CN1141093C - 番荔枝内酯抗癌有效部位药及其制备方法 - Google Patents
番荔枝内酯抗癌有效部位药及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1141093C CN1141093C CNB011075945A CN01107594A CN1141093C CN 1141093 C CN1141093 C CN 1141093C CN B011075945 A CNB011075945 A CN B011075945A CN 01107594 A CN01107594 A CN 01107594A CN 1141093 C CN1141093 C CN 1141093C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- anticancer
- arnold
- lectone
- lichee
- silica gel
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 64
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 title claims abstract description 35
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 claims abstract description 58
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 32
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 16
- HWJHWSBFPPPIPD-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.CCOCC HWJHWSBFPPPIPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims abstract description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 23
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 22
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 21
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 21
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 claims description 21
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 16
- 239000002026 chloroform extract Substances 0.000 claims description 10
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 9
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 9
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 8
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000007689 inspection Methods 0.000 claims description 7
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 claims description 6
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 claims description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 5
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 claims description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 5
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 claims description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 4
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 claims description 4
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 claims description 4
- 238000007670 refining Methods 0.000 claims description 4
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 11
- 241001081440 Annonaceae Species 0.000 abstract description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 5
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 abstract description 4
- 239000008267 milk Substances 0.000 abstract description 4
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 abstract description 4
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 abstract description 3
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 abstract description 3
- -1 and firstly Substances 0.000 abstract description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 13
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 6
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 6
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 6
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 5
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 5
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 4
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 4
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 4
- 231100000215 acute (single dose) toxicity testing Toxicity 0.000 description 4
- 238000011047 acute toxicity test Methods 0.000 description 4
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 4
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- DAEFUOXKPZLQMM-UHFFFAOYSA-N squamocin A Natural products O1C(C(O)CCCC(O)CCCCCC)CCC1C1OC(C(O)CCCCCCCCCCCCC=2C(OC(C)C=2)=O)CC1 DAEFUOXKPZLQMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 3
- 206010012818 diffuse large B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 3
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 3
- 201000006845 reticulosarcoma Diseases 0.000 description 3
- 208000029922 reticulum cell sarcoma Diseases 0.000 description 3
- 244000028821 Annona squamosa Species 0.000 description 2
- 235000005274 Annona squamosa Nutrition 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000002454 Nasopharyngeal Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 description 2
- DAEFUOXKPZLQMM-AUDZWCKFSA-N Squamocin Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](O)CCC[C@@H](O)CCCCCC)CC[C@@H]1[C@@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCCCCC=2C(O[C@@H](C)C=2)=O)CC1 DAEFUOXKPZLQMM-AUDZWCKFSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 2
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 description 2
- 201000011216 nasopharynx carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- MBABCNBNDNGODA-WPZDJQSSSA-N rolliniastatin 1 Natural products O1[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC[C@H]1[C@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCC[C@@H](O)CC=2C(O[C@@H](C)C=2)=O)CC1 MBABCNBNDNGODA-WPZDJQSSSA-N 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- MBABCNBNDNGODA-UHFFFAOYSA-N trilobacin Chemical compound O1C(C(O)CCCCCCCCCC)CCC1C1OC(C(O)CCCCCCCCCCC(O)CC=2C(OC(C)C=2)=O)CC1 MBABCNBNDNGODA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZCUOLOTMJILH-UHFFFAOYSA-N 2h-tetrazol-2-ium;bromide Chemical compound [Br-].C1=N[NH+]=NN1 QGZCUOLOTMJILH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 1
