CN115290904A - 一种原位杂交hpv检测试纸条、试剂盒及其制备方法 - Google Patents

一种原位杂交hpv检测试纸条、试剂盒及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于HPV检测技术领域，涉及一种原位杂交HPV检测试纸条、试剂盒及其制备方法，检测试纸条由第一层析垫、检测试纸、第二层析垫、玻璃纤维和吸液棉组成，检测试纸由试纸经试剂液浸泡后烘干而得，试剂液包括HPVC1蛋白原位杂交液、柠檬酸、乙酸钠、钨酸钠、氯化汞，余者为水。本发明将含HPV病毒的尿液滴定在检测试纸条上，通过C1蛋白弱酸钨酸钠染色而显色，从而可判断尿液中HPV病毒量的多少，进而推算人体是否感染HPV及携带量多少，其检测方便，10‑15min可知结果。HPV检测试剂盒可以对检测试纸条起到保护作用，避免其被污染，且携带、使用方便。本发明的制备方法简单，易于操作，成本较低，易于工业化生产。

Description

一种原位杂交HPV检测试纸条、试剂盒及其制备方法
技术领域
本发明属于HPV检测技术领域，具体涉及一种原位杂交HPV检测试纸条、试剂盒及其制备方法。
背景技术
HPV（人***瘤病毒）是一种属于乳多空病毒科的***瘤空泡病毒A属，是球形DNA病毒，能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖。表现为寻常疣、***等症状，随着性病中***的发病率急速上升和***、***癌等的增多，HPV检查则主要检测人是否携带有HPV病毒，可通过染色镜检法、HPV的DNA检测法或血清学试验来检查是否感染了HPV。
目前，HPV早期感染的检测方法仅限于宫颈样的涂片细胞形态学检查及HPV的DNA检测，采样和检测必须在医院等专业机构进行，因而上述的宫颈样检测方法远不适用于大规模人群自检。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可进行自检，检测方便、简单，结果可靠的原位杂交HPV检测试纸条，以解决上述背景技术中提出的问题。
为达到上述技术目的，本发明的技术方案：
一种原位杂交HPV检测试纸条，包括依次连接的第一层析垫、检测试纸和第二层析垫，所述第二层析垫的下方粘接有玻璃纤维，所述玻璃纤维的长度大于所述第二层析垫的长度，所述玻璃纤维靠近所述检测试纸的一端下方粘接有吸液棉；所述检测试纸由试纸经试剂液浸泡后烘干而得，按重量计，所述试剂液包括HPVC1蛋白原位杂交液5-10%、柠檬酸5%、乙酸钠10-20%、钨酸钠10-40%、氯化汞5%，余者为水，其中，所述HPVC1蛋白原位杂交液由HPVC1蛋白与半胱氨酸溶液或半胱氨酸盐酸盐溶液原位杂交而成。
浸泡前所用的试纸一般为定性滤纸。试剂液中，柠檬酸与钨酸钠反应形成弱酸钨酸钠，乙酸钠对弱钨酸钠强化钨离子固定，氯化汞可保持试纸条内溶试剂液的稳定性及排除阴性干扰元素。
优选的，所述HPVC1蛋白与所述半胱氨酸溶液或半胱氨酸盐酸盐溶液的重量比为1-10:90-99。
本发明的另一目的在于提供一种原位杂交HPV检测试剂盒，包括壳体，所述壳体内设有所述原位杂交HPV检测试纸条，所述壳体上设有尿液孔和观察孔，所述观察孔位于所述检测试纸的上方，所述尿液孔位于所述玻璃纤维的上方。
