CN116333947B - 一种复合生物制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本申请涉及农业微生物生态技术与应用的技术领域，提供了一种复合生物制剂及其制备方法，包括复合菌种组份与营养组份，所述复合菌种组份至少包括经过培养的淡紫紫孢菌、荧光假单孢菌、蜡样芽胞杆菌、胶质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌、巨大芽孢杆菌、苏云金杆菌、以及哈次木霉菌；所述营养组份至少包括蜜糖、水溶性营养粉、尿素、磷酸氢二钾、琼脂、以及牛肉膏。具有多种功效，能够在一次翻土投放操作中同时完成土传病害、土壤肥化、有机填埋物降解的处理。

Description

一种复合生物制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及农业微生物生态技术与应用的技术领域，更具体地，涉及一种复合生物制剂；本发明同时还涉及该种复合生物制剂的制备方法。

背景技术

土传病害是指随病残体生活在土壤中的病原体，例如真菌、细菌、线虫和病毒等，在适宜的环境温湿度条件下自作物的根部或茎部侵害作物而引起的病害。作物土传病害的传播速度快，植株受感染后死亡率相对较高，能够造成农作物产量减产20-90%。

同时，由于化学肥料的长期使用，使得现今的种植土壤的结构、性质、微生物结构受到不同程度的破坏。秸秆等作物的填埋，也影响了土壤中农作物的生长。为此，现有技术中，在添加了防治土传病害的复合微生物制剂后，还需要另外处理以修复土壤肥力或降解、分解有机填埋物等。

综上，现有技术中缺少一种具有多种功效并能够在一次翻土投放操作中完成土传病害、土壤肥化、有机填埋物降解的功效的复合生物制剂。

另一个方面，现有技术中复合生物制剂的使用方法一般包括以下步骤：首先将粉状制剂兑水后制得液体制剂，随后翻土并将液体制剂加入翻新的土壤中，最后通过搅拌或研磨的方式使复合生物制剂在土壤中均匀分散。上述方法存在以下问题：

（1）对土壤的搅拌、研磨操作较为复杂，所以提高了处理难度，

（2）润湿的土壤在搅拌或研磨过程中容易产生热量从而形成局部高温，使得菌种难以存活，所以菌种的处理效率大大降低。

发明内容

本发明旨在解决前述上述方案中尚缺少一种具有多种功效并能够在一次翻土投放操作中完成土传病害、土壤肥化、有机填埋物降解的功效的复合生物制剂的技术问题。

在本申请的第一个方面，提供了一种复合生物制剂，包括复合菌种组份与营养组份，所述复合菌种组份至少包括经过培养的淡紫紫孢菌、荧光假单孢菌、蜡样芽胞杆菌、胶质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌、巨大芽孢杆菌、苏云金杆菌、以及哈次木霉菌；所述营养组份至少包括蜜糖、水溶性营养粉、尿素、磷酸氢二钾、琼脂、以及牛肉膏。

在一些实施例中，所述复合菌种中各菌种均经过熟化。

在一些实施例中，所述复合菌种组份中淡紫紫孢菌、荧光假单孢菌、蜡样芽胞杆菌、胶质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌、巨大芽孢杆菌、以及苏云金杆菌均为等质量添加，且添加量均为15-25份；哈次木霉菌的添加量为3-5份。

在一些实施例中，所述营养组份中各成分的添加量分别为：蜜糖25-35份、水溶性营养粉12-17份、尿素12-17份、磷酸氢二钾12-17份、琼脂1.5-4份、以及牛肉膏1.5-4份。

