物004-7。LCMS:(ESI)m/z:605.1[M+1]+。
步骤7:化合物004-8的合成
将004-7(0.5g,826.90μmol,1eq)溶于1,4-二氧六环(2mL),加入盐酸(12M,68.91μL,1eq),70℃搅 拌56小时,反应完后将反应液冷却至室温,旋干,得到化合物004-8的盐酸盐。LCMS:(ESI)m/z:449.9 [M+1]+。
步骤8:化合物004的合成
将化合物004-8(100mg,222.48μmol,1eq)的盐酸盐,(E)-4-氟丁-2-烯酸(23.16mg,222.48μmol,1eq), 溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL),加入三乙胺(67.54mg,667.44μmol,92.90μL,3eq),三正丙基环磷酸酐 (283.16mg,444.96μmol,264.63μL,2eq)。25℃搅拌4小时,反应完后将反应液浓缩,得到粗产品,粗品制 备分离:色谱柱:Phenomenex C1880*40mm*3μm;流动相:[水(氨水)-乙腈];乙腈%:38%-68%,8min得到化合 物004。LCMS:(ESI)m/z:536.1[M+1]+。
实施例5
合成路线:
步骤1:化合物005-2的合成
将化合物005-1(3.13g,24.10mmol,2eq),对氟硝基苯(1.7g,12.05mmol,1.28mL,1eq)溶于乙腈(30 mL),加入碳酸钾(5.00g,36.14mmol,3eq),90℃反应16小时,反应完后过滤,旋干溶剂,粗品用硅胶柱 纯化(展开剂:石油醚)得到化合物005-2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.9-7.0(m,4H)7.1-7.2(m, 1H)8.1-8.2(m,2H)。
步骤2:化合物005-3的合成
将化合物005-2(10.36g,41.24mmol,1eq)溶于乙醇(60mL),加入盐酸(2M,8mL,3.88e-1eq)和铁粉 (11.52g,206.22mmol,5eq),90℃反应2小时,反应完后过滤,滤液直接旋干,得到粗品化合物005-3。 LCMS:(ESI)m/z:221.8[M+1]+;1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm2.9-4.0(m,2H)6.6-6.7(m,2H)6.8-6.9 (m,2H)6.9-7.0(m,2H)7.1-7.2(m,1H)。
步骤3:化合物005-4的合成
将化合物005-3(1g,4.52mmol,1eq),过氧化二苯甲酰(54.75mg,226.04μmol,0.05eq),联硼酸频那 醇酯(1.38g,5.42mmol,1.2eq)溶于乙腈(10mL),在0-5℃搅拌5分钟,0℃条件下加入亚硝酸叔丁酯(699.27 mg,6.78mmol,806.54μL,1.5eq),25℃下继续搅拌7小时,反应完后旋干,粗品经柱层析(展开剂:石油 醚)得到化合物005-4。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 1.3(s,12H)6.8(d,J=8.5Hz,2H)6.9-7.0(m,2H) 7.1-7.1(m,1H)7.7(d,J=8.5Hz,2H)。
步骤4:化合物005-5的合成
将化合物005-4(4g,12.04mmol,1eq)溶于丙酮(80mL)和水(20mL),加入高碘酸钠(7.73g,36.13mmol, 2.00mL,3eq)和醋酸铵(1.86g,24.09mmol,2eq),25℃反应24小时,反应完后旋走丙酮,水相用稀盐酸 调节pH至5-6,用乙酸乙酯萃取3次,每次50mL,饱和氯化钠洗涤,合并有机相,无水硫酸钠干燥,旋 干,粗品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=5:1~1:2)纯化得到化合物005-5。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ ppm 6.9-7.0(m,4H)7.1-7.2(m,1H)8.1(d,J=8.5Hz,2H)。
步骤5:化合物005-6的合成
将醋酸铜(58.45mg,321.78μmol,0.5eq),2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(121.44mg,772.27μmol,1.2eq) 溶于二氯甲烷(4mL),再加入三乙胺(260.49mg,2.57mmol,358.31μL,4eq),化合物001-8(0.25g,643.56 μmol,1eq)和化合物005-5(241.34mg,965.34μmol,1.5eq),氧气保护,25℃搅拌8小时,反应完后直接 旋干溶剂,粗品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=10%~100%)纯化得到化合物005-6。LCMS:(ESI) m/z:593.1[M+1]+。
步骤6:化合物005-7的合成
将化合物005-6(0.4g,674.95μmol,1eq)溶于1,4-二氧六环(2mL)中,加入盐酸(12M,2mL,35.56 eq),70℃搅拌56小时,反应完后直接旋干溶剂,得到化合物005-7的盐酸盐。LCMS:(ESI)m/z:438.0[M+1]+。
步骤7:化合物005的合成
将化合物005-7(100mg,228.60μmol,1eq)的盐酸盐,(E)-4-氟丁-2-烯酸(23.79mg,228.60μmol,1eq) 溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL),加入三乙胺(69.40mg,685.81μmol,95.46μL,3eq),三正丙基环磷酸酐 (290.95mg,457.20μmol,271.91μL,50%含量,2eq),25℃搅拌4小时,反应完后将反应液浓缩,粗产经制 备分离:色谱柱:Phenomenex C1880*40mm*3μm;流动相:[水(氨水)-乙腈];乙腈%:38%-68%,8min,得到化 合物005。LCMS:(ESI)m/z:524.1[M+1]+;1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 1.82-2.06(m,3H)2.33-2.70 (m,1H)2.92-3.19(m,0.5H)3.49(s,0.5H)3.74-3.93(m,1H)4.02-4.21(m,2H)4.61-4.81(m,1H)4.90- 4.99(m,1H)5.03-5.13(m,1H)6.44-6.60(m,2H)6.78-6.92(m,1H)6.95-7.00(m,2H)7.02(br d,J=8.5 Hz,2H)7.10-7.17(m,1H)7.32(br d,J=8.8Hz,2H)7.72-7.89(m,1H)。
实施例6
合成路线:
步骤1:化合物006-2的合成
将化合物006-1(2g,9.09mmol,1eq),2-氟-5-溴吡啶(1.60g,9.09mmol,935.29μL,1eq)溶于乙腈(20 mL),加入碳酸钾(2.51g,18.18mmol,2eq),90℃反应10小时,反应完后抽滤,滤液加水,用乙酸乙酯萃 取2次,每次50mL,饱和氯化钠洗涤,合并有机相,无水硫酸钠干燥,旋干,粗品经柱层析(展开剂:石 油醚)纯化得到化合物006-2。LCMS:(ESI)m/z:375.8[M+1]+。
