CN114276955B - 一种固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的微生物菌剂 - Google Patents
一种固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的微生物菌剂 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的微生物菌剂，该菌剂可以应用于马铃薯薯渣固态发酵生产蛋白饲料。本发明公开了一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BCSW‑21，其保藏编号为CGMCC 23931，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心。该菌株可以与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BCGQ2107和交替单胞菌(Altreomonas sp.)G1‑3复配成一种微生物菌剂，该菌剂不仅可以提高马铃薯薯渣固态发酵产蛋白的含量，还可以有效抑制常见的致病菌。经过该菌剂处理过后的马铃薯薯渣，酒香浓郁，具有一定的饲喂营养价值，不但可以进行马铃薯薯渣废弃物再利用，还减少了环境污染。
Description
技术领域
本发明设计饲料技术领域，具体是涉及一种用于发酵蛋白饲料的微生物菌剂。
背景技术
马铃薯在我国的栽培历史悠久，是重要的粮食和经济作物。近年来我国马铃薯种植生产 稳定发展，覆盖范围不断扩大。同时，马铃薯生产中附带的茎叶垃圾和加工中的薯渣废弃物 也大幅度增加。这类废弃物的资源不易加工处理、再利用困难，长时间搁置会污染环境，造成不良后果。马铃薯薯渣是淀粉生产过程中获得的农业废弃物之一，富含淀粉、纤维素、半 纤维素、果胶、蛋白质、游离氨基酸和盐等营养物质。如果把马铃薯薯渣加以利用制备成蛋 白饲料，不仅可以提高马铃薯淀粉加工厂的额外收益，还可以减少废弃物的排放。
目前马铃薯渣的利用形式主要分为：发酵法、理化法和混合法。发酵法为利用马铃薯渣 作为基质，向培养基中添加微生物菌剂使其发酵，将混合培养物发酵成新型生物质产品和有 机产品；理化法是利用酶制剂处理马铃薯渣，从马铃薯渣中提取可以回收利用的物质；混合法是将发酵方法和理化方法相结合。
马铃薯薯渣饲用化的处理更偏向于发酵法，利用添加微生物菌剂使薯渣发酵产生微生物 蛋白和酶等所需物质，以形成优质饲料。通过固态发酵生产禽畜蛋白饲料是马铃薯渣饲用化 的重要发展方向之一。固态发酵饲料就是利用低附加值的原材料经过发酵制成的动物饲粮，特点是低成本、多原料、易加工等。马铃薯渣经过接种菌体发酵后，将薯渣中的碳源和氮源 等营养因子转化成菌体本身，积累蛋白，从而提高马铃薯渣中的蛋白含量，并且可以通过发 酵产生活性蛋白饲料，营养品质更好，更有利于动物消化吸收。
酵母菌类主要有酿酒酵母、产阮假丝酵母和啤酒酵母等，能使发酵饲料产生酒香味，改 善饲料适口性，提升饲料风味，且因其本身是菌体蛋白，可增加蛋白产量，增加饲料利用率。 芽孢杆菌类主要有枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和蜡质芽孢杆菌等，能降解抗营养因子和有毒物质，分泌纤维素酶和蛋白酶将纤维素和大分子蛋白降解，调节动物肠道 健康。采用微生物菌剂固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料，不仅可以提高饲料粗蛋白含量， 还可以提高牲畜适口性，相比于马铃薯薯渣直接排放，既提高了企业经济效益，又减少了环 境污染。
发明内容
本发明提供了一种可以应用马铃薯薯渣固态发酵生产蛋白饲料的微生物菌剂，通过固 态发酵技术提高菌体蛋白，从而提高薯渣饲料的粗蛋白含量。微生物菌剂发酵饲料会产生 酒香味，改善饲料适口性，提升饲料风味。具有提高经济效益和减少废弃物排放双重效果。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明提供一种生物材料BCSW-21，分类命名为枯草芽孢杆菌，分类命名的拉丁名称 为Bacillus subtilis，保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2021年11月18日，保藏编号为：CGMCC 23931。应用在马铃薯薯渣固态发酵产蛋白方面效果突出。