在本申请的第二个方面，提供了一种复合生物制剂的制备方法，所述复合菌种组份中的淡紫紫孢菌、荧光假单孢菌、蜡样芽胞杆菌、胶质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌、巨大芽孢杆菌、苏云金杆菌、以及哈次木霉菌在培养基中分别培养、熟化后得到液体菌种，再将得到的淡紫紫孢菌液体菌种、荧光假单孢菌液体菌种、蜡样芽胞杆菌液体菌种、胶质芽孢杆菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、绿色木霉菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种、苏云金杆菌液体菌种、以及哈次木霉菌液体菌种制粉，最后将淡紫紫孢菌粉、荧光假单孢菌粉、蜡样芽胞杆菌粉、胶质芽孢杆菌粉、枯草芽孢杆菌粉、绿色木霉菌粉、巨大芽孢杆菌粉、苏云金杆菌粉、以及哈次木霉菌粉混合以得到粉状的所述复合生物制剂。

在一些实施例中，使用第一培养基培养并熟化淡紫紫孢菌，所述第一培养基按质量百分比计算包括0.5-2.0%的磷酸二氢钾、5.0-6.0%的蜜糖、0.5-1.5%的尿素、0.05-0.1%的氯化钠，余量为水，pH值为6.5-7.5，培养温度为30±1℃，熟化温度为35±1℃；

分别使用第二培养基培养并熟化荧光假单孢菌、蜡样芽胞杆菌、胶质芽孢杆菌，所述第二培养基按质量百分比计算包括1.5-2.5%的氨基酸、1.5-2.5%的磷酸二氢钾、0.5-2.0%的葡萄糖、0.1-1.1%的牛肉膏、0.1-1.1%的尿素，余量为水，pH值为6.5-7.5，培养温度为30±1℃，熟化温度为35±1℃；

分别使用第三培养基培养并熟化枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌、巨大芽孢杆菌、苏云金杆菌、哈次木霉菌，所述第三培养基按质量百分比计算包括5.0-6.0%的蜜糖、2.5-4.0%的葡萄糖、0.1-1.1%的硝酸钾、0.1-0.4%的氯化钠，余量为水，pH值为6.5-7.5，培养温度为30±1℃，熟化温度为35±1℃。

在一些实施例中，将淡紫紫孢菌粉、荧光假单孢菌粉、蜡样芽胞杆菌粉、胶质芽孢杆菌粉、枯草芽孢杆菌粉、绿色木霉菌粉、巨大芽孢杆菌粉、苏云金杆菌粉、以及哈次木霉菌粉通过震筛混合。

在本申请的第三个方面，提供了一种复合生物制剂的使用方法，其特征在于，将粉状的所述复合生物制剂洒向经过润湿的土壤。

在一些实施例中，该种复合生物制剂的使用方法包括以下步骤：

步骤一，以翻掘、抛洒的方式重新翻土；

步骤二，向被翻起并抛向空中的土壤洒水；

步骤三，向洒水后并仍在空中的土壤添加所述复合生物制剂。

在一些实施例中，在步骤三中，所述复合生物制剂通过震筛的方式投向所述土壤。

根据本发明的上述技术方案，本发明的一种复合生物制剂及其制备方法至少具有以下优点：

1、本申请的复合生物制剂通过合理选择多种菌种相复合，从而制得的复合生物制剂在投放至土壤后不仅能够对起到防治土传病害的功效，其还具备了固氮、溶磷、解钾的功效，所以能够提高土壤肥力；能够起到分解、腐化、转化有机填埋物的功效，所以能够较为高效的将有机填埋物（例如秸秆等）转化为营养物质以进一步提高土壤肥力。从而，本申请的复合生物制剂能够在防治土传病害的同时综合性的改良土壤结构、微生物结构。

2、进一步的，本申请的复合生物制剂通过特定比例混合从而得到1:1:1:1:1:1:1:1:0.2的黄金比例，避免了投放至土壤后各菌种之间产生抗衡，保证了本申请的复合生物制剂的效力。

3、本申请的复合生物制剂的制备方法通过将复合生物制剂中各个菌种单独培养熟化、单独制粉后再复合的方式，避免了多种菌种一起培养过程中因产生拮抗造成部分菌种死亡的问题，提高了本申请的制备方法中菌种存活率和菌落总数。

