CN116120219A - 一种多取代吡咯类化合物及其制备方法和在制备hbv衣壳蛋白抑制剂中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种多取代吡咯类化合物及其制备方法和在制备HBV衣壳蛋白抑制剂中的应用，该多取代吡咯类化合物结构通式如下所示，其具有很好的抗HBV活性，EC50值低至纳摩尔甚至皮摩尔级别，可作为潜在的抗HBV先导化合物用于制备HBV衣壳蛋白抑制剂。

Description

一种多取代吡咯类化合物及其制备方法和在制备HBV衣壳蛋白抑制剂中的应用
技术领域
本发明涉及药物研发技术领域，特别是关于一种多取代吡咯类化合物及其制备方法和在制备HBV衣壳蛋白抑制剂中的应用。
背景技术
乙型肝炎病毒(HBV)感染已成为全球性的公共健康问题，全球目前已有超3亿HBV感染者。HBV主要有血液传播、性传播和母婴传播3种传播途径。HBV感染可引起急性和慢性肝炎，继而引发肝脏病变，每年约数百万的患者死于HBV感染导致的肝功能衰竭、肝纤维化、肝硬化和肝癌。我国是乙型肝炎的高发区，一般人群的HBsAg阳性率为9.09％，估计有两千万到三千万的人是慢性乙型肝炎患者，是我国重大的卫生安全问题。
目前，乙肝疫苗已经在我国新生儿中普遍接种，但成人乙肝疫苗接种率低，发病率高，因此还需扩大接种人群范围。此外，一些抗病毒药物也早已进入临床使用，目前，抗乙肝治疗主要是干扰素(IFN)和核苷类似物两大类药物。IFN包括IFNα和聚乙二醇IFNα，除了发挥直接抗病毒作用，也参与免疫调节过程，但是INF价格昂贵且副作用大。核苷类药物则包括拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦、替比夫定和替诺福韦等，通过抑制逆转录过程，破坏病毒复制，抗病毒作用较强，但停药后复发率高，长期用药存在耐药问题。现有的HBV治疗方法均不能彻底清除病毒的共价闭合环状DNA(cccDNA)，从而导致病情复发，无法治愈乙肝。
因此，迫切需要开发新的安全有效的HBV治疗药物，其可以通过与核苷类似物不同的机制发挥抗病毒作用，并且减少或彻底清除病毒cccDNA，实现对HBV感染的临床治愈甚至完全治愈。此外，开发新靶点的抗HBV药物有助于缓解药物的耐药性问题。
HBV衣壳是由90个或120个核心蛋白二聚体组装形成的对称的20面体结构。HBV衣壳的形成对病毒基因组起到保护作用，加快衣壳蛋白降解或者阻断衣壳蛋白装配，都会影响病毒复制。近年来，广大科学研究工作者开始对HBV衣壳蛋白抑制剂的开发产生了浓厚兴趣，但是部分研究工作处于临床前或临床早期阶段便已终止，目前HBV衣壳蛋白抑制剂领域还未有药物上市。因此，需要提供结构多样化的、能够预防及治疗HBV感染的有效衣壳蛋白抑制剂。
发明内容
本发明的目的在于提供一种多取代吡咯类化合物，其具有抗HBV功能。
本发明的另一目的是提供上述多取代吡咯类化合物的制备方法。
本发明的再一目的是提供上述多取代吡咯类化合物的用途。
本发明技术方案详述如下：
第一方面，本发明提供了一种多取代吡咯类化合物，结构通式如下：
Figure BDA0004020117430000021
其中，
R1选自带有取代基的芳香环结构或CR3R4；其中芳香环结构选自苯环、吡啶环或嘧啶环；取代基选自单取代、双取代或三取代芳香环结构；其中取代基种类选自F、Cl、Br、CN、C1-8烷基或任意位置被一个或多个杂原子取代的长度为3-8的连接链，所述的杂原子包括O、S、N；
R3选自H、-(CH2)nOH、***取代基、炔丙基、乙烯基或-(CH2)nNHR5；
n选自1、2、3、4或5；
R5选自H、叔丁氧羰基或苄基；
R4选自H、-CONHR6、-COR7或带有取代基的环状结构；其中环状结构选自环己烷、环戊烷、环庚烷、环己酮、环戊酮或环庚酮；取代基选自H、OH、SH、F、Cl、Br或CN；
R6选自C1-3烷基、C1-3烷氧基和带有取代基的芳香环结构，芳香环结构选自苯环、吡啶环、嘧啶环；取代基选自单取代、双取代以及三取代芳香环结构；其中取代基种类选自F、Cl、Br、CN、C1-3烷基；
R7选自带羟基取代的五元含氮杂环结构，五元含氮杂环选自四氢吡咯；
L选自酰胺基、亚胺基或杂环基，其中杂环基选自
Figure BDA0004020117430000031
R2选自带有取代基的芳香环结构，芳香环结构选自苯环、吡啶环、嘧啶环；取代基选自单取代、双取代以及三取代芳香环结构；其中取代基种类选自F、Cl、Br、CN、C1-8烷基或任意位置被一个或多个杂原子取代的长度为3-8的连接链，所述的杂原子包括O、S、N。
本发明的上述化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括(R)-和(S)-对映体、非对映异构体及其外消旋混合物和其他混合物，所有这些异构体和混合物都属于本发明的范围之内。
在本发明的一实施方式中，上述多取代吡咯类化合物结构式如下任一所示：
Figure BDA0004020117430000041
第二方面，本发明提供了上述一些多取代吡咯类化合物的制备方法。
第三方面，本发明提供了上述多取代吡咯类化合物在制备HBV衣壳蛋白抑制剂中的应用。
第四方面，本发明提供了一种HBV衣壳蛋白抑制药物，包含上述多取代吡咯类化合物或其药学上可接受的盐。
在本发明的一实施方式中，所述的药物，还包括药学上可接受的辅料、辅助剂和/或载体；所述多取代吡咯类化合物或其药学上可接受的盐的含量为有效治疗剂量。
定义和说明
除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。
这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机胺或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。
本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。
术语“有效治疗剂量”指的是在给予需要这样的治疗的哺乳动物时，足以有效治疗的通式化合物的量。治疗有效量将依赖于所用的治疗药剂的特定活性、患者的年龄、生理状况、其它疾病状态的存在和营养状况而变化。此外，患者可能正接受的其它药物治疗将影响要给予的治疗药剂的治疗有效量的确定。
术语“治疗”意味着对于哺乳动物体内疾病的任何治疗，包括：(i)防止疾病，即造成疾病的临床症状不发展；(ii)抑制疾病，即阻止临床症状的发展；和/或(iii)减轻疾病，即造成临床症状的消退。
