CN114062548A - 一种同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，包括以下步骤：配制不同浓度的氨基酸标准溶液；将乳制品样品用微波消解仪进行消解，消解结束后得到消解液；将所述消解液冷却至室温，然后使冷却至室温的所述消解液流经滤膜进行过滤，收集滤液，将所述滤液稀释得到经处理后的乳制品样品；将所述氨基酸标准溶液、所述经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱‑串联质谱联用仪中进行检测。本发明提供一种同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，可对乳制品中晚期糖基化终末产物多种氨基酸进行检测，解决了现有的检测时间长、成本高等问题。

Description

一种同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法
技术领域
本发明涉及食品质量检测技术领域，特别涉及一种同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法。
背景技术
乳制品中含有赖氨酸、精氨酸、蛋氨酸等对人体有益的氨基酸，在乳制品的加工及储藏过程中，乳制品中含羰基化合物和含氨基化合物(氨基酸、蛋白质)之间会发生美拉德反应生成不可消化利用的晚期糖基化终末产物(糠氨酸、羧甲基赖氨酸、羧乙基赖氨酸等)。乳制品中的美拉德反应会降低乳制品中的营养成分和生成有害产物。因此，乳制品中多种晚期糖基化终末产物可以成为乳制品质量监控指标。
目前，对乳制品的前处理大都采用烘箱水解，使用烘箱水解的检测方法需要水解20～24h，水解液还需经过固相萃取小柱进行萃取净化操作，因此，对乳制品的前处理存在效率低和操作复杂等问题。
发明内容
基于此，本发明提供一种同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，在实现对乳制品中晚期糖基化终末产物多种氨基酸进行检测的同时，解决了现有对乳制品前处理存在的效率低和操作复杂等问题。
一种同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，包括步骤：
配制不同浓度的氨基酸标准溶液；
将乳制品样品用微波消解仪进行消解，以将乳制品中和蛋白质结合的晚期糖基化终末产物氨基酸分子水解成游离态的氨基酸小分子，消解结束后得到消解液；
将所述消解液流经滤膜进行过滤，收集滤液，将所述滤液稀释得到经处理后的乳制品样品；
将所述氨基酸标准溶液、所述经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱-串联质谱联用仪中进行检测。
优选地，所述氨基酸标准溶液包括溶剂和溶质，所述溶剂包括超纯水，所述溶质包括赖氨酸、糠氨酸、羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸。
优选地，所述消解的步骤包括：
将处理后的乳制品样品和6mol/L盐酸加入微波消解罐中，向所述微波消解罐中充入氮气以排除微波消解罐中的氧气，将所述微波消解罐置于微波消解仪中进行消解，消解结束后得到消解液。
优选地，消解温度为150℃，消解时间为15～20min。
优选地，每1mg蛋白质当量(1mg Pro)的经处理后的乳制品样品所用的盐酸为0.267mL。
优选地，所述滤膜的孔径为0.22μm。
优选地，将所述滤液稀释得经处理后的乳制品样品的具体步骤包括：
将所述滤液用超纯水稀释100倍得经处理后的乳制品样品。
在将所述氨基酸标准溶液、所述经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱-串联质谱联用仪中进行检测的步骤中，液相色谱检测的具体过程如下：
将所述经处理后的乳制品样品置于液相色谱的进样器，流动相A、流动相B通过所述液相色谱的输液泵流经所述进样器，与所述经处理后的乳制品样品混合，混合后得到的混合液流经所述液相色谱柱，以使所述液相色谱柱对经处理后的乳制品样品中的待分析氨基酸进行分离，然后通过所述色谱的检测器对所述经处理后的乳制品样品中不同的氨基酸进行检测，以得到所述经处理后的乳制样品中的不同氨基酸的色谱图；
流动相A为5mmol/L的全氟戊酸水溶液，流动相B为5mmol/L的全氟戊酸乙腈溶液。
优选地，在将所述氨基酸标准溶液、所述经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱-串联质谱联用仪进行检测的步骤中，所述液相色谱条件如下：
流动相的流速：0.2mL/min；
样品进样量：2μL；