4、由于本申请的复合生物制剂中各菌种的存活率、菌落总数相对较高，所以本申请的复合生物制剂的使用方法可以采用先润湿土壤、再将粉状制剂加入被抛洒起的润湿土壤中的方式，从而简化了复合生物制剂的使用方法，不需要对土壤实施搅拌或研磨，并进而避免了因搅拌或研磨土壤造成的高温影响菌种的存活率的问题。所以，本申请的复合生物制剂的使用方法能够提高本申请的复合生物制剂的处理效率。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅是本申请的一些实施例，对于本领域技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本申请实施例的复合生物制剂的投放装置的结构示意图。

图2为本申请实施例的投放机构的结构示意图。

图3为本申请实施例的投放机构的另一个视角的结构示意图。

图中：100、机头，200、翻土机构，300、投放机构，310、混合仓，320、投放单元，330、洒水单元，311、侧板，312、顶板，313、斜顶板，314、后端板，315、底板，316、出土口，317、制剂入口，321、制剂箱，322、导轨，323、筛网罩，324、气缸。

具体实施方式

为了使本技术领域的人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本申请保护的范围。

在本申请实施例提供了一种复合生物制剂，包括复合菌种组份与营养组份。其中，复合菌种组份至少包括经过培养、熟化的淡紫紫孢菌、荧光假单孢菌、蜡样芽胞杆菌、胶质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌、巨大芽孢杆菌、苏云金杆菌、以及哈次木霉菌；营养组份至少包括蜜糖、水溶性营养粉、尿素、磷酸氢二钾、琼脂、以及牛肉膏。上述菌种均为现有技术可得。

本申请的复合生物制剂通过选择上述菌种并将这些菌种混合复合，制得的复合生物制剂不仅具备防治土传病害的功效，还具备了固氮、溶磷、解钾的功效，以及分解、腐化、转化有机填埋物的功效，所以能够提高土壤肥力，同时能够较为高效的将有机填埋物（例如秸秆等）转化为营养物质以进一步提高土壤肥力，从而使其能够在防治土传病害的同时改善土壤肥力、改良土壤结构。

在一些实施例中，复合菌种组份中淡紫紫孢菌、荧光假单孢菌、蜡样芽胞杆菌、胶质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌、巨大芽孢杆菌、以及苏云金杆菌均为等质量添加，且添加量均为15-25份；哈次木霉菌的添加量为3-5份。

营养组份中各成分的添加量分别为：蜜糖25-35份、水溶性营养粉12-17份、尿素12-17份、磷酸氢二钾12-17份、琼脂1.5-4份、以及牛肉膏1.5-4份。

通过特定比例混合从而得到各菌种质量比（依序为淡紫紫孢菌、荧光假单孢菌、蜡样芽胞杆菌、胶质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌、巨大芽孢杆菌、以及苏云金杆菌）1:1:1:1:1:1:1:1:0.2的比例，从而能够较为有效的避免投放后各菌种之间产生抗衡，保证了本申请的复合生物制剂的效力。

实施例1至实施例3的复合生物制剂中的复合菌种组份参考表1所示；实施例1至实施例3的复合生物制剂中的营养组份参考表1所示。

表1. 实施例1至实施例3的复合生物制剂中的复合菌种组份、营养组份添加量（按质量份计算）

菌种	实施例1	实施例2	实施例3
				淡紫紫孢菌	15份	20份	25份
荧光假单孢菌	15份	20份	25份
				蜡样芽胞杆菌	15份	20份	25份
胶质芽孢杆菌	15份	20份	25份
				枯草芽孢杆菌	15份	20份	25份
绿色木霉菌	15份	20份	25份
				巨大芽孢杆菌	15份	20份	25份
苏云金杆菌	3份	4份	5份
				蜜糖	25份	30份	35份
水溶性营养粉	12份	15份	17份
				尿素	12份	15份	17份
磷酸氢二钾	12份	15份	17份
				琼脂	1.5份	2份	4份
牛肉膏	1.5份	2份	4份