作为一种改进，所述壳体包括上壳体和下壳体，所述上壳体与所述下壳体插接，所述上壳体内设有第一孔柱、第二凸起、所述观察孔、所述尿液孔和吸液棉固定槽，所述观察孔的两侧对角设有第三孔柱和第四孔柱，所述下壳体内设有第一凸起、第二孔柱、第三凸起和第四凸起，所述第一凸起与所述第一孔柱相适配，所述第二凸起与所述第二孔柱相适配，所述第三凸起与所述第三孔柱相适配，所述第四凸起与所述第四孔柱相适配，所述第一层析垫与所述第二凸起连接，所述检测试纸卡设于所述第三孔柱和所述第四孔柱之间，所述吸液棉卡设于所述吸液棉固定槽内。
优选的，所述第二凸起为塑料卡钉。
作为进一步地改进，所述下壳体内靠近所述第一层析垫的位置设有凹槽，所述凹槽内设有干燥片。干燥片优选为硅胶矿物干燥片。
优选的，所述壳体的形状为条形或叶形。
作为一种改进，所述壳体上设有比色卡。
本发明的又一目的在于提供一种原位杂交HPV检测试纸条的制备方法，包括以下步骤：
（1）取尿中C1蛋白类人***瘤病毒进行PCR-DNA核酸倍增，得HPVC1蛋白；
（2）取半胱氨酸或半胱氨酸盐酸盐，加入纯化水，制成浓度为24mmol/L的半胱氨酸溶液或半胱氨酸盐酸盐溶液；
（3）将所述HPVC1蛋白和所述半胱氨酸溶液或半胱氨酸盐酸盐溶液混合，静置48h，得HPVC1蛋白原位杂交液；
（4）按比例取柠檬酸、钨酸钠和乙酸钠，混合均匀，静置，得混合溶液；
（5）按比例取所述HPVC1蛋白原位杂交液、氯化汞、所述混合溶液和水，混合均匀，静置2h后，得试剂液，将试纸放入所述试剂液中浸泡10min，取出，烘干，得检测试纸；
（6）将所述检测试纸的两端分别粘接第一层析垫和第二层析垫，所述第二层析垫的下方粘接有玻璃纤维，所述玻璃纤维靠近所述检测试纸的一端粘接有吸液棉，即得。
步骤（1）中，尿中C1蛋白是指HPV病毒的外壳蛋白C1，也称HPV L1蛋白，是指HPV病毒的外壳。活动性感染的HPV病毒主要包括含有病毒的DNA和外壳蛋白C1，而潜伏的HPV病毒只有DNA没有外壳蛋白C1，所以检测HPV病毒主要表象为外壳蛋白C1的表达而来确定感染HPV与否。
对潜伏性HPV感染，由于HPV病毒DNA是以镶嵌的方式与宿主DNA整合，因此，HPV病毒活动感染转阴和病毒载量消长及潜伏感染病毒滴度的变化，通过显色来显示定性HPV的感染程度，外壳蛋白C1还有抗原表位，在宿主细胞表面有蛋白受体，而来判定HPV的感染梯度。
本发明的又一目的在于提供一种原位杂交HPV检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：将所述原位杂交HPV检测试纸条根据壳体的大小和形状进行裁切，裁切好后装入所述壳体内，即得。
由于采用上述技术方案，本发明的有益效果：
本发明提供的HPV检测试纸条，试纸通过尿液中携带C1蛋白类人***瘤病毒与半胱氨酸进行原位杂交后与柠檬酸、钨酸钠、乙酸钠交叉反应后制备的溶液进行浸泡而得，将含C1蛋白类人***瘤病毒的尿液在该HPV检测试纸条上进行滴定，通过C1蛋白弱酸钨酸钠染色而显色，从而可判断尿液中HPV病毒量的多少，进而推算人体是否感染HPV及携带量多少。如果尿液HPV检测呈阳性，检测试纸条染色显蓝色，颜色越深说明尿液中携带HPV病毒量越多，染色较浅说明尿液中携带HPV病毒量较少；如果尿液HPV检测呈阴性，检测试纸条不显颜色（无色），说明尿液中没有感染HPV病毒。HPV检测试剂盒可以对检测试纸条起到保护作用，避免其被污染，且携带、使用方便。本发明提供的制备方法简单，易于操作，成本较低，易于工业化生产。