优选地，在将所述氨基酸标准溶液、所述经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱-串联质谱联用仪中进行检测的步骤中，质谱检测的具体过程如下：
经液相色谱分离后的乳制品样品进入质谱，所述质谱的离子源喷出的雾化气和加载的高电压对所述乳制品样品中的分子进行电离，并进一步通过碰撞气在一定碰撞能量下对待分析的氨基酸分子形成定量和定性用的离子，通过所述质谱的质量分析器按离子的质荷比大小将所述离子分离成不同质量的离子，然后通过所述质谱的离子检测器对各离子进行检测，以得到所述乳制样品中不同氨基酸的质谱图。
与现有方案相比，本发明具有以下有益效果：
在本发明中，通过微波消解的方式代替了传统的烘箱水解对乳制品样品进行前处理，从而达到对乳制品样品中和蛋白质结合的晚期糖基化终末产物氨基酸分子的水解，且消解完之后并不需要经过固相萃取小柱进行萃取净化操作，因此，本方法简化了乳制品前处理的步骤，提高了检测效率，降低检测成本。
此外，本发明所采用的液相色谱-串联质谱检测法，将液相色谱分离与质谱检测相结合，目标物进入质谱离子源以“软电离”方式离子化，形成分子离子峰，再由质谱质量分析器筛选合适的分析物质荷比，除去杂质离子干扰，从而可以大大提高分析物的响应值，本方法可同时检测乳制品中晚期糖基化终末产物的四种氨基酸。
附图说明
图1为样品中晚期糖基化终末产物赖氨酸(LYS)色谱图；
图2样品中晚期糖基化终末产物糠氨酸(FUR)色谱图；
图3样品中晚期糖基化终末产物羧甲基赖氨酸(CML)色谱图；
图4样品中晚期糖基化终末产物羧乙基赖氨酸(CEL)色谱图；
图5为样品常规水解与微波消解对比图；
图6为赖氨酸过固相萃取小柱与不过固相萃取小柱对比图；
图7为糠氨酸过固相萃取小柱与不过固相萃取小柱对比图；
图8为羧甲基赖氨酸过固相萃取小柱与不过固相萃取小柱对比图；
图9为羧乙基赖氨酸过固相萃取小柱与不过固相萃取小柱对比图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料和试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，数据为三次重复实验的平均值或平均值±标准差。
另外，全文中的“和/或”包括三个方案，以A和/或B为例，包括A技术方案、B技术方案，以及A和B同时满足的技术方案；另外，各个实施例之间的技术方案可以相互结合，但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础，当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当认为这种技术方案的结合不存在，也不在本要求的保护范围之内。
一种同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，包括步骤：
配制不同浓度的氨基酸标准溶液；
将乳制品样品用微波消解仪进行消解，以将乳制品中和蛋白质结合的晚期糖基化终末产物氨基酸分子水解成游离态的氨基酸小分子，消解结束后得到消解液；
将消解液流经滤膜进行过滤，收集滤液，将滤液稀释得到经处理后的乳制品样品；
将氨基酸标准溶液、经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱-串联质谱联用仪中进行检测。
在本发明中，通过微波消解的方式代替了传统的烘箱水解对乳制品样品进行前处理，从而达到对乳制品样品溶液中和蛋白质结合的晚期糖基化终末产物氨基酸分子的水解，且消解完之后并不需要经过固相萃取小柱进行萃取净化操作，因此，本方法简化了乳制品前处理的步骤，提高了检测效率，降低检测成本。
此外，本发明所采用的液相色谱-串联质谱检测法，将液相色谱分离与质谱检测相结合，目标物进入质谱离子源以“软电离”方式离子化，形成分子离子峰，再由质谱质量分析器筛选合适的分析物质荷比，除去杂质离子干扰，从而可以大大提高分析物的响应值，本方法可同时检测乳制品中晚期糖基化终末产物的四种氨基酸。
具体地，将消解液冷却至室温再进行过滤，消解液温度太高不宜进行过滤操作，且在后期稀释时不易移取准确体积的消解液；
对消解液过滤，以去除消解液中大于0.22μm的颗粒，防止后续经处理后的乳制品样品中的杂质颗粒物进入到色谱***中造成堵塞；
多个浓度点的氨基酸标准溶液所获得的峰面积与其浓度形成的关系做趋势线，形成了横轴X(氨基酸浓度)与纵轴Y(峰面积)的相关性关系，即得标准曲线，再由标准曲线计算得到样品中氨基酸含量。
在一些实施例中，氨基酸标准溶液包括溶剂和溶质，溶剂包括超纯水，溶质包括赖氨酸、糠氨酸、羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸。
在一些实施例中，消解的步骤包括：
