CN114946997A - 一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物饲料发酵领域,公开了一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法,包括以下步骤:将枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母和黑曲霉分别在培养基内进行培养繁殖,得到扩培液,备用;将甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米、糖蜜混合后加水搅拌均匀,将得到的混合物料送入灭菌罐中进行灭菌处理;在经过灭菌处理的混合物料中接入枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液进行第一次混合发酵;第一次混合发酵结束后继续加入产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液,进行第二次混合发酵,得到湿料;将湿料进行低温干燥、粉碎后得到复合饲料。本发明制备得到的复合饲料有效改善了秸秆饲草适口性差的现象,并且提高了饲料利用率以及饲喂效果。
Description
技术领域
本发明涉及生物饲料发酵技术领域,特别是涉及一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法。
背景技术
中国一直以来是世界上的畜牧业大国和饲料生产大国,同时中国又是饲料消费大国,畜牧业和饲料业持续快速增长,新疆以农业为主,未利用的农业副产物和果蔬副产物资源非常丰富,尤其是甜菜废丝高湿易腐农业副产物原料,由于缺少针对该类副产物的发酵技术,因此大部分被浪费或者售卖给养殖户作为冬储饲料进行窖藏储存,但是由于窖藏密封性差常发生霉变和腐烂,饲养价值低。经检测发现甜菜废丝是一种高纤维的饲用原料和重要的改善肠道内环境的原料。
因此,面对日益严峻的畜牧业发展受饲料原料供应严重限制的局面,尝试利用新型饲料成分来代替日渐紧缺的常规饲料成分来开发利用非常规饲料资源,提高饲料的利用率,并同时减缓牛羊等反刍动物对秸秆饲草适口性差的现象,提升饲喂效果是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此,本发明提供了一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法,可以有效解决反刍动物对秸秆饲草适口性差及饲料利用率低、饲喂效果差的问题。
为了解决上述技术问题,本发明提供了一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法,包括以下步骤:
(1)将枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母和黑曲霉分别在培养基内进行培养繁殖,得到扩培液,备用;
(2)将甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米、糖蜜混合后加水搅拌均匀,将得到的混合物料送入灭菌罐中进行灭菌处理;
(3)在经过灭菌处理的混合物料中接入枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液进行第一次混合发酵;
(4)第一次混合发酵结束后继续加入产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液,进行第二次混合发酵,得到湿料;
(5)将所述湿料进行低温干燥、粉碎后得到复合饲料。
在本发明中,枯草芽孢杆菌具有耐酸、耐盐、耐高温及耐挤压的特性,且在肠道上能迅速发芽转变成具有新陈代谢作用的营养型细胞,具有多种有效促活性成分,富含多种氨基酸,能产生蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等多种胞外酶,并且还能够平衡/稳定乳酸杆菌;
嗜酸乳杆菌对反刍动物腹泻的预防与治疗效果明显,且具有明显的增重效果,提高采食量和日增重,显著提高粗纤维的表观消化率,且增加瘤胃中纤维分解菌和乳酸产生菌的数量;
黑曲霉是分泌纤维素酶和果胶酶的强菌株,用黑曲霉发酵饲料安全、可靠,不产生毒素,且抑杂菌能力强,可以分泌淀粉酶、纤维素酶、木聚糖酶等,促进纤维物质、淀粉等原料养分的降解,释放出能够被乳酸菌、酵母菌利用的单双糖类;
产朊假丝酵母具有特有的色、香、味,适口性好,而且发酵过程中耐酸能力强,适宜于低pH培养,不易污染,回收率高,富含B族维生素并且能够产生促进细胞***的生物活性物质,有强化营养和抗病促长的效果。
优选的,在上述一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法中,步骤 (2)中甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米和糖蜜的质量比为(25-35):(15-25):(15-25):(5-15):(15-20):(15-25);