术语“药学上可接受的辅料、辅助剂和/或载体”包括任何和全部的溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌药剂、等渗和吸收延迟剂等。这样的介质和药剂用于药学活性物质在本领域是众所周知的。除非任何常规介质或药剂与活性成分不相容，其在治疗组合物中的应用是可预期的。补充的活性成分也可以并入组合物中。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明提供的新型多取代吡咯类化合物，制备条件温和，成本低，产品具有很好的抗HBV活性，可作为抗HBV衣壳蛋白先导化合物进行药物开发。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行详细描述，但并不意味着对本发明任何不利限制。本文已经详细地描述了本发明，其中也公开了其具体实施例方式，对本领域的技术人员而言，在不脱离本发明精神和范围的情况下针对本发明具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。
实施例1
Figure BDA0004020117430000061
合成路线：
Figure BDA0004020117430000062
步骤1：化合物1c的合成
将氢化钠(0.6g,15.00mmol)溶于四氢呋喃(60mL)，0℃下缓慢加入2-咪唑烷酮(1a,1.04g,12.09mmol)的四氢呋喃溶液(30mL)，室温下搅拌1h后缓慢加入3,4-二氟溴苄(1b,1.9mL,15.00mmol)，回流6h。向反应液中加入50mL水，搅拌2分钟，加入二氯甲烷萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩经硅胶柱层析(二氯甲烷:CH3OH＝100:1)得到化合物1c(0.8g,产率31.5％)。
步骤2：化合物1g的合成
将乙酰乙酸乙酯(1d,12.0g,92.2mmol)溶于醋酸(40mL)中，留待备用。将亚硝酸钠(10.0g,110.64mmol)溶于水(12mL)中并冷却至0℃，并于冰浴下缓慢加入至上述乙酰乙酸乙酯的醋酸溶液中，保持内温不高于8℃，室温反应过夜。随后往反应液中加入乙酰丙酮(1f,30g,299.6mmol),并于0℃下缓慢加入锌粉(14g,214.13mmol)，升温至110℃下反应4h。反应液趁热倒入160mL冰水中，析出固体用冰水(120mL×3)洗涤3次，将固体溶于95乙醇(60mL)，趁热过滤，固体干燥即得到化合物1g。
步骤3：化合物1h的合成
将化合物1g(3.0g,14.34mmol)和氢氧化钾(1.5g,26.74mmol)依次加入到乙二醇(10mL)中，加热至160℃下反应4h。用二氯甲烷和水进行萃取，有机相浓缩后所得固体经干燥后即得到化合物1h(1.6g,产率83％)。
步骤4：化合物1i的合成
将化合物1h(6.0g,43.74mmol)溶于DMF(N,N-二甲基甲酰胺)中，冰浴下加入氢化钠(1.6g,65.61mmol)，室温下搅拌2h后加入碘甲烷(7.4g,52.48mmol)室温下搅拌8h，反应液用乙酸乙酯和水进行萃取，有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物1i。
步骤5：化合物1j的合成
将化合物1i(200mg,1.32mmol)溶于二氯甲烷，随后加入NIS(N-碘代丁二酰亚胺，600mg,2.64mmol)，室温搅拌1h。反应完后加入硫代硫酸钠饱和水溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相经干燥后并浓缩，经硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝50:1)得到白色固体1j(325mg,产率88％)。
步骤6：化合物1l的合成
将化合物1j(40mg,0.14mmol)、1k(37mg,0.17mmol)、醋酸铜(2.5mg,0.014mmol)、N,N'-二甲基-1,2-环己二胺(2mg,0.014mmol)、碳酸铯(74mg,0.28mmol)依次加入到N,N'-二甲基甲酰胺(2mL)中，100℃下反应24h。乙酸乙酯和水萃取，有机相合并有机相经干燥后并浓缩，经硅胶柱层析得到化合物1l。
步骤7：化合物1m的合成
将化合物1l(110mg,0.30mmol)溶于吡啶(5mL)中，然后加入二氧化硒(50mg,0.45mmol)，100℃下反应3h。过滤后旋干经硅胶柱层析得到化合物1m。
步骤8：化合物1的合成
将化合物1m(60mg,0.15mmol)溶于二氯甲烷，然后加入炔丙胺(13mg,0.23mmol)和三乙胺(46.6mg,0.45mmol)，0℃下加入草酰氯(25.3mg,0.20mmol)，再滴入2滴DMF，转至室温反应。反应浓缩后经硅胶柱层析得到终产品1。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.21–7.10(m,2H),7.05(s,1H),6.83(s,1H),4.41(s,2H),4.16(d,J＝2.8Hz,2H),3.61(d,J＝8.0Hz,2H),3.47–3.28(m,5H),2.41(s,3H),2.28(s,1H),2.09(s,3H)。
实施例2
Figure BDA0004020117430000081
合成路线：
Figure BDA0004020117430000091
步骤1：化合物2b的合成：
在双颈瓶中加入氢氧化钾(5g,0.090mol,3eq)和溶剂DMSO(二甲基亚砜，50mL)，抽真空，置换氮气3次，转移至冰盐浴中，加入化合物2a(5g,0.030mol,1eq)、碘甲烷(6.4g,0.045mol,1.5eq)，室温下反应4小时。反应结束后，用***和纯化水萃取，无水硫酸钠干燥，抽滤，旋蒸得到化合物2b。
步骤2：化合物2c的合成：
在双颈瓶中加入化合物2b(0.5g,0.0028mol,1eq)、3,4-二氟苯胺(0.53g,0.0042mol,1.5eq)和溶剂THF(四氢呋喃，10mL)，抽真空，置换氮气，转移至冰浴中，滴加双(三甲基硅基)氨基钠(2mol/L in THF)(4.2mL,0.0083mol,3eq)，室温下反应1小时。反应结束后，反应液中加入氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗产品。粗产品用正庚烷洗涤得到化合物2c。
步骤3：化合物2e的合成：