步骤2:化合物006-3的合成
将化合物006-2(2.4g,6.38mmol,1eq)溶于丙酮(20mL)和水(5mL),加入高碘酸钠(4.10g,19.15mmol, 1.06mL,3eq)和醋酸铵(983.90mg,12.76mmol,2eq),25℃反应24小时,反应完后旋走丙酮,水相用稀盐 酸调节pH至5-6,用乙酸乙酯萃取3次,每次50mL,饱和氯化钠洗涤,合并有机相,无水硫酸钠干燥, 旋干,粗品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=5:1~1:2)纯化得到化合物006-3。LCMS:(ESI)m/z:293.8[M+1]+。 步骤3:化合物006-4的合成
将醋酸铜(11.69mg,64.36μmol,0.5eq),2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(24.29mg,154.45μmol,1.2eq)溶于 二氯甲烷(2mL)中,加入三乙胺(52.10mg,514.85μmol,71.66μL,4eq),006-3(0.05g,128.71μmol,1eq) 和001-8(56.74mg,193.07μmol,1.5eq),25℃搅拌8小时,反应完后直接旋干溶剂,粗品经柱层析纯化(石 油醚:乙酸乙酯=10:1~1:2)得到化合物006-4。LCMS:(ESI)m/z:636.0[M+1]+。
步骤4:化合物006-5的合成
将化合物006-4(0.33g,518.43μmol,1eq)溶于1,4-二氧六环(2mL),加入盐酸(12M,4mL,92.59eq), 70℃反应50小时,反应完后直接旋干,得到化合物006-5的盐酸盐。LCMS:(ESI)m/z:480.9[M+1]+。
步骤5:化合物006的合成
将化合物006-5(100mg,207.75μmol,1eq)的盐酸盐,(E)-4-氟丁-2-烯酸(21.62mg,207.75μmol,1eq), 溶于N,N-二甲基甲酰胺(1mL),随后加入三乙胺(3.07mg,623.25μmol,86.75μL,3eq),三正丙基环磷酸酐 (264.41mg,415.50μmol,247.11μL,2eq),25℃搅拌4小时,反应完后将反应液浓缩,粗品经制备分离,色 谱柱:Phenomenex C18 80*40mm*3μm;流动相:[水(氨水)-乙腈];乙腈%:36%-66%,8min,得到化合物006。 LCMS:(ESI)m/z:567.0[M+1]+;1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 1.57-1.78(m,1H)1.94-2.14(m, 2H)2.47-2.63(m,1H)3.49-3.58(m,0.5H)3.92-4.00(m,0.5H)4.16-4.41(m,2H)4.58-4.77(m,1H)4.89 -4.96(m,1H)4.98-5.09(m,1H)5.09-5.21(m,1H)6.70-6.81(m,1H)6.83-6.92(m,1H)6.93-7.01(m,1 H)7.10(d,J=8.8Hz,1H)7.36(d,J=8.8Hz,2H)7.55(br d,J=8.0Hz,2H)7.81(d,J=6.0Hz,1H)8.04(dd,J=8.8, 2.5Hz,1H)8.21-8.27(m,1H)。
实施例7
合成路线:
步骤1:化合物007-2的合成
将化合物007-1(4g,23.12mmol,1eq),5-氯-2-氟吡啶(3.04g,23.12mmol,1eq)溶于N,N-二甲基甲酰 胺(40mL),加入碳酸铯(15.07g,46.24mmol,2eq),110℃反应4小时,反应完全后抽滤,除去固体杂质, 滤液用水洗涤,并用乙酸乙酯萃取2次,每次50mL,合并有机相,用无水硫酸钠干燥,粗品经柱层析(石 油醚:乙酸乙酯=10:1)纯化得到化合物007-2。LCMS:(ESI)m/z:283.7[M+1]+。
步骤2:化合物007-3的合成
将化合物007-2(0.3g,1.54mmol,1eq)用四氢呋喃(18mL)溶解,-78℃下加入正丁基锂(2.5M,632μL, 1.5eq),加完搅拌1小时,随后加入硼酸三异丙酯(0.39g,2.18mmol,2.42mL,2eq),反应1小时,反应完 后加水淬灭反应,将四氢呋喃旋去,水相用稀盐酸调节pH至5-6,用二氯甲烷萃取3次,每次50mL,合 并有机相,无水硫酸钠干燥,旋干,粗品经硅胶柱(石油醚:乙酸乙酯=10:1~1:2)纯化得到化合物007-3。 LCMS:(ESI)m/z:249.8[M+1]+。
步骤3:化合物007-4的合成
将醋酸铜(36.41mg,200.43μmol,0.5eq),2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(75.65mg,481.04μmol,1.2eq) 溶于二氯甲烷(2mL),加入三乙胺(162.25mg,1.60mmol,223.18μL,4eq),007-3(155.72mg,400.87μmol, 1eq)和001-8(0.15g,601.30μmol,1.5eq),氧气保护,25℃搅拌8小时,反应完后直接旋干溶剂,粗品经 柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯=10:1~1:2)得到化合物007-4。LCMS:(ESI)m/z:592.0[M+1]+。
步骤4:化合物007-5的合成
将化合物007-4(80mg,135.12μmol,1eq)溶于1,4-二氧六环(2mL)中,加入盐酸(12M,1.04mL,92.59 eq),70℃搅拌50小时,反应完后直接旋干得到粗品化合物007-5的盐酸盐。LCMS:(ESI)m/z:436.9[M+1]+。
步骤5:化合物007的合成
将化合物007-5(60.00mg,137.33μmol,1eq)的盐酸盐,(E)-4-氟丁-2-烯酸(14.29mg,137.33μmol,1 eq),溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL),随后加入三乙胺(41.69mg,412.00μmol,57.35μL,3eq),三正丙基 环磷酸酐(174.79mg,274.67μmol,163.35μL,50%含量,2eq),25℃搅拌4小时,反应完后将反应液浓缩, 粗品经制备分离:色谱柱:PhenomenexC18 80*40mm*3μm;流动相:[水(氨水)-乙腈];乙腈%:35%-65%,8min 得到化合物007。LCMS:(ESI)m/z:523.1[M+1]+。
实施例8
合成路线:
步骤1:化合物008-1的合成
将化合物007-1(4g,23.12mmol,1eq),2,5-二氟吡啶(2.66g,23.12mmol,1eq)溶于N,N-二甲基甲酰 胺(40mL),加入碳酸铯(15.07g,46.24mmol,2eq),80℃反应4小时,反应完全后抽滤除去固体,滤液 用水洗涤,并用乙酸乙酯萃取2次,每次50mL,合并有机相,用无水硫酸钠干燥,粗品经柱层析(石油 醚:乙酸乙酯=10:1~5:1)纯化得到化合物008-1。LCMS:(ESI)m/z:267.6[M+1]+;1H NMR(400MHz,CDCl3) δppm 6.95(dd,J=9.03,3.51Hz,1H)7.03(d,J=9.03Hz,2H)7.47(ddd,J=9.10,7.34,3.14Hz,1H)7.52(d, J=8.78Hz,2H)8.04(d,J=3.26Hz,1H)。
