CN115260333B - 一种活性多糖或活性多糖组合物及其在制备具有缓解和/或治疗肝损伤的产品中的应用 - Google Patents

一种活性多糖或活性多糖组合物及其在制备具有缓解和/或治疗肝损伤的产品中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及生物医药技术领域，具体公开了一种活性多糖或活性多糖组合物及其在制备具有缓解和/或治疗肝损伤的产品中的应用。所述的活性多糖为麒麟菜多糖，所述的麒麟菜多糖通过包含如下步骤的方法制备得到：S11.取中药麒麟菜，然后用水提醇沉法制备得到麒麟菜粗多糖；S12.将麒麟菜粗多糖溶解在水溶，先用第一透析袋进行透析得第一透析液和第一截留液；S13.将第一透析液装入第二透析袋中进行透析得第二透析液和第二截留液；取第二截留液浓缩干燥后即得所述的麒麟菜多糖。所述的活性多糖组合物，包含麒麟菜多糖和山楂多糖。研究表明本发明所述的活性多糖以及活性多糖组合物均具有优异的治疗和缓解肝损伤作用。

Description

一种活性多糖或活性多糖组合物及其在制备具有缓解和/或 治疗肝损伤的产品中的应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种活性多糖或活性多糖组合物及其在制备具有缓解和/或治疗肝损伤的产品中的应用。
背景技术
肝脏是酒精在体内代谢的主要场地，大量饮酒会增加肝脏负担，进而逐渐损伤肝脏。酒精进入肝脏后经过一系列氧化排出体外，其在肝脏中先被氧化为乙醛，进一步氧化为乙酸，最后转变为二氧化碳和水。而乙醛会导致肝细胞变性、坏死及纤维化，对肝细胞具有明显的毒害作用。一次性大量饮酒便会造成急性酒精性肝损伤，且随着酒精性肝损伤的发病率逐渐增加，病毒性肝炎、肝硬化甚至是肝癌等肝脏疾病也随之增加。
研究表明，中药复方制剂可提升肝脏抗酒精的损伤的能力，即其对肝脏具有较好的保护作用。许多中药不仅具有抗氧化以及抗凋亡活性的作用，且在改善肝功能方面，中药也有着“标本兼治”的优势。在开发保肝、护肝功能食品、药品过程中，引用中药天然产物进行酒精性肝损伤的治疗不失为一种重要方法。
麒麟菜多糖是从中药麒麟菜中提取得到的多糖；研究表明，其对肝损伤具有一定的治疗作用；但是简单的从麒麟菜中提取出来的粗多糖对于肝损伤的治疗作用并不显著。因此，以麒麟菜为原料，开发一种对肝损伤具有更好治疗效果的麒麟菜多糖具有重要的应用价值。
发明内容
为了解决现有技术中存在的至少之一的技术问题，本发明首先提供了一种活性多糖。所述的活性多糖为采用全新方法制备得到的麒麟菜多糖；研究表明，采用该方法制备得到的麒麟菜多糖与麒麟菜粗多糖相比，可以大幅提高麒麟菜粗多糖对于肝损伤的治疗作用。
本发明的技术方案如下：
一种活性多糖，所述的活性多糖为麒麟菜多糖，所述的麒麟菜多糖通过包含如下步骤的方法制备得到：
S11.取中药麒麟菜，然后用水提醇沉法制备得到麒麟菜粗多糖；
S12.将麒麟菜粗多糖溶解在水溶，先用第一透析袋进行透析得第一透析液和第一截留液；
S13.将第一透析液装入第二透析袋中进行透析得第二透析液和第二截留液；取第二截留液浓缩干燥后即得所述的麒麟菜多糖。
优选地，步骤S11中水提醇沉法的具体方法为：
取中药麒麟菜用水进行加热回流提取得麒麟菜提取液；然后浓缩麒麟菜提取液得麒麟菜浓缩液，再往麒麟菜浓缩液中加入乙醇，使得麒麟菜浓缩液中乙醇的最终体积分数为70～90％；最后经静置后取沉淀即得所述的麒麟菜粗多糖。
优选地，麒麟菜与水的用量比为1g：5～15mL。
最优选地，麒麟菜与水的用量比为1g：10mL。
优选地，浓缩麒麟菜提取液得麒麟菜浓缩液，使得麒麟菜浓缩液的体积为水的体积的1/3～1/5。