其中，实施例1至3中的水性营养粉分别为大豆蛋白粉、大豆蛋白粉和小麦粉的混合物、小麦粉。

本实施例的复合生物制剂通过以下方法制备得到，依序包括菌株培养的步骤、菌株熟化的步骤、菌种制粉的步骤和菌粉混合的步骤。

在菌株培养的步骤中，不分先后：（1）将淡紫紫孢菌置于第一培养基中，培养温度为30±1℃，培养时间为48-72h，得到第一样本，其中，第一培养基按质量百分比计算包括0.5-2.0%的磷酸二氢钾、5.0-6.0%的蜜糖、0.5-1.5%的尿素、0.05-0.1%的氯化钠，余量为水，pH值为6.5-7.5；（2）将荧光假单孢菌、蜡样芽胞杆菌、胶质芽孢杆菌分别置于第二培养基中，培养温度为30±1℃，培养时间为48-72h，得到第二至第四样本，其中，第二培养基按质量百分比计算包括1.5-2.5%的氨基酸、1.5-2.5%的磷酸二氢钾、0.5-2.0%的葡萄糖、0.1-1.1%的牛肉膏、0.1-1.1%的尿素，余量为水，pH值为6.5-7.5；（3）将枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌、巨大芽孢杆菌、苏云金杆菌、哈次木霉菌分别置于第三培养基培中，培养温度为30±1℃，培养时间为48-72h，得到第五至第九样本，其中，第三培养基按质量百分比计算包括5.0-6.0%的蜜糖、2.5-4.0%的葡萄糖、0.1-1.1%的硝酸钾、0.1-0.4%的氯化钠，余量为水，pH值为6.5-7.5。

在菌株熟化的步骤中，将第一至第九样本在现有技术的处理仪器（例如种子罐）中分别实施熟化，熟化温度为35±1℃，熟化时间为5天，得到第一至第九液体菌种。

在菌种制粉的步骤中，使用现有的菌种制粉技术分别获得上述菌种的粉状单一制剂。例如将上述第一至第九液体菌种按照1:10的质量比，在30±1℃的条件下加入熟小麦粉、熟大豆蛋白粉、熟木薯粉或两者、三者的混合物中，通过干燥介质（例如干空气）实施干燥，得到第一至第九粉状单一制剂。

在菌粉混合的步骤中，利用现有技术的振动筛或类似装置，以震筛的方式混合前述第一至第九粉状单一制剂。前述第一至第九粉状单一制剂的添加质量比为淡紫紫孢菌:荧光假单孢菌:蜡样芽胞杆菌:胶质芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌:绿色木霉菌:巨大芽孢杆菌:苏云金杆菌为1:1:1:1:1:1:1:1:0.2。

使用时，将制得的粉状的复合生物制剂洒向经过润湿的土壤，它包括以下步骤：

步骤一，以翻掘、抛洒的方式重新翻土；

步骤二，向被翻起并抛向空中的土壤洒水；

步骤三，向洒水后并仍在空中的土壤添加复合生物制剂。

特别的，在步骤三中，复合生物制剂通过震筛的方式投向土壤。参照图1-3所示，用于投放复合生物制剂的投放机构300，它可以与现有技术的能够行走的翻土装置配合使用，例如加装在具备车架、机头100、翻土机构200的翻土机，图中未示出行走机构。将投放机构300设置在翻土机构200的前进后方，通过车架安装，与翻土机主机体共用电气***和控制***。

本申请实施例的投放机构300包括混合仓310、投放单元320和洒水单元330。混合仓310包括一对侧板311、顶板312、与顶板312连接并向下倾斜的斜顶板313、以及底板315，斜顶板313、一对侧板311、底板315的一侧通过后端板314连接，另一侧为朝向翻土机构200的开口。底板315上开设有出土口316。斜顶板313与顶板312、后端板314之间均呈45°的角度，其上开设有制剂入口317。斜顶板313的顶面螺接或焊接固定设置有制剂箱321，复合生物制剂存放于该制剂箱321中，且制剂箱321通过制剂入口317连通与混合仓310内部连通。斜顶板313的内壁面上并位于制剂入口317的两侧螺接或焊接固定设置有一对导轨322，筛网罩323插接设置在一对导轨322上，并能够在气缸324的作用下沿一对导轨322滑移。