步骤2:化合物008-2的合成
将化合物008-1(4g,14.92mmol,1eq),联硼酸频那醇酯(4.93g,19.40mmol,1.3eq),[1,1'-双(二苯基 膦)二茂铁]二氯化钯(2.18g,2.98mmol,0.2eq)用1,4-二氧六环(40mL)溶解,加入碳酸钾(6.19g,44.76mmol, 3eq),氮气保护,100℃反应8小时。反应完后直接旋干,粗品经柱层析(石油醚100%~石油醚:乙酸乙 酯=5:1)纯化得到化合物008-2。LCMS:(ESI)m/z:315.9[M+1]+。
步骤3:化合物008-3的合成
将化合物008-2(5.4g,17.13mmol,1eq)用丙酮(80mL)和水(20mL)溶解,加入高碘酸钠(10.99g,51.40 mmol,2.85mL,3eq)和醋酸铵(2.64g,34.27mmol,2eq),25℃反应24小时,反应完后旋去丙酮,水相用 稀盐酸调节pH至5-6,用乙酸乙酯萃取2次,每次50mL,饱和氯化钠洗涤,合并有机相,无水硫酸钠干 燥,粗品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=5:1~1:2)纯化得到化合物008-3。LCMS:(ESI)m/z:233.8[M+1]+。
步骤4:化合物008-4的合成
将醋酸铜(58.45mg,321.78μmol,0.5eq),2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(121.44mg,772.27μmol,1.2eq) 溶于二氯甲烷(2mL),再加入三乙胺(260.49mg,2.57mmol,358.31μL,4eq),008-3(0.25g,643.56μmol, 1eq)和001-8(224.93mg,965.34μmol,1.5eq),氧气保护,25℃搅拌8小时,反应完后直接旋干溶剂,粗 品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=10:1~1:2)纯化得到化合物008-4。LCMS:(ESI)m/z:576.1[M+1]+。
步骤5:化合物008-5的合成
将化合物008-4(0.18g,312.70μmol,1eq)溶于1,4-二氧六环(2mL),加入盐酸(12M,26.06μL,1eq), 70℃搅拌50小时,反应完后直接旋干溶剂,得到粗品化合物008-5的盐酸盐。LCMS:(ESI)m/z:421.0[M+1]+。
步骤6:化合物008的合成
将化合物008-5(100mg,237.85μmol,1eq)的盐酸盐,(E)-4-氟丁-2-烯酸(24.75mg,237.85μmol,1eq) 溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL),再加入三乙胺(72.20mg,713.54μmol,99.32μL,3eq),三正丙基环磷酸 酐(302.71mg,475.69μmol,282.91μL,50%含量,2eq),25℃搅拌4小时,反应完后将反应液浓缩,粗品 经制备分离,色谱柱:Xtimate C18150*40mm*5μm;流动相:[水(甲酸)-乙腈];乙腈%:22%-62%,8min,得到化 合物008。LCMS:(ESI)m/z:507.0[M+1]+。
实施例9
合成路线:
步骤1:化合物009-2的合成
将醋酸铜(475.49mg,2.62mmol,0.5eq)溶于二氯甲烷(20mL),加入1克4A分子筛,三乙胺(2.12g, 20.94mmol,2.91mL,4eq),再加入化合物009-1(1.00g,5.24mmol,1eq),苯硼(957.57mg,7.85mmol,1.5 eq),通入氧气,20℃搅拌8小时,反应完后未处理,直接旋干,粗品经柱层析(石油醚)得到化合物009- 2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.92-7.00(t,J=8.7Hz,1H)7.01-7.04(d,J=8.3Hz,2H)7.1-7.2(m,1H) 7.2-7.3(m,1H)7.3-7.4(m,3H)。
步骤2:化合物009-3的合成
将化合物009-2(1.20g,4.49mmol,1eq),联硼酸频那醇酯(1.48g,5.84mmol,1.3eq),[1,1'-双(二苯基膦) 二茂铁]二氯化钯(657.49mg,898.56μmol,0.2eq)溶于1,4-二氧六环(24mL)溶解,再加入碳酸钾(1.74g, 12.58mmol,2.8eq),氮气保护,100℃反应8小时,反应完后直接旋干,粗品经柱层析(石油醚100%~石 油醚:乙酸乙酯=5:1)纯化得到化合物009-3。
步骤3:化合物009-4的合成
将化合物009-3(0.6g,1.91mmol,1eq)溶于丙酮(20mL)和水(5mL),加入高碘酸钠(1.23g,5.73mmol, 317.49μL,3eq)和醋酸铵(294.42mg,3.82mmol,2eq),25℃反应24小时,反应完后旋走丙酮,水相用稀 盐酸调节pH至5-6,用乙酸乙酯萃取,饱和氯化钠洗涤,合并有机相,无水硫酸钠干燥,粗品经柱层析(石 油醚:乙酸乙酯=5:1~1:2)纯化得到化合物009-4。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.07-7.13(m,3H) 7.17-7.24(m,1H)7.38-7.45(m,2H)7.89-8.00(m,2H)。
步骤4:化合物009-5的合成
将2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(64.77mg,411.88μmol,1.2eq),醋酸铜(31.17mg,171.62μmol,0.5eq) 溶于二氯甲烷(2mL),随后加入三乙胺(138.93mg,1.37mmol,191.10μL,4eq),化合物001-8(0.20g,514.85 μmol,1.50eq),化合物009-4(119.45mg,514.85μmol,1.5eq),通入氧气,25℃搅拌12小时,反应完后将 反应液浓缩,粗品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=10%~0.5%)纯化得到化合物009-5。LCMS:(ESI)m/z: 575.6[M+1]+。
步骤5:化合物009-6的合成
将化合物009-5(0.15g,261.03μmol,1eq)溶于1,4-二氧六环(2mL),再加入盐酸(12M,21.75μL,1 eq),70℃搅拌50小时。反应完后旋干溶剂,得到粗品化合物009-6的盐酸盐。LCMS:(ESI)m/z:419.9[M+1]+
步骤6:化合物009的合成