在三颈瓶中加入化合物2c(0.8g,0.003mol,1eq)和溶剂二氯甲烷(40mL)，抽真空，置换氮气3次，转移至冰浴中，加入AlCl3(1.21g,0.009mol,3eq)、滴加2-氯-2-氧代乙酸乙酯(1.24g,0.009mol,3eq)，随后转移至室温反应过夜。反应结束后，加入冰水淬灭，硅藻土过滤，用二氯甲烷萃取，分液，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得到化合物2d。用乙醇(30mL)溶解样品，滴加10％氢氧化钠溶液(30mL)。室温下反应1小时。反应结束后，旋蒸去除溶剂，用乙酸乙酯和水萃取，保留水层，水层用盐酸酸化，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物2e。
步骤4：化合物2-1的合成：
在双颈瓶中加入化合物2e(50mg,0.15mmol,1eq)、1-氨基-4-羟基环己烷甲醇盐酸盐(42mg,0.23mmol,1.5eq)和溶剂DMF(二甲基甲酰胺，5mL)。转移至冰浴中，加入HATU(2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，87mg,0.23mmol,1.5eq)、随后滴加DIPEA(N，N-二异丙基乙胺，58mg,0.45mmol,3eq)。室温下搅拌1小时。反应结束后，反应液中加入氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗产品。粗产品通过硅胶柱层析纯化得到化合物2-1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.37(s,1H),7.85(d,J＝3.6Hz,2H),7.51–7.33(m,2H),4.74(t,J＝5.5Hz,1H),3.58(s,3H),3.53(d,J＝5.5Hz,2H),2.43(s,3H),2.27(s,3H),2.14(d,J＝9.8Hz,1H),1.83(t,J＝6.3Hz,1H),1.61(d,J＝8.5Hz,2H),1.45–1.33(m,4H)。
步骤4：化合物2-2的合成：
在双颈瓶中加入化合物2e(100mg,0.3mmol,1eq)、(1-氨基环己基)甲醇盐酸盐(74mg,0.45mmol,1.5eq)和溶剂DMF(5mL)。转移至冰浴中，加入HATU(174mg,0.45mmol,1.5eq)、随后滴加DIPEA(116mg,0.45mmol,3eq)。室温下搅拌1小时。反应结束后，反应液中加入氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗产品。粗产品通过硅胶柱层析纯化得到化合物2-2。1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ10.34(s,1H),7.93–7.82(m,1H),7.77(s,1H),7.51–7.32(m,2H),4.71(t,J＝5.6Hz,1H),3.59(s,3H),3.55(d,J＝5.2Hz,2H),2.42(s,3H),2.27(s,3H),2.08–2.02(m,2H),1.48(d,J＝17.2Hz,4H),1.31–1.16(m,4H).
实施例3
Figure BDA0004020117430000111
合成路线：
Figure BDA0004020117430000112
步骤1：化合物3b的合成
将KOH(15g,269.4mmol)溶于DMF(100mL)中，0℃下加入化合物3a(15g,89.8mmol)并搅拌30分钟，然后加入碘甲烷(8.4mL,134.7mmol)，室温下反应4h。用乙酸乙酯和水继续萃取，有机相合并并浓缩，经硅胶柱层析纯化得到黄色固体3b。
步骤2：化合物3d的合成
将化合物3b(4g,22.09mmol)、3c(4.26g,33.13mmol)依次加入四氢呋喃中，并于0℃下加入LiHMDS(二(三甲基硅基)氨基锂，1mol/L in四氢呋喃,64mL,64.00mmol)，升至室温后反应过夜。加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，并用乙酸乙酯萃取，合并有机相并浓缩，所得残留物经硅胶柱层析纯化得到产品3d(5.33g,91％)。
步骤3：化合物3f的合成
将化合物3d(700mg,2.60mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，并于0℃下加入3e(954.6mg,7.03mmol)和三氯化铝(858mg,6.5mmol)，室温反应。随后将反应液倒入冰水中，硅藻土过滤并用二氯甲烷萃取，浓缩后不经纯化直接用于下一步。将所得粗产品溶于乙醇，并加入过量10％的氢氧化溶液，室温反应1h，旋干乙醇，EA(乙酸乙酯)萃取，弃去有机相，水相酸化后用乙酸乙酯萃取，旋干后用***洗涤得到化合物3f。
步骤4：化合物3i的合成
将化合物3g(2.0g,12.80mmol)溶于四氢呋喃(20mL)，随后依次加入3h(1.55g,12.80mmol)和Ti(OEt)4(钛酸乙酯，3.4mL,25.60mmol)，室温反应16h。将反应液旋干后经硅胶柱层析纯化得到化合物3i。
步骤5：化合物3k的合成
向-78℃的化合物3j的四氢呋喃溶液(4.62mL,4.62mmol)中缓慢加入化合物3i(400mg,1.54mmol)的四氢呋喃溶液(2mL,)，反应液于2h内缓慢升温至室温，继续搅拌30分钟。反应结束后，0℃下加入饱和氯化铵溶液淬灭，并用乙酸乙酯萃取，有机相合并并浓缩，所得残留物经硅胶柱层析纯化得到化合物3k(200mg,45％)。
步骤6：化合物3l的合成
将化合物3k(50mg,0.17mmol)溶于甲醇/水(1:10,3.3mL)的混合溶液中，随后加入硝酸铈铵(111mg,0.21mmol)，室温下反应1.5h。反应结束后旋干经硅胶柱层析纯化得到化合物3l。
步骤7：化合物3m的合成
0℃下向3l(100mg,0.41mmol)的四氢呋喃溶液中逐滴加入三氟化硼的四氢呋喃溶液(1.64mL,1.64mmol)，室温下搅拌3h。随后将反应液冷却至0℃，缓慢加入2mL甲醇，搅拌30分钟，浓缩后将残留物溶于四氢呋喃(5mL)，随后加入3.2mL的3M氢氧化钠溶液以及3.2mL的30％双氧水，室温反应过夜。反应液用乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物3m。
步骤8：化合物3n的合成
将化合物3m(100mg,0.38mmol)溶于1mL甲醇，随后加入4M盐酸乙酸乙酯溶液1mL，室温反应过夜。加水稀释，乙酸乙酯萃取除去杂质，水层旋干后得到产物3n。
步骤9：化合物3的合成
