CN114652773B - 一种妇科凝胶及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种妇科凝胶及其制备方法与应用，属于医药技术领域。所述妇科凝胶按照重量份数计，由如下原料加工而成：黄精多糖1～20份、茯苓多糖1～20份、卡波姆94010～20份、芦荟胶30～100份、甘油150～250份、肉桂挥发油0.1～10份、鱼腥草挥发油0.1～10份、丁香挥发油0.1～10份、L‑薄荷醇10～20份、鼠李糖乳杆菌10～20份、尼泊金乙酯0.1～10份、95％乙醇20～80份和水150～250份。通过本发明制备的妇科凝胶具有明显的抑菌抗炎作用，适于工业推广与应用。

Description

一种妇科凝胶及其制备方法与应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别涉及一种妇科凝胶及其制备方法，并公开所述妇科凝胶在医药领域抑菌抗炎中的应用。

背景技术

妇科感染性疾病是一类常见病和多发病，特别是霉菌性***炎、***和老年性***炎发病率很高，目前对***炎主要采用抗生素类药物治疗，***主要采用物理和手术疗法。长期使用抗生素类药物，会产生耐药性，使***菌群失调；且物理或手术疗法，对人身体有创伤，宫颈分泌能力下降，***防御屏障被破坏，严重影响性生活和生殖健康。

因此，如何提供一种安全有效并具有抑菌抗炎作用的妇科凝胶是本领域技术人员亟待解决的技术难题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是针对现有技术中存在的问题，提供一种具有抑菌抗炎作用的妇科凝胶。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种妇科凝胶，所述口服液按照重量份数计，由如下原料加工而成：

黄精多糖1～20份、茯苓多糖1～20份、卡波姆940 10～20份、芦荟胶30～100份、甘油150～250份、肉桂挥发油0.1～10份、鱼腥草挥发油0.1～10份、丁香挥发油0.1～10份、L-薄荷醇10～20份、鼠李糖乳杆菌10～20份、尼泊金乙酯0.1～10份、95％乙醇20～80份和水150～250份。

需要说明的是，妇科凝胶组分中黄精多糖、茯苓多糖具有增强机体免疫力的作用；鱼腥草挥发油具有抗病毒、抗炎、增强免疫力等作用；肉桂挥发油具有退热、镇痛、抗菌、抗真菌作用；且丁香挥发油体外对产酸克雷伯菌、肠炎沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抗菌作用；体内对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等感染的小鼠均有较好的治疗作用。

此外，本发明通过多糖增强免疫力，以提高机体的抵抗力，免受外邪的入侵；挥发油直接抗菌消炎，两者联合用药起到协同作用，用于治疗细菌性***炎、老年性***炎等妇科疾病。

本发明还有一个目的是提供上述妇科凝胶的制备方法。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种妇科凝胶的制备方法，具体包括如下步骤：

(1)按上述公开的重量份数分别称取各原料，随后在黄精多糖、茯苓多糖中加水溶解完全，备用；

(2)A液：将卡波姆940和芦荟胶加入至步骤(1)溶解的液体中，搅拌均匀，放置6～24小时，充分溶胀，备用；

(3)B液：将L-薄荷醇、肉桂挥发油、鱼腥草挥发油、丁香挥发油、尼泊金乙酯溶于95％的乙醇中，随后加甘油搅拌均匀，备用；

(4)少量多次将B液加到A液中，再加入鼠李糖乳杆菌，边加边搅拌，搅拌均匀后，用胶体磨匀浆1～3次，随后灌装，即得妇科凝胶。

本发明还请求保护上述妇科凝胶在医药领域中的应用。

经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明提供了一种妇科凝胶及其制备方法与应用，具有如下优异效果：

(1)本发明采用纯天然中药挥发油成分制备妇科凝胶，对人身体无伤害，不会产生抗药性、耐用性；且抑菌实验结果显示，对大肠杆菌，白色念珠菌，金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用。