最优选地，浓缩麒麟菜提取液得麒麟菜浓缩液，使得麒麟菜浓缩液的体积为水的体积的1/4。
优选地，使得麒麟菜浓缩液中乙醇的最终体积分数为80％。
优选地，步骤S12中第一透析袋的孔径为4.5～5.5kD的透析袋。
进一步优选地，步骤S12中第一透析袋的孔径为5kD的透析袋。
优选地，步骤S13中第二透析袋的孔径为2.5～3.5kD的透析袋。
进一步优选地，步骤S13中第二透析袋的孔径为3kD的透析袋。
发明在大量的实验中惊奇的发现，对麒麟菜粗多糖先采用孔径为4.5～5.5kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为2.5～3.5kD的透析袋进行透析制备得到的麒麟菜多糖，其与麒麟菜粗多糖相比，可以大幅提高麒麟菜粗多糖对于肝损伤的治疗作用。
发明人在此需要强调的是，在麒麟菜多糖的制备过程中，两次透析袋进行透析孔径的选择，对于制备得到的麒麟菜多糖，能否大幅提高对于肝损伤的治疗作用起着决定性作用。在麒麟菜多糖的制备过程中，两次透析袋进行透析孔径的选择不同，制备得到的麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用的差别是巨大的；两次透析袋进行透析孔径的选择不当，其与麒麟菜粗多糖相比，不但不能提高或大幅提高麒麟菜粗多糖对于肝损伤的治疗作用，甚至还有所降低。
本发明还提供了一种活性多糖组合物，其包含麒麟菜多糖和山楂多糖；
所述的麒麟菜多糖采用的是权由上述方法制备得到的麒麟菜多糖。
优选地，麒麟菜多糖和山楂多糖的重量比为1～3:1。
最优选地，麒麟菜多糖和山楂多糖的重量比为2:1。
优选地，所述的山楂多糖通过如下方法制备得到：
S21.取中药山楂，然后用水提醇沉法制备得到山楂粗多糖；
S22.将山楂粗多糖溶解在水溶，先用第一透析袋进行透析得第一透析液和第一截留液；
S23.将第一透析液装入第二透析袋中进行透析得第二透析液和第二截留液；取第二截留液浓缩干燥后即得所述的山楂菜多糖。
优选地，步骤S21中水提醇沉法的具体方法为：
取中药山楂用水进行加热回流提取得山楂提取液；然后浓缩山楂提取液得山楂浓缩液，再往山楂浓缩液中加入乙醇，使得山楂浓缩液中乙醇的最终体积分数为70～80％；最后经静置后取沉淀即得所述的山楂粗多糖。
优选地，山楂与水的用量比为1g：5～15mL。
最优选地，山楂与水的用量比为1g：10mL。
优选地，浓缩山楂提取液得山楂浓缩液，使得山楂浓缩液的体积为水的体积的1/3～1/5。
最优选地，浓缩山楂提取液得山楂浓缩液，使得山楂浓缩液的体积为水的体积的1/4。
优选地，使得山楂浓缩液中乙醇的最终体积分数为75％。
优选地，步骤S22中第一透析袋的孔径为7.5～8.5kD的透析袋。
进一步优选地，步骤S12中第一透析袋的孔径为8kD的透析袋。
优选地，步骤S13中第二透析袋的孔径为5.5～6.5kD的透析袋。
进一步优选地，步骤S13中第二透析袋的孔径为6kD的透析袋。
发明人在大量的研究中惊奇的发现，将山楂粗多糖先采用孔径为7.5～8.5kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为5.5～6.5kD的透析袋进行透析制备得到的山楂多糖，与本发明所述的麒麟菜多糖组合后，可以进一步大幅提高麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用。
