CN115327111A - 一种可变色指示的免疫层析试纸条及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种可变色指示的免疫层析试纸条及其使用方法，包括底板和底板上沿层析方向依次连接的样品垫、结合垫、反应膜及吸水垫，其特征在于，所述反应膜上设置检测线，不设置质控线；所述吸水垫在检测样品液到达时变色。所述可变色指示的免疫层析试纸条的检测特异性高，成本低。
Description
技术领域
本发明涉及一种可变色指示的免疫层析试纸条及其使用方法，属于免疫层析技术领域。
背景技术
免疫层析法(immunochromatography)是将一对特异的抗原或抗体，其中一个固定于硝酸纤维素膜上，另一个用示踪物进行标记并制成结合垫，最后组装成试纸条；在试纸条的加样端，也就是样品垫的位置进行样本和稀释液的加样，样本由于层析力会沿着硝酸纤维素膜进行层析，若样本中有待检物，则待检物会和结合垫里面带了示踪物的抗原抗体结合，在经过硝酸纤维素膜上固定的抗原抗体处会被拦截，而显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。免疫层析法，由于其简单、方便、快捷、便宜及不需要大型仪器和专业人员的操作而在疾病诊断、优生优育、食品检测、环境监测等领域得到了广泛的应用。免疫层析法中常用到的免疫层析试纸条主要包含五个部分：加样区(样品垫)、标记区(结合垫)、显示区(硝酸纤维素膜)、吸水区(吸水垫)以及背衬板。在传统的免疫层析试纸条中，吸水区是由AN3、AN5等滤纸常规未处理的吸水材料组成，为层析提供一定的层析力；产品内部的质控***为C***，在跑板时，一般通过质控线(C线)是否显色来确认跑板是否有效。但是，传统C***大多采用一些独立蛋白类***，在样本层析过程中很容易和样本中的蛋白类物质发生交叉干扰，从而造成产品的特异性较差。因此，急需开发一种特异性高的免疫层析试纸条。
发明内容
本发明提供了一种可变色指示的免疫层析试纸条及其使用方法，可以有效解决上述问题。
本发明是这样实现的：
一种可变色指示的免疫层析试纸条，包括底板和底板上沿层析方向依次连接的样品垫、结合垫、反应膜及吸水垫，所述反应膜上设置检测线，不设置质控线；所述吸水垫在检测样品液到达时变色。
一实施例中，所述吸水垫为经酸碱指示剂处理的吸水垫。
一实施例中，所述酸碱指示剂处理为将吸水垫浸泡在酸碱指示剂处理液中或将酸碱指示剂处理液涂抹在吸水垫上，一段时间后烘干备用。
一实施例中，还包括覆盖在所述的免疫层析试纸条上方的外壳，所述外壳上设有用于滴加检测样品液的加样区、用于观察或读取信号的检测区和用于判断跑板是否有效的指示区，所述加样区位于样品垫的上方，所述检测区位于检测线的上方，所述指示区位于吸水垫的上方。
一种上述的可变色指示的免疫层析试纸条的使用方法，包括以下步骤：
将检测样品液滴加在样品垫上，静置一段时间；
通过观察吸水垫是否变色来判断跑板是否有效，如果变色，则跑板有效，如果不变色，则跑板无效，需重新跑板；
通过观察检测线来读取检测结果。
一实施例中，所述检测样品液在滴加前加入碱性缓冲液或酸性缓冲液。
本发明的有益效果是：
本发明将变色的吸水垫应用于免疫层析试纸，不需采用传统C***的独立蛋白类***，避免在层析过程中发生交叉干扰，特异性高。
本发明将变色的吸水垫应用于免疫层析试纸，变色的吸水垫，相对于传统的蛋白类C***，价格低廉，读取结果快捷而直观，不需要特殊仪器设备，也不需要专业人员操作，可以大量的节约物料成本和人力操作方面的成本。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施方式的技术方案，下面将对实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1是本发明实施例提供的可变色指示的免疫层析试纸条的结构示意图。
图2是本发明实施例提供的可变色指示的免疫层析试纸条的外壳结构示意图。
附图标记：
样品垫1、结合垫2、反应膜3、检测线31、吸水垫4、底板5、加样区6、检测区7、指示区8。
具体实施方式
为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施方式中的附图，对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式是本发明一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。因此，以下对在附图中提供的本发明的实施方式的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施方式。基于本发明中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本发明保护的范围。
在本发明的描述中，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。
实施例
如图1所示，本发明实施例提供一种可变色指示的免疫层析试纸条，包括底板5和底板5上沿层析方向依次连接的样品垫1、结合垫2、反应膜3及吸水垫4。所述反应膜3上设置检测线31，不设置质控线。所述吸水垫4在检测样品液到达时变色。如果检测完成后，所述吸水垫4变色，则说明用于检测样品液已经达到了吸水垫4，则必然已经经过了所述反应膜3上设置检测线31，可以判断跑板有效；反之，则跑板无效，需重新跑板检测。
一实施例中，所述吸水垫4为经酸碱指示剂处理的吸水垫。检测样品液一般呈酸性或碱性，当检测样品液到达所述吸水垫时，所述吸水垫上的酸碱指示剂就会变色，表明跑板有效。
一实施例中，所述酸碱指示剂处理为将吸水垫浸泡在酸碱指示剂处理液中或将酸碱指示剂处理液涂抹在吸水垫上，一段时间后烘干备用。
一实施例中，所述酸碱指示剂处理液的配方为53wt％的乙醇、0.0047wt％的甲基红、0.10wt％的溴百里酚蓝、0.45wt％的20wt％Tween20、18wt％的5wt％PVA、19wt％的5wt％PVP溶液。