(2)本发明通过添加益生菌乳酸杆菌，调节***微生态环境，抑制致病微生物的生长。

(3)本发明选用高分子化合物卡波姆作为基质，可维持挥发油活性物质的稳定性，对***粘膜具有亲和性和保护作用。

(4)本发明公开的制备工艺操作简便，适合工业化大生产。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

图1为不同规格妇科凝胶对新西兰兔***组织病理学形态的影响。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例公开了一种具有抑菌抗炎作用的妇科凝胶及其制备方法。

为更好地理解本发明，下面通过以下实施例对本发明作进一步具体的阐述，但不可理解为对本发明的限定，对于本领域的技术人员根据上述发明内容所作的一些非本质的改进与调整，也视为落在本发明的保护范围内。

下面将结合具体实验，对本发明的技术方案进行进一步的说明。

需要说明的是，本发明内容不仅限于下述各实验例的内容。

实施例1：

配方：黄精多糖1份、卡波姆94010份、芦荟胶30份、甘油150份、肉桂挥发油0.1份、鱼腥草挥发油0.1份、丁香挥发油0.1份、L-薄荷醇10份、鼠李糖乳杆菌10份、尼泊金乙酯0.1份、95％乙醇20份和水150份。

制法：(1)称取黄精多糖，加水液溶解完全；

(2)A液：卡波姆940、芦荟胶，加上述黄精多糖溶液，搅拌均匀，放置6小时，充分溶胀；

(3)B液：将L-薄荷醇、肉桂挥发油、鱼腥草挥发油、丁香挥发油、尼泊金乙酯溶于95％的乙醇中，加甘油，搅拌均匀；

(4)少量多次将B液加到A液中，再加入鼠李糖乳杆菌，边加边搅拌，搅拌均匀后，用胶体磨匀浆1次；

(5)灌装，每支装5g，即得妇科凝胶。

实施例2：

配方：黄精多糖1份、茯苓多糖1份、卡波姆940 15份、芦荟胶40份、甘油180份、肉桂挥发油0.2份、鱼腥草挥发油0.2份、丁香挥发油0.2份、L-薄荷醇15份、鼠李糖乳杆菌15份、尼泊金乙酯0.2份、95％乙醇25份和水180份。

制法：(1)称取黄精多糖、茯苓多糖，加水液溶解完全；

(2)A液：卡波姆940、芦荟胶，加上述黄精多糖等溶液，搅拌均匀，放置12h，充分溶胀；

(3)B液：将L-薄荷醇、肉桂挥发油、鱼腥草挥发油、丁香挥发油、尼泊金乙酯溶于95％的乙醇中，加甘油，搅拌均匀；

(4)少量多次将B液加到A液中，再加入鼠李糖乳杆菌，边加边搅拌，搅拌均匀后，用胶体磨匀浆2次；

(5)灌装，每支装5g，即得妇科凝胶。

实施例3：

配方：黄精多糖2份、茯苓多糖2份、卡波姆940 20份、芦荟胶50份、甘油200份、肉桂挥发油0.3份、鱼腥草挥发油0.3份、丁香挥发油0.3份、L-薄荷醇20份、尼泊金乙酯0.3份、95％乙醇30份和水200份。

制法：(1)称取黄精多糖、茯苓多糖，加水液溶解完全；

(2)A液：卡波姆940、芦荟胶，加上述黄精多糖等溶液，搅拌均匀，放置24小时，充分溶胀；

(3)B液：将L-薄荷醇、肉桂挥发油、鱼腥草挥发油、丁香挥发油、尼泊金乙酯溶于95％的乙醇中，加甘油，搅拌均匀；

(4)少量多次将B液加到A液中，边加边搅拌，搅拌均匀后，用胶体磨匀浆；

(5)灌装，每支装5g，即得妇科凝胶。

为进一步验证由本发明制得的妇科凝胶具有优异的技术效果，发明人还进行了如下性能测定实验：

体内实验：不同规格妇科凝胶对实验兔体内抑菌抗炎作用的比较研究

1.试验目的

本试验通过建立金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌混合菌***炎模型，考察妇科凝胶对由金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌的抑制作用，为妇科凝胶的临床应用提供药理学依据。

2.试验材料(需要说明的是，下述供试品1～3分别对应上述实施例1～3公开的妇科凝胶组成与制备工艺)