进一步优选的,甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米和糖蜜的质量比为30:20:20:10:17:20。
优选的,在上述一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法中,所述糖蜜为甜菜糖蜜、甘蔗糖蜜、柑橘糖蜜、玉米糖蜜中的任一种或者几种的混合。
优选的,在上述一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法中,步骤 (2)中所述混合物料的粒径为20-100mm。
优选的,在上述一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法中,步骤 (3)中所述枯草芽孢杆菌扩培液和所述嗜酸乳杆菌扩培液的添加量为混合物料总质量的12-15%,且所述枯草芽孢杆菌扩培液和所述嗜酸乳杆菌扩培液的质量比为1:(1-2.5);
进一步优选的,所述枯草芽孢杆菌扩培液和所述嗜酸乳杆菌扩培液的质量比为1:1。
优选的,在上述一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法中,步骤 (3)中所述第一次混合发酵的发酵温度为32-35℃,发酵时间为24-30h;
进一步优选的,所述第一次混合发酵的发酵温度为33℃,发酵时间为28h。
优选的,在上述一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法中,步骤 (4)中所述产朊假丝酵母扩培液和所述黑曲霉扩培液的添加量为混合物料总质量的10-12%,且所述产朊假丝酵母扩培液和所述黑曲霉扩培液的质量比为1:(1-1.5);
进一步优选的,所述产朊假丝酵母扩培液和所述黑曲霉扩培液的质量比为1:1。
优选的,在上述一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法中,步骤 (4)中所述第二次混合发酵的发酵温度为30-32℃,发酵时间为36-45h。
进一步优选的,所述第二次混合发酵的发酵温度为30℃,发酵时间为40h。
优选的,在上述一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法中,步骤 (5)中所述低温干燥为在低温沸腾流化床中通过空气冷却至25-30℃。
优选的,在上述一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法中,所述枯草芽孢杆菌扩培液、所述嗜酸乳杆菌扩培液、所述产朊假丝酵母扩培液和所述黑曲霉扩培液的活菌数均不低于1.2×107-1.8×107CFU/g;
进一步优选的,所述枯草芽孢杆菌扩培液的活菌数不低于 1.8×107CFU/g,所述嗜酸乳杆菌扩培液的活菌数不低于1.5×107CFU/g,所述产朊假丝酵母扩培液的活菌数不低于1.2×107CFU/g,所述黑曲霉扩培液的活菌数不低于1.8×107CFU/g;
进一步优选的,所述枯草芽孢杆菌接种的培养基为LB培养基,所述LB培养基为:NaCl10.0g,蛋白胨10.0g,酵母膏5.0g;pH=7.0;
所述嗜酸乳杆菌接种的培养基为MRS培养基,所述MRS培养基为:蛋白胨10.0g/L,牛肉膏8.0g/L,酵母膏4.0g/L,葡萄糖20.0g/L,吐温801mL/L,磷酸氢二钾2.0g/L,三水乙酸钠5.0g/L,柠檬酸三铵 2.0g/L,七水硫酸镁0.2g/L,硫酸锰0.05g/L;pH=6.2±0.2;
所述产朊假丝酵母接种的培养基为YPD培养基,所述YPD培养基为:酵母粉5.0g/L,蛋白胨10.0g/L,葡萄糖20.0g/L,丙酸钠2.5g/L, pH=4.0±0.1;
所述黑曲霉接种的培养基为PDA培养基,所述PDA培养基为:土豆200g,蔗糖20g,琼脂20g。
优选的,在上述一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法中,步骤 (5)中所述所述复合饲料的粒径为3-8mm。
本发明还提供了一种由上述方法制备得到的混合菌种发酵的复合饲料。
本发明提供了一种混合菌种发酵生产复合饲料,与现有技术相比,其有益效果在于:
(1)本发明利用微生物发酵甜菜废丝、秸秆等廉价农副产品生产成为畜牧饲草料,利用微生物发酵过程中产生的酶将难以消化吸收的大分子物质降解为可吸收利用的小分子营养物质,降低饲料成本,提高饲料转化率,从而达到提高经济效益的目的;
(2)本发明发酵过程中优化了秸秆饲料,提高秸秆饲料化的使用量,并促进反刍动物吸收利用,使饲养成本降低,经济效益得到提高,达到玉米秸秆在反刍动物日粮中高效、安全的使用效果,进而缓解人畜争粮的危机,并且通过优化原料种类、添加量及菌种的选择,还解决了单一秸秆饲草牛羊等反刍动物适口性的问题,有效提升了饲喂效果,解决了秸秆及其他农副产品处理的问题。