将经处理后的乳制品样品和6mol/L盐酸加入微波消解罐中，向微波消解罐中充入氮气以排除微波消解罐中的氧气，将微波消解罐置于微波消解仪中进行消解，消解结束后得到消解液。
具体地，加盐酸是为了水解，将和蛋白质结合的晚期糖基化终末产物氨基酸水解为本方法要检测的目标物氨基酸小分子；
乳制品样品遇氧气会加速美拉德反应，为保证实验数据的真实性，向微波消解罐中充入氮气以排除微波消解罐中的氧气，避免蛋白质氧化。
在一些实施例中，消解温度为150℃，消解时间为15～20min。
本发明使用的微波消解方式，消解时间为15～20min，远远小于烘箱的水解时间(20～24h)，大大减少了对乳制品样品前处理的时间，提高了检测效率。
在一些实施例中，每1mg蛋白质当量(1mg Pro)的乳制品样品所用的盐酸为0.267mL，其中1mg蛋白质当量所对应的样品质量可根据乳制品样品的营养标签确定。
在一些实施例中，滤膜的孔径为0.22μm。
在一些实施例中，将滤液稀释得经处理后的乳制品样品溶液的具体步骤包括：
将滤液用超纯水稀释100倍得经处理后的乳制品样品溶液。
具体地，乳制品样品中待分析氨基酸浓度过高超过了色谱柱承载范围或是有干扰物质的存在，会导致形成“平头峰”或峰分叉、出现肩峰、对称性差等分离问题，进而会影响检测的准确性，因此需要对滤液进行稀释得经处理后的乳制品样品。
在将氨基酸标准溶液、经处理后的乳制品样品溶液分别注入液相色谱-串联质谱联用仪中进行检测的步骤中，液相色谱检测的具体过程如下：
将经处理后的乳制品样品置于液相色谱的进样器，流动相A、流动相B通过液相色谱的输液泵流经进样器，与乳制品样品混合，混合后得到的混合液流经液相色谱柱，以使液相色谱柱对乳制品样品中的待分析氨基酸进行分离，然后通过色谱的检测器对乳制品样品中不同的氨基酸进行检测，以得到乳制样品中的不同氨基酸的色谱图；
其中，液相色谱柱的条件如下：
液相色谱柱：C18，100×2.1mm，2.6μm；
流动相A为5mmol/L的全氟戊酸水溶液，流动相B为5mmol/L的全氟戊酸乙腈溶液；
洗脱梯度：以体积百分含量计，0min，流动相A为90％，流动相B为10％；2min，流动相A为90％，流动相B为10％；5min，流动相A为30％，流动相B为70％；7min，流动相A为30％，流动相B为70％；9min，流动相A为10％，流动相B为90％；10min，流动相A为10％，流动相B为90％；12min，流动相A为90％，流动相B为10％；15min，流动相A为90％，流动相B为10％。
具体地，流动相A和流动相B是两种互溶的溶剂，流动相B洗脱能力强，流动相A洗脱能力差，这样，通过调节流动相A和流动相B的比例来获得洗脱能力不同的混合流动相，以实现经处理后的乳制品样品在色谱柱上的分离。
在一些实施例中，在将氨基酸标准溶液、经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱-串联质谱联用仪进行检测的步骤中，液相色谱条件如下：
流动相的流速：0.2mL/min；
样品进样量：2μL；
液相色谱柱的柱温：33～37℃。
在一些实施例中，在将氨基酸标准溶液、经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱-串联质谱联用仪中进行检测的步骤中，质谱检测的具体过程如下：
经液相色谱分离后的乳制品样品进入质谱，所述质谱的离子源喷出的雾化气和加载的高电压对所述乳制品样品中的分子进行电离，并进一步通过碰撞气在一定碰撞能量下对待分析的氨基酸分子形成定量和定性用的离子，通过所述质谱的质量分析器按离子的质荷比大小将所述离子分离成不同质量的离子，然后通过所述质谱的离子检测器对各离子进行检测，以得到所述乳制样品中不同氨基酸的质谱图；
其中，质谱条件如下：
离子源为电喷雾离子源，正离子模式，喷雾电压为5kV，雾化温度为350℃，驻留时间为100ms，碰撞气为45psi高纯氮气；
离子检测器的检测模式是多反应监测。
使用的质谱是三重四级杆质谱，三重四级杆质谱配有电喷雾离子源，电喷雾离子源是电离过程中由电场产生带电液滴，然后通过溶剂蒸发形成待分析离子，适用于极性、不具有挥发性、热不稳定的化合物，可产生多电荷离子，可测得分子量范围较大。考虑到目标化合物为四种氨基酸类物质，通过调节流动相pH值，可使得其结合质子，带正电荷。因此，实验选择了电喷雾离子源，选择正离子模式进行离子扫描。
实施例1
配制氨基酸标准溶液：将赖氨酸(LYS)、糠氨酸(FUR)、羧甲基赖氨酸(CML)和羧乙基赖氨酸(CEL)分别用超纯水配制成以下12个浓度梯度：
0.25ng/mL、0.5ng/mL、1ng/mL、2.5ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、250ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL和2000ng/mL；
