CN116026910A - 一种检测幽门螺杆菌的新方法 - Google Patents

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urea
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黄卫
李海洋
王卫国
李京华
仓怀文
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Abstract

本发明提供了一种检测幽门螺杆菌的新方法，所述方法为：受检者口服非放射性尿素胶囊，静坐10‑20分钟后，向呼气采样袋中吹气，留取受检者呼出气样本；然后，利用离子迁移谱仪检测呼气采样袋中NH3的浓度水平，并与正常人呼出气中NH3的浓度水平进行对比；若检出浓度明显高于正常人水平，则诊断为幽门螺杆菌感染者。本发明提供的方法，不需要食用13C和14C的尿素，不具有放射性，对人体基本无副作用，适宜老人、小孩、孕妇等敏感人群的诊断，且诊断敏感性更高，诊断时间更短。

Description

一种检测幽门螺杆菌的新方法
技术领域
本发明涉及一种检测幽门螺杆菌的新方法。
背景技术
感染幽门螺杆菌(HP)是导致慢性胃炎的主要原因，它不仅与消化道溃疡密切相关，而且还是胃癌的始发原因之一。早发现早治疗是遏制幽门螺杆菌感染病情恶化的重要手段。
目前，对幽门螺杆菌感染检测的手段主要可分为两类：一类是侵袭性方法；另一类是非侵袭性方法。
侵袭性方法主要指采用胃镜及胃粘膜活检。尽管精确度较高，但为大多数病人对这种方法比较排斥，并且对医务人员的业务水平要求较高、费用高，不利于普查等。
非侵袭性方法主要分为两种，血清检测和同位素示踪。血清方式为检测血液中的HP抗体。因患者在治愈之后，血中幽菌抗体仍存在一、二年，很有可能会测出假阳性，现在医院很少使用。
现在医院一般采用同位素示踪方式机进行检测，即采尿素呼气试验(Urea BreathTest，UBT)检测。通过服用含13C和14C的尿素，在幽门螺杆菌中尿素酶的作用下分解为CO2和NH3，通过检测13CO2和14CO2间接检出幽菌。但14C具有放射性，对人体、环境有污染，不适于孕妇、儿童。13C是14C升级版，敏感性和特异性较高。这种方式较侵袭性方法有较大的改进，但也存在一定的局限性，例如，同位素药物的提取和制作过程繁琐，药物成本较高；CO2在人体的呼出气中含量较高，引起显著病理变化指示所需药物的剂量较多，反应时间较长等。
因此，当前仍需要发展一种非侵袭、便携、低成本、便于普查的幽门螺杆菌感染检测技术及设备。
离子迁移谱(Ion Mobility Spectrometry，IMS)是根据大气压下离子迁移率的差异，通过均匀弱电场对样品离子进行分离和检测的技术。具有检测速度快(单个检测周期＜20ms)、灵敏度高、易实现小型化、成本低等优点，广泛应用于军事、环境监测等领域。
前期，我们团队基于离子迁移谱技术，已开发出高精度测NH3的方法(Long-termsub second-response monitoring of gaseous ammonia in ambient air by positiveinhaling ion mobility spectrometry，Talanta，175，522-527)。
为此，本发明公开了一种检测幽门螺杆菌的新方法。该法通过服用常规尿素(区别于13C和14C的尿素)，然后通过离子迁移谱检测呼出气中NH3的浓度变化诊断幽门螺杆菌感染。
发明内容
本发明提供了一种检测幽门螺杆菌的新方法，具体技术方案如下：
受检者用温开水完整口服一颗非放射性尿素胶囊(区别于13C和14C的尿素)，静坐10-20分钟后，向专用的呼气采样袋中吹气，留取受检者呼出气样本。然后，利用离子迁移谱仪检测呼气采样袋中NH3的浓度水平，并与正常人呼出气中NH3的浓度水平进行对比。若检出浓度明显高于正常人水平，则诊断为幽门螺杆菌感染者。
检测原理为：幽门螺杆菌含有大量的幽门螺杆菌尿素酶。尿素在幽门螺杆菌尿素酶的作用下，分解为CO2和NH3。然后通过检测呼出气中NH3的浓度变化诊断幽门螺杆菌感染。
NH2CONH2→CO2+NH3
基于上述方案，优选地，所述尿素胶囊的口服量为50～200mg，采用温开水口服。
基于上述方案，优选地，在食用尿素后，正常人呼出气中NH3的浓度水平小于0.8ppm；幽门螺杆菌感染者，呼出气中NH3的浓度水平可高于2ppm。
基于上述方案，优选地，采样方式为：使用连接管，连接吹嘴与采样袋，然后受检者使用吹嘴向采样袋中吹气。其中，连接管为四氟材料加工制作，采样袋为内衬为四氟材质的气体采样袋。
基于上述方案，优选地，所述离子迁移谱仪采用非放射性电离源，使用酮类作为掺杂剂。所述酮类如丁酮。
基于上述方案，优选地，尿素胶囊所含尿素为普通食用尿素。
本发明的优点如下：
本发明方法，不需要食用13C和14C的尿素，对人体使用常规食品级尿素，不具有放射性，对人体基本无副作用，适宜老人、小孩、孕妇等敏感人群的诊断。
本发明方法，诊断敏感性更高。人体呼出气中CO2的浓度为40000ppm，13C丰度为1.1％，13CO2的背景浓度约为400ppm。而在呼出气中NH3的背景浓度约为0.8ppm，远低于13CO2的背景浓度。因此，低剂量NH3浓度变化，即可对幽门螺杆菌感染做出诊断。
本发明方法，诊断时间短。单次诊断时间＜20min，检测报告立等可取，适合大通量人群普查。
本发明方法，仪器体积较小，重量较轻，便携易操作。
附图说明
图1为干净空气的谱峰；
图2为实施例1的受检者服用尿素胶囊后呼出气的谱峰；
图3.呼出气中NH3的定量曲线。
具体实施方式
以下实施例说明本发明的使用，但不限制所述的应用范围。以下实施例中，离子迁移谱仪检测NH3的方法参考Long-term sub second-response monitoring of gaseousammonia in ambient air by positive inhaling ion mobility spectrometry，Talanta，175，522-527。
实施例1
受检者用温开水完整口服一颗尿素胶囊，尿素胶囊的服用量为100mg；静坐10-20分钟后，向专用的呼气采样袋吹气，留取受检者呼出气样本。然后，利用离子迁移谱仪检测呼气采样袋中，NH3的浓度水平，并与正常人呼出气中NH3的浓度水平进行对比。其中，离子迁移谱仪采用非放射性电离源，使用丁酮作为掺杂剂。检测结果如图2所示，经图3所示的曲线定量后，呼出气NH3浓度为0.4ppm，由检测结果判断，受检者为幽门螺杆菌感染者。