(3)本发明通过对枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母和黑曲霉的相互作用,并通过两次混合发酵过程获得菌含量、酶含量、酸含量均较高的复合饲料,可以有效提高反刍动物的采食量和饲料转化率,并且能够提高复合饲料整体的适口性,刺激动物食欲,以及减少营养性和细菌性所导致的腹泻等肠道问题,提高机体免疫力。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法,包括以下步骤:
(1)将枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母和黑曲霉分别在培养基内进行培养繁殖,得到扩培液,备用;
(2)将甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米、甜菜糖蜜按照30:20:20:10:17:20的质量比混合后加水搅拌均匀得到混合物料,送入灭菌罐中进行灭菌处理,其中混合物料的粒径为20-100mm;
(3)在经过灭菌处理的混合物料中接入混合物料总质量13%的枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液在33℃的条件下进行第一次混合发酵,发酵时间为28h,其中枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液的质量比为1:1;
(4)第一次混合发酵结束后继续加入混合物料总质量11%的产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液在30℃的条件下进行第二次混合发酵,发酵时间为40h,得到湿料,其中产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液的质量比为1:1;
(5)将湿料在低温沸腾流化床中通过空气冷却至25-30℃,粉碎至3-8mm,得到复合饲料。
实施例2
一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法,包括以下步骤:
(1)将枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母和黑曲霉分别在培养基内进行培养繁殖,得到扩培液,备用;
(2)将甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米、甘蔗糖蜜按照25:15:15:5:15:15的质量比混合后加水搅拌均匀得到混合物料,送入灭菌罐中进行灭菌处理,其中混合物料的粒径为20-100mm;
(3)在经过灭菌处理的混合物料中接入混合物料总质量12%的枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液在32℃的条件下进行第一次混合发酵,发酵时间为30h,其中枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液的质量比为1:1.5;
(4)第一次混合发酵结束后继续加入混合物料总质量10%的产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液在30℃的条件下进行第二次混合发酵,发酵时间为45h,得到湿料,其中产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液的质量比为1:1.2;
(5)将湿料在低温沸腾流化床中通过空气冷却至25-30℃,粉碎至3-8mm,得到复合饲料。
实施例3
一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法,包括以下步骤:
(1)将枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母和黑曲霉分别在培养基内进行培养繁殖,得到扩培液,备用;
(2)将甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米、甘蔗糖蜜和玉米糖蜜按照35:25:25:15:20:12:13的质量比混合后加水搅拌均匀得到混合物料,送入灭菌罐中进行灭菌处理,其中混合物料的粒径为 20-100mm;
(3)在经过灭菌处理的混合物料中接入混合物料总质量15%的枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液在35℃的条件下进行第一次混合发酵,发酵时间为24h,其中枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液的质量比为1:1;