2.1.1供试品1

名称：妇科凝胶1

批号：20210413

性状：/

规格：每支装5g

有效期至：2023年04月

保存条件：阴凉、通风、干燥处保存

成分：黄精、肉桂挥发油

功能主治：/

临床拟用剂量：/

临床拟用途径：/

临床拟用疗程：/

生产单位：湖南省中医院研究院

提供单位：湖南省中医院研究院

2.1.2供试品2

名称：妇科凝胶2

批号：20210903

性状：/

规格：每支装5g

有效期至：2023年09月

保存条件：阴凉、通风、干燥处保存

成分：黄精、茯苓、肉桂挥发油

功能主治：/

临床拟用剂量：/

临床拟用途径：/

临床拟用疗程：/

生产单位：湖南省中医院研究院

提供单位：湖南省中医院研究院

2.1.3供试品3

名称：妇科凝胶3

批号：20210904

性状：/

规格：每支装5g

有效期至：2023年09月

保存条件：阴凉、通风、干燥处保存

成分：黄精、茯苓、肉桂挥发油等

功能主治：/

临床拟用剂量：/

临床拟用途径：/

临床拟用疗程：/

生产单位：湖南省中医院研究院

提供单位：湖南省中医院研究院

2.2溶媒对照品

名称：凝胶基质

提供单位：湖南中医药研究院

2.3阳性对照药

名称：克霉唑乳膏

批号：H44023928

规格：10g/支，每g克霉唑乳膏含0.03g克霉唑

生产单位：广东恒健制药有限公司

2.4实验试剂

2.4.1实验试剂1

名称：甲硝唑氯化钠注射液

批号：20211112A

规格：100mL/瓶

成分：主要成分为甲硝唑，辅料为氯化钠等

作用与用途：有抗菌、消炎的作用

生产单位：广东素美堂卫生用品有限公司

2.4.2实验试剂2

名称：硫酸庆大霉素注射液

批号：210907

规格：1ml/支，10支/盒

成分：主要成分为硫酸庆大霉素

作用与用途：氨基糖苷类抗生素，用于革兰氏阴性和阳性细菌感染

生产单位：上海全宇生物科技(驻马店)动物药业有限公司

2.5实验菌株

2.5.1实验菌株1

名称：金黄色葡萄球菌FSCC223001

编号：ATCC25923

来源：广东食品安全菌种保藏中心

类别：第三类

2.5.2实验菌株2

名称：白色念珠菌FSCC129001

编号：ATCC10231

来源：广东食品安全菌种保藏中心

类别：第三类

2.5.3实验菌株3

名称：大肠埃希氏菌FSCC149004

编号：ATCC8739

来源：广东食品安全菌种保藏中心

类别：第三类

2.6试验仪器

2.6.1标准麦氏比浊管

生产厂家：常德贝克曼生物科技有限公司，批号：20200728，有效期：12个月

2.6.2血平皿

生产厂家：广东环凯生物科技有限公司，生产批号：L2101Y，有效期至：2022.02.23

2.6.3马铃薯葡萄糖琼脂

生产厂家：广东环凯生物科技有限公司，生产批号：1105601，有效期至：2024.08.18

2.6.4营养琼脂

生产厂家：广东环凯生物科技有限公司，生产批号：1086511，有效期至：2022.11.05

2.6.5 TU-1810型紫外可见分光光度计

生产厂家：北京普析通用仪器有限责任公司，编号092

2.6.6 SHH-150J型霉菌培养箱

生产厂家：重庆市永生实验仪器厂，编号120

2.6.7 SHH-150L型生化培养箱，生产厂家：重庆市永生实验仪器厂，编号118

3.实验***

3.1实验动物

品种/品系：新西兰兔

等级：普通级

性别：雌性

购入动物数：20只             使用动物数量：18只

购入时体重范围：1.8-2.2kg    实际使用体重范围：2.0-2.5kg

供应单位：湖南太平生物科技有限公司

实验动物生产许可证号：SCXK(湘)2018-0004

实验动物使用许可证号：SYXK(湘)2020-0004

3.2选择动物理由

《药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》、《药物毒理学》推荐使用该种动物。