一实施例中，所述可变色指示的免疫层析试纸条还包括覆盖在所述的免疫层析试纸条上方的外壳，所述外壳上设有用于滴加检测样品液的加样区6、用于观察或读取信号的检测区7和用于判断跑板是否有效的指示区8，所述加样区6位于样品垫1的上方，所述检测区7位于检测线31的上方，所述指示区8位于吸水垫4的上方。
一实施例中，所述样品垫1与结合垫2在连接处重叠，且所述样品垫1重叠在结合垫2的上方；所述结合垫2与反应膜3在连接处重叠，且所述结合垫2重叠在反应膜3的上方；所述反应膜3与吸水垫4在连接处重叠，且吸水垫4重叠在反应膜3的上方。如此，便于样品液层析及样品液停留在反应膜3上足够时间以完成检测反应。
一实施例中，所述样品垫1为玻璃纤维膜或聚酯纤维膜。
一实施例中，所述结合垫2为玻璃纤维膜或聚酯纤维膜。
一实施例中，所述反应膜3为硝酸纤维素膜。
一实施例中，所述吸水垫4为滤纸(如AN3、AN5)
一实施例中，所述底板5为PVC底板或PS底板。
一实施例中，所述检测样品液为血清、全血、尿液、组织液、咽拭子、鼻拭子、口咽拭子、肛拭子或***物等的一种或多种。
本发明实施例还提供一种上述的可变色指示的免疫层析试纸条的使用方法，包括以下步骤：
将检测样品液滴加在样品垫1上，静置一段时间，通常为10-20min，检测样品液沿着样品垫1、结合垫2、反应膜3及吸水垫4层析，层析到吸水垫上时检测完成；
通过观察吸水垫4是否变色来判断跑板是否有效，如果变色，则跑板有效，如果不变色，则跑板无效，需重新跑板；
通过观察检测线31来读取检测结果。
一实施例中，所述检测样品液在滴加前加入碱性缓冲液或酸性缓冲液。碱性缓冲液或酸性缓冲液的pH可以根据酸碱指示剂处理液的类型进行调整。进一步优选为加入碱性缓冲液。
试验例1
在登革抗原检测项目中，测试实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条的检测特异性。测试方法为采用很多阴性样本来进行检测实验，看是否会出现假阳样本，从而来统计特异性。传统蛋白类类C线***的免疫层析试纸条作为对照组，实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条作为实验组。两组均做血清200例，血浆200例，全血200例。统计实验结果如表1所示。
表1
由表1可知，实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条的检测特异性要高于传统蛋白类类C线***的免疫层析试纸条。分析原因认为，本发明实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条，不设置质控线，不需采用传统C***的独立蛋白类***，避免在层析过程中发生蛋白的交叉干扰，提高了特异性。
试验例2
在甲型/乙型流感病毒抗原检测项目中，测试实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条的检测特异性。测试方法为采用很多阴性样本来进行检测实验，看是否会出现假阳样本，从而来统计特异性。传统蛋白类类C线***的免疫层析试纸条作为对照组，实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条作为实验组。两组均做阴性血清样本500例。统计实验结果如表2所示。
表2
由表2可知，实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条的检测特异性要高于传统蛋白类类C线***的免疫层析试纸条。分析原因认为，本发明实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条，不设置质控线，不需采用传统C***的独立蛋白类***，避免在层析过程中发生蛋白的交叉干扰，提高了特异性。
试验例3
在甲型/乙型流感病毒抗原检测项目中，传统蛋白类类C线***的免疫层析试纸条作为对照组，实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条作为实验组，比较两者的背景完全跑干净时间。背景完全跑干净判断标准：视窗无明显的红色背景。统计结果表3所示。
表3
由表3可知，实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条的背景干净时间更短，说明其检测效率更高。分析原因认为，本发明的实施例1的可变色指示的免疫层析试纸条不设置质控线，减少了一道反应程序，检测样品溶液在反应膜上停留的时间更短，从而缩短了了整个背景干净时间，提高了检测效率。
以上所述仅为本发明的优选实施方式而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种可变色指示的免疫层析试纸条，包括底板和底板上沿层析方向依次连接的样品垫、结合垫、反应膜及吸水垫，其特征在于，所述反应膜上设置检测线，不设置质控线；所述吸水垫在检测样品液到达时变色。
2.根据权利要求1所述的可变色指示的免疫层析试纸条，其特征在于，所述吸水垫为经酸碱指示剂处理的吸水垫。
3.根据权利要求1所述的可变色指示的免疫层析试纸条，其特征在于，所述酸碱指示剂处理为将吸水垫浸泡在酸碱指示剂处理液中或将酸碱指示剂处理液涂抹在吸水垫上，一段时间后烘干备用。
4.根据权利要求1所述的可变色指示的免疫层析试纸条，其特征在于，还包括覆盖在所述的免疫层析试纸条上方的外壳，所述外壳上设有用于滴加检测样品液的加样区、用于观察或读取信号的检测区和用于判断跑板是否有效的指示区，所述加样区位于样品垫的上方，所述检测区位于检测线的上方，所述指示区位于吸水垫的上方。
5.一种权利要求1至4所述的可变色指示的免疫层析试纸条的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：
将检测样品液滴加在样品垫上，静置一段时间；
通过观察吸水垫是否变色来判断跑板是否有效，如果变色，则跑板有效，如果不变色，则跑板无效，需重新跑板；
通过观察检测线来读取检测结果。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述检测样品液在滴加前加入碱性缓冲液或酸性缓冲液。
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