CN116376729A - 异常威克汉姆酵母、微生物制剂和枸杞西打酒及其酿造方法 - Google Patents
异常威克汉姆酵母、微生物制剂和枸杞西打酒及其酿造方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了异常威克汉姆酵母、微生物制剂和枸杞西打酒及其酿造方法，异常威克汉姆酵母BYBC 2.22146和酿酒酵母BYBC2.21113的保藏编号分别为CGMCC No.26360和CGMCC No.23129；其酿造方法包括：将枸杞原浆加水混合和/或将枸杞干果加水破碎匀浆，灭菌得到待发酵液；先将活化培养后的异常威克汉姆酵母接种于待发酵液中进行液态发酵后，再将活化培养后的酿酒酵母接种并进行液态发酵；陈酿，即得枸杞西打酒。本发明利用所提供的异常威克汉姆酵母与酿酒酵母混合发酵酿造枸杞西打酒，大大提升了枸杞西打酒的总酯含量，明显改善了枸杞西打酒的口感和香味，有效提高了枸杞西打酒的发酵度和品质。
Description
技术领域
本发明涉及微生物应用和食品酿造技术领域，更具体地，涉及异常威克汉姆酵母、微生物制剂和枸杞西打酒及其酿造方法。
背景技术
枸杞作为传统的药食两用的中药材，营养成分十分丰富，药用价值非常高，枸杞中富含多种活性营养成分如枸杞多糖、枸杞酸、黄酮、多酚和甜菜碱等，具有抗氧化、抗疲劳、降血脂、降三高和提高免疫力等保健功效。但是，鲜果枸杞果实小而多汁，采摘后容易衰老腐败，贮存时间短，因此，枸杞大多以干果的形式进行出售。
随着人们保健意识的增强，喜欢将枸杞煮粥、泡茶、煲汤食用，起到清肝明目、滋阴润肺和滋肾益精的保健功效。枸杞行业也非常注重对枸杞的探究与开发，多集中于枸杞的基础研究、应用研究、文化传播等领域，为了提高枸杞的社会经济效益，不断创新于枸杞深加工领域，拓宽枸杞精深加工产品品类具有重要意义和价值。
西打源自英文cider的音译，枸杞西打酒采用特级枸杞为原料，通过低温发酵-自然老熟的工艺酿造而成的一种低度含酒精果汁饮料，融合了啤酒与枸杞原浆的优点，口感清醇，营养丰富。酵母菌是枸杞西打酒发酵过程中的一个重要因素，直接影响西打酒的风味，决定西打酒品质的好坏。目前，我国大多数使用单一酿酒酵母发酵西打酒，常常导致酿造得到的西打酒存在酒体寡淡和香味不足等问题。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
为解决上述技术中存在的缺陷，本发明提供了异常威克汉姆酵母、微生物制剂和枸杞西打酒及其酿造方法。
为实现上述目的，本发明的技术方案如下：
本发明一方面提供了一种异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC2.22146，于2022年12月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.26360。
具体地，所述异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146可用于枸杞西打酒的发酵，以解决其酒体寡淡和香味不足等问题。
本发明另一方面还提供了一种微生物制剂，包含上述异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146。
本发明再一方面还提供了上述保藏编号为CGMCC No.26360的异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146在酿造枸杞西打酒中的应用。
本发明又一方面还提供了一种枸杞西打酒的酿造方法，包括以下步骤：
S1、将枸杞原浆加水混合和/或将枸杞干果加水破碎匀浆，灭菌处理，得到待发酵液；
S2、先将活化培养后的异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC2.22146接种于待发酵液中进行液态发酵后，再将活化活化培养后的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113接种并进行液态发酵；
S3、陈酿，即得枸杞西打酒。
在上述技术方案中，步骤S2中，
异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146的接种浓度、接种量分别为1×106- 8×106CFU/ml和3.5-6 wt%，其液态发酵的温度和时间分别为16-24 ℃和45-54 h；
酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113的接种浓度、接种量分别为1×106- 8×106CFU/ml和3.5-6 wt%，其液态发酵的温度和时间分别为16-24 ℃和66-78 h。