附图说明
图1是本发明提供的原位杂交HPV检测试纸条的主视图；
图2是本发明提供的原位杂交HPV检测试纸条的侧视图；
图3是实施例5提供的原位杂交HPV检测试剂盒的主视图；
图4是实施例5提供的上壳体的结构示意图；
图5是实施例5提供的下壳体的结构示意图；
图6是实施例6提供的原位杂交HPV检测试剂盒的主视图；
图7是实施例6提供的上壳体的结构示意图；
图8是实施例6提供的下壳体的结构示意图；
图9是实施例7提供的原位杂交HPV检测试剂盒的主视图；
图10是实施例7提供的原位杂交HPV检测试剂盒的后视图；
图11是实施例7提供的上壳体的结构示意图；
图12是实施例7提供的下壳体的结构示意图；
图13是实施例5提供的检测试剂盒的准确度实验结果图；
图14是实施例6提供的检测试剂盒的准确度实验结果图；
图15是实施例5提供的检测试剂盒的特异性实验结果图；
图16是实施例6提供的检测试剂盒的重复性实验结果图；
其中：1-壳体，2-检测试纸，3-第一层析垫，4-第二层析垫，5-玻璃纤维，6-吸液棉，7-干燥片，8-比色卡，9-支撑棱，10-弧形凸起，11-上壳体，12-下壳体，111-第一孔柱，112-第二凸起，113-观察孔，114-尿液孔，115-吸液棉固定槽，116-第三孔柱，117-第四孔柱，118-比色孔，121-第一凸起，122-第二孔柱，123-第三凸起，124-第四凸起，125-凹槽。
具体实施方式
下面结合具体实施方式及附图对本发明作进一步的说明。其中，附图仅用于示例性说明，表示的仅是示意图，而非实物图，不能理解为对本专利的限制；为了更好地说明本发明的实施例，附图某些部件会有省略、放大或缩小，并不代表实际产品的尺寸；对本领域技术人员来说，附图中某些公知结构及其说明可能省略是可以理解的。
本发明实施例的附图中相同或相似的标号对应相同或相似的部件；在本发明的描述中，需要理解的是，若有术语“上”、“下”、“左”、“右”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此附图中描述位置关系的用语仅用于示例性说明，不能理解为对本专利的限制，对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语的具体含义。
实施例1
制备HPVC1蛋白原位杂交液：取尿中C1蛋白类人***瘤病毒进行PCR-DNA核酸倍增使C1蛋白镶嵌于DNA细胞内，得HPVC1蛋白；取半胱氨酸，加入纯化水，制成浓度为24mmol/L的半胱氨酸溶液；将上述HPVC1蛋白和上述半胱氨酸溶液混合，HPVC1蛋白和半胱氨酸溶液的重量比为1：99，静置48h，得HPVC1蛋白原位杂交液。
试剂液配方：HPVC1蛋白原位杂交液5%、柠檬酸5%、乙酸钠15%、钨酸钠20%、氯化汞5%，余者为水。
按比例取上述柠檬酸、钨酸钠和乙酸钠，混合均匀，静置，得混合溶液；再按比例取上述HPVC1蛋白原位杂交液、氯化汞和水，与上述混合溶液混合均匀，静置2h后，得试剂液，将试纸放入试剂液中进行浸泡10min，取出，于50-75℃烘干，即得检测试纸。
实施例2
