CN114441766A - 一种定量检测抗pla2r抗体的荧光免疫层析试纸条及其制备方法 - Google Patents

一种定量检测抗pla2r抗体的荧光免疫层析试纸条及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条及其制备方法，其包括底板和依次搭载在底板上的样本垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，其中，样本垫上封闭有鼠抗人红细胞抗体，结合垫上喷涂有PLA2R荧光微球偶联物和兔IgG荧光微球偶联物，硝酸纤维素膜上包被有鼠抗人IgG抗体作为检测线，硝酸纤维素膜上还包被有羊抗兔IgG作为质控线。本发明的荧光免疫层析试纸条灵敏度和准确度高，所需临床样本用量极少，且操作简单，仅需一台荧光免疫分析仪即可实现信号的检测及浓度值转换。

Description

一种定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条及其制备 方法
技术领域
本发明涉及免疫荧光检测技术领域，具体涉及一种定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条及其制备方法。
背景技术
磷脂酶A2受体(PLA2R)是一种跨膜糖蛋白，归属于甘露醇受体家族，其分子质量为185KD，最早发现于人类正常足细胞中，主要的表达是在肾小球足细胞中。特发性膜性肾病患者血清抗PLA2R抗体与PLA2R抗原结合，二者构成原位免疫复合物沉积于肾小球基底膜，引发了足细胞的损伤、肾小球基底膜的增厚和肾小球通透性的转变等一系列变化而致病，因此，临床上对肾组织PLA2R的检测对于膜性肾病特别是特发性膜性肾病的诊断、鉴别诊断、病情评估、疗效评价和预后具有重要作用。
对于膜性肾病的诊断，目前常用的依据临床表现和肾脏穿刺活检。其中肾脏穿刺活检是一种有创式的诊断方法，具有一定的危险性，对操作人员和环境、设备的要求比较高；而根据临床表现诊断膜性肾病的过程则对医生的经验要求较高，并且同样需要组织病理学的辅助验证。因此，开发一种可以精确定量检测抗PLA2R抗体的检测试剂，对于临床上诊断膜性肾病尤其是特发性膜性肾病具有重要意义。
目前临床上比较认可的PLA2R检测方法主要是采用欧蒙公司的间接免疫荧光法试剂盒测试血清中抗PLA2R抗体含量，但该试剂盒的操作方法比较复杂，检测周期长，且对检测人员的技术要求较高，该方法无法满足快速准确的检测抗PLA2R抗体含量，局限性较多。
现有专利CN104849452A在结合垫上喷涂抗人IgG抗体耦联的量子点，硝酸纤维膜上包被PLA2R抗原作为检测线，存在灵敏度不够高，检测结果不太准确的问题。现有专利CN111198273A也是采用抗人IgG标记、PLA2R抗原包被的形式，同样存在灵敏度不够高，检测结果不太准确的问题。现有专利CN111413506A设有两个结合垫，结构较为复杂，量产化难度高，而且其需要将PLA2R生物素化，操作复杂，损耗原料，同时也不能保证生物素化的PLA2R抗原与偶联SA的荧光微球100％反应，易造成信号损失。
因此，如何在保证试纸条结构简单，制备方法简单，能够量产化的前提下，提高其灵敏度、检测结果准确性以及缩短检测时间成为研究的重点。
发明内容
本发明的目的是提供一种操作简单、检测便捷，灵敏度高且可实现准确定量的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条。
本发明的另一目的是提供所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条的制备方法。
本发明的另一目的是提供含有所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条的抗PLA2R抗体定量检测***。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
一种定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条，所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条包括底板和依次搭载在所述的底板上的样本垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，其中，所述的样本垫上封闭有鼠抗人红细胞抗体，所述结合垫上喷涂有PLA2R荧光微球偶联物和兔IgG荧光微球偶联物，所述硝酸纤维素膜上包被有鼠抗人IgG抗体作为检测线，所述硝酸纤维素膜上还包被有羊抗兔IgG作为质控线。
优选地，所述的荧光微球为铕螯合荧光微球。
优选地，所述的荧光微球的表面带有修饰基团，所述的修饰基团为氨基和/或羧基；或，所述的荧光微球为经N-羟基琥珀酰亚胺酯和/或1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺活化的荧光微球。氨基或羧基修饰的荧光微球相较于传统的胶体金颗粒或有机荧光颗粒，具有可定量、灵敏度高、稳定性和重复性好等优势。
优选地，所述的荧光微球的直径为0.1～0.3μm。
优选地，所述的荧光微球的激发波长为320～350nm，所述的荧光微球的发射波长为600～620nm。