然而，发明人需要在此强调的是，山楂多糖的制备方法对于制备得到的山楂多糖与麒麟菜多糖组合后，能否进一步大幅提高麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用起着决定性作用。研究表明，只有将山楂粗多糖先采用孔径为7.5～8.5kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为5.5～6.5kD的透析袋进行透析制备得到的山楂多糖，与本发明所述的麒麟菜多糖组合后，才可以进一步大幅提高麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用；而采用其它方法制备得到的山楂多糖，与本发明所述的麒麟菜多糖组合后，并不能进一步大幅提高麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用。
本发明还提供了一种由上述活性多糖或活性多糖组合物在制备具有缓解和/或治疗肝损伤作用的产品中的应用。
优选地，所述的肝损伤乙醇所致的急性肝损伤。
优选地，所述的产品为功能性食品、膳食补充剂或药物。
有益效果：本发明提供了一种全新方法制备得到的活性多糖；所述的活性多糖为采用全新方法制备得到的麒麟菜多糖；研究表明，采用该方法制备得到的麒麟菜多糖与麒麟菜粗多糖相比，可以大幅提高麒麟菜粗多糖对于肝损伤的治疗作用。进一步地，将采用本发明所述方法制备得到的山楂多糖与本发明所述的麒麟菜多糖组合后得到的组合物，可以进一步大幅提高麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用，具有十分优异的治疗和缓解肝损伤作用。由于本发明所述的活性多糖以及活性多糖组合物均具有优异的治疗和缓解肝损伤作用；因此，将其作为有效成分用于开发具有缓解和/或治疗肝损伤的功能性食品、膳食补充剂或药物具有重要的应用价值。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1活性多糖的制备
S11.取400g中药麒麟菜，然后加入4L的水在100℃下进行加热回流提取1h，得麒麟菜提取液，将麒麟菜提取液浓缩至1L得麒麟菜浓缩液；接着在麒麟菜浓缩液中加入体积分数为95％的乙醇，使得麒麟菜浓缩液中乙醇的最终体积分数为80％，静置6h后，过滤，取固体得麒麟菜粗多糖；
S12.将麒麟菜粗多糖溶解在水溶，先用孔径为5kD的透析袋进行透析得第一透析液和第一截留液；
S13.将第一透析液装入孔径为3kD的透析袋中进行透析得第二透析液和第二截留液；取第二截留液浓缩干燥后即得所述的麒麟菜多糖；即所述的活性多糖。
实施例2活性多糖组合物
取按实施例1所述方法制备得到的麒麟菜多糖和山楂多糖按重量比为2:1混合均匀后即得所述的活性多糖组合物；
所述的山楂多糖通过如下方法制备得到：
S21.取400g中药山楂，然后加入4L的水在100℃下进行加热回流提取1h，得山楂提取液，将山楂提取液浓缩至1L得山楂浓缩液；接着在山楂浓缩液中加入体积分数为95％的乙醇，使得山楂浓缩液中乙醇的最终体积分数为75％，静置6h后，过滤，取固体得山楂粗多糖；
S22.将山楂粗多糖溶解在水溶，先用孔径为8kD的透析袋进行透析得第一透析液和第一截留液；
S23.将第一透析液装入孔径为6kD的透析袋中进行透析得第二透析液和第二截留液；取第二截留液浓缩干燥后即得所述的山楂多糖。
对比例1活性多糖的制备
S11.取400g中药麒麟菜，然后加入4L的水在100℃下进行加热回流提取1h，得麒麟菜提取液，将麒麟菜提取液浓缩至1L得麒麟菜浓缩液；接着在麒麟菜浓缩液中加入体积分数为95％的乙醇，使得麒麟菜浓缩液中乙醇的最终体积分数为80％，静置6h后，过滤，取固体得麒麟菜粗多糖；
S12.将麒麟菜粗多糖溶解在水溶，先用孔径为8kD的透析袋进行透析得第一透析液和第一截留液；
S13.将第一透析液装入孔径为6kD的透析袋中进行透析得第二透析液和第二截留液；取第二截留液浓缩干燥后即得所述的麒麟菜多糖；即所述的活性多糖。