制备HPVC1蛋白原位杂交液：取尿中C1蛋白类人***瘤病毒进行PCR-DNA核酸倍增使C1蛋白镶嵌于DNA细胞内，得HPVC1蛋白；取半胱氨酸，加入纯化水，制成浓度为24mmol/L的半胱氨酸溶液；将上述HPVC1蛋白和上述半胱氨酸溶液混合，HPVC1蛋白和半胱氨酸溶液的重量比为5：95，静置48h，得HPVC1蛋白原位杂交液。
试剂液配方：HPVC1蛋白原位杂交液8%、柠檬酸5%、乙酸钠10%、钨酸钠40%、氯化汞5%，余者为水。
按比例取上述柠檬酸、钨酸钠和乙酸钠，混合均匀，静置，得混合溶液；再按比例取上述HPVC1蛋白原位杂交液、氯化汞和水，与上述混合溶液混合均匀，静置2h后，得试剂液，将试纸放入试剂液中进行浸泡10min，取出，于50-75℃烘干，即得检测试纸。
实施例3
制备HPVC1蛋白原位杂交液：取尿中C1蛋白类人***瘤病毒进行PCR-DNA核酸倍增使C1蛋白镶嵌于DNA细胞内，得HPVC1蛋白；取半胱氨酸盐酸盐，加入纯化水，制成浓度为24mmol/L的半胱氨酸盐酸盐溶液；将上述HPVC1蛋白和上述半胱氨酸盐酸盐溶液混合，HPVC1蛋白和半胱氨酸盐酸盐溶液的重量比为10：90，静置48h，得HPVC1蛋白原位杂交液。
试剂液配方：HPVC1蛋白原位杂交液10%、柠檬酸5%、乙酸钠20%、钨酸钠10%、氯化汞5%，余者为水。
按比例取上述柠檬酸、钨酸钠和乙酸钠，混合均匀，静置，得混合溶液；再按比例取上述HPVC1蛋白原位杂交液、氯化汞和水，与上述混合溶液混合均匀，静置2h后，得试剂液，将试纸放入试剂液中进行浸泡10min，取出，于50-75℃烘干，即得检测试纸。
实施例4
制备HPVC1蛋白原位杂交液：取尿中C1蛋白类人***瘤病毒进行PCR-DNA核酸倍增使C1蛋白镶嵌于DNA细胞内，得HPVC1蛋白；取半胱氨酸盐酸盐，加入纯化水，制成浓度为24mmol/L的半胱氨酸盐酸盐溶液；将上述HPVC1蛋白和上述半胱氨酸盐酸盐溶液混合，HPVC1蛋白和半胱氨酸盐酸盐溶液的重量比为7：93，静置48h，得HPVC1蛋白原位杂交液。
试剂液配方：HPVC1蛋白原位杂交液7%、柠檬酸5%、乙酸钠12%、钨酸钠30%、氯化汞5%，余者为水。
按比例取上述柠檬酸、钨酸钠和乙酸钠，混合均匀，静置，得混合溶液；再按比例取上述HPVC1蛋白原位杂交液、氯化汞和水，与上述混合溶液混合均匀，静置2h后，得试剂液，将试纸放入试剂液中进行浸泡10min，取出，于50-75℃烘干，即得检测试纸。
实施例5
如图1-图2所示，一种原位杂交HPV检测试纸条，包括实施例1-4制得的检测试纸2、第一层析垫3、第二层析垫4、玻璃纤维5和吸液棉6，第一层析垫3粘接于检测试纸2的左端，第二层析垫4粘接于检测试纸2的右端，且第一层析垫3和第二层析垫4与检测试纸2粘接的一端位于检测试纸2的上面，玻璃纤维5粘接于第二层析垫4的下方，且玻璃纤维5的长度大于第二层析垫4的长度，吸液棉6粘接于玻璃纤维5的下方，且吸液棉6粘接于玻璃纤维5靠近检测试纸2的一端。
检测时，将尿液滴在玻璃纤维5上，尿液通过玻璃纤维5向第二层析垫4的方向流动，第二层析垫4可将尿液中的一些杂质过滤掉，尿液流动到吸液棉6处时，通过吸液棉6的大小可以控制尿液的流动速度，从而可控制检测试纸2的显色时间，如果吸液棉6较大，可使尿液的流动速度加快，检测试纸2的显色时间要稍快些，反之，如果吸液棉6较小，尿液的流动速度相对缓慢，检测试纸2的显色时间要稍慢些，第一层析垫3可阻断尿液继续流动，从而可使检测试纸2的显示时间相对稳定，避免尿液继续流动而使检测试纸2的显色不稳定。
