CN114437997B - 一种植物乳杆菌sf-l38及其在制备血糖控制产品中的应用 - Google Patents

一种植物乳杆菌sf-l38及其在制备血糖控制产品中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114437997B
CN114437997B CN202210361077.6A CN202210361077A CN114437997B CN 114437997 B CN114437997 B CN 114437997B CN 202210361077 A CN202210361077 A CN 202210361077A CN 114437997 B CN114437997 B CN 114437997B
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
parts
lactobacillus plantarum
fermented product
juice
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210361077.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114437997A (zh
Inventor
马明磊
孙浩
王艳
唐元凤
夏越
张环环
陈美玉
曲佳慧
隋岩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shandong Sunflower Bioengineering Co ltd
Original Assignee
Shandong Sunflower Bioengineering Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shandong Sunflower Bioengineering Co ltd filed Critical Shandong Sunflower Bioengineering Co ltd
Priority to CN202210361077.6A priority Critical patent/CN114437997B/zh
Publication of CN114437997A publication Critical patent/CN114437997A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114437997B publication Critical patent/CN114437997B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/38Other non-alcoholic beverages
    • A23L2/382Other non-alcoholic beverages fermented
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/169Plantarum

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一种植物乳杆菌SF‑L38及其在制备血糖控制产品中的应用,植物乳杆菌SF‑L38已于2021年9月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为CGMCC No.23475,分类命名为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum。本发明提供的植物乳杆菌SF‑L38具有高粘附性、强肠胃适应能力,同时以植物乳杆菌SF‑L38为菌种发酵制得发酵饮品,可抑制多糖转化为单糖,改善血糖指标,具有预防和治疗糖尿病的重要功能。

Description

一种植物乳杆菌SF-L38及其在制备血糖控制产品中的应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一种植物乳杆菌SF-L38及其在制备血糖控制产品中的应用。
背景技术
糖尿病是一种由于机体不能正常释放或利用胰岛素,而使血中葡萄糖(一种单糖)水平不适当升高所导致的一种常见的、多发的、伴随终身的疾病。近年来,国内糖尿病患病率呈逐渐攀升趋势。据调查数据显示:“在我国20岁以上的人群中,男性和女性的糖尿病患病率分别达10.6%和8.8%,总体糖尿病患病率为9.7%,由此,推算出全国糖尿病总患病人数约为9200万人。”2019年中国糖尿病患病人数约为1.16亿人,中国已成为全球糖尿病患病人数最多的国家;与此同时,糖尿病患者数量仍在持续快速增长。预测2040年中国糖尿病患病人群数量将达到1.51亿人。我国胰岛素市场增长速度也超过了全球平均增速。