3.3动物的接收与检疫

按照公司SOP规定对实验动物进行接收和检疫，检疫期为6天。

3.3.1动物接收：

接收时间：2021年12月08日

进行接收时使用TP-5200型电子天平(编号067)对实验动物称重。

3.3.2动物检疫：

检疫时间：2021年12月08日－2021年12月13日

检疫地点：普通环境C区实验室三

检疫期间，每日由检疫人员对动物外形、被毛、体形、体温、行动、呼吸、口鼻、粪便、生殖器、尿、摄食等进行观察记录，若动物出现异常或体质弱，可能对试验有影响，则应剔除，在试验时不得使用。检疫结束后使用TP-5200型电子天平(编号067)对实验动物称重。经兽医检查动物质量合格。

3.4动物检疫期的识别方法

按照SOP规定对检疫期动物进行编号与标记。动物入室时，分性别从1号开始编为通号。采用左耳内侧用黑色记号笔直接书写动物号进行标记，同时在笼具上挂上相应的白色笼卡。

3.5动物的饲养管理

按照公司SOP对实验动物进行饲养管理。

3.5.1动物的饲养环境

饲养房间：普通环境C区实验室三

环境等级：普通级

温度：16-26℃

相对湿度：40-70％

换气次数：≥8次/h                 动物照度：100-200Lx

照明时间：每日12h/12h交替照明

动物笼具：笼具规格500mm×315mm×320mm，笼具材质为不锈钢，由苏州冯氏实验动物设备有限公司生产。

饲养密度：1只/笼。

清扫与消毒：试验期间①地面台面每天清洁消毒一次；②房间整体每周清洁消毒一次，天花板每月清洁消毒一次；③食盒及饮水用品(包括饮水瓶、瓶塞)每周取下刷洗干净，沥干水分放回；④笼具每周清洁消毒一次；⑤便盘每天清理一次。消毒液为84消毒液、新洁尔灭，7天交替使用。

3.5.2饲料

兔维持饲料，购自科澳协力(天津)饲料有限公司(生产许可证号：SCXK(津)2020-0004)，包装：双层塑料；规格：每袋25kg。

给料方法：按公司SOP规定给料。每天投料两次，上午下午各一次。

饲料质量的确认：参照中华人民共和国国家标准GB/T14924.2-2001及GB/T14924.3-2010等对饲料中的营养成分、重金属、农药残留、微生物指标等进行检测，由供应商委托第三方检测机构每季度检测一次。

3.5.3饮用水

种类：纯水，由公司纯水设备(编号051)制备。

给水方法：自由饮水。

水质量的确认：参照中华人民共和国国家标准GB5750-2006、GB8538-2016、GB5749-2006及GB14925-2010，由本公司遗传毒理实验室每3个月检测1次微生物指标，每年送具有符合国家法规相应资质的单位对水质的感官指标、理化指标、微生物指标等外检一次。

3.5.4剩余动物的处理

根据公司SOP要求对剩余动物实施安乐死。

3.5.5动物伦理与保护

本试验方案交由公司实验动物福利伦理委员会审查、批准后实施，按国家相关实验动物福利法规和公司SOP规定执行。

4试验方法

4.1剂量设置(如表1)

表1剂量表

4.2试验方法

4.2.1新西兰兔***脱污染

取硫酸庆大霉素注射液与甲硝唑注射液等体积混合，随后每只动物***内给予1mL混合液，每天一次，连续三天，确保动物***的清洁度，避免***原有的杂菌对本实验造成干扰。

4.2.2混合菌液的制备

取金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和白色念珠菌菌株分别接种于血平皿、普通营养琼脂和马铃薯琼脂培养基中，37℃培养24小时，白色念珠菌25℃培养48小时后，用无菌接种环各自挑取适量的菌落放入10ml无菌生理盐水管中，不断调整菌落加入量直至肉眼比对与比克曼生物5号标准管的浓度相同，再各自吸取1.5ml的菌液，用TU-1810型紫外可见分光光计在625nm的波长进行吸光度检测确保其OD值在0.80-1.00范围内(即每种细菌的菌液浓度为1.5×10⁹个细菌/ml)，继续在各自试管中添加等量的菌落，混匀后测定吸光度值在2.40-3.00的范围内(菌液浓度为4.5×10⁹细个菌/ml)。