- 241000722951 Annona Species 0.000 description 1
- 235000007755 Annona Nutrition 0.000 description 1
- 235000011518 Annona purpurea Nutrition 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 1
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical group C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JQOYPOSGHDJFLI-AVNCTIOFSA-N Uvaricin Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](OC(C)=O)CCCCCCCCCC)CC[C@@H]1[C@@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCCCCC=2C(O[C@@H](C)C=2)=O)CC1 JQOYPOSGHDJFLI-AVNCTIOFSA-N 0.000 description 1
- JQOYPOSGHDJFLI-UHFFFAOYSA-N Uvaricin Natural products O1C(C(OC(C)=O)CCCCCCCCCC)CCC1C1OC(C(O)CCCCCCCCCCCCC=2C(OC(C)C=2)=O)CC1 JQOYPOSGHDJFLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Chemical group 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 1
- GCFHZZWXZLABBL-UHFFFAOYSA-N ethanol;hexane Chemical compound CCO.CCCCCC GCFHZZWXZLABBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 1
- 125000000457 gamma-lactone group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000010813 internal standard method Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 230000035806 respiratory chain Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明涉及一种番荔枝内酯抗癌有效部位药及其制备方法，以番荔枝种子为原料，首先用有机溶剂提取制备番荔枝总内酯，然后番荔枝总内酯经硅胶柱层析，石油醚-丙酮洗脱精制处理后，制备得阿诺宁-1和阿诺宁-2总含量为质量分数50%～70%的抗癌药，并以脂肪乳作为剂型。本发明抗癌药中由于富集了高活性番荔枝内酯成分，因而不仅活性更强，而且组成简单，易于质量控制；同时，其制备方法简单、易实施、生产成本低，并成功解决制剂问题，具有极强实用性。
Description
本发明涉及从番荔枝(Annona squamosa L.)种子制备的一种番荔枝内酯(AnnonaCeous acetogenins)抗癌有效部位药及其制备方法。
番荔枝内酯类物质(Annonaceous acetogenins)是由长链脂肪酸γ-内酯衍生出的一类天然产物。这类物质的结构特点是：在一长脂肪链的一端有一甲基取代的α，β-不饱和γ-内酯环，在脂肪链上有1～3个四氢呋喃环和其它一些含氧取代基，如羟基、乙酰氧基、酮基、环氧基，以及碳碳双键等。这类天然产物仅存在于番荔枝科(Annonaceae)某些属的植物中。
番荔枝内酯类物质具有多种生物活性，其中最重要的生物活性是极强的体外细胞毒和体内抗肿瘤作用。其作用机理是通过选择性地抑制癌细胞线粒体中NADH氧化还原酶，阻止呼吸链电子的传递，使ADP不能转化成ATP，从而切断癌细胞赖以生存和增殖的能量供应，进而诱导癌细胞走向凋亡(Apoptosis)；同时，番荔枝内酯类物质还能够克服癌细胞的多药抗药性(MDR)。因此，番荔枝内酯类物质成为近年来的研究热点。于1982年报道第一个番荔枝内酯化合物Uvaricin以来，至今已发现了约300个这类化合物。
国外的工作主要在单体化合物方面，但至今仍停留在分离、结构、合成及生物活性等方面的研究，距离实际应用尚很遥远，原因有：第一，在已发现的约300个化合物中，在体内真正有效的高活性化合物并不多；第二，由于数目众多的异构体、同系物共存于同一植物中，有些植物中多达30多个同系物，且各同系物及异构体的理化性质极为相似，因此，单体化合物的分离、纯化非常困难；第三，单个化合物在植物中的含量相对较低，植物资源有限；第四，番荔枝内酯类物质的分子中具有多个手性中心，亦难以通过化学合成得到特定单体物；第五，番荔枝内酯单体化合物的毒性较高，治疗指数较低。
国内有人提出以番荔枝总内酯用作药物原料，但这样的总内酯组分复杂，难以建立药物的质量标准和质量控制手段，因而无法保证药物的质量和疗效，难以达到新药应有的“有效、安全、可控”的目标。因此，番荔枝总内酯亦将难以进入实际应用。而且现有公知的番荔枝总内酯制备方法也存在一些问题，例如CN1224016A公开的方法是以番荔枝种子为原料，首先用己烷或石油醚脱脂，然后用醇提取、氯仿萃取及己烷-乙醇分配处理，最后再经硅胶吸附层析得到总内酯。这种方法存在下列缺点：(1)首先脱脂所用己烷或石油醚等有机溶剂的量很大，溶剂损耗大，处理时间长，导致成本增加；(2)由于己烷、石油醚等溶剂能溶出部分有效成分，因此首先脱脂会使部分有效成分损失。