取用100mg婴幼儿乳粉于50mL微波消解罐中，加入4mL 6mol/L盐酸混匀，向微波消解罐中充入氮气3min以排除样品中的氧气，将微波消解罐置于微波消解仪中进行消解，消解温度设定为150℃，消解时间为15min，消解结后得到消解液；
待消解液冷却至室温后，用0.22μm滤头过滤，收集滤液，将滤液用超纯水稀释100倍于进样瓶中，得到经处理后的乳制品样品溶液；
将氨基酸标准溶液和经处理后的乳制品样品溶液分别注入液相色谱-串联质谱联用仪中进行检测。
检测的色谱条件和质谱条件如下：
(1)色谱条件
色谱柱：C18，100×2.1mm，2.6μm；
流动相流速：0.2mL/min；
进样量：2μL；
柱温：35℃；
流动相A：5mM全氟戊酸水溶液；
流动相B：5mM全氟戊酸乙腈溶液；
梯度洗脱程序：以体积百分含量计，0min，流动相A为90％，流动相B为10％；2min，流动相A为90％，流动相B为10％；5min，流动相A为30％，流动相B为70％；7min，流动相A为30％，流动相B为70％；9min，流动相A为10％，流动相B为90％；10min，流动相A为10％，流动相B为90％；12min，流动相A为90％，流动相B为10％；15min，流动相A为90％，流动相B为10％。
(2)质谱条件
离子源为电喷雾离子源，正离子模式，喷雾电压为5kV，雾化温度为350℃，驻留时间为100ms，碰撞气为45psi高纯氮气；离子检测器的检测模式为多反应监测；其他质谱条件见表1。
表1质谱检测参数设定表
Figure BDA0003356237070000081
图1～4分别为乳制品样品中的赖氨酸(LYS)、糠氨酸(FUR)、羧甲基赖氨酸(CML)和羧乙基赖氨酸(CEL)的色谱图。
由图1～4可知，四种物质分离度好、每种物质附近无明显干扰峰，四种氨基酸的出峰时间不同，且峰形尖锐，说明本发明对四种氨基酸的定性是可行的，根据软件计算得出峰面积，再对应标准品溶液的工作曲线根据峰面积得到浓度以达到对四种氨基酸的定量分析。因此，本发明液相色谱-串联质谱联用法可以满足对四种氨基酸的定性、定量检测要求。
实施例2
本实施例用于验证本测试方法的稳定性、回收率，检测步骤与实施例1保持一致，不再赘述。
对配制的氨基酸标准溶液进行定量分析，分别以氨基酸峰面积响应值为纵坐标，以标准溶液浓度为横坐标，采用最小二乘法线性回归绘制标准曲线；并获得信噪比(S/N)为3时对应的浓度为此方法的检出限，获得信噪比(S/N)为10时对应的浓度为此方法的定量限，相对标准偏差为在定量限水平平行测定5次获得，回收率为在样品中分别加入赖氨酸4μg、糠氨酸0.4μg、羧甲基赖氨酸120μg、羧乙基赖氨酸120μg标准品，平行测定5次获得，下表所列结果为平均值±标准偏差。方法具体性能指标如表2所示。
表2四种氨基酸检测性能指标
Figure BDA0003356237070000091
根据表2的数据可以看出，四种氨基酸检测性能指标的相对标准偏差均在5％以内，说明本方法具有较好的稳定性；
回收率在85％～115％，说明本方法符合分析检测的基本需求。
实施例3
本实施例用于对比本测试方法中对乳制品的微波消解与常规水解(烘箱水解)，检测步骤与实施例1保持一致，不再赘述。
图5为样品常规水解和微波消解结果对比。
由图5可知，根据实际乳粉样品分别进行烘箱24h的常规水解和15min的微波消解结果对比，使用微波水解检测出氨基酸的峰面积与常规水解检测出氨基酸的峰面积的比值均接近1，因此，微波消解可达到常规水解的水平。乳制品样品前处理可采用微波消解方式代替常规水解得到游离态的目标氨基酸化合物。
实施例4
本实施例用于对比本测试方法中使用微波消解后过固相萃取小柱(HLB)与不过固相萃取小柱(No-HLB)，检测步骤与实施例1保持一致，不再赘述。
图6～9为同时检测实际乳粉样品中赖氨酸(LYS)、糠氨酸(FUR)、羧甲基赖氨酸(CML)和羧乙基赖氨酸(CEL)时，过固相萃取小柱(HLB)与不过固相萃取小柱(No-HLB)实验结果的对比，做了三组平行试验。
由图6～9可知，不过固相萃取小柱峰面积响应值更加稳定，且总体来看，不过固相萃取小柱时四种氨基酸的峰面积值更高，说明目标物质氨基酸相对于过固相萃取小柱而言，不会有一定的流失。综上，可认为过固相萃取小柱这一流程可以省略。
实施例5
本实施例用于检测样品中赖氨酸、糠氨酸、羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸的含量，检测步骤与实施例1保持一致，不再赘述。