糖尿病的药物治疗分胰岛素治疗、口服降糖西药治疗和中医药治疗,目前已发展到生物技术治疗。专利CN201610629475.6公布了糖尿病治疗产品含有于回肠末端和结肠定位释放的口服定位释放制剂口服定位释放制剂含有营养成分。CN201711432775.6公开了治疗糖尿病药物2-(苯氨基)-4H-苯并[e][1,3]噻嗪-4-酮的合成方法。CN201110375880.7公开了一种薯蓣皂苷在制备预防及治疗糖尿病药物中的应用。CN201110073133.8公开一种用于治疗糖尿病药物中应用的新疆一枝蒿制剂及制备。CN200910114494.5公开了一种通过微生物发酵制备α-葡萄糖苷酶抑制剂,用于糖尿病治疗。综上西药治疗糖尿病价格昂贵,毒副作用大,治标不治本;中成药降糖见效慢,需要时间长。
发明内容
针对现有技术西药副作用大、中药见效慢等问题,本发明提供一种植物乳杆菌SF-L38及其在制备血糖控制产品中的应用,可有效抑制人体中多糖转化为单糖,改善血糖指标,具有预防和治疗糖尿病的作用。
第一方面,本发明提供一种植物乳杆菌SF-L38,该植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNO. 23475,保藏日期为2021年9月23日,保藏机构地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
第二方面,本发明提供一种植物乳杆菌SF-L38的培养方法,包括将植物乳杆菌SF-L38接种到灭菌的MRS液体培养基中,接种量为1%,在37℃下培养18h,获得植物乳杆菌SF-L38培养液。
进一步的,MRS液体培养基包括以下组分:蛋白胨10.0g,牛肉粉5.0g,酵母粉4.0g,K2HPO4·7H2O 2.0g,柠檬酸三铵2.0g,葡萄糖20.0g,CH3COONa·3H2O 5.0g,MgSO4·7H2O0.2g,MnSO4·4H2O 0.05g,吐温80 1.0mL,琼脂15.0g,蒸馏水1000mL。
第三方面,本发明提供一种植物乳杆菌SF-L38的应用,即,植物乳杆菌SF-L38在制备血糖控制产品中的应用。
第四方面,本发明提供一种使用植物乳杆菌SF-L38制备发酵制品的方法,包括如下步骤:
(1)将人参、枸杞、茯苓、葛根、黄芪、桑葚、苦瓜、玉竹分别破碎后加水煎煮得提取液,提取液浓缩后喷雾干燥,分别得人参提取物、枸杞提取物、茯苓提取物、葛根提取物、黄芪提取物、桑葚提取物、苦瓜提取物、玉竹提取物;
(2)将人参提取物、枸杞提取物、茯苓提取物、葛根提取物、黄芪提取物、桑葚提取物、苦瓜提取物、玉竹提取物与淮山药粉、胡萝卜汁、净化水混合得混合浆料,混合浆料在120℃高压灭菌30min,冷却至40℃,得到灭菌液;
(3)将植物乳杆菌SF-L38接种到灭菌的MRS液体培养基中,接种量为1%,在37℃下培养18h,获得植物乳杆菌SF-L38培养液;
(4)将植物乳杆菌SF-L38培养液接种到灭菌液中,接种量为1%,在37℃下培养20h,得发酵液;
(5)发酵液破壁后添加水蜜桃浓缩汁、菠萝浓缩汁混合,破壁压力为20Mpa,巴氏灭菌得发酵制品。
进一步的,发酵制品包括如下重量份的原料:净化水50~70份,人参提取物1~2份,枸杞提取物2~5份,茯苓提取物2~5份,葛根提取物1~3份,黄芪提取物3~5份,桑葚提取物1~2份,苦瓜提取物2~6份,玉竹提取物2~3份,淮山药粉2~4份,胡萝卜汁2~7份,水蜜桃浓缩汁4~6份、菠萝浓缩汁3~5份。
进一步的,发酵制品包括如下重量份的原料:净化水60份,人参提取物1份,枸杞提取物3份,茯苓提取物2份,葛根提取物2份,黄芪提取物3份,桑葚提取物2份,苦瓜提取物4份,玉竹提取物2份,淮山药粉3份,胡萝卜汁4份,水蜜桃浓缩汁5份、菠萝浓缩汁4份。
本发明采用如下各辅料药用作用机理:
人参:大补元气、补脾益肺、生津、安神的功效。性味为甘微苦。
淮山药:补脾养胃,生津益肺,补肾涩精,清热解毒。
枸杞:养肝,滋肾,润肺。
茯苓:味甘、淡,性平。归心、肺、脾、肾经。利水渗湿,健脾,宁心。
葛根:甘、辛,凉。有解肌退热,透疹,生津止渴,升阳止泻之功。
黄芪:补气固表,托毒排脓,利尿,生肌。
桑葚:味甘性寒,入心肝、肾经,有滋阴补血作用,并能治阴虚津少、失眠等。
苦瓜:具有祛暑涤热,明目,解毒之功效。
玉竹:养阴润燥,生津止渴。
本发明的有益效果在于,本发明提供的植物乳杆菌SF-L38具有高粘附性、强肠胃适应能力,同时以植物乳杆菌SF-L38为菌种发酵,可抑制多糖转化为单糖,改善血糖指标,具有预防和治疗糖尿病的重要功能。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都应当属于本发明保护的范围。
下述实施例使用的MRS液体培养基包括以下组分:
蛋白胨10g、牛肉粉5g、酵母粉4g、K2HPO4·7H2O 2g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、CH3COONa·3H2O 5g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO4·4H2O 0.05g、吐温80 1mL、蒸馏水1000mL。
下述实施例使用的MRS固体平板培养基包括以下组分:
蛋白胨10g、牛肉粉5g、酵母粉4g、K2HPO4·7H2O2g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、CH3COONa·3H2O5g、MgSO4·7H2O0.2g、MnSO4·4H2O 0.05g、吐温80 1mL、琼脂15.0g、蒸馏水1000mL;