将化合物3f(79.3mg,0.236mmol)溶于DMF，随后依次加入3n(45.0mg,0.283mmol)、HATU(108mg,0.283mmol)、DIPEA(0.047mL,0.283mmol)，室温反应过夜。反应液旋干后经硅胶柱层析得到黄色固体化合物3。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.41(s,1H),7.88(dd,J＝14.6,8.9Hz,2H),7.42(dd,J＝18.2,7.9Hz,2H),4.56–4.24(m,1H),3.59(s,3H),3.51(dd,J＝15.3,7.8Hz,2H),2.43(s,3H),2.27(s,3H),2.06–1.74(m,4H),1.71–1.52(m,2H),1.45–1.27(m,4H)。
实施例4
Figure BDA0004020117430000131
合成路线：
Figure BDA0004020117430000141
步骤1：化合物4b的合成
将化合物4a(0.4g,11.4mmol)溶于10mL甲苯，-78℃下加入正丁基锂(2.5M,3.3mL,8.36mmol)，搅拌15分钟后加入化合物3i(1g,3.8mmol)和三甲基铝的甲苯溶液(2M,2.3mL,4.6mmol)，搅拌2h。加入饱和硫酸钠溶液淬灭反应,，过滤，乙酸乙酯萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物4b。
步骤2：化合物4c的合成
将化合物4b(1.2g,3.36mmol)溶于四氢呋喃，0℃下加入8mL TBAF(1M)，室温反应2h。饱和氯化氨溶液淬灭，乙酸乙酯萃取。有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到白色固体4c(640mg,68％)。
步骤3：化合物4d的合成
将化合物4c(300mg,1.24mmol)溶于甲苯，抽无水无氧，随后加入TMSN3(186mg,1.62mmol)、CuTc(噻吩-2-甲酸铜,47.5mg,0.25mmol)，100℃下反应过夜。饱和碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物4d(220mg,54％)。
步骤4：化合物4e的合成
将化合物4d(400mg,1.22mmol)溶于甲醇/水(1:10,11mL)的混合溶液中，随后加入硝酸铈铵(1g,1.83mmol)，室温下反应5h。反应结束后旋干经硅胶柱层析纯化得到化合物4e。
步骤5：化合物4f的合成
将化合物4e(33mg,0.12mmol)溶于四氢呋喃，冰浴下加入硼氢化钠(5.3mg,0.14mmol)，室温反应2h。水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物4f。
步骤6：化合物4g的合成
将化合物4f(286.4mg,1.0mmol)溶于2mL甲醇，随后加入4M盐酸乙酸乙酯溶液2mL，室温反应过夜。加水稀释，乙酸乙酯萃取除去杂质，水层旋干后得到产物4g。
步骤7：化合物4的合成
将化合物3f(79.3mg,0.236mmol)溶于DMF，随后依次加入4g(51.6mg,0.283mmol)、HATU(108mg,0.283mmol)、DIPEA(0.047mL,0.283mmol)，室温反应过夜。反应液旋干后经硅胶柱层析得到化合物4。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ13.76(s,1H),8.96(s,1H),7.89(s,1H),7.70–7.63(m,1H),7.61–7.52(m,1H),7.29–7.20(m,1H),7.11(s,1H),3.85(s,3H),3.79–3.65(m,1H),2.82–2.71(m,2H),2.47(d,J＝6.7Hz,1H),2.42(d,J＝0.7Hz,6H),2.05–1.91(m,2H),1.87–1.78(m,2H),1.75–1.65(m,2H).
实施例5
Figure BDA0004020117430000151
合成路线：
Figure BDA0004020117430000152
步骤1：化合物5b的合成：
在三颈瓶中加入化合物5a(5g,0.406mol,1eq)和溶剂1,2-二氯乙烷(100mL)，抽真空，置换氮气3次，分三批加入AlCl3(24.36g,0.183mol,4.5eq)、加入硝基甲烷(7.43g,0.122mol,3.0eq)，转移至冰浴中，滴加2-氯-2-氧代乙酸乙酯(8.31g,0.609mol,1.5eq)，随后转移至室温反应6h。反应结束后，加入冰水淬灭，硅藻土过滤，用二氯甲烷萃取，分液，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得到化合物5b。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ10.71(s,1H),9.65(s,1H),4.41(d,J＝6.9Hz,2H),2.55(s,3H),2.50(s,3H),1.40(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤2：化合物5c的合成：
在三颈瓶中加入化合物5b(0.15g,0.0007mol,1eq)和溶剂乙醇(10mL)，室温下开启搅拌，称取氢氧化钠(0.13g,0.003mol,5eq)溶于纯化水(2mL)，滴加入反应瓶中，室温下反应1小时。反应结束后，旋蒸去除溶剂，用乙酸乙酯和水萃取，保留水层，水层用盐酸酸化，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物5c。1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.74–12.42(m,1H),9.94–9.58(m,1H),3.48–3.30(m,1H),2.45(s,3H),2.42(s,3H).
步骤3：化合物5d的合成：
在双颈瓶中加入化合物5c(90mg,0.46mmol,1eq)、CDI(112mg,0.69mmol,1.5eq)，加入DMF(5mL)，随后滴加炔丙胺(38mg,0.69mmol,1.5eq)。室温下搅拌过夜。反应结束后，反应液中加入氯化铵水溶液和乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗产品，石油醚洗涤得到化合物5d。1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ12.43(s,1H),9.68(s,1H),9.15(d,J＝12.3Hz,1H),5.55(s,6H),4.01(s,3H),2.42(s,3H),2.38(s,3H).