本发明还提供一种固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的微生物菌剂，含有保藏编号 CGMCC 23931的枯草芽孢杆菌，还包括保藏编号为CGMCC 23129的酿酒酵母和保藏编号为CGMCC 14457的交替单胞菌。
其中，生物材料BCGQ2107，分类命名为酿酒酵母，分类命名的拉丁名称为Saccharomyces cerevisiae，保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址是北京市朝 阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2021年8月6日，保藏编号为：CGMCC 23129；
生物材料G1-3的分类命名为交替单胞菌，分类命名的拉丁名称为Altreomonassp.，保 藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保 藏日期为2017年7月25日，保藏编号为：CGMCC 14457。
优选地，一种固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的微生物菌剂，按照体积份数计，所 述菌剂的成分为酿酒酵母1～3份，枯草芽孢杆菌1～3份，交替单胞菌1～2份。
该微生物菌剂可抑制大肠杆菌、金黄葡萄球菌和疮痂链霉菌。
基于上述的微生物菌剂，本发明还提供了一种固态发酵马铃薯薯渣制备蛋白饲料的制 备和使用方法，包括以下步骤：分别将酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和交替单胞菌的培养和优 化扩大后，混合制备微生物菌剂；将所述的微生物菌剂与发酵底物混合，密封发酵，得发酵饲料；烘干、粉碎制得发酵饲料。
本发明的微生物菌剂中，酿酒酵母的培养基按照质量份数计，包括0.3份～0.5份的糖 蜜，0.3份～0.5份的硫酸钾，酵母膏和硫酸铵，酵母膏和硫酸铵的质量比例为4:1。酵母微 生物菌剂培养条件为，在温度28～30℃、转速180～200r/min条件下震荡培养30h，至OD600达到1.5～1.7。
细菌微生物菌剂(枯草芽孢杆菌和交替单胞菌)的培养基包括质量比例为0.1份～0.3 份的糖蜜，0.3份～0.5份的硫酸钾，酵母提取物和氯化铵，酵母提取物和氯化铵的质量比例为3:1。细菌微生物菌剂培养条件为，在温度35～37℃、转速180～200r/min条件下震荡培养28h，至OD600达到0.8～1.0。
微生物菌剂按体积百分比4～5％添加量和发酵底物混合后进行固态发酵制备蛋白饲 料。
发酵底物按照质量百分比计，包括马铃薯薯渣55～85％、秸秆0～10％、豆粕0～15％、 麸皮8～20％、柠条粉5～10％、硫酸铵2％和硫酸钾0.2％。
进一步，优选发酵底物按照质量百分比计，包括马铃薯薯渣60～80％、秸秆0～10％、 豆粕0～15％、麸皮10～15％、玉米柠条粉5～10％、硫酸铵2％和硫酸钾0.2％。
进一步地，密封发酵的温度为25～40℃，更优选为25～37℃；所述密封发酵的时间优 选为2～10d，更优选为3～5d。
进一步地，固态发酵前发酵底物的pH为5.0～7.8，优选为5.5～6.5；含水率为45～55wt.％，优选含水率为50～52.5wt.％。
发酵结束后，80℃烘干24h，粉碎过40目筛。
最终得到的马铃薯薯渣蛋白饲料，测定各项指标。
本发明的有益效果是：
1、生产该蛋白饲料的原料为马铃薯薯渣，随着马铃薯淀粉产业的日益发展，薯渣作为 副产物，其产量也十分可观。薯渣作为饲料的原料，营养价值也极高，富含淀粉、纤维素、 半纤维素、果胶、蛋白质、游离氨基酸和盐等营养物质，具有很高的重新利用的价值。