另外，番荔枝内酯类物质具有极强的脂溶性，制剂亦是难点。
本发明目的在于解决下述问题：(1)以单个番荔枝内酯化合物用作药物原料尚无实际应用价值问题；(2)以番荔枝总内酯作为药物原料时，组分过于复杂，无法保证药物的质量，即质量可控性问题；(3)番荔枝总内酯制备方法中存在的问题；(4)制剂问题。以开发一种以番荔枝内酯化合物为有效成分的有实用价值的抗癌有效部位药。
本发明以番荔枝种子为原料，番荔枝(Annona squamosay L.)是产于我国南方地区的一种药用植物，其果实是著名水果，资源丰富、易得，其种子含大量的番荔枝内酯，其中不乏活性很强的成分。本发明先由番荔枝种子制备番荔枝总内酯，然后将总内酯经精制处理，目的是除去大量活性不高或无活性的内酯成分，仅保留高活性内酯成分而成为一高效部位药。这种高效部位由于已除去了大量无用内酯成分而仅富集高活性内酯成分，因而不仅活性更强，而且组成简单，易于进行质量控制；同时，其制备方法简单、易实施、生产成本低；另外本发明对番荔枝总内酯制备方法作了改进，首先用醇提取，乙醇提取物用有机溶剂例如石油醚脱脂，并用乙醇萃取出有机溶剂例如石油醚中的有效成分，减少了溶剂用量，提高了有效成分收率；还有本发明以脂肪乳作为其剂型，成功地解决了制剂问题。因此本发明具有极强的实用性。
本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药是由下述两个工序制得的物质：首先有番荔枝总内酯制备工序，以番荔枝种子为原料制备番荔枝总内酯；其特征在于还有精制工序，把前步工序中所制备的番荔枝总内酯经硅胶柱层析，所述的硅胶柱中充填的硅胶粒度为80～300目，最好100～200目，与所述的番荔枝总内酯的质量比为15∶1～50∶1，最好为30∶1，层析后用体积比为3∶1～3∶2的石油醚-丙酮洗脱，用薄层层析检查，在阿诺宁-6(Annonin VI)流出时开始收集至阿诺宁-1(Annonin I)全部流出为止，洗脱剂石油醚丙酮的用量就由此来决定，将收集的所述馏分浓缩、干燥，即得本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药。
所述的番荔枝总内酯制备工序可采用现有各种公知的方法，例如CN1224016A的方法。但为了提高有效成分收率和减少溶剂用量，本发明对该工序作了改进。本发明番荔枝总内酯的制备工序为：把番荔枝种子粗粉用80％～97％乙醇浸泡提取，乙醇的用量、浸泡时间和次数随意选择，乙醇提取液浓缩后用有机溶剂萃取脱脂，然后用氯仿萃取，氯仿萃取物经硅胶柱层析，所述的硅胶柱中充填的硅胶粒度为80～300目，最好100～200目，与氯仿萃取物的质量比为5∶1～20∶1，最好为10∶1，层析后以体积比为100∶0～90∶10的氯仿-甲醇洗脱，用薄层层析检查，在番荔枝内酯类物质大量流出时开始收集，至无番荔枝内酯类物质流出时为止，将收集的所述馏分浓缩、干燥，得到番荔枝总内酯。
上述的各次萃取所用的溶剂用量和萃取次数均可随意选择。脱脂工序可使用公知的有机溶剂例如石油醚、己烷等。在所述的有机溶剂例如石油醚萃取脱脂前在蒸去乙醇的提取物中最好先加水；脱脂后的有机溶剂例如石油醚层最好用体积分数为60％～97％的乙醇萃取，乙醇萃取液在浓缩后并入脱脂后的水溶液中，具体制备工艺流程详见附图1。
所述的薄层层析检查是控制本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药质量的方法，可采用通常的薄层层析板，为方便本发明采用自制硅胶H硬板(CMC为粘合剂)，以体积比为3∶1的石油醚-丙酮作为展开剂，可选用下列三种显色剂中之一种进行显色：
(1)Kedde试剂即3，5-二硝基苯甲酸：斑点呈红色，色斑很快消褪；
(2)Dragendorff试剂即碘化铋钾试剂：呈橙黄色斑点，颜色持久；
(3)碘蒸汽：呈褐色斑点，颜色持久。
结果：本发明番荔枝总内酯有效部位药在TLC上按上述条件展开后，对三种显色剂均显示两个斑点，分别对映于对照品阿诺宁-1和阿诺宁-6。
高效液相色谱法测定本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药中两个主要成分的含量：用ODS柱(6mm×15cm)，甲醇-水(体积比9∶1)为流动相，流速1mL/min，用紫外检测仪，检测波长210nm，萘为内标，由峰面积积分值通过内标法或外标法测定阿诺宁-1和阿诺宁-6的含量，二者的回归方程如下：
阿诺宁-1(Annonin I)：y＝5065.05x-6902.7r＝0.9998；
阿诺宁-6(Annonin VI)：y＝4975.92x-4179.8r＝0.9998。
结果：阿诺宁-1的含量为质量分数42％～55％，典型值为52.3％，阿诺宁-6的含量为质量分数8％～15％，典型含量为10.5％，二者的含量之和为质量分数50％～70％，典型值为63.1％。
本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药可配成乳剂，其配方比例和制造方法如下：每1000mg本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药中，加入50～200g大豆油(最适用量为100g)和10～20g(最适用量为12g)卵磷脂，加热混合、溶解，待全部溶解后加注射用水至总体积为500～1500mL，最好1000mL，经乳化处理后，过滤、灌封、灭菌，即成本发明乳剂，所述的乳化处理可以采用一般的乳化方法，例如可用多级超声乳化处理。
本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药进行下述药理学试验。
(1)急性毒性试验
小鼠急性毒性试验，以Bliss法计算LD50，结果如下：
腹腔注射 ip×1次 LD50＝1.124(1.017～1.242)mg/kg；
灌胃 po×1次 LD50＝74.754(58.662～95.260)mg/kg。
(2)体外细胞毒试验