将化合物009-6(99.76mg,237.85μmol,1eq)的盐酸盐,(E)-4-氟丁-2-烯酸(24.75mg,237.85μmol,1eq) 溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中,随后加入三乙胺(72.20mg,713.54μmol,99.32μL,3eq),三正丙基环 磷酸酐(302.71mg,475.69μmol,282.91μL,2eq),25℃搅拌4小时,反应完后将反应液浓缩,粗品经制备 分离,色谱柱:Xtimate C18 150*40mm*5μm;流动相:[水(甲酸)-乙腈];乙腈%:26%-66%,8min,得到化合物 009。LCMS:(ESI)m/z:506.2[M+1]+;1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 1.59-1.81(m,1H)1.96-2.09(m,1 H)2.21(br d,J=3.8Hz,1H)2.56-2.74(m,1H)3.11-3.27(m,0.5H)3.43-3.55(m,0.5H)3.82-4.00(m,1H) 4.09-4.16(m,2H)4.77-4.90(m,1H)4.99-5.10(m,1H)5.11-5.22(m,1H)6.53-6.66(m,1H)6.68-6.81 (m,1H)6.89-7.03(m,1H)7.05-7.26(m,6H)7.50(br d,J=3.0Hz,3H)。
实施例10
合成路线:
步骤1:化合物010-2的合成
将醋酸铜(485.55mg,2.67mmol,0.5eq)溶于二氯甲烷(20mL),加入1克4A分子筛,三乙胺(2.16g, 21.39mmol,2.98mL,4eq),再加入010-1(1.00g,5.35mmol,1eq),苯硼酸(977.87mg,8.02mmol,1.5eq), 通入氧气,20℃搅拌10小时。反应完后浓缩,粗品经柱层析纯化(石油醚)得到化合物010-2。
步骤2:化合物010-3的合成
将化合物010-2(2.86g,10.86mmol,1eq),联硼酸频那醇酯(3.58g,14.11mmol,1.3eq),[1,1'-双(二苯 基膦)二茂铁]二氯化钯(1.59g,2.17mmol,0.2eq)加入50mL单口瓶,用1,4-二氧六环(40mL)溶解,随后 加入碳酸钾(4.50g,32.57mmol,3eq),氮气保护,100℃反应8小时。反应完后直接浓缩,粗品经柱层析 (石油醚100%~石油醚:乙酸乙酯=5:1)纯化得到化合物010-3。
步骤3:化合物010-4的合成
将化合物010-3(1.9g,6.13mmol,1eq)加入50mL单口瓶中,随后用丙酮(15mL)和水(3mL)溶解, 再加入高碘酸钠(3.93g,18.38mmol,1.02mL,3eq)和醋酸铵(944.26mg,12.25mmol,2eq),25℃反应24 小时。反应完后,旋走丙酮,水相用稀盐酸调节pH至5-6,用乙酸乙酯萃取,饱和氯化钠洗涤,合并有机 相,无水硫酸钠干燥,旋干,粗品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=5:1~1:2)纯化得到化合物010-4。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 2.31(s,3H)6.85-6.90(m,1H)6.93(dd,J=7.8,1.0Hz,2H)7.01-7.08(m,1 H)7.24-7.32(m,2H)7.92-7.97(m,1H)8.00-8.05(m,1H)。
步骤4:化合物010-5的合成
将化合物001-8(0.2g,514.85μmol,1.50eq),010-4(117.41mg,514.85μmol,1.5eq),2,2,6,6-四甲基哌 啶氧化物(64.77mg,411.88μmol,1.2eq),醋酸铜(31.17mg,171.62μmol,0.5eq)溶于二氯甲烷(10mL), 随后加入三乙胺(138.93mg,1.37mmol,191.10μL,4eq),通入氧气,25℃搅拌15小时。反应完后旋干溶 剂,粗品经硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯=10:1~1:2)得到化合物010-5。LCMS:(ESI)m/z:571.1[M+1]+。
步骤5:化合物010-6的合成
将化合物010-5(0.15g,262.84μmol,1eq)溶于1,4-二氧六环(2mL),随后加入盐酸(12M,21.90μL, 1eq),70℃搅拌50小时,反应完以后直接旋干,得到粗品化合物010-6的盐酸盐。LCMS:(ESI)m/z: 416.0[M+1]+
步骤6:化合物010的合成
将化合物010-6(98.82mg,237.85μmol,1eq)的盐酸盐,(E)-4-氟丁-2-烯酸(24.75mg,237.85μmol,1eq) 溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中,随后加入三乙胺(72.20mg,713.54μmol,99.32μL,3eq),三正丙基 环磷酸酐(302.71mg,475.69μmol,282.91μL,2eq)。25℃搅拌4小时后,将反应液浓缩,粗品经制备分离, 色谱柱:Xtimate C18 100*30mm*3μm;流动相:[水(甲酸)-乙腈];乙腈%:10%-50%,8min,得到化合物010。 LCMS:(ESI)m/z:502.2[M+1]+;1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 1.48-1.70(m,1H)1.88-1.96(m,1H)2.04 (m,1H)2.29(s,3H)2.47-2.70(m,1H)3.00-3.17(m,0.5H)3.30-3.48(m,0.5H)3.53-3.74(m,1H)3.99- 4.10(m,2H)4.64-4.83(m,1H)4.89-5.16(m,2H)6.42-6.61(m,1H)6.62-6.74(m,1H)6.79-6.92(m,2 H)6.96(br d,J=8.0Hz,2H)7.07-7.16(m,2H)7.23-7.39(m,4H)。
实施例11
合成路线:
步骤1:化合物011-2的合成
将醋酸铜(2.19g,12.05mmol,0.5eq)加入到二氯甲烷(40mL),再加入1克4A分子筛,三乙胺(9.76 g,96.41mmol,13.42mL,4eq),随后加入011-1(5g,24.10mmol,1eq),苯硼酸(4.41g,36.15mmol,1.5eq), 氧气保护,20℃搅拌8小时。反应完后将反应液浓缩,粗品经柱层析纯化(石油醚)得到化合物011-2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 6.97(d,J=8.0Hz,1H)7.00-7.05(m,2H)7.11-7.18(m,1H)7.34-7.41(m,2 H)8.00-8.06(m,1H)8.09-8.14(m,1H)。
步骤2:化合物011-3的合成
将化合物011-2(3.2g,11.29mmol,1eq),联硼酸频那醇酯(3.73g,14.67mmol,1.3eq),[1,1'-双(二苯基 膦)二茂铁]二氯化钯(1.65g,2.26mmol,0.2eq)加入50mL单口瓶,加完用1,4-二氧六环(40mL)溶解,随 后加入碳酸钾(4.68g,33.86mmol,3eq),氮气保护,100℃反应8小时。反应完后直接旋干反应液,粗品 经柱层析(石油醚100%~石油醚:乙酸乙酯=5:1)纯化得到化合物011-3。