筛选出保藏编号为CGMCC 23931的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis，对马铃薯薯渣固态 发酵产蛋白具有良效，经与保藏号为CGMCC 23129的酿酒酵母Saccharomycescerevisiae 和保藏号为CGMCC 14457的交替单胞菌Altreomonas sp.复配的微生物菌剂对固态发酵后的蛋白含量有明显的提高，且对发酵产物中重金属减少也有贡献。经过固态发酵产生的氨基 酸含量高，组成更有益于预防病害，提高家禽的营养价值。
2、生产该蛋白饲料的方法为固态发酵法，固态发酵具有成本低、投资少、原料广泛、 操作便利污染少等优点，并且发酵后期处理简单。在固态发酵培养基中微生物易于生长， 酶活力相对较高。
3、生产该蛋白饲料的微生物菌剂包含酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和交替单胞菌，这几株 菌种都无毒无害并且容易获得。所制成的菌剂还可以抑制杂菌生长，可以有效抑制常见的 致病菌金黄葡萄球菌和大肠杆菌，对马铃薯易感染的疮痂链霉菌也有一定的抑制效果。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要 使用的附图作简单地介绍。
图1为本发明优选实施例2中对金黄葡萄球菌拮抗能力的检测结果。
图2为本发明优选实施例2中对大肠杆菌拮抗能力的检测结果。
图3为本发明优选实施例2中对疮痂链霉菌拮抗能力的检测结果。
图4为本发明优选实施例3中的马铃薯薯渣蛋白饲料制备的流程图。
图5为本发明优选实施例4和实施例5得到的蛋白饲料产品对比图。
具体实施方式
以下结合实施例，对本发明的具体实施方式进行更加详细的说明，以便更好地阐述本 方面的方案及其各方面的优点。应当指出，以下描述的具体实施方式和实施例的目的仅是 对技术方案的说明，并不是对本发明的限制。
马铃薯薯渣，麸皮，秸秆，豆粕和玉米柠条粉均为市售。本发明所使用菌株均为天津 北洋百川生物技术有限公司提供。蛋白饲料的蛋白含量的测定参考GB T6432-1994《饲料粗 蛋白测定》采用凯氏定氮法测定，饲料含水率的测定参考GBT6435-2014《饲料中水分测定》， 饲料粗纤维的测定方法参考GBT5009.10-2003《粗纤维素测定》。
实施例1
实施例1为该微生物菌剂的制备方法和优化扩大培养。
本发明所述菌种制备培养基为：
枯草芽孢杆菌和交替单胞菌的斜面培养基为LB固体培养基，该培养基的配方为酵母浸 粉0.5％，蛋白胨1％，NaCl 1％，琼脂2.5％，pH 7.2～7.4，(质量百分比)。
枯草芽孢杆菌和交替单胞菌的液体培养基为LB培养基，该培养基的配方为酵母浸粉 0.5％，蛋白胨1％，NaCl 1％，pH 7.2～7.4，(质量百分比)。
枯草芽孢杆菌和交替单胞菌的扩大培养用优化培养基，该培养基的配方按质量百分比 为：糖蜜0.3份，硫酸钾0.3份，酵母提取物与氯化铵按照3比1的复合比列添加。
酿酒酵母的斜面培养基为YEPD固体培养基,该培养基的配方为酵母浸粉1％，葡萄糖 2％，蛋白胨2％，琼脂2.5％，pH 6.0，(质量百分比)。
酿酒酵母的液体培养基为液体YEPD培养基，该培养基的配方为酵母浸粉1％，葡萄糖2％，蛋白胨2％，pH 6.0，(质量百分比)。
酿酒酵母的扩大培养用优化培养基，该培养基的配方为：糖蜜0.3份，硫酸钾0.3份， 酵母膏与硫酸铵按照4比1的复合比列添加，(质量百分比)。
本发明所述菌剂的培养方法：
分别将酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和交替单胞菌进行斜面菌种培养、液体一级菌种培养、 液体二级菌种培养。
斜面菌种培养：将菌种从-80℃的超低温冰箱取出备用，采用划线接种法接种于斜面培 养中，然后置28～37℃培养箱中暗培养24～48h，即可获得单菌落，如不直接使用，优选 将试管保存在4℃冰箱中。
液体一级菌种培养：将液体培养基分装入100mL三角瓶中，每瓶装40～50mL，蘸取斜面培养菌种得到的单菌落，用接种环接入三角瓶中，置摇床上进行培养，培养温度28～37℃，转速180～200rpm，培养时间24～48h即可得到一级菌种。