本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药体体外对肺癌(A-549)、鼻咽癌(CNE2、SUNE1)、肝癌(BEL-7402)、HT-29(结肠癌)、乳腺癌(MCF-7)及肺腺癌(GLC-82)等7种人癌细胞进行了细胞毒实验，以Taxol作为阳性对照药物，结果如表1。显示本发明有效部位药对试验的7种细胞株均有细胞毒作用，其中对A-549、CNE2、BEL-7402等三种细胞株的作用最强，作用强于taxol或与taxol相当。
表1 对各种人癌细胞的体外细胞毒作用(IC50半数抑制浓度)
| 细胞株 | 本发明药物IC50(μg/mL) | 对照药物Taxol IC50(μg/mL) |
| HT-29CNE2SUNE1BEL-7402A-549MCF-7GLC-82 | 0.4464.369×10-21.6173.873×10-24.413×10-31.8573.491 | 0.2954.444×10-30.2209×10-29.846×10-21.373×10-26.058×10-32.091 |
(3)对小鼠移植性肿瘤的抗瘤作用
采用腹腔注射(ip)和灌胃(po)两种给药途径，ip以小鼠肝癌HepS和小鼠肉瘤S-180两种动物移植性肿瘤、po还增加网状细胞肉瘤(L2)进行体内抑瘤试验。本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药设3～4个剂量组，对照组为不含药物的脂肪乳，阳性药物对照组在ip给药时为环磷酰胺(CTX)，在po给药时为氟脲嘧啶(5-Fu)，各组连续给药10天，每个试验重复3～4批。结果(见表2～表6)表明：在ip给药剂量为0.03～0.09mg/(kg.d)时，抑瘤率接近化疗药物CTX 18mg/kg剂量组的抑瘤率，在剂量低至0.01mg/(kg.d)×10天时仍可显示一定的抑制作用；采用灌胃经药，亦显示出极强的体内抗肿瘤作用，但与腹腔注射给药相比，灌胃给药的剂量较大，说明灌胃给药途径药物的吸收性较差。实验中除高剂量(0.09mg/(kg.d))组有部分批次有10％的荷瘤鼠死亡外，其他有效剂量组的荷瘤鼠行为活动正常，未见明显消瘦、松毛、腹泻等毒性表现。
表2 腹腔注射给药对小鼠移植性肝癌HepS的抑制作用
| 组别 | 给药剂量 给药时间mg/(kg·d) d | 平均抑瘤率( x±s)/％ | P值 |
| 环磷酰胺组CTX本发明药物：剂量组中剂量组1中剂量组2高剂量组 | 18 100.01 100.03 100.06 100.09 10 | 65.80±0.9030.93±0.7344.97±5.1758.26±3.3966.68±5.46 | ＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01 |
表3 腹腔注射给药对小鼠肉瘤S-180的抑制作用
| 组别 | 给药剂量 给药时间mg/(kg·d) d | 平均抑瘤率( x±s)/％ | P值 |
| 环磷酰胺组CTX本发明药物：低剂量组中剂量组高剂量组 | 18 100.01 100.03 100.09 10 | 56.11±2.5930.93±0.7338.43±2.3550.70±4.08 | ＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01 |
表4 灌胃给药对小鼠移植性肝癌HepS的抑制作用
| 组别 | 给药剂量 给药时间mg/(kg·d) d | 平均抑瘤率( x±s)/％ | P值 |
| 氟脲嘧啶5-Fu本发明药物：低剂量组中剂量组高剂量组 | 30 104 108 1016 10 | 63.30±8.6336.61±3.8746.42±11.3957.53±11.55 | ＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01 |
表5 灌胃给药对小鼠肉瘤S-180的抑制作用
| 组别 | 给药剂量 给药时间mg/(kg·d) d | 平均抑瘤率( x±s)/％ | P值 |
| 氟脲嘧啶5-Fu本发明药物：低剂量组中剂量组高剂量组 | 30 104 108 1016 10 | 65.36±15.4735.97±14.7247.46±9.8352.57±11.66 | ＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01 |
表6 灌胃给药对小鼠网状细胞肉瘤L2的抑制作用
| 组别 | 给药剂量 给药时间mg(kg·d) d | 平均抑瘤率( x±s)/％ | P值 |
| 氟脲嘧啶5-Fu本发明药物：低剂量组中剂量组高剂量组 | 30 104 108 1016 10 | 60.33±0.737.64±0.0146.76±2.1560.75±1.65 | ＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01 |
经上述药理学试验说明本发明达到下述技术效果：
(1)抗肿瘤作用强，由于本发明是将番荔枝总内酯经进一步精制处理，排除大量活性较低或无活性的内酯成分，仅富集了高活性成分，因而其作用更高；
(2)组分简单、明确，易于进行质量控制；
(3)制备方法简单、易实施，成本低；
(4)用脂肪乳作为其药物剂型，成功地解决了制剂问题。
附图1为本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药制备工艺流程图。
本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药实施例如下：
实施例1
总内酯的提取：取番荔枝种子1公斤，粉碎，种子粉用95％乙醇浸泡提取三次，每次24小时，加乙醇的量为：第一次1500mL，第二、第三次1000mL。合并三次提取液，减压浓缩至150mL，加水150mL，混匀后加石油醚萃取三次，每次150mL，合并，于石油醚萃取液中加入80％乙醇萃取三次，每次100mL，将80％乙醇液与石油醚萃取后的稀醇液合并，减压蒸除乙醇，加水至200mL，该水溶液用氯仿萃取三次，每次100mL，氯仿萃取液合并后浓缩至干得棕色糖浆物(30.0g)，即为总内酯提取物。