详细地，在上述技术方案中，先接入异常威克汉姆酵母，发酵后再接酿酒酵母，酿酒酵母的加入会抑制异常威克汉姆酵母的生长，在异常威克汉姆酵母接入48 h后再接入酿酒酵母，可以生成更多的挥发性香气成分，提高枸杞西打酒的香味，随后，由于酿酒酵母的接入，提高了发酵效率，充分发挥两者的优势。
具体地，在上述技术方案中，步骤S2中，异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146的活化培养具体为：
取保藏于-80 ℃的异常威克汉姆酵母菌，在28 ℃下活化15-30min，以接种环沾取至固体麦汁培养基平板划线，随后在28 ℃下培养48 h，再以接种环挑取单菌落于100 mL麦汁液体培养基中，在28 ℃、200 rpm下恒温振荡培养22 h，即可。
具体地，在上述技术方案中，步骤S2中，酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113的活化培养具体为：
取保藏于-80 ℃的酿酒酵母，在28 ℃下活化15-30min，以接种环沾取至固体麦汁培养基平板划线，随后在28 ℃下培养48 h，再以接种环挑取单菌落于100 mL麦汁液体培养基中，在28 ℃、200 rpm下恒温振荡培养24 h，即可。
进一步地，在上述技术方案中，步骤S3中，所述陈酿具体为：
取残糖浓度为6.0-8.0 g/L的发酵液，以每24 h下降10℃的速率匀速降温至4 ℃，并后储7 d。
详细地，在上述技术方案中，在残糖浓度降为6-8 g/L时开始进入陈酿，此时已达到所需的酒精度且感官评分最佳；采用分阶段逐步降温，使菌体在相对平缓的环境中进入休眠的状态，不会因环境的剧烈变化，使菌体死亡、自溶、破裂使内容物质流入酒体。
进一步地，在上述技术方案中，步骤S1中，
所述待发酵液的初始糖度为8-16 Brix%。
此外，本发明还提供了上述枸杞西打酒的酿造方法酿造得到的枸杞西打酒。
具体地，在上述技术方案中，所述枸杞西打酒的酒精度、真正发酵度、醇类物质和酯类物质的含量分别为2.26-3.73 v%、62-68 %、32.39-35.21 %和56.00-63.43 %。
本发明与现有技术相比，具有以下优点：
（1）本发明利用所提供的异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC2.22146与酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113混合发酵酿造枸杞西打酒，并采用特定的酿造工艺，大大提升了枸杞西打酒的总酯含量，明显改善了枸杞西打酒的口感和香味，有效提高了枸杞西打酒的发酵度和品质；
（2）本发明采用新鲜枸杞原浆和特级枸杞为原料，加入酵母直接酿造而成的西打酒无任何添加剂，既具有啤酒应有的啤酒风味，又具有低酒精度的特点，此外，所酿造得到的枸杞西打酒含有多种对人身体有益的矿物质、氨基酸、维生素、微量元素及有机酸等，具有含糖量低、营养成分含量丰富和酒精度低等优点，口味独特，并且还有抗氧化、降血脂、调节人体免疫、美白和延缓机体衰老等功能，因此具有极大的开发利用价值。
附图说明
图1为本发明实施例中枸杞西打酒的酿造工艺流程图；
图2为本发明实施例1所得到的枸杞西打酒的香气成分的总离子流色谱图；
图3为本发明空白对照组（取实施例1中未接种酵母的枸杞原浆）的香气成分的总离子流色谱图；
图4为本发明实施例中的抗氧化功效的测定结果；
图5为本发明实施例中甘氨胆酸钠与牛磺胆酸钠的标准曲线图；
图6为本发明实施例中的枸杞原浆和实施例1所得到的枸杞西打酒的胆酸盐结合能力的测定结果；
图7为本发明实施例中的枸杞原浆和实施例1所得到的枸杞西打酒的酪氨酸酶抑制活性的测定结果图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。
应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例中，如无特别说明，所用手段均为本领域常规的手段。
本文中所用的术语“包含”、“包括”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
在本发明的以下实施例中，所用的原料均为市售产品，未经特殊处理直接使用。
本发明实施例中的酿酒酵母是前期通过菌体富集结合梯度稀释和平板涂布在枸杞鲜果中筛出；异常威克汉姆酵母是在保存不当的染菌的枸杞原浆中筛出。
具体地，在无菌的条件下，取一定量枸杞鲜果加入已灭菌装有100 mL YEPD液体培养基的500 mL三角瓶中，在28℃、转速为200 rpm的摇床中培养24 h进行菌体的富集，再将富集培养的菌液逐级稀释，取合适梯度的菌液涂布在加有青霉素的YEPD培养基平板上，于28 ℃恒温培养箱中培养48 h，挑取单菌落反复多次分离纯化镜检，经菌种鉴定，得到酿酒酵母菌种。