(4)第一次混合发酵结束后继续加入混合物料总质量12%的产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液在32℃的条件下进行第二次混合发酵,发酵时间为36h,得到湿料,其中产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液的质量比为1:1.5;
(5)将湿料在低温沸腾流化床中通过空气冷却至25-30℃,粉碎至3-8mm,得到复合饲料。
对比例1
一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法,包括以下步骤:
(1)将枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌分别在培养基内进行培养繁殖,得到扩培液,备用;
(2)将甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米、甜菜糖蜜按照 30:20:20:10:17:20的质量比混合后加水搅拌均匀得到混合物料,送入灭菌罐中进行灭菌处理,其中混合物料的粒径为20-100mm;
(3)在经过灭菌处理的混合物料中接入混合物料总质量13%的枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液在33℃的条件下进行混合发酵,发酵时间为28h,得到湿料,其中枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液的质量比为1:1;
(4)将湿料在低温沸腾流化床中通过空气冷却至25-30℃,粉碎至3-8mm,得到复合饲料。
对比例2
一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法,包括以下步骤:
(1)将产朊假丝酵母和黑曲霉分别在培养基内进行培养繁殖,得到扩培液,备用;
(2)将甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米、甜菜糖蜜按照 30:20:20:10:17:20的质量比混合后加水搅拌均匀得到混合物料,送入灭菌罐中进行灭菌处理,其中混合物料的粒径为20-100mm;
(3)在经过灭菌处理的混合物料中接入混合物料总质量11%的产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液在30℃的条件下进行混合发酵,发酵时间为40h,得到湿料,其中产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液的质量比为1:1;
(4)将湿料在低温沸腾流化床中通过空气冷却至25-30℃,粉碎至3-8mm,得到复合饲料。
对比例3
对比例3提供的混合菌种发酵生产复合饲料的方法与实施例基本相同,其区别仅在于步骤(2)的混合物料中不添加甜菜废丝;
步骤(2)具体为:将玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米、甜菜糖蜜按照20:20:10:17:20的质量比混合后加水搅拌均匀得到混合物料,送入灭菌罐中进行灭菌处理,其中混合物料的粒径为20-100mm。
需要说明的是,在上述实施例1-3及对比例1-3中,枯草芽孢杆菌接种的培养基为LB培养基,LB培养基为:NaCl10.0g,蛋白胨10.0g,酵母膏5.0g;pH=7.0;嗜酸乳杆菌接种的培养基为MRS培养基,MRS 培养基为:蛋白胨10.0g/L,牛肉膏8.0g/L,酵母膏4.0g/L,葡萄糖20.0g/L,吐温801mL/L,磷酸氢二钾2.0g/L,三水乙酸钠5.0g/L,柠檬酸三铵 2.0g/L,七水硫酸镁0.2g/L,硫酸锰0.05g/L;pH=6.2±0.2;产朊假丝酵母接种的培养基为YPD培养基,YPD培养基为:酵母粉5.0g/L,蛋白胨10.0g/L,葡萄糖20.0g/L,丙酸钠2.5g/L,pH=4.0±0.1;黑曲霉接种的培养基为PDA培养基,PDA培养基为:土豆200g,蔗糖20g,琼脂20g。
枯草芽孢杆菌扩培液的活菌数不低于1.8×107CFU/g,嗜酸乳杆菌扩培液的活菌数不低于1.5×107CFU/g,产朊假丝酵母扩培液的活菌数不低于1.2×107CFU/g,黑曲霉扩培液的活菌数不低于1.8×107CFU/g。
试验例1
本试验对实施例1-3及对比例1-3制备得到的复合饲料的水分、灰分、粗蛋白及总酸、酶活等进行了检测,检测结果如表1所示:
表1
水分/% | 灰分/% | 粗蛋白/% | 总酸g/kg | 酶活μ/g | |
实施例1 | 8.53 | 3.26 | 16.4 | 98 | 589.46 |
实施例2 | 9.29 | 4.02 | 15.3 | 100 | 577.69 |
实施例3 | 9.98 | 3.84 | 19.9 | 95 | 579.34 |
对比例1 | 15.69 | 7.95 | 13.8 | 65 | 459.02 |