Claims (6)

1.一种检测幽门螺杆菌的新方法，其特征在于：所述方法为：受检者口服非放射性尿素胶囊，静坐10-20分钟后，向呼气采样袋中吹气，留取受检者呼出气样本；然后，利用离子迁移谱仪检测呼气采样袋中NH3的浓度水平，并与正常人呼出气中NH3的浓度水平进行对比；若检出浓度明显高于正常人水平，则诊断为幽门螺杆菌感染者。
2.根据权利要求1所述的检测幽门螺杆菌的新方法，其特征在于：所述尿素胶囊所含尿素为普通食用尿素。
3.根据权利要求1所述的检测幽门螺杆菌的新方法，其特征在于：所述尿素胶囊的口服量为50～200mg，采用温开水口服。
4.根据权利要求1所述的检测幽门螺杆菌的新方法，其特征在于：在食用尿素后，正常人呼出气中NH3的浓度小于0.8ppm；幽门螺杆菌感染者，呼出气中NH3的浓度水平为2ppm以上。
5.根据权利要求1所述的检测幽门螺杆菌的新方法，其特征在于：所述离子迁移谱仪采用非放射性电离源，使用酮类作为掺杂剂。
6.根据权利要求1所述的检测幽门螺杆菌的新方法，其特征在于：采样时，使用连接管连接吹嘴与采样袋，然后受检者使用吹嘴向气体采样袋中吹气；其中，连接管为四氟材料，气体采样袋内衬为四氟材质。
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