具体地，在无菌的条件下，取一定量染菌的枸杞原浆加入已灭菌装有100 mL YEPD液体培养基的500 mL三角瓶中，在28℃、转速为200 rpm的摇床中培养24 h进行菌体的富集，再将富集培养的菌液逐级稀释，取合适梯度的菌液涂布在加有青霉素的YEPD培养基平板上，于28 ℃恒温培养箱中培养48 h，挑取单菌落反复多次分离纯化镜检，经菌种鉴定，得到异常威克汉姆酵母菌种。
生物保藏说明
异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146，于2022年12月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号（中国科学院微生物研究所），保藏编号为CGMCC No.26360。
酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113，于2021年08月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号（中国科学院微生物研究所），保藏编号为CGMCC No.23129。
异常威克汉姆酵母的活化、培养、扩大的过程如下：
取保藏于-80 ℃的异常威克汉姆酵母菌（Wickerhamomyces anomalus）BYBC2.22146，置于28 ℃恒温培养箱中，活化15-30 min，以接种环沾取至固体麦汁培养基平板划线，随后在28 ℃下培养48 h，再以接种环挑取单菌落于100 mL麦汁液体培养基中，在28℃、200 rpm摇床恒温振荡培养22 h，最后稀释25倍（OD600=0.491），即得到其种子液。
酿酒酵母的活化、培养、扩大的过程如下：
取保藏于-80 ℃的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113，置于28℃恒温培养箱中，活化15-30 min，以接种环沾取至固体麦汁培养基平板划线，随后在28 ℃下培养48 h，再以接种环挑取单菌落于100 mL麦汁液体培养基中，在28 ℃、200 rpm摇床恒温振荡培养24 h，最后稀释25倍（OD600=0.529），即得到其种子液。
实施例1
本发明实施例提供了一种枸杞西打酒的酿造方法，如图1所示，具体包括以下步骤：
S1、将枸杞原浆加水混合，调整其糖度为10 Brix%，灭菌处理，得到待发酵液；
S2、将异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146的种子液加入到待发酵液中（接种量为5 %），液态发酵48 h后，再将酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113的种子液加入（接种量为5 %），液态发酵72 h，两种菌的接种浓度均为（1-8）×106CFU/mL，整个发酵过程共计5 d，在发酵过程中，提前向待发酵液提供充足的氧气，供酵母进行增殖，之后控制压力罐内压力在0.12 MPa，并在18 ℃恒温发酵，发酵5d后发酵液开始澄清，菌体开始凝聚在罐底，且残糖浓度为6.0-8.0 g/L；
S3、以每24 h下降10℃的速率匀速降温至4 ℃，并后储7 d，最后滤去酒渣并罐装，即得枸杞西打酒。
实施例2
本发明实施例提供了一种枸杞西打酒的酿造方法，具体包括以下步骤：
S1、将枸杞干果加5倍体积的水进行破碎匀浆，然后在60±0.5℃中提取24 h，调整其糖度为12 Brix%，灭菌处理，得到待发酵液；
S2、将异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146的种子液加入到待发酵液中（接种量为5 %），液态发酵48 h后，再将酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113的种子液加入（接种量为5 %），液态发酵72 h，两种菌的接种浓度均为（1-8）×106CFU/mL，整个发酵过程共计5 d，在发酵过程中，提前向待发酵液提供充足的氧气，供酵母进行增殖，之后控制压力罐内压力在0.12 MPa，并在21 ℃恒温发酵，发酵5d后发酵液开始澄清，菌体开始凝聚在罐底，且残糖浓度为6.0-8.0 g/L；
S3、以每24 h下降10℃的速率匀速降温至4 ℃，并后储7 d，最后滤去酒渣并罐装，即得枸杞西打酒。
实施例3
本发明实施例提供了一种枸杞西打酒的酿造方法，具体包括以下步骤：
S1、将枸杞原浆加水混合，调整其糖度为15 Brix%，灭菌处理，得到待发酵液；