总内酯的分离：将上述得到的总内酯提取物上硅胶G(300g，100～200目，青岛海洋化工厂)柱，用氯仿-甲醇梯度洗脱，每份接收200mL，起始用纯氯仿洗脱，流分为1～13份，然后换为氯仿-甲醇(98∶2)，为14～21份；再换(97∶3)，22～26份；最后用(90∶10)洗脱，27～36份。用TLC检查，将第19～29份合并，浓缩、干燥，得总内酯(15.15g)。
总内酯的精制：取上述制备的总内酯10g，再上硅胶G(300g，100～2000目，青岛海洋化工厂)柱，用石油醚-丙酮按如下比例洗脱：3∶1，6000mL；7∶3，2000mL；65∶35，1500mL；1∶1，1000mL；以每份100mL接收。用TLC检查，从阿诺宁-6流出时开始收集直至阿诺宁1全部流出时为止(第43～93份)，将这部分流分合并、浓缩、干燥，得到6.6g微黄色蜡状固体，即为番荔枝内酯抗癌有效部位药物(批号：981225)。其主要成分的含量见表7。
实施例2
按实施例1提取总内酯，从1公斤原料得到29.7g总内酯提取物，总内酯的分离亦按实施例1进行，共得15.23g总内酯。取总内酯10g，上硅胶G(300g，100～200目，青岛海洋化工厂)柱，用石油醚-丙酮依次按如下比例洗脱：3∶1，9500mL；7∶3，1500mL；以每份100mL接收。用TLC检查，从阿诺宁-6流出时开始收集直至阿诺宁-1全部流出时为止(第35～102份)，将这部分流分合并、浓缩、干燥，得到6.2g番荔枝内酯抗癌有效部位药物(批号：990108)。其主要成分的含量见表7。
实施例3
按实施例1提取和分离总内酯，从1.05kg原料中得32.5g总内酯提取物，该提取物经分离得15.07g总内酯。取10g总内酯，上硅胶G(300g，100～200目，青岛海洋化工厂)柱，用石油醚-丙酮依次按如下比例洗脱：3∶1，5000mL：65∶35，3500mL；以每份100mL接收。用TLC检查，从阿诺宁-6流出时开始收集直至阿诺宁-1全部流出时为止(第41～76份)，将这部分流分合并、浓缩、干燥，得到6.13g番荔枝内酯抗癌有效部位药物(批号：990120)。其主要成分的含量见表7。
表7 不同批次番荔枝内酯有效部位药中主要成分的含量
实施例4
| 样品批号 | 含量(质量分数)/％ | ||
| 阿诺宁-1 | 阿诺宁-6 | 阿诺宁-1+阿诺宁-6 | |
| 981225990108990120 | 52.0651.4253.55 | 10.8811.669.85 | 62.9463.1063.40 |
乳剂的制备：取本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药1000mg，加注射用大豆油100g，再加12g卵磷脂，在90℃的水浴上加热使全部固体物溶解于大豆油中，加注射用水至1000mL，经多级超声乳化处理后，过滤、灌封、灭菌，即成番荔枝内酯有效部位药乳剂。
实施例5
体外细胞毒试验：所用人癌细胞株有：肺癌(A-549)、鼻咽癌(CNE2、SUNE1)、肝癌(BEL-7402)、HT-29(结肠癌)、乳腺癌(MCF-7)及肺腺癌(GLC-82)等7种。采用噻唑蓝还原法(MTT法)，设阴性对照组、溶剂对照组、阳性对照组及不同浓度本发明药物剂量组，本发明药物用10％DMSO溶解并稀释成不同浓度，溶剂对照为10％DMSO，阳性对照药物为紫杉醇(Taxol)。结果如表1。
实施例6
对小鼠移植性肿瘤的作用：按***颁《抗肿瘤药物药效学试验指导原则》进行试验。用清洁级昆明小鼠，移植性肿瘤为小鼠肝瘤HepS、小鼠肉瘤S-180和网状细胞肉瘤L2，腹腔注射(ip)和灌胃(po)两种给药方式，设阴性对照组、阳性药物对照组和本发明药物组。阳性对照药物在腹腔注射给药时为环磷酰胺(CTX)，在灌胃给药时为氟脲嘧啶(5-Fu)；本发明药物用1.0mg/mL的乳剂，设3～4个剂量组，每组试验重复三批，计算平均抑瘤率。结果见表2～6。
实施例7
急性毒性试验：按原***药政局《新药毒理学指导原则》进行小鼠急性毒性试验，按Bliss方法测定本发明番荔枝内酯抗癌有效部位药乳剂腹腔注射(ip)一次和灌胃(po)一次的LD50。
Claims (11)
1、一种番荔枝内酯抗癌有效部位药是含有阿诺宁-1与阿诺宁-6的质量分数之和为50％～70％并由下述两个工序制得的物质：首先有番荔枝总内酯制备工序，以番荔枝种子为原料制备番荔枝总内酯；其特征在于还有精制工序，把前步工序中所制备的番荔枝总内酯经硅胶柱层析，所述的硅胶柱中充填的硅胶粒度为80～300目，与所述的番荔枝总内酯的质量比为15∶1～50∶1，层析后用体积比为3∶1～3∶2的石油醚-丙酮洗脱，用薄层层析检查，在阿诺宁-6流出时开始收集至阿诺宁-1全部流出时止，将收集的所述馏分浓缩、干燥。
2、根据权利要求1所述的番荔枝内酯抗癌有效部位药，其特征在于所述的番荔枝总内酯制备工序如下：把番荔枝种子粗粉用80％～97％乙醇浸泡提取，乙醇提取液浓缩后用有机溶剂萃取脱脂，然后用氯仿萃取，氯仿萃取物经硅胶柱层析，所述的硅胶柱中充填的硅胶粒度为80～300目，与氯仿萃取物的质量比为5∶1～20∶1，层析后以体积比为100∶0～90∶10的氯仿-甲醇洗脱，用薄层层析检查，在番荔枝内酯类物质大量流出时开始收集，至无番荔枝内酯类物质流出时为止，将收集的所述馏分浓缩、干燥。
3、根据权利要求1所述的番荔枝内酯抗癌有效部位药，其特征在于所述的番荔枝总内酯制备工序如下：把番荔枝种子粗粉用体积分数80％～97％的乙醇浸泡提取，乙醇提取液浓缩后，加水，用有机溶剂萃取脱脂，有机溶剂层用体积分数60％～97％的乙醇萃取，乙醇液与有机溶剂萃取后的稀醇液合并，蒸除乙醇，水溶液用氯仿萃取，氯仿萃取物经硅胶柱层析，所述的硅胶柱中充填的硅胶粒度为80～300目，与氯仿萃取物的质量比为5∶1～20∶1，层析后以体积比为100∶0～90∶10的氯仿-甲醇洗脱，用薄层层析检查，在番荔枝内酯类物质大量流出时开始收集，至无番荔枝内酯类物质流出时为止，将收集的所述馏分浓缩、干燥。
4、根据权利要求1所述的番荔枝内酯抗癌有效部位药，其特征在于所述的硅胶粒度为100～200目，与番荔枝总内酯的质量比为30∶1，所述的阿诺宁1的含量为质量分数42％～55％，所述的阿诺宁-6的含量为质量分数8％～15％，所述的阿诺宁-1与阿诺宁-6含量之和为质量分数50％～70％。