下述实施例的各物质提取物的制备方法为:将人参,枸杞,茯苓,葛根,黄芪,桑葚,苦瓜,玉竹提洗净后破碎成粗粒,分别用10倍量水煎煮2次,两次煎煮时间为3h、1h,合并两次滤液,静置2h后过滤得提取液,将提取液在真空度-0.08Mpa条件下浓缩至1.10(80℃),然后进行喷雾干燥,最后粉碎成80目细粉,即得提取物。
下述实施例淮山药粉制备方法为:山药薄片用清水洗净后放入沸水中烫漂8min,捞出山药薄片并用清水漂去粘液,之后将山药薄片烘干、电磨加工成粉,即得淮山药粉。
下述实施例胡萝卜汁、水蜜桃浓缩汁的制备方法为:分别将去皮的胡萝卜丁、水蜜桃丁预煮5min后打浆,用卧螺机提取浆液中的汁液,同时用两效真空蒸发器将物料浓缩至40%,高温杀菌,待物料冷却,即可分别制得胡萝卜汁、水蜜桃浓缩汁。
下述实施例菠萝浓缩汁的制备方法为:将去皮菠萝榨汁后过滤,去除粗纤维、杂质、其他悬浮物及易产生沉淀的胶粒,菠萝汁脱气后灭菌,待菠萝汁冷却至50℃后加入苯甲酸钠(以菠萝汁计,0.5g/kg),真空浓缩至总糖量(以转化糖计)60%,即得菠萝浓缩汁。
实施例1
本实施例为植物乳杆菌SF-L38的分离和鉴定
1、菌源:酸奶,采集时间为2021年1月,采集地点为青海省西宁市。
2、菌株的分离
对酸奶样品做十倍梯度稀释,每个梯度取100μL均匀涂布于MRS固体平板培养基上,随后取出置于厌氧罐中,37℃厌氧培养过夜;
次日可见平板上长有形态大小各异的菌落,挑取若干乳酸菌的特征菌落作二代划线纯化处理,平板厌氧活化1天,得培养物,随后做菌株鉴定。
本发明分离的植物乳杆菌SF-L38具有以下微生物学特征:为圆端直杆菌,通常为0.9~1.2vtm×3.0~8.0μm,单个、成对或短链状。通常缺乏鞭毛,但能运动。革兰氏阳性,不生芽孢。兼性厌氧,表面菌落直径约3mm,凸起,呈圆形,表面光滑,细密,色白,偶尔呈浅黄或深黄色。能发酵戊糖或葡萄糖酸盐,终产物中85%以上是乳酸。能产生DL-乳酸,能在葡萄酸盐中生长,并产CO2。发酵1分子的核糖或其他的戊糖生成1分子的乳酸和1分子的乙酸。15℃能生长,通常最适生长温度为30~35℃。
3、植物乳杆菌SF-L38的鉴定
(1)鉴定单位:生工生物工程(上海)股份有限公司。
(2)引物序列
27F:5'- AGAGTTTGATCMTGGCTCAG -3';
1492R:5'- GGTTACCTTGTTACGACTT -3'。
(3)鉴定的序列
AAGGGTTACCTTGTTACGACTTCACCCTAATCATCTGTCCCACCTTAGGCGGCTGGTTCCTAAAAGGTTACCCCACCGACTTTGGGTGTTACAAACTCTCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAATCCGAACTGAGAATGGCTTTAAGAGATTAGCTTACTCTCGCGAGTTCGCAACTCGTTGTACCATCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTCACCAGAGTGCCCAACTTAATGCTGGCAACTGATAATAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACACCATGCACCACCTGTATCCATGTCCCCGAAGGGAACGTCTAATCTCTTAGATTTGCATAGTATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTAGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGAATGCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTGAAGGGCGGAAACCCTCCAACACTTAGCATTCATCGTTTACGGTATGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTACCCATACTTTCGAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGACAGCCGCCTTCGCCACTGGTGTTCTTCCATATATCTACGCATTTCACCGCTACACATGGAGTTCCACTGTCCTCTTCTGCACTCAAGTTTCCCAGTTTCCGATGCACTTCTTCGGTTGAGCCGAAGGCTTTCACATCAGACTTAAAAAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAATCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAAATACCGTCAATACCTGAACAGTTACTCTCAGATATGTTCTTCTTTAACAACAGAGTTTTACGAGCCGAAACCCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCCATCAGACTTTCGTCCATTGTGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGAGTTTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAATGTGGCCGATTACCCTCTCAGTCGGCTACGTATCATTGCCATGGTGAGCCGTTACCCCACCATCTAGCTATACGCCGCGGGACCATCCAAAGTGATAGCCGAAGCCATCTTTCAAGCTCGGACATGCGGTTCCAGTGTATGCGTATAGCATCTGTTCAGTGTATCCCCGCTCTGGCCAGTTTCCCACGTGTTTACTTCAC。