S2、将异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146的种子液加入到待发酵液中（接种量为5 %），液态发酵48 h后，再将酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113的种子液加入（接种量为5 %），液态发酵96 h，两种菌的接种浓度均为（1-8）×106CFU/mL，整个发酵过程共计6 d，在发酵过程中，提前向待发酵液提供充足的氧气，供酵母进行增殖，之后控制压力罐内压力在0.12 MPa，并在21 ℃恒温发酵，发酵6d后发酵液开始澄清，菌体开始凝聚在罐底，且残糖浓度为6.0-8.0 g/L；
S3、以每24 h下降10℃的速率匀速降温至4 ℃，并后储7 d，最后滤去酒渣并罐装，即得枸杞西打酒。
对比例1
本发明实施例提供了一种枸杞西打酒的酿造方法，具体包括以下步骤：
S1、将枸杞原浆加水混合，调整其糖度为10 Brix%，灭菌处理，得到待发酵液；
S2、将酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC2.21113的种子液加入（接种量为10 %），菌的接种浓度为（1-8）×106CFU/mL，液态发酵72 h，在发酵过程中，提前向待发酵液提供充足的氧气，供酵母进行增殖，之后控制压力罐内压力在0.12 MPa，并在18 ℃恒温发酵，发酵后发酵液开始澄清，菌体开始凝聚在罐底，且残糖浓度为6.0-8.0 g/L；
S3、以每24 h下降10℃的速率匀速降温至4 ℃，并后储7 d，最后滤去酒渣并罐装，即得枸杞西打酒。
对比例2
本发明实施例提供了一种枸杞西打酒的酿造方法，具体包括以下步骤：
S1、将枸杞原浆加水混合，调整其糖度为10 Brix%，灭菌处理，得到待发酵液；
S2、将异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC2.22146的种子液加入到待发酵液中（接种量为10 %），菌的接种浓度为（1-8）×106CFU/mL，液态发酵48 h，在发酵过程中，提前向待发酵液提供充足的氧气，供酵母进行增殖，之后控制压力罐内压力在0.12 MPa，并在18 ℃恒温发酵，发酵后发酵液开始澄清，菌体开始凝聚在罐底，且残糖浓度为6.0-8.0 g/L；
S3、以每24 h下降10℃的速率匀速降温至4 ℃，并后储7 d，最后滤去酒渣并罐装，即得枸杞西打酒。
对比例3
本发明实施例提供了一种枸杞西打酒的酿造方法，具体包括以下步骤：
S1、将枸杞原浆加水混合，调整其糖度为10 Brix%，灭菌处理，得到待发酵液；
S2、将酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113的种子液加入（接种量为5 %），液态发酵48 h后，再将异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC2.22146的种子液加入到待发酵液中（接种量为5 %），液态发酵72 h，两种菌的接种浓度均为（1-8）×106CFU/mL，整个发酵过程共计5 d，在发酵过程中，提前向待发酵液提供充足的氧气，供酵母进行增殖，之后控制压力罐内压力在0.12 MPa，并在18 ℃恒温发酵，发酵5d后发酵液开始澄清，菌体开始凝聚在罐底，且残糖浓度为6.0-8.0 g/L；
S3、以每24 h下降10℃的速率匀速降温至4 ℃，并后储7 d，最后滤去酒渣并罐装，即得枸杞西打酒。
感官评分的评价标准如下表1所示。
表1 感官评分的评价标准
酒精度采用GB/T4928-2008中密度瓶法进行检测。
真正发酵度采用以下公式进行检测计算：
真正发酵度=（W-W1）/W×100%；
式中：
W：发酵前发酵液的浓度（%）
W1：发酵后排除酒精后的发酵液浓度（%）。
香气成分（醇类物质和酯类物质）的含量通过气相色谱-质谱联用仪检测得到。
图2和图3分别为实施例1所得到的枸杞西打酒和空白对照组（取实施例1中未接种酵母的枸杞原浆）的香气成分的总离子流色谱图，取实施例1-3枸杞西打酒、对比例1-3的枸杞西打酒和空白对照组（取实施例1中未接种酵母的枸杞原浆）进行检测，香气成分（醇类物质和酯类物质）的含量的检测结果如下表2所示。
表2 香气成分（醇类物质和酯类物质）的含量的检测结果
实施例1-3所得到的枸杞西打酒中，酯类物质的含量有了明显的提高，使酒体更加丰满醇厚，另外，发酵度的提高也增加了枸杞西打酒的品质；对比例1所得到的枸杞西打酒（单一酿酒酵母发酵）的酒精度高且酯类物质含量低，香味不足；对比例2所得到的枸杞西打酒（单一异常威克汉姆酵母发酵）的发酵度低，降低了枸杞西打酒的品质，但酯类物质含量有了明显的提高；对比例3中加入酿酒酵母2d后，其在发酵液中占绝对优势，接入异常威克汉姆酵母会对其生长造成明显的抑制，因此，酯类物质含量没有提高。