5、根据权利要求书4所述的番荔枝内酯抗癌有效部位药，其特征在于所述的阿诺宁-1含量为质量分数52.3％，所述的阿诺宁-6含量为质量分数10.5％，所述的阿诺宁-6与阿诺宁1的含量之和为质量分数63.1％。
6、一种番荔枝内酯抗癌有效部位药的制备方法，有下述两个工序：首先有番荔枝总内酯制备工序，以番荔枝种子为原料制备番荔枝总内酯；其特征在于还有精制工序，把前步工序中所制备的番荔枝总内酯经硅胶柱层析，所述的硅胶柱中充填的硅胶粒度为80～300目，与所述的番荔枝总内酯的质量比为15∶1～50∶1，层析后用体积比为3∶1～3∶2的石油醚-丙酮洗脱，用薄层层析检查，在阿诺宁-6流出时开始收集至阿诺宁-1全部流出为止，将收集的所述馏分浓缩、干燥。
7、根据权利要求6与所述的番荔枝内酯抗癌有效部位药的制备方法，其特征在于所述的番荔枝总内酯制备工序如下：把番荔枝种子粗粉用体积分数80％～97％的乙醇浸泡提取，乙醇提取液浓缩后用有机溶剂萃取脱脂，然后用氯仿萃取，氯仿萃取物经硅胶柱层析，所述的硅胶柱中充填的硅胶粒度为80～300目，与氯仿萃取物的质量比为5∶1～20∶1，层析后以体积比为100∶0～90∶10的氯仿-甲醇洗脱，用薄层层析检查，在番荔枝内酯类物质大量流出时开始收集，至无番荔枝内酯类物质流出时为止，将收集的所述馏分浓缩、干燥。
8、根据权利要求6所述的番荔枝内酯抗癌有效部位药的制备方法，其特征在于所述的番荔枝总内酯制备工序如下：把番荔枝种子粗粉用体积分数80％～97％的乙醇浸泡提取，乙醇提取液浓缩后，加水，用有机溶剂萃取脱脂，有机溶剂层用体积分数60％～97％的乙醇萃取，乙醇液与有机溶剂萃取后的稀醇液合并，蒸除乙醇，水溶液用氯仿萃取，氯仿萃取物经硅胶柱层析，所述的硅胶柱中充填的硅胶粒度为80～300目，与氯仿萃取物的质量比为5∶1～20∶1，层析后以体积比为100∶0～90∶10的氯仿-甲醇洗脱，用薄层层析检查，在番荔枝内酯类物质大量流出时开始收集，至无番荔枝内酯类物质流出时为止，将收集的所述馏分浓缩、干燥。
9、根据权利要求6所述的番荔枝内酯抗癌有效部位药的制备方法，其特征在于所述的硅胶粒度为100～200目，与所述的番荔枝总内酯的质量比为30∶1，所述的薄层层析检查用硅胶H硬板，以体积比3∶1的石油醚-丙酮为展开剂，以碘化铋钾试剂显色。
10、一种番荔枝内酯抗癌有效部位药乳剂的制备方法，其特征在于所述的番荔枝内酯抗癌有效部位药乳剂配比如下：每1000mg权利要求1～5之一所述的番荔枝内酯抗癌有效部位药中加入50～200g大豆油和10～20g卵磷酯，按上述比例加热混合至物质溶解后加注射用水至总体积为500～1500mL，经乳化处理后过滤，灌封，灭菌。
11、根据权利要求10所述的番荔枝内酯抗癌有效部位药乳剂的制备方法，其特征在于所述的大豆油为100g，所述的卵磷酯为12g，所述的总体积为1000mL。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB011075945A CN1141093C (zh) | 2001-02-27 | 2001-02-27 | 番荔枝内酯抗癌有效部位药及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB011075945A CN1141093C (zh) | 2001-02-27 | 2001-02-27 | 番荔枝内酯抗癌有效部位药及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1370530A CN1370530A (zh) | 2002-09-25 |
| CN1141093C true CN1141093C (zh) | 2004-03-10 |
Family
ID=4656511
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB011075945A Expired - Lifetime CN1141093C (zh) | 2001-02-27 | 2001-02-27 | 番荔枝内酯抗癌有效部位药及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1141093C (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101375936B (zh) * | 2007-08-29 | 2012-02-29 | 北京星昊医药股份有限公司 | 抗肿瘤复方番荔枝制剂及其制备方法 |
| CN101575324B (zh) * | 2009-05-15 | 2011-05-25 | 贵州正鑫药业有限公司 | 一种从番荔枝中提取抗癌有效部位药史可莫辛的制备方法 |
| CN109528785A (zh) * | 2019-01-31 | 2019-03-29 | 中国医学科学院药用植物研究所 | 一种对耐药肿瘤选择性杀伤或nM水平高效杀伤的药物组合物及其应用 |
| CN110526883A (zh) * | 2019-07-22 | 2019-12-03 | 苏州农业职业技术学院 | 一种从番荔枝种子中提取泡番荔枝辛的方法 |
-
2001
- 2001-02-27 CN CNB011075945A patent/CN1141093C/zh not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1370530A (zh) | 2002-09-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101904968B (zh) | 重楼薯蓣类皂苷的制备方法及其抗肿瘤药物制剂 | |
| CN102652792A (zh) | 包含大蒜油、大蒜总多糖和大蒜总皂苷的组合物的抗癌用途 | |
| Hajimehdipoor et al. | The cytotoxic effects of Ferula persica var. persica and Ferula hezarlalehzarica against HepG2, A549, HT29, MCF7 and MDBK cell lines | |
| CN105017345B (zh) | 从夏枯草中同时提取四种化合物的方法及应用 | |