(4)鉴定结果
该菌株被鉴定为Lactobacillus(乳杆菌属),为Lactobacillus plantarum(植物乳杆菌)。
实施例2
本发明植物乳杆菌SF-L38发酵制品的制备方法,包括如下步骤:
(1)首先将净化水60份,人参提取物1份,淮山药粉3份,枸杞提取物3份,茯苓提取物2份,葛根提取物2份,黄芪提取物3份,桑葚提取物2份,苦瓜提取物4份,玉竹提取物2份,胡萝卜汁4份按配方比例混合,得混合浆料。
(2)将步骤(1)制备的混合浆料输送至灭菌容器中,经过120℃高压灭菌30min,然后冷却至40℃,得到灭菌液;
(3)将植物乳杆菌SF-L38接种到MRS液体培养基中,接种量为1%,在37℃下培养18h制备接种剂;
(4)将步骤(3)制备的植物乳杆菌SF-L38接种剂接种于步骤(2)灭菌液中,接种量为1%,在37℃下培养20h,制备发酵液;
(5)待步骤(4)发酵完成后,将制备的发酵液输送至高压喷雾破壁机中,压力设置20MPa,进行破壁处理;
(6)将步骤(5)破壁后发酵液与水蜜桃浓缩汁5份、菠萝浓缩汁4份混合调味后,进行巴氏灭菌,得发酵制品。
实施例3
本发明植物乳杆菌SF-L38发酵制品的制备方法,包括如下步骤:
(1)首先将净化水50份,人参提取物2份,淮山药粉2份,枸杞提取物2份,茯苓提取物3份,葛根提取物1份,黄芪提取物5份,桑葚提取物2份,苦瓜提取物2份,玉竹提取物3份,胡萝卜汁7份按配方比例混合,得混合浆料;
(2)将步骤(1)制备的混合浆料输送至灭菌容器中,经过120℃高压灭菌30min,然后冷却至40℃,得到灭菌液;
(3)将植物乳杆菌SF-L38接种到MRS液体培养基中,接种量为1%,在37℃下培养18h制备接种剂;
(4)将步骤(3)制备的植物乳杆菌SF-L38接种剂接种于步骤(2)灭菌液中,接种量为1%,在37℃下培养20h,制备发酵液;
(5)待步骤(4)发酵完成后,将制备的发酵液输送至高压喷雾破壁机中,压力设置20MPa,进行破壁处理;
(6)将步骤(5)破壁发酵液与水蜜桃浓缩汁4份、菠萝浓缩汁3份混合调味后,进行巴氏灭菌,得发酵制品。
实施例4
本发明植物乳杆菌SF-L38发酵制品的制备方法,包括如下步骤:
(1)首先将净化水70份,人参提取物1份,淮山药粉4份,枸杞提取物5份,茯苓提取物5份,葛根提取物3份,黄芪提取物4份,桑葚提取物1份,苦瓜提取物6份,玉竹提取物2份,胡萝卜汁2份按配方比例混合,得混合浆料;
(2)将步骤(1)制备的混合浆料输送至灭菌容器中,经过120℃高压灭菌30min,然后冷却至40℃,得到灭菌液;
(3)将植物乳杆菌SF-L38接种到MRS液体培养基中,接种量为1%,在37℃下培养18h制备接种剂;
(4)将步骤(3)制备的植物乳杆菌SF-L38接种剂接种于步骤(2)灭菌液中,接种量为1%,在37℃下培养20h,制备发酵液;
(5)待步骤(4)发酵完成后,将制备的发酵液输送至高压喷雾破壁机中,压力设置20MPa,进行破壁处理;
(6)将步骤(5)破壁发酵液与水蜜桃浓缩汁6份、菠萝浓缩汁5份混合调味后,进行巴氏灭菌,得发酵制品。
对比例1
对比例1与实施例2制备方法不同的是,采用植物乳杆菌JYLP-326进行发酵,植物乳杆菌JYLP-325购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,编号CGMCCNO.18038,制得发酵制品。
对比例2
对比例2与实施例2制备方法不同的是,采用植物乳杆菌JYLP-375进行发酵,植物乳杆菌JYLP-375购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,编号CGMCCNO.18039,制得发酵制品。
实施例5 植物乳杆菌SF-L38粘附特性测试
本实验根据实施例1所获得的植物乳杆菌SF-L38,测试其对胞外机制的粘附能力。
将植物乳杆菌SF-L38按1%的接种量接种于MRS液体培养基中,37℃培养12~14h,发酵菌液8000r/min离心15分钟,除去上清液,收集沉淀的菌体,将菌体和RPMI-1640细胞培养基重混合,使其浓度达到108CFU/mL。将制备完成的菌悬液加入到24孔平板中,每孔1ml,将24孔细胞培养板在5%CO2、95%空气的CO2培养箱中37℃培养3小时,吸收出未粘附的菌悬液,用磷酸盐缓冲盐冲洗5次,然后加入含有聚乙二醇辛基苯基醚的磷酸盐缓冲液溶解细胞,加入无菌水溶解。最后进行计数,培养条件为37℃恒温厌氧培养,2-3天后统计活菌数(GB4789.35方法检测)。