液体二级菌种培养：在选取本发明中所述菌种相应的培养基，按优化培养基配方配制， 分装入1000mL大三角瓶中，每瓶装300～400mL，接入培养好一级菌种，接种量1.0％～ 1.5％，置摇床上进行培养，培养温度28～37℃，转速180～200rpm，培养时间24～48h即可得到二级液体菌种。
得到的3种二级菌种单独菌种混合为微生物菌剂。所述微生物菌剂是将所得到的二级 菌液按照酿酒酵母2份，枯草芽孢杆菌2份，交替单胞菌1份的体积比混合后得到所述微 生物菌剂。更优选的，将所得到的二级菌液按照酿酒酵母1份，枯草芽孢杆菌1份，交替单胞菌1份的体积比混合后得到所述微生物菌剂混合得到的微生物菌剂所述微生物菌剂的培养基中，在温度32～39℃、转速180～200r/min条件下震荡培养，至OD600达到1.347， 所得到的微生物菌剂可用于下一步固态发酵蛋白饲料。
实施例2
验证本发明微生物菌剂对致病菌之间的拮抗作用，实验方法如下：
大肠杆菌和金黄葡萄球菌的培养基为LB培养基。疮痂链霉菌的培养基为SP培养基， 该配方为酵母浸粉0.4％、麦芽提取物1％、葡萄糖0.4％，pH 7.0～7.2，(质量百分比)。
将灭过菌的LB和YEPD培养基(琼脂添加量2％)倒平板，每个平板倒15mL至20mL，其凝固后为下层培养基，然后将灭过菌的牛津杯置于下层培养基表面，另取琼脂添加量1.5％ 的LB或SP培养基，加入3％的致病指示菌(大肠杆菌、金黄葡萄球菌和疮痂链霉菌中的 一种)，混匀倒在下层培养基上，其凝固后为上层培养。将牛津杯取出，露出凹槽，把0.1mL 被试菌菌液(实施例1混合得到更优选的微生物菌剂)注入凹槽内，正置于37℃或30℃生化培养箱中培养18h，观察并记录有无透明圈或菌体稀薄现象的平板编号。实验结果发现对 三种致病菌均有抑制作用。抑菌效果见图1、图2、图3。
实施例3
实施例3提供了上述技术方案所述微生物发酵菌剂在制备马铃薯渣发酵饲料中的应用 方法。将实施例1所述微生物菌剂与发酵底物混合，密封发酵，得发酵饲料。
马铃薯薯渣由内蒙古蒙森农业科技股份有限公司所提供，麸皮，豆粕和玉米柠条粉均 为市售。微生物菌剂的添加量为4％，发酵底物主要原料为马铃薯薯渣，发酵底物包括以下 质量百分含量的组分：马铃薯薯渣80％、秸秆2％、豆粕4％、麸皮8％、柠条粉6％、硫酸铵2％和硫酸钾0.2％。密封发酵的温度为37℃,密封发酵的时间为3d，在密封发酵前，混合所得物料固态发酵前底物的pH调整为6.5，含水率为52.5wt.％。按照上述混合所得发酵底物的标准为：手握成团，落地能散，略微潮湿，颜色成淡黄色。固态发酵方法将所述混合 所得物料与微生物菌剂混合处理后密封发酵，密封发酵在发酵池或发酵袋中进行。固态发 酵的结束标准为发酵饲料呈棕黄色并散发出酒香味。马铃薯薯渣蛋白饲料制备的流程图见图4。
实施例4
按所述方法固态发酵马铃薯薯渣饲料的空白组制备方法。
马铃薯薯渣由内蒙古蒙森农业科技股份有限公司所提供，麸皮，豆粕和玉米柠条粉均 为市售。发酵底物由80％马铃薯薯渣、2％秸秆、4％豆粕、8％麸皮和6％柠条粉组成，添加 2％硫酸铵和0.2％硫酸钾后混合均匀。将拌好的发酵底物80℃烘干24h，粉碎过40目筛，待测。
实施例5
实施例5为按所述方法固态发酵马铃薯薯渣饲料的实验组制备方法。
马铃薯薯渣由内蒙古蒙森农业科技股份有限公司所提供，麸皮，豆粕和玉米柠条粉均 为市售。发酵底物由80％马铃薯薯渣、2％秸秆、4％豆粕、8％麸皮和6％柠条粉组成，添加 2％硫酸铵和0.2％硫酸钾后混合均匀，分别按4％添加量接入按实施例1培养的混合菌剂和 单一菌株的菌剂。将拌好的发酵底物用密封袋装好，置于25～37℃的室温条件下发酵3天。将发酵完成后的饲料置于80℃烘干24h，粉碎过40目筛，待测。发酵后的产品对比图见 图5，发酵过后的饲料相比于发酵前的饲料呈棕黄色并散发出酒香味。
实施例6
实施例6为饲料各种指标含量检测。