洒水单元330设置在顶板312上，是现有技术的结构，例如包括多个连入主水管的喷洒头，优选的是雾化喷头；主水管连入水箱，水箱优选设置在机头100的后方，以平衡配重。

实施投放时，将所需量的复合生物制剂装入制剂箱321，启动翻土机使其行走并开始翻土，翻土机构200掀起的土壤甩向混合仓310，洒水单元330先于投放单元320润湿土壤，而后投放单元320在气缸324的作用下以震动筛选的方式将复合生物制剂抛洒向润湿的土壤。

由于筛网罩323往复移动，能够将粉状复合生物制剂的下落轨道形成规律的抛洒，从而使投放更为均匀。另一个方面，现有技术的投放方式多将粉状制剂与水混合后进行投放，此方式不可避免的先遇水的土壤吸水更多所以需要搅拌、翻土以实现均匀投放，但搅拌、翻土会提高润湿土壤的温度从而降低菌种的活性。本实施例的投放方式与投放设备，整个过程在抛洒中完成，所以不会提高土壤的温度，进而保证了复合生物制剂的处理效力。

以上描述是为了进行图示说明而不是为了进行限制。通过阅读上述描述，在所提供的示例之外的许多实施方式和许多应用对本领域技术人员来说都将是显而易见的。因此，本教导的范围不应该参照上述描述来确定，而是应该参照所附权利要求以及这些权利要求所拥有的等价物的全部范围来确定。出于全面之目的，所有文章和参考包括专利申请和公告的公开都通过参考结合在本文中。在前述权利要求中省略这里公开的主题的任何方面并不是为了放弃该主体内容，也不应该认为申请人没有将该主题考虑为所公开的申请主题的一部分。

Claims (1)

1.一种复合生物制剂的使用方法，其特征在于，是将粉状的所述复合生物制剂洒向经过润湿的土壤，包括以下步骤：

步骤一，以翻掘、抛洒的方式重新翻土；

步骤二，向被翻起并抛向空中的土壤洒水；

步骤三，向洒水后并仍在空中的土壤添加所述复合生物制剂；

在步骤三中，所述复合生物制剂通过震筛的方式投向所述土壤；

所述复合生物制剂，包括复合菌种组份与营养组份，所述复合菌种组份至少包括经过培养的淡紫紫孢菌、荧光假单孢菌、蜡样芽胞杆菌、胶质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、绿色木霉菌、巨大芽孢杆菌、苏云金杆菌、以及哈次木霉菌；所述营养组份至少包括蜜糖、水溶性营养粉、尿素、磷酸氢二钾、琼脂、以及牛肉膏；

用于投放所述复合生物制剂的投放机构包括混合仓、投放单元和洒水单元，所述混合仓包括一对侧板、顶板、与所述顶板连接并向下倾斜的斜顶板、以及底板，所述斜顶板、一对所述侧板、所述底板的一侧通过后端板连接，另一侧为朝向翻土机构的开口，所述底板上开设有出土口，所述斜顶板与所述顶板、所述后端板之间均呈45°的角度，其上开设有制剂入口，所述斜顶板的顶面螺接或焊接固定设置有制剂箱，所述复合生物制剂存放于所述制剂箱中，且所述制剂箱通过制剂入口连通与所述混合仓内部连通，所述斜顶板的内壁面上并位于所述制剂入口的两侧螺接或焊接固定设置有一对导轨，筛网罩插接设置在一对所述导轨上，并能够在气缸的作用下沿一对所述导轨滑移；

实施投放时，将所需量的所述复合生物制剂装入所述制剂箱，启动翻土机使其行走并开始翻土，所述翻土机构掀起的土壤甩向所述混合仓，所述洒水单元先于所述投放单元润湿土壤，而后所述投放单元在气缸的作用下以震动筛选的方式将所述复合生物制剂抛洒向润湿的土壤。