对比菌株为:JYLP-375、JYLP-326和BB12,其中BB12为行业内公认的高粘附力双歧杆菌菌种标品,上述菌种均来源于开放的菌种保藏库,能够在市面上购买得到。由表1可以看出,0.2%是较理想指标,结果表明,本发明的植物乳杆菌SF-L38粘附力有明显优势。
表1植物乳杆菌SF-L38粘附特性测试结果
Figure 613500DEST_PATH_IMAGE001
实施例6 植物乳杆菌SF-L38胃肠道适应性测试
本实验根据实施例1所获得的植物乳杆菌SF-L38。
(1)模拟胃液的配置:将胃蛋白酶溶于灭菌的生理盐水(0.9%w/v),调节pH至3.0中,使终浓度为3g/L。以0.22μm无菌滤膜过滤,现配现用;
(2)模拟肠液的配置:将胰蛋白酶溶于灭菌的生理盐水(0.9%w/v,调节pH至8.0)中,使终浓度为1g/L,并加入胆盐使终浓度为0.3%。以0.22μm无菌滤膜过滤,现配现用;
(3)将不同植物乳杆菌(JYLP-375、JYLP-326和SF-L38)连续活化三代(每次18h)后进行实验。测定连续活化三代的菌株在A600下的OD值,通过计算求出OD 5所需的菌液量;
(4)将OD 5的菌液以8000G离心10min,弃上清,重悬于1mL模拟胃液中,37℃培养3h后进行平板活菌计数;
(5)取模拟胃液处理后的菌液8000G离心10min,弃上清,重悬于等体积的模拟肠液中,37℃培养4h后进行平板活菌计数。
耐受胃肠液后的存活率(%)=(耐受模拟肠液后菌液中的活菌数/菌液中的原始活菌数)×100%。
表2植物乳杆菌SF-L38胃肠道适应性测试
Figure 667431DEST_PATH_IMAGE002
结果显示,植物乳杆菌SF-L38较其他植物乳杆菌胃肠适应能力强。
实施例7 对α-葡萄糖苷酶活性的抑制能力
预防糖尿病功能制品对α-葡萄糖苷酶抑制活性测定:在150μLPBS中加入75μL20mM的4-硝基酚-α-D-吡喃葡葡糖苷(PNPG)溶液及25μL待测样品(分别为实施例2、实施例3、实施例4、对比例1、对比例2制备的发酵制品),将混合物于37℃水浴10min。加入50μL大鼠肠道提取的α-葡萄糖苷酶溶液(0.17U/mL)继续反应10min。加入1mL0.1MNa2CO3作为反应终止液。并将反应液于405nm处测其吸光值,吸光值与4-硝基酚(PNP)的游离量成正比。反应体系中采用pH6.8的0.1MPBS作为α-葡萄糖苷酶溶液及待测样品的空白对照,采用以下公式计算样品的抑制活性:
酶抑制率(%)=[1-(C-D)/(A-B)]×100%,
其中A为含有α-葡萄糖苷酶溶液但不含样品的测定吸光值;
B为不含α-葡萄糖苷酶溶液及待测样品的测定吸光值;
C为含有α-葡萄糖苷酶溶液及待测样品的测定吸光值;
D为不含α-葡萄糖苷酶溶液但含待测样品的测定吸光值;
由表3可知,实施例2-4所制得的植物乳杆菌SF-L38发酵制品α-葡萄糖苷酶活性抑制率均明显高于对比例,且实施例2制备的植物乳杆菌SF-L38发酵制品对α-葡萄糖苷酶活性有抑制作用效果最明显,抑制率达15.6%,表明本发明制得的植物乳杆菌SF-L38发酵制品可改善血糖指标。
表3 实施例及对比例制得发酵制品对α-葡萄糖苷酶活性影响
Figure 340858DEST_PATH_IMAGE003
实施例8
本实施例验证了所制得植物乳杆菌SF-L38发酵制品对糖尿病预防及治疗效果。
门诊患者32例,其中男性17例,女性15例,年龄35-60岁。本实施例采用实施例2的植物乳杆菌SF-L38发酵制品,用量为一日三次,每次20ml。15天为一个疗程,服用六个疗程。
评定标准:
显效:空腹血糖及餐后2小时血糖下降至正常范围;或空腹血糖及餐后2小时血糖值下降超过治疗前的40%;糖化血红蛋白值下降至正常,或下降超过治疗前的30%。
好转:空腹血糖及餐后2小时血糖下降超过治疗前的20%,但未达到显效标准;糖化血红蛋白值下降超过治疗前的10%,但未达到显效标准。
无效:空腹血糖及餐后2小时血糖无下降,或下降未达到好转标准;糖化血红蛋白值无下降,或下降未达到好转标准。
表4 植物乳杆菌SF-L38发酵制品临床治疗效果
Figure 84692DEST_PATH_IMAGE004
由表4可以看出,本发明所制得的植物乳杆菌SF-L38发酵制品对糖尿病具有良好的治疗效果。
尽管通过优选实施例的方式对本发明进行了详细描述,但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下,本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换,而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 山东向日葵生物工程有限公司
<120> 一种植物乳杆菌SF-L38及其在制备血糖控制产品中的应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1397
<212> DNA
<213> 植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)
<400> 1
aagggttacc ttgttacgac ttcaccctaa tcatctgtcc caccttaggc ggctggttcc 60