| CN101979366A (zh) | 莪术中的二苯庚烷类化合物及其医药用途 | |
| CN101485700B (zh) | 抗肿瘤活性精制番荔枝总内酯及其制备方法 | |
| CN1141093C (zh) | 番荔枝内酯抗癌有效部位药及其制备方法 | |
| CN1247855A (zh) | 丹参多酚酸盐的制备方法和用途 | |
| CN102827001A (zh) | 一种苦丁茶冬青提取物 | |
| CN102908340B (zh) | 一种含异甘草黄酮醇的抗肿瘤药物及其应用 | |
| Altinyay et al. | Quantification of shikimic acid in the methanolic extracts of three alnus taxons growing in Turkey | |
| Hajimehdipoor et al. | The Cytotoxic Effects of Ferula Persica var. Persica and Ferula Hezarlalehzarica against HepG2, A549, HT29, MCF7 and MDBK Cell Lines: Cytotoxicity of Ferula species | |
| CN103833823A (zh) | 二萜二聚体类化合物及其药物组合物和制备方法与应用 | |
| CN101721434B (zh) | 一种阿里红有效组分及其制备方法和用途 | |
| CN1165545C (zh) | 从栾树植物中分离提取总黄酮部位的方法及其应用 | |
| CN102961440A (zh) | 含有人环氧酶及天然阿霉素或类阿霉素的药用组合物、其制备方法及在制备多种药物的应用 | |
| CN102805829B (zh) | 土茯苓提取物的制备方法及其在肿瘤治疗中的应用 | |
| CN104374890B (zh) | 一种苦丁茶冬青提取物 | |
| CN106008641A (zh) | 睡茄交酯类化合物及提取方法及用途 | |
| CN104546952A (zh) | 一种石上柏活性组分及其制备方法和用途 | |
| CN111978309B (zh) | 雷公藤来源化合物及其应用和制备方法、药物组合物、杀虫剂 | |
| CN105796548B (zh) | 一种黄酮类药物组合物及制备方法和用途 | |
| CN102114065B (zh) | 具有防治癌症作用的金钱草与雷公藤中药组合物及其应用 | |
| CN1068782C (zh) | 以栾树提取物为有效组分的抗癌药物及制备方法 | |
| CN104288169B (zh) | 一种黄酮苷类化合物及其制备方法和用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C56 | Change in the name or address of the patentee |
Owner name: GUILIN SANJIN PHARMACEUTICAL CO., LTD. Free format text: FORMER NAME OR ADDRESS: SOUTH CHINA BOTANICAL GARDEN CHINESE ACADEMY OF SCIENCES Owner name: SOUTH CHINA BOTANICAL GARDEN CHINESE ACADEMY OF SC Free format text: FORMER NAME OR ADDRESS: SOUTH-CHINA INST. OF BOTANY, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES |
|
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: No. 1, Jinxing Road, Guilin, the Guangxi Zhuang Autonomous Region: 541004 Patentee after: GUILIN SANJIN PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. Address before: Guangdong city of Guangzhou province Shahe Chang ban happy home zip code: 510650 Patentee before: South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences Address after: Guangdong city of Guangzhou province Shahe Chang ban happy home zip code: 510650 Patentee after: SOUTH CHINA BOTANICAL GARDEN, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES Address before: Guangdong city of Guangzhou province Shahe Chang ban happy home zip code: 510650 Patentee before: SOUTH CHINA INST OF BOTANY CHI |
|
| CX01 | Expiry of patent term |
Granted publication date: 20040310 |
|
| CX01 | Expiry of patent term | ||
| DD01 | Delivery of document by public notice |
Addressee: Xiong Qiling Document name: Notice of termination of patent right |
|
| DD01 | Delivery of document by public notice |