步骤3:化合物011-4的合成
将化合物011-3(2g,6.05mmol,1eq)加入50mL单口瓶中,随后用丙酮(15mL)和水(3mL)溶解, 再加入高碘酸钠(3.88g,18.15mmol,1.01mL,3eq)和醋酸铵(932.57mg,12.10mmol,2eq),加完25℃反 应24小时。旋走丙酮,水相用稀盐酸调节pH至5-6,用乙酸乙酯萃取,饱和氯化钠洗涤,合并有机相, 无水硫酸钠干燥,粗品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=5:1~1:2)分离得到化合物011-4。1H NMR(400MHz, CDCl3)δppm 6.88-6.95(m,1H)6.97-7.01(m,2H)7.08-7.15(m,1H)7.29-7.35(m,2H)7.89-7.96(m,1 H)8.13-8.20(m,1H)。
步骤4:化合物011-5的合成
将化合物001-8(0.2g,514.85μmol,1.50eq),011-4(127.92mg,514.85μmol,1.5eq),2,2,6,6-四甲基哌 啶氧化物(64.77mg,411.88μmol,1.2eq),醋酸铜(31.17mg,171.62μmol,0.5eq)溶于二氯甲烷(4mL),随 后加入三乙胺(138.93mg,1.37mmol,191.10μL,4eq),加完通入氧气,25℃搅拌15小时。反应完以后, 旋干溶剂,粗品经柱层析(石油醚:乙酸乙酯=10:1~1:2)分离得到化合物011-5。
步骤5:化合物011-6的合成
将化合物011-5(0.15g,253.76μmol,1eq)溶于1,4-二氧六环(2mL),随后加入HCl(12M,21.90μL, 1eq),加完70℃搅拌50时,反应完以后直接旋干溶剂,得到粗品化合物011-6的盐酸盐。LCMS:(ESI)m/z: 435.9[M+1]+。
步骤6:化合物011的合成
将化合物011-6(0.1g,229.41μmol,1eq)的盐酸盐,(E)-4-氟丁-2-烯酸(23.88mg,229.41μmol,1eq)溶 于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中,随后加入三乙胺(69.64mg,688.22μmol,95.79μL,3eq),三正丙基环磷 酸酐(291.97mg,458.82μmol,272.87μL,50%含量,2eq),25℃搅拌12小时。反应完后将反应液浓缩,粗 品经制备分离,色谱柱:Xtimate C18150*40mm*5μm;流动相:[水(甲酸)-乙腈];乙腈%:26%-66%,8min,得 到化合物011。LCMS:(ESI)m/z:522.0[M+1]+;1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 1.26-1.41(m,1H)1.55- 1.80(m,1H)1.92-2.22(m,2H)2.53-2.76(m,1H)3.09-3.30(m,0.5H)3.42-3.55(m,0.5H)4.09-4.20(m, 2H)4.77-4.94(m,1H)5.00-5.20(m,2H)6.49-6.72(m,1H)6.72-6.86(m,1H)6.88-7.00(m,1H)7.04 (d,J=8.8Hz,1H)7.11(d,J=7.8Hz,2H)7.22-7.31(m,3H)7.40-7.49(m,2H)7.59-7.65(m,1H)。
实验例1.BTK激酶实验
实验材料:
BTK激酶,PolyE4Y1底物,Kinase assay buffer III购自Signalchem;ADP-GloKinase Assay购自Promega; Nivo多标记分析仪(PerkinElmer)。
实验方法:
1X buffer配制(现配现用):将Kinase assay buffer III用ddH2O稀释成1Xassay buffer备用。
将待测化合物用100%DMSO稀释到10μM作为第一个浓度,然后再用排枪进行5倍稀释至第8个浓 度,即从10μM稀释至0.128nM。
用1X buffer将待测化合物各梯度稀释成DMSO为5%的工作液,取1μL/孔加到对应孔中,设置双复 孔实验。每孔加入2μL BTK酶(4ng),25度孵育30分钟。结束孵育后加入每孔2μL底物和ATP的混合 物(2μM ATP,0.2μg/μL PolyE4Y1),25度孵育120分钟。此时化合物终浓度梯度为100nM稀释至0.00128nM。 反应结束后,每孔加入5μL ADP-Glo试剂,25度继续反应40分钟,结束反应后每孔加入10μL的kinase detection试剂,25度反应30分钟后采用PerkinElmer Nivo多标记分析仪读数化学发光,积分时间0.5秒。 数据分析:
利用方程式(Sample-Min)/(Max-Min)*100%将原始数据换算成抑制率,IC50的值即可通过四参数进行曲 线拟合得出(GraphPad Prism中log(inhibitor)vs.response--Variable slope模式得出)。表1提供了本发明的 化合物对BTK酶活的影响。
表1 BTK体外活性测试结果
化合物编号 | BTK IC50(nM) |
001 | 0.71 |
002 | 1.65 |
003A | 4.4 |
003B | 1.9 |
004 | 2.46 |
005 | 2.85 |
006 | 13.61 |
007 | 16.04 |
008 | 36.5 |
009 | 2.8 |
010 | 3.04 |
011 | 1.57 |
实验结论:本发明化合物对BTK具有很强的抑制作用。
实验例2.HPBMC实验
1.实验步骤
1.1培养基和缓冲液准备
1)培养基:RPMI Medium 1640+1%P/S+10%FBS
2)MACS缓冲液:2%FBS+1mM EDTA in DPBS
3)染色缓冲液:DPBS+2%FBS
1.2化合物及抗人IgM稀释
1)待测化合物起始浓度为5μL,3倍稀释,9个点,稀释后加入到96孔板中,50μL/孔
2)按照下表2进行抗人IgM的稀释,稀释后加入到96孔板中,50μL/孔
表2抗人IgM稀释方法
1.3B细胞准备和处理
1)从液氮罐中取出PBMC,然后在37℃水浴锅中复苏解冻;
2)使用B细胞分离试剂盒,
按照说明书从PBMC中分离B细胞,并使用细胞计数仪计算其活率与数目。
3)用1640培养基重悬细胞,使其终浓度为1M/mL。
4)将B细胞按照0.1M/孔(100μL)铺入到已经有化合物以及anti-IgM的96孔平底板中;
5)放入37℃CO2培养箱中培养48h;
1.4细胞染色与流式分析
1)48h后收集细胞,把细胞转移到96V底板,350g,离心5min,弃上清,加入200μLDPBS清洗一次, 再次离心,弃上清;
2)加入50μL DPBS和50μL Live/Dead(1:500PBS稀释)重悬,常温10min;
3)加入100μL染色缓冲液清洗一遍,350g,离心弃上清;
4)每孔加入20μL Fc受体封闭溶液,重悬细胞进行封闭,常温10min;(Fc受体封闭溶液用染色缓冲液20 倍稀释);
5)每孔加入20μL APC标记的鼠抗人CD69(用染色缓冲液20倍稀释)或者同型对照,4℃,30min.