用本发明的方法测定100mg婴幼儿配方乳粉(3段)(其中蛋白质含量为15mg)和460μL超高温灭菌乳(其中蛋白质含量为16.56mg)中赖氨酸、糠氨酸、羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸的含量(计算结果折算为每100g Pro中氨基酸含量，三组平行试验结果取平均值)，结果如下表3：
表3婴幼儿配方乳粉(3段)及超高温灭菌乳测定结果
Figure BDA0003356237070000101
由表3可知，本发明的方法可以用于乳制品中晚期糖基化终末产物—赖氨酸、糠氨酸、羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸含量的同时检测。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，包括步骤：
配制不同浓度的氨基酸标准溶液；
将乳制品样品用微波消解仪进行消解，以将乳制品中和蛋白质结合的晚期糖基化终末产物氨基酸分子水解成游离态的氨基酸小分子，消解结束后得到消解液；
将所述消解液流经滤膜进行过滤，收集滤液，将所述滤液稀释得到经处理后的乳制品样品；
将所述氨基酸标准溶液、所述经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱-串联质谱联用仪中进行检测。
2.根据权利要求1所述的同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，所述氨基酸标准溶液包括溶剂和溶质，所述溶剂包括超纯水，所述溶质包括赖氨酸、糠氨酸、羧甲基赖氨酸和羧乙基赖氨酸。
3.根据权利要求1所述的同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，所述消解的步骤包括：
将经处理后的乳制品样品和6mol/L盐酸加入微波消解罐中，向所述微波消解罐中充入氮气以排除所述微波消解罐中的氧气，将所述微波消解罐置于微波消解仪中进行消解，消解结束后得到消解液。
4.根据权利要求3所述的同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，消解温度为150℃，消解时间为15～20min。
5.根据权利要求3所述的同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，每1mg蛋白质当量的乳制品样品所用的盐酸为0.267mL。
6.根据权利要求1所述的同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，所述滤膜的孔径为0.22μm。
7.根据权利要求1所述的同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，将所述滤液稀释得经处理后的乳制品样品的具体步骤包括：
将所述滤液用超纯水稀释100倍得经处理后的乳制品样品。
8.根据权利要求1所述的同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，在将所述氨基酸标准溶液、所述经处理后的乳制品样品溶液分别注入液相色谱-串联质谱联用仪中进行检测的步骤中，液相色谱检测的具体过程如下：
将所述经处理后的乳制品样品置于液相色谱的进样器，流动相A、流动相B通过所述液相色谱的输液泵流经所述进样器，与所述经处理后的乳制品样品混合，混合后得到的混合液流经所述液相色谱柱，以使所述液相色谱柱对乳制品样品中的待分析氨基酸进行分离，然后通过所述的质谱检测器对所述经处理后的乳制品样品中不同的氨基酸进行检测，以得到所述经处理后的乳制样品中的不同氨基酸的色谱图；
流动相A为5mmol/L的全氟戊酸水溶液，流动相B为5mmol/L的全氟戊酸乙腈溶液。
9.根据权利要求8所述的同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，在将所述氨基酸标准溶液、所述经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱-串联质谱联用仪进行检测的步骤中，所述液相色谱条件如下：
流动相的流速：0.2mL/min；
进样量：2μL。
10.根据权利要求1所述的同时检测乳制品中多种晚期糖基化终末产物的方法，其特征在于，在将所述氨基酸标准溶液、所述经处理后的乳制品样品分别注入液相色谱-串联质谱联用仪中进行检测的步骤中，质谱检测的具体过程如下：
经液相色谱分离后的乳制品样品进入质谱，用所述质谱的电喷雾离子源将所述乳制品样品离子化，通过所述质谱的质量分析器，按离子的质荷比大小将所述离子分离成不同质量的离子，然后通过所述质谱的离子检测器对各离子进行检测，以得到所述乳制品样品中的不同氨基酸的质谱图。
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