步骤4：化合物5的合成：
在研钵中加入化合物5d(50mg,0.22mmol,1eq)、邻氨基苯甲醇(30mg,0.24mmol,1.1eq)，加入2滴乙酸。室温下研磨15min。用厚制备板分离得到化合物5。1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ9.16(t,J＝5.7Hz,1H),8.37(d,J＝2.7Hz,1H),7.51(d,J＝7.5Hz,1H),7.30(t,J＝7.6Hz,1H),7.22(t,J＝7.5Hz,1H),7.08(d,J＝7.8Hz,1H),5.06(s,1H),4.69(s,2H),4.06(dd,J＝5.7,2.7Hz,2H),3.21(d,J＝2.7Hz,1H),2.49(d,J＝2.7Hz,3H),2.40(d,J＝2.6Hz,3H)。
实施例6
Figure BDA0004020117430000171
合成路线：
Figure BDA0004020117430000172
步骤1：化合物11b的合成
将化合物3c(4.06g,29.19mmol)、11a(4.92g,24.32mmol)、HATU(10.95g,29.19mmol)、DIPEA(3.72g,29.19mmol)依次加入到DMF中，室温反应过夜。乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物11b。
步骤2：化合物11c的合成
将化合物11b(316.3mg,1.00mmol)溶于1mL甲醇中，随后冰浴下加入2mL盐酸甲醇溶液，室温反应过夜，旋干即得粗产品11c。
步骤3：化合物11的合成
将化合物3f(129.6mg,0.38mmol)溶于DMF，0℃下加入11c(100mg,0.46mmol)、HATU(175.9mg,0.46mmol)、DIPEA(109.6mg,0.85mmol)依次加入到DMF中，室温反应过夜。乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物11(130mg,63％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.40(d,J＝11.4Hz,2H),8.86(d,J＝7.5Hz,1H),8.01–7.69(m,2H),7.59–7.21(m,4H),5.16(t,J＝5.4Hz,1H),3.87–3.68(m,2H),3.58(s,3H),2.38(s,3H),2.22(s,3H)。
实施例7
Figure BDA0004020117430000181
合成路线：
Figure BDA0004020117430000182
步骤1：化合物12c的合成
将化合物12a(1g,2.2mmol)、12b(312mg,2.64mmol)、HATU(1g,2.64mmol)、DIPEA(341.0mg,2.64mmol)依次加入到DMF中，室温反应过夜。乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物12c。
步骤2：化合物12d的合成
将化合物12c(50mg,0.088mmol)溶于二氯甲烷，随后加入DBU(0.039mL,0.264mmol)，直接旋干过柱得到化合物12d。
步骤3：化合物12e的合成
将化合物12d(150mg,0.45mmol)、3f(143mg,0.38mmol)、HATU(171mg,0.45mmol)、DIPEA(56.0mg,0.45mmol)依次加入到DMF中，室温反应过夜。乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物12e。
步骤4：化合物12的合成
将化合物12e(100mg,0.3mmol)溶于1mL二氯甲烷，冰浴下加入0.5mL三氟乙酸，室温下反应1h。加入1,4-二氧六环随后旋干，得到纯品化合物12。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.69(s,1H),10.42(s,1H),9.15(d,J＝7.4Hz,1H),8.12(s,1H),7.87(d,J＝15.1Hz,2H),7.64–7.52(m,2H),7.41(dd,J＝15.9,7.4Hz,2H),4.51(dd,J＝13.7,7.2Hz,1H),3.58(s,3H),2.83(d,J＝6.1Hz,2H),2.38(s,3H),2.22(s,3H),1.90–1.58(m,4H)。
实施例8
Figure BDA0004020117430000191
合成路线：
Figure BDA0004020117430000192
步骤1：化合物14b的合成
将化合物12a(100mg,0.22mmol)、14a(32mg,0.26mmol)、HATU(99mg,0.26mmol)、DIPEA(64mg,0.49mmol)依次加入到DMF中，室温反应过夜。乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物14b。
步骤2：化合物14c的合成
将化合物14b(60mg,0.12mmol)溶于二氯甲烷，随后加入DBU(52mg,0.34mmol)，直接旋干过柱得到化合物14c。
步骤3：化合物14的合成
将化合物3f(47mg,0.14mmol)溶于二氯甲烷中，冰浴下加入EDCI(27mg,0.14mmol)、HOBt(21mg,0.15mmol)、三乙胺(14mg,0.14mmol)，10分钟后加入14c(40mg,0.17mmol)、室温反应过夜。二氯甲烷和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物14。
实施例9HBV体外测试定量qPCR试验
1、实验目的：
通过实时定量qPCR试验(real time-qPCR)检测HepG2.2.15细胞内的HBV DNA含量，以化合物的EC50值为指标，来评价化合物对HBV的抑制作用。
2、实验材料：
2.1细胞系：HepG2.2.15细胞
HepG2.2.15细胞培养基(DMEM/F12；10％血清；100units/ml青霉素和10fg/mL链霉素；1％非必需氨基酸；2mM左旋谷氨酰胺；300μg/mL遗传霉素)。
2.2试剂：
胰酶；DPBS；DMSO；高通量DNA纯化试剂盒(QIAamp 96DNA Blood Kit)；
定量快速启动通用探针试剂(FastStart Universal Probe Master)。
2.3耗材与仪器：
96孔细胞培养板(Corning)；CO2培养箱(HERA-CELL)；光学封板膜(ABI)；定量PCR96孔板(Applied Biosystems)；荧光定量PCR仪(Applied Biosystems)。