醇类物质是酵母发酵过程中一类重要的挥发性香气物质，异戊醇、2-甲基丁醇、糠醇、苯乙醇和α-松油醇都是枸杞西打酒中检测出来的主要高级醇类，相比酿酒酵母纯种发酵，混菌发酵中的高级醇类含量均减少，说明发酵过程引入异常威克汉姆酵母，在一定程度上影响高级醇的合成。酯类物质具有花香和果香的特性，乙酸乙酯具有果香味，乙酸苯乙酯具有甜蜜香味，在混菌发酵的枸杞西打酒中有了显著提高；乙酸异戊酯主要带来甜味、果味和类似香蕉的气味；异常威克汉姆酵母的加入使酒体有更浓郁的发酵香味。
取实施例1-3枸杞西打酒、对比例1-3的枸杞西打酒和空白对照组（取实施例1中未接种酵母的枸杞原浆）进行检测，检测结果如下表3所示。
表3 检测结果对照表
| 酒精度/v% | 真正发酵度/% | 感官评分/分 | 醇类物质含量/ % | 酯类物质含量/% | |
| 实施例1 | 2.28±0.07 | 62.97±0.28 | 83.93 | 32.39 | 62.21 |
| 实施例2 | 2.52±0.05 | 65.07±0.36 | 86.65 | 30.08 | 64.80 |
| 实施例3 | 2.68±0.01 | 66.95±0.27 | 82.91 | 31.56 | 63.73 |
| 对比例1 | 3.24±0.01 | 60.28±0.81 | 76.21 | 81.12 | 2.51 |
| 对比例2 | 0.58±0.05 | 20.27±0.73 | 50.82 | 7.36 | 78.90 |
| 对比例3 | 3.24±0.01 | 60.28±0.81 | 75.39 | 80.93 | 3.35 |
| 空白对照组 | nd | nd | nd | 5.37 | 5.83 |
枸杞西打酒的功能检测
将实施例1所得到的枸杞西打酒、空白对照组（取实施例1中未接种酵母的枸杞原浆）和阳性对照（维生素Vc）做对比，检测说明枸杞西打酒的功效。
1、抗氧化功效测定
抗氧化的功效测定采用GB/T 39100-2020中DPPH和ABTS法来测定抗氧化性能。
抗氧化功效的测定结果如图4所示。对自由基半抑制浓度越低，说明其抗氧化能力越强；从图4中可以看出，枸杞西打酒的DPPH和ABTS自由基半抑制量均比枸杞原浆的少，说明枸杞原浆经发酵酿造后制得的枸杞西打酒的抗氧化活性增强；枸杞西打酒对DPPH和ABTS抑制效果比枸杞原浆分别提高了23.23 %和19.30 %；阳性对照（维生素Vc）对DPPH、ABTS的半抑制浓度为0.0225 g/L和0.03239 g/L。
2、体外降血脂胆酸盐结合能力功效测定
采用硫酸比色法测定胆酸盐含量：
（1）标准曲线的绘制：
配置不同浓度甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠标准溶液，分别取2 mL胆酸盐标准溶液于25 mL具塞试管中，加入60 % H2SO4于70 ℃水浴40 min，取出冰浴5 min，在387 nm处测定其吸光度，以溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，分别绘制甘氨胆酸钠与牛磺胆酸钠的标准曲线图，如图5所示；
（2）样品的测定：
取3 mL不同浓度的样品放入三角瓶中，加入3 mL、10 g/L的胃蛋白酶与1 mL、0.01mol/L盐酸，在37 ℃恒温振荡箱中振荡1 h，用NaOH调节pH至6.3，加入4 mL、10g/L胰蛋白酶，在37 ℃恒温振荡箱中振荡1 h；一份三角瓶加入4 mL、0.4 mmol/L甘氨胆酸钠，另一份加入4 mL、0.5 mmol/L牛磺胆酸钠，于37 ℃下恒温振荡1h，之后4000 r/min离心20 min，取上清液2 mL，于387nm处测定其吸光度；
采用下式计算胆酸盐含量：
结合胆酸盐能力=（N1-N2）/V×A；
式中：
N1为胆酸盐的加入量，mmol；
N2为胆酸盐的剩余量，mmol；
V为样品加入的体积；
A为样品稀释倍数。
体外降血脂胆酸盐结合能力功效的测定结果如图6所示；从图6中可以看出，枸杞原浆经发酵酿造后制得的枸杞西打酒的结合甘氨酸钠能力均比枸杞原浆高，说明发酵对结合胆酸盐的能力有增益效果；枸杞西打酒对甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠的结合能力分别提高了51.78 %和23.36 %。
3、酪氨酸酶抑制活性
按照T/SHRH 015-2018中的方法来测定酪氨酸酶抑制实验。