如图3-图5所示，一种原位杂交HPV检测试剂盒，包括壳体1，壳体1的形状为条形，壳体1包括上壳体11和下壳体12，上壳体11与下壳体12的边缘通过凸起和孔柱插接的方式连接固定，上壳体11内设有第一孔柱111、第二凸起112、观察孔113、尿液孔114和吸液棉固定槽115，观察孔113的两角对称设有第三孔柱116和第四孔柱117，实施例1-4制得的检测试纸2卡设于第三孔柱116和第四孔柱117之间，检测试纸2的两端分别粘接有第一层析垫3和第二层析垫4，第一层析垫3上设有通孔，通孔可贯穿第二凸起112并挂于第二凸起112上，第二凸起112优选为塑料卡钉，此设计可避免第一层析垫3从塑料卡钉上脱落，再通过将第二凸起112***第二孔柱122中，从而可将第一层析垫3固定。观察孔113位于检测试纸2的上方，尿液孔114位于玻璃纤维5的上方。第二层析垫4的下方粘接有玻璃纤维5，玻璃纤维5靠近检测试纸条2的一端下方粘接有吸液棉6，吸液棉6压入吸液棉固定槽115内从而可将第二层析垫4和玻璃纤维5固定在上壳体11内，吸液棉固定槽115的内侧壁设有多个弧形凸起10，弧形凸起10可进一步将吸液棉6固定在吸液棉固定槽115内。
下壳体12内设有第一凸起121、第二孔柱122、第三凸起123和第四凸起124，下壳体12内靠近第一层析垫3的位置设有凹槽125，凹槽125内设有干燥片7。干燥片7的主要成分为硅胶矿物粉。干燥片7可保持检测试纸2的干燥，避免其吸潮而影响检测结果。第一凸起121与第一孔柱111相适配，第二凸起112与第二孔柱122相适配，第三凸起123与第三孔柱116相适配，第四凸起124与第四孔柱117相适配，通过将第一凸起121、第二凸起112、第三凸起123和第四凸起124分别***第一孔柱111、第二孔柱122、第三孔柱116和第四孔柱117内，可将上壳体11和下壳体12闭合形成壳体1，并将检测试纸2、第一层析垫3、第二层析垫4、玻璃纤维5、吸液棉6和干燥片7固定在壳体1内，避免其随意移动。
该原位杂交HPV检测试剂盒的制备方法如下：根据壳体1的形状先将检测试纸2、第一层析垫3、第二层析垫4、玻璃纤维5和吸液棉6裁切成需要的形状和大小，检测试纸2的两端分别粘接第一层析垫3和第二层析垫4，将玻璃纤维5与第二层析垫4粘接，吸液棉6与玻璃纤维5的一端粘接，将第一层析垫3挂于第二凸起112上，检测试纸2卡入第三孔柱116和第四孔柱117之间，将吸液棉6压入吸液棉固定槽115内，从而可将第二层析垫4、玻璃纤维5及吸液棉6固定于上壳体11内，将干燥片7放入凹槽125内，再将第一凸起121、第二凸起112、第三凸起123和第四凸起124分别***第一孔柱111、第二孔柱122、第三孔柱116和第四孔柱117内，使上壳体11与下壳体12插接在一起，即得。
实施例6
如图6-图8所示，本实施例的原位杂交HPV检测试剂盒与实施例5的原位杂交HPV检测试剂盒结构基本相同，不同之处在于：本实施例的壳体1的形状为叶形，上壳体11上设有比色孔118，比色孔118下设有比色卡8，比色卡8上设有1-9号显色块，比色卡8固定于上壳体11内。使用者根据检测后的显色与比色卡8上的显色块对比，从而可判断尿液的阴性或阳性及HPV病毒量的多少。