对比例1与实施例1的区别在于，对比例1将麒麟菜粗多糖先采用孔径为8kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为6kD的透析袋进行透析制备得到麒麟菜多糖；而实施例1则是将麒麟菜粗多糖先采用孔径为5kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为3kD的透析袋进行透析制备得到麒麟菜多糖。
对比例2活性多糖的制备
S11.取400g中药麒麟菜，然后加入4L的水在100℃下进行加热回流提取1h，得麒麟菜提取液，将麒麟菜提取液浓缩至1L得麒麟菜浓缩液；接着在麒麟菜浓缩液中加入体积分数为95％的乙醇，使得麒麟菜浓缩液中乙醇的最终体积分数为80％，静置6h后，过滤，取固体得麒麟菜粗多糖；
S12.将麒麟菜粗多糖溶解在水溶，先用孔径为3kD的透析袋进行透析得第一透析液和第一截留液；
S13.将第一透析液装入孔径为1kD的透析袋中进行透析得第二透析液和第二截留液；取第二截留液浓缩干燥后即得所述的麒麟菜多糖；即所述的活性多糖。
对比例2与实施例1的区别在于，对比例2将麒麟菜粗多糖先采用孔径为3kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为1kD的透析袋进行透析制备得到麒麟菜多糖；而实施例1则是将麒麟菜粗多糖先采用孔径为5kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为3kD的透析袋进行透析制备得到麒麟菜多糖。
对比例3活性多糖组合物
取按实施例1所述方法制备得到的麒麟菜多糖和山楂多糖按重量比为2:1混合均匀后即得所述的活性多糖组合物；
所述的山楂多糖通过如下方法制备得到：
S21.取400g中药山楂，然后加入4L的水在100℃下进行加热回流提取1h，得山楂提取液，将山楂提取液浓缩至1L得山楂浓缩液；接着在山楂浓缩液中加入体积分数为95％的乙醇，使得山楂浓缩液中乙醇的最终体积分数为75％，静置6h后，过滤，取固体得山楂粗多糖；
S22.将山楂粗多糖溶解在水溶，先用孔径为5kD的透析袋进行透析得第一透析液和第一截留液；
S23.将第一透析液装入孔径为3kD的透析袋中进行透析得第二透析液和第二截留液；取第二截留液浓缩干燥后即得所述的山楂多糖。
对比例3与实施例2的区别在于，对比例3将山楂粗多糖先采用孔径为5kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为3kD的透析袋进行透析制备得到的山楂多糖，与本发明所述的麒麟菜多糖组合制备活性多糖组合物；而实施例2则是将山楂粗多糖先采用孔径为8kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为6kD的透析袋进行透析制备得到的山楂多糖，与本发明所述的麒麟菜多糖组合制备活性多糖组合物。
实验例1
取体重一致的实验小鼠分为正常组、酒精组、药物组1～6，每组10只，雌雄各半。实验进行如下，除正常组，酒精组、药物组小鼠每天灌胃白酒(酒精:水-v:v-53:47)8mL/kg(约3.5g/kg)一次，灌胃白酒前3h灌胃相应药物(10mg/kg/d)或等容积蒸馏水，灌胃体积均为0.2mL/10g。于造模第9天禁食12h，第10天给予白酒后4h，断头取血；分离血清，按试剂盒说明书方法测定血清中ALT、AST的含量。测试结果见表1。
药物组1～6分别测试按照实施例1方法制备得到的麒麟菜粗多糖，以及实施例1、2以及对比例1～3制备得到的活性多糖或活性多糖组合物。
表1.