3、实验步骤和方法：
3.1接种HepG2.2.15细胞(4×104细胞/孔)到96孔板，37℃，5％ CO2培养过夜。
3.2第二天，稀释化合物，共8个浓度，3倍梯度稀释。加不同浓度化合物到培养孔中，双复孔。培养液中DMSO的终浓度为1％。1μM GLS4作为100％抑制对照；1％的DMSO作为0％抑制对照。
3.3第五天，更换含有化合物的新鲜培养液
3.4第八天收取培养孔中的培养液，使用高通量DNA纯化试剂盒提取DNA，具体步骤参照该产品说明书。
3.5PCR反应液的配制如表所示：
项目 配置1个孔所需体积(微升)
定量快速启动通用探针试剂 12.5
上游引物(10微摩尔) 1
下游引物(10微摩尔) 1
探针(10微摩尔) 0.5
上游引物序列：GTGTCTGCGGCGTTTTATCA，
下游引物序列：GACAAACGGGCAACATACCTT；
探针序列：5'+FAM+CCTCTKCATCCTGCTGCTATGCCTCATC+TAMRA-3'。3.6在96孔PCR板中每孔加入15μL的反应混合液，然后每孔加入10μL的样品DNA或HBV DNA的标准品。
3.7PCR的反应条件为：95℃加热10分钟；然后95℃变性15秒，60℃延伸1分钟，共40个循环。
3.8分析：
3.8.1计算抑制百分比：％Inh.＝【1-(样品中DNA拷贝数-1μM GLS4中DNA拷贝数)/(DMSO对照中DNA拷贝数-1μM GLS4中DNA拷贝数)】×100％。3.8.2计算EC50:使用GraphPadPrism软件计算化合物对HBV的50％抑制浓度(EC50)值。
表1多取代吡咯类化合物的抗HBV活性
化合物编号 <![CDATA[EC<sub>50</sub>(nM)]]>
2-1 4
2-2 0.85
3 3.44
4 5.06
11 14.7
12 512.3
上述实验结果表明：化合物2-1、2-2、3、4、11均具有很好的抗HBV活性，EC50值低至纳摩尔甚至皮摩尔级别(化合物2-2)，可作为潜在的抗HBV先导化合物进一步开发。
前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。

Claims (6)

1.一种多取代吡咯类化合物，其特征在于，结构通式如下：
Figure FDA0004020117420000011
其中，
R1选自带有取代基的芳香环结构或CR3R4；其中芳香环结构选自苯环、吡啶环或嘧啶环；取代基选自单取代、双取代或三取代芳香环结构；其中取代基种类选自F、Cl、Br、CN、C1-8烷基或任意位置被一个或多个杂原子取代的长度为3-8的连接链，所述的杂原子包括O、S、N；
R3选自H、-(CH2)nOH、***取代基、炔丙基、乙烯基或-(CH2)nNHR5；
n选自1、2、3、4或5；
R5选自H、叔丁氧羰基或苄基；
R4选自H、-CONHR6、-COR7或带有取代基的环状结构；其中环状结构选自环己烷、环戊烷、环庚烷、环己酮、环戊酮或环庚酮；取代基选自H、OH、SH、F、Cl、Br或CN；
R6选自C1-3烷基、C1-3烷氧基和带有取代基的芳香环结构，芳香环结构选自苯环、吡啶环、嘧啶环；取代基选自单取代、双取代以及三取代芳香环结构；其中取代基种类选自F、Cl、Br、CN、C1-3烷基；
R7选自带羟基取代的五元含氮杂环结构，五元含氮杂环选自四氢吡咯；
L选自酰胺基、亚胺基或杂环基，其中杂环基选自
Figure FDA0004020117420000012
R2选自带有取代基的芳香环结构，芳香环结构选自苯环、吡啶环、嘧啶环；取代基选自单取代、双取代以及三取代芳香环结构；其中取代基种类选自F、Cl、Br、CN、C1-8烷基或任意位置被一个或多个杂原子取代的长度为3-8的连接链，所述的杂原子包括O、S、N。
2.根据权利要求1所述的多取代吡咯类化合物，其特征在于，结构式如下任一所示：
Figure FDA0004020117420000021
3.权利要求2所述多取代吡咯类化合物的制备方法，其特征在于，
当所述多取代吡咯类化合物结构式如下1所示时，
Figure FDA0004020117420000022
制备方法包括以下步骤：
(1)化合物1c的合成
将氢化钠溶于四氢呋喃，0℃下缓慢加入含2-咪唑烷酮的四氢呋喃溶液，室温下搅拌后缓慢加入3,4-二氟溴苄，回流反应，反应结束后向反应液中加入水，搅拌，再加入二氯甲烷萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，经硅胶柱层析，洗脱液为体积比二氯甲烷:CH3OH＝100:1的混合液，得到化合物1c，
Figure FDA0004020117420000031
(2)化合物1g的合成
将亚硝酸钠溶于水并冷却至0℃，并于冰浴下缓慢加入至含乙酰乙酸乙酯的醋酸中，保持内温不高于8℃，室温反应过夜；反应结束后往反应液中加入乙酰丙酮，并于0℃下缓慢加入锌粉，升温至110℃下继续反应；反应结束后反应液趁热倒入冰水中，析出固体用冰水洗涤，将固体溶于乙醇水溶液，趁热过滤，固体干燥即得到化合物1g，
Figure FDA0004020117420000032
(3)化合物1h的合成
将化合物1g和氢氧化钾依次加入到乙二醇中，加热至160℃下反应；反应结束后用二氯甲烷和水进行萃取，有机相浓缩后所得固体经干燥后即得到化合物1h，
Figure FDA0004020117420000033
(4)化合物1i的合成
将化合物1h溶于DMF中，冰浴下加入氢化钠，室温下搅拌2h后加入碘甲烷室温下搅拌反应，反应结束后反应液用乙酸乙酯和水进行萃取，有机相合并后用无水硫酸钠干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物1i，
Figure FDA0004020117420000041
(5)化合物1j的合成
将化合物1i溶于二氯甲烷，随后加入NIS室温搅拌反应，反应完后加入硫代硫酸钠饱和水溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相经干燥后并浓缩，经硅胶柱层析，洗脱液为体积比石油醚：乙酸乙酯＝50:1的混合液，得到白色固体1j，
Figure FDA0004020117420000042
(6)化合物1l的合成
将化合物1j、1k、醋酸铜、N,N'-二甲基-1,2-环己二胺、碳酸铯依次加入到N,N'-二甲基甲酰胺中，100℃下反应，反应结束后用乙酸乙酯和水萃取，有机相合并有机相经干燥后并浓缩，经硅胶柱层析得到化合物1l，
Figure FDA0004020117420000043
(7)化合物1m的合成