分别吸取浓度为4.5×10⁹个细菌/ml金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和白色念珠菌菌液5ml到无菌试管，混匀，混合菌液总体积为15ml，浓度为4.5×10⁹细菌/ml。

4.2.3构建新西兰兔***细菌感染模型

选取检疫合格的20只新西兰兔，雌性，3只作为空白对照组，不做任何处理，另17只***接种混合菌液，用16号大鼠灌胃针头******深度约6cm，将针头紧靠***壁前后左右反复推进5-6次，造成***粘膜局部轻微损伤；针头外包乳胶管将混合菌液注入新西兰兔***内，每只接种1.0mL，接种后随即用无菌脱脂棉堵住***，每天1次，连续3d，第4d采用无菌棉签对所有动物***内涂抹取材，随后分别移入含有5mL PBS的无菌管内混匀，每个样本稀释2个梯度，并分别接种于三种菌株的选择性培养基，37℃培养24-72h，如果培养基上有金色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌出现，表明造模成功。

4.2.4分组与给受试物

选取造模成功的新西兰兔15只，按体重随机分为5组，模型对照组、妇科凝胶1组、妇科凝胶2组、妇科凝胶3组、克霉唑组。另3只未造模的新西兰兔设为空白对照组，共6组。除空白对照组外，其余各组给予相应受试物1mL/只(模型对照组给予凝胶基质)，克霉唑乳膏组给予克霉唑乳膏1.0g/只，每天1次，连续5天。

4.3检测指标

4.3.1体重称量

在给受试物前、给受试物第1周、给受试物第2周对新西兰兔进行称重。

4.3.2***口及周围组织观察

在给受试物前、给受试物第1周、给受试物第2周对新西兰兔***口及周围组织肿胀、充血、分泌物等进行肉眼观察并分级评分，评分的标准：无水肿、无充血、无分泌物记为0分；轻度水肿、充血、可见分泌物记为1分；中度水肿、充血、分泌物增多记为2分；重度充血、水肿、大量分泌物记为3分，最大计分为3分，如表2。

表2新西兰兔***口肉眼观察评分标准

4.3.3***组织解剖肉眼观察

新西兰兔二氧化碳安乐死后，取出***组织立即解剖对***内壁进行肉眼观察并评分，评分标准：无水肿、无充血、无糜烂记为0分；轻度水肿、充血、糜烂记为1分；中度水肿、充血、糜烂记为2分；重度充血、水肿、糜烂记为3分，最大计分为3分，如表3。

表3新西兰兔***内壁组织肉眼观察评分标准

4.3.4***组织组织病理学检查

新西兰兔解剖后取***组织于10％中性***中固定，经常规脱水、包埋、切片、染色，进行组织病理学检查。根据表3所示组织病理评分标准进行评分，每组动物评价记分相加后除以观察动物数，记为该组平均评分，最大记分为16。如表4。

表4***组织病理检查评分标准

5试验结果

5.1不同规格妇科凝胶对***细菌感染新西兰兔体重的影响

与空白对照组比较，模型对照组、妇科凝胶1组、妇科凝胶2组、妇科凝胶3组、克霉唑乳膏组在给受试物前、给受试物后1周、给受试物后2周体重均未见统计学差异(P>0.05)。与模型对照组比较，妇科凝胶1组、妇科凝胶2组、妇科凝胶3组、克霉唑乳膏组在给受试物前、给受试物后1周、给受试物后2周体重亦均未见统计学差异(P>0.05)。具体结果详见表5。

表5不同规格妇科凝胶对***细菌感染新西兰兔体重的影响(

n＝3)

5.2不同规格妇科凝胶对***细菌感染新西兰兔***口炎症的影响

与空白对照组比较，模型对照组在给受试物前、给受试物后1周、给受试物后2周***口炎症评分明显升高(P＜0.05)。与模型对照组比较，各组给受试物前评分均未见统计学差异；妇科凝胶1组、妇科凝胶2组给受试物后1周***口炎症评分未见统计学差异，给受试物后2周评分显著降低(P＜0.05)；妇科凝胶3组、克霉唑乳膏组给受试物后1周、给受试物后2周***口炎症评分均显著降低(P＜0.05)。与克霉唑乳膏组比较，妇科凝胶1组、妇科凝胶2组、妇科凝胶3组在给受试物前、给受试物后1周、给受试物后2周均未见明显差异(P>0.05)，结果见表6。