taaaaggtta ccccaccgac tttgggtgtt acaaactctc atggtgtgac gggcggtgtg 120
tacaaggccc gggaacgtat tcaccgcggc atgctgatcc gcgattacta gcgattccga 180
cttcatgtag gcgagttgca gcctacaatc cgaactgaga atggctttaa gagattagct 240
tactctcgcg agttcgcaac tcgttgtacc atccattgta gcacgtgtgt agcccaggtc 300
ataaggggca tgatgatttg acgtcatccc caccttcctc cggtttgtca ccggcagtct 360
caccagagtg cccaacttaa tgctggcaac tgataataag ggttgcgctc gttgcgggac 420
ttaacccaac atctcacgac acgagctgac gacaccatgc accacctgta tccatgtccc 480
cgaagggaac gtctaatctc ttagatttgc atagtatgtc aagacctggt aaggttcttc 540
gcgtagcttc gaattaaacc acatgctcca ccgcttgtgc gggcccccgt caattccttt 600
gagtttcagc cttgcggccg tactccccag gcggaatgct taatgcgtta gctgcagcac 660
tgaagggcgg aaaccctcca acacttagca ttcatcgttt acggtatgga ctaccagggt 720
atctaatcct gtttgctacc catactttcg agcctcagcg tcagttacag accagacagc 780
cgccttcgcc actggtgttc ttccatatat ctacgcattt caccgctaca catggagttc 840
cactgtcctc ttctgcactc aagtttccca gtttccgatg cacttcttcg gttgagccga 900
aggctttcac atcagactta aaaaaccgcc tgcgctcgct ttacgcccaa taaatccgga 960
caacgcttgc cacctacgta ttaccgcggc tgctggcacg tagttagccg tggctttctg 1020
gttaaatacc gtcaatacct gaacagttac tctcagatat gttcttcttt aacaacagag 1080
ttttacgagc cgaaaccctt cttcactcac gcggcgttgc tccatcagac tttcgtccat 1140
tgtggaagat tccctactgc tgcctcccgt agagtttggg ccgtgtctca gtcccaatgt 1200
ggccgattac cctctcagtc ggctacgtat cattgccatg gtgagccgtt accccaccat 1260
ctagctatac gccgcgggac catccaaagt gatagccgaa gccatctttc aagctcggac 1320
atgcggttcc agtgtatgcg tatagcatct gttcagtgta tccccgctct ggccagtttc 1380
ccacgtgttt acttcac 1397
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
agagtttgat cmtggctcag 20
<210> 3
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
ggttaccttg ttacgactt 19

Claims (4)

1.一种植物乳杆菌SF-L38在制备辅助降血糖发酵制品中的应用,其特征在于,发酵制品的制备方法包括如下步骤:
(1)将人参、枸杞、茯苓、葛根、黄芪、桑葚、苦瓜、玉竹分别破碎后加水煎煮得提取液,提取液浓缩后喷雾干燥,分别得人参提取物、枸杞提取物、茯苓提取物、葛根提取物、黄芪提取物、桑葚提取物、苦瓜提取物、玉竹提取物;
(2)将人参提取物、枸杞提取物、茯苓提取物、葛根提取物、黄芪提取物、桑葚提取物、苦瓜提取物、玉竹提取物与淮山药粉、胡萝卜汁、净化水混合得混合浆料,混合浆料在120℃高压灭菌30min,冷却至40℃,得到灭菌液;
(3)将植物乳杆菌SF-L38接种到灭菌的MRS液体培养基中,接种量为1%,在37℃下培养18h,获得植物乳杆菌SF-L38培养液;
(4)将植物乳杆菌SF-L38培养液接种到灭菌液中,接种量为1%,在37℃下培养20h,得发酵液;
(5)发酵液破壁后添加水蜜桃浓缩汁、菠萝浓缩汁混合,破壁压力为20Mpa,巴氏灭菌得发酵制品;