6)加入150μL染色缓冲液清洗两次,350g,离心5min,弃上清;
7)加入100μL染色缓冲液重悬细胞,上流式细胞仪
2.统计学处理
采用GraphPad Prism统计软件处理,数据用Mean±SEM表示。活性数据如表3所示。
表3 HPBMC细胞活性
化合物编号 | CD69 IC50(nM) |
002 | 3.6 |
003B | 2.0 |
实验结论:该系列化合物对HPBMC细胞具有很好的抑制效果。
实验例3:血浆蛋白结合实验(PPB)
实验操作:取各种属的空白血浆995μL,加入5μL受试化合物工作溶液(400μM)或华法林工作溶液(400 μM),使血浆样品中受试化合物与华法林终浓度均为2μM。将样品充分混合。有机相DMSO的终浓度为 0.5%;移取50μL受试化合物和华法林血浆样品到样品接收板中(三个平行),立即加入相应体积的对应空 白血浆或缓冲液,使得每个样品孔的终体积为100μL,血浆:透析缓冲液的体积比为1:1,然后向这些样 品中加入500μL终止液,此样品将作为T0样品用于回收率及稳定性测定。将T0样品存储于2-8℃,等待 与其它透析完的样品一起进行后续处理;将150μL受试化合物和华法林血浆样品加入到每个透析孔的给 药端,在透析孔对应的接收端中加入150μL空白透析缓冲液。然后将透析板置于湿润的、5%CO2的培养 箱中,在37℃下、约100rpm振荡孵育4-hr。透析结束后,移取50μL透析后的缓冲液样品和透析后的血 浆样品到新的样品接收板。在样品中加入相应体积的对应空白血浆或缓冲液,使得每个样品孔的终体积为 100μL,血浆:透析缓冲液的体积比为1:1。所有样品经过蛋白沉淀后进行LC/MS/MS分析,并通过公式:% Unbound=100*F/T,%Bound=100-%Unbound,%Recovery=100*(F+T)/T0计算蛋白结合率以及回收 率(其中F是透析4h后透析液中化合物的峰面积比值;T是透析4h后血浆中化合物的峰面积比值;T0是零 时刻血浆样品中化合物的峰面积比值)。实验结果如表4所示:
表4 PPB测试结果
化合物编号 | Unbound PPB H/D/C/R/M |
002 | 8.2%/4.3%/4.1%/1.3%/4.5% |
003B | 10.7%/10.9%/9.5%/5.7%/1.8% |
实验结论:本发明化合物与血浆蛋白结合比较强。
实验例4:肝细胞代谢稳定性实验(HMS)
实验操作:将198μL的肝细胞混悬液(0.51×106cells/mL)加入到已预热的孵育板中,培养液对照组加入 198μL不含肝细胞的孵育培养液至T0-MC和T120-MC孵育板中,所有孵育板在37℃培养箱中预孵育 10分钟。然后加入2μL供试品和对照化合物工作液,混匀,立即将孵育板放入培养箱内的摇板机中,调 节转数约为650rpm,启动计时器开始反应。每个化合物的每个时间点准备2个重复样本。孵育条件为37℃、 饱和湿度、含5%CO2。测试体系中,供试品的终浓度为1μM,对照品的终浓度为3μM,肝细胞的终浓度 为0.5×106cells/mL,总有机溶剂的终浓度为0.96%,其中DMSO的终浓度为0.1%。相应时间点孵育结 束时,取出孵育板,取出25μL化合物和对照化合物与细胞的混合液加入到含有125μL终止液(含有200ng/mL甲苯磺丁脲的乙腈甲醇溶液(v:v,5:95))的样品板中。对于Blank样品板,直接加入25μL不含 肝细胞的孵育培养液。所有样品板封膜后在摇板机上以600rpm摇10分钟后,3220×g离心20分钟。供 试品上清液用超纯水以1:1的比例稀释,对照品上清液用超纯水以1:3的比例稀释。所有样品混匀后用 LC-MS/MS的方法进行分析。实验结果如表5所示:
表5HMS测试结果
CLint(liver):肝固有清除率
实验结论:该系列化合物具有良好的肝细胞稳定性。
实验例5:化合物对体外细胞色素P450酶抑制评价
实验目的
为考察化合物对人肝微粒体CYP450酶的活性,本研究采用LC-MS/MS法测定化合物对人肝细胞 CYP450酶5种主要亚型(CYP1A2,2C9,2C19,2D6,3A4)抑制作用进行了测试,以IC50值为指标, 进行化合物筛选和分析。
实验方法和步骤
1)制备测试化合物和标准抑制剂工作溶液(100×);
2)将微粒体从-80℃冰箱中取出,在冰上解冻,贴上日期标签,使用后立即放回冰箱;
3)向相应的孔中加入20微升的基质溶液;
4)向空白孔中加入20微升磷酸缓冲盐溶液;
5)将2微升试验化合物和阳性对照工作液加入相应的孔中;
6)向无抑制剂孔和空白孔中添加2微升溶剂;
7)制备人肝微粒体工作液;
8)将158微升HLM工作液加入孵育板的所有孔中;
9)在37℃水浴中预热板子约10分钟;
10)制备NADPH辅因子溶液;
11)向所有孵育孔中添加20微升NADPH辅因子;
12)在37℃水浴条件下,将所有CYP混合培养10分钟;
13)在时间点,通过添加400微升***液(200ng/mL甲苯磺丁脲的乙腈溶液和200ng/mL Labetalol 的乙腈溶液)来终止反应;
14)样品以4000转/分的转速离心20分钟以沉淀蛋白质;
15)将200微升上清液移入100微升高效液相色谱水中,摇匀10分钟;
16)开始进行LC/MS/MS分析。
实验结果如表6所示:
表6CYP测试结果
实验结论:化合物003B对CYP酶无明显抑制作用。
实验例6:化合物在小鼠中药代动力学评价
实验目的:测试化合物在CD-1小鼠体内药代动力学数据。
将化合物与溶媒5%DMSO/5%Solutol/90%H2O混合,涡旋并超声,制备得到0.5mg/mL澄清溶液。 选取7至10周龄的CD-1雄性小鼠,静脉注射给予候选化合物溶液,收集一定时间的全血,制备得到血 浆,以LC-MS/MS方法分析药物浓度,并用Phoenix WinNonlin软件(美国Pharsight公司)计算药代参数, 结果如表7所示。
表7静脉(IV)PK数据
供试品 | 002 | 003B |
给药剂量(mg/kg) | 1.0 | 1.2 |
C0(nM) | 4192 | 4239 |
T1/2(h) | 0.28 | 0.27 |
Vd(L/kg) | 0.76 | 0.85 |
Cl(mL/Kg/min) | 49 | 79 |
AUC0-inf(nM.h) | 697 | 445 |
化合物与溶媒5%DMSO/5%Solutol/90%H2O混合,涡旋并超声,制备得到0.5mg/mL澄清溶液。 选取7至10周龄的CD-1雄性小鼠,口服给予候选化合物溶液,收集一定时间的全血,制备得到血浆,以 LC-MS/MS方法分析药物浓度,并用Phoenix WinNonlin软件(美国Pharsight公司)计算药代参数,结果如 表8所示。
表8口服(PO)PK数据
实验结论:本发明化合物在小鼠中具有良好PK性质。
实验例7:化合物在大鼠中药代动力学评价