饲料蛋白含量的测定参考GB T6432-1994《饲料粗蛋白测定》采用凯氏定氮法测定。在 有催化剂的条件下，用浓硫酸消解样品使得有机氮转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将 无机铵盐转化为氨气，随水蒸汽蒸馏出来并被过量的硼酸吸收，再以标准酸溶液滴定，通过计算滴定所需酸溶液的体积，计算出样品中的氮含量。在消解管中加入硫酸钾3.00g，硫 酸铜0.200g，样品0.200g，浓硫酸10mL。在消解炉上200℃消解20min，300℃消解20 min，400℃消解90min，冷却后，转移到锥形瓶中，在自动凯氏定氮仪中反应后，将反应后的液体使用标准酸溶液滴定。
V0：滴定空白蒸馏液消耗的标准酸溶液体积
V1：滴定样品蒸馏液消耗的标准酸溶液体积
C：标准酸溶液浓度
0.014：氮的毫摩尔质量
F：蛋白系数
m：样品质量
饲料含水率的测定参考GBT6435-2014《饲料中水分测定》。于预先干燥并称重好的空 铝盒中，称取样品2.00g，称准至0.0002g，置于干燥箱中105℃，4-6h后取出，在干燥器中冷却至室温后称重。
m1：空铝盒的质量
m2：干燥前试样的质量
m3：空铝盒和干燥后样品的质量
饲料粗纤维的测定方法参考GBT5009.10-2003《粗纤维素测定》酸碱洗涤法。在硫酸作 用下，试样中的糖、淀粉、果胶质和半纤维素经水解除去后，再用碱处理，除去蛋白质及 脂肪酸，剩余的残渣为粗纤维。
X：试样中粗纤维的含量
G：残余物的质量
m：试样的质量
检测实施例5中单一菌株和按实施例1复配的微生物菌剂固态发酵饲料的指标，对比 见表1。
表1单一菌株和复配微生物菌剂固态发酵指标对比
据表1所述，单一菌株制成的菌剂和微生物复合菌剂处理薯渣混合物效果均好于不添 加菌剂的初始薯渣混合物，且微生物复合菌剂处理薯渣混合物效果要好于单一菌株制成的 菌剂。
空白组和实施例5中接入混合微生物菌剂的实验组发酵产品中氨基酸组分对比见表2。
表2空白组和实验组发酵产品氨基酸组分对比
由表2可得，经过微生物菌剂固态发酵处理后的马铃薯薯渣饲料其氨基酸含量均高于 发酵前的空白实验组，总量为13.4％，提高了197.78％。本试验共检出16种氨基酸，各类 氨基酸中谷氨酸含量最高，谷氨酸是生物机体内氮代谢的基本氨基酸之一，可作为碳氮营 养参与机体代谢，有较高的营养价值。其次为亮氨酸，亮氨酸的作用包括与异亮氨酸和缬氨酸一起合作修复肌肉，控制血糖，并给身体组织提供能量，其中亮氨酸是最有效的一种支链氨基酸，可以有效防止肌肉损失，因为它能够更快的分解转化为葡萄糖。由于赖氨酸在谷物食品含量中含量极低，被称为第一限制性氨基酸，在饲料中添加适量赖氨酸，可以提高饲料利用率并且对霉菌的繁殖有一定的抑制效果。第二限制性氨基酸为蛋氨酸，蛋氨酸不仅为营养所需，还可以抑制各种霉毒素的生长，饲料中含有蛋氨酸对家禽有预防病害和保健的作用。
空白组和实施实例5中添加混合微生物菌剂的实验组发酵产品各项参数指标和重金属 离子含量对比见表3、表4。
表3空白组和实验组发酵产品参数对比
表4空白组和实验组发酵产品重金属离子含量对比
虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但熟悉本技术领域的技术人员应当理解，我 们所描述的具体的实施例只是说明性的，而不是用于对本发明的范围的限定，熟悉本技术 领域的技术人员在依照本发明的精神所做的等效修饰以及变化，都应当涵盖在本发明的权利要求所保护的范围内。
Claims (9)
1.一种固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的微生物菌剂，其特征在于，含有保藏号为CGMCC 23931的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BCSW-21、保藏号为CGMCC 23129的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BCGQ2107和保藏号为CGMCC 14457的交替单胞菌(Altreomonas sp.)G1-3；所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BCSW-21，保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2021年11月18日；所述的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BCGQ2107，保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2021年8月6日；所述的交替单胞菌(Altreomonas sp.)G1-3，保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2017年7月25日。