表6不同规格妇科凝胶对***细菌感染新西兰兔***口炎症的影响(

n＝3)

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。与模型对照组比较，^△P＜0.05，^△△P＜0.01。与克霉唑乳膏组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01。

5.3不同规格妇科凝胶对***细菌感染新西兰兔***组织的影响

与空白对照组比较，模型对照组在解剖后***炎症评分明显升高(P＜0.05)。与模型对照组比较，各组动物***炎症评分均未见显著差异(P>0.05)，结果见表7。

表7不同规格妇科凝胶对***细菌感染新西兰兔***组织的影响(

n＝3)

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。与模型对照组比较，^△P＜0.05，^△△P＜0.01。与克霉唑组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01。

5.4不同规格妇科凝胶对***细菌感染新西兰兔***组织病理学形态的影响

空白对照组：空白对照组1F02号动物***黏膜上皮可见细胞变性，黏膜固有层极少白细胞浸润，评分为2分；1F01、1F03号动物***黏膜上皮细胞未见变性坏死，黏膜固有层及黏膜下层未见水肿、充血、出血、炎症细胞浸润等病理变化，评分为0分。详见表8。

模型对照组：模型对照组2F01号动物***黏膜上皮局部糜烂，黏膜固有层少量白细胞浸润，评分为5分；2F02号动物***黏膜组织变形，黏膜固有层重度白细胞浸润，血管轻度充血，评分为7分；2F03号动物***黏膜上皮细胞未见变性坏死，黏膜固有层及黏膜下层未见水肿、充血、出血、炎症细胞浸润等病理变化，评分为0分。详见表8。

妇科凝胶1组：妇科凝胶1组3F01号动物***黏膜上皮可见细胞变性，黏膜固有层轻度白细胞浸润，评分为3分；3F02号动物***黏膜上皮细胞变性，黏膜固有层轻度白细胞浸润，血管极少充血，评分为4分；3F03号动物***黏膜上皮细胞未见变性坏死，黏膜固有层及黏膜下层未见水肿、充血、出血、炎症细胞浸润等病理变化，评分为0分。详见表8。

妇科凝胶2组：妇科凝胶2组4F01号动物***黏膜上皮细胞变性，黏膜固有层极少白细胞浸润，血管极少充血，极少水肿，评分为4分；4F02号动物***黏膜上皮细胞变性，黏膜黏膜固有层极少白细胞浸润，血管轻度充血，评分为4分；4F03号动物***黏膜上皮细胞未见变性坏死，黏膜固有层及黏膜下层未见水肿、充血、出血、炎症细胞浸润等病理变化，评分为0分。详见表6。

妇科凝胶3组：妇科凝胶3组5F01号动物***黏膜上皮组织变形，评分为2分；5F02号动物***黏膜上皮局部糜烂，黏膜固有层极少白细胞浸润，血管极少充血，极少水肿，评分为6分；5F03号动物***黏膜上皮细胞未见变性坏死，黏膜固有层及黏膜下层未见水肿、充血、出血、炎症细胞浸润等病理变化，评分为0分。详见表8。

克霉唑乳膏组：克霉唑乳膏组6F01、6F02号动物***黏膜上皮细胞未见变性坏死，黏膜固有层及黏膜下层未见水肿、充血、出血、炎症细胞浸润等病理变化，评分均为0分；6F03号动物***黏膜上皮细胞变性，黏膜固有层极少白细胞浸润，血管极少充血，评分为3分。详见表8。

表8显微镜下观察评分表

与空白对照组比较，模型对照组病变动物数较多、出现的病变程度较严重、评分较高，具有统计学差异(P＜0.05)；与模型对照组比较，妇科凝胶1组、妇科凝胶2组、妇科凝胶3组***组织病变均不同程度改善，病理评分均降低，但未见统计学差异；克霉唑乳膏组***组织病变明显改善，病理评分明显降低，具有统计学差异(P＜0.05)。详见表9及图1。