酪氨酸酶广泛分布于生物体内，为催化黑色素合成的关键限速酶，酪氨酸酶活性增加，产生的黑素就会更多；酪氨酸酶活性被抑制，黑素细胞产生黑素的能力就相应降低。
酪氨酸酶抑制活性的测定结果如图7所示；从图7可以看出，枸杞原浆经发酵酿造后制得的枸杞西打酒的酪氨酸酶抑制活性达到56.17 %，抑制效果比枸杞原浆提高了69.65%。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。
应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146，其特征在于，
于2022年12月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.26360。
2.一种微生物制剂，其特征在于，
包含权利要求1所述的异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC2.22146。
3.保藏编号为CGMCC No.26360的异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146在酿造枸杞西打酒中的应用。
4.一种枸杞西打酒的酿造方法，其特征在于，
包括以下步骤：
S1、将枸杞原浆加水混合和/或将枸杞干果加水破碎匀浆，灭菌处理，得到待发酵液；
S2、先将活化培养后的异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146接种于待发酵液中进行液态发酵后，再将活化培养后的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113接种并进行液态发酵；
S3、陈酿，即得枸杞西打酒。
5.根据权利要求4所述的枸杞西打酒的酿造方法，其特征在于，
步骤S2中，
异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146的接种浓度、接种量分别为1×106- 8×106 CFU/ml和3.5-6 wt%，其液态发酵的温度和时间分别为16-24 ℃和45-54 h；
酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113的接种浓度、接种量分别为1×106- 8×106 CFU/ml和3.5-6 wt%，其液态发酵的温度和时间分别为16-24 ℃和66-78 h。
6.根据权利要求4所述的枸杞西打酒的酿造方法，其特征在于，
步骤S2中，
异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）BYBC 2.22146的活化培养具体为：
取保藏于-80 ℃的异常威克汉姆酵母菌，在28 ℃下活化15-30min，以接种环沾取至固体麦汁培养基平板划线，随后在28 ℃下培养48 h，再以接种环挑取单菌落于100 mL麦汁液体培养基中，在28 ℃、200 rpm下恒温振荡培养22 h，即可；
酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BYBC 2.21113的活化培养具体为：
取保藏于-80 ℃的酿酒酵母，在28 ℃下活化15-30min，以接种环沾取至固体麦汁培养基平板划线，随后在28 ℃下培养48 h，再以接种环挑取单菌落于100 mL麦汁液体培养基中，在28 ℃、200 rpm下恒温振荡培养24 h，即可。
7.根据权利要求4-6任一项所述的枸杞西打酒的酿造方法，其特征在于，
步骤S3中，
所述陈酿具体为：
取残糖浓度为6.0-8.0 g/L的发酵液，以每24 h下降10℃的速率匀速降温至4 ℃，并后储7 d。
8.根据权利要求4-6任一项所述的枸杞西打酒的酿造方法，其特征在于，
步骤S1中，
所述待发酵液的初始糖度为8-16 Brix%。
9.权利要求4-8任一项所述的枸杞西打酒的酿造方法酿造得到的枸杞西打酒。
10.根据权利要求9所述的枸杞西打酒，其特征在于，
所述枸杞西打酒的酒精度、真正发酵度、醇类物质和酯类物质的含量分别为2.26-3.73v%、62-68 %、32.39-35.21 %和56.00-63.43 %。
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Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
| CN117887598A (zh) * | 2024-03-15 | 2024-04-16 | 山东巨鑫源农业科技有限公司 | 一种芦笋酵母及其应用 |
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