2.根据权利要求1所述的一种固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的微生物菌剂，其特征在于，按照体积份数计，所述微生物菌剂的组成为酿酒酵母1～3份，枯草芽孢杆菌1～3份，交替单胞菌1～2份。
3.根据权利要求1所述的一种固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂可抑制大肠杆菌、金黄葡萄球菌和疮痂链霉菌。
4.一种基于权利要求1至3中任一项所述微生物菌剂的固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)分别将酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和交替单胞菌培养和优化扩大后，混合制备微生物菌剂；(2)将所述的微生物菌剂与发酵底物混合，密封进行固态发酵；烘干、粉碎制得蛋白饲料；
所述酿酒酵母的扩大培养基按质量份数计，包括0.3份～0.5份的糖蜜，0.3份～0.5份的硫酸钾，酵母膏和硫酸铵，酵母膏和硫酸铵的质量比例为4:1，培养条件为，在温度28～30℃、转速180～200r/min条件下震荡培养30h，至OD600达到1.5～1.7；所述枯草芽孢杆菌和交替单胞菌的扩大培养基包括质量比例为0.1份～0.3份的糖蜜，0.3份～0.5份的硫酸钾，酵母提取物和氯化铵，酵母提取物和氯化铵的质量比例为3:1，培养条件为，在温度35～37℃、转速180～200r/min条件下震荡培养28h，至OD600达到0.8～1.0。
5.根据权利要求4所述的一种基于权利要求1至3中任一项所述微生物菌剂的固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的方法，其特征在于，将所述微生物菌剂按体积百分比4～5％添加量和发酵底物混合进行固态发酵制备蛋白饲料。
6.根据权利要求4所述的一种基于权利要求1至3中任一项所述微生物菌剂的固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的方法，其特征在于，所述发酵底物按照质量百分比计，包括马铃薯薯渣55～85％、秸秆0～10％、豆粕0～15％、麸皮8～20％、柠条粉5～10％、硫酸铵2％和硫酸钾0.2％。
7.根据权利要求6所述的一种基于权利要求1至3中任一项所述微生物菌剂的固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的方法，其特征在于，所述发酵底物按照质量百分比计，包括马铃薯薯渣60～80％、秸秆0～10％、豆粕0～15％、麸皮10～15％、玉米柠条粉5～10％、硫酸铵2％和硫酸钾0.2％。
8.根据权利要求4所述的一种基于权利要求1至3中任一项所述微生物菌剂的固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的方法，其特征在于，所述密封固态发酵的温度为25～37℃；所述密封发酵的时间为3～5天；发酵结束后，50～60°C烘干至水分10％～20％，保存。
9.根据权利要求4所述的一种基于权利要求1至3中任一项所述微生物菌剂的固态发酵马铃薯薯渣生产蛋白饲料的方法，其特征在于，所述固态发酵前发酵底物的pH为5.5～6.5；含水率为50～52.5wt.％。
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