表9***组织病理形态学评分(

n＝3)

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。与模型对照组比较，^△P＜0.05，^△△P＜0.01。与克霉唑乳膏组比较，^#P＜0.05，^##P＜0.01。

6实验小结

在本试验条件下，妇科凝胶1、2、3对新西兰兔体重均无明显影响；妇科凝胶1、2、3和克霉唑乳膏组对由金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠杆菌引起新西兰兔***炎均具有明显改善作用。

体外实验

对上述妇科凝胶1、2、3分别进行白色念珠菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌试验，具体试验内容如下：

一、白色念珠菌抑菌试验

1、器材

(1)样品：妇科凝胶样品一(批号为20210413)。

(2)白色念珠菌ATCC 10231(由广东环凯微生物科技有限公司提供)菌载体：取经24h培养的新鲜斜面培养物(第5代)，先用PBS洗下菌苔，再用PBS稀释至所需浓度，用滴染法取20μL滴于灭菌布片(1.0cm×1.0cm)，烘干，使回收菌数达1×10⁴CFU/片～9×10⁴CFU/片。

(3)沙氏培养基(批号：1103001)。

(4)仪器：生物安全柜(EC18-01)；生化培养箱(EB29-01)；两孔恒温水浴锅(EB09-04)。

2、方法

(1)检测依据：GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C。

(2)检测环境：温度为22.0-22.7℃，相对湿度为53-58％。

(3)检测方法：

取该样品和对照基质置于灭菌平皿内，取上述已制备好的载体使之分别浸透于样品及基质内，分别作用到2min、5min、10min、20min时，用无菌镊子取出上述载体，分别移入含5.0mL PBS的试管内混匀，作适当稀释后，分别吸取1.0mL倾皿做活菌菌落计数。试验重复3次。

二、金黄色葡萄球菌抑菌试验

1、器材

(1)样品：妇科凝胶样品一(批号为20210413)

(2)金黄色葡萄球菌ATCC 6538(由广东环凯微生物科技有限公司提供)菌载体：取经24h培养的新鲜斜面培养物(第5代)，先用PBS洗下菌苔，再用PBS稀释至所需浓度，用滴染法取20μL于灭菌布片(1.0cm×1.0cm)载体上，烘干，使回收菌数达1×10⁴CFU/片～9×10⁴CFU/片。

(3)营养琼脂培养基(批号：1103581)。

(4)仪器：生物安全柜(EC18-01)；生化培养箱(EB29-01)；两孔恒温水浴锅(EB09-04)。

2、方法

(1)检测依据：GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C。

(2)检测环境：温度为22.0-22.7℃，相对湿度为53-58％。

(3)检测方法：

取该样品和对照基质置于灭菌平皿内，取上述已制备好的载体使之分别浸透于样品及基质内，分别作用到2min、5min、10min、20min时，用无菌镊子取出上述载体，分别移入含5.0mL PBS的试管内混匀，作适当稀释后，分别吸取1.0mL倾皿做活菌菌落计数。试验重复3次。

三、大肠杆菌抑菌试验

1、器材

(1)样品：妇科凝胶样品一(批号为20210413)。

(2)大肠杆菌8099(由广东环凯微生物科技有限公司提供)菌载体：取经24h培养的新鲜斜面培养物(第5代)，先用PBS洗下菌苔，再用PBS稀释至所需浓度，用滴染法取20μL于灭菌布片(1.0cm×1.0cm)载体上，烘干，使回收菌数达1×10⁴CFU/片～9×10⁴CFU/片。

(3)营养琼脂培养基(批号：1103581)。

(4)仪器：生物安全柜(EC18-01)；生化培养箱(EB29-01)；两孔恒温水浴锅(EB09-04)。

2、方法

(1)检测依据：GB 25979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录C。

(2)检测环境：温度为22.0-22.7℃，相对湿度为53-58％。

(3)检测方法：

取该样品和对照基质置于灭菌平皿内，取上述已制备好的载体使之分别浸透于样品及基质内，分别作用到2min、5min、10min、20min时，用无菌镊子取出上述载体，分别移入含5.0mL PBS的试管内混匀，作适当稀释后，分别吸取1.0mL倾皿做活菌菌落计数。试验重复3次。