实施例7
如图9-图12所示，本实施例的原位杂交HPV检测试剂盒与实施例5的原位杂交HPV检测试剂盒结构基本相同，不同之处在于：本实施例不设尿液孔114，玻璃纤维5伸出壳体1外，使用时可将尿液直接淋在外露的玻璃纤维5上进行检测即可。
实施例5-实施例7中的上壳体11和下壳体12内还设有多条支撑棱9，支撑棱9可防止壳体1变形，增加其稳固性和耐压性，且支撑棱9还可对壳体1内的检测试纸2、第一层析垫3、第二层析垫4、玻璃纤维5、吸液棉6起到一定的压紧作用，避免其在壳体1内晃动或移位。
准确度实验
以实施例5的原位杂交HPV检测试剂盒对各浓度水平的半胱氨酸水溶液进行检测，半胱氨酸溶液的参考浓度：0.7mmol/L、1.4mmol/L、2.8mmol/L、4mmol/L、12mmol/L、16mmol/L、24mmol/L。每个浓度水平重复测定3次，对比检测结果与参考溶液标示浓度的量级的差，检测结果与标示浓度的相对偏差不大于90%。其检测结果见图13。从图13中可看出，实施例5的原位杂交HPV检测试剂盒的显色结果与手持显色卡对比，半胱氨酸水溶液的浓度越大，显色越深，说明该原位杂交HPV检测试剂盒的检测结果准确。
以实施例6的原位杂交HPV检测试剂盒对各浓度水平的半胱氨酸水溶液进行检测，半胱氨酸溶液的参考浓度：0.75mmol/L、1.5mmol/L、6mmol/L、12mmol/L。每个浓度水平重复测定3次，对比检测结果与参考溶液标示浓度的量级的差，检测结果与标示浓度的相对偏差不大于90%。其检测结果见图14。从图14中可看出，实施例6的原位杂交HPV检测试剂盒的显色结果与手持显色卡对比，半胱氨酸水溶液的浓度越大，显色越深，说明该原位杂交HPV检测试剂盒的检测结果准确。
特异性实验
以实施例5的检测试剂盒分别对同一份阴性样本进行测试，阴性样本所含半胱氨酸浓度分别为0.6mmol/L、1.2mmol/L、2.4mmol/L、4mmol/L、8mmol/L、12mmol/L、16mmol/L、24mmol/L。每个浓度水平重复测定3次，观察对比各检测项目检测结果的一致性程度，结果应为阴性，相对偏差不大于90%。其检测结果见图15。从图15可以看出，本发明的特异性强。
重复性实验
以实施例6的检测试剂盒对参考浓度为24mmol/L的半胱氨酸溶液进行重复测定4次，平放静置10min，对比检测结果与参考溶液标示浓度的量级的差，检测结果与标示浓度的相对偏差不大于90%。其检测结果见图16。从图16可以看出，本发明的重复性好。
本发明提供的检测试剂盒的使用方法是：取晨起第一次排尿时最初的5-10ml尿液，将尿液滴入尿液孔内，平放静置10-15分钟等待检测结果，将观察孔内显示的颜色与比色卡中的颜色对比，从而可确定尿液中是否感染HPV及携带量多少，正常尿液中不含HPV，检测试纸无色，显阴性。含有HPV的尿液显阳性，检测试纸显色，颜色越深说明HPV携带量越多。
以上所述本发明的具体实施方式，并不构成对本发明保护范围的限定。任何根据本发明的技术构思所做出的各种其他相应的改变与变形，均应包含在本发明权利要求的保护范围内。

Claims (10)