对比例2 | 16.73 | 8.07 | 14.2 | 68 | 442.58 |
对比例3 | 13.99 | 7.21 | 14.1 | 75 | 483.01 |
由表1可知,相较单独使用枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌进行发酵或者单独使用产朊假丝酵母、黑曲霉进行发酵的方案,本发明使用四种菌种协同发酵并且分两次进行发酵制备得到的复合饲料的水分、灰分、粗蛋白、总酸、酶活等性能均更加优异;并且通过添加甜菜废丝,同样可以在一定程度上优化饲料的物质含量。
试验例2
本试验选择平均初始体重为12.0±0.5kg的健康羔羊100只,随机平均分为5个组,分别饲喂常规饲料、实施例1-3制备得到的饲料和对比例1-3制备得到的饲料,试验期为35天,记录羔羊的初始重量和试验期结束后的重量,并计算日增重、日采食量、成活率和腹泻率,具体数据及结果参见表2:
表2
由表2可知,相较常规市售饲料和对比例1-3制备得到的饲料,本发明制备得到的复合饲料对羔羊的适口性更好、料重比更高,且成活率更高、腹泻率得到有效改善,能够有效改善反刍动物的肠道问题,提高机体免疫力。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述,每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处,各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的方案而言,由于其与实施例公开的方法相对应,所以描述的比较简单,相关之处参见方法部分说明即可。
对所公开的实施例的上述说明,使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的,本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例,而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
Claims (10)
1.一种混合菌种发酵生产复合饲料的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母和黑曲霉分别在培养基内进行培养繁殖,得到扩培液,备用;
(2)将甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米、糖蜜混合后加水搅拌均匀,将得到的混合物料送入灭菌罐中进行灭菌处理;
(3)在经过灭菌处理的混合物料中接入枯草芽孢杆菌扩培液和嗜酸乳杆菌扩培液进行第一次混合发酵;
(4)第一次混合发酵结束后继续加入产朊假丝酵母扩培液和黑曲霉扩培液,进行第二次混合发酵,得到湿料;
(5)将所述湿料进行低温干燥、粉碎后得到复合饲料。
2.根据权利要求1所述的混合菌种发酵生产复合饲料的方法,其特征在于,步骤(2)中甜菜废丝、玉米秸秆、棉粕、小麦、玉米和糖蜜的质量比为(25-35):(15-25):(15-25):(5-15):(15-20):(15-25)。
3.根据权利要求1或2所述的混合菌种发酵生产复合饲料的方法,其特征在于,步骤(2)中所述混合物料的粒径为20-100mm。
4.根据权利要求1所述的混合菌种发酵生产复合饲料的方法,其特征在于,步骤(3)中所述枯草芽孢杆菌扩培液和所述嗜酸乳杆菌扩培液的添加量为混合物料总质量的12-15%,且所述枯草芽孢杆菌扩培液和所述嗜酸乳杆菌扩培液的质量比为1:(1-2.5)。
5.根据权利要求1或4所述的混合菌种发酵生产复合饲料的方法,其特征在于,步骤(3)中所述第一次混合发酵的发酵温度为32-35℃,发酵时间为24-30h。
6.根据权利要求1所述的混合菌种发酵生产复合饲料的方法,其特征在于,步骤(4)中所述产朊假丝酵母扩培液和所述黑曲霉扩培液的添加量为混合物料总质量的10-12%,且所述产朊假丝酵母扩培液和所述黑曲霉扩培液的质量比为1:(1-1.5)。
7.根据权利要求1或6所述的混合菌种发酵生产复合饲料的方法,其特征在于,步骤(4)中所述第二次混合发酵的发酵温度为30-32℃,发酵时间为36-45h。
8.根据权利要求1所述的混合菌种发酵生产复合饲料的方法,其特征在于,步骤(5)中所述低温干燥为在低温沸腾流化床中通过空气冷却至25-30℃。
9.根据权利要求1所述的混合菌种发酵生产复合饲料的方法,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌扩培液、所述嗜酸乳杆菌扩培液、所述产朊假丝酵母扩培液和所述黑曲霉扩培液的活菌数均不低于1.2×107-1.8×107CFU/g。
10.一种权利要求1-9任一项所述方法制备得到的混合菌种发酵的复合饲料。
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