实验目的:测试化合物在SD大鼠体内药代动力学数据。
化合物与溶媒5%DMSO/5%Solutol/90%H2O混合,涡旋并超声,制备得到0.5mg/mL澄清溶液。 静脉注射给予候选化合物溶液。收集一定时间的全血,制备得到血浆,以LC-MS/MS方法分析药物浓度, 并计算药代参数,结果如表9所示。
表9静脉(IV)PK数据
供试品 | 002 | 003B |
给药剂量(mg/kg) | 1.0 | 0.85 |
C0(nM) | 3515 | 2200 |
T1/2(h) | 0.40 | 0.32 |
Vd(L/kg) | 0.7 | 1.16 |
Cl(mL/Kg/min) | 26.0 | 50.2 |
AUC0-inf(nM.h) | 1318 | 705 |
化合物与溶媒5%DMSO/5%Solutol/90%water混合,涡旋并超声,制备得到2mg/mL的溶液。口 服给予候选化合物溶液。收集一定时间的全血,制备得到血浆,以LC-MS/MS方法分析药物浓度,并计算 药代参数,结果如表10所示。
表10口服(PO)PK数据
供试品 | 002 | 003B |
给药剂量(mg/kg) | 9.2 | 8.4 |
Cmax(nM) | 1805 | 1125 |
Tmax | 0.38 | 0.38 |
T1/2(h) | 1.79 | 1.56 |
AUC0-inf(nM.h) | 2582 | 2117 |
F% | 18.1% | 30.0% |
结论:本发明化合物在大鼠中具有良好PK性质。
实验例8:化合物在犬中药代动力学评价
实验目的:测试化合物在比格犬体内药代动力学数据。
化合物与溶媒5%DMSO/5%Solutol/90%water混合,涡旋并超声,制备得到0.5mg/mL澄清溶液。 静脉注射给予候选化合物溶液。收集一定时间的全血,制备得到血浆,以LC-MS/MS方法分析药物浓度, 并计算药代参数,结果如表11所示。
表11静脉(IV)PK数据
供试品 | 002 | 003B |
给药剂量(mg/kg) | 0.49 | 0.5 |
C0(nM) | 1714 | 451 |
T1/2(h) | 0.97 | 1.14 |
Vd(L/kg) | 1.50 | 2.49 |
Cl(mL/Kg/min) | 25.6 | 31.9 |
AUC0-inf(nM.h) | 684 | 557 |
化合物与溶媒5%DMSO/5%Solutol/90%water混合,涡旋并超声,制备得到0.5mg/mL的溶液。口 服给予候选化合物溶液。收集一定时间的全血,制备得到血浆,以LC-MS/MS方法分析药物浓度,并计算 药代参数,结果如表12所示。
表12口服(PO)PK数据
供试品 | 002 | 003B |
给药剂量(mg/kg) | 2.0 | 2.0 |
Cmax(nM) | 1135 | 724 |
Tmax | 0.5 | 0.63 |
T1/2(h) | 0.71 | 1.0 |
AUC0-inf(nM.h) | 2249 | 2247 |
F% | 82.2% | 101% |
结论:本发明化合物在犬中具有良好PK性质。
实验例9:C57BL/6小鼠EAE体内药效
实验方法:在10周龄C57BL/6雌性小鼠中构型自身免疫脑脊髓炎(EAE)模型,将动物按照体重随机分 为2组,其中G1组5只动物,为纯造模组;G2组7只动物,为受试物002组。第0天,在G1-G2组中 的每只动物后胁皮下,分两点各注射100μL的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)乳剂,共计200μL。分 别在2小时和48小时后,G1-G2组动物腹腹腔注射200μL的百日咳毒素(PTX)。在第22天结束体内实 验,从第0天开始,G1组不做任何处理;G2组给予5mg/kg受试物002,每天1次,共30天,每2天对 各组动物进行称重,评分(包括尾无力、跛行、后肢麻痹、后肢麻痹等症状)。
实验结果:在C57BL/6雌性小鼠自身免疫脑脊髓炎(EAE)模型中,与造摸组相比,化合物002在5mg/kg, QD的剂量下能够有效的降低疾病的严重程度,评分标准如表13和表14所示,详细结果如表15和图1所示。
表13.评分标准
于两个评分之间记为n.5分。
表14.评分标准
表15受试物在小鼠自身免疫脑脊髓炎(EAE)模型药效
组别 | 动物数 | 受试物 | 给药频率 | 剂量mg/kg | 动物在给药第20天的评分 |
G1 | 5 | 造模组 | QD x 29 | NA | 1.8 |
G2 | 7 | 化合物002 | QD x29 | 5 | 0.4 |
实验结论:化合物在小鼠EAE模型中展现出良好的药效。
实验例10:DBA/1小鼠足趾肿胀模型体内药效
实验方法
1.试剂配制
取1.43mL醋酸,加500mL的超纯水配制成0.05mol·L-1醋酸溶液。称取适量II型胶原蛋白,加入适 量体积0.05mol·L-1醋酸溶液至盛有胶原蛋白的玻璃瓶中,上下颠倒使胶原蛋白完全溶解,得浓度2.0mg·mL-1胶原蛋白溶液;取等体积弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂(第一次免疫使用弗氏完全佐剂,第二次加强免 疫时使用弗氏不完全佐剂)于冰上,逐滴加入胶原蛋白溶液且同时用磁力搅拌器缓慢搅拌,得均匀乳液, 以乳液滴至水面不扩散为判断标准(每次免疫使用2瓶II型胶原蛋白)。
2.动物模型制备
实验第一天,用1mL注射器吸取胶原蛋白乳液,注射到小鼠尾根部皮下,每只动物注射100μL(1 mg·mL-1),共免疫117只(剩余3只动物不免疫,作为正常对照组)。免疫三周后(第21天)进行加强免 疫一次,注射100μL/只(1mg·mL-1)。定期观察动物状态及足趾肿胀诱导情况,当左右后爪的脚掌厚度增 加率大于20%时表示免疫成功。同时对四只足爪肿胀程度进行评分。
足部肿胀情况评分规则如下:
1分:跗骨或踝关节单个区域轻度红肿;
2分:跗骨延伸至踝关节区域轻度红肿;
3分:从踝关节到跖骨区域中度红肿;
4分:关节,脚掌及脚趾区域重度红肿或肢体僵硬。
单个肢体最高分4分,每只小鼠最高积分16分。
脚掌厚度测量:使用游标卡尺测量小鼠脚掌或踝关节的厚度,将测定数据导入excel。
3.给药制剂配制
a)空白溶剂
分别吸取适量体积DMSO,Solutol HS-15和超纯水,涡旋混匀,配制成空白溶媒,分装后保存于2- 8℃冰箱,每3~4天配制一次。空白溶媒中DMSO、Solutol HS-15和超纯水体积比为5%、5%和90%。
b)***磷酸钠的配制
称取适量***磷酸钠,向其中加入适量体积的生理盐水,涡旋振荡,完全溶解后配制成浓度为0.1 mg·mL-1的给药制剂,分装后保存于2-8℃冰箱,每3~4天配制一次。
c)003B的配制