1.一种原位杂交HPV检测试纸条，其特征在于，包括依次连接的第一层析垫、检测试纸和第二层析垫，所述第二层析垫的下方粘接有玻璃纤维，所述玻璃纤维的长度大于所述第二层析垫的长度，所述玻璃纤维靠近所述检测试纸的一端下方粘接有吸液棉；所述检测试纸由试纸经试剂液浸泡后烘干而得，按重量计，所述试剂液包括HPVC1蛋白原位杂交液5-10%、柠檬酸5%、乙酸钠10-20%、钨酸钠10-40%、氯化汞5%，余者为水，其中，所述HPVC1蛋白原位杂交液由HPVC1蛋白与半胱氨酸溶液或半胱氨酸盐酸盐溶液原位杂交而成。
2.根据权利要求1所述的原位杂交HPV检测试纸条，其特征在于，所述HPVC1蛋白与所述半胱氨酸溶液或半胱氨酸盐酸盐溶液的重量比为1-10:90-99。
3.一种原位杂交HPV检测试剂盒，包括壳体，其特征在于，所述壳体内设有权利要求1所述的原位杂交HPV检测试纸条，所述壳体上设有尿液孔和观察孔，所述观察孔位于所述检测试纸的上方，所述尿液孔位于所述玻璃纤维的上方。
4.根据权利要求3所述的原位杂交HPV检测试剂盒，其特征在于，所述壳体包括上壳体和下壳体，所述上壳体与所述下壳体插接，所述上壳体内设有第一孔柱、第二凸起、所述观察孔、所述尿液孔和吸液棉固定槽，所述观察孔的两侧对角设有第三孔柱和第四孔柱，所述下壳体内设有第一凸起、第二孔柱、第三凸起和第四凸起，所述第一凸起与所述第一孔柱相适配，所述第二凸起与所述第二孔柱相适配，所述第三凸起与所述第三孔柱相适配，所述第四凸起与所述第四孔柱相适配，所述第一层析垫与所述第二凸起连接，所述检测试纸卡设于所述第三孔柱和所述第四孔柱之间，所述吸液棉卡设于所述吸液棉固定槽内。
5.根据权利要求4所述的原位杂交HPV检测试剂盒，其特征在于，所述第二凸起为塑料卡钉。
6.根据权利要求4所述的原位杂交HPV检测试剂盒，其特征在于，所述下壳体内靠近所述第一层析垫的位置设有凹槽，所述凹槽内设有干燥片。
7.根据权利要求3所述的原位杂交HPV检测试剂盒，其特征在于，所述壳体的形状为条形或叶形。
8.根据权利要求3所述的原位杂交HPV检测试剂盒，其特征在于，所述壳体上设有比色卡。
9.一种权利要求1所述的原位杂交HPV检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）取尿中C1蛋白类人***瘤病毒进行PCR-DNA核酸倍增，得HPVC1蛋白；
（2）取半胱氨酸或半胱氨酸盐酸盐，加入纯化水，制成浓度为24mmol/L的半胱氨酸溶液或半胱氨酸盐酸盐溶液；
（3）将所述HPVC1蛋白和所述半胱氨酸溶液或半胱氨酸盐酸盐溶液混合，静置48h，得HPVC1蛋白原位杂交液；
（4）按比例取柠檬酸、钨酸钠和乙酸钠，混合均匀，静置，得混合溶液；
（5）按比例取所述HPVC1蛋白原位杂交液、氯化汞、所述混合溶液和水，混合均匀，静置2h后，得试剂液，将试纸放入所述试剂液中浸泡10min，取出，烘干，得检测试纸；
（6）将所述检测试纸的两端分别粘接第一层析垫和第二层析垫，所述第二层析垫的下方粘接有玻璃纤维，所述玻璃纤维靠近所述检测试纸的一端粘接有吸液棉，即得。
10.一种权利要求3所述的原位杂交HPV检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将权利要求1所述的原位杂交HPV检测试纸条根据壳体的大小和形状进行裁切，裁切好后装入所述壳体内，即得。
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