从由表1实验数据可看出，与空白对照组相比，酒精组AST、ALT含量显著升高，说明乙醇所致急性肝损伤小鼠模型构建成功。
从由表1实验数据可看出，药物组1的AST、ALT含量与酒精组相比，虽然有降低，但是幅度不大；这说明，采用实施例1方法制备得到的麒麟菜粗多糖对于乙醇所致的急性肝损伤的治疗效果有限。然而，药物组2的AST、ALT含量与酒精组以及药物组1相比，有着大幅的降低；这说明：将麒麟菜粗多糖先采用孔径为4.5～5.5kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为2.5～3.5kD的透析袋进行透析制备得到的麒麟菜多糖具有优异的治疗肝损伤作用；其与麒麟菜粗多糖相比，可以大幅提高麒麟菜粗多糖对于肝损伤的治疗作用。
从由表1实验数据可看出，药物组4和5的AST、ALT含量与药物组1相比，降低幅度并不大，其降低幅度远远小于药物组2；这说明：在麒麟菜多糖的制备过程中，两次透析袋进行透析孔径的选择，对于制备得到的麒麟菜多糖，能否大幅提高对于肝损伤的治疗作用起着决定性作用。在麒麟菜多糖的制备过程中，两次透析袋进行透析孔径的选择不同，制备得到的麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用的差别是巨大的；两次透析袋进行透析孔径的选择不当，其与麒麟菜粗多糖相比，不但不能提高或大幅提高麒麟菜粗多糖对于肝损伤的治疗作用，甚至还有所降低。只有将麒麟菜粗多糖先采用孔径为4.5～5.5kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为2.5～3.5kD的透析袋进行透析制备得到的麒麟菜多糖才具有优异的治疗肝损伤作用；其与麒麟菜粗多糖相比，才可以大幅提高麒麟菜粗多糖对于肝损伤的治疗作用。
从由表1实验数据可看出，药物组3的AST、ALT含量与药物组2相比，进一步有着大幅的降低；这么说明：将山楂粗多糖先采用孔径为7.5～8.5kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为5.5～6.5kD的透析袋进行透析制备得到的山楂多糖，与本发明所述的麒麟菜多糖组合后，可以进一步大幅提高麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用。然而，药物组6的AST、ALT含量与药物组2相比，并没得到降低，且大幅高于药物组3；这进一步说明：山楂多糖的制备方法对于制备得到的山楂多糖与麒麟菜多糖组合后，能否进一步大幅提高麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用起着决定性作用；只有将山楂粗多糖先采用孔径为7.5～8.5kD的透析袋进行透析，然后再采用孔径为5.5～6.5kD的透析袋进行透析制备得到的山楂多糖，与本发明所述的麒麟菜多糖组合后，才可以进一步大幅提高麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用；而采用其它方法制备得到的山楂多糖，与本发明所述的麒麟菜多糖组合后，并不能进一步大幅提高麒麟菜多糖对于肝损伤的治疗作用。

Claims (6)

1.一种活性多糖，其特征在于，所述的活性多糖为麒麟菜多糖，所述的麒
麟菜多糖通过包含如下步骤的方法制备得到：
S11. 取中药麒麟菜，然后用水提醇沉法制备得到麒麟菜粗多糖；
S12. 将麒麟菜粗多糖溶解在水中，先用第一透析袋进行透析得第一透析液
和第一截留液；
S13. 将第一透析液装入第二透析袋中进行透析得第二透析液和第二截留液；取第二截留液浓缩干燥后即得所述的麒麟菜多糖；
步骤S12中第一透析袋的孔径为4.5~5.5kD的透析袋；
步骤S13中第二透析袋的孔径为2.5~3.5kD的透析袋。
2.根据权利要求1所述的活性多糖，其特征在于，步骤S12中第一透析袋的孔径为5kD的透析袋。
3.根据权利要求1所述的活性多糖，其特征在于，步骤S13中第二透析袋的孔径为3kD的透析袋。
4.一种活性多糖组合物，其特征在于，包含麒麟菜多糖和山楂多糖；其中，麒麟菜多糖和山楂多糖的重量比为2:1；
所述的麒麟菜多糖采用的是权利要求1~3任一项所述方法制备得到的麒麟菜多糖；
所述的山楂多糖通过如下方法制备得到：
S21. 取中药山楂，然后用水提醇沉法制备得到山楂粗多糖；
S22. 将山楂粗多糖溶解在水中，先用第一透析袋进行透析得第一透析液和
第一截留液；
S23. 将第一透析液装入第二透析袋中进行透析得第二透析液和第二截留液；取第二截留液浓缩干燥后即得所述的山楂菜多糖；
步骤S22中第一透析袋的孔径为7.5~8.5kD的透析袋；
步骤S23中第二透析袋的孔径为5.5~6.5kD的透析袋。
5.权利要求1~4任一项所述的活性多糖或活性多糖组合物在制备具有缓解和/或治疗肝损伤作用的产品中的应用；
所述的肝损伤为乙醇所致的急性肝损伤。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的产品为功能性食品、膳食补充剂或药物。
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