称取适量003B,向其中加入适量体积DMSO,配制成储备液(30mg·mL-1)后分装保存于-20℃冰 箱。每次配制时取出一支,涡旋振荡(若有必要可超声),依次加入适量体积的Solutol HS-15和超纯水, 涡旋混匀,配制成浓度分别为0.25、0.5和1.5mg·mL-1的给药制剂,分装后保存于2-8℃冰箱,每3~4天 配制一次。给药制剂中DMSO、Solutol HS-15和超纯水体积比为5%、5%和90%。
4.动物分组及给药
根据动物体重、踝关节厚度、足爪肿胀程度评分等指标和动物整体状况等对模型动物进行筛选,淘汰动物体重、踝关节厚度、足爪肿胀程度评分等指标不合格的动物,挑选状态良好,踝关节厚度增加明显且相近的动物42只,随机分为6组,分别为B、C、D、E、F、G组(n=7),并开始给药,共给予14天。A组为正常组(不进行免疫),不做处理。动物给药方案具体见表16(i.g.代表灌胃给药,i.p.代表腹腔注射,QD代表一天一次)。
表16.实验给药方案
5.临床观察及指标测定
第2次免疫后,每天对动物状态及足趾肿胀情况进行观察(1次/天),待大部分免疫动物出现明显足 趾肿胀后开对动物肢体评分进行监测。给药开始后,每天对动物状态进行观察(1次/天),每周记录2次 动物体重,同时对动物肢体进行评分(2次/周),并测量踝关节厚度(2次/周)。
6.实验结果
实验结果见图2和图3。
实验结论:化合物003B在小鼠足趾肿胀模型中表现出良好的药效。
Claims (22)
1.式(P)所示化合物或其药学上可接受的盐,
其中,
T1选自CH和N;
L1选自O和-C1-3烷基-NH-C(=O)-;
环A选自四氢吡咯基和哌啶基;
各R1分别独立地选自卤素、C1-3烷基和C1-3烷氧基,所述C1-3烷基和C1-3烷氧基分别独立地任选被1、2或3个卤素取代;
R2选自H、卤素和C1-3烷基,所述C1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代;
R3选自
R4选自卤素、CN、C1-3烷基和C1-3烷氧基,所述C1-3烷基和C1-3烷氧基分别独立地任选被1、2或3个卤素取代;
R5选自H、卤素和C1-3烷基,所述C1-3烷基任选被1、2或3个卤素取代;
各Rb分别独立地选自H和卤素;
各Rc分别独立地选自H和C1-3烷基,所述C1-3烷基被1、2或3个F取代;
m为0、1、2或3;
n为0、1或2;
条件是,当L1选自O时,Rc选自C1-3烷基,所述C1-3烷基被1、2或3个F取代。
2.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,L1选自O和-CH2-NH-C(=O)-。
3.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,各R1分别独立地选自F、Cl、Br、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、OCH3、OCH2CH3和OCH(CH3)2,所述CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、OCH3、OCH2CH3和OCH(CH3)2分别独立地任选被1、2或3个卤素取代。
4.根据权利要求1或3所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,各R1分别独立选自F、Cl、Br、CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、CF3、OCH3、OCH2CH3、OCH(CH3)2和OCF3。
5.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,结构单元选自/>
6.根据权利要求1或5所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,结构单元选自/>
7.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,R2选自H、F、Cl和CH3。
8.根据权利要求1或7所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,结构单元选自/>
9.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,各Rc分别独立地选自H、CH3、CH2CH3和CH(CH3)2,所述CH3、CH2CH3和CH(CH3)2被1、2或3个F取代。
10.根据权利要求1或9所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,各Rc分别独立地选自H、CH2F、CHF2和CF3。
11.根据权利要求1或9所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,R3选自
12.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,R4选自F、Cl、Br、CN、CH3、CF3、OCH3和OCF3。
13.根据权利要求1或12所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,R4选自F和CH3。
14.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,环A选自
15.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,n为0或1。
16.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,结构单元选自/>
17.根据权利要求16所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,结构单元选自/>
18.根据权利要求1、12、14~17任意一项所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,结构单元选自/>
19.根据权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐,其中,R5选自H。
20.根据权利要求1~19任意一项所述化合物或其药学上可接受的盐,其化合物选自
其中,L1、R1、R2、R3、R4、m和n如权利要求1~19任意一项所述;
p为0或1,q为0或1,且p和q不同时为0。
21.下式所示化合物或其药学上可接受的盐,
22.根据权利要求21所述化合物或其药学上可接受的盐,其化合物选自
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