将化合物1l溶于吡啶中，然后加入二氧化硒，100℃下反应，反应结束后过滤，旋干，经硅胶柱层析得到化合物1m，
Figure FDA0004020117420000051
(8)化合物1的合成
将化合物1m溶于二氯甲烷，然后加入炔丙胺和三乙胺，0℃下加入草酰氯，再滴入2滴DMF，转至室温反应，反应浓缩后经硅胶柱层析得到终产品1；
当所述多取代吡咯类化合物结构式如下2-1或2-2所示时，
Figure FDA0004020117420000052
制备方法包括以下步骤：
(1)化合物2b的合成：
氢氧化钾和溶剂DMSO在氮气环境下转移至冰盐浴中，加入化合物2a、碘甲烷，室温下反应；反应结束后，用***和纯化水萃取，无水硫酸钠干燥，抽滤，旋蒸得到化合物2b，
Figure FDA0004020117420000053
(2)化合物2c的合成：
化合物2b、3,4-二氟苯胺和溶剂THF在氮气环境下转移至冰浴中，滴加双(三甲基硅基)氨基钠，室温下反应；反应结束后，反应液中加入氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，再用正庚烷洗涤得到化合物2c，
Figure FDA0004020117420000061
(3)化合物2e的合成：
化合物2c和溶剂二氯甲烷在氮气环境下转移至冰浴中，加入AlCl3，滴加2-氯-2-氧代乙酸乙酯，随后转移至室温反应；反应结束后，加入冰水淬灭，硅藻土过滤，用二氯甲烷萃取，分液，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得到化合物2d；
用乙醇溶解化合物2d，滴加氢氧化钠水溶液，室温下反应；反应结束后，旋蒸去除乙醇，用乙酸乙酯和水萃取，保留水层，水层用盐酸酸化，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物2e；
Figure FDA0004020117420000062
(4)化合物2-1、2-2的合成：
化合物2-1的合成：化合物2e、1-氨基-4-羟基环己烷甲醇盐酸盐和溶剂DMF混合后转移至冰浴中，加入HATU，随后滴加DIPEA，室温下搅拌反应；反应结束后，反应液中加入氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，通过硅胶柱层析纯化得到化合物2-1；
化合物2-2的合成：化合物2e、(1-氨基环己基)甲醇盐酸盐和溶剂DMF混合后转移至冰浴中，加入HATU，随后滴加DIPEA，室温下搅拌反应；反应结束后，反应液中加入氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，通过硅胶柱层析纯化得到化合物2-2；
当所述多取代吡咯类化合物结构式如下3所示时，
Figure FDA0004020117420000071
制备方法包括以下步骤：
(1)化合物3b的合成
将KOH溶于DMF中，0℃下加入化合物3a并搅拌，然后加入碘甲烷，室温下反应；反应结束后用乙酸乙酯和水继续萃取，有机相合并后浓缩，经硅胶柱层析纯化得到黄色固体3b，
Figure FDA0004020117420000072
(2)化合物3d的合成
将化合物3b、3c依次加入四氢呋喃中，并于0℃下加入LiHMDS，升至室温后反应；反应结束后加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，并用乙酸乙酯萃取，合并有机相并浓缩，所得残留物经硅胶柱层析纯化得到产品3d，
Figure FDA0004020117420000073
(3)化合物3f的合成
将化合物3d溶于二氯甲烷，并于0℃下加入3e和三氯化铝，室温反应；反应结束后将反应液倒入冰水中，硅藻土过滤并用二氯甲烷萃取，浓缩，浓缩产物溶于乙醇，并加入过量氢氧化钠溶液，室温反应；反应结束后旋干乙醇，EA萃取，弃去有机相，水相酸化后用乙酸乙酯萃取，旋干后用***洗涤得到化合物3f，
Figure FDA0004020117420000081
(4)化合物3i的合成
将化合物3g溶于四氢呋喃，随后依次加入3h和Ti(OEt)4，室温反应；反应结束后将反应液旋干，经硅胶柱层析纯化得到化合物3i，
Figure FDA0004020117420000082
(5)化合物3k的合成
向-78℃的含化合物3j的四氢呋喃中缓慢加入含化合物3i的四氢呋喃，缓慢升温至室温，搅拌反应；反应结束后，0℃下加入饱和氯化铵溶液淬灭，并用乙酸乙酯萃取，有机相合并并浓缩，经硅胶柱层析纯化得到化合物3k，
Figure FDA0004020117420000083
(6)化合物3l的合成
将化合物3k溶于甲醇和水的混合溶液中，加入硝酸铈铵，室温下反应；反应结束后旋干经硅胶柱层析纯化得到化合物3l，
Figure FDA0004020117420000084
(7)化合物3m的合成
0℃下向含3l的四氢呋喃中逐滴加入含三氟化硼的四氢呋喃，室温下搅拌反应；随后将反应液冷却至0℃，缓慢加入甲醇，搅拌30分钟，浓缩后将残留物溶于四氢呋喃，随后加入氢氧化钠水溶液和双氧水，室温反应过夜；反应液用乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物3m，
Figure FDA0004020117420000091
(8)化合物3n的合成
将化合物3m溶于甲醇，随后加入含盐酸的乙酸乙酯，室温反应过夜；加水稀释，乙酸乙酯萃取除去杂质，水层旋干后得到产物3n，
Figure FDA0004020117420000092
(9)化合物3的合成
将化合物3f溶于DMF，随后依次加入3n、HATU、DIPEA，室温反应过夜；反应液旋干后经硅胶柱层析得到黄色固体化合物3，
Figure FDA0004020117420000093
当所述多取代吡咯类化合物结构式如下4所示时，
Figure FDA0004020117420000101
制备方法包括以下步骤：
(1)化合物4b的合成
将化合物4a溶于甲苯，-78℃下加入正丁基锂，搅拌后加入化合物3i和含三甲基铝的甲苯溶液，搅拌反应；反应结束后加入饱和硫酸钠水溶液淬灭反应，过滤，乙酸乙酯萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物4b，
Figure FDA0004020117420000102
(2)化合物4c的合成
将化合物4b溶于四氢呋喃，0℃下加入TBAF，室温反应；反应结束后用饱和氯化氨水溶液淬灭，乙酸乙酯萃取；有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到白色固体4c，
Figure FDA0004020117420000103
(3)化合物4d的合成