抑菌效果分析

1、白色念珠菌的抑菌效果

在20℃±1℃温度条件下，试验重复3次，样品一作用不同时间的抑菌率(％)如表1所示，样品二作用不同时间的抑菌率(％)如表2所示，样品三作用不同时间的抑菌率(％)如表3所示。

表1

注：阴性对照：无菌落生长。由表1可知，样品一作用2min、5min、10min和20min对白色念珠菌的平均抑菌率均为100.00％。

表2

注：阴性对照：无菌落生长。

由表2可知，样品二作用2min、5min、10min和20min对白色念珠菌的平均抑菌率分别为96.45％、100.00％、100.00％和100.00％。

表3

注：阴性对照：无菌落生长。

由表3可知，样品三作用2min、5min、10min和20min对白色念珠菌的平均抑菌率均为100.00％。

2、金黄色葡萄球菌的抑菌效果

在20℃±1℃温度条件下，试验重复3次，样品一作用不同时间的抑菌率(％)如表4所示，样品二作用不同时间的抑菌率(％)如表5所示，样品三作用不同时间的抑菌率(％)如表6所示。

表4

注：阴性对照：无菌落生长。

由表4可知，样品一作用2min、5min、10min和20min对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率分别为92.52％、97.40％、99.46％和100.00％。

表5

注：阴性对照：无菌落生长。

由表5可知，样品二作用2min、5min、10min和20min对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率分别为89.60％、94.40％、99.41％和100.00％。

表6

注：阴性对照：无菌落生长。

由表6可知，样品三作用2min、5min、10min和20min对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率分别为97.15％、99.31％、100.00％和100.00％。

3、大肠杆菌的抑菌效果

在20℃±1℃温度条件下，试验重复3次，样品一作用不同时间的抑菌率(％)如表7所示，样品二作用不同时间的抑菌率(％)如表8所示，样品三作用不同时间的抑菌率(％)如表9所示。

表7

由表7可知，样品一作用2min、5min、10min和20min对大肠杆菌的平均抑菌率分别为95.62％、98.56％、100.00％和100.00％。

表8

由表8可知，样品二作用2min、5min、10min和20min对大肠杆菌的平均抑菌率分别为93.49％、97.83％、100.00％和100.00％。

表9

注：阴性对照：无菌落生长。

由表9可知，样品三作用2min、5min、10min和20min对大肠杆菌的平均抑菌率分别为99.23％、100.00％、100.00％和100.00％。

对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (3)

1.一种妇科凝胶，其特征在于，所述妇科凝胶按照重量份数计，由如下原料加工而成：黄精多糖1份、茯苓多糖1份、卡波姆94015份、芦荟胶40份、甘油180份、肉桂挥发油0.2份、鱼腥草挥发油0.2份、丁香挥发油0.2份、L-薄荷醇15份、鼠李糖乳杆菌15份、尼泊金乙酯0.2份、95％乙醇25份和水180份。

2.一种如权利要求1所述妇科凝胶的制备方法，其特征在于，所述方法具体包括如下步骤：

(1)按如权利要求1所述重量份数分别称取各原料，随后在黄精多糖、茯苓多糖中加水溶解完全，备用；

(2)A液：将卡波姆940和芦荟胶加入至步骤(1)溶解的液体中，搅拌均匀，放置6～24小时，充分溶胀，备用；

(3)B液：将L-薄荷醇、肉桂挥发油、鱼腥草挥发油、丁香挥发油、尼泊金乙酯溶于95％的乙醇中，随后加甘油搅拌均匀，备用；

(4)少量多次将B液加到A液中，再加入鼠李糖乳杆菌，边加边搅拌，搅拌均匀后，用胶体磨匀浆1～3次，随后灌装，即得妇科凝胶。

3.一种如权利要求1所述的妇科凝胶或如权利要求2所述方法制备的妇科凝胶在制备治疗妇科疾病药物中的应用。

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