该植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)SF-L38保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.23475,保藏日期为2021年9月23日,保藏机构地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,MRS液体培养基包括以下组分:蛋白胨10.0g,牛肉粉5.0g,酵母粉4.0g,K2HPO4·7H2O 2.0g,柠檬酸三铵2.0g,葡萄糖20.0g,CH3COONa·3H2O 5.0g,MgSO4·7H2O 0.2g,MnSO4·4H2O 0.05g,吐温80 1.0mL,琼脂15.0g,蒸馏水1000mL。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于,发酵制品包括如下重量份的原料:净化水50~70份,人参提取物1~2份,枸杞提取物2~5份,茯苓提取物2~5份,葛根提取物1~3份,黄芪提取物3~5份,桑葚提取物1~2份,苦瓜提取物2~6份,玉竹提取物2~3份,淮山药粉2~4份,胡萝卜汁2~7份,水蜜桃浓缩汁4~6份、菠萝浓缩汁3~5份。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,发酵制品包括如下重量份的原料:净化水60份,人参提取物1份,枸杞提取物3份,茯苓提取物2份,葛根提取物2份,黄芪提取物3份,桑葚提取物2份,苦瓜提取物4份,玉竹提取物2份,淮山药粉3份,胡萝卜汁4份,水蜜桃浓缩汁5份、菠萝浓缩汁4份。
CN202210361077.6A 2022-04-07 2022-04-07 一种植物乳杆菌sf-l38及其在制备血糖控制产品中的应用 Active CN114437997B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210361077.6A CN114437997B (zh) 2022-04-07 2022-04-07 一种植物乳杆菌sf-l38及其在制备血糖控制产品中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210361077.6A CN114437997B (zh) 2022-04-07 2022-04-07 一种植物乳杆菌sf-l38及其在制备血糖控制产品中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114437997A CN114437997A (zh) 2022-05-06
CN114437997B true CN114437997B (zh) 2022-06-10

Family

ID=81359036

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210361077.6A Active CN114437997B (zh) 2022-04-07 2022-04-07 一种植物乳杆菌sf-l38及其在制备血糖控制产品中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114437997B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117085079B (zh) * 2023-10-20 2024-02-06 妙越缇卡生物医药科技(山东)有限公司 植物乳杆菌sf-l38的发酵制品及其制备方法和应用

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102586155A (zh) * 2012-03-07 2012-07-18 江南大学 一种植物乳杆菌n13及其用途
CN105567586A (zh) * 2015-12-21 2016-05-11 南昌大学 一株具有抗糖尿病功能的植物乳杆菌及其应用
CN106399196A (zh) * 2016-11-04 2017-02-15 北京好实沃生物技术有限公司 一株植物乳杆菌hew‑a490及其应用
CN106834196A (zh) * 2017-04-10 2017-06-13 吉林省农业科学院 植物乳杆菌ch126及其在制备降糖功能性食品中的应用
CN110791451A (zh) * 2019-11-25 2020-02-14 山东中科嘉亿生物工程有限公司 一株植物乳杆菌jylp-326及其对睡眠的改善应用和产品
CN110964659A (zh) * 2019-08-02 2020-04-07 四川大学 降血糖功效的植物乳杆菌及其筛选方法和应用药剂及食品
CN113462613A (zh) * 2021-08-03 2021-10-01 浙江大学 降血糖植物乳杆菌zjuids04及其应用
CN113647633A (zh) * 2021-09-17 2021-11-16 山东向日葵生物工程有限公司 一种护肝降脂的植物乳杆菌sf-l-28植物饮品及其制备工艺
CN113957021A (zh) * 2021-12-09 2022-01-21 扬州大学 一种具有耐消化应激及高肠道黏附能力的植物乳杆菌grx401及其应用

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102586155A (zh) * 2012-03-07 2012-07-18 江南大学 一种植物乳杆菌n13及其用途