将化合物4c溶于甲苯，抽无水无氧，随后加入TMSN3、CuTc，100℃下反应过夜；饱和碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物4d，
Figure FDA0004020117420000111
(4)化合物4e的合成
将化合物4d溶于甲醇和水的混合溶液中，加入硝酸铈铵，室温下反应；反应结束后旋干经硅胶柱层析纯化得到化合物4e，
Figure FDA0004020117420000112
(5)化合物4f的合成
将化合物4e溶于四氢呋喃，冰浴下加入硼氢化钠，室温反应；反应结束后加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物4f，
Figure FDA0004020117420000113
(6)化合物4g的合成
将化合物4f溶于甲醇，随后加入盐酸乙酸乙酯溶液，室温反应过夜；反应结束后加水稀释，乙酸乙酯萃取除去杂质，水层旋干后得到产物4g，
Figure FDA0004020117420000114
(7)化合物4的合成
将化合物3f溶于DMF，随后依次加入4g、HATU、DIPEA，室温反应过夜；反应结束后反应液旋干，经硅胶柱层析得到化合物4，
Figure FDA0004020117420000121
当所述多取代吡咯类化合物结构式如下5所示时，
Figure FDA0004020117420000122
制备方法包括以下步骤：
(1)化合物5b的合成：
化合物5a和溶剂1,2-二氯乙烷混合，在氮气环境下加入AlCl3，加入硝基甲烷，转移至冰浴中，滴加2-氯-2-氧代乙酸乙酯，随后转移至室温反应；反应结束后，加入冰水淬灭，硅藻土过滤，用二氯甲烷萃取，分液，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得到化合物5b，
Figure FDA0004020117420000123
(2)化合物5c的合成：
化合物5b和溶剂乙醇室温下搅拌，滴加氢氧化钠水溶液，室温下反应；反应结束后，旋蒸去除溶剂乙醇，用乙酸乙酯和水萃取，保留水层，水层用盐酸酸化，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物5c，
Figure FDA0004020117420000131
(3)化合物5d的合成：
化合物5c和CDI混合，加入DMF，随后滴加炔丙胺，室温下搅拌反应；反应结束后，反应液中加入氯化铵水溶液和乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚洗涤得到化合物5d，
Figure FDA0004020117420000132
(4)化合物5的合成：
化合物5d、邻氨基苯甲醇、乙酸室温下混合研磨，用制备板分离得到化合物5，
Figure FDA0004020117420000133
当所述多取代吡咯类化合物结构式如下11所示时，
Figure FDA0004020117420000134
制备方法包括以下步骤：
(1)化合物11b的合成
将化合物3c、11a、HATU、DIPEA依次加入到DMF中，室温反应过夜；反应结束后加入乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物11b，
Figure FDA0004020117420000141
(2)化合物11c的合成
化合物11b溶于甲醇中，随后冰浴下加入盐酸甲醇溶液，室温反应过夜，旋干即得粗产品11c，
Figure FDA0004020117420000142
(3)化合物11的合成
将化合物3f溶于DMF，0℃下加入11c、HATU、DIPEA，室温反应过夜；反应结束后用乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物11，
Figure FDA0004020117420000143
当所述多取代吡咯类化合物结构式如下12所示时，
Figure FDA0004020117420000151
制备方法包括以下步骤：
(1)化合物12c的合成
将化合物12a、12b、HATU、DIPEA依次加入到DMF中，室温反应过夜；反应结束后用乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物12c，
Figure FDA0004020117420000152
(2)化合物12d的合成
将化合物12c溶于二氯甲烷，随后加入DBU，直接旋干过柱得到化合物12d，
Figure FDA0004020117420000153
(3)化合物12e的合成
将化合物12d、3f、HATU、DIPEA依次加入到DMF中，室温反应过夜；反应结束后用乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物12e，
Figure FDA0004020117420000161
(4)化合物12的合成
将化合物12e溶于二氯甲烷，冰浴下加入三氟乙酸，室温下反应；反应结束后加入1,4-二氧六环随后旋干，得到纯品化合物12，
Figure FDA0004020117420000162
当所述多取代吡咯类化合物结构式如下14所示时，
Figure FDA0004020117420000163
制备方法包括以下步骤：
(1)化合物14b的合成
将化合物12a、14a、HATU、DIPEA依次加入到DMF中，室温反应过夜；反应结束后用乙酸乙酯和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物14b，
Figure FDA0004020117420000164
(2)化合物14c的合成
将化合物14b溶于二氯甲烷，随后加入DBU，直接旋干过柱得到化合物14c，
Figure FDA0004020117420000171
(3)化合物14的合成
将化合物3f溶于二氯甲烷中，冰浴下加入EDCI、HOBt和三乙胺，然后再加入14c，室温反应过夜；反应结束后用二氯甲烷和水萃取，有机相合并浓缩后经硅胶柱层析纯化得到化合物14，
Figure FDA0004020117420000172
4.权利要求1或2所述多取代吡咯类化合物在制备HBV衣壳蛋白抑制剂中的应用。
5.一种HBV衣壳蛋白抑制药物，其特征在于，包含权利要求1或2所述多取代吡咯类化合物或其药学上可接受的盐。
6.根据权利要求5所述的药物，其特征在于，还包括药学上可接受的辅料、辅助剂和/或载体；所述多取代吡咯类化合物或其药学上可接受的盐的含量为有效治疗剂量。
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