优选地，所述的PLA2R荧光微球偶联物中的PLA2R为天然PLA2R蛋白和/或重组PLA2R蛋白。所述的重组PLA2R蛋白包括通过基因重组生产出的全长PLA2R蛋白或PLA2R片段。
优选地，所述的样本垫与结合垫的材质为玻璃纤维膜或聚酯纤维膜。
所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鼠抗人红细胞抗体封闭到样本垫上；
(2)将PLA2R蛋白与荧光微球偶联得到PLA2R荧光微球偶联物；将兔IgG抗体与荧光微球偶联得到兔IgG荧光微球偶联物，将所述的PLA2R荧光微球偶联物和所述的兔IgG荧光微球偶联物混合后喷涂在结合垫上；
(3)在硝酸纤维素膜上包被鼠抗人IgG抗体作为检测线；在硝酸纤维素膜上包被羊抗兔IgG抗体作为质控线；
(4)在PVC底板上依次搭载步骤(1)中制备的样本垫、步骤(2)中制备的结合垫、步骤(3)中制备的硝酸纤维素膜以及吸水纸，然后裁成一定宽度的试纸条并装入卡壳中。
优选地，所述的步骤(1)具体为：将样本垫浸润到含有鼠抗人红细胞抗体的封闭缓冲液中，取出后置于湿度小于30％、温度为18～28℃的环境中，以30～60℃条件下烘干即可，
所述的封闭缓冲液为磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液或柠檬酸缓冲液，
优选地，所述的封闭缓冲液中鼠抗人红细胞抗体的浓度为0.01～0.5mg/mL。
优选地，所述的步骤(2)具体为：将PLA2R蛋白和荧光微球在偶联缓冲液中偶联得到PLA2R荧光微球偶联物，将兔IgG抗体和荧光微球在偶联缓冲液中偶联得到兔IgG荧光微球偶联物，将所述的PLA2R荧光微球偶联物和所述的兔IgG荧光微球偶联物混合成喷金液，用喷金仪将喷金液均匀喷涂到结合垫上，然后置于湿度小于30％、温度为18～28℃的环境中，以30～60℃条件下烘干即可，
所述的偶联缓冲液为磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液或柠檬酸缓冲液，
所述的PLA2R蛋白在偶联缓冲液中的浓度为0.01～0.5mg/mL，
所述的兔IgG抗体在偶联缓冲液中的浓度为0.01～0.5mg/mL，
所述的荧光微球在偶联缓冲液中的浓度为0.01～0.5mg/mL mg/mL，
所述的喷金液中PLA2R荧光微球偶联物的浓度为0.01～0.5mg/mL，
所述的喷金液中兔IgG荧光微球偶联物的浓度为0.01～0.5mg/mL。
优选地，所述的步骤(3)具体为：分别将含有鼠抗人IgG抗体的包被溶液和含有羊抗兔IgG抗体的包被溶液分别以0.5～2μL/cm的包被速度包被在硝酸纤维素膜上，然后置于湿度小于30％、温度为18～28℃的环境中，以30～60℃条件下烘干即可，
所述的包被溶液为磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液或柠檬酸缓冲液，且所述的包被溶液中还含有糖类和/或醇类，
所述的包被溶液中抗体浓度为0.5～2mg/mL。
优选地，荧光免疫层析试纸条组装：在粘性PVC底板上的特定位置依次搭接样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸。
所述的抗PLA2R抗体定量检测***包括所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条和荧光免疫分析仪，所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条中设有ID卡，所述的ID卡中存储有标定数据和/或标准曲线，
所述的抗PLA2R抗体定量检测***的检测方法包括以下步骤：
(1)使用所述的荧光免疫分析仪读取所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条的ID卡中保存的标定数据和/或标准曲线。
(2)取血清、血浆或全血样本，使用稀释液稀释10～30倍后，取样加入所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条，依次经过所述的样本垫、所述的结合垫、所述的硝酸纤维素膜和所述的吸水纸。
(3)等待5～15min后，再次将所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条***荧光免疫分析仪读取T值、C值并计算该样本PLA2R的浓度值。
本发明与现有技术相比具有如下优势：
本发明的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条灵敏度和准确度高，所需临床样本用量极少，且操作简单，仅需一台荧光免疫分析仪即可实现信号的检测及浓度值转换。本发明的测试结果与欧蒙公司的间接免疫荧光法试剂盒的测试结果的阴阳性符合率高度一致，明显优于其他同类产品。
本发明的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条的结构简单，制作步骤少，生产周期短，设备要求不高，易于实现量产化等优势。
本发明的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条还具有检测时间短、操作简单、使用便捷、对人员素质要求低、应用场景广等优势。
附图说明
图1为实施例中的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条的结构示意图，
1、样本垫；2、底板；3、结合垫；4、检测线；5、硝酸纤维素膜；6、质控线；7、吸水纸。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述。但本发明并不限于以下实施例。实施例中采用的实施条件可以根据具体使用的不同要求做进一步调整，未注明的实施条件为本行业中的常规条件。本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
以下实施例和对比例中，若无特殊说明，所使用的原料、试剂等均为常规市售产品。
以下实施例和对比例中，使用的PLA2R蛋白为重组蛋白。
实施例1
本实施例提供一种定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条，其结构如图1所示，包括样本垫1、底板2、结合垫3、检测线4、硝酸纤维素膜5、质控线6和吸水纸7，样本垫1上封闭有鼠抗人红细胞抗体、结合垫3上喷涂有荧光微球标记的PLA2R蛋白和荧光微球标记的兔IgG抗体；检测线4上包被有抗体为鼠抗人IgG抗体；质控线6上包被有抗体为羊抗兔IgG抗体。其中，底板2的材质为PVC，样本垫1和结合垫3的材质均为玻璃纤维素膜，荧光微球为铕螯合荧光微球，采购自Thermo，染色微粒表面带有修饰基团为羧基，荧光微球的粒径约为0.2μm，激发波长为333nm，发射波长为613nm。
定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条的制备方法如下：
(1)样本垫1制备：将整张样本垫浸润到封闭缓冲液中1min，取出后置于湿度小于30％、温度为18～28℃的环境下，以37℃烘干24小时，裁切成固定规格后备用。
所述封闭缓冲液配制：使用的缓冲液为pH值为8.5的0.05mM Tris缓冲液，其中包含1％Tween-20、5％海藻糖、1％BSA和0.025mg/mL的鼠抗人红细胞抗体。
(2)PLA2R蛋白偶联的荧光微球及兔IgG偶联的荧光微球制备：
PLA2R蛋白偶联的荧光微球：
在偶联缓冲液中，将PLA2R蛋白加入活化后荧光微球溶液中进行偶联，室温孵育2小时，其中荧光微球的体积为偶联反应总体积的10％，活化使用1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)，按每1mL偶联总体积加入12.5μg EDC，室温孵育15min。偶联使用的PLA2R蛋白的浓度为0.1mg/mL。
所述偶联缓冲液为pH值为6.0的0.1M MES缓冲液。
兔IgG偶联的荧光微球：
同PLA2R蛋白偶联的荧光微球的制备方法，偶联使用的兔IgG的浓度为0.1mg/mL。
(3)结合垫3制备：将结合垫预先裁为7mm的长条后，将两种偶联好的荧光微球稀释并混合成喷金液，具体稀释倍数为每1mL喷金液中含0.4mL的PLA2R蛋白偶联的荧光微球溶液和0.05mL的兔IgG偶联的荧光微球溶液。用喷金仪将配制好的喷金液均匀喷涂到结合垫上，并置于湿度小于30％、温度为18-28℃的环境下，以37℃烘干2小时。
所述荧光微球稀释液的配制：使用的缓冲液为pH值为6.0的0.1M MES缓冲液，其中包含1％Tween-20、5％海藻糖和1％BSA。
(4)硝酸纤维素膜5上包被检测线4与质控线6：
配制鼠抗人IgG抗体包被溶液：使用的缓冲液为pH值为7.4的10mM PBS，包含5％海藻糖、5％甲醇以及2mg/mL的鼠抗人IgG抗体。
配制羊抗兔IgG抗体包被溶液：配制方法同鼠抗人IgG抗体包被溶液，羊抗兔IgG抗体包被溶液的浓度为2mg/mL。
用划膜仪将鼠抗人IgG抗体包被溶液以1μL/cm的包被速度均匀的包被在硝酸纤维素膜5的检测线4的位置上，用划膜仪将羊抗兔IgG抗体包被溶液以1μL/cm的包被速度均匀的包被在硝酸纤维素膜5的质控线6的位置上，待包被完毕后，置于湿度小于30％、温度为18-28℃的环境下，以37℃烘干24小时。
(5)吸水纸7制备：将整张吸水纸裁切成一定规格后备用。
(6)荧光免疫层析试纸条组装：在粘性PVC底板2上的特定位置依次搭接样品垫1、结合垫3、硝酸纤维素膜5和吸水纸7，组装好后以3.9mm的固定宽度裁切，即为用于定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条。
使用方法如下：
取5μL待测样本，与95μL稀释液混匀，取80μL混合液加入PLA2R试纸卡条的加样孔，所述稀释液为pH值为8.5的50mM Tris缓冲液；
等待8min后，***荧光免疫分析仪测试T值、C值，计算T/C值。
(7)ID卡制备
选择PLA2R的6个浓度标准品，其浓度为0RU/mL、5RU/mL、20RU/mL、100RU/mL、500RU/mL、1500RU/mL，每个浓度标准品重复测试6次，获得PLA2R浓度与T/C的拟合标准曲线：y＝(A-D)/[1+(x/C^B)]+D，其中，A＝6.51260，B＝-1.49578，C＝346.49047，D＝0.03412，式中y表示T/C值，x表示PLA2R浓度值，R2＝0.99989。
回收率：将已知浓度的高水平待测物(A-290RU/mL)加到低浓度的血清或其他体液成分中(B-17RU/mL)，所加待测物A与血清或其他体液成分B之间的体积比例为不大于1：9，各重复检测3次，取平均值，根据下列公式计算出回收率，结果见表1。
Figure BDA0003436046880000061
式中：
R——回收率；
C——向B液中加入A液后的检测浓度的平均值；
V0——B液体积；
VS——A液体积；
C0——B液浓度的平均值；
CS——A液浓度；
表1
Figure BDA0003436046880000071
表1显示：回收率再85.8％-102.3％之间，平均回收率为94.2％。
空白限：用空白稀释液作为样本重复检测20次，得出20次检测结果，计算其平均值(M)和标准差(SD)，以空白均值加两倍标准差(M+2SD)报告空白限。结果见表2。
表2
检测次数 浓度值(RU/mL)
1 0.06
2 0.14
3 0
4 0.29
5 0.2
6 0
7 0
8 0.22
9 0.09
10 0.08
11 0.16
12 0.15
13 0.15
14 0
15 0.02
16 0.24
17 0
18 0.14
19 0.21
20 0
均值M 0.11
标准差SD 0.09
M+2SD 0.30
表2显示，实施例1的空白限小于2RU/mL。
重复性：使用浓度为20RU/mL、50RU/mL和200RU/mL的质控血清各重复检测10次，计算变异系数CV(％)，结果见表3。
表3
重复性 20RU/mL 50RU/mL 200RU/mL
测试1 20.67 43.7 215.17
测试2 19.62 47.47 213.59
测试3 18.46 49.59 210.29
测试4 20.93 45.64 206.32
测试5 19.1 50.89 213.1
测试6 20.76 49.56 204.04
测试7 17.27 46.37 203.32
测试8 20.79 47.34 214.77
测试9 18.57 46.18 216.91
测试10 19.55 46.45 214.26
M 19.57 47.32 211.18
SD 1.23 2.16 4.92
CV 6.31％ 4.56％ 2.33％
表3显示，实施例1在三个浓度点的变异系数CV均小于10％。
对比例1
本对比例提供一种定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条，其结构及制备方法基本同实施例1，区别仅在于，结合垫3上喷涂的是抗人IgG偶联的荧光微球和兔IgG偶联的荧光微球，检测线4包被的是PLA2R蛋白。
采用相同的方法测试对比例1的线性及灵敏度，结果见表4。
表4
Figure BDA0003436046880000081
由表4可知，相比实施例1，对比例1的灵敏度明显较低。
实施例2
取70个临床血清样本，使用实施例1的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条进行检测，检测方法为：
(1)使用荧光免疫分析仪读取预先制作的PLA2R的ID卡，保存标准曲线。
(2)取5μL阳性样本，与95μL稀释液混匀，取80μL混合液加入PLA2R试纸卡条的加样孔，所述稀释液为pH值为8.5的50mM Tris缓冲液。
(3)等待8min后，***荧光免疫分析仪测试T值、C值，通过T/C值代入标准曲线计算抗PLA2R抗体浓度。
分别与行业认可的欧蒙公司的间接免疫荧光法试剂盒测试结果进行比对，结果见表5。
表5
数量 实施例1 符合率
阴性样本 26 26 100％
阳性样本 44 43 97.73％
表6显示，实施例1的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条与欧蒙公司的间接免疫荧光法试剂盒的阳性符合率达到100％，阴性符合率达到97.73％。
以上对本发明做了详尽的描述，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明的内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明的精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条，其特征在于，所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条包括底板和依次搭载在所述的底板上的样本垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，其中，所述的样本垫上封闭有鼠抗人红细胞抗体，所述的结合垫上喷涂有PLA2R荧光微球偶联物和兔IgG荧光微球偶联物，所述的硝酸纤维素膜上包被有鼠抗人IgG抗体作为检测线，所述的硝酸纤维素膜上还包被有羊抗兔IgG作为质控线。
2.根据权利要求1所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条，其特征在于，所述的荧光微球为铕螯合荧光微球。
3.根据权利要求1所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条，其特征在于，所述的荧光微球的表面带有修饰基团，所述的修饰基团为氨基和/或羧基；或，所述的荧光微球为经N-羟基琥珀酰亚胺酯和/或1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺活化的荧光微球。
4.根据权利要求1所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条，其特征在于，所述的荧光微球的直径为0.1～0.3μm，所述的荧光微球的激发波长为320～350nm，所述的荧光微球的发射波长为600～620nm。
5.根据权利要求1所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条，其特征在于，所述的PLA2R荧光微球偶联物中的PLA2R为天然PLA2R蛋白和/或重组PLA2R蛋白；
和/或，所述的样本垫与结合垫的材质为玻璃纤维膜或聚酯纤维膜。
6.一种如权利要求1至5中任一项所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于：所述的制备方法包括以下步骤：
(1)将鼠抗人红细胞抗体封闭到样本垫上；
(2)将PLA2R蛋白与荧光微球偶联得到PLA2R荧光微球偶联物；将兔IgG抗体与荧光微球偶联得到兔IgG荧光微球偶联物，将所述的PLA2R荧光微球偶联物和所述的兔IgG荧光微球偶联物混合后喷涂在结合垫上；
(3)在硝酸纤维素膜上包被鼠抗人IgG抗体作为检测线；在硝酸纤维素膜上包被羊抗兔IgG抗体作为质控线；
(4)在PVC底板上依次搭载步骤(1)中制备的样本垫、步骤(2)中制备的结合垫、步骤(3)中制备的硝酸纤维素膜以及吸水纸，然后裁成一定宽度的试纸条并装入卡壳中。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤(1)具体为：将样本垫浸润到含有鼠抗人红细胞抗体的封闭缓冲液中，取出后置于湿度小于30％、温度为18～28℃的环境中，以30～60℃条件下烘干即可，
所述的封闭缓冲液为磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液或柠檬酸缓冲液，
所述的封闭缓冲液中鼠抗人红细胞抗体的浓度为0.01～0.5mg/mL。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤(2)具体为：将PLA2R蛋白和荧光微球在偶联缓冲液中偶联得到PLA2R荧光微球偶联物，将兔IgG抗体和荧光微球在偶联缓冲液中偶联得到兔IgG荧光微球偶联物，将所述的PLA2R荧光微球偶联物和所述的兔IgG荧光微球偶联物混合成喷金液，用喷金仪将喷金液均匀喷涂到结合垫上，然后置于湿度小于30％、温度为18～28℃的环境中，以30～60℃条件下烘干即可，
所述的偶联缓冲液为磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液或柠檬酸缓冲液，
所述的PLA2R蛋白在偶联缓冲液中的浓度为0.01～0.5mg/mL，
所述的兔IgG抗体在偶联缓冲液中的浓度为0.01～0.5mg/mL，
所述的荧光微球在偶联缓冲液中的浓度为0.01～0.5mg/mL，
所述的喷金液中PLA2R荧光微球偶联物的浓度为0.01～0.5mg/mL，
所述的喷金液中兔IgG荧光微球偶联物的浓度为0.01～0.5mg/mL。
9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤(3)具体为：分别将含有鼠抗人IgG抗体的包被溶液和含有羊抗兔IgG抗体的包被溶液分别以0.5～2μL/cm的包被速度包被在硝酸纤维素膜上，然后置于湿度小于30％、温度为18～28℃的环境中，以30～60℃条件下烘干即可，
所述的包被溶液为磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液或柠檬酸缓冲液，且所述的包被溶液中还含有糖类和/或醇类，
所述的包被溶液中抗体浓度为0.5～2mg/mL。
10.一种抗PLA2R抗体定量检测***，其特征在于：所述的抗PLA2R抗体定量检测***包括权利要求1至5中任一项所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条和荧光免疫分析仪，所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条中设有ID卡，所述的ID卡中存储有标定数据和/或标准曲线，
所述的抗PLA2R抗体定量检测***的检测方法包括以下步骤：
(1)使用所述的荧光免疫分析仪读取所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条的ID卡中保存的标定数据和/或标准曲线。
(2)取血清、血浆或全血样本，使用稀释液稀释10～30倍后，取样加入所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条，依次经过所述的样本垫、所述的结合垫、所述的硝酸纤维素膜和所述的吸水纸。
(3)等待5～15min后，再次将所述的定量检测抗PLA2R抗体的荧光免疫层析试纸条***荧光免疫分析仪读取T值、C值并计算该样本PLA2R的浓度值。
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