CN105567586A (zh) * 2015-12-21 2016-05-11 南昌大学 一株具有抗糖尿病功能的植物乳杆菌及其应用
CN106399196A (zh) * 2016-11-04 2017-02-15 北京好实沃生物技术有限公司 一株植物乳杆菌hew‑a490及其应用
CN106834196A (zh) * 2017-04-10 2017-06-13 吉林省农业科学院 植物乳杆菌ch126及其在制备降糖功能性食品中的应用
CN110964659A (zh) * 2019-08-02 2020-04-07 四川大学 降血糖功效的植物乳杆菌及其筛选方法和应用药剂及食品
CN110791451A (zh) * 2019-11-25 2020-02-14 山东中科嘉亿生物工程有限公司 一株植物乳杆菌jylp-326及其对睡眠的改善应用和产品
CN113462613A (zh) * 2021-08-03 2021-10-01 浙江大学 降血糖植物乳杆菌zjuids04及其应用
CN113647633A (zh) * 2021-09-17 2021-11-16 山东向日葵生物工程有限公司 一种护肝降脂的植物乳杆菌sf-l-28植物饮品及其制备工艺
CN113957021A (zh) * 2021-12-09 2022-01-21 扬州大学 一种具有耐消化应激及高肠道黏附能力的植物乳杆菌grx401及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Improvement in glucose tolerance and insulin sensitivity by probiotic strains of Indian gut origin in high-fat diet-fed C57BL/6J mice;Mahalingam Balakumar等;《Eur J Nutr.》;20080228;第57卷(第1期);279-295 *
新型复合型饮料的研制;张天爽等;《山西化工》;20211231;第41卷(第3期);13-16 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN114437997A (zh) 2022-05-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113647633B (zh) 一种护肝降脂的植物乳杆菌sf-l-28植物饮品及其制备工艺
CN105054040B (zh) 一种益生菌发酵人参的组合物及其制备方法和应用
CN109182207B (zh) 一株具有调节血糖和胆固醇水平等益生功能的嗜酸乳杆菌La-SJLH001及其应用
CN112375713B (zh) 一株长双岐乳杆菌sf-b-27及其应用
CN103478738A (zh) 一种具有减肥塑身及体重管理作用的组合物
CN112438354A (zh) 一种植物发酵液及其制备方法和应用
CN107307253A (zh) 一种具有润肠通便功效的酵素饮品及其生产工艺
CN114908020B (zh) 一种抗幽门螺旋杆菌感染的植物乳杆菌及其在食用本草酵素产品中的应用
CN114196603B (zh) 一种乳双歧杆菌sf-b21及其制备增加骨密度发酵饮品的应用
CN114437997B (zh) 一种植物乳杆菌sf-l38及其在制备血糖控制产品中的应用
CN115137069A (zh) 一种德氏乳杆菌保加利亚亚种sf-l-18发酵制品及其制备方法和应用
CN111329055B (zh) 一种簕菜酵素的制备方法
CN115364178A (zh) 一种适用于高尿酸及痛风人群的药食同源酵素及其制备方法
CN114521590A (zh) 阻断糖、油脂吸收的白芸豆益生菌减脂片及其制备方法
CN117025450A (zh) 一种副干酪乳杆菌sf-l31和提高钙吸收的双菌发酵饮品及其制备方法
CN115895966B (zh) 一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌bl002及其应用
CN110710675A (zh) 治疗胃肠紊乱及腹胀腹泻的益生元多肽复合益生菌及制备方法
CN106389960A (zh) 一种益生菌发酵型参术建中口服液及其制备方法
CN107670002A (zh) 一种降血糖组合物及其制备方法和应用
CN114601906A (zh) 一种治疗消化***疾病的九葉青牌畅清酶益生素口服液及其制备方法和应用
CN1284848C (zh) 干红都柿酒及其酿造方法
CN117099892B (zh) 乳双歧杆菌sf-b21的抗疲劳发酵饮品及其制备工艺
CN117085086B (zh) 一种补气血发酵物及其制备工艺、应用
CN117223809B (zh) 一种消炎利尿的发酵乳杆菌sf-l35发酵药用饮品及应用
CN114668151B (zh) 一种乳双歧杆菌sf-b21在制备降尿酸产品中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant